system - Laboratoire de biologie médicale du Quai Vallière

fr
system
B12
7K61
49-8735/R06
B7K612
Faire attention aux modifications
Révision d'août 2010
B12
Service Clients : Retrouvez le contact de votre Service Clients Abbott
sur www.abbottdiagnostics.com
Suivre scrupuleusement les instructions de cette notice. La fiabilité des résultats du dosage ne peut pas être garantie si
ces instructions ne sont pas strictement respectées.
Légende des symboles utilisés
Référence
Contrôle bas, moyen,
haut (L, M, H)
Dispositif médical de
diagnostic in vitro
CD-ROM de dosages
Numéro de lot
Cupules réactionnelles
Date d'expiration
Godets-échantillons
Bouchons de remplacement
Conserver entre 2 et 8 °C
Lot de réactifs
Consulter les instructions
d'utilisation
Mise en garde : Risque pour la
reproduction
Calibrateurs A à F
Mise en garde : Peut entraîner
des réactions allergiques
Numéro de série
Contient de l'azide de sodium. Au
contact d'un acide, dégage un
gaz très toxique.
Septum
Fabricant
Mise en garde : Gravement irritant
L'explication complète des symboles utilisés pour la dénomination des composants se trouve au
paragraphe REACTIFS.
1
DENOMINATION
REACTIFS
ARCHITECT B12
Kit de réactifs, 100 tests/500 tests
REMARQUE : Certains conditionnements ne sont pas disponibles dans
tous les pays ou utilisables sur tous les analyseurs ARCHITECT i Systems.
Contacter le distributeur local.
ARCHITECT B12 Reagent Kit (7K61)
•
1 flacon (6,6 ml pour le flacon de 100 tests /27,0 ml
pour le flacon de 500 tests) de microparticules recouvertes de facteur
intrinsèque (porcin) dans du tampon borate contenant des stabilisants
de protéines (bovines). Concentration minimale : 0,1 % de particules
solides. Conservateurs : agents antimicrobiens.
•
1 flacon (5,9 ml pour le flacon de 100 tests / 26,3 ml
pour le flacon de 500 tests) de conjugué B12 marqué à l'acridinium
dans du tampon MES. Concentration minimale : 0,7 ng/ml.
Conservateur : ProClin.
•
1 flacon (10,0 ml pour le flacon de 100 tests / 51,0 ml
pour le flacon de 500 tests) de diluant de dosage B12 contenant du tampon
borate avec de l'EDTA. Conservateurs : agents antimicrobiens.
•
1 flacon (27,0 ml pour le flacon
de 100 tests / 50,4 ml pour le flacon de 500 tests) de réactif 1 de
prétraitement B12 contenant de l'hydroxyde de sodium 1,0 N avec
0,005 % de cyanure de potassium.
•
1 flacon (5,5 ml pour le flacon de
100 tests / 25,9 ml pour le flacon de 500 tests) de réactif 2 de
prétraitement B12 contenant de l'alpha-monothioglycérol et de
l'EDTA.
•
1 flacon (5,5 ml pour le flacon de
100 tests / 25,9 ml pour le flacon de 500 tests) de réactif 3 de
prétraitement B12 contenant du dicyanure de cobinamide dans
du tampon borate avec des stabilisants de protéines (aviaires).
Conservateur : azide de sodium.
DOMAINE D'APPLICATION
ARCHITECT B12 est un dosage microparticulaire (microparticules
recouvertes de facteur intrinsèque) par chimiluminescence pour la
détermination quantitative de la vitamine B12 dans le sérum et le plasma
humains sur l'ARCHITECT i System.
