Les conjugués Cy2, Cy3, et Cy5 sont plus lumineux dans le

Spécialisé dans les anticorps secondaires et les conjugués
Les conjugués Cy2, Cy3, et Cy5 sont plus lumineux
dans le plastique Milieu de montage
Parmi les conjugués de colorants fluorescents actuellement disponibles proposés par Jackson ImmunoResearch,
les colorants de cyanine résistent mieux à la forte déshydratation et aux conditions d'intégration requises pour le
montage de sections dans des milieux non polaires en plastique, tels que le DPX et le Permount™. Les colorants
de cyanine sont plus brillants dans un environnement non polaire qu'en milieu aqueux, et nécessitent par conséquent
moins de temps d'acquisition au microscope confocal que pour les colorants DyLight ™ et Alexa Fluor® (Figure 1),
même si ces colorants sont plus brillants dans un milieu de montage aqueux.
Les principaux avantages du plastique sur les milieux de montage aqueux sont la luminosité, le contraste et la
longévité de la fluorescence. Cy2 et Cy5 sont à nouveau disponibles, avec Cy3, conjugués à une sélection d'anticorps
de marquage multiple, de streptavidine, et de contrôles d'IgG purifiées, donnant les réactifs les plus lumineux pour
les laboratoires qui utilisent des milieux de montage en plastique. Pour le marquage multiple, voir l'autre partie de
notre tableau des conjugués Cy2, Cy3, et Cy5. Pour les protocoles de marquage simple ne nécessitant pas
d'anticorps à forte adsorption croisée, choisissez des conjugués Cy3 dans les tableaux d'IgG entières ou d'anticorps
F(ab')2 sur www.jireurope.com.
IgG anti-souris de Cy2-chèvre (H+L), 36,7ms
IgG anti-lapin de chèvre Alexa Fluor 647 (H+L), 444,8 ms
IgG anti-souris de chèvre Alexa Fluor 488 (H+L), 222,4 ms
IgG anti-lapin de chèvre Dylight 649 (H+L), 444,8 ms
IgG anti-souris de chèvre Dylight 488 (H+L), 222,4 ms
IgG anti-lapin de chèvre Alexa Fluor 647 (H+L), 444,8 ms
Figure 1. Des sections de muqueuse gastrique ont été colorées et montées dans du DPX. Les sections A, B et C ont été colorées avec des anticorps
primaires pour les antigènes abondants (collagène de souris anti-Type IV [vert] et de lapin anti-PGP 9.5 [rouge]). Toutes les sections ont été colorées
avec différents anticorps secondaires conjugués au fluorophore de Jackson ImmunoResearch. Toutes les sections ont été exposées à la lumière assez
longtemps pour obtenir environ la même luminosité relative. Les temps d'exposition sont indiqués en millisecondes (ms). Les différences de temps
d'exposition pour chaque fluorophore sont une indication de son degré relatif de luminosité. Noter que les conjugués Cy2 exigent beaucoup moins de
temps d'exposition dans le DPX (36,7 ms) que dans le DyLight 488 (222,4 ms) et l'Alexa Fluor® 488 (222,4 ms), tous deux avec des antigènes
abondants et moins abondants (non représentés). Les conjugués Cy2 étaient également plus brillants dans le DPX que dans le milieu de montage de
glycérol (non représenté). D'autres antigènes moins visibles dans les sections colorées au Cy2 colorées ne sont pas visibles avec le DyLight 488 et
l'Alexa Fluor® 488 (non représenté). Des différences similaires ont été observés lorsque les autres cyanines, Cy3 et Cy5, ont été comparées avec des
colorants Alexa Fluor® et DyLight correspondants. Les images et les résultats sont offerts par le Dr. Gwen Wendelschafer-Crabb, Laboratoire
Kennedy, Université du Minnesota. Des résultats similaires nous ont été signalés par le Dr. Barbara Jones, Département de Neurologie et de
neurochirurgie de l'Université McGill.
