HemosIL - Werfen

HemosIL®
Factor VIII deficient plasma - 0020012800
ENGLISH - Insert revision 11/2016
Intended use
Preparation
Limitations/interfering substances
HemosIL Factor VIII deficient plasma is human plasma, depleted of Factor VIII, which is
intended for the in vitro diagnostic quantitative determination of Factor VIII activity in citrated
plasma, based on the activated partial thromboplastin time (APTT) assay, on the ACL TOP®
Family analyzers. HemosIL Factor VIII deficient plasma is indicated for use on patients who are
suspected of congenital or acquired deficiency based on the activated partial thromboplastin
time (APTT) assay results.
Dissolve the contents of each vial with 1 mL of CLSI Type CLR water or equivalent.6 Replace
the stopper and swirl gently. Make sure of the complete reconstitution of the product. Keep
the plasma at 15-25°C for 30 minutes and invert to mix before use. Do not shake. Avoid foam
formation.
Samples with excessive hemolysis, icterus, or lipemia, should not be used; Factor VIII results on
the ACL TOP Family are not affected by hemoglobin up to 530 mg/dL, triglycerides up to 2000
mg/dL, Bilirubin up to 150 mg/dL and Factor VIII inhibitors up to 0.1BU. Results are not affected
by the presence of Lupus anticoagulant antibodies.
The performance of this assay has not been validated in pediatric patients.
Summary and principle
FVIII is a plasma glycoprotein, with a complex polypeptide composition, which is synthesized in
the liver and circulates in plasma in a non-covalent complex with von Willebrand Factor (VWF).
During coagulation FVIII is converted to the active form, FVIIIa, through limited proteolysis by
thrombin or Factor Xa (FXa). FVIIIa functions as a cofactor for Factor IX (FIX), accelerating (up
to 200,000 - fold), the conversion of FX to FXa by FIXa.
Congenital deficiency of FVIII leads to Hemophilia A, an inherited sex-linked recessive disorder
that causes severe bleeding. The severity of this bleeding disorder is inversely related to the
FVIII concentration. Hemophilia A patients are generally classified according to their FVIII
activity into three categories: <1% (severe hemophilia), between 1 – 4% (moderate hemophilia)
and between 5 – 25% (mild hemophilia).1-5
Decreased FVIII levels may also be associated to the von Willebrand Disease (VWD) or
acquired secondarily due to other diseases such as liver disease or Disseminated Intravascular
Coagulation (DIC).1,2
Factor VIII activity in a patient’s plasma is determined by performing a modified activated partial
thromboplastin time test (APTT). Patient plasma is diluted and added to plasma deficient
in Factor VIII. Correction of the clotting time of the deficient plasma is proportional to the
concentration (% activity) of that factor in the patient plasma interpolated from a calibration
curve.
Composition
The Factor VIII deficient plasma kit consists of:
VIII Factor VIII deficient plasma (Cat. No. 0020012810): 10 x 1 mL vials of lyophilized human
plasma that has been artificially depleted of Factor VIII containing buffer and stabilizers.
The residual Factor VIII activity is less than or equal to 1% whereas von Willebrand Factor
and the remaining intrinsic pathway factor levels are normal.
PRECAUTIONS AND WARNINGS:
The Factor VIII deficient plasma contains human source material that tested non-reactive for
HIV antibody, Hepatitis B Surface Antigen and Anti-HCV at the donor stage. This product, as
with all human based specimens, should be handled with proper laboratory safety procedures to
minimize the risk of transmission of infectious disease.
The Factor VIII deficient plasma is not classified as hazardous.
Hazard class: None
Hazard statements: None
Precautionary statements: None
Supplemental hazard information:
≈ 100% of the mixture consists of component of unknown acute toxicity (oral, dermal, inhalation)
for the human health and unknown hazard to the aquatic environment.
This product is For in vitro Diagnostic Use.
Reagent storage and stability
Unopened deficient plasma is stable until the expiration date shown on the vial when stored at 2-8°C.
Stability after reconstitution: 24 hours at 2-8°C in the closed original vial or 24 hours at 15°C on
the ACL TOP Family or 3 weeks at -20°C in the closed original vial. Frozen deficient plasma
may be thawed once at 37°C and gently mixed before use. Do not refreeze.
For optimal stability remove deficient plasma from the system and store it at 2-8°C in the closed
original vial.
Instrument/test procedures
Refer to the appropriate IL instrument’s Operator’s Manual and/or Application/Reference Manual
for the complete assay procedure instructions.
Specimen collection and preparation
Nine parts of freshly drawn venous blood are collected into one part trisodium citrate. Refer to
CLSI Document H21-A5 for further instructions on specimen collection, handling and storage.7
Additional reagents and control plasmas
The following are not supplied with the kit and must be purchased separately.
Americas and Pacific Rim
Europe
Cat. No.
Cat. No.
Calibration Plasma
0020003700
Normal Control 0020003120
0020003110
Special Test Control Level 2
0020012000
SynthASil0020006800
Calcium Chloride 0.020 M
0020006900
APTT-SP (liquid)
0020006300
Factor diluent
0009757600
NOTE: Each laboratory should validate their choice of reagent/instrument combination.
Quality control
Normal and abnormal controls are recommended for a complete quality control program.8
Normal Control and Special Test Control Level 2 are designed for this program. Each laboratory
should establish its own mean and standard deviation and should establish a quality control
program to monitor laboratory testing. Controls should be analyzed at least once every 8 hour
shift in accordance with good laboratory practice. Refer to the instrument’s Operator’s Manual for
additional information. Refer to Westgard et al for identification and resolution of out-of-control
situations.9,10
Expected values11
Factor VIII: 50-150% (0.50-1.50 IU)
Due to the many variables which may affect clotting times (including the population age), each
laboratory should verify its own normal range.
Performance characteristics
Precision:
Precision was assessed utilizing 3 lots of plasma on representative members of the ACL
TOP Family (ACL TOP, ACL TOP 700 and ACL TOP 500 CTS). Precision was evaluated in
accordance with CLSI EP05-A212, for 20 days, with 2 runs per day and 2 replicates per run for
each sample level (n=80/instrument/lot), using a specific lot of APTT reagent (APTT-SP and
SynthASil) and both normal and abnormal samples. Test data from a representative instrument,
APTT reagent and plasma lot is included below.
ACL TOP Family
Mean (% FVIII) CV% (Within run)
Normal
Special Test Control Level 2
Low Sample I
Low Sample II
CV% (Total)
80.33.8
23.8
4.0
12.1
3.7
6.8
4.1
Correlation:
System
slope
intercept
r
3.9
5.5
5.2
6.4
Reference method
ACL TOP Family
1.112
-3.57
0.9923 HemosIL Factor VIII deficient
plasma with SynthASil
ACL TOP Family 0.913
0.56
0.9926 HemosIL Factor VIII deficient
plasma with APTT-SP
In field site studies, the following data were obtained using specific lots of Factor VIII deficient
plasma and APTT reagents:
System
slope
intercept
r
Reference method
ACL TOP Family
1.074
-4.83
0.9829 HemosIL Factor VIII deficient
plasma with SynthASil
ACL TOP Family
1.138
-9.31
0.9842 HemosIL Factor VIII deficient
plasma with SynthASil
ACL TOP Family
0.871
-0.25
0.9935 HemosIL Factor VIII deficient
plasma with APTT-SP
Analytical Range:
System
Results
Patient results may be expressed in % activity, IU or seconds.