RESUME ET EXPLICATION DU TEST
La vitamine B12 (B12) appartient à la famille des cobalamines et constitue
un cofacteur pour la conversion de la méthylmalonyl coenzyme-A (CoA)
en succinyl CoA. En outre, la vitamine B12 est un cofacteur de la synthèse
de la méthionine à partir de l'homocystéine. Elle est également impliquée
dans la formation de la myéline et est nécessaire, avec les folates, à la
synthèse de l'ADN.1,2
La vitamine B12 absorbée provient des aliments après s'être liée à
une protéine appelée facteur intrinsèque produite par l'estomac. Les
différentes causes d'une carence en vitamine B12 peuvent être classées
en trois catégories : malnutrition, malabsorption et autres troubles
gastro‑intestinaux. Une carence en B12 peut être à l'origine d'une anémie
mégaloblastique (MA), de syndromes neurologiques et de dégénérescence
de la mœlle épinière. Toute carence en B12, même faible, peut entraîner
une détérioration de la gaine de myéline entourant et protégeant les
fibres nerveuses et aboutir à une neuropathie périphérique. Les lésions
neurologiques dues à une carence en B12 peuvent devenir irréversibles
si la cause de la carence n'est pas traitée. En l'absence de traitement,
les personnes présentant des carences en facteur intrinsèque risquent
de développer une MA appelée anémie pernicieuse (PA).2
La relation entre les concentrations en vitamine B12 et l'anémie
mégaloblastique n'est pas toujours claire puisque certains patients
souffrant de MA présentent des concentrations en B12 normales ; à
l'inverse, de nombreux individus présentant une carence en B12 ne sont
pas atteints de MA. Toutefois, en présence d'anémie mégaloblastique
(caractérisée par un volume corpusculaire moyen (VCM) élevé), il y a
généralement une carence en vitamine B12 sérique ou en folates.2,3
La prévalence de la carence en B12 dans la population générale n'est
pas connue mais elle augmente avec l'âge. Selon une étude,4 pour 15 %
des adultes âgés de plus de 65 ans, les analyses de laboratoire ont mis
en évidence une carence en vitamine B12.
Un taux sérique de B12 inférieur à la valeur attendue peut indiquer un
épuisement prochain des réserves en B12 tissulaires. Par contre, un
taux de B12 se situant dans la plage normale basse ne permet pas de
garantir que les taux de B12 sont normaux ; d'autres tests permettant de
doser l'holotranscobalamine,5 l'homocystéine et l'acide méthylmalonique
s'imposent donc pour toute personne symptomatique.6,7
Il existe un nombre important d'affections associées à des concentrations
sériques basses en vitamine B12, dont la carence en fer, la grossesse
normale près du terme, le végétarisme, la gastrectomie partielle, les
détériorations iléales, la maladie cœliaque, la prise de contraceptifs par
voie orale, la compétition parasitaire, la déficience pancréatique, l'épilepsie
traitée et la vieillesse.2,8-10,11 Les maladies liées à des concentrations
sériques élevées en vitamine B12 comprennent l'insuffisance rénale, les
affections hépatiques, ainsi que les maladies myéloprolifératives.8,12
Diluant de dosage
ARCHITECT i Multi-Assay Manual Diluent (7D82-50)
•
1 flacon (100 ml) d'ARCHITECT i
Multi-Assay Manual Diluent contenant une solution saline tamponnée
au phosphate. Conservateur : agent antimicrobien.
Autres réactifs
ARCHITECT i Pre-Trigger Solution
•
Solution de préactivation contenant 1,32 %
(m/v) d'eau oxygénée.
ARCHITECT i Trigger Solution
•
Solution d'activation contenant de l'hydroxyde
de sodium 0,35 N.
ARCHITECT i Wash Buffer
•
Tampon de lavage contenant une solution saline
tamponnée au phosphate. Conservateurs : agents antimicrobiens.
PRECAUTIONS ET RESTRICTIONS D'EMPLOI
•
• Pour diagnostic in vitro
• Suivre scrupuleusement les instructions de cette notice. La fiabilité
des résultats du dosage ne peut pas être garantie si ces instructions
ne sont pas strictement respectées.
PRINCIPES BIOLOGIQUES DE LA METHODE
ARCHITECT B12 est un dosage en deux étapes avec prétraitement
automatisé des échantillons, pour la détermination du taux de B12
dans le sérum et le plasma humains, utilisant la technologie de dosage
immunologique microparticulaire par chimiluminescence (CMIA) à
protocoles de dosage flexibles, appelée Chemiflex.
L'échantillon et les réactifs 1, 2 et 3 de prétraitement sont mis en présence.
Une partie aliquote de l'échantillon prétraité est aspirée et transférée dans
une nouvelle cupule réactionnelle (CR). L'échantillon prétraité, le diluant
de dosage et les microparticules paramagnétiques recouvertes de facteur
intrinsèque sont mis en présence. La B12 présente dans l'échantillon se lie
aux microparticules recouvertes de facteur intrinsèque. Après lavage, le
conjugué B12 marqué à l'acridinium est ajouté dans un deuxième temps.
Les solutions de préactivation et d'activation sont ensuite ajoutées au
mélange réactionnel et la chimiluminescence résultante est mesurée en
unités relatives de lumière (URL). Il existe une relation inverse entre la
quantité de B12 présente dans l'échantillon et les URL détectées par le
système optique ARCHITECT i.
