Sécurité biologique dans les laboratoires de microbiologie

Sécurité biologique
dans les laboratoires de
microbiologie
D.S. Blanc
Médecine Préventive Hospitalière
CHUV
Buts
• protection du personnel
• protection des personnes en dehors
du laboratoire
• protection de l'environnement
Cadre légal
• Ordonnances
– Ordonnance sur l'utilisation d’organisme en milieu confiné
– Ordonance sur la protection des travailleurs contre les risques
liés aux microorganismes
– Ordonnance sur la protection de la maternité
• Recommandations SUVA:
– Prévention des maladies professionnelles dans les laboratoires
de microbiologie diagnostique. 2003. 2869/27.f
– Prévention des infections transmises par voie sanguine dans les
laboratoires médicaux. 2003. 2869/19.f
– Prévention des atteintes à la santé lors des opérations de
désinfection. 1993. 2869/23.f
– Prévention des maladies infectieuses transmises par voie
sanguine dans le secteur sanitaire. 2003. 2869/30.f
– Tuberculose dans le cadre professionnel: Risques et prévention
– Vaccination du personnel de santé
– Allergie au latex
4 Niveaux de Sécurité Biologique (BSL):
fonction (entre autres!) de la pathogénicité
des microorganismes utilisés
1: non pathogènes (ex. Bacillus subtilis)
2: modérément pathogènes
3: causant des maladies sévères ou potentiellement
létales (HIV, B.anthracis)
4: risque élevé de transmission par aérosol et
causant des infections léthales (FVH)
Laboratoires de diagnostic microbiologique: BSL-2
Mesures de sécurités biologiques:
1.
2.
3.
4.
5.
Infrastructures
Pratiques microbiologiques
Elimination des déchets
Hygiène du lieu de travail
Hygiène et prévention personnelle
1. Infrastructures
• Un panneau de risque
biologique doit être
suspendu sur chaque porte
d'accès des laboratoires
• L'accès au laboratoire est limité
• Portes et fenêtres des lieux de travail
doivent être fermées pendant le travail
2. Pratiques microbiologiques standards
• Pas de pipetage à la bouche
• Utilisation de matériel jetable de
préférence
Matériel réutilisable doit être pré-désinfecté
chimiquement ou thermiquement avant le nettoyage
manuel (ex. pipettes en verres)
• Aiguilles hypodermiques et seringues:
ne doivent être utilisées que si cela est absolument
nécessaire et doivent être éliminées de manière sûre;
le recapuchonage des aiguilles est proscrit
Pratiques microbiologiques standards
• Minimiser la production d’aérosols!
Lorsqu'il y a possibilité de production d'aérosols entraînant
un risque d'infection aérogène, la manipulation d'échantillons
doit s'effectuer sous un flux de sécurité de classe II
• Port de gants obligatoire:
⇒ risque de contact cutané avec du matériel infectieux,
une surface ou un équipement contaminés
⇒ travaille avec un récipient ouvert contenant du sang ou
un autre liquide biologique
Pratiques microbiologiques standards
• Désinfection des récipients d'échantillons
dont l'extérieur est souillé avant toute
manipulation
• Contrôle de l'identité des microorganismes de référence utilisés
Pratiques microbiologiques spéciales
Manipulation sous un flux laminaire de classe 2
¾ Prélèvements respiratoires ou de tissus:
¾ Production d'aérosol potentiellement infectieux
Hottes de sécurité biologique
Classe 2
Classe 1
Classe 3
3. Classification et élimination des
déchets du secteur de la santé
A. Déchets médicaux ne posant pas de problème,
composition similaire à celle des déchets urbains
B. Déchets spéciaux
1. Danger de contamination (contenant du sang,
des excrétions et des sécessions)
2. Danger de blessures
3. Médicaments périmés
4. Cytostatiques
C. Infectieux
OUC: inactivation des
déchets contaminés
avant de les sortir des
laboratoires
D. Autres déchets spéciaux (chimiques, radioactifs…)
IMU-DAM: Élimination des déchets
Déchets infectieux solides
Cultures de microorganismes ou de cellules
Fermeture du sac avec
une attache zip
Échantillons de patients,
reste d'analyse
Objets ayant touchés des
échantillons (tips de
pipetage de sérum, …)
Dépôt dans les chariots
prévus à cet effet
Autoclavage
(IMU ou BH-03)
IMU-DAM: Élimination des déchets
Déchets infectieux liquides
B2. Objets
tranchants
Tubes de cultures
Flacons de cultures
Inactivation chimique
(eau de Javel)
Evier
IMU-DAM: Élimination des déchets
Déchets présentant un danger de blessure
Aiguilles, lames,
pipette Pasteur
B2. Objets
tranchants
IMU-DAM: Élimination des déchets
Déchets toxiques
Bromure d'éthidium
Radiactivité
Etc…
Emballage
adhoc
D.
Pharmacie
IMU-DAM: Élimination des déchets
Déchets urbains
Emballages échantillons
Emballages de kits
Récipients de réactifs vides
Essuie-mains
Sac gris
sagex.
Etc…
Liquide corporels et excrétions de personnes
infectées: peuvent en principe être déversées dans les
canalisations
Déchets ne présentant pas de risque (urbains): peu
souillés de sang et peu contaminé (sparadraps,
pansements, couches…)
A. Déchets
urbains
CHUV: Recyclage des déchets
Papier
Plastique
Aluminium
Attention: tous les documents contenant une identification de patient
doivent être détruit de façon "sécurisée" (par exemple avec une
déchiqueteuse).
4. Hygiène du lieu de travail
• Les lieux de travail doivent être parfaitement propres
et en ordre; seuls les matériaux et appareils
absolument nécessaires doivent s’y trouver; les
réserves doivent être rangées dans les locaux et
armoires prévus à cet effet
• Place de travail:
responsable: personnel technique
- maintient de l'ordre
- nettoyage et désinfection après chaque travail ou à la
fin de chaque journée, et après chaque souillure par du
matériel viable
Hygiène du lieu de travail
• Equipements:
responsable: personnel technique
- Désinfection selon fiche technique
Un équipement devra être désinfecté avant de le
sortir du laboratoire (changement de laboratoire,
réparation, mise à la casse)
• Surfaces (sols et murs): responsable: service de maison
- Selon le plan d'hygiène
• En cas de présence d'insectes ou de rongeurs, faire
appel au Service de maison pour leur élimination
• Les animaux de compagnie sont interdits d'accès
5. Hygiène personnelle
• Port de la blouse fermée (ou autres vêtements de
protection):
– obligatoire dans les lieux de travail!
– La blouse reste dans le laboratoire!!!
Hygiène personnelle
• Il est interdit de manger, de boire, de fumer, de
priser, de manipuler des verres de contact, d’utiliser
des produits cosmétiques ou d’entreposer de la
nourriture dans les lieux de travail
Hygiène personnelle
Lavage/désinfection des mains
Il convient de se désinfecter (solution alcoolique) ou de se
laver (savon désinfectant) soigneusement les mains:
•
à la fin de chaque opération de travail
•
après le port de gant
•
avant de quitter le laboratoire
Prévention personnelle
• Vaccination contre les hépatites A et B:
hautement recommandée pour tout le personnel
• Vaccination contre le méningocoque: recommandé pour le
personnel des laboratoires de diagnostique
• Vaccin contre la grippe: recommandé
• Test à la tuberculine (Mantoux): à l'engagement, puis à
rythme annuel s'il est négatif
(chaque année pour le personnel du labo TB)
• Mise à jours des vaccins généraux (diTE, ROR, etc.): contrôle
par la Médecine du Personnel lors de l'engagement
Prévention personnelle
• Grossesse suspectée ou confirmée:
Informer le médecin du personnel ou/et le supérieur
responsable, afin que soient appréciés et discutés les
risques éventuels du poste de travail actuel.
Vdoc: 6.4.2A Directives générales
DIR CHUV: Protection des collaboratrices enceintes ou qui allaitent
Ne sont pas autorisées pour les femmes enceintes
(*: + 3 premiers mois d’allaitement)
•les manipulations du virus HIV, herpès simplex ou varicelle
•*les manipulations de sang ou autres liquides biologiques HIV ou
HBV ou HCV positifs ou suspects de l’être
•les manipulations de prélèvements déclarés infectieux (point jaune)
•les manipulations d’agents bactériens* (tuberculose, listeria,
gonocoque), viraux (en l’absence d’immunité démontrée : CMV, virus
varicelle-zona, herpès, rougeole, rubéole, parvovirus B19) ou
parasitaire (toxoplasmose): évaluation rigoureuse
•*Les activités avec des agents infectieux dans le cadre des
laboratoires de recherches doivent dans tous les cas être évalués
avec la Médecine du personnel.
Pour le général, voire le document « Application de l’ordonnance sur
la protection de la maternité dans les Institutions HospicesCHUV ».
Mesures de sécurité supplémentaires
pour le laboratoire des mycobactéries
• Port des gants obligatoire pour toutes les
manipulations de cultures
• Port d'une blouse à usage unique obligatoire
Cette blouse ne doit pas quitter le laboratoire de tuberculose.
Les blouses à usage unique doivent être jetées dans les
poubelles biologiques réservées à cet effet (sacs rayés rouge
et blanc)
• Entrée du laboratoire restreinte au
personnel autorisé
Mesures en cas de contamination
Contamination par du liquide
(tube de bouillon de culture ou
récipient contenant un liquide
biologique cassé, etc.)
Contamination par contact
(plaques de milieux de cultures qui
tombent par terre, échantillon clinique
qui tombe sur la surface de travail,
etc...)
Mesures en cas de contamination
• Porter des gants
• Recouvrir de papier absorbant
imbibé de désinfectant. Eviter de
sprayer ou de verser le désinfectant
de haut, ce qui peut engendrer des
aérosols
• Laisser agir
• Éponger et jeter le matériel souillé
dans conteneur adéquat (Ne jamais
manipuler du verre cassé directement avec
les mains, même gantées, mais utiliser une
brosse et ramassoire, un pincette …)
Mesures en cas d'accident
• Mesures d'urgences
– Piqûre et blessures: laver immédiatement la partie lésée à l'eau
et au savon, la rincer abondamment et la désinfecter (alcool ou
Betadine)
– Projections sur les muqueuses (bouche, yeux): rincer
abondamment avec du sérum physiologique ou à défaut de l'eau
du robinet
• Conseil médical rapide
– Semaine, nuit, week-end et fériés:
tél.
40 275
• Déclarer l'accident
– Déclaration avec le responsable du service adressée à la
Médecine du personnel (obligation légale)
Les désinfectants utilisés au CHUV
• Stérilium
(alcool, ammonium quaternaire):
désinfection des mains
• SeptoCHUV2000
(alcool, ammonium quaternaire):
désinfection des surfaces
• Lysetol AF (amines)
désinfection des instruments (trempage)
Les désinfectants utilisés au CHUV
Stérilium
Septochuv
Lysetol
Bactéries végétatives
+++
+++
+++
Micobactéries
++
+++
+++
Virus
+++
+++
+++
Champignons
+++
+++
+++
-
-
±
Spores
Documents
M:/IMU/COMMUN/
ACCREDITATION/
Biosécurité/Documents/
SécuriteLabo4_DBlanc.pdf