Test immunologique de détermination qualitative des anticorps
Transcription
Test immunologique de détermination qualitative des anticorps
Test immunologique Elecsys® Syphilis Test immunologique de détermination qualitative des anticorps totaux dirigés contre le T. pallidum dans le sérum et le plasma Indication La syphilis est provoquée par la sous-espèce pallidum de la bactérie intracellulaire à Gram négatif Treponema qui fait partie du groupe des spirochètes. Environ 12 millions de nouvelles infections ont été signalées en 2012.1 La plupart des personnes infectées par la syphilis ne présentent aucun symptôme, mais l’absence de traitement peut entraîner de graves complications.2 La syphilis est principalement transmise par le biais de relations sexuelles et peut aussi être transmise par une femme enceinte au fœtus ; ce type de transmission concerne chaque année environ 1,5 million de grossesses.3, 4 Si l’infection est détectée à un stade précoce, elle peut être traitée efficacement par la pénicilline et il est ainsi possible d’éviter une syphilis congénitale.2, 3 La syphilis peut également être transmise par l’intermédiaire d’une transfusion sanguine.4 Les tests sérologiques comme le test Elecsys® Syphilis constituent la meilleure méthode d’obtention d’un diagnostic fiable de la syphilis.5 Les tests tréponémiques (dont également l’ECLIA) détectent la présence d’anticorps dirigés contre la protéine du T. pallidum.5 Principe du test: méthode sandwich à deux antigènes (DAGS) (durée de test: 18 min.) Echantillon avec anticorps IgG anti-TpN17 ou anti-TpN15 Antigènes biotinylés TpN17, TpN15 Antigènes ruthénylés TpN17, TpN15 9 min 9 min Mesure Antigènes biotinylés TpN17, TpN47 Echantillon avec anticorps IgM anti-TpN17 ou anti-TpN47 Antigènes ruthénylés TpN17, TpN47 Etape 1 (9 minutes): Une fraction de 10 μl de l’échantillon de patient est mise à incubation avec des antigènes recombinants biotinylés spécifiques au T. pallidum et des antigènes recombinants marqués au ruthénium spécifiques au T. pallidum. Des composés sandwich se forment en présence des anticorps correspondants. Etape 2 (9 minutes): Suite à l’ajout de microparticules paramagnétiques couvertes de streptavidine, les complexes immuns se forment via l’interaction biotine-streptavidine à la phase solide. Etape 3 (mesure): Le mélange de réactifs est transféré dans la cellule de mesure où les microparticules sont fixées par magnétisme à la surface de l’électrode. Les particules libres sont évacuées. L’application d’une certaine tension au niveau de l’électrode permet d’induire la chimio-luminescence qui est ensuite mesurée par un photomultiplicateur. L’intensité de signal dépend des titres IgG et IgM de la syphilis dans l’échantillon. Caractéristiques du test Elecsys® Syphilis Durée du test 18 minutes Principe du test Méthode sandwich à deux antigènes en une étape, le test mesure les anticorps totaux IgG et IgM dirigés contre les TpN15, TpN17 et TpN47 bactériennes Calibrage Calibrage à deux points Interprétation Non réactif: < 1,00 E/S; Réactif: ≥ 1,00 E/S Matériel d’échantillonnage Sérum, Li-héparine, K2 EDTA, K3 EDTA, plasma citraté et plasma CPDA Volume d’échantillon 10 μL Systèmes Analyseur cobas e 411, analyseur Elecsys® 2010, modules cobas e 601 / cobas e 602, système MODULAR ANALYTICS <E 170> Sensibilité clinique 100,00 % (n=924) Spécificité clinique 99,93 %, n=4579 (donneurs de sang) Spécificité globale 99,88 %, n=8079 (La limite inf. de l’intervalle de confiance à 95% était de 99,6%) Spécificité analytique > 200 échantillons avec anticorps dirigés contre différents 99,80 %, n=3500 (échantillons de routine non sélectionnés) pathogènes ne présentaient aucune réactivité croisée Algorithme recommandé pour le diagnostic sérologique du Treponema pallidum5 Essai inversé: démarrage avec un test tréponémique (p. ex. ECLIA, EIA, TPLA) Essai classique: démarrage avec un test non tréponémique (p. ex. RPR, VDRL) Test tréponémique réactif Non réactif Non infecté Test non tréponémique Syphilis ou faux positif Non réactif Non infecté ou infection très récente Test non tréponémique Non réactif Syphilis traitée, infection très récente ou test tréponémique faux positif Test tréponémique Non réactif Faux positif biologique ou infection récente Test non tréponémique réactif Syphilis: nouvelle infection ou traitement précédent Renouvellement du test tréponémique Non réactif Aucune syphilis Test tréponémique réactif Syphilis: traiter si aucun traitement précédent ECLIA = test immunologique par électro-chimio-luminescence, EIA = test immunoenzymatique, RPR = réagine plasmatique rapide, TPLA = test d’agglutination au latex de dépistage du Treponema pallidum, VDRL = test de laboratoire de dépistage des maladies vénériennes. Le test d’agglutination T. pallidum Latex Agglutination® (TPLA; 04955137 190) de mesure in vitro des anticorps dirigés contre le T. pallidum est également disponible auprès de Roche Diagnostics. Informations sur la commande Produit Contenu N° de commande Elecsys® Syphilis 100 tests 06 923 348 190 PreciControl Syphilis 4 x 2,0 ml 06 923 364 190 CalSet Vials 2 x 56 11 776 576 322 COBAS, COBAS E, ELECSYS, LIFE NEEDS ANSWERS et MODULAR sont des marques de Roche. © 2014 Roche Diagnostics. Tous droits réservés. Littérature 1 World Health Organisation (2012). Baseline report on global sexually transmitted infection surveillance 2012. Disponible sous: bitstream/10665/85376/1/9789241505895_eng.pdf (accès: décembre 2013). 2 Workowski, K.A., Berman, S.; CDC. (2010). Sexually transmitted diseases treatment guidelines, 2010. MMWR Recomm Rep 59, 1–110. 3 World Health Organisation (2012). Investment case for eliminating mother-to-child transmission of syphilis. Disponible sous: am/10665/75480/1/9789241504348_eng.pdf (accès septembre 2013). 4 World Health Organisation (2010). Screening donated blood for transfusiontransmissible infections: recommendations. Disponible sous: DonatedBlood forTransfusion.pdf (accès: décembre 2013). 5 Binnicker, M.J. (2012). Which algorithm should be used to screen for syphilis? Curr Opin Infect Dis 25, 79–85. Roche Diagnostics (Suisse) SA Roche Diagnostics GmbH Industriestrasse 7 Engelhorngasse 3 CH-6343 Rotkreuz A-1211 Vienne www.roche-diagnostics.chwww.roche.at 0514 - AD Roche Diagnostics Deutschland GmbH Sandhofer Straße 116 68305 Mannheim www.roche.de Test tréponémique réactif Syphilis: nouvelle infection ou traitement précédent