Rapport de synthèse AES 10-03 09-00 (fr) - NF VALIDATION

Transcription

Laboratoire de Touraine
bioMérieux
Rapport de synthèse
(études préliminaire, d’extension et interlaboratoire
conduites selon la norme EN ISO 16140)
Validation de la méthode
« ALOA® ONE DAY »
pour la recherche de Listeria monocytogenes et de
Listeria spp dans les produits d’alimentation humaine et
les échantillons d’environnement
Réalisation de l’étude par :
Laboratoire de Touraine
Unité vétérinaire et Agroalimentaire
BP 67357
37073 Tours cedex 2
Pour :
bioMérieux SA
Chemin de l’Orme
69280 MARCY L’ETOILE
N° attestation AFNOR : AES 10/3 – 09/00
RSynthese_AES 10/3 – 09/00_v6_15/05/2015
Tables des matières
1. Introduction ...................................................................................................................................... 3
1.1 Référentiels de validation ......................................................................................................... 3
1.2 Protocole et principe de la méthode alternative..................................................................... 3
1.3 Domaine d’application ............................................................................................................. 4
1.4 Méthode de référence ............................................................................................................... 4
1.5 Historique de la validation ....................................................................................................... 4
2. Étude préliminaire ............................................................................................................................ 6
2.1 Exactitude relative, spécificité relative et sensibilité relative ............................................... 6
2.1.1. Protocole pour la recherche de Listeria monocytogenes ..................................................... 6
2.1.2. Protocole pour la recherche de Listeria spp ........................................................................ 9
2.1.3. Conservation au froid et tests de confirmation.................................................................. 13
2.2 Niveau de détection relatif ..................................................................................................... 15
2.3 Inclusivité / Exclusivité ........................................................................................................... 16
2.3.1. Étude (2000) menée lors de la validation initiale de la méthode « ALOA® / L.
Monodisk » pour la recherche de Listeria monocytogenes ......................................................... 16
2.3.3. Étude (2006) menée lors de l’extension de la méthode « ALOA® One Day » pour la
recherche de Listeria monocytogenes, en intégrant le protocole de confirmation « ALOA®
Confirmation » (ISHA) ............................................................................................................... 17
2.3.4. Étude (2010) menée lors de l’extension du protocole « ALOA® One Day » pour la
recherche de Listeria monocytogenes et de Listeria spp ............................................................. 18
3. Étude d’extension concernant le test « Fast Rhamnose » (confirmation) ...................................... 19
3.1 Principe et mode opératoire ................................................................................................... 19
3.2 Protocole de l’étude ................................................................................................................ 19
3.3 Résultats des essais « Fast Rhamnose » ................................................................................ 20
3.4 Conclusion de l’étude d’extension ......................................................................................... 22
4. Etude interlaboratoire ..................................................................................................................... 22
5. Praticabilité .................................................................................................................................... 24
6. Conclusion générale ....................................................................................................................... 28
ANNEXES ......................................................................................................................................... 30
Liste des Annexes
- Annexe 1 : Protocole analytique de la méthode « ALOA® One Day »
- Annexe 2 : Mode opératoire de la méthode EN ISO 11290-1/A1
- Annexe 3 : Inclusivité/ Exclusivité : Tableaux de résultats (étude 2000)
- Annexe 4 : Inclusivité/ Exclusivité : Tableaux de résultats (étude d’extension : 2005)
- Annexe 5 : Inclusivité/ Exclusivité : Tableaux de résultats (ISHA : 2006)
- Annexe 6 : Inclusivité/ Exclusivité : Tableaux de résultats (étude d’extension : 2010)
- Annexe 7 : Résultats des essais Fast Rhamnose : Souches cibles (étude d’extension : 2013)
- Annexe 8 : Résultats des essais Fast Rhamnose : Souches non cibles (étude d’extension : 2013)
2
1. Introduction
1.1 Référentiels de validation
•
•
Norme EN ISO 16140 (2003)
« Microbiologie des aliments - Protocole pour la validation des méthodes alternatives »
Document AFNOR Certification :
« Exigences relatives aux études (préliminaire et interlaboratoire) menées par un
laboratoire expert ».
1.2 Protocole et principe de la méthode alternative
Principe de la méthode :
Le milieu gélosé ALOA® est un milieu chromogène qui permet de détecter l’ensemble des Listeria
par la mise en évidence de l’activité béta-glucosidase (colonies rondes, à bord régulier, de couleur
bleu-turquoise) et de distinguer Listeria monocytogenes ou Listeria ivanovii par la formation d’un
halo franc de précipitation des phospholipides clivés par sa phospholipase spécifique.
Protocole de la méthode alternative :
La gélose ALOA® est utilisée pour la recherche de Listeria monocytogenes (protocole « ALOA®
One Day ») et de Listeria spp dans les échantillons d’alimentation humaine et les prélèvements
d’environnement.
Le principe de la méthode repose sur une phase préliminaire d’enrichissement de la prise d’essai
diluée au 1/10ème en bouillon Fraser demi (incubation 24h +-2h, 30°C +/- 1°C) suivie d’un
étalement ou d’un isolement sur gélose ALOA®. Il est laissé la possibilité à l’utilisateur de
conserver le bouillon Fraser ½ jusqu’à 72 heures à 5°C +/- 3°C avant de réaliser les
ensemencements.
Après une incubation des géloses de 24h à 48h, à 37°C +/- 1°C, les Listeria monocytogenes forment
des colonies bleues à bleu-vert entourées d’un halo opaque (24h). Les Listeria autres que
monocytogenes ou ivanovii forment, quant à elles, des colonies bleues à bleu vert, rondes,
régulières, sans halo opaque.
Conformément aux prescriptions d’AFNOR Certification et du fabricant, les colonies typiques
doivent faire l’objet de tests de confirmation :
Pour le cas des colonies typiques de Listeria monocytogenes (colonies bleues à bleues vertes,
entourées d’un halo opaque) :
1- confirmation d’une colonie positive selon les tests classiques des méthodes normalisées, en
incluant l’étape de purification,
2- confirmation selon le protocole « ALOA® Confirmation »,
3- confirmation selon le protocole VIDAS LMO2,
4- confirmation avec le réactif Accuprobe L. monocytogenes,
5- confirmation en réalisant une galerie API Listeria,
6- confirmation en réalisant une galerie RAPIDEC L. mono,
7- test « FAST Rhamnose »,
3
8- confirmation par toute autre méthode certifiée AFNOR Validation dont le principe est différent
de la méthode « ALOA® One Day » (les deux méthodes validées devant avoir un tronc commun).
Pour le cas des colonies typiques de Listeria spp (colonies bleues à bleues vertes, entourées ou
non d’un halo opaque) :
1- confirmation d’une colonie positive selon les tests classiques des méthodes normalisées, en
incluant l’étape de purification,
2- confirmation par piqûre sur gélose Palcam à partir d’une colonie isolée,
3- confirmation rapide par test immunochromatographique « Listeria species Confirmation Strip »,
4- confirmation par toute autre méthode certifiée AFNOR Validation dont le principe est différent
de la méthode « ALOA® One Day » (les deux méthodes validées devant avoir un tronc commun).
Protocole d’utilisation de la méthode alternative sous forme de schéma :
Le synoptique du protocole d’utilisation de la méthode alternative est présenté en annexe 1.
1.3 Domaine d’application
Tous produits d’alimentation humaine et échantillons de l’environnement
1.4 Méthode de référence
• EN ISO 11290-1 / A1 (2004) :
« Méthode horizontale pour la recherche et le dénombrement de Listeria monocytogenes, partie 1 :
méthode de recherche – Amendement 1 »
La méthode de référence à laquelle sera comparée la méthode alternative est la norme EN ISO
11290-1 / A1 (2004). Le mode opératoire de la méthode ISO est présenté en annexe 2.
1.5 Historique de la validation
•
•
•
•
La technique ALOA®/L MONODISK a été validée par le bureau technique "Microbiologie" de
la marque AFNOR Validation en septembre 2000 et a été enregistrée sous le numéro 10/309/00.
Une demande d’extension de certification AFNOR Validation a été instruite en mai 2002 par le
bureau technique au terme de laquelle, la méthode « ALOA® One Day » a été validée (révision
7 des règles de validation AFNOR), en remplacement de la méthode ALOA®/L MONODISK.
Le projet de reconduction de la validation sous la marque AFNOR Validation de la méthode de
recherche de Listeria monocytogenes par la technique « ALOA® One Day » a été proposé à la
commission le 24 septembre 2004.
La reconduction et l’extension (intégration d’une cinquième matrice : prélèvements
d’environnement) de la méthode « ALOA® One Day » datent du 07 avril 2005 et ont été
réalisées selon les modalités de la norme EN ISO 16140 (2003), hormis l’étude collaborative.
L’amendement A1 de la norme de référence EN ISO 11290-1 a alors été pris en compte.
4
•
•
•
•
•
•
En 2006, extension de la méthode « ALOA® One Day » pour prendre en compte la nouvelle
étude interlaboratoire réalisée selon les modalités de la norme EN ISO 16140 (2003) et intégrer
la possibilité de confirmation par la technique « ALOA® Confirmation ».
En 2008, demande de reconduction sans modification de la méthode « ALOA® One Day » : le
bureau technique émet l’avis favorable lors de la réunion du 30 juin 2008.
Le 1er avril 2010, extension de la méthode « ALOA® One Day » pour la recherche de Listeria
monocytogenes et de Listeria spp dans les produits d’alimentation humaine et les échantillons
d’environnement. Cette extension intègre également la possibilité d’effectuer un isolement de
0,1 ml ou un étalement de 0,1 ml, au choix de l’opérateur, ainsi que deux nouveaux modes de
confirmation (par piqûre sur gélose Palcam et par utilisation du test immunochromatographique
« Listeria species Conf irmation Strip »).
Le 06 octobre 2011 : extensions de la méthode « ALOA® One Day » concernant :
- la possibilité de conserver le bouillon Fraser ½ après incubation pendant 72 heures
maximum à 5°C +/- 3°C, avant de réaliser les ensemencements sur gélose ALOA®
- l’intégration au protocole des principes de confirmation des Listeria monocytogenes :
• « RAPIDEC® Lmono » (réalisation d’essais)
• galerie API® Listeria (données antérieures de validation dans le cadre de la marque
NF VALIDATION)
• AccuProbe Listeria monocytogenes (données antérieures de validation dans le cadre
de la marque NF VALIDATION)
• VIDAS LMO2 (données antérieures de validation dans le cadre de la marque NF
VALIDATION)
Le 06 juillet 2012, la validation de la méthode « ALOA® One Day » a été reconduite par le
bureau technique AFNOR (reconduction sans modification).
Bureau Technique du 28 mars 2013 : extension à un nouveau mode de confirmation « FAST
Rhamnose », concernant les deux méthodes « ALOA® One Day » et « ALOA® COUNT ».
En synthèse :
Date de validation initiale : 27/09/2000
1ère extension le : 17/05/2002
Date de reconduction : 07/04/2005
2ème extension le : 15/09/2006
Fin de validité : 27/09/2016
5
2. Étude préliminaire
2.1 Exactitude relative, spécificité relative et sensibilité relative
2.1.1. Protocole pour la recherche de Listeria monocytogenes
Nombre et nature des échantillons
Des essais ont été effectués en 2000 sur 164 échantillons de produits dont 53 naturellement
contaminés et 111 non contaminés, appartenant aux grandes catégories d’aliments suivantes :
produits carnés, produits de la mer, produits végétaux, produits laitiers.
Des essais complémentaires ont été effectués en 2004 et 2005 sur :
92 échantillons appartenant aux catégories produits carnés, produits de la mer, produits végétaux,
produits laitiers, dont 23 échantillons naturellement contaminés, 52 artificiellement contaminés et
17 non contaminés,
61 échantillons d’environnement dont 4 naturellement contaminés, 26 artificiellement contaminés et
31 non contaminés.
Au total, les essais ont porté sur 317 échantillons de produits dont 80 naturellement contaminés, 78
artificiellement contaminés et 159 non contaminés, appartenant aux catégories suivantes :
- produits carnés,
- produits de la mer,
- produits végétaux,
- produits laitiers,
- échantillons d’environnement.
Lecture à 24h / 48h :
Catégories
Types
Brut
Congelé
Traité à chaud
Total
Brut
Total
Brut
Fumé
Total
Brut
Congelé
Fermenté
Total
Chiffonnettes
Ecouvillons
Eau
Total
Positif*
13 / 13
11 / 12
Viandes et
charcuteries
12 / 12
36 / 37
30 / 30
Fruits et légumes
30 / 30
15 / 15
Poissons et crustacés
15 / 15
30 / 30
13 / 13
15 / 15
Produits laitiers
4/4
32 / 32
11 / 11
8/8
Environnement
11 / 11
30 / 30
Total
158 / 159
* il s’agit des résultats positifs par l’une ou l’autre des méthodes
6
Négatif
12 / 12
9/8
11 / 11
32 / 31
35 / 35
35 / 35
8/8
23 / 23
31 / 31
7/7
7/7
16 / 16
30 / 30
10 / 10
12 / 12
9/9
31 / 31
159 / 158
Total
25 / 25
20 / 20
23 / 23
68 / 68
65 / 65
65 / 65
23 / 23
38 / 38
61 / 61
20 / 20
22 / 22
20 / 20
62 / 62
21 / 21
20 /20
20 /20
61 / 61
317 / 317
Pour chaque catégorie, les échantillons ont été analysés en simple par la méthode alternative et par
la méthode de référence.
Contamination artificielle des échantillons
Le protocole de contamination artificielle utilisé correspond à l’option 3 décrite dans l’annexe C du
référentiel EN ISO 16140.
Le pourcentage d’échantillons naturellement contaminés est de 50,6%.
Résultats des essais
Les couples de résultats des méthodes de référence et alternative pour l’ensemble des produits sont
présentés dans les tableaux suivants :
Tableau de résultats "lecture à 24 heures"
Méthode de référence
positive (R+)
Réponses
négative (R-)
Accord positif A+ / R+
Déviation positive A+ / RMéthode alternative positive
PA = 156 (1)
PD = 1 (1)
(A+)
Méthode alternative
Déviation négative A- / R+
Accord négatif A- / Rnégative
(2)
ND = 1
NA = 159 (3)
(A-)
(1) il s’agit de positifs confirmés
(2), (3) dont aucun échantillon présumé positif par la méthode alternative, négatif après
confirmation
Légende : A+ = positifs confirmés
A- = négatifs immédiats et négatifs après confirmation quand présomptifs positifs
Lecture à 24h : Calcul de l’exactitude relative (AC), de la sensibilité relative (SE) et de la
spécificité relative (SP)
L’ensemble des résultats permet de calculer l’exactitude relative (AC), la sensibilité relative (SE) et
la spécificité relative (SP) pour chacune des catégories, selon les formules de la norme EN ISO
16140.
Lecture des géloses ALOA® :
Catégorie PA NA ND PD
Carnée
Mer
Végétaux
Laitiers
Environne
ment
TOTAL
Somme
N
Exactitude relative
AC (%)
[100x(PA+NA])/N
N+
PA + ND
Spécificité relative
Sensibilité relative
NSP (%)
SE (%)
NA + PD
[100xNA]/N[100xPA]/N+
35
29
30
32
32
31
35
30
0
1
0
0
1
0
0
0
68
61
65
62
98,52%
98,36%
100%
100%
35
30
30
32
100%
96,66%
100%
100%
33
31
35
30
96,96%
100%
100%
100%
30
31
0
0
61
100%
30
100%
31
100%
156 159
1
1
317
99,36%
157
99,36%
160
99,37%
7
Pour la méthode alternative, les valeurs en pourcentage calculées pour les trois critères suivants,
selon la norme EN ISO 16140 sont :
24h d’incubation
99,36%
99,37%
99,36%
exactitude relative : AC
spécificité relative : SP
sensibilité relative : SE
Le pourcentage de sensibilité (à 24 heures) a également été calculé en tenant compte de l’ensemble
des positifs confirmés (ceci inclut le positif supplémentaire de la méthode alternative), comme suit :
24h d’incubation
Méthode alternative :
Méthode de référence :
(PA + PD) / (PA + PD + ND) (PA + ND) / (PA + PD + ND)
= 99,4 %
= 99,4 %
Le nombre d’essais discordants étant égal à 2, l’annexe F du référentiel EN ISO 16140 ne peut
s’appliquer.
L’analyse des résultats montre que les deux méthodes sont très proches l’une de l’autre
puisqu’elles ne se prennent respectivement à défaut qu’une seule fois chacune.
Tableau de résultats "lecture à 48 heures"
Réponses
positive (R+)
négative (R-)
Accord positif A+ / R+
Déviation positive A+ / RMéthode alternative positive
(1)
PA = 157
PD = 2 (1)
(A+)
Déviation négative A- / R+
Accord négatif A- / Rnégative
ND = 0 (2)
NA = 158 (3)
(A-)
(1) il s’agit de positifs confirmés
(2), (3) dont aucun échantillon présumé positif par la méthode alternative, négatif après
confirmation
Légende : A+ = positifs confirmés
Lecture à 48h : Calcul de l’exactitude relative (AC), de la sensibilité relative (SE) et de la
spécificité relative (SP)
16140.
8
Catégorie PA NA ND PD
Carnée
Mer
Végétaux
Laitiers
Environne
ment
TOTAL
Somme
N
Exactitude relative
AC (%)
[100x(PA+NA])/N
N+
PA + ND
NSP (%)
SE (%)
NA + PD
[100xNA]/N[100xPA]/N+
35
30
30
32
31
31
35
30
0
0
0
0
2
0
0
0
68
61
65
62
97,06%
100%
100%
100%
35
30
30
32
100%
100%
100%
100%
33
31
35
30
93,94%
100%
100%
100%
30
31
0
0
61
100%
30
100%
31
100%
157 158
0
2
317
99,36%
157
100%
160
98,75%
48h d’incubation
99,36%
98,75%
100%
Le pourcentage de sensibilité (à 48 heures) a également été calculé en tenant compte de l’ensemble
des positifs confirmés (ceci inclut les positifs supplémentaires de la méthode alternative), comme
suit :
48h d’incubation
= 100 %
= 98,74 %
Les performances de la méthode « ALOA® One Day » apparaissent équivalentes à celles de la
méthode de référence.