ACL TOP Family with SynthASil
ACL TOP Family with APTT-SP
Factor VIII deficient plasma - 0020012800
0.1 – 150%
0.5 – 150%
DEUTSCH - Packungsbeilage Version 11/2016
Verwendung
Herstellung
Ergebnisse
Das HemosIL Faktor VIII Mangelplasma ist ein Humanplasma mit Mangel an Faktor VIII zur
Verwendung für die in vitro diagnostische quantitative Bestimmung der Faktor VIII Aktivität in
humanem Citratplasma, basierend auf der aktivierten partiellen Thromboplastinzeit (APTT)
Methode auf den Systemen der ACL TOP® Familie. Das HemosIL Faktor VIII Mangelplasma
dient der Testung von Patienten mit Verdacht auf einen angeborenen oder erworbenen FVIII
Mangel basierend auf den Ergebnissen der APTT Bestimmung.
Inhalt der Flasche mit 1 mL CLSI Wasser (CLRW) oder vergleichbarem (z.B. Aqua bidest.)
lösen.6 Die Flasche wieder verschließen, vorsichtig schwenken und das Lyophilisat vollständig
rekonstituieren. Das Plasma für 30 Minuten bei 15-25°C inkubieren und unter vorsichtigem
Schwenken vor der Verwendung erneut mischen. Nicht schütteln. Schaumbildung vermeiden.
Ergebnisse werden in % Aktivität, Sekunden und IU dargestellt.
Lagerung und Haltbarkeit
Testprinzip und Zusammenfassung
Faktor VIII ist ein Plasma-Glykoprotein, mit einem komplexen Polypeptidaufbau, welches
hauptsächlich in der Leber synthetisiert wird und im Plasma als nicht-kovalenter Komplex mit
von Willebrand Faktor (VWF) zirkuliert. Während des Gerinnungsvorgangs wird Faktor VIII durch
eine limitierte Proteolyse mittels Thrombin oder Faktor Xa (FXa) in die aktivierte Form Faktor
VIIIa umgewandelt. FVIIIa fungiert als Kofaktor für Faktor IX (FIX), was die Umwandlung von FX
zu FXa durch FIXa um bis zu 200.000-fach beschleunigt.
Ein kongenitaler Faktor VIII-Mangel führt zur Hämophilie A, einer hereditären
geschlechtsabhängigen rezessiven Gerinnungsstörung, die zu schweren Blutungen führt.
Der Schweregrad dieser Gerinnungsstörung steht in umgekehrtem Verhältnis zur Faktor
VIII-Aktivität. Patienten mit Hämophilie A werden generell in drei Kategorien eingeteilt: <1 %
(schwere Hämophilie), 1 – 4 % (moderate Hämophilie) und 5 – 25 % (leichte Hämophilie).1-5
Erniedrigte FVIII Konzentrationen können in Verbindung mit dem von Willebrand Syndrom
(VWS) stehen oder auch durch andere Erkrankungen wie Lebererkrankungen und
disseminierte intravasale Gerinnung (DIC) sekundär erworben werden.1,2
Der zur Ermittlung der Faktor VIII-Aktivität eines Patientenplasmas durchgeführte Test basiert
auf einer modifizierten aktivierten partiellen Thromboplastinzeit (APTT) Bestimmung. Hierbei
wird verdünntes Patientenplasma mit einem Mangelplasma gemischt. Die Verkürzung der
Gerinnungszeit ist proportional zum Gehalt (Aktivität %) des untersuchten Faktors in der
zugesetzten Probe. Die Menge des Faktors kann über eine Kalibrationskurve quantifiziert
werden.
Inhalt
Die Factor VIII deficient plasma Packung enthält:
VIII Factor VIII deficient plasma (Art. Nr. 0020012810): 10 x 1 mL Flaschen lyophilisiertes
Humanplasma mit artifiziell Mangel an FVIII, mit Puffer und Stabilisatoren. Die Faktor-VIIIAktivität beträgt maximal 1 % des Normalwerts, während der von Willebrand Faktor und die
anderen Faktoren des intrinsischen Gerinnungssystems im Normalbereich liegen.
WARNUNG:
Das Faktor VIII Mangelplasma enthält Bestandteile humanen Ursprungs, die bei der
Blutentnahme negativ auf HIV-Antikörper, Hepatitis-B-Antigen und HCV-Antigen getestet
wurden. Dieses Produkt sollte wie alle anderen Humanproben mit angemessenen
Sicherheitsvorkehrungen behandelt werden, um das Risiko der Übertragung von infektiösen
Krankheiten zu minimieren.
Das Faktor VIII Mangelplasma wird nicht als gefährlich eingestuft:
Gefahrenklasse: Keine
Gefahrenhinweise: Keine
Sicherheitssätze: Keine
Ergänzende Gefahrenmerkmale:
≈ 100% dieses Gemisches besteht aus Inhaltsstoffen, deren akute Toxizität (orale, dermale,
inhalatorische) für den Menschen und die Gewässer nicht bekannt ist.
Dieses Produkt ist nur für die in vitro Diagnostik geeignet.
Das ungeöffnete Mangelplasma ist bei Lagerung zwischen 2-8°C bis zu dem auf dem Etikett
angegebenen Verfallsdatum haltbar.
Haltbarkeit nach Rekonstitution:
• bei 2-8°C in der geschlossenen Originalflasche : 24 Stunden
• bei 15°C in Systemen der ACL TOP Familie: 24 Stunden
• bei -20°C in der geschlossenen Originalflasche : 3 Wochen
Eingefrorenes Mangelplasma bei 37°C auftauen und vor Gebrauch vorsichtig mischen. Nicht
erneut einfrieren.
Um eine optimale Stabilität zu gewährleisten, wird empfohlen das Reagenz nach Gebrauch aus
dem Gerät zu nehmen und in der geschlossenen Originalflasche im Kühlschrank bei 2-8°C zu
lagern.
Bestimmungsansatz
Die ausführliche Beschreibung des Bestimmungsansatzes ist dem IL Geräte-Bedienerhandbuch
und/oder dem Applikationshandbuch zu entnehmen.
Probenmaterial und Gewinnung
9 Teile frisches venöses Blut und 1 Teil Trinatriumcitratlösung werden sorgfältig in einem
silikonisierten Glasröhrchen gemischt. Hinweise zur Aufbereitung des Blutes sind den
Empfehlungen des Deutschen Instituts für Normung - DIN 58 905 – oder dem CLSI Dokument
H21-A5 zu entnehmen.7
Zusätzliche Reagenzien und Kontrollplasmen
Die folgenden Materialien sind nicht in der Packung enthalten und müssen zusätzlich bestellt
werden:
Amerikanischer und Pazifischer Raum Europa
Art. Nr.
Art. Nr.
Kalibrationsplasma0020003700
Normal-Kontroll-Plasma
0020003120 0020003110
Spezialtest-Kontrolle Bereich 2
0020012000
SynthASil0020006800
Kalziumchlorid 0,020 M
0020006900
APTT-SP (flüssig)
0020006300
Faktor Diluent
0009757600
Hinweis: Jedes Labor sollte seine Reagenz/Geräte Kombination validieren.
