029 IgG(urine analysis)-IFU-V3.03-fr-FR-100

MAGLUMI IgG (analyse dans l'urine) (CLIA)
DOMAINES D'UTILISATION
130208006M
100
Shenzhen New Industries
Biomedical Engineering Co., Ltd
No.16, Jinhui Road, Pingshan New
District, Shenzhen, 518122, P.R.
CHINE
Tél. + 86-755-21536601
Fax. + 86-755-28292740
Lotus Medical Equipment
Limited
26B Cameron Court,
Cork Street, Dublin 8,
l'irlande
Tél. + 353-1-6571034
Courriel: [email protected]
POUR UTILISATION PROFESSIONNELLE UNIQUEMENT
Conserver à 2-8°C
ENTIÈREMENT
ATTENTION :LIRE
INSTRUCTIONS AVANT L'UTILISATION
LES
EXPLICATIONS DES SYMBOLES
Représentant
autorisé
communauté européenne
dans
la
Fabricant
Le kit a été conçu pour le dosage quantitatif
de
l'immunoglobuline G (IgG) dans l'urine humaine.
La méthode peut être utilisée pour des échantillons dans une
plage de 0,3 à 80,0 µg/ml.
Le test doit être effectué avec l'analyseur d'immuno-analyse par
chimiluminescence (CLIA) entièrement automatisé MAGLUMI
(notamment Maglumi 600, Maglumi 800, Maglumi 1000, Maglumi
1000 Plus, Maglumi 2000, Maglumi 2000 Plus et Maglumi 4000).
RÉSUMÉ ET EXPLICATION DU TEST
L'IgG est le principal anticorps contenu dans la fraction protéique
du sang. Avec des diminutions significatives du niveau d'IgG, soit
congénitales soit acquises, il existe une susceptibilité accrue aux
processus infectieux habituellement combattus par l'anticorps
humoral (c. à d. l'infection bactérienne). Ainsi, les
immunoglobulines, et en particulier les IgG, doivent être dosées
chez les patients présentant des infections à répétition. Un
traitement avec des gamma globulines exogènes peut être
efficace chez de tels patients. Inversement, les niveaux d'IgG
seront augmentés chez les sujets immunocompétents répondant
à une grande diversité d'infections ou d'affections inflammatoires
(en fait, cela constitue la base du diagnostic sérologique des
maladies infectieuses). Lorsqu'ils sont couplés à l'anticorps
spécifique IgM, ils peuvent donner un diagnostic précis d'une
infection aiguë ou chronique. Aujourd'hui, une cause majeure
d'augmentation polyclonale des IgG est le syndrome
d'immunodéficience acquise. Une IgG monoclonale peut être
démontrée dans de nombreux cas de myélome multiple. 3 g/dl
d'IgG monoclonale est un critère diagnostique majeur de
myélome. Une IgG oligoclonale peut être observée dans la
sclérose en plaques et certaines hépatites chroniques.
PRINCIPE DE LA MÉTHODE
Consulter le manuel d'utilisation
Contenu du kit
Dispositif médical de diagnostic in vitro
Numéro de lot
Numéro catalogue
Immuno-analyse par chimiluminescence par compétition
Utiliser l'ABEI pour marquer des anticorps monoclonaux anti-IgG,
et utiliser le FITC pour marquer l'antigène IgG purifié. Mélanger
soigneusement l'échantillon (ou l'étalon/le contrôle, le cas
échéant), le marquage ABEI, le marquage FITC et les microbilles
magnétiques revêtues d'anticorps de chèvre anti-FITC et incuber
à 37 °C°C, pour former un complexe immun. Après précipitation
dans un champ magnétique, décanter le surnageant et effectuer
ensuite un autre cycle de lavage. Ensuite, le starter 1+2 est
ajouté pour initier une réaction de chimiluminescence. Le signal
lumineux est mesuré par un photomultiplicateur dans les
3 secondes sous forme d'URL qui est proportionnelle à la
concentration d'IgG présente dans les échantillons.
À utiliser avant
Limite de température
(conserver à 2-8°C)
CONTENU DU KIT
Matériel
Quantité suffisante pour
Conserver à l'abri de la lumière
Maintenir verticalement
stockage.