Les résultats obtenus par la méthode « ALOA® One Day » avec lecture à 24 heures et lecture
à 48 heures sont équivalents.
2.1.2. Protocole pour la recherche de Listeria spp
Nombre et nature des échantillons
Quatre catégories d’aliments ont été testées ainsi que la catégorie des prélèvements
d'environnement agro-alimentaires, avec pour chacune d’entre elles, 3 types d'échantillons
différents répartis de la façon suivante.
9
Catégories
Viandes et charcuteries
Fruits et légumes
Produits laitiers
Environnement
Types
Brut
Positif*
31
Négatif
19
Total
50
Congelé
15
9
24
Traité à chaud
12
12
24
Total
Brut
Congelé
58
10
11
40
15
7
98
25
18
Produits transformés
10
10
20
Total
Brut
31
12
32
12
63
24
Congelé
14
10
24
Fumé
16
16
32
Total
Brut
Congelé
42
10
10
38
12
12
80
22
22
Fermenté
11
10
21
Total
Chiffonnettes
Ecouvillons
31
19
7
34
17
11
65
36
18
Eau
9
10
19
Total
35
38
73
197
182
379
Total
* il s’agit des résultats positifs par l’une ou l’autre des méthodes
Pour chaque catégorie, les échantillons ont été analysés en simple par la méthode alternative et par
la méthode de référence.
Contamination artificielle des échantillons
La recherche de la contamination naturelle des échantillons testés a été privilégiée. Toutefois, il a
été nécessaire de recourir à la contamination artificielle, qui s’est opérée par utilisation de souches
isolées et stressées. Le mode opératoire utilisé est conforme à celui demandé dans le document
« Exigences relatives aux études (préliminaire et interlaboratoire) menées par un laboratoire
expert ».
74 résultats positifs ont été obtenus suite à une contamination artificielle sur un total de 197
résultats positifs (123 échantillons naturellement contaminés). Le pourcentage de contamination
artificielle est de 37,6%.
Il est également à noter que le pourcentage d’échantillons positifs par Listeria monocytogenes seule
est de 30% (seuil fixé entre 17% et 33% par le bureau technique).
10
Résultats des essais
Les lectures ont été effectuées à 24h.
Tableau de résultats des méthodes de référence et alternative
positive
(R+)
positive
(A+)
négative
(A-)
Accord positif (A+/R+)
PA = 191
négative
(R-)
Déviation positive (R/A+)
PD = 1
Total
192
Déviation négative (A/R+)
ND = 5*
Accord négatif (A-/R-)
NA = 182**
187
196
183
379
Total
Légende :
A+ = positifs confirmés
* dont 0 échantillon présumé positif par la méthode alternative, négatif après confirmation
** dont 3 échantillons douteux non confirmés, mais en concordance avec la méthode de référence
(également présumé positif et confirmé négatif).
Calcul de l’exactitude relative (AC), de la sensibilité relative (SE) et de la spécificité relative (SP)
16140.
Catégorie
Viandes/
charcuteries
Fruits/
Légumes
Poissons/
Crustacés
Produits
laitiers
Environneme
nt
TOTAL
PA NA ND PD
Somme
N
Exactitude relative
N+
NAC (%)
SE (%)
SP (%)
PA + ND
NA + PD
[100x(PA+NA)]/N
[100xPA]/N+
[100xNA]/N-
55
40
3
0
98
96,94
58
94,83
40
100,00
31
32
0
0
63
100,00
31
100,00
32
100,00
40
38
1
1
80
97,50
41
97,56
39
97,44
30
34
1
0
65
98,46
31
96,77
34
100,00
35
38
0
0
73
100,00
35
100,00
38
100,00
191 182
5
1
379
98,42
196
97,45
183
99,45
11
24h d’incubation
98,42 %
99,45 %
97,45 %
Le bureau technique dans le cadre la marque AFNOR Validation demande que la sensibilité des
deux méthodes soit recalculée en tenant compte de l’ensemble des positifs confirmés (ceci inclut les
positifs supplémentaires de la méthode alternative) :
24h d’incubation
= 97,46 %
= 99,49 %
Analyse des discordants
Selon l’annexe F de la norme EN ISO 16140, le nombre de discordants pour lequel un test
statistique doit être réalisé afin de comparer les deux méthodes est de 6.
Or, après 24h d’incubation, le nombre de discordants Y = ND + PD, soit 6.
Il s’agit de déterminer M en fonction du nombre total de discordants et en fonction de l’annexe F de
la norme EN ISO 16140. Cette valeur M sera comparée à la valeur m, plus petite valeur de PD et de
ND.
Si 6 ≤ Y ≤ 22 : m = PD = 1 (parce que PD < ND)
La valeur de M est, quant à elle, de 0 (tableau F.1 de la norme).
Les deux valeurs sont considérées comme équivalentes si m > M.
Nombre de résultats discordants
6
M
0
m
1
Conclusion
EQUIVALENCE
Les échantillons pour lesquels les résultats sont discordants sont les suivants :
pour la déviation négative : 71 (steak haché cru), 100 (tartare de saumon), 367 (saucisse crue), 419
(camembert), 473 (terrine de campagne)
pour la déviation positive : 409 (filets de saumon surgelés)
Cinq échantillons sont négatifs après 24h d’incubation, mais tous positifs après 48h d’incubation.
Pour la méthode de référence, la positivité s’est manifestée soit sur géloses incubées 48h après
Fraser ½, soit sur géloses ensemencées après Fraser.
Les souches de Listeria concernées sont Listeria welshimeri et Listeria grayi. Les contaminations
sont naturelles et doivent certainement être de très faible niveau.
Un échantillon est un positif supplémentaire. Le résultat a été obtenu dès 24h d’incubation par la
méthode alternative, alors que la méthode de référence rend un résultat négatif.
La souche concernée est Listeria monocytogenes. La contamination est naturelle.
12
Confirmation des échantillons positifs ou douteux
Résultats chiffrés des confirmations par « Listeria species Confirmation Strip » et par spots Palcam :
Total positifs confirmés
Géloses incubées 24h
192
Bandelettes positives
191*
Spots Palcam positifs
191*
Total négatifs
Géloses incubées 24h
187
Ech. présentant des résultats suspects
non confirmés : présence de colonies
typiques douteuses, non confirmées
Bandelettes positives (à partir des
échantillons présentant des résultats
suspects non confirmés)
Spots Palcam positifs (à partir des
échantillons présentant des résultats
suspects non confirmés)
3
0
0
* Cas particulier : il s’agit de l’échantillon n°399 (Ecouvillon/ Listeria monocytogenes) pour lequel
la colonie à 24h est trop petite pour effectuer à la fois les tests de confirmation Palcam et
immunochromatographique. Ces tests ont été réalisés à 48h et sont ressortis positifs.
Seule la galerie biochimique a pu être faite à 24h.
Tous les résultats obtenus sont conformes à ceux attendus.
Ensemencement par isolement
Cette analyse de l’étude comparative démontre que le mode d’ensemencement par isolement donne
des résultats équivalents à ceux obtenus par la méthode de référence.
Le mode d’ensemencement par étalement, quant à lui, a déjà été validé lors des études précédentes
(notamment en 2005).
2.1.3. Conservation au froid et tests de confirmation
 Conservation des géloses 48h à 2-8°C et test de confirmation « Listeria species
Confirmation Strip »
La norme EN ISO 7218 précise la possibilité de conserver les géloses au réfrigérateur pendant 48
heures.
13
La gélose ALOA® est formulée selon les indications de la norme EN ISO 11290-1, et est même
explicitement citée.
La durée de conservation 48h au froid positif doit donc s’appliquer et aucun essai complémentaire
n’aurait dû être nécessaire. Malgré tout, ce critère a été vérifié lors de l’étude d’exactitude menée
pour l’extension accordée en avril 2010.
L’ensemble des résultats obtenus est conforme aux attentes, également en termes de confirmation
par « Listeria species Confirmation Strip ».
 Conservation des bouillons Fraser ½ à 5°C ± 3°C pendant 72 heures
Dans le cadre de l’étude d’extension de 2011, des essais ont été réalisés par la méthode alternative
afin de comparer les résultats des ensemencements réalisés dès la fin de l’incubation du Fraser ½ à
ceux obtenus après passage du Fraser ½ au froid 5°C ± 3°C pendant 72h. Les géloses ont été lues
après 24 heures d’incubation et après 48 heures d’incubation.
Sur 117 échantillons positifs (dont 38 contaminés avec Listeria monocytogenes et 79 contaminés
avec Listeria spp), incluant 57 contaminés artificiellement et 60 naturellement contaminés, et
répartis sur 5 catégories de produits alimentaires (produits carnés, produits de la mer, produits
végétaux, produits laitiers et échantillons d’environnement), les résultats étaient les suivants :
Pour 115 échantillons, les ensemencements réalisés à partir du Fraser ½ incubé 72 heures au froid
ont donné des résultats concordants, après lecture à 24 heures et à 48 heures, à ceux obtenus à partir
des ensemencements réalisés directement après incubation.
Pour 2 échantillons, les ensemencements réalisés à partir du bouillon Fraser ½ conservé au froid
pendant 72 heures se sont révélés positifs à 24 heures, alors que ceux réalisés directement après
incubation étaient positifs après lecture à 48 heures. Cela s’explique par une multiplication
bactérienne durant les 72 heures de stockage du bouillon.
En conclusion, la conservation du bouillon Fraser ½ pendant 72h à 5 ± 3°C ne modifie pas le
rendu des résultats.
 Tests de confirmation
Dans le cadre de l’étude d’extension de 2011, toutes les confirmations des Listeria
monocytogenes (n=38) ont été réalisées avec ALOA® Confirmation et avec RAPIDEC® Lmono.
14
Total L. spp positifs
Géloses incubées /
ensemencement à T0
79
Géloses incubées /
ensemencement à T72H
79
Bandelettes positives
79
79
Total L. mono positifs
38
38
Aloa® Conf. Positifs
38
38
Rapidec® L. mono positifs
38
38
Toutes les confirmations effectuées à partir de RAPIDEC® Lmono sont concordantes à celles
effectuées à partir d’ALOA® Confirmation.
Suite à l’acquisition de la société « AES Chemunex » par la société « bioMérieux » et compte tenu
du fait que les formulations des géloses ALOA® et OAA® sont conformes à la définition de la
norme EN ISO 11290-1, le Bureau technique, lors de la séance du 6 octobre 2011, a accepté que les
3 tests de confirmation de la méthode OAA® suivants soient appliqués à la méthode ALOA® sans
essais complémentaires :
- galerie API® Listeria,
- par le test AccuProbe Listeria monocytogenes à partir de colonies isolées ou non sur gélose
ALOA®
- par le test VIDAS LMO2 à partir de colonies isolées ou non sur gélose ALOA®
Ces modes de confirmation ont été validés dans le cadre de l’ « étude de reconduction de validation
de la méthode OAA – protocole court pour la recherche de L. monocytogenes & Résultats
d’extension à un nouveau protocole de confirmation » (Référence : OAA recherche – reconduction
ext 2009-03 v01, présenté au bureau technique de Mars 2009).
Le protocole court (OAA) est validé sous le numéro d’attestation BIO 12/14–04/05.
2.2 Niveau de détection relatif
Des essais ont été effectués en 2004 et 2005, sur des combinaisons produits alimentaires/ souches
de Listeria monocytogenes, pour les matrices suivantes : Rillettes, Saumon, Salade, Lait cru,
Chiffonnette. Quatre niveaux cibles de contamination ont été testés pour chaque couple matrice/
souche (0,25 – 0,5 – 0,75 et 1 UFC/25 g). Six réplications ont été réalisées pour chaque niveau, par
les deux méthodes.
Le laboratoire expert a complété ces données avec des souches de Listeria autres que
monocytogenes, pour deux couples « matrice-souche » :
Rillettes / Listeria welshimeri (origine : viande de bœuf)
Eau de process / Listeria innocua (origine : chiffonnette siphon sol)
Quatre niveaux de contamination croissants ont été testés pour chaque couple « matrice – souche »
(les niveaux cibles sont : 0,25 – 0,50 – 0,75 et 1 UFC/ 25 g). Six réplications ont été réalisées pour
chaque niveau.
15
Les niveaux de détection obtenus pour chaque combinaison "Matrice-Souche" sont les suivants,
selon le test Spearman-Karber :
Couples (souche, matrice)
L. monocytogenes (1/2a)- Rillettes
L. welshimeri - Rillettes
L. monocytogenes (4b) - Saumon
L. monocytogenes (1/2b) - Salade
L. monocytogenes (1/2a) – Lait cru
L. monocytogenes (1/2a) Chiffonnettes
L. innocua - Eau de process
Flore
totale
(UFC/g ou
UFC/ml)
Niveau de détection relatif LOD50
avec intervalle de confiance
(UFC / 25 g ou 25 ml)
<100
< 200
25 000
4500
250 000
3 000
0,5 [0,4-0,7]
0,5 [0,3-0,7]
0,5 [0,4-0,7]
0,4 [0,3-0,5]
0,5 [0,4-0,8]
0,5 [0,4-0,7]
0,5[0,4-0,7]
0,5 [0,3-0,7]
0,5 [0,4-0,7]
0,4 [0,3-0,5]
0,5 [0,4-0,8]
0,5 [0,4-0,7]
< 20
0,4 [0,3-0,6]
0,4 [0,3-0,6]
LOD50 : estimation du niveau de contamination qui permet d’obtenir une détection positive par la méthode alternative
dans 50% des cas
Remarque : toutes les souches utilisées pour les contaminations ont été préalablement isolées
d’échantillons des mêmes catégories que les échantillons artificiellement contaminés.
Le niveau de détection relatif de la méthode alternative pour la recherche de Listeria
monocytogenes est compris entre 0,3 et 0,8 UFC/ 25 g ou ml. Il est identique à celui de la
Le niveau de détection relatif de la méthode alternative pour la recherche de Listeria spp est
compris entre 0,3 et 0,7 UFC/ 25 g ou ml. Il est identique à celui de la méthode de référence.
2.3 Inclusivité / Exclusivité
Plusieurs études d’inclusivité / exclusivité ont été menées depuis la validation initiale de la méthode
en 2000, lors des différentes phases de reconduction et/ ou d’extension.
2.3.1. Étude (2000) menée lors de la validation initiale de la méthode « ALOA® / L.
Monodisk » pour la recherche de Listeria monocytogenes
50 souches de Listeria monocytogenes ont été testées et donné une réponse positive.
51 souches non Listeria monocytogenes ont été testées. Toutes ont répondu négativement sauf
quelques souches de Listeria ivanovii qui ont présenté un fin halo à 24 H. La mise en œuvre des
tests de confirmation a permis de différencier les deux espèces.
Les résultats figurent en annexe 3.
16
2.3.2. Étude (2005) menée lors de la validation de reconduction et d’extension du protocole
« ALOA® One Day » pour la recherche de Listeria monocytogenes
Protocole « inclusivité » :
50 souches de Listeria monocytogenes de collection ou issues de produits alimentaires ont été
testées.
Chaque souche est d’abord repiquée en bouillon nutritif (incubation 24 heures, 37°C). Les cultures
obtenues sont diluées pour obtenir environ des suspensions de 10 à 100 UFC / ml. Un millilitre de
chaque suspension diluée est ensuite ensemencé dans 225 ml de bouillon FRASER demi.
Le bouillon est ensuite incubé à 30°C pendant 24 heures +/- 2 heures.
Après enrichissement, un étalement de 0,1 ml est effectué sur gélose ALOA®. Les boîtes sont
incubées à 37°C, puis lues après 24 heures.
Protocole « exclusivité » :
30 souches non cibles, autres que Listeria monocytogenes, ont été testées en double sur gélose
ALOA®. Ces souches sont connues soit pour interférer avec Listeria monocytogenes, soit pour être
naturellement présentes dans les produits alimentaires d’essai.
Chaque souche est d’abord repiquée en bouillon nutritif (incubation 24 heures, 37°C). Les cultures
obtenues sont diluées pour obtenir des suspensions d’environ 106 UFC / ml.
Un étalement de 0,1 ml est alors effectué sur gélose ALOA®. Les boîtes sont incubées à 37°C, puis
lues après 24 heures.
Résultats :
Les 50 souches de Listeria monocytogenes ont répondu positivement.
Les 30 souches non-cibles ont donné des résultats négatifs. Il convient de signaler le fait que
certaines colonies de Listeria ivanovii présentent un aspect typique avec un fin halo au terme des 24
premières heures d’incubation. Après 48 heures d’incubation, Listeria ivanovii peut présenter le
même aspect que Listeria monocytogenes.
2.3.3. Étude (2006) menée lors de l’extension de la méthode « ALOA® One Day » pour la
recherche de Listeria monocytogenes, en intégrant le protocole de confirmation « ALOA®
Confirmation » (ISHA)
Souches cibles :
152 souches cibles ont été testées. Les résultats obtenus sont parfaitement conformes à ceux
attendus. Toutes les souches de Listeria monocytogenes ont formé des colonies caractéristiques sur
ALOA® après 24 heures d’incubation (y compris la souche non hémolytique testée). Aucun résultat
discordant entre ALOA® / ALOA® Confirmation n’a été observé.