Qualitätskontrolle
Es ist gängige Laborpraxis, die Qualität der Analyse mit Kontrollmaterialien im normalen sowie
im pathologischen Bereich zu überprüfen.8 Es wird empfohlen, als Kontrollmaterial die oben
angegebenen Kontrollen zu verwenden. Jedes Labor sollte für das Qualitätskontroll-Programm
seinen eigenen Mittelwert und die Standardabweichung (s) ermitteln. Spätestens nach jeweils
8 Stunden sollte eine Qualitätskontrolle durchgeführt werden. Algorithmen zur Beurteilung
der Qualitätskontrollergebnisse siehe z.B. Westgard et al. 9,10 Siehe auch „Richtlinien der
Bundesärztekammer zur Qualitätssicherung laboratoriumsmedizinischer Untersuchungen“ in
der jeweils gültigen Fassung.
Einschränkungen
Stark hämolytische, ikterische oder lipämische Proben sollten nicht verwendet werden; Faktor
VIII Ergebnisse an den Systemen der ACL TOP Familie werden durch Konzentrationen an
Hämoglobin bis zu 530 mg/dL, Triglyceriden bis zu 2000 mg/dL, Bilirubin bis zu 150 mg/dL
und Faktor VIII Inhibitoren bis zu 0,1 BU nicht beeinflusst. Die Ergebnisse werden durch die
Anwesenheit von Lupus Antikoagulanz Antikörpern nicht beeinflusst.
Die Testcharakteristik wurde nicht mit pädiatrischen Patienten validiert.
Referenzbereiche11
Faktor VIII: 50-150 % (0,50-1,50 IU)
Aufgrund verschiedener Variablen, die die Gerinnungszeit beeinflussen können (einschließlich
Patientenalter), wird empfohlen, dass jedes Labor seinen eigenen Normalbereich ermittelt.
Testcharakteristik
Präzision:
Die Präzisionsmessungen wurde unter Verwendung von drei Chargen des Mangelplasmas auf
repräsentativen Mitgliedern der ACL TOP Systemfamilie (ACL TOP, ACL TOP 700 und ACL
TOP 500 CTS) durchgeführt. Die Präzision wurde in Übereinstimmung mit den CLSI EP05-A212
Richtlinien, an 20 Tagen mit zwei Läufen pro Tag und zwei Wiederholungen pro Lauf für jede
Probe (n=80/Gerät/Charge) ermittelt. Dabei wurden spezifische APTT Reagenzchargen (APTTSP und SynthASil), sowie normale und abnormale Proben eingesetzt. Die Testergebnisse
eines repräsentativen Gerätes, APTT Reagenzes und einer Mangelplasma Charge sind hier
aufgeführt.
ACL TOP Familie
Mittelwert (% FVIII) VK % (im Lauf)
Normal
Spezialtest-Kontrolle Level 2
Niedrige Patientenprobe I
Niedrige Patientenprobe II
Korrelation:
System
SteigungOrdinatenabschnitt r
3,9
5,5
5,2
6,4
Referenzmethode
ACL TOP Familie
1,112
-3,57
0,9923 HemosIL Faktor VIII
Mangelplasma mit SynthASil
ACL TOP Familie 0,913
0,56
0,9926 HemosIL Faktor VIII
Mangelplasma mit APTT-SP
In Vergleichsstudien wurden folgende Daten auf Systemen der ACL TOP Familie (ACL TOP und
ACL TOP 500 CTS) mit spezifischen Chargen Faktor VIII Mangelplasma und APTT Reagenzien
ermittelt:
System
SteigungOrdinatenabschnitt r
Referenzmethode
ACL TOP Familie
1,074
-4,83
0,9829 HemosIL Faktor VIII
Mangelplasma mit SynthASil
ACL TOP Familie
1,138
-9,31
0,9842 HemosIL Faktor VIII
Mangelplasma mit SynthASil
ACL TOP Familie
0,871
-0,25
0,9935 HemosIL Faktor VIII
Mangelplasma mit APTT-SP
Analytischer Bereich:
System
ACL TOP Familie mit SynthASil
ACL TOP Familie mit APTT-SP
Factor VIII deficient plasma - 0020012800
VK % (gesamt)
80,33,8
23,8
4,0
12,1
3,7
6,8
4,1
0,1 – 150%
0,5 – 150%
ESPAÑOL - Revisión Prospecto 11/2016
Aplicación
Preparación
Limitaciones/Interferencias
El Plasma Deficiente HemosIL Factor VIII es plasma humano, deplecionado para Factor
VIII, cuya aplicación es el diagnóstico in vitro en la determinación cuantitativa de la actividad
del Factor VIII en plasma citratado, basado en el ensayo del Tiempo de Tromboplastina
Parcialmente Activada (TTPA) en los analizadores de la Familia ACL TOP®. El Plasma
Deficiente HemosIL Factor VIII está indicado para su uso en pacientes en los que existe
sospecha de una deficiencia congénica o adquirida basada en resultados del test del Tiempo
de Tromboplastina Parcialmente Activada (TTPA).
Disolver el contenido de cada vial con 1 mL de agua destilada CLSI Tipo CLR o equivalente.6
Cerrar el vial con el tapón y homogeneizar suavemente. Comprobar la completa reconstitución
del producto. Mantener el vial de plasma a 15-25ºC durante 30 minutos y mezclar por inversión
antes de utilizar. No agitar. Evitar la formación de espuma.
Las muestras con excesiva hemólisis, ictericia o lipemia no deberían utilizarse; los resultados
del Factor VIII en la Famila ACL TOP no se ven afectados hasta niveles de hemoglobina de 530
mg/dL, triglicéridos hasta 2000 mg/dL, Bilirubina hasta 150 mg/dL e inhibidores del Factor VIII
hasta 0.1UB. Los resultados no se ven afectados por la presencia de anticuerpos de naturaleza
Anticoagulante Lúpico.
La realización de este ensayo no se ha validado en pacientes pediátricos.
Conservación y Estabilidad de los Reactivos
Principio
El FVIII es una glicoproteína plasmática, de composición polipeptídica, que se sintetiza en el
hígado y que circula en sangre formando un complejo no covalente con el Factor von Willebrand
(FvW). En la cascada de la coagulación, el FVIII se activa como FVIIIa gracias a una proteolisis
mediada por la Trombina o Factor Xa (FXa). El FVIIIa funciona como cofactor para el Factor IX
(FIX) acelerando (hasta 200.000 veces) la conversion del FX en FXa por el FIXa.
Deficiencias congénitas de FVIII son las responsables de la Hemofilia A, patología de herencia
recesiva ligada al sexo, que produce hemorragias severas. El grado de intensidad hemorrágica
está inversamente relacionado con la concentración del FVIII. Los pacientes con Hemofilia
A generalmente se clasifican en tres categorías, según la actividad del FVIII: <1% (hemofilia
severa), entre 1 – 4% (hemofilia moderada), entre 5-25% (hemofilia leve). 1-5
Niveles bajos de FVIII también pueden asociarse a la Enfermedad de von Willebrand (EvW).
También puede adquirirse secundariamente debido a otras enfermedades, como hepatopatías
y coagulación intravascular diseminada (CID). 1,2
La actividad del FVIII en el plasma del paciente se determina llevando a cabo un Tiempo de
Tromboplastina Parcial Activada (TTPA). El plasma del paciente se diluye y se añade a un
plasma deficiente en Factor VIII. La corrección del tiempo de coagulación prolongado del
plasma deficiente es proporcional a la concentración (% de actividad) del factor en el plasma
del paciente, que se obtiene a partir de una curva de calibración.