Pour de plus amples informations concernant l'analyseur et la technologie
de dosage, se référer au Chapitre 3 du Manuel Technique ARCHITECT.
Mesures de sécurité
• ATTENTION : Ce produit nécessite la manipulation d'échantillons
humains. Il est recommandé de considérer tous les produits d'origine
humaine comme potentiellement infectieux et de les manipuler selon
les règles "OSHA Standard on Bloodborne Pathogens".13 Les produits
contenant ou susceptibles de contenir des agents infectieux doivent
être manipulés selon les règles de biosécurité de niveau 214 ou autres
règles de biosécurité en vigueur15,16.
2
Les mises en garde et précautions suivantes s'appliquent aux composants
ci-après :
• Microparticules
• Diluant de dosage
• Réactif de prétraitement 3
MISE EN GARDE : Contient des méthylisothiazolones.
H317
Prévention
P261
MISE EN GARDE : Contient du borate de sodium.
H361
Prévention
P201
P202
P281
Réponse
P308+P313
Conservation
P405
P272
Susceptible de nuire à la fertilité ou
au fœtus.
P280
Se procurer les instructions avant
utilisation.
Ne pas manipuler avant d’avoir lu et
compris toutes les précautions de
sécurité.
Utiliser l’équipement de protection
individuel requis.
EN CAS DE CONTACT AVEC LA
PEAU : Laver abondamment à l'eau
et au savon.
P333+P313
En cas d'irritation ou d'éruption
cutanée : Consulter un médecin.
P363
Laver les vêtements contaminés
avant réutilisation.
Ne se débarrasser de ce produit et de son récipient qu'en
prenant toutes précautions d'usage.
En cas d'exposition prouvée ou
suspectée : consulter un médecin.
Garder sous clef.
Les mises en garde et précautions suivantes s'appliquent au composant
ci-après :
• Réactif de prétraitement 1
Les mises en garde et précautions suivantes s'appliquent au composant
ci-après :
• Réactif de prétraitement 2
MISE EN GARDE : Contient du monothioglycérol.
H303
H313
Prévention
P264
P280
Eviter de respirer les brouillards /
vapeurs / aérosols.
Les vêtements de travail contaminés
ne devraient pas sortir du lieu de
travail.
Porter des gants de protection /
des vêtements de protection / un
équipement de protection des yeux.
Réponse
P302+P352
Ne se débarrasser de ce produit et de son récipient qu'en
prenant toutes précautions d'usage.
H315
H319
Peut provoquer une allergie cutanée.
DANGER :
Contient de l'hydroxyde de sodium.
H314
Provoque des brûlures de la peau et
des lésions oculaires graves.
Peut être corrosif pour les métaux.
Provoque une irritation cutanée.
Provoque une sévère irritation des
yeux.
Nocif en cas d'ingestion.
Peut être nocif par contact cutané.
H290
Prévention
P234
Se laver les mains soigneusement
après manipulation.
Porter des gants de protection /
des vêtements de protection / un
équipement de protection des yeux.
P264
P260
P280
Réponse
P301+P330
+ P331
P304+P340
Réponse
P305+P351
+ P338
EN CAS DE CONTACT AVEC LES
YEUX : Rincer avec précaution à
l'eau pendant plusieurs minutes.
Enlever les lentilles de contact si la
victime en porte et si elles peuvent
être facilement enlevées. Continuer
à rincer.
P337+P313
Si l'irritation oculaire persiste :
consulter un médecin.
P302+P352
EN CAS DE CONTACT AVEC LA
PEAU : Laver abondamment à l'eau
et au savon.
P332+P313
En cas d'irritation cutanée :
Consulter un médecin.
P362
Enlever les vêtements contaminés
et les laver avant réutilisation.
P312
Appeler un CENTRE ANTIPOISON
ou un médecin en cas de malaise.
Ne se débarrasser de ce produit et de son récipient qu'en
prenant toutes précautions d'usage.
P305+P351
+ P338
P303+P361
+ P353
P363
P310
P390
Les mises en garde et précautions suivantes s'appliquent au composant
ci-après :
• Conjugué
Conserver uniquement dans le
récipient d'origine.
Ne pas respirer les brouillards /
vapeurs / aérosols.
Se laver les mains soigneusement
après manipulation.
Porter des gants de protection /
des vêtements de protection / un
équipement de protection des yeux.
EN CAS D'INGESTION : Rincer la
bouche. NE PAS faire vomir.