Souches non cibles :
100 souches non cibles ont été testées, dont 27 Listeria ivanovii. Les résultats obtenus sont
parfaitement conformes à ceux attendus. Toutes les souches de Listeria ivanovii testées ont présenté
des colonies caractéristiques sur ALOA® après 48 heures d’incubation. Cependant, les profils
obtenus sur ALOA® Confirmation ont montré qu’il ne s’agit pas de L. monocytogenes. Les résultats
des tests d’identification de ces souches par la méthode de référence confirment qu’il s’agit de
Listeria ivanovii.
17
2.3.4. Étude (2010) menée lors de l’extension du protocole « ALOA® One Day » pour la
recherche de Listeria monocytogenes et de Listeria spp
Protocole « inclusivité » :
63 souches pures de Listeria spp (20 Listeria monocytogenes et 43 Listeria autres que
monocytogenes) de collection ou issues de produits alimentaires ont été testées.
Chaque souche est d’abord repiquée en bouillon nutritif (incubation 24 heures à 37°C). Le bouillon
est ensuite calibré à 1 Mac Farland et les dilutions sont effectuées pour obtenir des suspensions de
10 à 100 cellules / ml. Un millilitre de chaque suspension est ensuite ensemencé dans 225 ml de
bouillon FRASER ½.
Le bouillon est ensuite incubé à 30°C pendant 24 heures.
Après enrichissement, un ensemencement de 0,1 ml est effectué sur gélose ALOA®. Les boîtes sont
incubées à 37°C puis lues à 24 heures.
Protocole « exclusivité » :
32 souches non cibles, autres que Listeria spp, ont été testées. Ces souches sont connues soit pour
interférer avec Listeria spp, soit pour être naturellement présentes dans les produits alimentaires
d’essai.
Chaque souche est d’abord repiquée en bouillon nutritif (incubation 24 heures à 37°C). Les cultures
obtenues sont diluées pour obtenir des suspensions supérieures à 105 cellules / ml. Un millilitre de
chaque suspension est ensuite ensemencé dans 225 ml de bouillon nutritif non sélectif.
Après incubation, un ensemencement de 0,1 ml est alors effectué sur gélose ALOA®. Les boîtes
sont incubées à 37°C puis lues à 24 heures.
Résultats :
Les 63 souches de Listeria spp ont répondu positivement.
Toutes les souches ont été confirmées par test immunochromatographique (« Listeria species
Confirmation Strip ») et par spot Palcam.
Les 32 souches non-cibles ont toutes donné des résultats négatifs (soit une absence de colonie, soit
des colonies non typiques).
Aucune de ces souches n’a été confirmée par test immunochromatographique (« Listeria species
Confirmation Strip »). Il est à noter que certaines souches, principalement de Bacillus, ont pu se
développer sur gélose Palcam, mais aucun spot n’avait un aspect caractéristique de Listeria.
Les résultats de confirmation obtenus par « Listeria species Confirmation Strip » et spot Palcam sont
conformes à ceux attendus.
18
3. Étude d’extension concernant le test « Fast Rhamnose » (confirmation)
3.1 Principe et mode opératoire
Cette méthode de confirmation rapide, repose sur la mise en évidence de la fermentation du
Rhamnose. L’acidification est révélée par la présence d’un indicateur coloré, avec un virage du
bouillon du violet au jaune.
Ce test permet de discriminer les Listeria monocytogenes des autres souches telles que Listeria
ivanovii ou certains Bacillus cereus, qui peuvent présenter un profil caractéristique sur ALOA®
après 24h à 48h d’incubation.
Mode opératoire :
Le test est réalisé à partir d’une colonie caractéristique et isolée sur ALOA® ou à partir d’un
repiquage de cette même colonie ré-isolée sur TSYE.
Un tube de bouillon « Fast Rhamnose » est ensemencé, puis incubé à 37°C +/- 1°C pendant 6 à 24
heures.
La formation d’une coloration jaune indique un résultat positif.
Dès l’observation d’un virage au jaune, le résultat est considéré comme positif, même avant 6
heures d’incubation. Un résultat est rendu négatif, après une incubation de 24h à 37°C, si aucun
virage n’a été observé.
Après inoculation, la couleur du milieu pour un résultat négatif, peut évoluer vers le violet pâle ou
grisé.
Le test non inoculé a une couleur violette.
Profil
1
2
Aspect de la colonie sur ALOA
Couleur de la colonie
Halo d’opacification
bleu
+
bleu
+
FAST
Rhamnose
+
-
Conclusion
L. monocytogenes
L. ivanovii
Les tests peuvent également être conservés après une incubation à température ambiante ou à 37°C,
pendant 72 heures au total après inoculation des tubes.
3.2 Protocole de l’étude
Dans le cadre de l’étude d’extension, le laboratoire expert a réalisé :
* la confirmation de 203 souches cibles de Listeria monocytogenes, d’origine variée et
préalablement sérogroupées,
* la confirmation de 103 souches non cibles : 53 de ces souches sont des Listeria autre que
monocytogenes (dont 20 Listeria ivanovii) et 50 sont des souches d’autres genres, tels que Bacillus,
Staphylococcus, Lactobacillus, enterococcus, …
Les souches ont toutes été isolées sur géloses ALOA® et TSYE.
L’ensemble des souches isolées sur ALOA® et TSYE a fait l’objet d’une confirmation par la mise
en œuvre du test « FAST Rhamnose ».
19
Chaque souche donnant un résultat discordant entre l’aspect sur gélose ALOA® et le test de
confirmation réalisé a été identifiée selon les tests normalisés.
Plusieurs lectures ont systématiquement été réalisées. Les tests sont donc interprétés :
- après 4h, 6h, 24h, 72h d’incubation à 37°C +/-1°C,
- après 24h d’incubation à 37°C +/-1°C suivies de 48h de conservation à température ambiante.
3.3 Résultats des essais « Fast Rhamnose »
Souches cibles
Les tableaux de résultats obtenus figurent en annexe 7.
203 souches de Listeria monocytogenes sérogroupées et d’origine variée ont été testées avec la
répartition suivante :
Catégories
Viandes et charcuteries
Fruits et légumes
Produits laitiers
Environnement
Plats cuisinés / mélanges divers
Pâtisseries
Total
Nb souches
82
26
18
18
21
24
14
203
Sérotype ou groupe PCR
1/2a, IIa
1/2b, IIb
1/2c, IIc
4b, IVb
4a, L
Total
Nb Souches
128
15
8
46
6
203
À partir des colonies issues des géloses ALOA® incubées, les résultats obtenus sont conformes à
ceux attendus après 24 heures d’incubation pour les 203 souches de Listeria monocytogenes testées,
soit dans 100% des cas.
Ces résultats sont identiques dès 6 heures d’incubation à 37°C pour 199 souches, soit dans 98% des
cas.
Ces résultats sont identiques dès 4 heures d’incubation à 37°C pour 198 souches, soit dans 97,5%
des cas.
Toutes les souches de Listeria monocytogenes ensemencées ont présentées des colonies
caractéristiques sur gélose ALOA® après incubation.
20
À partir des colonies issues des géloses TSYE incubées, les résultats obtenus sont conformes à
ceux attendus après 24 heures d’incubation pour les 203 souches de Listeria monocytogenes testées,
soit dans 100% des cas.
des cas.
des cas.
Après conservation des tests pendant 72 heures à 37°C +/1°C, l’ensemble des résultats est
positif pour les 203 souches de Listeria monocytogenes, aussi bien à partir des géloses ALOA® que
des géloses TSYE : 100% de résultats conformes.
Après conservation des tests à température ambiante, pour une durée allant jusqu’à 72 heures
après ensemencement, l’ensemble des résultats est positif pour les 203 souches de Listeria
monocytogenes, aussi bien à partir des géloses ALOA® que des géloses TSYE : 100% de résultats
conformes.
Souches non cibles
Les tableaux de résultats obtenus figurent en annexe 8.
Les 103 souches non cibles ont été testées à partir de colonies obtenues sur gélose TSYE et sur
gélose ALOA® lorsque des colonies étaient présentes, même si elles étaient non caractéristiques.
Elles sont représentées par 53 souches de Listeria autres que monocytogenes, dont 20 souches de
Listeria ivanovii et par 50 souches d’autres genres, dont 18 souches de Bacillus.
Seules les souches de Listeria ivanovii étaient bleues-vertes avec halo après 48 heures d’incubation.
Toutes les souches des autres genres testés n’étaient pas caractéristiques.
Parmi les souches testées, toutes les Listeria ivanovii présentent des tests « Fast Rhamnose »
négatifs.
Certaines souches de Listeria innocua et de Listeria welshimeri présentent des résultats positifs aux
tests « Fast Rhamnose », mais aucune n’ont un aspect caractéristique sur gélose ALOA®.
Aucune des 7 souches de Bacillus cereus testées n’a présenté de test « Fast Rhamnose » positif à
partir des géloses ALOA®.
Certaines souches sont rhamnose positive (Enterococcus, Lactobacillus, Streptococcus,
Pediococcus, Brochotrix, Bacillus), mais soit ne présentent aucune croissance sur gélose ALOA®,
soit ne présentent aucune colonie caractéristique.
Pour les souches Listeria testées, les résultats après conservation des tests à température ambiante,
pour une durée allant jusqu’à 72 heures après ensemencement, et les résultats des tests incubés
jusqu’à 72 heures à 37°C +/- 1°C, restent identiques à ceux obtenus après 24 heures d’incubation.
21
Dans le cadre des souches d’autres genres que Listeria, le laboratoire a constaté quelques cas de
tests ayant initialement virés à une couleur jaune qui ont ensuite changé de nouveau de couleur
(couleur « gris »). Ces cas s’expliquent par une ré-alcalinisation du milieu.
3.4 Conclusion de l’étude d’extension
L’ensemble des résultats obtenus est conforme à ceux attendus :
Les essais réalisés à partir de souches pures n’ont pas mis en évidence de discordance.
La réalisation d’un test à partir d’une colonie caractéristique isolée obtenue sur gélose ALOA®
permet de conclure à Listeria monocytogenes après 24h d’incubation (100% de concordance) ou
après 6h d’incubation (98% des cas), ou encore dès 4h d’incubation si le test « Fast Rhamnose »
présente un virage au jaune.
Les tests peuvent être conservés pour lecture après une incubation à température ambiante ou à
37°C, pendant 72 heures au total après inoculation des tubes.
4. Etude interlaboratoire
L’étude interlaboratoire selon la norme EN ISO 16140 a été réalisée en 2006 avec
14 laboratoires collaborateurs. Les analyses ont été effectuées sur des échantillons de lait de chèvre
pasteurisé, contaminés artificiellement avec une souche de Listeria monocytogenes 4b (isolée d’un
fromage de chèvre au lait cru) aux 3 niveaux suivants :
- niveau 0 (niveau cible : 0 UFC/25 ml),
- niveau légèrement supérieur au niveau de détection relatif (niveau cible : 3 UFC/25 ml),
- niveau 10 fois supérieur au niveau précédent (niveau cible : 30 UFC/25 ml).
Les laboratoires ont testé, par les deux méthodes, 8 réplicats pour chaque niveau de
contamination.
Chaque laboratoire a reçu un total de 26 échantillons :
- 24 échantillons répartis en 3 niveaux de contamination (L0, L1 et L2),
- 1 échantillon pour le dénombrement de la flore endogène de la matrice,
- 1 échantillon pour la prise de température à réception (cet échantillon contenait également
un thermobouton TOMPROBETM destiné au suivi de la température pendant le transport).
Les résultats obtenus sont les suivants :
Niveaux
de
contamination
Nombre de
Nombre de
Nombre
Nombre de
Nombre total
résultats négatifs résultats positifs
d'échantillons résultats
d'échantillons
analysés
exploités*
REF
ALT
REF
ALT
0
112
112
104
104
104
0
0
1
112
112
104
0
0
104
104
2
112
112
104
0
0
104
104
22
* Un laboratoire a déclaré avoir mal manipulé. Ses résultats n’ont pas été pris en compte
(contamination de deux échantillons entre eux au moment de la mise en enrichissement.
Après vérification des numéros des échantillons concernés par cette erreur de
manipulation, il s’est avéré qu’un échantillon négatif a été mélangé avec un échantillon
artificiellement contaminé).
a- Pourcentage de spécificité, Pourcentage de sensibilité, Exactitude relative
Pourcentage de spécificité :
Il est calculé pour les deux méthodes pour le niveau L0.
Avec : SP = [ 1 – (FP/N-)] X 100
et FP : nombre de faux positifs - N- = nombre total de tous les essais L0
Pourcentages de sensibilité :
Ils sont calculés pour les deux méthodes pour chaque niveau de contamination positif (L1 et L2)
et pour les deux méthodes.
Avec : SE = (TP/N+)] X 100
et TP = nombre vrais positifs – N+ = nombre total des essais L1 ou L2 respectivement.
Exactitude relative :
Elle est calculée pour tous les niveaux.
Avec : AC = [(PA+NA) / N] X 100
et PA = nombre d’accords positifs – NA = nombre d’accords négatifs
N = nombre d’échantillons soumis à essai.
Tableau récapitulatif :
Niveaux
L0
L1
L2
TOTAL
Exactitude relative
N AC(%) LCL(%)
104
100
98
104
100
98
104
100
98
312
100
98
N+
SE(%) LCL(%)
104
104
208
100
100
100
98
98
98
NSP(%) LCL(%)
104
100
98
104
100
98
LCL : low critical value
L’exactitude relative est de 100 %.
La spécificité est de 100 %.
La sensibilité est de 100 %.
Calcul de la sensibilité des deux méthodes en tenant compte de l’ensemble des positifs
confirmés (incluant les éventuels positifs supplémentaires obtenus par la méthode alternative, dans
cette étude : aucun) :
SENSIBILITE
METHODE
ALTERNATIVE
METHODE DE
REFERENCE
(PA+PD) / (PA+PD+ND) = 100 %
(PA+PD) / (PA+PD+ND) = 100 %
23
Les résultats obtenus dans cette étude interlaboratoire ont corroboré ceux obtenus antérieurement
dans la précédente étude collaborative menée selon le référentiel en application en 2000. Aucun
faux positif n’avait été obtenu avec la méthode de référence et la méthode « ALOA® One Day ».
Les résultats de l’étude collaborative sont comparables à ceux obtenus lors de l’étude préliminaire
pour la reconduction de la certification AFNOR Validation de la méthode « ALOA® One day » et
de son extension aux prélèvements d’environnement menée en 2004 – 2005.
b- Degré d’accord, concordance et odds ratio :
Degré d’accord : % de chance de trouver le même résultat pour deux échantillons identiques
analysés par le même laboratoire dans des conditions de répétabilité. C’est la moyenne des
probabilités que deux réplicats donnent le même résultat pour chaque laboratoire.
Concordance : % de chance de trouver le résultat pour deux échantillons identiques analysés dans
deux laboratoires différents (conditions de reproductibilité). C’est le % de toutes les paires de
réplicats donnant le même résultat.
Odds ratio (COR) : il est défini par la formule suivante :
COR= degré d’accord x (100 – concordance) / concordance x (100 – degré d’accord).
Le tableau suivant indique les valeurs pour la méthode alternative et pour la méthode de
référence :
Niveau de contamination
L0
L1
L2
Degré d’accord
100
100
100
Concordance
100
100
100
COR
1
1
1
La variabilité de la méthode alternative (degré d’accord, concordance, odds ratio) est identique à
celle de la méthode de référence
5. Praticabilité
La praticabilité est étudiée en fonction des 13 critères définis par le bureau technique :
1 - Mode de conditionnement des éléments de la méthode :
Les boîtes de gélose ALOA® sont conditionnées par paquet de 10 en sachet plastique et expédiées
par carton de 10 unités (boîtes 140 mm), 20 unités (boîtes 90 mm) ou de 120 unités (boîtes 90 mm).
Le kit pour 1 litre « base + suppléments » est constitué de 5 flacons de 200 ml + suppléments
(expédié par carton).
2 - Volume des réactifs :
Chaque boîte de gélose ALOA® précoulée contient 16 ml de milieu sélectif (diamètre 90 mm) ou 60
ml de milieu sélectif (diamètre 140 mm).
Chaque flacon de gélose ALOA® a un volume de 200 ml.
24
3 - Conditions de stockage et péremption des produits non ouverts :
La température de stockage des géloses ALOA® est celle mentionnée sur la notice technique du
fabricant : 2 à 8° C.
La date limite d’utilisation est indiquée sur le fond des boîtes de gélose ALOA® (impression jet
d’encre). Elle correspond à un délai de 10 semaines après fabrication.
Pour les flacons, la date limite d’utilisation est également mentionnée sur chaque flacon. Elle
correspond à un délai de 1 an après fabrication.
Les boîtes coulées par le laboratoire utilisateur à partir de flacons prêts à l’emploi peuvent être
conservées pendant une semaine entre 2 et 8°C.
4 - Modalités d’utilisation après première utilisation :
Sans objet pour la gélose ALOA® en boîte précoulée.
Les modalités d’utilisation après première utilisation sont spécifiées dans la fiche technique du
fabricant. En l’occurrence :
Les boîtes coulées par le laboratoire utilisateur à partir de flacons prêt à l’emploi peuvent être
conservées pendant une semaine entre 2 et 8°C.
Par ailleurs, les flacons d’ALOA® Base non complémentés peuvent subir deux cycles de
régénération et de maintien en surfusion sans que la qualité analytique des résultats obtenus par la
méthode alternative ne soit réduite.
5 - Équipements ou locaux spécifiques nécessaires :
La nature des équipements et les locaux nécessaires à la réalisation des analyses selon le mode
d’emploi du fabricant de la méthode alternative sont du même niveau que ceux prescrits dans la
6 - Réactifs prêts à l’emploi ou à reconstituer :
Les boîtes de gélose ALOA® sont disponibles en prêt à l’emploi.
Les kits ALOA® sont prévus pour la fabrication de 5 fois 200 ml, soit 1 litre de milieu prêt à
l’emploi.
Le milieu est également disponible sous forme déshydratée plus suppléments.