Composición
El kit Factor VIII deficient plasma consta de:
VIII Factor VIII deficient plasma (Núm. Cat. 0020012810): 10 viales de 1 mL de plasma
humano liofilizado al que se le ha artificial eliminado el Factor VIII, y que contiene tampón
y estabilizantes. La actividad residual del Factor FVIII es menor o igual al 1%, mientras
que los niveles del Factor von Willebrand y de los demás factores de la vía intrínseca son
normales.
MEDIDAS DE PRECAUCIÓN Y ADVERTENCIAS:
El Plasma Deficiente en Factor VIII contiene material de origen humano que han sido
verificados dando como resultado no reactivos para el anticuerpo del VIH, para el Antígeno de
Superficie de la Hepatitis B y para el Anti-HCV a nivel de donante. Este producto, como todos
aquellos basados en muestras de origen humano, deben manejarse con procedimientos de
laboratorio apropiados y seguros para minimizar el riesgo de transmisión de enfermedades
infecciosas.
El Plasma Deficiente en Factor VIII no está clasificado como peligroso.
Clase de peligro: Ninguna
Indicaciones de peligro: Ninguna Consejos de prudencia: Ninguno
Información suplementaria sobre los peligros:
≈ 100% de la mezcla está constituido por componentes con una toxicidad aguda (oral, dérmica,
por inhalación) para los seres humanos y un peligro para el medio ambiente no conocidos.
Este producto es para Uso de Diagnóstico in vitro.
Los plasmas deficientes que no hayan sido abiertos son estables hasta la fecha de caducidad
indicada en el vial si se mantienen entre 2-8ºC.
Estabilidad después de su reconstitución: 24 horas a 2-8ºC en el vial cerrado original o 24
horas a 15 ºC en la Familia ACL TOP o 3 semanas a -20ºC en el vial cerrado original. El plasma
deficiente congelado debe descongelarse a 37ºC y mezclarse suavemente antes de usar. No
recongelar.
Para obtener una estabilidad óptima, retirar los plasmas deficientes del sistema y conservar a
2-8ºC en el vial cerrado original.
Método de Ensayo
Seguir las instrucciones descritas en el Manual del Operador del Instrumento correspondiente
y/o el Manual de Aplicaciones /Referencia de los instrumentos de IL para el procedimiento
completo del ensayo.
Recolección y preparación de las muestras
Se recogen nueve partes de sangre venosa fresca en una parte de citrato trisódico. Para más
instrucciones en cuanto a la recolección, manipulación y conservación de la muestra1 seguir las
recomendaciones del Documento H21-A5 de la CLSI.7
Reactivos adicionales y plasmas de control
Los siguientes productos no se suministran con el kit y deben pedirse por separado.
América y Pacífico
Europa
Núm. Cat.
Núm. Cat.
Plasma de Calibración
0020003700
Control Normal 0020003120
0020003110
Control de Técnicas Especiales Nivel 2
0020012000
SynthASil0020006800
Cloruro Cálcico 0.020 M
0020006900
APTT-SP (líquido)
0020006300
Diluyente de Factores
0009757600
NOTA: Cada laboratorio debería validar su combinación reactivo/instrumento.
Control de calidad
Para realizar un programa completo de control de calidad se recomienda el uso de controles
normales y anormales.8 Los controles de IL adecuados para este programa son el Contol
Normal y el Control de Técnicas Especiales Nivel 2. Cada laboratorio debería establecer su
propia media y desviación estándar, y debe realizar un programa de control de calidad para
monitorizar sus resultados. Los controles deberían procesarse al menos una vez cada 8 horas
de acuerdo con la normativa de buenas prácticas de laboratorio. Consúltese el Manual del
Operador para obtener más información. Consúltese la publicación de Westgard y col. para la
identificación y resolución de situaciones anormales de control de calidad.9,10
Resultados
Los resultados de los pacientes se expresan en % actividad, UI o segundos.
Valores esperados11
Factor VIII: 50-150% (0,50-1,50 IU)
Debido a las variables que pueden afectar a los tiempos de coagulación (incluida la edad de la
población), cada laboratorio debería verificar su propio rango de normalidad.
Características técnicas
Precisión:
Se evaluó la precisión utilizando 3 lotes de plasma en analizadores representativos de la
Familia ACL TOP ( ACL TOP, ACL TOP 700 y ACL TOP 500). La precisión se evaluó según
CLSI EP05-A212 , durante 20 día, procesando 2 series al día, con 2 replicados por serie para
cada nivel de muestra ( (n=80/instrumento/lote), utilizando un lote específico de reactivo de
TTPA (APTT-SP y SynthASil) y tanto muestras normales como anormales. A continuación se
incluyen los resultados de los tests representativos de los instrumentos, reactivos y lotes de
plasma.
Familia ACL TOP
Media (% FVIII) CV% (Intra-serie)
CV% (Total)
Normal
80,33,8
Control de Técnicas Especiales Nivel 223,8
4,0
Muestra Baja I
12,1
3,7
Muestra Baja II
6,8
4,1
Correlación:
Sistema
pendiente
inter-sección
r
3,9
5,5
5,2
6,4
Método de referencia
Familia ACL TOP
1,112
-3,57
0,9923 HemosIL Factor VIII deficient
plasma con SynthASil
Familia ACL TOP
0,913
0,56
0,9926 HemosIL Factor VIII deficient
plasma con APTT-SP
En estudios en campo, se obtuvieron los siguientes resultados utilizando lotes específicos de
plasma deficiente en Factor VIII y reactivos de TTPA.
Sistema
pendiente
inter-sección
r
Método de referencia
Familia ACL TOP
1,074
-4,83
0,9829 HemosIL Factor VIII deficient
plasma con SynthASil
Familia ACL TOP
1,138
-9,31
0,9842 HemosIL Factor VIII deficient
plasma con SynthASil
Familia ACL TOP
0,871
-0,25
0,9935 HemosIL Factor VIII
deficient plasma con APTT-SP
Rango Analítico:
Sistema
Familia ACL TOP con SynthASil
Familia ACL TOP con APTT-SP
0,1 – 150%
0,5 – 150%
Symbols used / Verwendete Symbole / Símbolos utilizados / Symboles utilisés / Simboli impiegati / Símbolos utilizados
In vitro diagnostic medical device
In-vitro Diagnostikum
De uso diagnóstico in vitro
Dispositif mèdical de diagnostic in vitro
Per uso diagnostico in vitro
Dispositivo médico para utilização em diagnóstico in vitro
Batch code
Chargen-Bezeichnung
Identificación número de lote
Désignation du lot
Numero del lotto
Número de lote
Use by
Verwendbar bis
Caducidad
Utilisable jusqu’à
Da utilizzare prima del
Data límite de utilização
Instrumentation Laboratory Company - Bedford, MA 01730-2443 (USA
Instrumentation Laboratory SpA - V.le Monza 338 - 20128 Milano (Italy)
Tel. +1 800 678 0710
Temperature limitation
Festgelegte Temperatur
Temperatura de Almacenamiento
Températures limites de conservation
Limiti di temperatura
Límite de temperatura
Consult instructions for use
Beilage beachten
Consultar la metódica
Lire le mode d’emploi
Vedere istruzioni per l’uso
Consultar as instruções de utilização
Control
Kontrollen
Control
Contrôle
Controllo
Controlo
Biological risks
Biologisches Risiko
Riesgo biológico
Risque biologique
Rischio biologico
Risco biológico
Manufacturer
Hergestellt von
Fabricado por
Fabricant
Prodotto da
Fabricado por
Authorised representative
Bevollmächtigter
Representante autorizado
Mandataire
Rappresentanza autorizzata
Representante autorizado
303763 R4 11/2016
HemosIL®
Factor VIII deficient plasma - 0020012800
FRANÇAIS - Révision de la notice 11/2016
Utilisation
Préparation
Limites de la méthode et substances interférant avec celle-ci
Le réactif HemosIL Factor VIII deficient plasma est un plasma humain déplété en Facteur VIII,
à usage diagnostic in vitro, pour la détermination quantitative de l’activité en FVIII dans les
plasmas humains citratés, par un temps de céphaline avec activateur (TCA), sur les analyseurs
de la famille ACL TOP®. Le test utilisant le réactif HemosIL Factor VIII deficient plasma est
indiqué chez les patients suspectés de déficience en facteur VIII congénitale ou acquise et basé
sur les résultats d’un temps de céphaline avec activateur (TCA).
Dissoudre le contenu de chaque flacon avec 1 ml d’eau de type CLR selon les
recommandations du CLSI ou équivalent.6 Replacer le capuchon et agiter doucement. Assurezvous de la complète reconstitution du produit. Conserver le plasma à 15-25°C pendant au
moins 30 minutes et mélanger par inversion avant utilisation. Ne pas agiter violemment. Eviter la
formation de mousse.
Les échantillons par trop hémolysés, ictériques et/ou lipémiques doivent être analysés avec
précautions. Les résultats de Facteur VIII sur les analyseurs de la famille ACL TOP ne sont pas
affectés par l’hémoglobine jusqu’à 530 mg/dl, les triglycérides jusqu’à 2000 mg/dl (20 g/l), la
bilirubine jusqu’à 150 mg/dl (1500 mg/l) et les inhibiteurs du Facteur VIII jusqu’à 0,1 BU. Les
résultats ne sont pas affectés par la présence d’anticorps anticoagulant de type lupique.
Les performances de ce test n’ont pas été validées pour les échantillons pédiatriques.
Principe
Le facteur VIII est une glycoprotéine, de composition polypeptidique complexe, dont le lieu de
synthèse est principalement le foie. Cette molécule est transportée dans le plasma sous forme
de complexe non covalent avec le Facteur von Willebrand (VWF). Durant le processus de
coagulation, le facteur VIII est converti en forme active, facteur VIIIa, par protéolyse modérée
induite par la thrombine ou le facteur Xa (FXa). Le FVIIIa intervient comme cofacteur du facteur
IX (FIX), accélérant (jusqu’à 200,000 fois), la conversion du FX en FXa par le FIXa.
Les déficits congénitaux en facteur VIII peuvent être responsables de l’hémophilie A, syndrome
congénital récessif lié aux chromosomes sexuels et responsable d’hémorragies sévères. Il
existe un rapport inverse entre la gravité de cette pathologie et la concentration en facteur VIII.
Les patients atteints d’hémophilie A sont généralement classés en trois catégories sur la base
de leur activité en facteur VIII, à savoir : < 0,01 UI/mL (hémophilie sévère), entre 0,01 et 0,04
UI/mL (hémophilie modérée) et entre 0,05 et 0,25 UI/mL (hémophilie mineure).1-5
Des taux abaissés de FVIII peuvent être associés à la maladie de Von Willebrand (VWM) ou
également acquis, à la suite de pathologies telles qu’un syndrome hépatique ou une coagulation
intravasculaire disséminée (CIVD).1,2
Ces déficits peuvent être mis en évidence par la détermination de l’activité en Facteur VIII
avec un temps de céphaline activée (TCA) modifié. Le spécimen dilué est mélangé au plasma
déficient en Facteur VIII. La correction du temps de coagulation prolongé du plasma déficient
est alors proportionnelle à la concentration (ou activité en % ) de ce facteur apporté par le
spécimen. Par interpolation sur une droite de calibrage générée automatiquement, l’appareil
donne l’activité exacte de ce facteur.
Composition
Le coffret Factor VIII deficient plasma (Plasma déficient en Facteur VIII) contient :
VIII Factor VIII deficient plasma (Réf. 0020012810) : 10 flacons de 1 ml de plasma humain
lyophilisé, artificiellement déplété en Facteur VIII, contenant du tampon et des stabilisants.
L’activité du Facteur VIII est inférieure ou égale à 1 % de l’activité normale, alors que le
Facteur Von Willebrand et les autres facteurs de la coagulation sont présents à des taux
normaux.
PRECAUTIONS : Ces réactifs contiennent des produits d’origine humaine. Ils ont été trouvés
négatifs pour les anticorps anti VIH 1/2, anti VHC et l’antigène de surface de l’hépatite B
(AgHBs), en utilisant des trousses de dépistage approuvées par la FDA. Cependant, ce réactif,
comme tout autre produit d’origine humaine, est à manipuler avec les précautions d’usage afin
de minimiser le risque de transmission de maladies infectieuses.
Ce plasma déficient en Facteur VIII n’est pas classé comme dangereux.
Classe de danger : Aucun
Indications de danger : Aucun
Conseils de prudence : Aucun Informations additionnelles sur les dangers :
≈ 100 % de ce mélange est constitué de composants dont la toxicité aiguë (par voie orale,
cutanée, par inhalation) pour la santé humaine et l’écotoxicité pour le milieu aquatique sont
inconnues.
Ce produit est à usage diagnostique in vitro.
Conservation et stabilité du réactif
Conservé à 2-8°C, le plasma déficient avant ouverture est stable jusqu’à la date de péremption
indiquée sur l’étiquette du flacon. Stabilité après reconstitution : 24 heures à 2-8°C dans le
flacon d’origine bouché ou 24 heures à 15°C sur les analyseurs de la famille ACL TOP ou 3
semaines à -20°C dans le flacon d’origine bouché. Le plasma congelé doit être décongelé à
37°C puis agité doucement avant utilisation. Ne pas recongeler.
Pour une stabilité optimale, retirer le réactif du système et le conserver à 2-8°C dans le flacon
d’origine bouché.
Procédures de test/instrument
Se référer au mode d’emploi de l’instrument IL approprié et/ou au manuel d’application pour des
informations complètes sur les procédures de dosage.
Recueil des spécimens et préparation
9 parts de sang fraîchement prélevé sont collectées avec 1 part de citrate trisodique. Se référer
au document CLSI H21-A5 ou au document GEHT (STV, numéro spécial, 1-40, 1998 et les
modifications parues sur le site du GEHT en 2007) pour plus d’informations sur le prélèvement
des échantillons, leur manipulation et leur stockage.7
Réactifs auxiliaires et plasmas de contrôle
Non fournis avec la trousse, ils doivent faire l’objet d’une commande séparée.
Ameriques et Pacifique
Europe
Réf. Réf.
Plasma de calibration
0020003700
Contrôle normal
0020003120
0020003110
Contrôle Tests Spéciaux Niveau 2
0020012000
SynthASil 0020006800
Chlorure de Calcium 0,020 M
0020006900
APTT-SP (Liquide)
0020006300
Diluant facteur
0009757600
NOTES : Il est du ressort du laboratoire de valider le choix du système analytique réactif /
instrument.
