4-Imagerie couleur avec les conjugués DyLight 405
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4-Imagerie couleur avec les conjugués DyLight 405
Spécialisé dans les anticorps secondaires et les conjugués 4-Imagerie couleur avec les conjugués DyLight 405 Nos anticorps secondaires conjugués DyLight 405 sont stimulés au maximum à 400 nm et fluorescents avec un pic à 421 nm (Figure 1). Ils sont très lumineux et photostables lorsqu'ils sont utilisés en microscopie confocale avec un laser de 405 nm et d'un filtre d'émission approprié. Figure 1. Le spectre d'excitation (en violet) et d'émission (en bleue) pour le DyLight 405 conjugué à un anticorps secondaire purifié par affinité de Jackson ImmunoResearch. Les comparaisons quantitatives ne doivent pas être effectuées à partir du moment où les hauteurs de pics ont été normalisées. Les spectres ont été obtenus avec un système de spectro-fluorimètre de série M de Photon Technology International, Inc. Figure 2. Spectres d'émission de DyLight 405 (bleu), Alexa Fluor® 488 (vert), Rhodamine Red-X (rouge), et Alexa Fluor® 647 (marron). Cette figure illustre la forme et la position relative de chaque pic d'émission du fluorophore suivant la conjugaison aux anticorps. Elle montre qu'une imagerie efficace en 4 couleurs peut être réalisée avec une séparation maximale des couleurs à l'aide de ces colorants. Les comparaisons quantitatives ne doivent pas être effectuées à partir du moment où les hauteurs de pics ont été normalisées. Tous les spectres ont été obtenus avec un système de spectro-fluorimètre de série M de Photon Technology International, Inc. Dans ces conditions, il est possible d'effectuer une imagerie en 4 couleurs très efficace avec une bonne séparation des couleurs, une bonne photostabilité et une sensibilité élevée en milieu de montage aqueux et permanent. La combinaison de DyLight 405, Alexa Fluor® 488, Rhodamine Red-X et Alexa Fluor® 647 permet une séparation maximale des couleurs (Figure 2). Le DyLight 405 n'est pas conseillé avec des microscopes à épifluorescence sans un laser de 405 nm, ni pour la cytométrie en flux avec un laser de 405 nm, parce que les filtres d'émission généralement utilisés dans les cytomètres en flux ne conviennent pas au DyLight 405. Tel: +44 (0)1638 782616 www.jireurope.com Fax: +44 (0)1638 668462 Email:[email protected] Le tableau ci-dessous répertorie les anticorps secondaires purifiés par affinité fortement adsorbés, la streptavidine et les contrôles d'immuno-globulines conjuguées au DyLight 405 proposés par Jackson ImmunoResearch pour une utilisation uniquement dans les protocoles de marquage à 4 couleurs à l'aide d'un microscope confocal équipé d'un laser de 405 nm. Pour une liste complète des autres conjugués DyLight 405 pour un marquage à 1, 2 et 3 couleurs, se reporter aux autres tableaux sur www.jireurope.com. Product Description Streptavidin Donkey Anti-Chicken IgY (IgG)(H+L) ML (min X Bov, Gt, GP, Sy Hms, Hrs, Hu, Ms, Rb, Rat, Shp Sr Prot) Donkey Anti-Goat IgG (H+L) (min X Ck, GP, Sy Hms, Hrs, Hu, Ms, Rb, Rat Sr Prot) ML Donkey Anti-Guinea Pig IgG (H+L) ML (min X Bov, Ck, Gt, Sy Hms, Hrs, Hu, Ms, Rb, Rat, Shp Sr Prot) Donkey Anti-Human IgG (H+L) ML (min X Bov, Ck, Gt, GP, Sy Hms, Hrs, Ms, Rb, Rat, Shp Sr Prot) Donkey Anti-Mouse IgG (H+L) (min X Bov, Ck, Gt, GP, Sy Hms, Hrs, Hu, Rb, Shp Sr Prot) ML Goat Anti-Mouse IgG, Fcγ Subclass 1 Specific (min X Hu, Bov, Rb Sr Prot) ML Donkey Anti-Mouse IgG (H+L) ML (min X Bov, Ck, Gt, GP, Sy Hms, Hrs, Hu, Rb, Rat Shp Sr Prot) Goat Anti-Mouse IgG, Fcγ Subclass 2a Specific (min X Hu, Bov, Rb Sr Prot) Goat Anti-Mouse IgG, Fcγ Subclass 2b Specific (min X Hu, Bov, Rb Sr Prot) Goat Anti-Mouse IgG, Fcγ Subclass 2c Specific (min X Hu, Bov, Rb Sr Prot) * ML ML ML DyLight 405 DyLight 405 Product Description 1.0 mg 016-470-084 Goat Anti-Mouse IgG, Fcγ Subclass 3 Specific (min X Hu, Bov, Rb Sr Prot) A=400 nm, E=421 nm ML 0.5 mg 703-475-155 Goat Anti-Mouse IgG (H+L) (min X Rat, Hu, Bov, Hrs, Rb Sr Prot) ML 0.5 mg 706-475-148 Donkey Anti-Rat IgG (H+L) ML (min X Bov, Ck, Gt, GP, Sy Hms, Hrs, Hu, Ms, Rb, Shp Sr Prot) Donkey Anti-Rat IgG (H+L) (min X Bov, Ck, Gt, GP, Sy Hms, Hrs, Hu, Rb, Shp Sr Prot) ML 0.5 mg 709-475-149 Goat Anti-Rat IgG (H+L) (min X Ms, Hu, Bov, Hrs, Rb Sr Prot) ML 0.5 mg 715-475-151 Goat Anti-Rabbit IgG (H+L) (min X Hu, Ms, Rat Sr Prot) ML 0.5 mg 705-475-147 0.5 mg 715-475-150 0.5 mg 115-475-205 0.5 mg 115-475-206 0.5 mg 115-475-207 Donkey Anti-Rabbit IgG (H+L) ML (min X Bov, Ck, Gt, GP, Sy Hms, Hrs, Hu, Ms, Rat, Shp Sr Prot) Donkey Anti-Sheep IgG (H+L) (min X Ck, GP, Sy Hms, Hrs, Hu, Ms, Rb, Rat Sr Prot) ChromPure Donkey IgG, whole molecule ChromPure Goat IgG, whole molecule 0.5 mg 115-475-208 ML A=400 nm, E=421 nm 0.5 mg 115-475-209 0.5 mg 115-475-166 0.5 mg 712-475-150 0.5 mg 712-475-153 0.5 mg 112-475-167 0.5 mg 711-475-152 1.0 mg 111-475-144 0.5 mg 713-475-147 1.0 mg 017-470-003 1.0 mg 005-470-003 ML= Marquage multiple (voir l'explication sur Marquage multiple dans www.jireurope.com ). DyLight est une marque déposée de Thermo Fisher Scientific Inc et ses filiales. Jackson ImmunoResearch est autorisé par Thermo Fisher Scientific à fabriquer et à vendre des conjugués de colorants fluorescents DyLight. Certifié par UKAS selon la norme BS EN ISO 9001:2008 sous le certificat numéro 12017/1. www.jireurope.com Tel: