Protein S Activity 0020302000

Transcription

HemosIL®
Protein S Activity - 0020302000
ENGLISH - Insert revision 08/2012
Intended use
Instrument/test procedures
Automated coagulation functional assay for the quantitative determination of free Protein S in human citrated plasma on
the ACL TOP® Family, ACL ELITE®/ELITE PRO/8/9/10000, ACL Advance and ACL Classic (100-7000) Systems as an
aid in the diagnosis of hereditary and acquired Protein S deficiency.
Refer to the appropriate IL instrument’s Operator’s Manual and/or Application Manual for the complete assay procedure
instructions.
Summary and principle
Protein S is a vitamin K-dependent cofactor for the anticoagulation and the profibrinolytic effects of activated protein C.1
Two forms of Protein S are present in plasma: free Protein S (40%), and Protein S linked to the complement C4b-binding
protein (C4BP, 60%). Only free Protein S has functional cofactor activity.2
Protein S deficiency may be hereditary or acquired. Acquired deficiency may be observed during pregnancy, during
oral anticoagulant therapy, during oral contraceptive use, in liver disease, in newborn infants as well as in other clinical
conditions.3,4,5 Deficiency of Protein S has been associated with a high risk of developing venous thromboembolism
especially in young people.6,7
The HemosIL Protein S Activity assay determines the functional activity of free Protein S by measuring the degree of
prolongation of a prothrombin time in the presence of the recombinant human tissue factor, phospholipids, calcium
ions and activated protein C. The Protein S activity is correlated with the prolongation of the clotting time of a Protein S
deficient plasma to which diluted sample has been added.
Specimen collection and preparation
Nine parts of freshly drawn venous blood are collected into one part trisodium citrate. Refer to CLSI Document H21-A5
for further instructions on specimen collection, handling and storage.9
Additional reagents and control plasmas
The following are not supplied with the kit and must be purchased separately.
Americas and Pacific Rim Cat. No.
Calibration plasma
0020003700
Normal Control
0020003120
Low Abnormal Control
0020003220
High Abnormal Control
0020003320
Factor diluent
0009757600
Cleaning agent
0009832700
Europe Cat. No.
0020003700
0020003110
0020003210
0020003310
0009757600
0009832700
Composition
Quality control
The HemosIL Protein S Activity kit consists of:
R Protein S reagent (Cat. No. 0020302010): 3 x 2 mL vials of a lyophilized preparation containing recombinant
human tissue factor, synthetic phospholipids, activated protein C, polybrene, buffer, stabilizers and preservatives.
C Calcium reagent (Cat. No. 0020302020): 3 x 6 mL vials of a liquid preparation containing calcium.
Normal and abnormal controls are recommended for a complete quality control program.10 Normal Control, Low
Abnormal Control and High Abnormal Control are designed for this program. Each laboratory should establish its own
mean and standard deviation and should establish a quality control program to monitor laboratory testing. Controls
should be analyzed at least once every 8 hour shift in accordance to good laboratory practice. Refer to Westgard et al for
identification and resolution of out-of-control situtations.11
D Protein S deficient plasma (Cat. No. 0020302030): 3 x 2 mL vials of a lyophilized human plasma which has been
artificially depleted of Protein S.
PRECAUTIONS AND WARNINGS:
The Protein S reagent contains animal source material, therefore should be treated as potentially infectious.
The Protein S reagent and Protein S deficient plasma contain human source material that tested non-reactive for HIV
antibody, Hepatitis B Surface Antigen and Anti-HCV at the donor stage. These products, as with all human based
specimens, should be handled with proper laboratory safety procedures to minimize the risk of transmission of infectious
disease.
The Protein S reagent, Calcium reagent and Protein S deficient plasma are not classified as hzardous.
• Hazard class: none
• Risk phrases: none
• Safety phrases: none
This product is For in vitro Diagnostic Use.
Traceability of calibrators and control materials
Preparation
Protein S reagent: Dissolve the contents of each vial with 2 mL of CLSI CLRW Type water or equivalent.8 Replace the
stopper and swirl gently. Make sure of the complete reconstitution of the product. Keep the reagent at 15-25°C for 30
minutes and invert to mix before use. Do not shake.
PLEASE NOTE ACL CLASSIC (100 - 7000) users: Dissolve the contents of each vial of Protein S reagent with half
a vial (3mL) of Calcium reagent. Replace the stopper and swirl gently. Make sure of the complete reconstitution of the
product. Keep the reagent at 15-25°C for 30 minutes and invert to mix. Pipet the whole contents of the reconstituted
Protein S reagent into the remaining Calcium reagent vial invert to mix. Place the reagent into a dedicated macro
reservoir with a cover, and place the reservoir in reagent position 1 of the analyzer.
Calcium reagent: Invert to mix before use.
Protein S deficient plasma: Dissolve the contents of each vial with 2 mL of CLSI CLRW Type water or equivalent.8
Replace the stopper and swirl gently. Make sure of the complete reconstitution of the product. Keep the plasma at 1525°C for 30 minutes and invert to mix before use. Do not shake.
Reagent storage and stability
Unopened reagents are stable until the expiration date shown on the vial when stored at 2-8°C.
Protein S reagent - Stability after reconstitution: 24 hours at 2-8 ºC in closed original vial or 8 hours at 15ºC on-board
the ACL TOP Family in the original vial, 8 hours at 15ºC on-board the ACL ELITE/ELITE PRO/8/9/10000 in the original
vial, 8 hours at 15ºC on-board the ACL Advance in the original vial or 24 hours on-board the ACL Classic (100-7000)
Systems.
Calcium reagent - Stability after opening: 24 hours at 2-8 ºC or 8 hours on-board the ACL TOP Family in the original
vial, 8 hours at 15-25ºC on-board the ACL ELITE/ELITE PRO/8/9/10000 in the original vial or 8 hours at 15ºC on-board
the ACL Advance in the original vial.
Protein S deficient plasma - Stability after reconstitution: 6 hours at 15ºC on-board the ACL TOP Family in the original
vial, 3 hours on-board the ACL ELITE/ELITE PRO/8/910000 in the original vial, 6 hours at 15ºC on-board the ACL
Advance in the original vial or 4 hours on-board the ACL Classic (100 -7000) Systems.
The reported values were determined over multiple runs on ACL TOP Family, ACL ELITE/ELITE PRO/8/9/10000, ACL
Advance and ACL Classic (100-7000) Systems using a specific lot of reagent and against a Calibration Plasma House
Standard which is traceable to the current International Protein S Standard, identified in the acceptance range table.
Results
Protein S results may be reported in seconds and activity (%). Refer to the instrument’s Operator’s manual for additional
information.
Limitations/interfering substances
Protein S results are affected by certain commonly administered drugs (e.g. Warfarin) and by certain conditions (e.g.
pregnancy12). Additional studies should be conducted to determine the source of unexpected abnormal results.
Protein S results on the ACL TOP Family, ACL ELITE/ELITE PRO/8/9/10000 and ACL Advance Systems are not
affected by heparin (UF) up to 1.6 IU/mL, heparin (LMW) up to 2.1 IU/mL, bilirubin up to 15 mg/dL, hemoglobin up to
250 mg/dL and triglycerides up to 2360 mg/dL. Hemolyzed and turbid samples should not be assayed.
Protein S results on the ACL Classic (100-7000) are not affected by heparin (UF) up to 2.0 IU/mL, heparin (LMW) up
to 2.5 IU/mL, bilirubin up to 20 mg/dL, hemoglobin up to 250 mg/dL, and triglycerides up to 1655 mg/dL. Hemolyzed
samples and turbid samples should not be assayed.
Expected values
A normal range study was performed using the Protein S Activity kit on representative members of the ACL TOP Family
(ACL TOP and ACL TOP 500 CTS), ACL ELITE/ELITE PRO/8/9/10000, ACL Advance and ACL Classic (100-7000)
Systems.
System
N
% PS Activity
ACL TOP Family
164
63.5 – 149.0%
ACL ELITE/ELITE PRO/8/9/10000
112
60.0 – 135.8%
ACL Advance
112
63.8 – 148.1%
ACL Classic (100-7000)
123
50 – 149%
Note: Age and hormonal status may affect the normal range for females.13
Ranges were calculated as recommended by CLSI document C28-A3.14 These results were obtained using a specific lot
of reagent. Due to many variables which may affect results, each laboratory should verify its own normal range.
Performance characteristics
Performance characteristics were assessed utilizing 3 lots of reagent on 3 representative members of the ACL TOP
Family (ACL TOP, ACL TOP 500 CTS and ACL TOP 700), ACL ELITE/ELITE PRO /8/9/10000, ACL Advance and ACL
Classic (100-7000) Systems. Precision was evaluated in accordance with CLSI EP05-A215, for 20 days, with 2 runs per
day and 2 replicates per run for each sample level (n=80/ instrument/ lot). Test data from a representative lot is included
below:
Precision:
ACL TOP Family
Mean (% PS)
CV% (Within run)
CV% (Total)
Normal Control
94.2
2.5
4.9
33.6
3.8
7.1
19.3
1.19 (SD)
2.23 (SD)
Internal Control 1
44.5
2.9
6.2
Internal Control 2
67.2
1.7
4.7
High Plasma Sample
128
1.6
4.2
ACL ELITE/ELITE PRO/8/9/10000 Mean (% PS)
CV% (Within run)
CV% (Total)
Normal Control
88.4
1.7
4.2
31.4
3.7
7.6
17.8
1.07 (SD)
2.23 (SD)
Internal Control 1
41.5
3.1
7.2
Internal Control 2
63.7
2.0
4.7
High Plasma Sample
131
1.3
4.1
ACL Advance
Mean (% PS)
CV% (Within run)
CV% (Total)
Normal Control
96.8
2.8
4.8
33.9
3.5
8.6
21.0
1.23 (SD)
2.77 (SD)
Internal Control 1
43.1
3.4
7.6
Internal Control 2
66.4
2.6
5.1
High Plasma Sample
140
3.5
4.4
Mean (% PS)
CV% (Within run)
CV% (Total)
Normal Control
104
3.4
6.3
31
2.7
7.6
18
1.2 (SD)
1.5 (SD)
Internal Control 1
47
4.4
10.7
Internal Control 2
74
2.6
8.2
Correlation:
System
slope
intercept
r
Reference method
ACL TOP Family
0.966 1.10
0.968
HemosIL ProS on ACL TOP Family
ACL ELITE/
ELITE PRO/8/9/10000
0.969
0.01
0.990
HemosIL Protein S Activity on
an ACL TOP Family
ACL Advance
1.018
2.58
0.993
an ACL TOP Family
0.990
1.35
0.961
an ACL TOP Family
The precision and correlation results were obtained using specific lots of reagents and controls.
In field site studies, the following data were obtained using a specific lot of Protein S Activity reagents:
System
slope
intercept
r
Reference method
ACL TOP Family
1.049
-2.7
0.956
HemosIL ProS
ACL TOP Family
0.984
6.2
0.965
HemosIL ProS
Detection Limit
System:
ACL TOP Family
5%
6%
ACL Advance
10%
4%
Linearity
System:
ACL TOP Family
10 – 150%
10 – 150%
ACL Advance
10 – 150%
10 – 100%
DEUTSCH - Packungsbeilage Version 08/2012
Verwendung
Vollautomatischer funktioneller Test zur quantitativen Bestimmung von freiem Protein S in humanem Citratplasma auf
Geräten der ACL TOP® Gerätefamilie, ACL ELITE®/ELITE Pro, ACL Advance Systemen und am ACL Classic (ACL 1007000) als Hilfestellung bei der Diagnose von angeborenem und erworbenem Protein S Mangel.
Testprinzip und Zusammenfassung
Protein S ist ein Vitamin K-abhängiger Kofaktor für die antikoagulatorischen und profibrinolytischen Effekte von
aktiviertem Protein C.1 Es liegt im Plasma in zwei Formen vor: zu 40% als freies Protein S und zu 60% in gebundener
Form an C4b-Bindeprotein (Komplementfaktor). Nur das freie Protein S ist biologisch aktiv.2 Ein Protein S Mangel kann
sowohl angeboren als auch erworben sein. Erworbene Mangelzustände können während der Schwangerschaft, unter
oraler Antikoagulantientherapie, bei Einnahme oraler Kontrazeptiva, bei Lebererkrankungen, bei Neugeborenen und bei
anderen klinischen Zuständen auftreten.3,4,5 Protein S Mangel ist als Risikofaktor bekannt, der die Bildung von venösen
Thrombosen besonders bei jungen Patienten begünstigt.6,7
Der HemosIL Protein S Aktivitätstest bestimmt die funktionelle Aktivität des freien Protein S über die Messung der
Verlängerung einer Prothrombinzeit in Anwesenheit von rekombinantem Gewebefaktor, Phospholipiden, Calcium-Ionen
und aktiviertem Protein C. Die verdünnte Patientenprobe wird mit einem Protein S Mangelplasma gemischt, so dass
alle übrigen Gerinnungsfaktoren im Überschuss vorliegen und die Bestimmung der Gerinnungszeit von der Menge an
Protein S im Patientenplasma abhängig ist.
Inhalt
Die HemosIL Protein S Activity Packung enthält:
R Protein S reagent (Art. Nr. 0020302010): 3 Flaschen x 2 mL lyophilisiertes Material, die rekombinanten
humanen Gewebefaktor, synthetische Phospholipide, aktiviertes Protein C, Polybren, Puffer, Stabilisatoren und
Konservierungsmittel enthalten.
C Calcium reagent (Art. Nr. 0020302020): 3 Flaschen x 6 mL einer flüssigen Lösung, die Calcium enthalten.
Haltbarkeit nach Öffnen in Systemen der ACL TOP Familie:
- in der Originalflasche im Gerät: 8 Stunden
Haltbarkeit nach Öffnen in ACL ELITE/ELITE PRO/8/9/10000 Systemen:
- bei 15-25°C in der Originalflasche im Gerät: 8 Stunden
Haltbarkeit nach Öffnen in ACL Advance Systemen:
- bei 15°C in der Originalflasche im Gerät: 8 Stunden
Protein S deficient plasma
Haltbarkeit nach Rekonstitution in Systemen der ACL TOP Familie und ACL Advance Systemen:
Haltbarkeit nach Rekonstitution in ACL ELITE/ELITE PRO/8/9/10000 Systemen:
- in der Originalflasche im Gerät: 3 Stunden
- in ACL Classic Systemen (ACL 100-7000): 4 Stunden
Bestimmungsansatz
Die ausführliche Beschreibung des Bestimmungsansatzes ist dem IL Geräte-Bedienerhandbuch und/oder dem
Applikationshandbuch zu entnehmen.
Probenmaterial und Gewinnung
9 Teile frisches venöses Blut und 1 Teil Trinatriumcitratlösung werden sorgfältig gemischt. Hinweise zur Aufbereitung des
Blutes sind den Empfehlungen des Deutschen Instituts für Normung - DIN 58 905 - oder dem CLSI Dokument H21-A5
zu entnehmen.9
Zusätzliche Reagenzien und Kontrollmaterialien
D Protein S deficient plasma (Art. Nr. 0020302030): 3 Flaschen x 2 mL lyophilisiertes Humanplasma, hergestellt
durch spezifische Protein S Immunabsorption.
WARNUNG:
Das Protein S Reagenz enthält tierisches Material und sollte daher als potentiell infektiös behandelt werden.
Das Protein S Reagenz und das Protein S Mangelplasma enthalten Material humanen Ursprungs, das auf Spenderseite
als nicht reaktiv für HIV-Antiköper, Hepatitis-B-Oberflächenantigen (HBsAg) und Anti-HCV getestet wurde. Diese
Produkte sollten wie alle anderen Humanproben mit angemessenen Sicherheitsvorkehrungen behandelt werden um
das Risiko der Übertragung von infektiösen Krankheiten zu minimieren.
Das Protein S Reagenz, Calciumreagenz und Protein S Mangelplasma sind als nicht gefährlich eingestuft.
• Gefahrenklasse: keine
• Risikoeinstufung: keine
• Sicherheitseinstufung: keine
Dieses Produkt ist nur für die in vitro Diagnostik geeignet.
Herstellung
Protein S reagent: Inhalt der Flasche mit 2 mL CLSI Wasser (CLRW) oder vergleichbarem (z. B. Aqua bidest.) lösen.8
Die Flasche wieder verschließen, vorsichtig schwenken und das Lyophilisat vollständig rekonstituieren. Das Reagenz
für 30 Minuten bei 15-25°C inkubieren und unter vorsichtigem Schwenken vor der Verwendung erneut mischen. Nicht
schütteln.
HINWEIS bei Verwendung am ACL Classic (ACL 100-7000):
Den Inhalt jeder Protein S Reagenzflasche mit der Hälfte des Calcium Reagenzes (3 mL) lösen. Die Flasche wieder
verschließen, vorsichtig schwenken und das Lyophilisat vollständig rekonstituieren. Das Reagenz für 30 Minuten
bei 15-25°C inkubieren und unter vorsichtigem Schwenken erneut mischen. Anschließend den gesamten Inhalt des
rekonstituierten Protein S Reagenzes in die angebrochenen Calcium Reagenzflasche pipettieren und unter vorsichtigem
Schwenken mit den restlichen 3 mL Calcium Reagenz mischen. Füllen Sie das Reagenz in ein Makroreservoir mit
Deckel und stellen es auf die Position 1 im ACL Gerät.
Calcium reagent: Vor der Verwendung vorsichtig schwenken.
Protein S deficient plasma: Inhalt der Flasche mit 2 mL CLSI Wasser (CLRW) oder vergleichbarem (z. B. Aqua
bidest.) lösen.8 Die Flasche wieder verschließen, vorsichtig schwenken und das Lyophilisat vollständig rekonstituieren.
Das Reagenz für 30 Minuten bei 15-25°C inkubieren und unter vorsichtigem Schwenken vor der Verwendung erneut
mischen. Nicht schütteln.
Lagerung und Haltbarkeit
Die ungeöffneten Reagenzien sind bei Lagerung zwischen 2-8°C bis zu dem auf dem Etikett angegebenen
Verfallsdatum haltbar.
Protein S reagent
Haltbarkeit nach Rekonstitution in Systemen der ACL TOP Familie, ACL ELITE/ELITE PRO/8/9/10000, ACL Advance
Systemen und am ACL Classic (ACL 100-7000):
- bei 2-8°C in der Originalflasche: 24 Stunden
- in ACL Classic Systemen (ACL 100-7000): 24 Stunden
Calcium reagent
Haltbarkeit nach dem Öffnen:
- bei 2-8°C in der Originalflasche: 24 Stunden
Die folgenden Materialien sind nicht in der Packung enthalten und müssen zusätzlich bestellt werden:
Amerikan. und Pazifischer Raum Art. Nr.
Europa Art. Nr.
Kalibrationsplasma
0020003700
0020003700
Normal-Kontroll-Plasma
0020003120
0020003110
Low Abnormal Kontroll-Plasma
0020003220
0020003210
High Abnormal-Kontroll-Plasma
0020003320
0020003310
Faktor Diluent
0009757600
0009757600
Reinigungslösung
0009832700
0009832700
Qualitätskontrolle
Es ist gängige Laborpraxis, die Qualität der Analyse mit Kontrollmaterialien in zwei Bereichen zu überprüfen.10
Die im vorherigen Abschnitt aufgelisteten Kontrollmaterialien stehen dafür zur Verfügung. Jedes Labor sollte für
das Qualitätskontroll-Programm seinen eigenen Mittelwert und die Standardabweichung (s) ermitteln. Spätestens
nach jeweils 8 Stunden sollte eine Qualitätskontrolle durchgeführt werden. Algorithmen zur Beurteilung der
Qualitätskontrollergebnisse siehe z.B. Westgard et al.11 Siehe auch „Richtlinien der Bundesärztekammer zur
Qualitätssicherung laboratoriumsmedizinischer Untersuchungen“ in der jeweils gültigen Fassung.
Standardisierung des Kalibrators und der Kontrollmaterialien
Die angegebenen Referenzwerte wurden bei mehreren Läufen an Geräten der ACL TOP Familie, ACL ELITE/ELITE
Pro, ACL 8/9/10000, ACL Advance Systemen und am ACL Classic (ACL 100-7000) mit spezifischen Reagenzchargen
und gegen ein Haus-Standard-Kalibrationsplasma ermittelt. Dieses ist abgeglichen auf den aktuellen Internationalen
Standard für Protein S (siehe Abschnitt Referenzbereiche).
Ergebnisse
Protein S Ergebnisse werden in Sekunden und Aktivität (%) angegeben. Weitere Informationen sind dem GeräteBedienerhandbuch zu entnehmen.
Einschränkungen
Protein S Ergebnisse werden von bestimmten, häufig verordneten Medikamenten (z.B. Warfarin) und von bestimmten
Gesundheitszuständen (z.B. Schwangerschaft)12 beeinflusst. Es sollten weitere Untersuchungen durchgeführt werden
um die Ursache von unerwarteten abnormalen Ergebnissen zu klären.
Protein S Ergebnisse auf Systemen der ACL TOP Familie, ACL ELITE/ELITE Pro, ACL 8/9/10000 und ACL Advance
Systemen werden durch Konzentrationen an Heparin (UFH) bis zu 1,6 IU/mL, Heparin (LMWH) bis zu 2,1 IU/mL,
Bilirubin bis zu 15 mg/dL, Hämoglobin bis zu 250 mg/dL und Triglyceride bis zu 2360 mg/dL nicht beeinflusst.
Hämoloytische und trübe Proben sollten nicht analysiert werden.
Protein S Ergebnisse am ACL Classic (ACL 100-7000) werden durch Konzentrationen an Heparin (UFH) bis zu
2,0 IU/mL, Heparin (LMWH) bis zu 2,5 IU/mL, Bilirubin bis zu 20 mg/dL, Hämoglobin bis zu 250 mg/dL und Triglyceride
bis zu 1655 mg/dL nicht beeinflusst. Hämolytische und trübe Proben sollten nicht analysiert werden.
Referenzbereiche
Mit dem Protein S Aktivitätstest wurde eine Studie zur Bestimmung des Normalbereichs auf Systemen der ACL TOP
Familie (ACL TOP and ACL TOP 500 CTS), ACL ELITE/ELITE Pro, ACL 8/9/10000, ACL Advance Systemen und am
ACL Classic (ACL 100-7000) durchgeführt.
System
N
% PS Aktivität
ACL TOP Familie
164
63,5 – 149
ACL ELITE/ELITE Pro, ACL 8/9/10000 112
60,0 – 135,8
ACL Advance
112
63,8 – 148,1
ACL Classic ( ACL 100-7000)
123
50 – 149
Hinweis: Der Normalbereich für Frauen kann vom Alter und dem hormonellen Status beeinflusst werden.13 Die
Bereiche wurden entsprechend dem CLSI Dokument C28-A3 berechnet.14 Aufgrund verschiedener Variablen, die die
Gerinnungszeit beeinflussen können, wird empfohlen, dass jedes Labor seinen eigenen Normalbereich überprüft.
Testcharakteristik
Die Testcharakteristika wurden unter Verwendung von drei verschiedenen Reagenzchargen auf jeweils drei
repräsentativen Geräten der ACL TOP Familie (ACL TOP, ACL TOP 500 CTS und ACL TOP 700), der ACL ELITE/
ELITE Pro, ACL 8/9/10000 , der ACL Advance Systeme und der ACL Classic Systeme (ACL 100-7000) ermittelt. Die
Präzision wurde in Übereinstimmung mit der CLSI EP05-A215 Richtlinie an 20 Tagen, mit je zwei Läufen pro Tag und
zwei Wiederholungen pro Lauf und Probe ermittelt (n=80/Gerät/Charge). Die Daten einer repräsentativen Charge sind
im Folgenden aufgeführt:
Präzision:
Die Präzision im Lauf und von Tag zu Tag wurde bei mehreren Läufen bestimmt.
ACL TOP Familie
Mittelwert (% PS)
VK % (im Lauf)
VK % (gesamt)
Normal Kontroll-Plasma
94,2
2,5
4,9
33,6
3,8
7,1
High Abnormal Kontroll-Plasma
19,3
1,19 (SD)
2,23 (SD)
Interne Kontrolle 1
44,5
2,9
6,2
Interne Kontrolle 2
67,2
1,7
4,7
Hohe Patientenprobe
128
1,6
4,2
ACL ELITE/ELITE Pro,
ACL 8/9/10000
Mittelwert (% PS)
VK% (im Lauf)
VK% (gesamt)
88,4
1,7
4,2
31,4
3,7
7,6
17,8
1,07 (SD)
2,23 (SD)
Interne Kontrolle 1
41,5
3,1
7,2
Interne Kontroll 2
63,7
2,0
4,7
Hohe Patientenprobe
131
1,3
4,1
ACL Advance
Mittelwert (% PS)
VK% (im Lauf)
VK% (gesamt)
96,8
2,8
4,8
33,9
3,5
8,6
21,0
1,23 (SD)
2,77 (SD)
Interne Kontrolle 1
43,1
3,4
7,6
Interne Kontrolle 2
66,4
2,6
5,1
Hohe Patientenprobe
140
3,5
4,4
ACL Classic ( ACL 100-7000)
Mittelwert (% PS)
VK % (im Lauf)
VK % (gesamt)
104
3.4
6.3
31
2.7
7.6
18
1,2 (SD)
1,5 (SD)
Interne Kontrolle 1
47
4.4
10.7
Interne Kontrolle 2
74
2.6
8.2
Korrelation:
System
Steigung
Offset
r
Vergleichsmethode
ACL TOP Familie
0,966
1,10
0,968
HemosIL ProS am ACL TOP
ACL ELITE/
0,969
0,01
0,990
HemosIL Protein S Aktivität auf
ELITE Pro, ACL 8/9/10000 Geräten der ACL TOP Familie
ACL Advance
1,018
2,58
0,993
Geräten der ACL TOP Familie
ACL Classic (ACL 100-7000)0,990
1,35
0,961
Geräten der ACL TOP Familie
Die Ergebnisse der Präzision und Korrelation sind mit spezifischen Reagenzien- und Kontrollchargen ermittelt worden.
Bei externen Vergleichsstudien wurden unter Verwendung einer spezifischen Reagenzcharge folgende Ergebnisse
erzielt:
System
Steigung
Offset
r
Vergleichsmethode
ACL TOP Familie
1,049
-2,7
0,956
HemosIL ProS
ACL TOP Familie
0,984
6,2
0,965
HemosIL ProS
Bestimmungsgrenze:
System
ACL TOP Familie 5%
ACL ELITE/ELITE Pro, ACL 8/9/10000
6%
ACL Advance
10 %
ACL Classic (ACL 100-7000)
4%
Linearität:
System
ACL TOP Familie
10 – 150 %
ACL ELITE/ELITE Pro, ACL 8/9/10000
10 – 150 %
ACL Advance
10 – 150 %
ACL Classic (ACL 100-7000)
10 – 100%
ESPAÑOL - Revisión folleto 08/2012
Aplicación
Técnica coagulativa funcional automatizada para la determinación cuantitativa de la actividad de la Proteína S libre en
plasma humano citratado en los Sistemas de Coagulación de la Familia ACL TOP, ACL ELITE®/ELITE PRO/8/9/10000,
ACL Advance y ACL Clásicos (100-7000) utilizada como ayuda en el diagnóstico de deficiencias hereditarias y
adquiridas de Proteína S.
Principio
La Proteína S es un cofactor dependiente de la vitamina K que interviene en los procesos
anticoagulantes y profibrinolíticos de la Proteína C activada1. La Proteína S se presenta en el plasma en dos formas:
Proteína S Libre (40%) y Proteína S ligada al complemento C4-Binding Protein (C4BP, 60%). Sólo la Proteína S Libre
posee la actividad funcional como cofactor2.
Las deficiencias de Proteína S pueden ser de origen hereditario o adquiridas. Las deficiencias adquiridas se pueden
observar durante el embarazo, terapia anticoagulante oral, contraceptivos orales, enfermedades hepáticas, en
neonatos, así como en diversas condiciones clínicas3,4,5. Deficiencias de Proteína S se han asociado a un alto riesgo de
desarrollar tromboembolismo venoso, especialmente en gente joven6,7.
El kit HemosIL Protein S Activity determina la actividad funcional de la Proteína S libre, midiendo el grado de
prolongación del Tiempo de Protrombina en presencia de factor tisular recombinante humano, fosfolípidos, iones calcio
y Proteína C activada. La actividad de la Proteína S es proporcional a la prolongación del tiempo de coagulación del
plasma deficiente en Proteína S al cual se le ha añadido muestra de paciente diluida.
Composición
El kit HemosIL Protein S Activity consta de:
R Protein S reagent (Cat. No. 0020302010): 3 x 2 mL viales de una preparación liofilizada que contiene factor
tisular recombinante humano, fosfolípidos sintéticos, proteína C activada, polibrene, tampón, estabilizantes y
conservantes.
C Calcium reagent (Cat. No. 0020302020): 3 x 6 mL viales de una preparación líquida que contiene calcio.
Protein S deficient plasma - La estabilidad después de la reconstitución es: 6 horas a 15ºC en el vial original
colocados en los modelos de la Familia ACL TOP, 3 horas situado den el analizador ACL ELITE/ELITE PRO/8/910000
en el vial original, 6 horas a 15ºC situado en el analizador ACL Advance o 4 horas en máquina de los Sistemas ACL
Clásicos (100-7000) en el vial original.
Método de ensayo
Referirse al Manual del operador de los instrumentos de IL y/o al Manual de Aplicaciones para seguir las instrucciones
del procedimiento.
Recolección y preparación de las muestras
Recoger nueve partes de sangre recién extraída por punción venosa sobre una parte de anticoagulante citrato trisódico.
Para la recolección, manipulación y conservación de la muestra seguir las recomendaciones del Documento H21-A5
de la CLSI9.
Reactivos adicionales y plasmas de control
Los siguientes productos no se suministran con el kit y deberán pedirse por separado.
Américas y Área del Pacífico Cat. No.
Europa Cat. No.
Plasma Calibrador
0020003700
0020003700
Control Normal
0020003120
0020003110
Control Anormal Bajo
0020003220
0020003210
Control Anormal Alto
0020003320
0020003310
Diluyente de Factores
0009757600
0009757600
Agente de Limpieza
0009832700
0009832700
Control de Calidad
D Protein S deficient plasma (Cat. No. 0020302030): 3 x 2 mL viales de plasma humano liofilizado del que se le ha
eliminado artificialmente la Proteína S.
MEDIDAS DE PRECAUCIÓN Y ADVERTENCIAS:
El reactivo Protein S contiene material de origen animal, por lo tanto deberá ser tratado como si fuese potencialmente
infeccioso.
El reactivo Protein S y el plasma deficiente en Proteína S contienen material de origen humano que ha sido probado
como no reactivo para anticuerpos contra el VIH, antígenos de superficie de la hepatitis B y anti-VHC durante
la donación. Estos productos, al igual que todas las muestras de origen humano, debería ser manejado con el
procedimiento adecuado de seguridad del laboratorio para minimizar el riesgo de transmisión de enfermedades
infecciosas.
El reactivo Protein S t, Reactivo de calcio y el plasma deficiente en Proteína S no están clasificado como peligrosos.
• Indicaciones de peligro: Ninguna
• Frases de Riesgo: Ninguna
• Frases de Seguridad: Ninguna
Este producto es para usar en Diagnóstico in vitro.
Preparación
Protein S reagent: Disolver el contenido de cada vial con 2 mL de agua destilada tipo CLR según CLSI o equivalente8.
Cerrar el vial y homogeneizar suavemente. Asegurarse de la completa disolución del producto. Mantener el reactivo
entre 15-25 ° C durante 30 minutos y mezclar por inversión del vial antes de su uso. No agitar.
NOTA PARA LOS USUARIOS DE ACL CLÁSICOS (100 -7000): Disuelva el contenido de cada vial de reactivo
de Proteína S con medio vial de reactivo Calcio (3 mL). Colocar el tapón en el vial y homogeneizar suavemente.
Compruebe la completa reconstitución del producto. Mantenga el reactivo entre 15-25ºC durante 30 minutos y mezcle
por inversión. Pipetee todo el contenido del reactivo de Proteína S reconstituido dentro del vial del reactivo de Calcio y
mezcle por inversión. Sitúe el reactivo en un macro-reservorio tapado con su cubierta, y sitúe este macro-reservorio en
la posición 1 del analizador.
Calcium reagent: mezclar por inversión del vial antes de usar.
Protein S deficient plasma: Disolver el contenido de cada vial con 2 mL de agua destilada tipo CLR según CLSI o
equivalente8. Cerrar el vial y homogeneizar suavemente. Asegurarse de la completa disolución del producto. Mantener
el plasma entre 15-25 ° C durante 30 minutos y mezclar por inversión del vial antes de su uso. No agitar.
Conservación y estabilidad de los reactivos
Los viales que no hayan sido abiertos son estables hasta la fecha de caducidad indicada en el mismo vial si se
mantienen a 2-8°C.
Protein S reagent - La estabilidad después de la reconstitución es: 24 horas a 2-8°C en el vial original tapado, ó
8 horas a 15ºC en el vial original colocados en los modelos de la Familia ACL TOP, 8 horas a 15ºC situado en el
analizador ACL ELITE/ELITE PRO/8/9/10000 en el vial original, 8 horas a 15°C situado en el analizador ACL Advance o
24 horas en máquina de los Sistemas ACL Clásicos (100-7000) en el vial original.
Calcium reagent - La estabilidad una vez abierto es de 24 horas a 2-8ºC ó 8 horas en el vial original colocados en los
modelos de la Familia ACL TOP, 8 horas a 15-25ºC situado en el analizador ACL ELITE/ELITE PRO/8/9/10000 en el vial
original o 8 horas a 15ºC situado en el analizador ACL Advance en el vial original.
Para realizar un programa completo de Control de Calidad, se recomienda el uso de controles normal y patológico.10
Los controles diseñados para este programa son el Control Normal, el Control Anormal Bajo y el Control Anormal
Alto. Cada laboratorio debería establecer su propia media y desviación estándar y también establecer un programa de
Control de Calidad para monitorizar sus resultados. Los controles deberían ser analizados por lo menos una vez en
cada turno de 8 horas, de acuerdo con la Normativa de Buenas Prácticas de Laboratorio. Consúltese la publicación de
Westgard y col. para la identificación y resolución de situaciones anormales del control de calidad.11
Trazabilidad de los calibradores y controles
Los valores indicados en la ficha técnica fueron obtenidos a través de múltiples determinaciones en los sistemas de
coagulación de la familia ACL TOP, en los sistemas ACL ELITE/ELITE PRO/8/9/10000, ACL Advance y ACL Clásicos
(100-7000) usando un lote específico de reactivo y un Estándar Interno de Plasma Calibrador. Dicho Estándar está
valorado respecto al actual Estándar Internacional de Proteína S el cual está indicado en la tabla de valores límites
aceptados.
Resultados
Los resultados de Proteína S se expresan en segundos y actividad (%). Referirse al Manual del Operador para
información adicional.
Limitaciones/interferencias
Los resultados del tets Proteína S pueden ser alterados por ciertos fármacos de administración común (ej. Warfarina)
y en ciertas condiciones (ej. embarazo12). Estudios adicionales deben llevarse a cabo para determinar la causa de
resultados anormales inesperados.
Los resultados de la Proteína S en la Familia ACL TOP, en los sistemas ACL ELITE/ELITE PRO/8/9/10000 y ACL
Advance no son alterados por concentraciones de heparina no fraccionada (UF) de hasta 1,6 UI/mL, de heparina de
Bajo Peso Molecular (LMW) de hasta 2,1 UI/mL, niveles de bilirrubina de hasta 15 mg/dL, niveles de hemoglobina
de hasta 250 mg/dL y niveles de triglicéridos de hasta 2360 mg/dL. Plasmas hemolizados o turbios no deberían ser
analizados.
Los resultados de Proteína S en los ACL Clásicos (100-7000) no se ven afectados por valores de heparina (NF) hasta
2.0 UI/mL, heparina (BPM) hasta 2.5 UI/mL, bilirrubina hasta 20 mg/dL, hemoglobina hasta 250 mg/dL, y triglicéridos
hasta 1655 mg/dL. Las muestras hemolizadas y que presenten turbidez no deberían ser procesadas.
Valores esperados
Se ha realizado un estudio del rango de normalidad utilizando el kit Proteína S Actividad en los sistemas de coagulación
de la familia ACL TOP (ACL TOP y ACL TOP 500 CTS), en los sistemas ACL ELITE/ELITE PRO/8/9/10000, ACL
Advance y ACL Clásicos (100-7000) .
Sistema
N
% PS Actividad
Familia ACL TOP 164
63,5 - 149,0%
112
60,0 – 135,8%
ACL Advance
112
63,8 – 148,1%
ACL Clásico(100-7000)
123
50 – 149%
Nota: la edad y estado hormonal pueden afectar el rango normal en mujeres.13
Los rangos fueron calculados siguiendo las recomendaciones del documento C28-A3 de la CLSI.14 Estos resultados
se obtuvieron utilizando un lote específico de reactivo. Debido a que muchas variables pueden afectar a los resultados,
cada laboratorio debería verificar su propio rango de normalidad.
Características técnicas
Los estudios de precision fueron realizados utilizando 3 lotes de reactivos en tres modelos de la familia ACL TOP
(ACL TOP, ACL TOP 500 CTS y ACL TOP 700), en los sistemas ACL ELITE/ELITE PRO/8/9/10000, ACL Advance y
ACL Clásico (100-7000). La precisión fue evaluada de acuerdo con CLSI EP05-A215, durante 20 días, con 2 sesiones
por día y 2 replicados por muestra en cada sesión (n=80/ instrumento/ lote). Los resultados obtenidos con un lote
representativo se muestran en la tabla siguiente:
Precisión:
El estudio de precisión intraserie y total (serie a serie y día a día) fue realizado en diferentes series.
Familia ACL TOP
Media (% PS)
CV% (Intraserie)
CV% (Total)
Control Normal
94,2
2,5
4,9
Control Anormal Bajo
33,6
3,8
7,1
Control Anormal Alto
19,3
1,19 (DS)
2,23 (DS)
Control Interno 1
44,5
2,9
6,2
Control Interno 2
67,2
1,7
4,7
Muestra de plasma
con valor alto
128
1,6
4,2
ACL ELITE/ELITE PRO/8/9/10000 Media (% PS)
CV% (Intraserie)
CV% (Total)
Normal Control
88,4
1,7
4,2
31,4
3,7
7,6
17,8
1,07 (SD)
2,23 (SD)
Internal Control 1
41,5
3,1
7,2
Internal Control 2
63,7
2,0
4,7
Muestra Plasma Alta
131
1,3
4,1
ACL Advance
Media (% PS)
CV% (Intraserie)
CV% (Total)
Normal Control
96,8
2,8
4,8
33,9
3,5
8,6
21,0
1,23 (SD)
2,77 (SD)
Internal Control 1
43,1
3,4
7,6
Internal Control 2
66,4
2,6
5,1
High Plasma Sample
140
3,5
4,4
ACL Clásico (100-7000)
Media (% PS)
CV% (Intraserie)
CV% (Total)
Normal Control
104
3.4
6.3
31
2.7
7.6
18
1.2 (SD)
1.5 (SD)
Internal Control 1
47
4.4
10.7
Internal Control 2
74
2.6
8.2
Correlación:
Sistema
pendiente
intersección
r
Método de Referencia
Familia ACL TOP
0,966
1,10
0,968
HemosIL ProS en Familia ACL TOP
ACL ELITE/
0.969
0,01
0,990
HemosIL Protein S Activity en un
ELITE PRO/8/9/10000
analizador de la Familia ACL TOP
ACL Advance
1,018
2,58
0,993
0.990
1.35
0.961
La precisión y los datos de correlación se han obtenido usando lotes específicos de reactivos y de controles.
Los siguientes datos se obtuvieron en diferentes estudios utilizando un lote específico de reactivos de Protein S Activity:
Sistema
pendiente
intersección
r
Método de Referencia
Familia ACL TOP
1,049
-2,7
0,956
HemosIL ProS
Familia ACL TOP
0,984
6,2
0,965
HemosIL ProS
Límite de detección:
Sistema
Familia ACL TOP
5%
6%
ACL Advance
10%
ACL Clásico(100-7000)
4%
Linealidad:
Sistema
Familia ACL TOP
10 – 150%
10 – 150%
ACL Advance
10 – 150%
10 – 100%
Symbols used / Verwendete Symbole / Símbolos utilizados / Symboles utilisés / Simboli impiegati / Símbolos utilizados
In vitro diagnostic medical device
In-vitro Diagnostikum
De uso diagnóstico in vitro
Dispositif mèdical de diagnostic in vitro
Per uso diagnostico in vitro
Dispositivo médico para utilização em diagnóstico in vitro
Batch code
Chargen-Bezeichnung
Identificación número de lote
Désignation du lot
Numero del lotto
Número de lote
Use by
Verwendbar bis
Caducidad
Utilisable jusqu’à
Da utilizzare prima del
Data límite de utilização
Instrumentation Laboratory Company - Bedford, MA 01730-2443 (USA)
Instrumentation Laboratory SpA - V.le Monza 338 - 20128 Milano (Italy)
Temperature limitation
Festgelegte Temperatur
Temperatura de Almacenamiento
Températures limites de conservation
Limiti di temperatura
Límite de temperatura
Consult instructions for use
Beilage beachten
Consultar la metódica
Lire le mode d’emploi
Vedere istruzioni per l’uso
Consultar as instruções de utilização
Control
Kontrollen
Control
Contrôle
Controllo
Controlo
Biological risks
Biologisches Risiko
Riesgo biológico
Risque biologique
Rischio biologico
Risco biológico
Manufacturer
Hergestellt von
Fabricado por
Fabricant
Prodotto da
Fabricado por
Authorised representative
Bevollmächtigter
Representante autorizado
Mandataire
Rappresentanza autorizzata
Representante autorizado
303770 R4 08/2012
HemosIL®
Utilisation
Dosage automatisé de la Protéine S fonctionnelle par méthode chronométrique. Ce dosage permet une détermination
quantitative de la Protéine S libre dans les plasmas humains citratés sur les analyseurs de la famille ACL TOP, ACL
ELITE®/ELITE PRO/8/9/10000, ACL Advance et ACL 100-7000. Il est une aide au diagnostic des déficits héréditaires
ou acquis en Protéine S.
Principe
La Protéine S, protéine vitamine K dépendante, est le cofacteur de la Protéine C activée qui possède un effet
anticoagulant et profibrinolytique.1 Deux formes sont présentes dans le plasma: la Protéine S libre (40 %), et la Protéine
S liée à la C4b-binding Protein (60 %). Seule la Protéine S libre est biologiquement active.2
Les déficits en Protéine S peuvent être héréditaires ou acquis. Les déficits acquis peuvent être observés pendant la
grossesse, les traitements anticoagulants oraux, l’utilisation de contraceptifs oraux, au cours les maladies hépatiques
chez l’enfant nouveau-né ainsi que dans d’autres conditions cliniques.3,4,5 Les déficits en Protéine S sont associés à un
risque élevé de développement d’épisodes thromboemboliques veineux, particulièrement chez le sujet jeune.6,7
Le réactif HemosIL Protein S activity permet la détermination de l’activité fonctionnelle de la Protéine S libre
en mesurant le degré d’allongement d’un Temps de Quick (TQ) en présence de facteur tissulaire humain, de
phospholipides, de calcium et de Protéine C activée. L’activité en Protéine S est proportionnelle à l’allongement du
temps de coagulation d’un plasma déficient en Protéine S auquel le spécimen dilué a été ajouté.
Composition
Le coffret HemosIL Protein S Activity contient :
R Protein S reagent (Cat. No. 0020302010): 3 flacons de 2 ml d’une préparation lyophilisée contenant du facteur
tissulaire humain recombinant, des phospholipides synthétiques, de la protéine C activée, du polybrène, du
tampon, des stabilisants et des conservateurs.
C Calcium reagent (Cat. No. 0020302020): 3 flacons de 6 ml d’une solution liquide de calcium.
D Protein S deficient plasma (Cat. No. 0020302030): 3 flacons de 2 ml de plasma humain lyophilisé, artificiellement
déplété en Protéine S.
PRÉCAUTIONS D’EMPLOI ET MISES EN GARDE:
Le réactif Protéine S contient du matériel d’origine animale, et doit être considéré comme potentiellement infectieux.
Les réactifs Protéine S et plasma déficient en protéine S contiennent des produits d’origine humaine. Ils ont été trouvés
négatifs pour les anticorps anti VIH 1/2, anti VHC et l’antigène de surface de l’hépatite B (AgHBs), en utilisant des
trousses de dépistage de 3ème génération. Cependant, aucune technique ne permettant d’assurer l’absence totale du
virus HIV ou de l’hépatite B ou de tout autre agent infectieux, ces réactifs sont à manipuler avec les précautions d’usage
dans le laboratoire, afin d’éviter le risque de transmission de maladies infectieuses.
Les réactifs Protein S Reagent, Calcium et Protein S Deficient Plasma ne sont pas classés comme dangereux.
• Classification risque: Aucune
• Phrases risque Aucune
• Phrases sécurité: Aucune
Ces produits sont à usage diagnostic in vitro
Préparation
Protein S reagent: Dissoudre le contenu de chaque flacon avec 2 ml d’eau déminéralisée de type CLRW selon les
normes CLSI ou équivalent.8 Replacer le capuchon et agiter doucement. Assurez-vous de la complète reconstitution du
produit. Conserver le réactif à 15-25°C pendant au moins 30 minutes et mélanger par inversion avant utilisation. Ne pas
agiter violemment.
NOTE UTILISATEURS ACL 100-7000: Dissoudre le contenu de chaque flacon de réactif Protéine S avec la moitié du
volume (3 ml) du réactif Calcium. Replacer le capuchon et agiter doucement. Assurez-vous de la complète reconstitution
du produit. Conserver le réactif à 15-25°C pendant au moins 30 minutes et mélanger par inversion. Pipeter la totalité du
réactif Protéine S reconstitué et le déposer dans le réactif Calcium restant, mélanger par inversion. Mettre le réactif ainsi
reconstitué dans une macro nacelle, puis disposer un couvercle. Placer la macro nacelle en position 1 de l’analyseur.
Calcium reagent: Mélanger par inversion avant utilisation.
Protein S deficient plasma: Dissoudre le contenu de chaque flacon avec 2 ml d’eau déminéralisée de type CLRW
selon les normes CLSI ou équivalent.8 Replacer le capuchon et agiter doucement. Assurez-vous de la complète
reconstitution du produit. Conserver le réactif à 15-25°C pendant au moins 30 minutes et mélanger par inversion avant
utilisation. Ne pas agiter violemment.
Conservation et stabilité des réactifs
Conservés à 2-8°C, les réactifs sont stables jusqu’à la date de péremption indiquée sur le flacon.
Protein S reagent - La stabilité du réactif reconstitué est de 24 heures à 2-8°C dans le flacon d’origine bouché ou
8 heures à 15°C à bord des analyseurs de la famille ACL TOP dans le flacon d’origine, 8 heures à 15°C à bord des
analyseurs ACL ELITE/ELITE PRO/8/9/10000 dans le flacon d’origine, 8 heures à bord de l’analyseur ACL Advance
dans le flacon d’origine ou 24 heures à bord des analyseurs ACL 100-7000.
Calcium reagent - Stabilité après ouverture, 24 heures à 2-8°C ou 8 heures à 15°C à bord des analyseurs de la famille
ACL TOP dans le flacon d’origine, 8 heures à 15-25°C à bord des analyseurs ACL ELITE/ELITE PRO/8/9/10000 dans le
flacon d’origine ou 8 heures à bord de l’analyseur ACL Advance dans le flacon d’origine.
FRANÇAIS - Révision de la notice 08/2012
Protein S deficient plasma - La stabilité du réactif reconstitué est de 6 heures à 15°C à bord des analyseurs de la
famille ACL TOP dans le flacon d’origine, 3 heures à 15°C à bord des analyseurs ACL ELITE/ELITE PRO/8/9/10000
dans le flacon d’origine, 6 heures à bord de l’analyseur ACL Advance dans le flacon d’origine ou 4 heures à bord des
analyseurs ACL 100-7000.
Procédures de test/instrument
Se référer au mode d’emploi de l’instrument IL approprié et/ou au manuel d’application pour des informations complètes
sur les procédures de dosage.
Recueil des spécimens et préparation
9 parts de sang fraîchement prélevé sont collectées avec 1 part de citrate trisodique. Se référer au document CLSI
H21-A5 ou au document GEHT (STV, numéro spécial, 1-40, 1998, et ses modifications 2007 parues sur le site du
GEHT) pour plus d’informations sur le prélèvement des échantillons, leur manipulation et leur stockage.9
Réactifs auxiliaires et plasmas de contrôle
Non fournis avec la trousse, ils doivent faire l’objet d’une commande séparée.
Amérique et Pacifique Réf.
HemosIL Calibration Plasma
0020003700
HemosIL Normal Control
0020003120
HemosIL Low Abnormal Control
0020003220
HemosIL High Abnormal Control
0020003320
Diluant facteur
0009757600
Cleaning Agent
0009832700
Europe Réf.
0020003700
0020003110
0020003210
0020003310
0009757600
0009832700
Contrôle de qualité
Les contrôles normaux et anormaux sont recommandés pour un programme de contrôle de qualité complet.10 Les
plasmas de Contrôle normal, Contrôle anormal bas et Contrôle anormal haut sont spécifiques à ce programme. Chaque
laboratoire doit établir sa propre moyenne et déviation standard et son programme de contrôle de qualité afin de vérifier
l’état de fonctionnement de son système analytique. A titre d’exemple, les contrôles pourraient être analysés une fois
toutes les 8 heures en regard des bonnes pratiques de laboratoire. Se reporter à Westgard et al pour l’identification et la
résolution des contrôles hors limites.11
Traçabilité des valeurs des calibrateurs et contrôles
Les valeurs reportées dans les notices sont déterminées à partir d’essais multiples réalisés sur les analyseurs de la
famille ACL TOP, ACL ELITE/ELITE PRO/8/9/10000, ACL Advance et ACL 100-7000, en utilisant des lots spécifiques de
réactif IL, et ce, par rapport à un Standard interne. Ce dernier est raccordé au standard international Protéine S actuel,
et validé à l’aide de la table de valeurs limites usuelles correspondantes.
Résultats
Les résultats de Protéine S sont reportés en secondes, en activité (%). Se référer au mode d’emploi de l’instrument pour
des informations complémentaires.
Limites de la méthode et substances interférant avec celle-ci
Les résultats de Protéine S peuvent être affectés par la présence de molécules communément administrées (e.g.
Warfarin) et dans certaines conditions (e.g. grossesse12). Des études complémentaires pourraient être nécessaires afin
de déterminer les raisons de l’obtention de résultats anormaux inattendus.
Les résultats de Protéine S sur les analyseurs de la famille ACL TOP, ACL ELITE/ELITE PRO/8/9/10000 et ACL
Advance ne sont pas affectés par l’héparine Non Fractionnée (HNF) jusqu’à 1,6 U/ml ou les héparines de Bas Poids
Moléculaire (HBPM) jusqu’à 2,1 U/ml, par la bilirubine jusqu’à 15 mg/dl (150 mg/l), par l’hémoglobine jusqu’à 250
mg/dl et les triglycérides jusqu’à 2360 mg/dl (23,6 g/l). Les échantillons par trop hémolysés ou lipémiques doivent être
analysés en prenant certaines précautions.
Les résultats de Protéine S sur les analyseurs ACL 100-7000 ne sont pas affectés par l’héparine Non Fractionnée (HNF)
jusqu’à 2,0 U/ml ou les héparines de Bas Poids Moléculaire (HBPM) jusqu’à 2,5 U/ml, par la bilirubine jusqu’à 20 mg/dl
(200 mg/l), par l’hémoglobine jusqu’à 250 mg/dl et les triglycérides jusqu’à 1655 mg/dl (16,5 g/l). Les échantillons par
trop hémolysés ou lipémiques doivent être analysés en prenant certaines précautions.
Valeurs attendues
Les valeurs normales de cette étude ont été obtenues en utilisant la trousse Protein S activity sur des analyseurs
représentatifs de la famille ACL TOP (ACL TOP et ACL TOP 500 CTS), ACL ELITE/ELITE PRO/8/9/10000, ACL
Advance et ACL Classic (100 - 7000).
Analyseur
N
% d’activité en PS
Famille ACL TOP
164
63,5 – 149,0%
112
60,0 – 135,8%
ACL Advance
112
63,8 – 148,1%
ACL 100-7000
123
50 – 149%
Note: l’âge et le statut hormonal peuvent affecter les valeurs normales chez la femme.13
Les normales ont été calculées comme il est recommandé par le document CLSI C28-A.14 Ces résultats sont obtenus
en utilisant un lot spécifique de réactif. Du fait qu’un grand nombre de variables peuvent affecter les résultats, nous
recommandons à chaque laboratoire de vérifier ses propres valeurs normales.
Metodo
Test coagulativo funzionale totalmente automatizzato per la determinazione quantitativa della Proteina S libera nel
plasma umano sugli analizzatori della Famiglia ACL TOP®, ACL ELITE® PRO/9/10000, Advance e ACL Classici (1007000) come aiuto nella diagnosi dei deficit acquisiti o ereditari della Proteina S.
Consultare il Manuale dell’Operatore per le procedure di lavoro.
La Proteina S, una proteina vitamina K dipendente, è il cofattore necessario all’azione anticoagulante e profibrinolitica
della Proteina C attivata.1 La Proteina S è presente nel plasma in due diverse forme: Proteina S libera (40%) e Proteina
S legata al C4BP (Complement C4b - Binding Protein) (60%). Solo la Proteina S libera è funzionalmente attiva.2
La carenza di Proteina S può essere ereditaria o acquisita. Carenze acquisite possono essere riscontrate durante la
gravidanza, la terapia anticoagulante orale, l’uso di contraccettivi, nelle epatopatie, nei neonati o in altre condizioni
cliniche.3,4,5 La carenza di Proteina S è generalmente associata ad un alto rischio di eventi trombo embolici venosi,
specialmente in soggetti giovani.6,7
Il kit HemosIL Protein S Activity determina l’attività funzionale della Proteina S libera eseguendo un tempo di
protrombina (PT) modificato in presenza di fattore tissutale umano ricombinante, fosfolipidi, ioni calcio e Proteina C
attivata. L’attività della Proteina S è proporzionale all’allungamento del tempo di coagulazione del Plasma carente di
Proteina S a cui è stato addizionato il plasma diluito del campione in esame.
Composizione
Il kit HemosIL Protein S Activity è composto da:
R Protein S reagent (Cat. No. 0020302010): 3 flaconi da 2 mL di una preparazione liofilizzata contenente
fattore tissutale ricombinante umano, fosfolipidi sintetici, Proteina C attivata, polibrene, tampone, stabilizzanti e
conservanti.
C Calcium reagent (Cat. No. 0020302020): 3 flaconi da 6 mL di una soluzione contenente calcio.
D Protein S deficient plasma (Cat. No. 0020302030): 3 flaconi da 2 mL di plasma umano liofilizzato depletato
artificialmente di Proteina S.
ATTENZIONE:
Il reagente Proteina S contiene materiale di origine animale, trattare come potenzialmente infetto. Il reagente, il plasma
carente e il plasma di controllo contengono materiale di origine umana di cui è stata verificata all’origine, con metodi
raccomandati dalla FDA, l’assenza degli anticorpi anti-HIV, dell’antigene di superficie dell’epatite B (HBsAg) e degli
anticorpi anti-HCV. Trattare come potenzialmente infetto.
Il reagente, il reagente calcio e il plasma carente sono classificati come non pericolosi.
• Simbolo di pericolo: nessuno
• Frasi di rischio: nessuno
• Consigli di prudenza: nessuno
Per uso diagnostico in vitro.
Preparazione
Protein S reagent: Sciogliere il contenuto di ciascun flacone con 2 mL di acqua di Tipo CLRW o equivalente.8 Tappare
e miscelare delicatamente fino alla completa ricostituzione del materiale. Mantenere il reagente a 15-25°C per 30 minuti
e miscelarlo nuovamente prima dell’uso. Non agitare.
ATTENZIONE, NOTA per gli utilizzatori ACL CLASSICI (100 - 7000): Sciogliere il contenuto di ciascun flacone di
reagente Proteina S con mezzo flacone (3 mL) di reagente Calcio. Tappare e miscelare delicatamente. Assicurarsi della
completa ricostituzione del prodotto. Mantenere il reagente a 15-25°C per 30 minuti e miscelare per inversione. Pipettare
l’intero contenuto del reagente Proteina S ricostituito e rimettere nel flaconcino del restante reagente Calcio, miscelare.
Mettere il reagente in una vaschetta Macro dedicata, con coperchio, e posizionarla sull’analizzatore in posizione
reagente 1.
Calcium reagent: Capovolgere delicatamente prima dell’uso.
Protein S deficient plasma: Sciogliere il contenuto di ciascun flacone con 2 mL di acqua di Tipo CLRW o equivalente.8
Tappare e miscelare delicatamente fino alla completa ricostituzione del materiale. Mantenere il reagente a 15-25°C per
30 minuti e miscelarlo nuovamente prima dell’uso. Non agitare.
Conservazione e stabilità dei reagenti
I reagenti sigillati sono stabili a 2-8°C fino alla data di scadenza stampata sull’etichetta.
Protein S reagent - Stabilità dopo ricostituzione: 24 ore a 2-8ºC o 8 ore a 15ºC a bordo dei Sistemi ACL TOP nel
flacone originale chiuso, 8 ore a 15ºC a bordo di ACL ELITE PRO/9/10000 nel flacone originale o 8 ore a 15ºC a bordo
di ACL Advance nel flacone originale o 24 ore a bordo di ACL Classici (100-7000).
Calcium reagent - Stabilità dopo ricostituzione: 24 ore a 2-8ºC o 8 ore a bordo dei Sistemi ACL TOP nel flacone
originale, 8 ore a 15-25ºC a bordo di ACL ELITE PRO/9/10000 nel flacone originale chiuso o 8 ore a 15ºC a bordo di
ACL Advance nel flacone originale.
Protein S deficient plasma - Stabilità dopo ricostituzione: 6 ore a 15ºC a bordo dei Sistemi ACL TOP nel flacone
originale, 3 ore a bordo di ACL ELITE PRO/9/10000 nel flacone originale o 6 ore a 15ºC a bordo di ACL Advance nel
flacone originale o 4 ore a bordo di ACL Classici (100-7000).
Preparazione dei campioni
Aggiungere a nove parti di sangue venoso fresco una parte di trisodio citrato. Per informazioni aggiuntive sulla
preparazione, il trattamento e la conservazione dei campioni fare riferimento al documento CLSI H21-A5.9
Reagenti ausiliari e plasmi di controllo
I seguenti reattivi non sono forniti insieme al kit e devono essere ordinati separatamente.
Codice
Plasma Calibrante
0020003700
Plasma di Controllo Normale
0020003110
Plasma di Controllo Anormale Basso
0020003210
Plasma di Controllo Anormale Alto
0020003310
Diluente Fattori
0009757600
Soluzione Detergente (Clean B)
0009832700
Controllo di qualità
Per un completo programma di controllo di qualità si raccomanda l’uso di plasmi normali e patologici.10 Il Controllo
Normale e i Plasmi di controllo Anormale Basso e Anormale Alto sono indicati per questo programma. Ogni laboratorio
dovrebbe stabilire i propri valori medi e le deviazioni standard per ogni controllo e stabilire le procedure di analisi. I
controlli dovrebbero essere analizzati almeno una volta ogni 8 ore in accordo con le esigenze del laboratorio. Per
l’identificazione e la risoluzione di eventuali situazioni particolari, fare riferimento all’articolo di Westgard et al.11
Calibratori e materiali di controllo
I valori indicati sono stati assegnati eseguendo repliche successive sui Sistemi ACL TOP, ACL ELITE PRO/9/10000,
ACL Advance e ACL Classici (100-7000) con l’impiego di un lotto specifico di reagente verso uno Standard Interno
(Aziendale) di Plasma calibrante che è riconducibile all’attuale Standard Internazionale di Proteina S, identificabile nella
tabella degli intervalli di accettabilità.
Risultati
I valori di Proteina S dei campioni possono essere riportati in secondi e attività (%). Riferirsi al Manuale dell’Operatore
per ulteriori informazioni.
Limitazioni/Sostanze interferenti
I risultati del kit Protein S possono essere influenzati da alcuni farmaci comunemente somministrati (es. Warfarin) e
da alcune condizioni (es. gravidanza12). Dovrebbero essere eseguiti ulteriori analisi per determinare l’origine di risultati
anomali inattesi.
I risultati del test su Sistemi ACL TOP, ACL ELITE PRO/9/10000 e ACL Advance non sono influenzati in presenza di
livelli di eparina (NF) fino a 1,6 U/mL, eparina (BPM) fino a 2,1 U/mL, bilirubina fino a 15 mg/dL, emoglobina fino a
250 mg/dL, trigliceridi fino a 2360 mg/dL. Nel caso di campioni emolizzati o torbidi si consiglia di ripetere il prelievo.
I risultati di Proteina S su ACL Classici (100-7000) non sono influenzati in presenza di livelli di eparina (NF) fino a
2,0 U/mL, eparina (BPM) fino a 2,5 U/mL, bilirubina fino a 20 mg/dL, emoglobina fino a 250 mg/dL, trigliceridi fino a
1655 mg/dL. Nel caso di campioni emolizzati o torbidi si consiglia di ripetere il prelievo.
Valori attesi
È stato eseguito uno studio per determinare il range di normalità utilizzando il kit Protein S Activity su sistemi analitici
della Famiglia ACL TOP (ACL TOP e ACL TOP 500 CTS), ACL ELITE PRO/9/10000, Advance e ACL Classici (100-7000).
Sistema
N
Attività PS %
Famiglia ACL TOP
164
63,5 – 149,0%
ACL ELITE PRO/9/10000 112
60,0 – 135,8%
ACL Advance
112
63,8 – 148,1%
ACL Classici (100-7000)
123
50 – 149%
Nota: L’età e lo stato ormonale possono modificare l’intervallo di normalità.13
Gli intervalli di riferimento sono stati calcolati seguendo le raccomandazioni del documento C28-A3 del CLSI.14 Tali
risultati sono stati ottenuti utilizzando un lotto specifico di reagente. Poichè numerose variabili possono influenzare i
risultati, ogni laboratorio dovrebbe verificare il proprio range di normalità.
Prestazioni
Le prestazioni sono state valutate utilizzando 3 differenti lotti di reagente su analizzatori della Famiglia ACL TOP (ACL
TOP, ACL TOP 500 CTS e ACL TOP 700), ACL ELITE PRO/9/10000, Advance e ACL Classici (100-7000). La precisione
è stata valutata in accordo con il documento CLSI EP05-A215, per 20 giorni, eseguendo 2 sessioni per giorno con
2 replicati per ogni livello del campione (n=80/strumento/lotto). I seguenti risultati sono stati ottenuti utilizzando uno
specifico lotto:
Utilização Prevista
Ensaio funcional de coagulação automatizado para a determinação quantitativa da Proteína S livre em plasma humano
citratado nos Sistemas da Família ACL TOP®, ACL ELITE®/ELITE PRO/8/9/10000, ACL Advance e ACL Classic (1007000) para auxiliar no diagnóstico de deficiência de Proteína S hereditária e adquirida.
Resumo e príncipio
A Proteína S é um cofator dependente da vitamina K para a anticoagulação e os efeitos pró-fibrinolíticos da proteína C
ativada.1 O plasma contém duas formas de Proteína S: Proteína S livre (40%) e Proteína S ligada à proteína de ligação
ao complemento C4b (C4BP, 60%). Apenas a Proteína S livre tem uma atividade funcional de cofator.2
A deficiência de Proteína S pode ser hereditária ou adquirida. A deficiência adquirida pode ser verificada durante
a gravidez, durante a terapêutica anticoagulante oral, durante a utilização de contracetivos orais, devido a doenças
hepáticas, em recém-nascidos, bem como noutras condições clínicas.3,4,5 A deficiência de Proteína S encontra-se
associada a um risco elevado de desenvolvimento de tromboembolismos venosos, especialmente em jovens.6,7
O ensaio HemosIL Protein S Activity determina a atividade funcional da Proteína S livre medindo o grau de
prolongamento do tempo de protrombina na presença do fator recombinante de tecido humano, fosfolípidos, iões de
cálcio e proteína C ativada. A atividade da Proteína S encontra-se relacionada com o prolongamento do tempo de
coagulação de plasmas com deficiência de Proteína S, aos quais foi adicionada uma amostra diluída.
Composição
O kit HemosIL Protein S Activity consiste em:
R Reagente de Proteína S (Cat. No. 0020302010): 3 frascos x 2 mL de solução liofilizada com fator recombinante
de tecido humano, fosfolípidos sintéticos, proteína C ativada, polibreno, tampão, estabilizadores e conservantes.
C Reagente de cálcio (Cat. No. 0020302020): 3 frascos x 6 mL de solução líquida com cálcio.
D Plasma com deficiência de Proteína S (Cat. No. 0020302030): 3 frascos x 2 mL de plasma humano liofilizado
artificialmente desprovido de Proteína S.
PRECAUÇÕES E AVISOS:
O Reagente de Proteína S contém material de origem animal, como tal, deve ser tratado como potencialmente
infecioso.
O Reagente de Proteína S e o Plasma com Deficiência de Proteína S contêm material de origem humana com
resultados de teste não reativos para anticorpos VIH, Antigénio de Superfície da Hepatite B e Anti-HCV na fase de
dador.
Estes produtos, como todos os que são baseados em material humano, devem ser manuseados com os procedimentos
de segurança de laboratório adequados para minimizar o risco de transmissão de doenças infeciosas.
O Reagente de Proteína S, o Reagente de Cálcio e o Plasma com Deficiência de Proteína S não são classificados
como perigosos.
• Classe de risco: nenhuma
• Frases de risco: nenhuma
• Frases de segurança: nenhuma
Este produto destina-se à Utilização em Diagnósticos in vitro.
Preparação
Reagente de Proteína S: Dissolva o conteúdo de cada frasco em 2 mL de água tipo CLRW de acordo com as normas
CLSI ou equivalente.8 Coloque a tampa e rode cuidadosamente. Assegure-se de que o produto foi completamente
reconstituído. Mantenha o reagente a 15-25°C durante 30 minutos e inverta para misturar antes de usar. Não agite.
NOTA para os utilizadores do ACL CLASSIC (100-7000): Dissolva o conteúdo de cada frasco de reagente de
Proteína S com meio frasco (3mL) de reagente de cálcio. Coloque a tampa e rode cuidadosamente. Assegure-se de
que o produto foi completamente reconstituído. Mantenha o reagente a 15-25ºC durante 30 minutos e inverta para
misturar. Pipete todo o conteúdo do reagente de Proteína S reconstituído para o frasco com o restante reagente
de cálcio e inverta para misturar. Coloque o reagente num macro reservatório dedicado com tampa e coloque o
reservatório na posição de reagente 1 do analisador.
Reagente de cálcio: Inverta para misturar antes de utilizar.
Plasma com deficiência de Proteína S: Dissolva o conteúdo de cada frasco com 2 mL de água Inverta ou
equivalente.8 Coloque a tampa e rode cuidadosamente. Assegure-se de que o produto foi completamente reconstituído.
Mantenha o plasma a 15-25°C durante 30 minutos e inverta para misturar antes de utilizar. Não agite.
Conservação e estabilidade do reagente
Os reagentes fechados são estáveis até ao fim do prazo de validade impresso no frasco, desde que sejam conservados
entre a 2-8°C.
Reagente de Proteína S - Estabilidade pós-reconstituição: 24 horas a 2-8ºC no frasco original fechado ou 8 horas a
15ºC na Família ACL TOP no frasco original, 8 horas a 15ºC no ACL ELITE/ELITE PRO/8/9/10000 no frasco original, 8
horas a 15ºC no ACL Advance no frasco original ou 24 horas nos Sistemas ACL Classic (100-7000).
Reagente de cálcio - Estabilidade pós-abertura: 24 horas a 2-8ºC ou 8 horas na Família ACL TOP no frasco original, 8
horas a 15-25ºC no ACL ELITE/ELITE PRO/8/9/10000 no frasco original ou 8 horas a 15ºC no ACL Advance no frasco
original.
Les performances ont été évaluées en utilisant 3 lots différents de réactifs sur 3 analyseurs représentatifs de la famille
ACL TOP (ACL TOP, ACL TOP 500 CTS et ACL TOP 700), ACL ELITE/ELITE PRO /8/9/10000, ACL Advance et ACL
100-7000. La fidélité a été évaluée en concordance avec les recommandations du guide CLSI EP05-A215, pendant
20 jours à raison de 2 séries par jour et d’une duplicate dans chaque série de chaque niveau d’échantillon (N=80 /
instrument / lot). Les données présentées ci-dessous sont issues de celles obtenues pour un lot représentatif :
Fidélité:
La répétabilité (CV% intra séries) et la reproductibilité (CV% total) ont été évaluées au cours d’essais multiples.
Famille ACL TOP
Moyenne (% PS)
CV% (Intra séries)
CV% (Total)
Contrôle Normal
94,2
2,5
4,9
Contrôle anormal bas
33,6
3,8
7,1
Contrôle anormal haut
19,3
1,19 (ET)
2,23 (ET)
Contrôle Interne niveau 1
44,5
2,9
6,2
67,2
1,7
4,7
Echantillon Plasma élevé
128
1,6
4,2
Moyenne (% PS)
CV% (Intra séries)
CV% (Total)
Contrôle Normal
88,4
1,7
4,2
31,4
3,7
7,6
17,8
1,07 (ET)
2,23 (ET)
41,5
3,1
7,2
63,7
2,0
4,7
131
1,3
4,1
ACL Advance
Moyenne (% PS)
CV% (Intra séries)
CV% (Total)
Contrôle Normal
96,8
2,8
4,8
33,9
3,5
8,6
21,0
1,23 (ET)
2,77 (ET)
43,1
3,4
7,6
66,4
2,6
5,1
140
3,5
4,4
ACL 100-7000
Moyenne (% PS)
CV% (Intra séries)
CV% (Total)
Contrôle Normal
104
3,4
6,3
31
2,7
7,6
18
1,2 (ET)
1,5 (ET)
47
4,4
10,7
74
2,6
8,2
Corrélation:
Analyseur
pente
ordonnée à l’origine
r
Méthode de référence
Famille ACL TOP
0,966 1,10
0,968
HemosIL ProS sur
famille ACL TOP
ACL ELITE/
0,969
0,01
0,990
HemosIL Protein S Activity
ELITE PRO/8/9/10000
sur famille ACL TOP
ACL Advance
1,018
2,58
0,993
sur famille ACL TOP
ACL 100-7000
0,990
1,35
0,961
sur famille ACL TOP
La fidélité et la corrélation des résultats ont été obtenues en utilisant des lots spécifiques de réactifs et de contrôles.
Lors d’études sur sites, les résultats suivants ont été obtenus en utilisant un lot spécifique de réactif HemosIL Protein
S activity.
Analyseur
pente
ordonnée à l’origine
r
Méthode de référence
Famille ACL TOP
1,049 -2,7
0,985
HemosIL ProS
Famille ACL TOP
0,984
6,2
0,965
HemosIL ProS
Limite de détection:
Analyseur
Famille ACL TOP
5%
6%
ACL Advance
10%
ACL 100-7000
4%
Linéarité :
Analyseur
Famille ACL TOP
10 – 150%
10 – 150%
ACL Advance
10 – 150%
ACL 100-7000
10 – 100%
ITALIANO - Revisione dell’inserto 08/2012
Utilizzo
Principio del metodo
Caractéristiques et performances
Precisione:
La precisione nella serie e totale (tra ciclo e ciclo e tra giorno e giorno) è stata verificata eseguendo numerosi test.
Famiglia ACL TOP
Media (% PS)
CV% (Nella serie)
CV% (Totale)
94,2
2,5
4,9
33,6
3,8
7,1
19,3
1,19 (SD)
2,23 (SD)
Controllo Interno 1
44,5
2,9
6,2
Controllo Interno 2
67,2
1,7
4,7
Campione di plasma Livello Alto
128
1,6
4,2
ACL ELITE PRO/9/10000 Media (% PS)
CV% (Nella serie)
CV% (Totale)
88,4
1,7
4,2
31,4
3,7
7,6
17,8
1,07 (SD)
2,23 (SD)
Controllo Interno 1
41,5
3,1
7,2
Controllo Interno 2
63,7
2,0
4,7
Plasma con titolo elevato
131
1,3
4,1
ACL Advance
Media (% PS)
CV% (Nella serie)
CV% (Totale)
96,8
2,8
4,8
33,9
3,5
8,6
21,0
1,23 (SD)
2,77 (SD)
Controllo Interno 1
43,1
3,4
7,6
Controllo Interno 2
66,4
2,6
5,1
Plasma con titolo elevato
140
3,5
4,4
Media (% PS)
CV% (Nella serie)
CV% (Totale)
104
3,4
6,3
31
2,7
7,6
18
1,2 (SD)
1,5 (SD)
Controllo Interno 1
47
4,4
10,7
Controllo Interno 2
74
2,6
8,2
Correlazione:
Sistema
pendenza
intercetta
r
Metodo di Riferimento
Famiglia ACL TOP
0,966 1,10
0,968
HemosIL ProS
su Famiglia ACL TOP
ACL ELITE PRO/9/10000
0,969
0,01
0,990
su Famiglia ACL TOP
ACL Advance
1,018
2,58
0,993
HemosIL Protein S Activity su Famiglia ACL TOP
0,990
1,35
0,961
HemosIL Protein S Activity su Famiglia ACL TOP
I risultati dei test di precisione e di correlazione sono stati ottenuti usando uno specifico lotto di reagenti e controlli.
Utilizzando in uno studio uno specifico lotto di Protein S Activity sono stati ottenuti i seguenti risultati:
Sistema
pendenza
intercetta
r
Metodo di Riferimento
Famiglia ACL TOP
1,049
-2,7
0,956
HemosIL ProS
Famiglia ACL TOP
0,984
6,2
0,965
HemosIL ProS
Limite di rilevabilità:
Sistema
Famiglia ACL TOP
5%
ACL ELITE PRO/9/10000 6%
ACL Advance
10%
4%
Linearità:
Sistema
Famiglia ACL TOP
10 – 150%
ACL ELITE PRO/9/10000 10 – 150%
ACL Advance
10 – 150%
10 – 100%
PORTUGUÊS - Revisão do folheto 08/2012
Plasma com deficiência de Proteína S - Estabilidade pós-reconstituição: 6 horas a 15ºC na Família ACL TOP no
frasco original, 3 horas no ACL ELITE/ELITE PRO/8/910000 no frasco original, 6 horas a 15ºC no ACL Advance no
frasco original ou 4 horas nos Sistemas ACL Classic (100 -7000).
Instrumento/Procedimentos de teste
Consulte o Manual do Operador e/ou Manual de Aplicação do instrumento IL apropriado para obter as instruções de
procedimentos de ensaio completas.
Recolha e preparação de amostras
Nove partes de sangue venoso acabado de extrair são recolhidas numa parte de citrato trissódico. Consulte o
Documento CLSI H21-A5 para obter mais instruções sobre a recolha, manuseamento e conservação de amostras.9
Reagentes adicionais e plasmas de controlo
Os seguintes produtos não são fornecidos com o kit e devem ser adquiridos separadamente:
Continente Americano e Orla do Pacífico Cat. Nº
Europa Cat. Nº
Plasma de calibração
0020003700
0020003700
Controlo Normal
0020003120
0020003110
Controlo Anormal Baixo
0020003220
0020003210
Controlo Anormal Elevado
0020003320
0020003310
Diluente de fator
0009757600
0009757600
Agente de limpeza
0009832700
0009832700
Controlo de qualidade
Recomenda-se a utilização de controlos normais e anormais para um programa de controlo de qualidade completo.10
O Controlo Normal, o Controlo Anormal Baixo e o Controlo Anormal Elevado (Normal Control, Low Abnormal Control e
High Abnormal Control) foram concebidos para este programa. Cada laboratório deve estabelecer a sua própria média
e desvio padrão, devendo também implementar um programa de controlo de qualidade para monitorizar os testes
laboratoriais. Os controlos devem ser analisados, pelo menos, uma vez em cada turno de 8 horas, em conformidade
com as boas práticas de laboratório. Consulte Westgard et al para a identificação e resolução de situações fora de
controlo.11
Rastreabilidade dos calibradores e materiais de controlo
Os valores notificados foram determinados ao longo de múltiplas análises nos Sistemas da Família ACL TOP, ACL
ELITE/ELITE PRO/8/9/10000, ACL Advance e ACL Classic (100-7000) utilizando um lote específico de reagente e
contra um Standard do Fabricante para o Plasma de Calibração, o qual é rastreável ao Standard Internacional de
Proteína S atual, identificado na tabela de intervalos de aceitação.
Resultados
Os resultados da Proteína S podem ser apresentados em segundos e em atividade (%). Consulte o manual do
Operador do instrumento para obter mais informações.
Limitações/substâncias interferentes
Os resultados da Proteína S são afetados por alguns medicamentos de administração comum (por exemplo, o Warfarin)
e por alguns estados clínicos (por exemplo, durante a gravidez12). Devem ser efetuados estudos adicionais para
determinar a origem de resultados anormais inesperados.
Os resultados da Proteína S nos Sistemas da Família ACL TOP, ACL ELITE/ELITE PRO/8/9/10000 e ACL Advance não
são afetados pela heparina (UF) até 1,6 IU/mL, heparina (LMW) até 2,1 IU/mL, bilirrubina até 15 mg/dL, hemoglobina
até 250 mg/dL e triglicéridos até 2 360 mg/dL. As amostras hemolisadas e as amostras turvas não devem ser
analisadas.
Os resultados da Proteína S no ACL Classic (100-7000) não são afetadas pela heparina (UF) até 2,0 IU/mL, heparina
(LMW) até 2,5 IU/mL, bilirrubina até 20 mg/dL, hemoglobina até 250 mg/dL e triglicéridos até 1655 mg/dL. As amostras
hemolisadas e as amostras turvas não devem ser analisadas.
Valores esperados
Foi efetuado um estudo de intervalo normal utilizando o kit Protein S Activity em membros representantes dos Sistemas
da Família ACL TOP (ACL TOP e ACL TOP 500 CTS), ACL ELITE/ELITE PRO/8/9/10000, ACL Advance e ACL Classic
(100-7000).
Sistema
N
% Atividade da PS
Família ACL TOP
164
63,5 – 149,0%
112
60.0 – 135.8%
ACL Advance
112
63.8 – 148.1%
123
50 – 149%
Nota: A idade e o estado hormonal podem afetar o intervalo normal das mulheres.13
Os intervalos foram calculados em conformidade com as recomendações do documento CLSI C28-A3.14 Estes
resultados foram obtidos utilizando um lote específico de reagente. Devido a muitas variáveis que podem afetar os
resultados, cada laboratório deve verificar o seu próprio intervalo normal.
Características de desempenho
As características de desempenho foram avaliadas utilizando 3 lotes de reagente em 3 membros representativos dos
Sistemas da Família ACL TOP (ACL TOP, ACL TOP 500 CTS e ACL TOP 700), ACL ELITE/ELITE PRO /8/9/10000, ACL
Advance e ACL Classic (100-7000). A precisão foi avaliada em conformidade com a norma CLSI EP05-A215, durante 20
dias, sendo realizadas 2 análises por dia e 2 repetições por análise, para cada nível de amostra (n=80/instrumento/lote).
Os dados de teste de um lote representativo são apresentados em baixo:
Precisão:
Família ACL TOP
Média (% PS)
CV% (Durante a análise)
CV% (Total)
Controlo Normal
94,2
2,5
4,9
33,6
3,8
7,1
19,3
1,19 (DP)
2,23 (DP)
Controlo Interno 1
44,5
2,9
6,2
Controlo Interno 2
67,2
1,7
4,7
Amostra de Plasma Elevada
128
1,6
4,2
Média (% PS)
CV% (Total)
Controlo Normal
88,4
1,7
4,2
31,4
3,7
7,6
17,8
1,07 (DP)
2,23 (DP)
Controlo Interno 1
41,5
3,1
7,2
Controlo Interno 2
63,7
2,0
4,7
131
1,3
4,1
ACL Advance
Média (% PS)
CV% (Total)
Controlo Normal
96,8
2,8
4,8
33,9
3,5
8,6
21,0
1,23 (DP)
2,77 (DP)
Controlo Interno 1
43,1
3,4
7,6
Controlo Interno 2
66,4
2,6
5,1
140
3,5
4,4
Média (% PS)
CV% (Total)
Controlo Normal
104
3,4
6,3
31
2,7
7,6
18
1,2 (DP)
1,5 (DP)
Controlo Interno 1
47
4,4
10,7
Controlo Interno 2
74
2,6
8,2
Correlação:
Sistema
Declive
Interceção
r
Método de referência
Família ACL TOP
0,966 1,10
0,968
HemosIL ProS na Família ACL TOP
ACL ELITE/
0,969
0,01
0,990
ELITE PRO/8/9/10000 na Família ACL TOP
ACL Advance
1,018
2,58
0,993
na Família ACL TOP
0,990
1,35
0,961
na Família ACL TOP
Os resultados de precisão e correlação foram obtidos utilizando lotes específicos de reagentes e controlos.
Os dados que se seguem foram obtidos em estudos de campo, utilizando um lote específico de reagentes Protein S
Activity:
Sistema
Declive
Interceção
r
Método de referência
Família ACL TOP
1,049
-2,7
0,956
HemosIL ProS
Família ACL TOP
0,984
6,2
0,965
HemosIL ProS
Limite de deteção:
Sistema
Família ACL TOP
5%
6%
ACL Advance
10%
4%
Linearidade:
Sistema
Família ACL TOP
10 – 150%
10 – 150%
ACL Advance
10 – 150%
10 – 100%
Bibliography / Literatur / Bibliografía / Bibliographie / Bibliografia /Bibliografia
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Issued August 2012
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August 2012
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