Contrôle de qualité
Les contrôles normaux et anormaux sont recommandés pour un programme de contrôle de
qualité complet.8 Le plasma de Contrôle normal et le Contrôle Tests Spéciaux Niveau 2 sont
spécifiques à ce programme. Chaque laboratoire doit établir sa propre moyenne et déviation
standard et son programme de contrôle de qualité afin de vérifier l’état de fonctionnement
de son système analytique. A titre d’exemple, les contrôles pourraient être analysés une fois
toutes les 8 heures en regard des bonnes pratiques de laboratoire. Se référer au mode d’emploi
de l’instrument pour des informations complémentaires. Se reporter à Westgard et al pour
l’identification et la résolution des contrôles hors limites.9,10
Résultats
Les résultats des patients sont reportés en activité ( % ), IU et secondes.
Factor VIII deficient plasma - 0020012800
Valeurs attendues11
Facteur VIII : 50-150 % (0,50-1,50 IU)
Du fait qu’un grand nombre de variables peuvent affecter les résultats (dont l’âge de la
population étudiée), nous recommandons à chaque laboratoire de vérifier ses valeurs normales.
Caractéristiques et performances
Fidélité :
La fidélité a été testée en utilisant 3 lots de plasma sur un nombre représentatif d’analyseurs
de la Famille ACL TOP (ACL TOP, ACL TOP 700 et ACL TOP 500 CTS). La fidélité (répétabilité,
CV % intra séries et reproductibilité, CV % Total) a été évaluée selon les recommandations
du document CLSI EP05-A212, sur une période de 20 jours, à raison de 2 séries par jour et 2
réplicates de chaque niveau d’échantillon par série (n = 80/instrument/lot), en utilisant un lot
spécifique de TCA (HemosIL APTT SP et SynthASil) ainsi que des échantillons normaux et
anormaux. Les données relatives à un instrument représentatif de la famille ACL TOP, un lot de
réactif TCA et de plasma sont présentées ci-dessous.
Famille ACL TOP
Moyenne ( % FVIII)
Contrôle normal
Contrôle Tests Spéciaux Niveau 2 Echantillon Bas I
Echantillon Bas II
Corrélation :
Analyseur
Pente
CV % (Intra-séries)
CV % (Total)
3,8
4,0
3,7
4,1
3,9
5,5
5,2
6,4
80,3
23,8
12,1
6,8
Ordonnée à l’origine
r
Méthode de référence
Famille ACL TOP
1,112
-3,57
0,9923 HemosIL Factor VIII deficient
plasma avec SynthASil
Famille ACL TOP
0,913
0,56
0,9926 HemosIL Factor VIII deficient
plasma avec APTT SP
Lors d’études réalisées sur différents sites, les résultats suivants ont été obtenus en utilisant des
lots spécifiques de réactifs HemosIL Factor VIII deficient plasma et de TCA :
Analyseur
Pente Ordonnée à l’origine
r
Méthode de référence
Famille ACL TOP
1,074
-4,83
0,9829
Famille ACL TOP
1,138
-9,31
0,9842
Famille ACL TOP
0,871
-0,25
0,9935
HemosIL Factor VIII deficient
plasma avec SynthASil
HemosIL Factor VIII deficient
plasma avec SynthASil
HemosIL Factor VIII deficient
plasma avec APTT SP
Domaine de mesure :
Analyseur
Famille ACL TOP avec SynthASil
Famille ACL TOP avec APTT SP
0,1 – 150 %
0,5 – 150 %
ITALIANO - Revisione dell’inserto 11/2016
Utilizzo
Preparazione
Limitazioni/Sostanze interferenti
Plasma umano immunodepleto di fattore VIII per la determinazione quantitativa dell’attività
del fattore VIII (FVIII) nel plasma umano citratato, mediante l’esecuzione di un tempo di
tromboplastina parziale attivato (APTT) modificato, sugli analizzatori della Famiglia ACL TOP®.
Il kit HemosIL Factor VIII deficient plasma è indicato per l’uso su campioni di pazienti con una
sospetta carenza congenita o acquisita di fattore VIII.
Sciogliere il contenuto di ciascun flacone con 1 mL di acqua distillata CLSI di tipo CLR o
equivalente.6 Chiudere con il tappo e miscelare delicatamente fino alla completa ricostituzione
del materiale. Mantenere il plasma a 15-25°C per 30 minuti e miscelarlo nuovamente prima
dell’uso. Non agitare. Evitare la formazione di schiuma.
Campioni che mostrano una eccessiva emolisi, oppure che si presentano lipemici o itterici non
devono essere utilizzati; i risultati del kit Factor VIII su strumenti ACL TOP non sono influenzati
dalla presenza di emoglobina fino a 530 mg/dL, trigliceridi fino a 2000 mg/dL, Bilirubina fino a
150 mg/dL e inibitori del Fattore VIII fino a 0.1BU. I risultati non sono influenzati dalla presenta di
anticorpi di tipo Lupus Anticoagulant.
Le performance del kit non sono state verificate su campioni pediatrici.
Principio del metodo
Il Fattore VIII è una glicoproteina plasmatica, con una complessa struttura polipeptidica, che
viene sintetizzata dal fegato e circola nel plasma legata al fattore von Willebrand (VWF) per
mezzo di legami non covalenti. Durante il processo coagulativo il Fattore VIII viene trasformato
nella sua forma attiva, il Fattore VIIIa, attraverso una ridotta lisi proteolitica ad opera della
trombina o del Fattore Xa (FXa). Il FVIIIa agisce poi come co-fattore del Fattore IX (FIX),
accelerando fino a 200000 volte, la conversione del FX a FXa ad opera del FIXa.
La carenza congenita di FVIII è la causa dell’Emofilia A, una sindrome ereditaria recessiva
legata al cromosoma X, che provoca gravi sanguinamenti. La gravità di questo disturbo
emorragico è inversamente correlata alla concentrazione del FVIII. Pazienti affetti da Emofilia A
sono in genere classificati, sulla base dell’attività del FVIII, in tre categorie: < 1% (emofila grave),
tra 1 - 4% (emofilia moderata) e tra 5 – 25% (emofilia leggera). 1-5
Le carenze di FVIII possono anche essere associata alla malattia di von Willebrand (VWD) o
causate da altre patologie come epatopatie e Coagulazione Intravascolare Disseminata (CID). 1,2
L’attività del FVIII nel plasma del paziente viene determinata eseguendo un tempo di
tromboplastina parziale attivato (APTT) modificato. Il plasma del paziente viene diluito e
aggiunto al plasma carente di Fattore VIII. La correzione del tempo di coagulazione del plasma
carente è proporzionale alla concentrazione (attività %) di quel fattore nel plasma del paziente,
attività che viene calcolata interpolando il tempo di coagulazione sulla curva di calibrazione.
Composizione
Il kit Factor VIII deficient plasma è composto da:
VIII Factor VIII deficient plasma (Cat. No. 0020012810): 10 flaconi da 1 mL di plasma umano
liofilizzato artificialmente depletato artificialmente di Fattore VIII e contenente tampone
e stabilizzanti. L’attività residua di fattore VIII è al massimo equivalente all’1% del valore
normale, mentre i livelli di tutti gli altri fattori della coagulazione e il fattore von Willebrand
rientrano nei rispettivi intervalli di normalità.
ATTENZIONE:
Questo prodotto contiene materiale di cui è stata verificata all’origine, con metodi raccomandati
dalla FDA, l’assenza dell’antigene di superficie dell’epatite B (HBsAg) e degli anticorpi anti-HCV
e anti-HIV.