7 - Durée de formation de l’opérateur non initié à la méthode :
½ journée
8 - Temps réel de manipulations et flexibilité de la technique par rapport au nombre
d’échantillons à analyser :
La méthode alternative présente l’avantage de ne nécessiter que l’ensemencement par étalement ou
isolement d’une seule boîte ALOA® par rapport aux 4 boîtes (2 ALOA® et 2 d’un autre milieu)
prévues dans la méthode de référence.
Par ailleurs, cette méthode s’affranchit du repiquage sur bouillon FRASER (absence
d’enrichissement secondaire).
Synthétiquement, pour le cas d’échantillons négatifs, pour lesquels aucune confirmation n’est
nécessaire, les temps estimés sont les suivants :
25
Étapes
Préparation, pesée, dilution, broyage
Transfert du Fraser ½ en Fraser
Isolement sur géloses sélectives du Fraser ½ et du Fraser
Isolement de 100 µl sur gélose ALOA®
Lecture des géloses
Temps total moyen
Temps moyen pour 1 échantillon (min)
ALOA® One Day
EN ISO 11290-1
5
5
1
2
1
2
1
10
7
Dans le cadre des confirmations des colonies caractéristiques de Listeria monocytogenes, la
méthode alternative permet de ne repiquer qu’une seule colonie au lieu des cinq mentionnées dans
la méthode de référence. Différents modes de confirmation peuvent être utilisés à la place des tests
normatifs, permettant de gagner plusieurs jours par rapport à la méthode de référence.
Dans le cadre des confirmations des colonies caractéristiques de Listeria spp, l’opérateur peut
effectuer le test « Listeria species Confirmation Strip » par bandelette permettant un gain de temps
très important puisque la lecture s’effectue en 10 minutes, après 5h à 24h d’incubation préalable du
bouillon cœur-cerveau.
Il convient également de noter que la souplesse d’utilisation autorise l’induction de l’analyse le
vendredi, avec étalement / isolement le samedi, pour une lecture finale le lundi, sans obligation pour
le manipulateur, d’intervenir le dimanche. En effet, la notice prévoit un temps d’incubation de 24h à
48h. Cet avantage majeur peut, bien entendu, se transposer sur la gestion des calendriers composés
de jours fériés.
26
9 - Délai d’obtention des résultats :
Étapes
Réalisation du bouillon Fraser ½
Ensemencement du bouillon Fraser
Isolement sur géloses sélectives
Étalement / Isolement sur ALOA®
Obtention des résultats négatifs (absence
de colonies caractéristiques)
Obtention des résultats positifs (colonies
caractéristiques) ou négatifs après
confirmation
Délai obtenu
EN ISO 11290-1
J0
J1
J1 et J3
J5
Délai obtenu
« ALOA® One Day »*
J0
J1
J2
J6 à J7
-
J3 à J4
J2
J3
J8 à J12
J4
-
J4 à J9
J3
J2 à J3
J2
J2
J3 à J4
J2 à J3
Confirmation du genre :
- Tests normatifs
- Listeria species Confirmation Strip
Spot Palcam
Confirmation de l’espèce Listeria
monocytogenes :
- Tests normatifs
- ALOA® Confirmation
- protocole « RAPIDEC Lmono »,
- protocole VIDAS LMO2,
- protocole Accuprobe L. monocytogenes,
- galerie API Listeria,
- test FAST Rhamnose
* Lecture après 24h d’incubation
10 - Type de qualification de l’opérateur
Il est identique au niveau requis pour la méthode de référence.
11 - Étape commune avec la méthode de référence :
Indépendamment des étapes éventuelles de confirmation, la méthode alternative partage une seule
étape en commun avec la méthode de référence. Il s’agit de l’étape d’enrichissement primaire.
Il existe, par ailleurs, une similitude dans l’étalement / isolement de 0,1 ml de cet enrichissement
primaire sur la gélose ALOA® et le transfert de 0,1 ml de cet enrichissement primaire dans 10 ml de
FRASER d’enrichissement secondaire.
12 - Traçabilité éventuelle des résultats d’analyses :
La traçabilité des résultats d’analyses repose sur le relevé des numéros de lots de gélose ainsi que
sur le suivi des fiches de contrôle qualité fournies par la société AES Chemunex et les épreuves de
stérilité et de fertilité que le laboratoire peut gérer en interne dans le cadre de ses exigences qualité.
13 - Maintenance par le laboratoire :
Aucune.
27
6. Conclusion générale
L’étude de validation a été menée selon le référentiel EN ISO 16140.
* Les résultats de l’étude comparative permettent de conclure que la méthode « ALOA® One
Day » :
- est exacte, sensible et spécifique,
Recherche de Listeria monocytogenes :
Exactitude relative (à 24 heures) : AC =99,36%
Spécificité relative (à 24 heures) : SP =99,37%
Sensibilité relative (à 24 heures) : SE =99,36%
Les échantillons positifs par la méthode alternative étant des échantillons positifs confirmés, les
sensibilités et spécificités ont été recalculées par rapport à l’ensemble des résultats positifs et sont
de :
99,4% de sensibilité pour la méthode alternative,
99,4% de sensibilité pour la méthode de référence.
Exactitude relative (à 48 heures) : AC = 99,36%
Spécificité relative (à 48 heures) : SP = 98,75% (une spécificité relative inférieure à 100% résulte
d’un nombre de positifs supplémentaires confirmés et non pas de faux positifs).
Sensibilité relative (à 48 heures) : SE = 100%
de :
100% de sensibilité pour la méthode alternative,
Recherche de Listeria monocytogenes et autre Listeria spp :
Exactitude relative (à 24 heures) : AC =98,42%
Spécificité relative (à 24 heures) : SP =99,45%
Sensibilité relative (à 24 heures) : SE =97,45%
de :
97,46% de sensibilité pour la méthode alternative,
- présente un niveau de détection identique à celui de la méthode de référence,
Le niveau de détection relatif de la méthode alternative pour la recherche de Listeria
monocytogenes est compris entre 0,3 et 0,8 UFC/ 25 g ou ml.
Le niveau de détection relatif de la méthode alternative pour la recherche de Listeria spp est
compris entre 0,3 et 0,7 UFC/ 25 g ou ml.
28
- est inclusive et exclusive,
- est aisée à mettre en œuvre dans les laboratoires.
Enfin :
• tous les tests effectués avec « Listeria species Confirmation Strip » (étude d’exactitude, études
d’inclusivité et d’exclusivité) se sont avérés conformes aux attentes, au même titre que les
confirmations sur Palcam.
• toutes les confirmations effectuées à partir de RAPIDEC® Lmono sont concordantes à celles
effectuées à partir d’ALOA® Confirmation.
• Suite à l’acquisition de la société « AES Chemunex » par la société « bioMérieux » et compte
tenu du fait que les formulations des géloses ALOA® et OAA® sont conformes à la définition
de la norme EN ISO 11290-1, les tests suivants pour la confirmation des Listeria
monocytogenes ont également été validé :
- galerie API® Listeria,
- par le test AccuProbe Listeria monocytogenes à partir de colonies isolées ou non sur gélose
ALOA®
- par le test VIDAS LMO2 à partir de colonies isolées ou non sur gélose ALOA®
• le fait de conserver les boîtes 48h à 2/8°C n’a pas influé sur les résultats obtenus après 24h
d’incubation.
• la conservation du bouillon Fraser ½ pendant 72h à 5 ± 3°C ne modifie pas le rendu des
résultats.
* Les résultats de l’étude interlaboratoire permettent de conclure que la méthode « ALOA® One
Day » :
- est exacte, sensible et spécifique,
L’exactitude relative, la spécificité et la sensibilité sont de 100%.
Les résultats de l’étude interlaboratoire sont comparables à ceux obtenus lors de l’étude
préliminaire.
- a une variabilité (degré d’accord, concordance et odds ratio) identique à celle de la
méthode de référence, aux trois niveaux de contamination testés :
Degré d’accord : 100%
Concordance : 100%
COR : 1
Fait à TOURS, le 15/05/2015
Nicolas GAILLARD
Directeur adjoint hygiène
29
ANNEXES
30
ANNEXE 1
Protocole analytique
Méthode « ALOA® One Day »
Annexe 1 – Page 1/1
RECHERCHE DE LISTERIA MONOCYTOGENES ET LISTERIA SPP DANS LES ALIMENTS
METHODE « ALOA® One Day »
PROTOCOLE ANALYTIQUE (Attestation AFNOR N° 10/3-09/00)
X g ou X ml de prise d'essai + 9 X ml Fraser-demi
24 heures +/- 2 heures, à 30°C +/- 1°C
Possibilité de conserver le bouillon 72 heures à 5°C +/-3°C, après incubation
0,1 ml étalement ou isolement sur ALOA®
Dans le cadre de l’ensemencement par étalement, maintenir une zone non ensemencée en périphérie de la boîte.
Cette zone facilite l’observation des halos pour les boîtes chargées (contraste centre/périphérie de la boîte).
24 heures à 48 heures, à 37°C +/- 1°C
Présomption
L. spp
OUI
colonies typiques ?
avec / sans halo
OUI
avec halo
Présomption
L. monocytogenes
NON
-
Confirmation Listeria spp (au choix) :
tests classiques des méthodes
normalisées,
piqûre sur gélose Palcam,
protocole « Listeria species
Confirmation Strip »,
autre méthode validée Afnor, dont le
principe est différent.
Absence
Listeria spp.
-
Confirmation (au choix) :
tests classiques des méthodes normalisées,
protocole « ALOA® Confirmation »,
protocole « RAPIDEC Lmono »,
protocole VIDAS LMO2
protocole Accuprobe L. monocytogenes,
galerie API Listeria
test « FAST Rhamnose »,
autre méthode validée Afnor, dont le
principe est différent.
ANNEXE 2
Mode opératoire de la méthode
EN ISO 11290-1/A1
MODE OPERATOIRE DE LA METHODE EN ISO 11290-1/A1
X g ou X ml de prise d'essai
+ 9 X ml Fraser-demi
0,1 ml de culture dans 10 ml Fraser
Isolement de 10 µl sur gélose ALOA et
isolement sur 2ème milieu sélectif
(gélose Palcam)
Isolement de 10 µl sur gélose ALOA et
isolement sur 2ème milieu sélectif
(gélose Palcam)
24 heures +/- 3 heures, à 37°C +/- 1°C,
si nécessaire : 24 heures +/- 3 heures
supplémentaires, à 37°C +/- 1°C
24 heures +/- 3 heures, à 37°C +/- 1°C,
si nécessaire : 24 heures +/- 3 heures
supplémentaires, à 37°C +/- 1°C
Confirmation
(tests normatifs)
Confirmation
(tests normatifs)
ANNEXE 3
Inclusivité / Exclusivité :
Tableaux de résultats
(Étude : 2000)
ÉTUDE D’INCLUSIVITE DE LA GELOSE ALOA®
100 = boîtes envahies de colonies isolées
37
38
39
40
ÉTUDE D’EXCLUSIVITE DE LA GELOSE ALOA®
41
42
43
44
45
ANNEXE 4
(Étude d’extension : 2005)
Étude d’inclusivité
®
Réf.
Nom
Sérovar
Origine
Aspect des colonies sur ALOA
Résultats
1
Listeria monocytogenes
1/2 a
Steak haché
Colonies bleu-vert avec halo
positif
2
1/2 b
Viande hachée
positif
3
4b
Steak
positif
4
1/2a
Viande hachée
positif
5
4b
Viande hachée
positif
6
1/2 a
Veau
positif
7
2b
Sauté de veau
positif
8
4b
Faux-filet
positif
9
4b
Viande
positif
10
1/2a
Veau
positif
11
1/2a
Veau
positif
12
1/2a
Chiffonnette
positif
13
1/2a
Saucisson sec
positif
14
4b
Portion unitaire
positif
®
Réf.
Nom
Sérovar
Origine
Résultats
15
4b
Viande de
positif
16
4b
Cône Saumon
positif
17
1/2a
Fromage
positif
18
1/2a
Chiffonnette
positif
19
1/2a
Saucisson sec
positif
20
4b
Merguez
positif
21
4b
Chipolatas
positif
22
4b
Chiffonnette
positif
23
4b
Ecouvillon
positif
24
4b
Tartelette
positif
25
1/2a
Tartelette
positif
26
4b
Fromage
positif
27
1/2b
Fromage
positif
28
1/2b
Barde
positif
29
4b
Capas
positif
®
Réf.
Nom
Sérovar
Origine
Résultats
30
1/2b
Fromage
positif
31
1/2b
Lait de chèvre
positif
32
1/2b
Lait de chèvre
positif
33
4b
Epaule d'agneau
positif
34
1/2a
Lait
positif
35
4b
Foie de porc
positif
36
4b
Surface
positif
37
4b
Chair à
positif
38
1/2a
Lait de vache
positif
39
ND
Lait CECALAIT
positif
40
ND
Chocolats
positif
41
4b
Viande de porc
positif
42
1/2b
Radis
positif
43
1/2a
Cantal
positif
44
1/2a
St Nectaire
positif
®
Réf.
Nom
Sérovar
Origine
Résultats
45
4b
Chair à curry
positif
46
4b
placenta
positif
47
4b
placenta
positif
48
4b
placenta
positif
49
4b
Ensilage
positif
50
4b
Fourrage
positif
ND : non déterminé
Étude d’exclusivité
®
Réf.
Nom
Origine
Résultats
1
Staphylococcus aureus
Fromage de chèvre
Colonies non caractéristiques
Négatif
2
Lait de chèvre
Négatif
3
Aiguillette de canard
Négatif
4
Listeria ivanovii
Lait de chèvre
Petites colonies caractéristiques sans halo
Négatif
5
Listeria ivanovii
Buvard lait de chèvre
Négatif
6
Listeria ivanovii
Lait de chèvre
7
Listeria innocua
Lait de chèvre
Petites colonies caractéristiques avec halo
très fin
Petites colonies caractéristiques avec halo
très fin
8
Listeria innocua
Chiffonnette
Négatif
9
Listeria innocua
Lait de chèvre
Négatif
10
Listeria seeligeri
Souchothèque
Négatif
11
Staphylococcus enteritidis
Souchothèque
Négatif
12
Bacillus cereus
Taboulé
Négatif
13
Bacillus mycoïdes
Radis bio
Négatif
14
Bacillus cereus
Blé
Négatif
15
Bacillus cereus
ATCC14579
Négatif
Négatif
Négatif
®
Réf.
Nom
Origine
Résultats
16
Bacillus megaterium
Souchotèque IAA 14/01/93
Négatif
17
Bacillus subtilis
Souchothèque IAA 21/9/93
Négatif
18
Salmonella typhimurium
Souche BV
Négatif
19
Escherichia coli
Souchothèque IAA
Négatif
20
Enterobacter cloacae
Souche BV
Négatif
21
Listeria welshimeri
Veau
Négatif
22
Listeria welshimeri
Chiffonnette
Négatif
23
Staphylococcus haemolyticus
Souche BV
Négatif
24
Pantoea
Souche BV
Négatif
25
Salade d'endives
Négatif
26
Enterococcus faecalis
Souche BV
Négatif
27
Enterococcus faecium
Souche ATCC
Négatif
28
Souche AES
Négatif
29
Souche AES
Négatif
30
Souche AES CIP5855
Négatif
ANNEXE 5
(Étude menée par l’ISHA : 2006)
SOUCHES CIBLES : Listeria monocytog enes
Code
Nom
Origine
Profil ALOA confirmation
à partir milieu non sélectif
ALOA
à partir ALOA
Concordance
Couleur Halo Virage Résultat Colonies Couleur Halo Virage Résultat ALOA/
strie
au jaune
typiques strie
au jaune
ALOA conf.
R 62
L. monocytogenes
CIP 78.31
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
L09
L. monocytogenes
Environnement clinique
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
L10
L. monocytogenes
Lait 107P
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
LIS 3.2
L. monocytogenes
Canard
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
LIS 3.3
L. monocytogenes
Produit laitier
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
LIS 3.6
L. monocytogenes
Environnement production
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
LIS 3.7
L. monocytogenes
Environnement production
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
LIS 3.10 L. monocytogenes
Poisson congelé
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
LIS 3.11
L. monocytogenes
Poisson congelé
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
Poisson congelé
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
Poisson congelé
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
Poisson congelé
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
Saucisses
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
Plat cuisiné (produits de la mer)
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
Produit laitier
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
ATCC 13932
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
Saucisses
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
Saucisses
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
Poudre de lait
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
Poudre de lait
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
Poudre de lait
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
Produit laitier
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
Produit laitier
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
Poudre de lait
Produit laitier
BV
BV
+
+
+
+
LM
LM
oui
oui
BV
BV
+
+
+
+
LM
LM
oui
oui
BV : bleu/vert
LM : Listeria monocytogenes
Code
Nom
Origine
ALOA
à partir ALOA
Concordance
Couleur
Virage
Colonies Couleur
Virage
ALOA/
Halo
Résultat
Halo
Résultat
strie
au jaune
typiques strie
au jaune
ALOA conf.
P1 TA100 L. monocytogenes
Truite fumée
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
P2TA100 L. monocytogenes
Poisson pané
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
Darne saumon
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
Saumon fumé
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
Saumon fumé
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
Saumon fumé
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
Saumon fumé
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
Saumon fumé
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
Saumon fumé
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
Saumon fumé
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
Saumon fumé
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
Saumon fumé
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
E16TA100 L. monocytogenes
Eau de rinçage Atelier transformation d
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
C11TA100 L. monocytogenes
Chiffonnettes Atelier transformation de
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
V1TA100 L. monocytogenes
Viande hachée (bœuf)
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
Steak haché (bœuf)
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
Viande hachée (boeuf)
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
BV
BV
+
+
+
+
LM
LM
oui
oui
BV
BV
+
+
+
+
LM
LM
oui
oui
BV : bleu/vert
Code
Nom
Origine
ALOA
Concordance
à partir ALOA
Couleur
Virage
Colonies Couleur
Virage
ALOA/
Halo
Résultat
Halo
Résultat
ALOA conf.
strie
au jaune
typiques strie
au jaune
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
V17A48
L. monocytogenes
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
LIS 3.1
L. monocytogenes 1/2
ATCC 15313
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
L101
L. monocytogenes 1/2 H=0
Poulet rôti
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
I100
L. monocytogenes 1/2a
brochette courgette chèvre
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
I103
jambon crudité
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
I104
sdwich jambon emmental
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
I107
sdwich jambon emmental
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
I108
sdwich thon œuf surimi
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
I109
granulé de bœuf rôti
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
I112
salade
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
I121
poulet curry
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
I122
saumon fumé
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
I123
foie gras
I125
sauce ktipiti
BV
BV
+
+
+
+
LM
LM
oui
oui
BV
BV
+
+
+
+
LM
LM
oui
oui
BV : bleu/vert
Code
Nom
Origine
ALOA
à partir ALOA
Concordance
Couleur
Virage
Colonies Couleur
Virage
ALOA/
Halo
Résultat
Halo
Résultat
ALOA conf.
strie
au jaune
typiques strie
au jaune
I130
tartare de saumon
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
I132
contrôle surface égoût
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
I134
crudités
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
I135
salade de légumes
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
I 97
pintade fermière
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
I 99
sandwich bacon crudité
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
L11
CIP 103574 (152P)
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
L12
CIP 104794 (153P)
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
L52
Fromage frais
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
L53
Repas fromager
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
L58
Poisson et légumes à la provençale
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
L60
Jambon
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
L62
Viande hachée
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
L83
Ecouvillon égout
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
L86
Reblochon
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
L94
Escabèche de légumes
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
L97
Fromage de brebis
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
L98
Fromage bleu
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
L99
Concombres en dés
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
L100
Ecouvillon ligne
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
L104
Crabe
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
L105
Tartare de Saint-Jacques
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
L106
Chiffonnette sur sol
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
L107
Saucisse
L108
Chiffonnette sur égout
BV
BV
+
+
+
+
LM
LM
oui
oui
BV
BV
+
+
+
+
LM
LM
oui
oui
BV : bleu/vert
Code
Nom
Origine
ALOA
Concordance
à partir ALOA
Virage
Colonies Couleur
Virage
ALOA/
Couleur
Halo
Résultat
Résultat
Halo
ALOA conf.
strie
au jaune
typiques strie
au jaune
L102
Viande hachée
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
L69
Poulet indies
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
L73
Foie gras de canard
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
L74
Poivron vert
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
L76
Campagnard jambon emmental
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
L80
Granulé de bœuf rôti
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
L 116
Tortilla tzatziki saumon fumé
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
L117
Poitrine de porc hachée
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
I106
L. monocytogenes 1/2b
cuisse de canard
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
I114
pâte praliné
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
I 96
roulé de dinde cru
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
L55
Hareng aux épices
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
L68
Lait cru
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
L110
Assortiment de charcuteries fines
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
L72
Légumes grillés
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
I102
L. monocytogenes 1/2c
viande hachée
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
I113
Gouda
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
I129
Sdwich salade du chef
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
L13
CIP 103573 (154P)
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
L54
Foie gras de canard
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
L59
Foie gras de canard
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
L64
Tartare saumon
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
L65
Sauce ktipiti
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
L66
Foie gras
L84
Viande hachée
BV
BV
+
+
+
+
LM
LM
oui
oui
BV
BV
+
+
+
+
LM
LM
oui
oui
BV : bleu/vert
Code
Nom
Origine
ALOA
Concordance
à partir ALOA
Couleur
Virage
Colonies Couleur
Virage
ALOA/
Halo
Résultat
Halo
Résultat
strie
au jaune
typiques strie
au jaune
ALOA conf.
L87
Foie gras
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
L109
Foie gras de canard
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
L111
Crudités
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
L115
Comté
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
I105
L. monocytogenes 3a
Saumon fumé
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
I131
L. monocytogenes 3a
Bacon tranché
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
L57
L. monocytogenes 3a
Contrôle de surface
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
L61
L. monocytogenes 3a
Bacon grillé
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
L63
L. monocytogenes 3a
Sandwich chèvre
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
L88
L. monocytogenes 3a
Tarama œufs de truite
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
L90
L. monocytogenes 3a
Saumon sauvage
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
L93
L. monocytogenes 3a
Tarama au saumon
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
L103
L. monocytogenes 3a
Tarama
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
L112
L. monocytogenes 3a
Salade coupée
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
L113
L. monocytogenes 3a
Ecouvillon rebords conditionneuse
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
L114
L. monocytogenes 3a
Filet de pintade
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
L118
L. monocytogenes 3a
Tarama
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
L82
L. monocytogenes 3b
Arlequin de poivrons
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
L92
L. monocytogenes 3c
Saumon
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
I128
L. monocytogenes 4b
lanières de saumon
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
L14
L. monocytogenes 4b
CIP 103575 (155P)
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
L15
L. monocytogenes 4b
CIP 7838 (156P)
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
L56
L. monocytogenes 4b
Contrôle de surface sur saumon
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
L95
L. monocytogenes 4b
Cantal au lait cru
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
L96
L. monocytogenes 4b
Lait cru
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
LIS 3.5
L. monocytogenes 4b
ATCC 19115
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
L16
L. monocytogenes 4c
CIP 7839 (157P)
BV
+
+
LM
oui
BV
+
+
LM
oui
BV : bleu/vert
SOUCHES NON CIBLES
Code
Nom
Origine
I 38
Bacillus amyloliquefasciens Produit laitier
R 87
Bacillus cereus
CIP 66.24 T
I 28
Bacillus cereus
Industrie laitière
I 80
Bacillus cereus
R 53
Bacillus cereus
Couleur
Virage
Halo
Résultat
strie
au jaune
-
-
-
translucide
-
-
-
-
-
Lait UHT
translucide +
-
non LM
CIP 54.9
translucide +
-
SIK 281 Sué
translucide +
-
ALOA
Colonies
typiques
pas de croissance pas de croissance
à partir ALOA
Concordance Identification
Couleur
Virage
ALOA/
selon
Halo
Résultat
strie
au jaune
ALOA conf.
ISO 11290
/
/
/
/
/
/
/
/
/
/
/
/
/
/
/
/
/
/
non
/
/
/
/
/
/
non LM
non
/
/
/
/
/
/
non LM
non
/
/
/
/
/
/
non LM
non
R 70 Bacillus cereus
BA.1.2 Bacillus cereus
Nems
translucide +
-
non LM
non*
translucide +
-
non LM
/
/
BA.1.5 Bacillus cereus
Poudre de lait
translucide +
-
non LM
non*
translucide +
-
non LM
/
/
R 86
Bacillus circulans
CIP 52.76
-
-
-
/
/
/
/
/
/
I 21
Bacillus circulans
Industrie laitière
-
-
-
/
/
/
/
/
/
I 22
Bacillus subtilis
Crème dessert
-
-
-
/
/
/
/
/
/
I 40
Bacillus subtilis
Produit laitier
-
-
-
pas de croissance
/
/
/
/
/
/
R 10
Bacillus subtilis
CIP 52.65 T
-
-
-
/
/
/
/
/
/
non
I 35
Brevibacterium casei
Produit laitier
-
-
-
/
/
/
/
/
/
R 63
Candida albicans
CNCM 48.72
-
-
-
/
/
/
/
/
/
R 75
Candida albicans
ATCC 10231
-
-
-
/
/
/
/
/
/
LevD
Cryptococcus
Produits végétaux
-
-
-
/
/
/
/
/
/
I 25
Enterobacter aerogenes
Industrie laitière
-
-
-
/
/
/
/
/
/
I 37
Enterobacter sakazakii
Poudre de lait
-
-
-
/
/
/
/
/
/
R3
Escherichia coli
CIP 54.127
-
-
-
/
/
/
/
/
/
I2
L02
Escherichia coli
Carottes rapées
L. grayi
CIP 105447T
LIS 5.1 L. grayi
I124
I126
L. innocua
L. innocua
-
-
-
BV
-
+
non LM
non
/
/
/
/
/
/
/
/
/
/
/
/
Saucisses
BV
-
+
non LM
non
/
/
/
/
/
/
Sdwich légumes
Sdwich bacon crudité
BV
BV
-
+
+
non LM
non LM
non
non
/
/
/
/
/
/
/
/
/
/
/
/
BV : bleu/vert
* colonies non typiques pour un œil expérimenté
SOUCHES NON CIBLES
Code
I133
Nom
L. innocua
Origine
contrôle surface porte
Couleur
Virage
Halo
Résultat
au jaune
strie
BV
-
+
non LM
ALOA
Colonies
typiques
non
à partir ALOA
Couleur
Virage
ALOA/
selon
Halo
Résultat
au jaune
ALOA conf.
ISO 11290
strie
/
/
/
/
/
/
L04
L. innocua
CIP 80.12
BV
-
+
non LM
non
/
/
/
/
/
/
L47
L. innocua
CTSCCV
BV
-
+
non LM
non
/
/
/
/
/
/
L49
L. innocua
17765 (viande de porc)
BV
-
+
non LM
non
/
/
/
/
/
/
L50
L. innocua
Sandwich poulet bacon
BV
-
+
non LM
non
/
/
/
/
/
/
L51
L. innocua
Langue de bœuf
BV
-
-
non LM
non
/
/
/
/
/
/
L67
L. innocua
Viande hachée
BV
-
+
non LM
non
/
/
/
/
/
/
R 30
L. innocua
CIP 80.11
BV
-
+
non LM
non
/
/
/
/
/
/
L71
L. innocua
Canard laqué
BV
-
+
non LM
non
/
/
/
/
/
/
L75
L. innocua
Poulet crudités
BV
-
-
non LM
non
/
/
/
/
/
/
L77
L. innocua
Rôti de dinde
BV
-
+
non LM
non
/
/
/
/
/
/
L89
L. innocua
Saumon
BV
-
-
non LM
non
/
/
/
/
/
/
L91
L. innocua
Canard laqué
BV
-
+
non LM
non
/
/
/
/
/
/
L120 L. innocua
LIS.1.3 L. innocua
LIS.1.4 L. innocua
Sdwich jambon emmental
BV
-
+
non LM
non
/
/
/
/
/
/
viande hâchée
BV
-
+
non LM
non
/
/
/
/
/
/
Viande
BV
-
+
non LM
non
/
/
/
/
/
/
LIS.1.5 L. innocua
LIS.1.6 L. innocua
Poudre de Lait
BV
-
+
non LM
non
/
/
/
/
/
/
Poudre de lait
BV
-
+
non LM
non
/
/
/
/
/
/
L41
L. ivanovii
lait cru
BV
+/-
-
non LM
oui**
BV
+/-
-
non LM
non
L. ivanovii
L45
L. ivanovii
CTSCCV
BV
+
-
non LM
oui**
BV
+
-
non LM
non
L. ivanovii
R 31 L. ivanovii
LIS.2.1 L. ivanovii
LIS.2.2 L. ivanovii
CIP 78.42
BV
+
-
non LM
oui**
BV
+
-
non LM
non
L. ivanovii
Brocolis
BV
+/-
-
non LM
oui**
BV
+/-
-
non LM
non
L. ivanovii
Volaille
BV
+
-
non LM
oui**
BV
+
-
non LM
non
L. ivanovii
LIS.2.5 L. ivanovii
LIS.2.6 L. ivanovii
Souche clinique
Fromage lait cru
BV
BV
+
+/-
-
non LM
non LM
oui**
oui**
BV
BV
+
+/-
-
non LM
non LM
non
non
L. ivanovii
L. ivanovii
BV : bleu/vert
** après 48 heures d'incubation
SOUCHES NON CIBLES
Code
Nom
Origine
Couleur
Virage
Résultat
Halo
strie
au jaune
ALOA
Colonies
typiques
à partir ALOA
selon
ALOA/
Couleur
Virage
Résultat
Halo
strie
au jaune
ALOA conf.
ISO 11290
LIS.2.7 L. ivanovii
Fromage lait cru
BV
+/-
-
non LM
oui**
BV
+/-
-
non LM
non
L. ivanovii
LIS 2.8 L. ivanovii
Lait brebis
BV
+
-
non LM
oui**
BV
+
-
non LM
non
L. ivanovii
LIS 2.9 L. ivanovii
Lait brebis
BV
+
-
non LM
oui**
BV
+
-
non LM
non
L. ivanovii
LIS 2.11 L. ivanovii
Fromage lait cru
BV
+
-
non LM
oui**
BV
+
-
non LM
non
L. ivanovii
Poudre de lait
BV
+
-
non LM
oui**
BV
+
-
non LM
non
L. ivanovii
Poudre de lait
BV
+
-
non LM
oui**
BV
+
-
non LM
non
L. ivanovii
PG
L. ivanovii
CTSCCV
LIS.2.4 L. ivanovii (Londoniensis) CIP 103466T
BV
+
-
non LM
oui**
BV
+
-
non LM
non
L. ivanovii
BV
+/-
-
non LM
oui**
BV
+/-
-
non LM
non
L. ivanovii
L01
L. ivanovii (Londoniensis) CIP 103505
BV
+
-
non LM
oui**
BV
+/-
-
non LM
non
L. ivanovii
I 41
L. ivanovii
Produit laitier
BV
+
-
non LM
oui**
BV
+/-
-
non LM
non
L. ivanovii
L 119
L. ivanovii
Sandwich
BV
+
-
non LM
oui**
BV
+/-
-
non LM
non
L. ivanovii
835.3
L. ivanovii
Lait de chèvre
BV
+
-
non LM
oui**
BV
+
-
non LM
non
L. ivanovii
1220.1 L. ivanovii
Lait de chèvre
BV
+
-
non LM
oui**
BV
+
-
non LM
non
L. ivanovii
3069.1 L. ivanovii
Viande de surface
BV
+
-
non LM
oui**
BV
+
-
non LM
non
L. ivanovii
3069.3 L. ivanovii
Viande de surface
BV
+
-
non LM
oui**
BV
+
-
non LM
non
L. ivanovii
5979.3 L. ivanovii
Lait de chèvre
BV
+
-
non LM
oui**
BV
+
-
non LM
non
L. ivanovii
5979.7 L. ivanovii
Lait de chèvre
BV
+
-
non LM
oui**
BV
+
-
non LM
non
L. ivanovii
6232.3 L. ivanovii
Lait de chèvre
BV
+/-
-
non LM
oui**
BV
+/-
-
non LM
non
L. ivanovii
6595.6 L. ivanovii
Fromage de chèvre
BV
+
-
non LM
oui**
BV
+/-
-
non LM
non
L. ivanovii
7769.2 L. ivanovii
Fromage Rocamadour
BV
+
-
non LM
oui**
BV
+/-
-
non LM
non
L. ivanovii
L03
L. seeligeri
CIP 79.46
BV
-
+
non LM
non
/
/
/
/
/
/
L48
L. seeligeri
CTSCCV
BV
-
-
non LM
non
/
/
/
/
/
/
LIS 4.2 L. seeligeri
Lait brebis
BV
-
+/-
non LM
non
/
/
/
/
/
/
Saucisses
Poudre de lait
BV
BV
-
+/+/-
non LM
non LM
non
non
/
/
/
/
/
/
/
/
/
/
/
/
BV : bleu/vert
** après 48 heures d'incubation
SOUCHES NON CIBLES
Code
L05
Couleur
Virage
Résultat
Halo
strie
au jaune
BV
+
non LM
ALOA
Colonies
typiques
non
à partir ALOA
selon
ALOA/
Couleur
Virage
Halo
Résultat
strie
au jaune
ALOA conf.
ISO 11290
/
/
/
/
/
/
Nom
L. welshimeri
Origine
CIP 81.48
L06
L. welshimeri
CIP 81.94 T
BV
-
+
non LM
non
/
/
/
/
/
/
L46
L. welshimeri
CTSCCV
BV
-
+
non LM
non
/
/
/
/
/
/
non LM
non
L70
L. welshimeri
Ailes jaunes
BV
-
+
/
/
/
/
/
/
I 33
Lactobacillus casei
produit laitier
-
-
-
/
/
/
/
/
/
R 96
Lactobacillus casei
CIP 157
-
-
-
/
/
/
/
/
/
R113
Lactobacillus casei rhamnosuB 7138 (ADRIA)
-
-
-
/
/
/
/
/
/
R 99
Lactobacillus johnsonii
CIP 130 620
-
-
-
/
/
/
/
/
/
R 98
Lactobacillus leishmanii
CIP 53.61
-
-
-
/
/
/
/
/
/
R114
Lactobacillus paracasei
99A70 (ADRIA)
-
-
-
/
/
/
/
/
/
R 97
Lactobacillus plantarum
CIP A159
-
-
-
/
/
/
/
/
/
R 66
Leuconostoc pseudomesenter CIP 103 316
-
-
-
/
/
/
/
/
/
I 42
Pediococcus
Produits végétaux
-
-
-
/
/
/
/
/
/
R 65
Pseudomonas aeruginosa
ATCC 19429
-
-
-
/
/
/
/
/
/
R6
Rhodococcus equi
CIP 58.69
-
-
-
pas de croissance
/
/
/
/
/
/
R 37
CIP 57.10
-
-
-
/
/
/
/
/
/
R 46
CIP 4.83
-
-
-
/
/
/
/
/
/
R 73
ATCC 6538
-
-
-
/
/
/
/
/
/
R 83
CIP 53.154
-
-
-
/
/
/
/
/
/
Eaux superficielles
non
I 32
-
-
-
/
/
/
/
/
/
I 34
Staphylococcus epidermidis produit laitier
-
-
-
/
/
/
/
/
/
I 11
Staphylococcus epidermidis 2boîte de contact in
-
-
-
/
/
/
/
/
/
I 39
Staphylococcus equorum
-
-
-
/
/
/
/
/
/
I 12
R 85
Staphylococcus haemolyticusboîte de contact in
Staphylococus xylosus
CIP 81.66 T
-
-
-
/
/
/
/
/
/
/
/
/
/
/
/
BV : bleu/vert
Pâté vietnamien au bœuf
ANNEXE 6
(Étude d’extension : 2010)
Étude d’inclusivité
Taux d'inoculation dans 225
ml Fraser 1/2 (en UFC)
Aspect des colonies sur
®
ALOA (incubation 24h)
Résultats « Listeria species
Résultats
Palcam
Steak haché
75
colonies bleues-vertes,
avec halo
positif
positif
L. monocytogenes
(1/2a)
Blanc d'œuf
55
avec halo
positif
positif
1641/20/21
L. monocytogenes
(1/2b)
Radis
30
avec halo
positif
positif
1048 - 8865.1
L. monocytogenes
Carcasse de
bœuf
20
avec halo
positif
positif
645 - 5391.4
L. monocytogenes
(1/2c)
Foie gras cuit
65
avec halo
positif
positif
1040 - 8776.1
L. monocytogenes
Chapeau
berrichon (glace)
35
avec halo
positif
positif
1630/20/10
L. monocytogenes
(1/2a)
Chiffonnette
85
avec halo
positif
positif
978 - 7549.1
L. monocytogenes
Religieuse
chocolat
50
avec halo
positif
positif
1645/20/25
L. monocytogenes
(1/2a)
Saumon fumé
25
avec halo
positif
positif
1648/20/28
L. monocytogenes
(4b)
Lait cru de chèvre
25
avec halo
positif
positif
1629/20/9
L. monocytogenes
(1/2c)
Chiffonnette
70
avec halo
positif
positif
1632/20/12
L. monocytogenes
(1/2a)
Viande hachée
35
avec halo
positif
positif
1632/20/14
L. monocytogenes
(1/2a)
Veau
40
avec halo
positif
positif
Réf.
Nom
1635/20/15
L. monocytogenes
(1/2a)
1651/20/31
Origine
Taux d'inoculation dans 225
ml Fraser 1/2 (en UFC)
Aspect des colonies sur
®
ALOA (incubation 24h)
Résultats « Listeria species
Résultats
Palcam
Veau
15
avec halo
positif
positif
L. monocytogenes
(1/2a)
Kebab
50
avec halo
positif
positif
1527/20/7
L. monocytogenes
(1/2a)
Chiffonnette
65
avec halo
positif
positif
1647/20/27
L. monocytogenes
(1/2a)
Fromage
35
avec halo
positif
positif
1630/20/10
L. monocytogenes
(1/2a)
Chiffonnette
85
avec halo
positif
positif
1640/20/20
L. monocytogenes
Saucisse aux
herbes
30
avec halo
positif
positif
1628/20/8
L. monocytogenes
(1/2a)
Eau de rinçage
90
avec halo
positif
positif
LIS 5.2
L. grayi
Saucisse
50
petites colonies bleues
vertes, sans halo
positif
positif
LIS 5.3
L. grayi
Camembert
50
vertes, sans halo
positif
positif
L190
L. grayi
Frites surgelées
50
vertes, sans halo
positif
positif
L143
L. grayi
Frites surgelées
50
positif
positif
Cecalait
70
Positif (témoin ok, 2ème trait
léger)
positif
Positif (témoin ok, 2ème trait
léger)
positif
positif
positif
Réf.
Nom
1636/20/16
L. monocytogenes
(1/2a)
1639/20/19
09_IAA_9625.4 L. ivanovii
Origine
96 - 779.2
L. ivanovii
Veau
65
593 - 4637.1
L. ivanovii
Lait de chèvre
80
vertes, sans halo
petites colonies vertes
clairs avec halo (24h) puis
bleu-vert avec halo (48h)
Réf.
Nom
Origine
Taux d'inoculation
dans 225 ml
Fraser 1/2 (en
UFC)
(incubation 24h)
Résultats
« Listeria species
Confirmation
Strip »
Résultats
Palcam
®
1076 - 9325.3
L. ivanovii
Lait de chèvre
75
petites colonies vertes clairs avec halo
(24h) puis bleu-vert avec halo (48h)
Positif (témoin ok,
2ème trait léger)
positif
102 - 1153.2
L. ivanovii
Maigre de veau
80
positif
positif
133 - 1564.5
L. ivanovii
Lait de chèvre
70
positif
positif
513 - 6336.1
L. ivanovii
Crottin de chèvre
75
positif
positif
516 - 6398.2
L. ivanovii
Fromage de chèvre
80
positif
positif
682 - 9143.2
L. ivanovii
Viande hachée de
boeuf (frais)
65
Positif (témoin ok,
2ème trait léger)
positif
82 - 847.2
L. innocua
Fromage de chèvre
55
colonies bleues-vertes, sans halo
positif
positif
87 - 891.2
L. innocua
Lait de chèvre
50
positif
positif
404 - 3310.2
L. innocua
Alfafa
40
positif
positif
592 - 4698.5
L. innocua
Chiffonnette sol,
syphon fromagerie
60
positif
positif
898 - 7119.1
L. innocua
Surface carcasse
bœuf
35
positif
positif
1025 - 8436.1
L. innocua
Surface carcasse
bœuf
40
positif
positif
673 - 5353.5
L. innocua
Poireau
45
positif
positif
64 - 601.5
L. innocua
Lait de chèvre
50
positif
positif
Réf.
Nom
Origine
Taux d'inoculation
dans 225 ml
Fraser 1/2 (en
UFC)
(incubation 24h)
Résultats
« Listeria species
Confirmation
Strip »
Résultats
Palcam
®
206 - 2586.1
L. innocua
Farine
50
positif
positif
374 - 4368.2
L. innocua
Chiffonnette
(environnement/
volaille)
60
positif
positif
LIS 1.7
L. innocua
Brocolis
45
positif
positif
300 - 2673.1
L. seeligeri
Lait de chèvre
55
positif
positif
81 - 760.9
L. seeligeri
Cecalait
70
positif
positif
586/7/19
L. seeligeri
Chiffonnette
65
positif
positif
317/3/74
L. seeligeri
Viande de bœuf
80
positif
positif
1326/16/30
L. seeligeri
Salade
70
positif
positif
LIS 4.3
L. seeligeri
Saucisse
60
positif
positif
LIS 4.8
L. seeligeri
Chiffonnette
75
positif
positif
LIS 4.10
L. seeligeri
Endives braisées
80
positif
positif
L140
L. seeligeri
Frites surgelées
90
positif
positif
L115
L. seeligeri
Eau de lac
50
positif
positif
Réf.
Nom
Origine
Taux d'inoculation
dans 225 ml
Fraser 1/2 (en
UFC)
(incubation 24h)
Résultats
« Listeria species
Confirmation
Strip »
Résultats
Palcam
®
LIS 6.2
L. welshimeri
Cecalait
50
positif
positif
61 - 583.1
L. welshimeri
Chiffonnette suif
chaine 1
80
positif
positif
350 - 3236.1
L. welshimeri
Riz germé
60
positif
positif
899 - 7120.2
L. welshimeri
Maigre de veau
50
positif
positif
1038 - 7704.2
L. welshimeri
Veau, portion
unitaire
50
positif
positif
625 - 5032.3
L. welshimeri
Affranchi bœuf
45
positif
positif
16 - 278.1
L. welshimeri
Roti de dinde cru
40
positif
positif
43 - 575.2
L. welshimeri
Chiffonnette zone
cuisson rillettes
65
positif
positif
373 - 4368.2
L. welshimeri
Chiffonnette
(environnement/
volaille)
60
positif
positif
Étude d’exclusivité
Réf.
Nom
Origine
Taux d'inoculation
Aspect des colonies
dans 225 ml bouillon
non sélectif (en UFC)
sur ALOA (incubation 24h)
®
1400/17/23
Bacillus cereus
Taboulé
2,5E+06
Petites colonies blanches
crénelées, mates, petit halo
Petites colonies blanches
crénelées, mates, petit halo
1399/17/22
Bacillus cereus
Blé
1,4E+06
absence de colonie
BA 10.3
Bacillus circulans
Ferment lactique
1,6E+06
BA 9.1
Bacillus megaterium
Salade
1,8E+06
BA 8.2
Bacillus mycoïdes
Radis bio
Collection ATCC
6633
1,2E+06
absence de colonie
Petites colonies blanches frangées
mates
Petites colonies blanches avec
halo
1,5E+06
absence de colonie
Jus d'orange
2,3E+06
absence de colonie
2,3E+06
absence de colonie
2,0E+06
absence de colonie
09_IAA_9456.2 Bacillus cereus
1791/22/9
Bacillus subtilis
08_IAA_8724.1 Candida albicans
Graines germées
1,2E+06
617/7/50
Corynebacteriaceae sp
1786/22/4
Abat de volaille
Collection ATCC
29212
1412/17/35
Lait de vache
3,0E+06
absence de colonie
1413/17/36
Découpe de canard
2,5E+06
1411/17/34
Collection CIP 5855
3,5E+06
absence de colonie
petites colonies vertes non
typiques, sans halo
928/11/37
Enterococcus hirae
Eau
2,0E+06
absence de colonie
Résultats
« Listeria species
Résultats
négatif
négatif
négatif
négatif
non effectué
non effectué
Palcam
non
effectué
non
effectué
négatif
négatif
négatif
négatif
non effectué
non effectué
non effectué
non effectué
non effectué
non effectué
non
effectué
non
effectué
non
effectué
non
effectué
non
effectué
non
effectué
négatif
négatif
non effectué
non
effectué
Réf.
Nom
Origine
Taux d'inoculation
Aspect des colonies
®
09_IAA_9833.2 Escherichia coli
Viande de bœuf
2,5E+06
absence de colonie
09_IAA_9834.1 Escherichia coli
Lait de chèvre
2,4E+06
absence de colonie
1415/17/38
Lactobacillus acidophilus
Produit laitier
2,2E+06
absence de colonie
1414/17/37
Lactobacillus casei
Produit laitier
2,0E+06
absence de colonie
1416/17/39
Lactobacillus casei
Poudre de lait
2,0E+06
absence de colonie
1522/18/64
Pediococcus pentosaceus
Ferment lactique
1,0E+06
Foie de veau
5,0E+05
absence de colonie
colonies jaunâtres, plates, sans
halo
colonies jaunâtres, plates, sans
halo
09_IAA_9683.3 Pseudomonas aeruginosa
1792/22/10
Pseudomonas aeruginosa
ATCC 27853
5,0E+05
1328/16/32
Rhodococcus equi
1,5E+06
1797/22/15
Saccharomyces cerevisiae
Matrice carnée
Collection ATCC
9763
1,0E+06
absence de colonie
Tapis de colonies blanches mates,
non typiques
1310/16/14
Lait de vache
4,3E+06
absence de colonie
1307/16/11
Lait de vache
3,5E+06
absence de colonie
1321/16/25
Staphylococcus intermedius
IAA
3,5E+06
absence de colonie
16/0/16
Streptococcus agalactiae
Lait de vache
3,0E+06
absence de colonie
279/3/36
Streptococcus dysgalactiae
Lait de vache
3,0E+06
absence de colonie
772/9/43
Streptococcus uberis
Lait de vache
3,0E+06
absence de colonie
Résultats
« Listeria species
non effectué
non effectué
non effectué
non effectué
non effectué
non effectué
Résultats
Palcam
non
effectué
non
effectué
non
effectué
non
effectué
non
effectué
non
effectué
négatif
négatif
négatif
négatif
non effectué
non
effectué
négatif
négatif
non effectué
non effectué
non effectué
non effectué
non effectué
non effectué
non
effectué
non
effectué
non
effectué
non
effectué
non
effectué
non
effectué
Réf.
Nom
Origine
Taux d'inoculation
Aspect des colonies
®
IAA_ML
Micrococcus luteus
ATCC 9341
1,5E+06
absence de colonie
5 SOU 60816
Micrococcus luteus
CIP 5345
1,5E+06
absence de colonie
Résultats
« Listeria species
non effectué
non effectué
Résultats
Palcam
non
effectué
non
effectué
ANNEXE 7
Résultats des essais :
Souches cibles
(Étude d’extension concernant Fast Rhamnose : 2013)
Annexe 7 - Page 1/11
Etude d'inclusivité
N°
Souche
Sérotype /
Groupe PCR
Emplacement
souchothèque /
Matrice
Catégorie
matrice
12_IAA_9973.2
Géloses
4h
37°C
6h
37°C
24h
37°C
ALOA
TSYE
+
+
+
+
+
+
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
ALOA
+
+
+
+
+
+
+
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
N° dossier
2
L. monocytogenes
IIa
Saucisse nature
Viandes &
charc.
3
L. monocytogenes
L
Salade saumon maïs
Plats cuisin. /
Mélanges div.
12_IAA_9966.2
4
L. monocytogenes
IIa
Magret de canard cru
Viandes &
charc.
12_IAA_10012.2
5
L. monocytogenes
IIa
Découpe poulet cru
Viandes &
charc.
12_IAA_9907.1
8
L. monocytogenes
IIa
Buvard
Produits laitiers
12_IAA_9740.2
9
L. monocytogenes
IIa
Cheveux d'ange
Viandes &
charc.
12_IAA_9737.2
10
L. monocytogenes
IIa
Eclair café
Pâtisseries
12_IAA_9710.1
13
L. monocytogenes
Ivb
Religieuse chocolat
Pâtisseries
12_IAA_9534.1
14
L. monocytogenes
Ivb
Filet de boeuf cru
Viandes &
charc.
12_IAA_9349.4
15
L. monocytogenes
IIa
Chair à saucisse crue
Viandes &
charc.
12_IAA_9349.1
16
L. monocytogenes
Ivb
Pâté de campagne
Viandes &
charc.
12_IAA_9285.1
17
L. monocytogenes
IIa
Terrine de volaille foie
gras
Viandes &
charc.
12_IAA_9406.5
18
L. monocytogenes
IIa
Céleri rémoulade
Fruits & Lég.
12_IAA_9276.2
19
L. monocytogenes
Ivb
Sandwich thon
tomates mayonnaise
Plats cuisin. /
Mélanges div.
12_IAA_9281.2
20
L. monocytogenes
Ivb
Salade verte
Fruits & Lég.
12_IAA_9356.2
21
L. monocytogenes
IIa
Concombre à la
crème
Fruits & Lég.
12_IAA_9366.3
22
L. monocytogenes
Ivb
Abat cœur
Viandes &
charc.
12_IAA_8767.2
23
L. monocytogenes
IIc
Tomme de brebis
Produits laitiers
12_IAA_8278.2
24
L. monocytogenes
IIa
Viande d'oie
Viandes &
charc.
12_IAA_8212.3
Légende : (+) : test positif / (-) : test négatif
48h
72h
24h à 37°C
24h à 37°C
37°C 37°C
puis 24h à
puis 48h à
T° ambiante
T° ambiante
+
+
+
+
+
+
+
+
N°
Souche
Sérotype /
Groupe PCR
Emplacement
souchothèque /
Matrice
Catégorie
matrice
12_IAA_8090.2
Géloses
4h
37°C
6h
37°C
24h
37°C
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
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ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
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ALOA
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+
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+
+
+
+
+
+
+
+
+
N° dossier
25
L. monocytogenes
IIa
Beignets calamar
Viandes &&
Poissons
crust.
26
L. monocytogenes
IIb
Sushi saumon
Poissons &
crust.
12_IAA_7717.2
27
L. monocytogenes
IIa
Poulet cru
Viandes &
charc.
12_IAA_8596.1
28
L. monocytogenes
IIb
Poelée gourmande
Fruits & Lég.
12_IAA_8333.3
31
L. monocytogenes
L
Tartare saumon
Poissons &
crust.
12_IAA_8225.1
32
L. monocytogenes
IIa
Farce à la tomate
Viandes &
charc.
12_IAA_7162.1
34
L. monocytogenes
Ivb
Saucisson à l'ail
Viandes &
charc.
12_IAA_7467.2
35
L. monocytogenes
IIa
Chair à saucisse
Viandes &
charc.
12_IAA_6863.1
36
L. monocytogenes
IIa
Filet de poulet
Viandes &
charc.
12_IAA_6838.1
38
L. monocytogenes
Ivb
Pizza 4 fromages
Plats cuisin. /
Mélanges div.
12_IAA_6776.3
39
L. monocytogenes
Ivb
Poireaux
Fruits & Lég.
12_IAA_6766.1
41
L. monocytogenes
IIa
Poulet mariné
Viandes &
charc.
12_IAA_6580.1
42
L. monocytogenes
IIa
Jarret de veau cru
Viandes &
charc.
12_IAA_6430.1
43
L. monocytogenes
Ivb
Foie gras
Viandes &
charc.
12_IAA_6361.1
44
L. monocytogenes
IIb
Chiffonnette
Environnement
12_IAA_6349.7
46
L. monocytogenes
Ivb
Terrine de lapin
Viandes &
charc.
12_IAA_6221.2
47
L. monocytogenes
L
Tartare saumon
Poissons &
crust.
12_IAA_6069.2
48
L. monocytogenes
L
Lasagnes
Plats cuisin. /
Mélanges div.
12_IAA_5905.4
49
L. monocytogenes
IIa
Foie gras
Viandes &
charc.
12_IAA_5355.1
48h
72h
24h à 37°C
24h à 37°C
37°C 37°C
puis 24h à
puis 48h à
T° ambiante
T° ambiante
N°
Souche
Sérotype /
Groupe PCR
Emplacement
souchothèque /
Matrice
Catégorie
matrice
12_IAA_5398.1
Géloses
4h
37°C
6h
37°C
24h
37°C
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
+
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ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
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ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
+
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+
+
+
+
+
+
N° dossier
52
L. monocytogenes
IIa
Saucisse nature
Viandes &
charc.
53
L. monocytogenes
IIa
Steack haché
Viandes &
charc.
12_IAA_5169.1
55
L. monocytogenes
IIa
Saucisson sec
Viandes &
charc.
12_IAA_4592.1
56
L. monocytogenes
IIa
Boulettes de bœuf
Viandes &
charc.
12_IAA_4735.1
57
L. monocytogenes
IIa
Tomates/légumes/œu
fs
Plats cuisin. /
Mélanges div.
12_IAA_4789.3
58
L. monocytogenes
IIa
Melon
Fruits & Lég.
12_IAA_4455.1
59
L. monocytogenes
Ivb
Minerai
Viandes &
charc.
12_IAA_4476.2
61
L. monocytogenes
IIa
Steack haché cuit
Viandes &
charc.
12_IAA_4342.1
62
L. monocytogenes
Ivb
Magret de canard
Viandes &
charc.
12_IAA_4326.2
63
L. monocytogenes
Ivb
Opéra
Pâtisseries
12_IAA_4185.2
64
L. monocytogenes
IIa
Rôti de veau
Viandes &
charc.
12_IAA_3962.1
65
L. monocytogenes
IIa
Saucisse aux herbes
Viandes &
charc.
12_IAA_3938.1
67
L. monocytogenes
Ivb
Chair bœuf agneau
Viandes &
charc.
12_IAA_3917.2
68
L. monocytogenes
IIa
Farce
Viandes &
charc.
12_IAA_3865.2
69
L. monocytogenes
IIa
Salade piémontaise
Plats cuisin. /
Mélanges div.
12_IAA_3856.2
70
L. monocytogenes
IIa
Bavette crue
Viandes &
charc.
12_IAA_3893.3
71
L. monocytogenes
IIa
Rillons
Viandes &
charc.
12_IAA_3453.2
72
L. monocytogenes
IIa
Lait de chèvre
Produits laitiers
12_IAA_3152.5
73
L. monocytogenes
IIa
Escalope de veau
Viandes &
charc.
12_IAA_3073.1
48h
72h
24h à 37°C
24h à 37°C
37°C 37°C
puis 24h à
puis 48h à
T° ambiante
T° ambiante
N°
Souche
Sérotype /
Groupe PCR
Emplacement
souchothèque /
Matrice
Catégorie
matrice
12_IAA_2981.2
Géloses
4h
37°C
6h
37°C
24h
37°C
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
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ALOA
TSYE
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ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
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TSYE
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TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
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TSYE
ALOA
TSYE
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ALOA
TSYE
+
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+
+
+
+
+
N° dossier
74
L. monocytogenes
IIa
Lait Béneteau
Viandes &
Produits laitiers
75
L. monocytogenes
IIb
Valençay
Produits laitiers
12_IAA_2773.2
76
L. monocytogenes
IIa
Lait de chèvre
Produits laitiers
12_IAA_2718.3
77
L. monocytogenes
IIa
Valençay
Produits laitiers
12_IAA_2319.1
78
L. monocytogenes
IIa
Foie de vache
Viandes &
charc.
12_IAA_2343.1
79
L. monocytogenes
IIa
Salade pdt/hareng
Plats cuisin. /
Mélanges div.
12_IAA_2253.2
82
L. monocytogenes
IIa
Salade piémontaise
Plats cuisin. /
Mélanges div.
12_IAA_2088.2
84
L. monocytogenes
Ivb
Faisselle
échalottes/oignons
Produits laitiers
12_IAA_2009.1
86
L. monocytogenes
Ivb
Salade piémontaise
Plats cuisin. /
Mélanges div.
12_IAA_1909.2
88
L. monocytogenes
IIb
Boudin blanc
Viandes &
charc.
12_IAA_1833.1
89
L. monocytogenes
IIa
Andouillette
Viandes &
charc.
12_IAA_1613.1
90
L. monocytogenes
IIb
Pavé 3 chocolats
Pâtisseries
12_IAA_1699.2
92
L. monocytogenes
IIa
Salade piémontaise
Plats cuisin. /
Mélanges div.
12_IAA_1265.1
93
L. monocytogenes
IIa
Saucisses aux herbes
Viandes &
charc.
12_IAA_1346.1
94
L. monocytogenes
Ivb
Haricots blancs
vinaigrette
Fruits & Lég.
12_IAA_1303.2
96
L. monocytogenes
Ivb
Pied de porc
Viandes &
charc.
12_IAA_942.2
97
L. monocytogenes
Ivb
Maki de saumon
Poissons &
crust.
12_IAA_897.2
98
L. monocytogenes
Ivb
Farce lapin
Viandes &
charc.
12_IAA_914.1
100
L. monocytogenes
IIa
Risotto
Plats cuisin. /
Mélanges div.
12_IAA_586.2
48h
72h
24h à 37°C
24h à 37°C
37°C 37°C
puis 24h à
puis 48h à
T° ambiante
T° ambiante
N°
Souche
Sérotype /
Groupe PCR
Emplacement
souchothèque /
Matrice
Catégorie
matrice
12_IAA_597.3
Géloses
4h
37°C
6h
37°C
24h
37°C
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
+
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ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
+
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+
+
+
+
+
+
+
N° dossier
101
L. monocytogenes
Ivb
Rillettes
Viandes &
charc.
102
L. monocytogenes
IIa
Jambon sec
Viandes &
charc.
12_IAA_750.1
104
L. monocytogenes
IIa
Pâté de campagne
Viandes &
charc.
12_IAA_657.1
105
L. monocytogenes
IIa
Haché de veau cuit
Viandes &
charc.
12_IAA_386.1
106
L. monocytogenes
IIa
Emincé de veau cuit
Viandes &
charc.
12_IAA_246.3
107
L. monocytogenes
IIa
Filet mignon de porc
Viandes &
charc.
12_IAA_492.1
108
L. monocytogenes
IIa
Steak haché cuit
Viandes &
charc.
12_IAA_116.1
109
L. monocytogenes
Ivb
Rillettes de canard
Viandes &
charc.
12_IAA_462.1
111
L. monocytogenes
IIa
Terrine de porc
Viandes &
charc.
12_IAA_203.1
115
L. monocytogenes
Ivb
Shake
Produits laitiers
12_IAA_403.2
116
L. monocytogenes
IIa
Jambon de pays
Viandes &
charc.
12_IAA_313.3
117
L. monocytogenes
IIa
Onglet cru
Viandes &
charc.
12_IAA_24.2
118
L. monocytogenes
IIa
Bûche
Pâtisseries
12_IAA_29.1
119
L. monocytogenes
IIa
Foie
gras/gambas/quinoa
Plats cuisin. /
Mélanges div.
12_IAA_22.1
120
L. monocytogenes
IIa
Steak haché
Viandes &
charc.
%8_El49
121
L. monocytogenes
IIa
Salade d'écrevisse
Poissons &
crust.
12_IAA_11940.2
124
L. monocytogenes
IIb
Saucisse de
strasbourg
Viandes &
charc.
12_IAA_11375.2
126
L. monocytogenes
L
Saucisse fumée
Viandes &
charc.
12_IAA_11367.2
128
L. monocytogenes
Ivb
Faux filet
Viandes &
charc.
12_IAA_10061.2
48h
72h
24h à 37°C
24h à 37°C
37°C 37°C
puis 24h à
puis 48h à
T° ambiante
T° ambiante
N°
Souche
Sérotype /
Groupe PCR
Emplacement
souchothèque /
Matrice
Catégorie
matrice
12_IAA_7539.10
Géloses
4h
37°C
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
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+
+
+
+
+
+
+
6h
37°C
24h
37°C
N° dossier
132
L. monocytogenes
L
Soubressade
Viandes &
charc.
136
L. monocytogenes
IIc
Steak
Viandes &
charc.
12_IAA_6407.1
137
L. monocytogenes
IIa
Chiffonnette
Environnement
12_IAA_6013.1
139
L. monocytogenes
IIa
Treaming
Viandes &
charc.
12_IAA_5615.2
141
L. monocytogenes
IIa
Soubressade
Viandes &
charc.
12_IAA_2791.1à5
143
L. monocytogenes
IIa
Cheveux d'ange
Viandes &
charc.
12_IAA_2476.1
144
L. monocytogenes
IIa
Haché de bœuf
Viandes &
charc.
12_IAA_1626.2
145
L. monocytogenes
IIa
Lait de chèvre
Produits laitiers
12_IAA_1630.4
149
L. monocytogenes
IIa
Chiffonnette
Environnement
12_IAA_274.6
152
L. monocytogenes
IIa
Poisson
Poissons &
crust.
P1D48_Etude_Aloa_05_08
153
L. monocytogenes
IIa
Fenouil
Fruits & Lég.
1771.1_Etude_Aloa_05_08
154
L. monocytogenes
Ivb
Fromage
Produits laitiers
583.4_Etude_Aloa_05_08
155
L. monocytogenes
IIa
Lait
Produits laitiers
158
L. monocytogenes
IIb
radis
Fruits & Lég.
Etude_Aloa_05_08
159
L. monocytogenes
Ivb
Fromage
Produits laitiers
160
L. monocytogenes
IIa
Poireaux
Fruits & Lég.
1203.8_Etude_Aloa_05_08
161
L. monocytogenes
1/2a
Saumon fumé
Poissons &
crust.
Etude_Aloa_05_08
+
+
+
+
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+
+
48h
72h
24h à 37°C
24h à 37°C
37°C 37°C
puis 24h à
puis 48h à
T° ambiante
T° ambiante
+
+
+
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N°
Souche
Sérotype /
Groupe PCR
Emplacement
souchothèque /
Matrice
Catégorie
matrice
Etude_Aloa_05_08
Géloses
4h
37°C
6h
37°C
24h
37°C
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
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ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
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+
+
+
+
+
+
N° dossier
162
L. monocytogenes
1/2a
Salade de poisson
Viandes &&
Poissons
crust.
164
L. monocytogenes
1/2c
Chiffonnette
Environnement
Etude_Aloa_05_08
165
L. monocytogenes
1/2a
Chiffonnette
Environnement
Etude_Aloa_05_08
166
L. monocytogenes
1/2a
Eau de rinçage
Environnement
Etude_Aloa_05_08
167
L. monocytogenes
1/2a
Chiffonnette
Environnement
Etude_Aloa_05_08
168
L. monocytogenes
4b
Lait
Produits laitiers
Etude_Aloa_05_08
170
L. monocytogenes
1/2a
Fromage
Produits laitiers
Etude_Aloa_05_08
171
L. monocytogenes
1/2a
Fromage
Produits laitiers
Etude_Aloa_05_08
172
L. monocytogenes
1/2b
Fromage
Produits laitiers
Etude_Aloa_05_08
173
L. monocytogenes
1/2c
Foie de porc
Viandes &
charc.
Etude_Aloa_05_08
174
L. monocytogenes
4b
viande hachée
Viandes &
charc.
Etude_Aloa_05_08
175
L. monocytogenes
1/2a
kebab de veau
Viandes &
charc.
Etude_Aloa_05_08
176
L. monocytogenes
IIa
Eclair chocolat
Pâtisseries
11_IAA_11897.1
177
L. monocytogenes
Ivb
espadon
Poissons &
crust.
11_IAA_603.1
180
L. monocytogenes
IIa
Salade composée
Fruits & Lég.
11_IAA_590.1
181
L. monocytogenes
IIa
Moka café
Pâtisseries
11_IAA_955.2
182
L. monocytogenes
IIa
Avocat crevettes
Plats cuisin. /
Mélanges div.
11_IAA_880.1
183
L. monocytogenes
Ivb
Mille feuille
Pâtisseries
11_IAA_987.1
185
L. monocytogenes
IIa
Sushi crevette
Poissons &
crust.
11_IAA_1695.2
48h
72h
24h à 37°C
24h à 37°C
37°C 37°C
puis 24h à
puis 48h à
T° ambiante
T° ambiante
N°
Souche
Emplacement
souchothèque /
Sérotype /
Groupe PCR
Matrice
Catégorie
matrice
Viandes
& /
Plats
cuisin.
Mélanges div.
11_IAA_218.1
Géloses
4h
37°C
6h
37°C
24h
37°C
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
+
+
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ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
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ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
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+
+
N° dossier
187
L. monocytogenes
IIa
Salade pomme de
terre hareng
188
L. monocytogenes
IIb
Macédoine de légume
Fruits & Lég.
11_IAA_2239.2
189
L. monocytogenes
IIa
Chiffonnette
Environnement
11_IAA_2438.1
190
L. monocytogenes
IIa
Pomme de
terre/saumon
Plats cuisin. /
Mélanges div.
11_IAA_2464.1
191
L. monocytogenes
IIa
Salade endive thon
Plats cuisin. /
Mélanges div.
11_IAA_2387.2
192
L. monocytogenes
Ivb
Paris Brest
Pâtisseries
11_IAA_2898.2
193
L. monocytogenes
Ivb
Betterave
Fruits & Lég.
11_IAA_3200.5
194
L. monocytogenes
IIa
Betterave
Fruits & Lég.
11_IAA_3709.6
195
L. monocytogenes
Ivb
Chiffonnette
Environnement
11_IAA_3098.2
196
L. monocytogenes
IIa
Gland
Pâtisseries
11_IAA_4231.1
197
L. monocytogenes
IIc
Chiffonnette
Environnement
11_IAA_4403.1
198
L. monocytogenes
IIa
Chiffonnette
Environnement
11_IAA_5027.5
199
L. monocytogenes
IIa
Ecouvillon
Environnement
11_IAA_5027.16
200
L. monocytogenes
IIa
Eau de rinçage
Environnement
11_IAA_5027.20
202
L. monocytogenes
Ivb
Salade Tailandaise
Plats cuisin. /
Mélanges div.
11_IAA_5419.1
203
L. monocytogenes
IIa
Minestrone
Fruits & Lég.
11_IAA_5745.3
205
L. monocytogenes
IIa
Lait
Produits laitiers
11_IAA_6104.3
206
L. monocytogenes
Ivb
Betterave
Fruits & Lég.
11_IAA_6139.9
207
L. monocytogenes
Ivb
Gland
Pâtisseries
11_IAA_6103.1
48h
72h
24h à 37°C
24h à 37°C
37°C 37°C
puis 24h à
puis 48h à
T° ambiante
T° ambiante
N°
Souche
Sérotype /
Groupe PCR
Emplacement
souchothèque /
Matrice
Catégorie
matrice
11_IAA_6998.2
Géloses
4h
37°C
6h
37°C
24h
37°C
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
+
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ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
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ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
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ALOA
TSYE
+
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ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
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ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
+
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+
+
+
+
+
N° dossier
208
L. monocytogenes
Ivb
Sushi
Viandes &&
Poissons
crust.
209
L. monocytogenes
IIa
Tarama saumon
Poissons &
crust.
11_IAA_7209.2
210
L. monocytogenes
IIa
Eclair chocolat
Pâtisseries
11_IAA_6860.1
211
L. monocytogenes
IIb
Eclair chocolat
Pâtisseries
11_IAA_7895.1
212
L. monocytogenes
IIa
Salade de l'adour
Plats cuisin. /
Mélanges div.
11_IAA_7990.1
213
L. monocytogenes
Ivb
Chou fleur cuit
Fruits & Lég.
11_IAA_8206.3
214
L. monocytogenes
Ivb
Taboulé agrume
Fruits & Lég.
11_IAA_8479.1
215
L. monocytogenes
IIa
filet fletan cru
Poissons &
crust.
11_IAA_8781.2
216
L. monocytogenes
IIa
Céleri rémoulade
Fruits & Lég.
11_IAA_8782.1
217
L. monocytogenes
IIa
Salade piémontaise
Plats cuisin. /
Mélanges div.
11_IAA_8835.2
218
L. monocytogenes
IIa
Salade pomme de
terre betterave
Fruits & Lég.
11_IAA_9190.2
219
L. monocytogenes
IIb
Paris Brest
Pâtisseries
11_IAA_9217.1
220
L. monocytogenes
IIa
Pizza
Plats cuisin. /
Mélanges div.
11_IAA_9599.1
221
L. monocytogenes
IIa
Salade vendange
Plats cuisin. /
Mélanges div.
11_IAA_10307.3
222
L. monocytogenes
IIb
Brandade
Poissons &
crust.
11_IAA_10599.2
223
L. monocytogenes
IIa
Blinis saumon
Poissons &
crust.
11_IAA_10644.1
224
L. monocytogenes
IIa
Pizza thon
Plats cuisin. /
Mélanges div.
11_IAA_11124.4
225
L. monocytogenes
IIa
Carottes
Fruits & Lég.
13_IAA_261.2
226
L. monocytogenes
IIa
Saumon
Poissons &
crust.
13_IAA_263.1
48h
72h
24h à 37°C
24h à 37°C
37°C 37°C
puis 24h à
puis 48h à
T° ambiante
T° ambiante
N°
Souche
Sérotype /
Groupe PCR
Emplacement
souchothèque /
Matrice
Catégorie
matrice
11_IAA_9205-1
4h
37°C
6h
37°C
24h
37°C
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
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+
+
+
+
+
+
+
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
+
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+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
N° dossier
279
L. monocytogenes
IIa
Rillons
Viandes &
charc.
280
L. monocytogenes
IIc
Salade composée
nature
Fruits & Lég.
11_IAA_590-1
281
L. monocytogenes
IIa
Tarama aux œufs de
truite
Poissons &
crust.
11_IAA_368-4
282
L. monocytogenes
IVb
Chiffonnette chambre
Environnement
froide
283
L. monocytogenes
IIa
Viande hachée
Viandes &
charc.
10_IAA_3109-1
284
L. monocytogenes
IIa
Salade de perles
provençales
Fruits & Lég.
10_IAA_9228-1
285
L. monocytogenes
IIa
Cuisse de dinde cuite
Viandes &
charc.