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pendant le
Réactif Integral pour 100 dosages
Microbilles magnétiques : tampon TRIS,
1,2 % (P/V), 0,2 % NaN 3 , revêtues avec un
anticorps polyclonal de chèvre anti-FITC.
Étalon bas : sérum bovin, 0,2 % NaN 3 .
Étalon haut : sérum bovin, 0,2 % NaN 3 .
2,5 ml
2,5 ml
2,5 ml
Marquage FITC : antigène IgG purifié marqué
6,5 ml
par FITC, contient de l'ASB, 0,2 % NaN 3 .
Marquage ABEI : anticorps monoclonal
anti-IgG marqué par ABEI, contient de l'ASB,
6,5 ml
0,2 % NaN 3 .
Diluant : 0,9 % NaCl
25,0 ml
Tous les réactifs sont fournis prêts à l'emploi.
1/4
Si les contrôles sont hors de la plage attendue.
Chaque fois que la température ambiante varie de plus de
5 °C (recommandé).

Flacons de réactifs dans la boîte de kit
Contrôle de qualité interne : contenant de
l'ASB, 0,2 % NaN 3 . (Pour la valeur cible se
2,0 ml
référer à la fiche de données d'informations
de contrôle de qualité)
Le contrôle de qualité interne n'est applicable qu'au système
MAGLUMI. Pour le manuel d'utilisation et la valeur cible,
consulter la fiche de données d'informations de contrôle de
qualité. L'utilisateur doit évaluer les résultats à la lumière de ses
propres normes et connaissances.
Accessoires requis mais non fournis
MAGLUMI Reaction Module
REF : 630003
MAGLUMI Starter 1+2
REF : 130299004M
MAGLUMI Wash Concentrate
REF : 130299005M
MAGLUMI Light Check
REF : 130299006M
Veuillez vous procurer les accessoires auprès de Shenzhen New
Industries Biomedical Engineering Co., Ltd (SNIBE) ou de notre
représentant.
Préparation du réactif Integral
Il est essentiel d'agiter horizontalement, doucement et
soigneusement le réactif Integral avant de retirer le bouchon
(éviter la formation de mousse !) Retirer le bouchon et tourner
la petite molette du compartiment des microbilles magnétiques
dans un sens puis dans l'autre, jusqu'à ce que la couleur de la
suspension vire au marron. Placer l'Integral dans la zone des
réactifs et l'y laisser pendant 30 minutes. Pendant ce temps, les
microbilles magnétiques sont agitées automatiquement et
entièrement remises en suspension.
Ne pas interchanger le composant Integral de différents
réactifs ou lots !
Conservation et stabilité
 Fermé : conservé à 2-8 °C jusqu'à la date de péremption.
 Ouvert :
stable pendant 4 semaines. Pour assurer les
meilleures performances des kits, il est recommandé de placer
les kits ouverts au réfrigérateur s'ils ne doivent pas être utilisés
dans l'appareil au cours des 12 heures suivantes.


Maintenir verticalement pendant le stockage.
Conserver à l'abri de la lumière.
ÉTALONNAGE ET TRAÇABILITÉ
1) Traçabilité
Pour permettre un étalonnage précis, nous avons fourni les
échantillons d'étalonnage standardisés contre la référence OMS
W.H.O.1st International Reference Preparation 67/086.
2) Ré-étalonnage 2-points
Via la mesure des étalons, la courbe maîtresse prédéfinie est
ajustée (ré-étalonnée) jusqu'à un nouveau niveau de mesure
spécifique de l'instrument avec chaque étalonnage.
3) Fréquence de ré-étalonnage
 Après chaque changement de lots (réactif Integral ou réactifs
Starters).
 Toutes les semaines et/ou chaque fois qu'un nouvel Integral
est utilisé (recommandé).
 Après
chaque opération d'entretien de l'analyseur
d'immuno-analyse
par
chimiluminescence
(CLIA)
entièrement automatisé MAGLUMI.
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
PRÉLÈVEMENT
ÉCHANTILLONS
ET
PRÉPARATION
DES
Matériel d'échantillon : sérum ou urine
Éviter de congeler et décongeler plusieurs fois. Les échantillons
conservés doivent être soigneusement mélangés avant
l'utilisation (mélangeur Vortex).