Questo prodotto, come tutti i materiali di origine umana, dovrebbe essere trattato con apposite
procedure di sicurezza per ridurre al minimo il rischio di trasmissione di malattie infettive.
Il kit Factor VIII deficient plasma non è classificato come pericoloso
Classe di pericolo: Nessuno
Indicazioni di pericolo: Nessuno
Consigli di prudenza: Nessuno
Informazioni supplementari sui pericoli:
≈ 100% di questa miscela è costituita da ingredienti la cui tossicità acuta (per via orale, dermale,
inalatoria) per la salute umana e la tossicità per l’ambiente acquatico non è nota.
Per uso diagnostico in vitro.
Conservazione e stabilità dei reagenti
I plasmi carenti sigillati sono stabili a 2-8°C fino alla data di scadenza stampata sull’etichetta del
flacone.
Stabilità dopo la ricostituzione: 24 ore a 2-8°C nel flacone originale chiuso o 24 ore a 15°C su
Sistemi ACL TOP o 3 settimane a -20°C nel flacone originale chiuso. Scongelare i plasmi carenti
a 37°C e miscelare delicatamente prima dell’uso. Non ricongelare.
Al termine dei cicli lavorativi si consiglia di conservare il plasma carente a 2-8°C nel flacone
originale chiuso per una migliore stabilità.
Metodo
Per le metodiche e le procedure di lavoro fare riferimento al Manuale dell’Operatore dello
strumento.
Preparazione dei campioni
Aggiungere a nove parti di sangue fresco venoso una parte di trisodio citrato. Per informazioni
aggiuntive sulla preparazione, il trattamento e la conservazione dei campioni fare riferimento al
documento CLSI H21-A5.7
Reagenti ausiliari e plasmi di controllo
I seguenti prodotti non sono forniti insieme al kit e devono essere ordinati separatamente.
Europe
Cat. No.
Plasma Calibrante
0020003700
Controllo Normale
0020003110
Controllo dei Test Speciali Livello 2
0020012000
SynthASil0020006800
Cloruro di Calcio 0,020 M
0020006900
APTT-SP (liquido)
0020006300
Factor diluent
0009757600
NOTA: Ogni laboratorio dovrebbe verificare la propria combinazione reagente/strumento.
Controllo di Qualità
Per un completo programma di controllo di qualità si raccomanda l’uso di plasmi normali e
patologici.8 Il Controllo normale e il Controllo dei Test Speciali Livello 2 sono specifici per questo
tipo di programma. Ogni laboratorio dovrà stabilire i propri valori medi e le deviazioni standard
per ogni controllo ed individuare le corrette procedure di analisi. I controlli dovranno essere
analizzati almeno una volta ogni 8 ore in accordo con le esigenze del laboratorio. Consultare
il Manuale dell’Operatore dello strumento per ulteriori informazioni. Per l’identificazione e la
risoluzione di situazioni particolari, fare riferimento all’articolo di Westgard et al. 9,10
Risultati
Valori attesi11
Fattore VIII: 50-150% (0,50-1,50 UI)
Poichè numerose variabili (ad es. l’età della popolazione) possono influenzare i tempi di
coagulazione, ogni laboratorio dovrebbe stabilire il proprio intervallo di riferimento.
Prestazioni
Precisione:
La precisione è stata valutata utilizzando 3 lotti di plasmi su analizzatori della Famiglia ACL TOP.
La precisione è stata valutata seguendo le indicazioni del documento CLSI EP05-A212, per 20
giorni, eseguendo due sessioni al giorno e 2 replicati per ciascun livello (n=80/strumento/lotto),
usando uno specifico lotto di reagente APTT (APTT-SP e SynthASil) con campioni normali e
patologici. I dati ottenuti sono riportati qui di seguito.
Sistemi ACL TOP
Media (% FVIII) CV% (nella serie)
CV% (Totale)
Normale
80,33,8
Controlli dei Test Speciali Livello 2 23,8
4,0
Campione patologico I
12,1
3,7
Campione patologico II
6,8
4,1
Correlazione:
Sistema
pendenza
intercetta
r
3,9
5,5
5,2
6,4
Metodo di riferimento
Sistemi ACL TOP 1,112
-3,57
0,9923 HemosIL Factor VIII deficient
plasma con SynthASil
Sistemi ACL TOP 0,913
0,56
0,9926 HemosIL Factor VIII deficient
plasma con APTT-SP
In uno studio clinico, utilizzando un lotto specifico di Factor VIII deficient plasma e reagenti APTT
sono stati ottenuti i seguenti dati:
Sistema
pendenza
intercetta
r
Metodo di riferimento
Sistemi ACL TOP
1,074
-4,83
0,9829 HemosIL Factor VIII deficient
plasma con SynthASil
Sistemi ACL TOP
1,138
-9,31
0,9842 HemosIL Factor VIII deficient plasma con SynthASil
Sistemi ACL TOP
0,871
-0,25
0,9935 HemosIL Factor VIII deficient
plasma con APTT-SP
Intervallo analitico:
Sistema
I risultati dei pazienti possono essere riportati in attività percentuale (%), UI ed in secondi.
ACL TOP con SynthASil
ACL TOP con APTT-SP
Utilização prevista
Preparação
Limitações/Susbtâncias interferentes
O HemosIL Factor VIII deficient plasma é um plasma humano, deficitário em Factor VIII, que
se destina à determinação quantitativa por diagnóstico in vitro da actividade do Factor VIII em
plasma citratado, baseado no ensaio do tempo de tromboplastina parcial activada (APTT) ,
nos analisadores da Família ACL TOP®. O HemosIL Factor VIII deficient plasma é indicado
para utilização em doentes com suspeita de deficiência congénita ou adquirida baseada nos
resultados do ensaio do tempo de tromboplastina parcial activada (APTT).
Dissolva o conteúdo de cada frasco com 1 mL de água tipo CLSI ou equivalente.6 Coloque
a tampa e rode suavemente. Assegure a reconstituição completa do produto. Mantenha o
reagente a 15-25°C durante 30 minutos e inverta para misturar antes de utilizar. Não agite. Evite
a formação de espuma.
As amostras excessivamente hemolisadas, ictéricas ou lipémicas não devem ser utilizadas;os
resultados Factor VIII na Família ACL TOP não são afectados pela hemoglobina até 530 mg/dL,
trigliceridos até 2000 mg/dL, Bilirubina até 150 mg/dL e inibidores do Factor VIII até 0.1BU. Os
resultados não são afectados pela presença de anticorpos anticoagulantes lúpicos.
O desempenho deste ensaio não foi validado em doentes pediátricos.
Factor VIII deficient plasma - 0020012800
Resumo e Princípio
O FVIII é uma glicoproteína plasmática, com uma composição polipéptidica complexa,
sintetizado no fígado e que circula no plasma num complexo não-covalente com o Factor de
von Willebrand (VWF). Durante a coagulação, o FVIII é convertido na forma activa, FVIIIa,
através de proteólise limitada pela trombina ou Factor Xa (FXa). As funções do FVIIIa são de
cofactor do Factor IX (FIX), acelerando (até 200,000 vezes), a conversão do FX a FXa pelo
FIXa.