10_IAA_9228-2
286
L. monocytogenes
IIa
Taboulé
Fruits & Lég.
10_IAA_6235-1
287
L. monocytogenes
IIa
Salade composée
Fruits & Lég.
10_IAA_7665-1
288
L. monocytogenes
IIa
289
L. monocytogenes
IIa
290
L. monocytogenes
IIa
291
L. monocytogenes
IIa
Rôti de porc cuit
Viandes &
charc.
10_IAA_259-1
292
L. monocytogenes
IIa
Rôti de porc cuit
Viandes &
charc.
10_IAA_259-2
293
L. monocytogenes
IIa
Rôti de porc cuit
Viandes &
charc.
10_IAA_259-3
294
L. monocytogenes
IVb
Chiffonnette trancheur
Environnement
à jambon
10_IAA_2805-4
295
L. monocytogenes
IVb
Laboratoire patisserie Environnement
10_IAA_2806-2
296
L. monocytogenes
IVb
Chiffonnette plan de
travail cuisine
Environnement
10_IAA_2585-6
297
L. monocytogenes
IIa
Chair à tomates
Viandes &
charc.
10_IAA_1842-1
Concombre
Fruits & Lég.
vinaigrette
Salade
Plats cuisin. /
jambon/macédoine/m
Mélanges div.
ayonnaise
Chiffonnette
Environnement
trancheuse
Géloses
11_IAA_368-16
10_IAA_8301-1
10_IAA_7963-1
10_IAA_4027-3
48h
72h
24h à 37°C
24h à 37°C
37°C 37°C
puis 24h à
puis 48h à
T° ambiante
T° ambiante
N°
Souche
Sérotype /
Groupe PCR
Emplacement
souchothèque /
Matrice
Catégorie
matrice
10_IAA_1842-1
Géloses
4h
37°C
6h
37°C
24h
37°C
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
+
+
+
+
+
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+
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+
+
+
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+
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+
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+
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+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
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+
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+
+
+
+
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
N° dossier
298
L. monocytogenes
IIb
Chair à tomates
Viandes &
charc.
299
L. monocytogenes
IIa
Chair à tomates
Viandes &
charc.
10_IAA_2133-1
300
L. monocytogenes
IIa
Chiffonnette hachoir
Environnement
10_IAA_2133-2
301
L. monocytogenes
IIa
Chiffonnette labo
prépa chair
Environnement
10_IAA_2133-3
302
L. monocytogenes
IIb
Sol laboratoire
Environnement
10_IAA_2251-2
303
L. monocytogenes
IVb
Rosbeef mixé cuit
Viandes &
charc.
10_IAA_2240-1
304
L. monocytogenes
IVb
Rosbeef mixé cuit
Viandes &
charc.
10_IAA_2241-1
305
L. monocytogenes
IIa
Farce à légumes
Viandes &
charc.
09_IAA_11160-2
306
L. monocytogenes
IIa
Farce à légumes
Viandes &
charc.
09_IAA_11160-3
307
L. monocytogenes
IIa
Foie gras
Viandes &
charc.
09_IAA_5107-2
308
L. monocytogenes
IIa
Foie gras
Viandes &
charc.
09_IAA_5391-3
309
L. monocytogenes
IIc
Foie gras
Viandes &
charc.
09_IAA_5391-4
310
L. monocytogenes
IIa
Foie gras
Viandes &
charc.
09_IAA_5391-4
311
L. monocytogenes
IIa
Harengs + pommes
de terre
Plats cuisin. /
Mélanges div.
09_IAA_9136-1
312
L. monocytogenes
IIc
Poitrine crue de veau
Viandes &
charc.
09_IAA_7592-7
48h
72h
24h à 37°C
24h à 37°C
37°C 37°C
puis 24h à
puis 48h à
T° ambiante
T° ambiante
ANNEXE 8
Résultats des essais :
Souches non cibles
(Étude d’extension concernant Fast Rhamnose : 2013)
Annexe 8 - Page 1/9
Etude d'exclusivité
N°
Souche
Matrice
Emplacement
souchothèque /
Géloses
N° dossier
247
L. grayi
Chifonnette
11_IAA_3454.3
269
L. grayi
IAA
IAA
272
227
228
L. grayi
L. innocua
L. innocua
12L:6642
Chiffonnette
Lait de chèvre
TSYE
ALOA
1322/16/26
TSYE
12_IAA_11849.4
12_IAA_107.6
L. innocua
Buvard lait
12_IAA_702.3
236
L. innocua
Lait de chèvre
12_IAA_5442.2
237
L. innocua
Chiffonnette
12_IAA_5928.9
238
L. innocua
Chiffonnette
12_IAA_6095.1
239
L. innocua
Chiffonnette
12_IAA_7164.3
240
L. innocua
Chiffonnette
12_IAA_7164.10
246
L. innocua
Chifonnette
11_IAA_3454.5
249
L. innocua
Chifonnette
11_IAA_4403.2
250
L. innocua
Compost
11_IAA_4713.1
256
L. innocua
Ecouvillon
Etude EC17024
257
L. innocua
Lait
11_IAA_903.3
L. innocua
Abats
TSYE
ALOA
229
267
ALOA
13_IAA_354.3
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
4h
6h
24h 48h 72h
24h à 37°C
24h à 37°C
37°C 37°C 37°C 37°C 37°C puis 24h à
puis 48h à
T° ambiante
T° ambiante
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
-
+
+
+
+
+
+
+
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+
+
-
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
-
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
-
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
-
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
-
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
-
Informations
complémentaires
(si nécessaire)
confirmation par galerie biochimique
Annexe 8 - Page 2/9
N°
Souche
Matrice
Emplacement
souchothèque /
Géloses
N° dossier
230
L. ivanovii
Minerai
12_IAA_3080.1
231
L. ivanovii
Buvard lait
12_IAA_4144.3
232
L. ivanovii
Lait de chèvre
12_IAA_4145.6
233
L. ivanovii
Lait de chèvre
12_IAA_4144.2
234
L. ivanovii
Buvard lait
12_IAA_4925.6
235
L. ivanovii
Lait de chèvre
12_IAA_4925.3
241
L. ivanovii
Agneau
12_IAA_9230.5
242
L. ivanovii
Viande hallal
12_IAA_9252.2
245
L. ivanovii
Merguez
11_IAA_2836.2
252
L. ivanovii
Cote d'agneau
11_IAA_7583.1
253
254
255
L. ivanovii
L. ivanovii
L. ivanovii
Filet d'agneau
Veau
Farce de veau
11_IAA_9451.3
11_IAA_10509.1
11_IAA_10151.1
274
L. ivanovii
12L:5655
1324/16/28
275
L. ivanovii
Foin
1337/16/41
276
277
L. ivanovii
L. ivanovii
Foie
Placenta bovin
656/8/8
1286/15/71
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
4h
6h
24h 48h 72h
24h à 37°C
24h à 37°C
37°C 37°C 37°C 37°C 37°C puis 24h à
puis 48h à
T° ambiante
T° ambiante
-
-
-
-
-
-
-
Informations
complémentaires
(si nécessaire)
Annexe 8 - Page 3/9
N°
Souche
Matrice
Emplacement
souchothèque /
Géloses
N° dossier
278
L. ivanovii
Lait de chèvre
13_IAA_741.3
313
L. ivanovii
Agro-alimentaire
AES 2.18
314
L. ivanovii
Environnement
AES 2.6
259
L. seeligeri
Ecouvillon
E10P48
270
L. seeligeri
Placenta vache
L. seeligeri
Foin
586/7/19
273
L. seeligeri
12L:5445
1326/16/30
243
L. welshimeri
Chiffonnette
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
11_IAA_1455.3
244
L. welshimeri
Chifonnette
11_IAA_2803.4
248
L. welshimeri
Chifonnette
11_IAA_4403.1
251
260
261
L. welshimeri
L. welshimeri
L. welshimeri
Chiffonnette
Ecouvillon
Poisson
11_IAA_6268.1
E10P48
P14P48
L. welshimeri
Steak haché
13_IAA_527.1
Tartare
TSYE
TSYE
13_IAA_522.1
T16
TSYE
ALOA
TSYE
263
L. welshimeri
ALOA
ALOA
P11O48
265
TSYE
TSYE
Boisson
Minerai
TSYE
ALOA
ALOA
L. welshimeri
L. welshimeri
ALOA
ALOA
262
264
TSYE
ALOA
317/3/74
271
ALOA
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
4h
6h
24h 48h 72h
24h à 37°C
24h à 37°C
37°C 37°C 37°C 37°C 37°C puis 24h à
puis 48h à
T° ambiante
T° ambiante
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
Informations
complémentaires
(si nécessaire)
Annexe 8 - Page 4/9
N°
Souche
Matrice
Emplacement
souchothèque /
Géloses
N° dossier
266
L. welshimeri
Soubressade
13_IAA_501.1_5
268
L. welshimeri
Cheveux d'ange
13_IAA_412.3
E1
Bacillus cereus
Taboulé
1400/17/23
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
ALOA
TSYE
E2
Bacillus cereus
Blé
1399/17/22
ALOA
TSYE
E30
Bacillus cereus
ATCC 11778
2644/32/52
ALOA
TSYE
E41
Bacillus cereus
IAA
IAA
ALOA
TSYE
E42
Bacillus cereus
Flocon purée
déshydratée
IAA
ALOA
TSYE
E44
Bacillus cereus
IAA
LDA36
ALOA
TSYE
E45
Bacillus cereus
Bactério des eaux
286.5
Bacillus circulans
Agro-alimentaire
AES BA 10.9
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
-
-
-
-
-
-
-
+
+
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
ALOA
TSYE
Informations
complémentaires
(si nécessaire)
Aspect gélose ALOA : non
caractéristique (nappe blanche)
caractéristique (nappe blanche et
verte)
caractéristique (petite nappe blanche)
Aspect gélose ALOA : colonies vertes
et blanches et nappe blanche
pas de croissance
ALOA
TSYE
E49
4h
6h
24h 48h 72h
24h à 37°C
24h à 37°C
37°C 37°C 37°C 37°C 37°C puis 24h à
puis 48h à
T° ambiante
T° ambiante
-
+
+
+
+
+
+
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
Annexe 8 - Page 5/9
N°
Souche
Matrice
Emplacement
souchothèque /
Géloses
N° dossier
E54
Bacillus circulans
Industrie Laitière
ISHA BAC 2.1
Bacillus lentus
Agro-alimentaire
ALOA
AES BA 16.2
TSYE
E3
Bacillus mycoïdes
Radis bio
ALOA
1398/17/2
TSYE
E48
Bacillus mycoides
Environnement
ALOA
AES BA 8.1
TSYE
E58
Bacillus mycoïdes
Salade camargaise
13_IAA_1115.1
ALOA
TSYE
E34
Bacillus macerans
Ferment lactique
93/1/12
E31
Bacillus megaterium
Souchothèque IAA
14/01/1993
1401/17/24
ALOA
TSYE
E50
Bacillus megaterium
Agro-alimentaire
AES BA 9.7
ALOA
TSYE
E4
Bacillus subtilis
ATCC 6633
1791/22/9
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
+
+
+
+
+
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
pas de croissance
ALOA
TSYE
caractéristique (colonies blanches
frangées à halo et qqs colonies vertes)
caractéristique (nappe blanche et qqs
très petites colonies vertes pâles)
caractéristique (nappe blanche et qqs
colonies vertes)
pas de croissance
ALOA
TSYE
Informations
complémentaires
(si nécessaire)
pas de croissance
ALOA
TSYE
E51
4h
6h
24h 48h 72h
24h à 37°C
24h à 37°C
37°C 37°C 37°C 37°C 37°C puis 24h à
puis 48h à
T° ambiante
T° ambiante
-
-
-
-
-
-
-
caractéristique (toute petite nappe
blanche)
Annexe 8 - Page 6/9
N°
Souche
Matrice
Emplacement
souchothèque /
Géloses
N° dossier
E35
Bacillus subtilis
Souchothèque IAA
1993
Brevibacillus laterosporus
Fromage chèvre au
lait cru
13_IAA_698.1
ALOA
TSYE
E52
Brevibacterium casei
Produit laitier
ISHA BRE 1.1
E40
Brochotrix
Souchothèque IAA
2001
ALOA
1421/17/44
TSYE
E5
Candida magnoliaeae
ATCC 10231
Corynebacteriaceae sp
Abat de volaille
Enterococcus durans
Contamination de
levures sèches
AES ENT 10.1
ALOA
TSYE
E56
Enterococcus durans
Ovoproduit
ADRIA Ad182
ALOA
TSYE
E7
ATCC 29212
1786/22/4
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
ALOA
TSYE
caractéristique (colonies vertes
frangées à halo)
pas de croissance
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
caractéristique (nappe verte et qqs
colonies isolées vertes)
pas de croissance
-
-
-
-
-
-
-
pas de croissance
ALOA
617/7/50
TSYE
E46
-
ALOA
1796/22/14
TSYE
E6
-
ALOA
TSYE
Informations
complémentaires
(si nécessaire)
pas de croissance
ALOA
1402/17/25
TSYE
E43
4h
6h
24h 48h 72h
24h à 37°C
24h à 37°C
37°C 37°C 37°C 37°C 37°C puis 24h à
puis 48h à
T° ambiante
T° ambiante
-
-
-
-
-
-
-
-
-
+
+
+
+
+
-
-
+
+
+
+
+
-
-
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
caractéristique (nappe verte et petites
colonies blanches)
verte)
caractéristique (nappe verte, toutes
petites colonies)
Annexe 8 - Page 7/9
N°
Souche
Matrice
Emplacement
souchothèque /
Géloses
N° dossier
E8
Lait de vache
ALOA
1412/17/35
TSYE
E9
Découpe canard
ALOA
1413/17/36
TSYE
E10
CIP 5855
ALOA
1411/17/34
TSYE
E47
Enterococcus hirae
CCM2423
AES ENT 5.1
ALOA
TSYE
E55
Enterococcus hirae
Eau
ADRIA Ad1362
ALOA
TSYE
E13
Lactobacillus acidophilus
Produit laitier
1415/17/38
ALOA
TSYE
E15
Lactobacillus casei
Poudre de lait
1416/17/39
Leuconostoc
sérum lait
IAA
Micrococcus luteus
IAA
1447/17/71
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
ALOA
TSYE
Informations
complémentaires
(si nécessaire)
petites colonies)
petites colonies et qqs colonies vertes
isolées)
petites colonies et qqs colonies vertes
isolées)
caractéristique (colonies vertes à
centre blanc)
verte)
petites colonies)
pas de croissance
-
+
+
+
+
+
+
pas de croissance
ALOA
TSYE
E29
+
ALOA
TSYE
E28
4h
6h
24h 48h 72h
24h à 37°C
24h à 37°C
37°C 37°C 37°C 37°C 37°C puis 24h à
puis 48h à
T° ambiante
T° ambiante
+
+
+
+
+
+
+
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
caractéristique (nappe petites colonies
jaunes)
Annexe 8 - Page 8/9
N°
Souche
Matrice
Emplacement
souchothèque /
Géloses
N° dossier
E16
Pediococcus pentosaceus
Ferment lactique
ALOA
1522/18/64
TSYE
E18
Rhodococcus equi
Matrice carnée
ALOA
1328/16/32
TSYE
E19
Sacharomyces cerevisiae
Bière
ALOA
EAU
TSYE
E20
Lait de vache
ALOA
1310/16/14
TSYE
E21
Lait de vache
ALOA
1307/16/11
TSYE
E32
ATCC 25923
Lait de vache
ALOA
284/3/41
TSYE
E38
Souchothèque BV
ALOA
1407/17/30
TSYE
E53
Staphylococcus epidermidis
Produit laitier
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
+
+
-
-
-
-
-
+
+
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
+
+
-
-
-
-
-
ISHA STA 2.1
+
+
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
pas de croissance
ALOA
TSYE
Informations
complémentaires
(si nécessaire)
petites colonies)
caractéristique (colonies blanches
muqueuses)
caractéristique (toutes petites colonies
blanches)
caractéristique (colonies jaunâtres)
caractéristique (colonies jaunâtres)
pas de croissance
ALOA
1785/22/3
TSYE
E37
4h
6h
24h 48h 72h
24h à 37°C
24h à 37°C
37°C 37°C 37°C 37°C 37°C puis 24h à
puis 48h à
T° ambiante
T° ambiante
+
+
-
-
-
-
-
caractéristique (colonies vertes pâles
et blanchâtres)
caractéristique (colonies vertes pâles
et blanchâtres)
Annexe 8 - Page 9/9
N°
Souche
Matrice
Emplacement
souchothèque /
Géloses
N° dossier
E22
Staphylococcus intermedius
IAA
1321/16/25
Staphylococcus lugdunensis
Lait de chèvre
89/1/8
ALOA
TSYE
E39
Streptococcus agalactiae
Lait de vache
16/0/16
E33
Streptococcus bovis
Rein de bovin
1499/18/41
ALOA
TSYE
E23
Streptococcus dysgalactiae
Lait de vache
279/3/96
Streptococcus uberis
Lait de vache
772/9/43
+
-
-
-
-
-
+
+
-
-
-
-
-
+
+
-
-
-
-
-
-
+
+
+
+
+
+
-
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
pas de croissance
+
+
-
-
-
-
-
pas de croissance
ALOA
TSYE
caractéristique (colonies muqueuses
blanchâtres)
pas de croissance
ALOA
TSYE
E24
+
ALOA
TSYE
Informations
complémentaires
(si nécessaire)
pas de croissance
ALOA
TSYE
E36
4h
6h
24h 48h 72h
24h à 37°C
24h à 37°C
37°C 37°C 37°C 37°C 37°C puis 24h à
puis 48h à
T° ambiante
T° ambiante
-
-
+
+
+
+
+
verte)

Rapport de synthèse AES 10-03 09-00 (fr) - NF VALIDATION

Transcription

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