Conditions pour les échantillons
• La prudence est de mise lors de la manipulation des
échantillons de patients pour éviter toute contamination
croisée. L'utilisation de pipettes ou embouts de pipettes
jetables est recommandée.
• Inspecter tous les échantillons pour rechercher la présence
de bulles. Retirer les bulles avec un embout applicateur
avant l'analyse. Utiliser un nouvel embout applicateur pour
chaque échantillon pour éviter toute contamination croisée.
Préparation pour l'analyse
• Les échantillons doivent être soigneusement mélangés après
la décongélation par vortexage à vitesse lente ou en les
retournant doucement. Il faut éviter des cycles multiples de
congélation-décongélation des échantillons.
• Tous les échantillons (échantillons des patients ou contrôles)
doivent être testés dans les 3 heures après été placés à
l'intérieur du système MAGLUMI. Consulter le service SNIBE
pour une discussion plus détaillée sur les contraintes de
conservation à l'intérieur de l'appareil.
Conservation
• Les échantillons peuvent être stockés jusqu'à 30 jours
congelés à une température inférieure ou égale à -20 °C
MISES EN GARDE ET PRÉCAUTIONS POUR LES
UTILISATEURS


Uniquement pour les procédures de diagnostic IN-VITRO.
Les instructions de la notice doivent être scrupuleusement
respectées. La fiabilité des résultats de l'analyse ne peut
être garantie en cas de non respect des instructions
figurant dans cette notice.
Précautions de sécurité
ATTENTION : ce produit nécessite la manipulation
d'échantillons d'origine humaine.

Les étalons de ce kit sont préparés à partir de produits tiré
du sérum bovin. Toutefois, comme aucune méthode de
test ne peut garantir avec certitude l'absence de virus VIH,
de l'hépatite B ou d'autres agents infectieux, ces réactifs
doivent être considérés comme un risque biologique
potentiel et manipulés avec les mêmes précautions
applicables à tout échantillon de sérum ou de plasma.

Tous les échantillons, les réactifs biologiques et les
matériels utilisés dans l'analyse doivent être considérés
comme potentiellement susceptibles de transmettre des
agents infectieux. Ils doivent donc être éliminés
conformément aux réglementations et recommandations
en vigueur des agences ayant juridiction sur le laboratoire,
et aux réglementations de chaque pays. Les matériels
jetables doivent être incinérés ; les déchets liquides
doivent être décontaminés avec de l'hypochlorite de
sodium à une concentration finale de 5 % pendant au
moins une demi-heure. Tout matériel devant être réutilisé
doit être autoclavé en utilisant une méthode de
surdestruction. Un minimum d’une heure à 121°C est
2/4



habituellement considéré comme adéquat, bien que les
utilisateurs doivent contrôler l'efficacité de leur cycle de
décontamination en le validant initialement et en utilisant
en routine des indicateurs biologiques.
Il est recommandé que tous les matériels d'origine
humaine soient considérés comme potentiellement
infectieux et manipulés conformément à la norme 29 CFR.
1910.1030 Occupational exposure to bloodborne
pathogens. Le niveau de sécurité biologique 2 ou d'autres
pratiques de sécurité biologique appropriées doivent être
appliqués pour les matériels qui contiennent ou sont
suspectés de contenir des agents infectieux.
Ce produit contient de l'azoture de sodium ; ce produit et
son contenant doivent être éliminés de manière sécurisée.
Les fiches de données de sécurité sont disponibles sur
demande.
Précautions de manipulation
• Ne pas utiliser les kits de réactifs après leur date de
péremption.
• Ne pas mélanger des réactifs provenant de différents kits de
réactifs.
• Avant de charger le kit de réactifs dans le système pour la
première fois, les microbilles nécessitent d'être mélangées
pour remettre en suspension les microbilles qui ont
sédimenté pendant l'expédition.
• Pour les instructions de mélange des microbilles, consulter la
rubrique COMPOSANTS DU KIT, préparation du réactif
Integral dans cette notice.
• Pour éviter toute contamination, porter des gants propres lors
de l'utilisation d'un kit de réactifs et d'un échantillon.
• Faire attention aux liquides résiduels qui ont séché à la
surface du kit.
• Pour une discussion détaillée sur les précautions de
manipulation pendant l'utilisation du système, consulter les
instructions de maintenance de SNIBE.