A deficiência congénita em FVIII causa Hemofilia A, uma doença hereditária recessiva ligada
ao sexo, com hemorragias graves. A gravidade desta doença está inversamente relacionada
com a concentração do FVIII. Os doentes com Hemofilia A são geralmente classificados de
acordo com a sua actividade FVIII, em 3 categorias: <1% (hemofilia grave), entre 1 – 4%
(hemofilia moderada) e entre 5 – 25% (hemofilia ligeira).1-5
A diminuição dos níveis de FVIII também pode estar associada à doença de von Willebrand
(VWD) ou ser secundariamente adquirida, devido a outras doenças, tais como doenças
hepáticas ou Coagulação Intravascular Disseminada(DIC).1,2
A actividade do Factor VIII no plasma do doente é determinada pela realização do teste do
Tempo de tromboplastina parcial activada (APTT). O plasma do doente é diluído e adicionado
ao plasma deficiente em Factor VIII. A correcção do tempo de coagulação do plasma
deficiente é proporcional à concentração (% actividade) desse factor no plasma do doente por
interpolação a partir da curva de calibração.
Composição
O kit Factor VIII deficient plasma consiste em:
VIII Factor VIII deficient plasma (Cat. No. 0020012810): 10 x 1 mL frascos de plasma
humano liofilizado artificial deficiente em Factor VIII com tampão e estabilizantes. A
actividade do Factor VIII é inferior ou igual a 1% enquanto o Factor von Willebrand e os
níveis dos restantes factores são normais.
PRECAUÇÕES E AVISOS:
O plasma deficiente em Factor VIII contém material de origem humana não reactivo ao
anticorpo anti-HIV, para o antigénio de superfície da Hepatite B e para o anticorpo Anti-HCV no
estadio de dador. Este produto, tal como todas as amostras humanas, deve ser manipulado, de
acordo com os procedimentos adequados de segurança no laboratorial para minimizar o risco
de transmissão de doença infecciosa..
O plasma deficiente em Factor VIII não está classificado como perigoso.
Classe de perigo: Nenhuma
Advertências de perigo: Nenhuma
Recomendações de prudência: Nenhuma
Informações perigo suplementar:
≈ 100% da mistura é constituído por ingredientes cuja toxicidade aguda (oral, dérmica, por
inalação) para a saúde humana e cujo risco para o ambiente aquático não são conhecidos.
Este produto é para utilização em diagnóstico in vitro.
0,1 – 150%
0,5 – 150%
PORTUGUÊS - Revisão do folheto 11/2016
Conservação e estabilidade do reagente
O plasma deficiente fechado é estável até ao fim do prazo de validade impresso no frasco,
desde que conservado entre 2-8°C.
Estabilidade após reconstituição: 24 horas a 2-8°C no frasco fechado original, 24 horas a 15°C
nos sistemas da Família ACL® TOP ou 3 semanas a -20°C no frasco fechado original. O plasma
deficiente congelado pode ser descongelado uma vez a 37ºC e suavemente misturado antes
de utilizar. Não torne a congelar.
Para estabilidade óptima retire o plasma do sistema e conserve-o entre 2-8°C no frasco
fechado original.
Instrumento/Procedimento do teste
Consulte o Manual do Operador do Instrumento IL e/ou Manual de Aplicação para obter
instruções completas acerca do ensaio.
Colheita das amostras e preparação
Nove partes de sangue venoso fresco são colhidas numa parte de citrato trissódico. Consulte o
CLSI Document H21-A5 para obter mais instruções sobre colheita, manipulação e conservação
de amostras.7
Reagentes adicionais e plasmas de controlo
Os seguintes não são fornecidos com o kit e devem ser adquiridos separadamente.
Américas e Anel do Pacífico
Europa
Cat. No.
Cat. No.
Calibration Plasma 0020003700
Normal Control 0020003120
0020003110
Special Test Control Level 2
0020012000
SynthASil0020006800
Calcium Chloride 0.020 M
0020006900
APTT-SP (liquid)
0020006300
Factor diluent
0009757600
NOTA: Cada laboratório deve validar a sua escolha de reagente/instrumento.
Controlo de Qualidade
Os controlos Normal e Anormal são recomendados para um programa de controlo de
qualidade completo.8 O Controlo Normal e o Special Test Control Level 2 foram concebidos
para este programa. Cada laboratório deve estabelecer a sua média e desvio padrão e deve
estabelecer um programa de controlo de qualidade para monitorizar os testes de laboratório.
Os controlos devem ser analisados pelo menos uma vez, a cada turno de 8 horas, de acordo
com as boas práticas de laboratório. Consulte o manual do operador do instrumento para obter
informações adicionais. Consulte Westgard et al para identificação e resolução para situações
fora do controlo.9,10
Resultados
Os resultados do doente podem ser notificados em % de actividade, UI ou segundos.
Valores esperados11
Factor VIII: 50-150% (0,50-1,50 UI)
Devido às muitas variáveis que podem afectar os tempos de coagulação (incluindo a idade da
população), cada laboratório deve verificar o seu próprio intervalo normal.
Características de desempenho
Precisão:
A precisão foi avaliada com a utilização de 3 lotes de plasma em membros representativos
da Família ACL TOP (ACL TOP, ACL TOP 700 e ACL TOP 500 CTS). A precisão foi avaliada
de acordo com o CLSI EP05-A212, para 20 dias, com 2 análises por dia e 2 replicados por
análises para cada nível de amostra. (n=80/instrumento/lote), com um lote específico de
reagente APTT (APTT-SP e SynthASil) e amostras normais e anormais. Os dados do teste de
um instrumento representativo, lote de reagente APTT e de plasma são apresentados a seguir.
Família ACL TOP
Média (% FVIII) CV% (intra-análise)
Normal
Special Test Control Level 2
Low Sample I
Low Sample II
Correlação:
Sistema
declive
CV% (Total)
80,33,8
23,8
4,0
12,1
3,7
6,8
4,1
intercepção
r
3,9
5,5
5,2
6,4
método de referência
Família ACL TOP 1,112
-3,57
0,9923 HemosIL Factor VIII deficient
plasma com SynthASil
Família ACL TOP
0,913
0,56
0,9926 HemosIL Factor VIII deficient
plasma com APTT-SP
Em estudos de campo, os dados seguintes foram obtidos utilizando lotes específicos de
reagentes Factor VIII deficient plasma e APTT em membros representativos da Família ACL
TOP (ACL TOP e ACL TOP 500 CTS):
Sistema
declive
intercepção
r
método de referência
Família ACL TOP
1,074
-4,83
0,9829 HemosIL Factor VIII deficient
plasma com SynthASil
Família ACL TOP
1,138
-9,31
0,9842 HemosIL Factor VIII deficient
plasma com SynthASil
Família ACL TOP
0,871
-0,25
0,9935 HemosIL Factor VIII deficient
plasma com APTT-SP
Intervalo analítico:
Sistema
Família ACL TOP com SynthASil
Família ACL TOP com APTT-SP
0.1 – 150%
0.5 – 150%
Bibliography / Literatur / Bibliografía / Bibliographie / Bibliografia / Bibliografia
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Instrumentation Laboratory Company - Bedford, MA 01730-2443 (USA
Instrumentation Laboratory SpA - V.le Monza 338 - 20128 Milano (Italy)
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©2016 Instrumentation Laboratory
Issued November 2016
303763 R4 11/2016
Factor VIII DP
0020012800
Printed Insert Sheet: 303763
Revision: R4
Issued: November 2016
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