phosphatase acide 30 – 30118ly

PHOSPHATASE ACIDE
30 – 30118LY
IVD Dispositif médical de diagnostic in vitro
Code CND : W01030708
volume de la solution de travail ... 10 ml
temps de réalisation .................... 1 heure 26 minutes
température de stockage ............. - 20°C
équipement complémentaire ....... aucun
But prévu
Produit pour la préparation d'échantillons cyto-histologiques à examiner en microscopie optique.
Application
Coupes cryostatiques de 8 microns de muscle strié.
Mise en évidence de l'activité enzymatique de la phosphatase acide.
Elle est présente dans les macrophages et les lysosomes ; elle est le signe de phénomènes de nécrose
et de régénération
Principe
Le phosphate de naphtol acide est hydrolysé par les phosphatases acides présentes dans le tissu, ce qui
entraîne la production de dérivés du naphtol.
Ces dérivés copulent également avec le sel de diazonium instable, la pararosaniline hexazotée, en
produisant un colorant azoïque rouge capable de marquer les sites d'activité enzymatique.
Méthode
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Résultats
Composants
Pour une application correcte de la méthode, il est nécessaire d'utiliser les réactifs à température
ambiante.
Coupes dans fixatif pour phosphatase acide (Bio-Optica code 30-30120)
10 minutes
Sécher à l'air
10 minutes
Préparation de la solution de travail :
- Verser le réactif B dans le réactif C. Agiter pendant 5-10 sec. et laisser reposer pendant 1 min.
- Verser le contenu de l'éprouvette A dans le réactif D. Agiter pendant 5-10 secondes.
- Unir la solution B+C à la solution A+D. Agiter pendant 5-10 secondes.
Incuber la coupe à 37 °C
45 minutes
Laver dans de l'eau distillée
10 minutes
Vert de méthyle (Bio-Optica code 30-30119)
5 minutes
Laver dans de l'eau distillée
5 minutes
Monter dans une solution aqueuse de montage ou bien déshydrater rapidement dans la série
ascendante des alcools, clarifier et monter avec une solution xylénique de montage.
Activité enzymatique phosphatase acide positive ............................................................................ rouge
Fond et noyaux ................................................................................................................................... vert
Composants
Réactif A ................................... 1 x 9,2 ml
Acétate de sodium anhydre
Réactif B ................................... 1 x 0,4 ml
Pararosaniline hydrochloride en solution
Réactif C ................................... 1 x 0,4 ml
Nitrate de sodium en solution
Réactif D ................................... 1 x 0,5 ml
Phosphate de naphtol-ASBI
Diméthylformamide
CAS
CE
Index
127-09-3
204-823-8
-
n.a.
-
-
7632-00-0
231-555-9
007-010-00-4
1919-91-1
68-12-2
217-645-0
200-679-5
616-001-00-X
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Fabricant : Bio-Optica Milano s.p.a.
Bio Optica Milano s.p.a.
via San Faustino 58 • I - 20134 Milan
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www.bio-optica.it
Avertissements et
précautions
Le produit doit être utilisé par du personnel technique spécialisé.
Le produit est classé comme dangereux.
Lire attentivement les informations figurant sur l'étiquette (symboles de danger, phrases de risque et de
sécurité), et consulter toujours la fiche de sécurité contenant les informations relatives aux risques
présentés par la préparation, les mesures de précaution à adopter pendant l'utilisation et les premiers
soins, ainsi que les mesures en cas de dispersion accidentelle.
Ne pas utiliser si le conditionnement primaire a été endommagé.
Conservation
Conserver la préparation à -20 °C. Les conditionnements doivent toujours être bien fermés.
Stabilité
Si l'on souhaite aliquoter et congeler le produit à -20 ° C pour une utilisation ultérieure, Bio-Optica ne
répond pas des pertes d'activité résultant d'une telle pratique. Validité du produit : 1 année.
Élimination
Déchet dangereux ; confier à des entreprises spécialisées et agréées, selon les lois en vigueur.
Bibliographie
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Grogg E, Pearse AGE. J Path Bact. 1952; 64:627 Pearse AGE. Histochemistry Theoretical and
Applied 2nd ed. London; 1960.
Barka, T. and Anderson, P.J., 1962. In: Theory and Practice of Histotechnology, Sheehan, D.C. and
Hrapchak, B.B., 2nd Edition 1980; Battelle Memorial Institute, Columbus, OH 1987.
Date d'émission : juillet 2014
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