PROCÉDURE DE TEST
Pour assurer une performance adéquate du test, suivre
strictement
le
manuel
d'utilisation
de
l'analyseur
d'immuno-analyse par chimiluminescence (CLIA) entièrement
automatisé MAGLUMI. Chaque paramètre du test est identifié par
une radio-étiquette RFID sur le réactif Integral. Pour toute
information complémentaire veuillez consulter le manuel
d'utilisation
de
l'analyseur
d'immuno-analyse
par
chimiluminescence (CLIA) entièrement automatisé MAGLUMI.
20 μl
Échantillon, étalon
+ 40 μl
Marquage ABEI
+ 40 μl
Marquage FITC
+ 20 μl
Microbilles magnétiques
15 min
Incubation
400 μl
Cycle de lavage
3s
Mesure
DILUTION
La dilution de l'échantillon par l'analyseur n'est pas disponible
dans ce kit de réactifs
Les échantillons ayant des concentrations supérieures à la plage
de mesure peuvent être dilués manuellement. Après une dilution
manuelle, multiplier le résultat par le facteur de dilution.
Avant qu'une dilution manuelle ne doive être réalisée, veuillez
choisir des diluants appropriés ou consulter SNIBE pour avis.
CONTRÔLE DE QUALITÉ


Suivre les recommandations de contrôle de qualité pour les
laboratoires médicaux
Utiliser des contrôles appropriés pour le contrôle de qualité
au laboratoire. Les contrôles doivent être effectués au
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moins une fois par 24 heures (un cycle ne doit pas dépasser
24 heures), une fois par kit de réactifs et après chaque
étalonnage. Les intervalles des contrôles doivent être
adaptés aux exigences individuelles de chaque laboratoire.
Les valeurs obtenues doivent être dans les plages définies.
Chaque laboratoire doit établir des recommandations pour
les mesures correctives à prendre si des valeurs sont hors
de la plage.
LIMITES DE LA MÉTHODE
1) Limitations
Les patients atteints de malignités peuvent présenter des valeurs
d'IgG dans la plage normale. Les concentrations d'IgG peuvent
être élevées en cas de cirrhose du foie, d'hépatite ou de
tyrosinémie. Ainsi, le dosage des IgG est plus adapté à la
surveillance thérapeutique et au suivi ainsi que pour une
comparaison avec les résultats histologiques. Les niveaux
urinaires d'IgG ne peuvent être interprétés que dans le contexte
du tableau clinique et des autres procédures diagnostiques.
2) Substances interférentes
L'analyse n'est pas affectée par la bilirubine < 0, 06 mg/ml,
l'hémoglobine < 16 mg/dl ou les triglycérides < 12,5 mg/ml.
3) HAMA
Les échantillons de patients contenant des anticorps humains
anti-souris (HAMA) peuvent donner des valeurs faussement
élevées ou diminuées. Bien que des agents neutralisant les
HAMA soient ajoutés, des concentrations sériques d'HAMA
extrêmement élevées peuvent occasionnellement influencer les
résultats.
RÉSULTATS
1) Calcul des résultats
L'analyseur calcule automatiquement la concentration d'IgG
dans chaque échantillon au moyen d'une courbe
d'étalonnage qui est générée par une procédure de courbe
maîtresse d'étalonnage en 2 points. Les résultats sont
exprimés en µg/ml. Pour toute information complémentaire
veuillez consulter le manuel d'utilisation de l'analyseur
d'immuno-analyse
par
chimiluminescence
(CLIA)
entièrement automatisé MAGLUMI.
2) Interprétation des résultats
 Valeurs de référence : Urine < 6 μg/ml.
 Les résultats peuvent être différents entre les laboratoires en
raison des variations au sein de la population et de la
méthode de test. Si nécessaire, chaque laboratoire doit
établir sa propre plage de référence.
CARACTÉRISTIQUES DE PERFORMANCES
1) Précision
Le coefficient de variation intra-analyse a été évalué sur
3 niveaux différents de sérum de contrôle. Mesurer de manière
répétitive 10 fois au cours du même cycle pour calculer le
coefficient de variation.