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Streptavidin and Antibody Description
Streptavidin
Donkey Anti-Chicken IgY†(IgG)(H+L)
(min X Bov, Gt, GP, Sy Hms, Hrs, Hu, Ms, Rb, Rat, Shp Sr Prot)
Donkey Anti-Goat IgG (H+L)***
(min X Ck, GP, Sy Hms, Hrs, Hu, Ms, Rb, Rat Sr Prot)
Donkey Anti-Guinea Pig IgG (H+L)
(min X Bov, Ck, Gt, Sy Hms, Hrs, Hu, Ms, Rb, Rat, Shp Sr Prot)
Donkey Anti-Human IgG (H+L)
(min X Bov, Ck, Gt, GP, Sy Hms, Hrs, Ms, Rb, Rat, Shp Sr Prot)
Donkey Anti-Mouse IgG (H+L)
(min X Bov, Ck, Gt, GP, Sy Hms, Hrs, Hu, Rb, Shp Sr Prot)
Donkey Anti-Mouse IgG (H+L)
(min X Bov, Ck, Gt, GP, Sy Hms, Hrs, Hu, Rb, Rat, Shp Sr Prot)**
Goat Anti-Mouse IgG (H+L)
(min X Hu, Bov, Hrs, Rb, Sw Sr Prot)
Goat Anti-Mouse IgG (H+L)
(min X Hu, Bov, Hrs, Rb, Rat Sr Prot)
ML*
ML*
ML*
ML*
ML*
ML*
ML*
ML*
Goat Anti-Mouse IgG Fcγ fragment specific
(min X Hu, Bov, Hrs Sr Prot)
ML*
Goat Anti-Mouse IgM, μ chain specific
(min X Hu, Bov, Hrs Sr Prot)
ML*
Goat Anti-Mouse IgG, Fcγ subclass 1 specific
(min X Hu, Bov, Rb Sr Prot)
ML*
Goat Anti-Mouse IgG, Fcγ subclass 2a specific
(min X Hu, Bov, Rb Sr Prot)
ML*
Goat Anti-Mouse IgG, Fcγ subclass 2b specific
(min X Hu, Bov, Rb Sr Prot)
ML*
Goat Anti-Mouse IgG, Fcγ subclass 3 specific
(min X Hu, Bov, Rb Sr Prot)
ML*
Donkey Anti-Rabbit IgG (H+L)
(min X Bov, Ck, Gt, GP, Sy Hms, Hrs, Hu, Ms, Rat, Shp Sr Prot)
Goat Anti-Rabbit IgG (H+L)
(min X Hu, Ms, Rat Sr Prot)
Donkey Anti-Rat IgG (H+L)
(min X Bov, Ck, Gt, GP, Sy Hms, Hrs, Hu, Rb, Shp Sr Prot)
ML*
ML*
ML*
Donkey Anti-Rat IgG (H+L)
(min X Bov, Ck, Gt, GP, Sy Hms, Hrs, Hu, Ms, Rb, Shp Sr Prot)**
Goat Anti-Rat IgG (H+L)
(min X Hu, Bov, Hrs, Rb Sr Prot)
Goat Anti-Rat IgG, Fcγ fragment specific
(min X Hu, Bov, Hrs Sr Prot)
ML*
ML*
ML*
Goat Anti-Rat IgM, μ chain specific
(min X Hu, Bov, Hrs Sr Prot)
ML*
Donkey Anti-Sheep IgG (H+L)***
(min X Ck, GP, Sy Hms, Hrs, Hu, Ms, Rb, Rat Sr Prot)
ML*
Controls
Cyanine Cy2
A=492, E=510
Cyanine Cy3
A=550, E=570
Cyanine Cy5
A=650, E=670
0.5 mg
703-225-155
0.5 mg
703-165-155
0.5 mg
703-175-155
1.0 mg
016-220-084
0.5 mg
705-225-147
0.5 mg
706-225-148
0.5 mg
709-225-149
0.5 mg
715-225-150
0.5 mg
715-225-151
1.5 mg
115-225-146
0.5 mg
115-225-166
1.5 mg
115-225-071
1.0 mg
115-225-075
0.5 mg
115-225-205
0.5 mg
115-225-206
0.5 mg
115-225-207
0.5 mg
115-225-209
0.5 mg
711-225-152
1.5 mg
111-225-144
0.5 mg
712-225-150
0.5 mg
712-225-153
1.5 mg
112-225-143
1.5 mg
112-225-071
1.0
112-225-075
0.5 mg
713-225-147
1.0 mg
017-220-003
ChromPure Donkey IgG, whole molecule
1.0 mg
005-220-003
ChromPure Goat IgG, whole molecule
† IgY est la désignation d'origine de la protéine de type IgG trouvée dans le sérum et le jaune d'œuf.
