15. Tag der Mikroskopie 2016 ZEISS Lightsheet Z.1 Schonende
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15. Tag der Mikroskopie 2016 ZEISS Lightsheet Z.1 Schonende
15. Tag der Mikroskopie 2016 Workshop 6 ZEISS Lightsheet Z.1 Schonende Lichtblattmikroskopie mit Multiview In der klassischen Fluoreszenzmikroskopie betrachtet man meist dünne Präparate, die auf einen Glasträger fixiert und mit fluoreszierenden Farbstoffen markiert sind. Seit einigen Jahren tritt aber die Beobachtung dynamischer Prozesse in lebenden Organismen (Zebrafischlarven, Embryonen) oder in Strukturen, wie aus Stammzellen gewonnene Organoide oder Tumorzellsphäroide und Aggregationskulturen zunehmend ins Interesse der Forscher. Solche Analysen waren bisher schwierig oder sogar unmöglich, da mit zunehmender Dicke des Objekts die Transparenz der Probe, die Geschwindigkeit der Datenerfassung und die Lichtbelastung des Präparats zu kritischen Faktoren werden. Hohe Beleuchtungsintensitäten über einen längeren Zeitraum führen zu zytotoxischen Effekten und einem Ausbleichen der Farbstoffe. Das Lightsheet Z.1 ist für solche Anwendungen ideal geeignet. In diesem System erfolgt die Beleuchtung des Präparats von der Seite, senkrecht zu Betrachtungsrichtung und exakt in der Fokusebene des Mikroskops. Dadurch wird nur die Ebene des Präparats beleuchtet, die man gerade betrachtet. Das Präparat hängt in einer Inkubationskammer, die ideale Lebens- und Wachstumsbedingungen bietet. Es kann im Lichtblatt bewegt und sogar gedreht werden. Die Lichtbelastung ist nur ein Bruchteil dessen, was eine Probe in konventionellen Mikroskopen akzeptieren muss. Dadurch ist eine mikroskopische Analyse mit hoher zeitlicher und räumlicher Auflösung über einen langen Beobachtungszeitraum oder in sehr dicken und geklärten Präparaten möglich, ohne dass die Probe zu Schaden kommt oder die Farbstoffe gebleicht werden. Im Workshop werden wir Ihnen die Vielfalt möglicher Objektive und Probenkammern erklären und Ihnen zeigen, welches Spektrum von bisher undenkbaren Experimenten mit einem Lightsheet Z.1 möglich werden. Carl Zeiss Microscopy GmbH Jena, September 2016