Précision intra-analyse
Contrôle
Moyenne
SD (μg/ml)
CV %
(μg/ml)
Niveau 1
3,52
0,44
7,62 %
Niveau 2
9,54
0,73
4,11 %
Niveau 3
44,23
1,24
2,80 %
Le coefficient de variation inter-analyses a été évalué sur trois
lots de kits. Doser les sérums de manière répétée 10 fois dans la
même série, et mesurer 3 niveaux différents, pour un total de 30
fois pour calculer le coefficient de variation.
Précision inter-analyses
Contrôle
Moyenne
(μg/ml)
Niveau 1
18,06
Niveau 2
150,51
SD (μg/ml)
CV %
1,24
9,21
6,85 %
6,12 %
3/4
Niveau 3
601,74
38,09
6,33 %
2) Sensibilité analytique
< 0,3 μg/ml
La limite de détection représente la concentration d'analyte la
plus basse qui peut être distinguée de zéro.
3) Spécificité
Aucune réactivité croisée n'a été observée lors de l'ajout aux
analytes suivants présentant une réactivité croisée potentielle.
Composé
Concentration
IgE
IgA
IgM
320 UI/ml
40 μg/ml
40 μg/ml
"Analysis of immunoglobulin glycosylation by LC-ESI-MS of
glycopeptides
and
oligosaccharides". Proteomics 8 (14):
2858–2871.
6. Painter PC, Mosher LE, Rhoads C (July 1982). "Low-frequency
modes in the Raman spectra of proteins". Biopolymers 21 (7):
1469–72.
7. Chou KC (August 1985). "Low-frequency motions in protein
molecules. Beta-sheet and beta-barrel". Biophys. J. 48 (2):
289–97.
8. Hashira S, Okitsu-Negishi S, Yoshino K (August 2000).
"Placental transfer of IgG subclasses in a Japanese
population". Pediatr Int 42 (4): 337–42.
4) Récupération
En considérant un étalon haut de concentration connue comme
échantillon, le diluer selon un rapport 1:2 avec des diluants et
effectuer 10 mesures de sa concentration diluée. Puis calculer la
concentration et la récupération attendues de la concentration
mesurée. La récupération doit être de l'ordre de 90 % à 110 %.
Attendue
Mesure moyenne
Récupération
21,21 μg/ml
22,11 μg/ml
104 %
5) Linéarité
Utiliser l'étalon IgG pour préparer la courbe standard en six points,
en mesurant toutes les URL de points à l'exception du point A, et
effectuer ensuite un alignement linéaire à quatre paramètres en
coordonnées logarithmiques doubles, le coefficient de corrélation
linéaire absolu (r) doit être supérieur à 0,9800.
Point
d'étalon
Concentration
μg/ml
A
0.0
B
C
D
E
F
1,0
4,0
10,0
30,0
80,0
Coefficient de corrélation
linéaire absolu (r)
r = 0,9905
6) Comparaison de méthodes
Une comparaison du test des IgG MAGLUMI (y) avec un test des
IgG disponible dans le commerce (x) sur des échantillons
cliniques a donné les corrélations suivantes (µg/ml) :
Régression linéaire
y = 1,1089x + 0,1109
r = 0,9944
Nombre d'échantillons mesurés : 100
Les concentrations des échantillons étaient comprises entre
0,326 et 31,285 μg/ml.
RÉFÉRENCES
1. Anti-Helicobacter pylori immunoglobulin G (IgG) and IgA
antibody responses and the value of clinical presentations in
diagnosis of H. Pylori infection in patients with precancerous
lesions World Journal of Gastroenterology
2. Detection of H pylori infection by ELISA and Western blot
techniques and evaluation of anti CagA seropositivity in adult
Turkish dyspeptic patients World Journal of Gastroenterology.
3. Junqueira, Luiz C.; Jose Carneiro (2003). Basic Histology.
McGraw-Hill. ISBN 0-8385-0590-2.
4. Mallery DL, McEwan WA, Bidgood SR, Towers GJ, Johnson
CM, James LC (2010). "Antibodies mediate intracellular
immunity through tripartite motif-containing 21 (TRIM21)". Proc.
Natl. Acad. Sci. U.S.A. 107 (46): 19985–19990.
5. Stadlmann J, Pabst M, Kolarich D, Kunert R, Altmann F. (2008).
029 IgG(urine analysis)-IFU-V3.03-fr-FR-100
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