* ML= Marquage multiple (voir l'explication sur Marquage multiple dans www.jireurope.com ).
** Attention : Voir « Sélection et emplacement des anticorps purifiés par affinité avant de sélectionner un anticorps adsorbé
contre une espèce voisine.
1.0 mg
016-160-084
0.5 mg
705-165-147
0.5 mg
706-165-148
0.5 mg
709-165-149
0.5 mg
715-165-150
0.5 mg
715-165-151
1.5 mg
115-165-146
0.5 mg
115-165-166
1.5 mg
115-165-071
1.0 mg
115-165-075
0.5 mg
115-165-205
0.5 mg
115-165-206
0.5 mg
115-165-207
0.5 mg
115-165-209
0.5 mg
711-165-152
1.5 mg
111-165-144
0.5 mg
712-165-150
0.5 mg
712-165-153
1.5 mg
112-165-143
1.5 mg
112-165-071
1.0 mg
112-165-075
0.5 mg
713-165-147
1.0 mg
017-160-003
1.0 mg
005-160-003
1.0 mg
016-170-084
0.5 mg
705-175-147
0.5 mg
706-175-148
0.5 mg
709-175-149
0.5 mg
715-175-150
0.5 mg
715-175-151
1.5 mg
115-175-146
0.5 mg
115-175-166
1.5 mg
115-175-071
1.0 mg
115-175-075
0.5 mg
115-175-205
0.5 mg
115-175-206
0.5 mg
115-175-207
0.5 mg
115-175-209
0.5 mg
711-175-152
1.5 mg
111-175-144
0.5 mg
712-175-150
0.5 mg
712-175-153
1.5 mg
112-175-143
1.5 mg
112-175-071
1.0 mg
112-175-075
0.5 mg
713-175-147
1.0 mg
017-170-003
1.0 mg
005-170-003
*** Avertissement : L'ABS et le lait en poudre peuvent contenir des IgG qui réagissent avec cet anticorps. L'utilisation
d'ABS ou de lait en poudre pour bloquer ou diluer cet anticorps peut augmenter l'arrière-plan et/ou réduire le titre des
anticorps secondaires.
DyLight est une marque déposée de Thermo Fisher Scientific Inc et ses filiales. Jackson ImmunoResearch est autorisé par Thermo Fisher Scientific à fabriquer et à vendre des conjugués de colorants fluorescents DyLight.
Cy ™ est une marque déposée de GE Healthcare. Jackson ImmunoResearch est autorisé par GE Healthcare pour fabriquer et vendre conjugués de Cy2, Cy3, Cy5, et Cy7 sous le numéro de brevet 5,268,486 et d'autres
brevets en attente. Les colorants fluorescents.Alexa Fluor®s sont une marque déposée de Life Technologies Corp
Certifié par UKAS selon la norme BS EN ISO 9001:2008 sous le certificat numéro 12017/1.
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