EN CAS D'INHALATION : Transporter la
victime à l'extérieur et la maintenir au
repos dans une position où elle peut
confortablement respirer.
EN CAS DE CONTACT AVEC LES
YEUX : Rincer avec précaution à l'eau
pendant plusieurs minutes. Enlever
les lentilles de contact si la victime en
porte et si elles peuvent être facilement
enlevées. Continuer à rincer.
EN CAS DE CONTACT AVEC LA
PEAU (ou les cheveux) : Enlever
immédiatement les vêtements
contaminés. Rincer la peau à l’eau / se
doucher.
Laver les vêtements contaminés avant
réutilisation.
Appeler immédiatement un CENTRE
ANTIPOISON ou un médecin.
Absorber toute substance répandue
pour éviter qu'elle attaque les
matériaux environnants.
Conservation
P405
P406
Garder sous clef.
Stocker dans un récipient résistant à
la corrosion avec doublure intérieure
résistante.
Ne se débarrasser de ce produit et de son récipient qu'en
prenant toutes précautions d'usage.
3
• Le réactif de prétraitement 3 contient de l'azide de sodium. Au contact
d'un acide, dégage un gaz très toxique. Ne se débarrasser de ce produit
et de son récipient qu'en prenant toutes précautions d'usage.
• Pour de plus amples informations sur l'élimination appropriée de l'azide
de sodium et une explication détaillée des mesures de sécurité lors
du fonctionnement de l'analyseur, se référer au Chapitre 8 du Manuel
Technique ARCHITECT.
• Pour de plus amples informations sur l'impression des paramètres de
dosage, se référer au Chapitre 5 du Manuel Technique ARCHITECT.
• Pour une explication détaillée du fonctionnement de l'analyseur, se
référer au Manuel Technique ARCHITECT.
• L'unité de résultat par défaut du dosage ARCHITECT B12 est le pg/ml.
Pour l'enregistrement des résultats, il est possible de sélectionner
l'unité alternative pmol/l en réglant le paramètre de dosage "Unités
de concentration résultat" sur pmol/L. Le facteur de conversion utilisé
par l'appareil est de 0,7378.
Précautions d'emploi
• Ne pas utiliser les kits de réactifs au-delà de leur date d'expiration.
• Ne pas effectuer de pools de réactifs au sein d'un même kit ou
entre plusieurs kits de réactifs.
• Avant de charger l'ARCHITECT B12 Reagent Kit sur l'analyseur pour
la première fois, le flacon de microparticules doit être homogénéisé
afin de remettre en suspension les microparticules qui se sont
déposées pendant le transport. Pour de plus amples informations
sur l'homogénéisation des microparticules, se référer au paragraphe
Procédure du dosage de la partie PROCEDURE de cette notice.
• Des septums DOIVENT être utilisés afin d'empêcher l'évaporation et
la contamination des réactifs et d'assurer leur intégrité. La fiabilité
des résultats du dosage ne peut pas être garantie si les septums ne
sont pas utilisés conformément aux instructions de cette notice.
• Une exposition prolongée du réactif 1 de prétraitement B12 à l'air
peut entraîner une diminution de la performance.
• Afin d'éviter toute contamination, porter des gants propres lors de
l'application d'un septum sur un flacon de réactif débouché.
• Une fois qu'un septum a été placé sur un flacon de réactif ouvert,
ne pas retourner le flacon afin d'éviter toute fuite de réactif et de ne
pas fausser les résultats du dosage.
• Avec le temps, il se peut que des liquides résiduels sèchent à la
surface du septum. Il s'agit de sels secs qui n'ont aucune incidence
sur la performance du dosage.
• Pour de plus amples informations sur les précautions d'emploi lors du
fonctionnement de l'analyseur, se référer au Chapitre 7 du Manuel
Technique ARCHITECT.
PRELEVEMENT ET PREPARATION DES ECHANTILLONS
POUR L'ANALYSE
Les types de tubes d'échantillons suivants ont été vérifiés pour l'utilisation
avec le dosage ARCHITECT B12 :
Verre
Sérum
Plastique
Sérum
Séparateur sérum
Séparateur plasma à l'héparinate de lithium
Héparinate de sodium
EDTA dipotassique
L'ARCHITECT i System n'est pas configuré pour détecter le type d'échantillon
utilisé pour le dosage. Il revient par conséquent à l'utilisateur de vérifier les
types d'échantillons utilisés dans le dosage ARCHITECT B12.
Etats des échantillons
• Ne pas utiliser d'échantillons présentant les caractéristiques suivantes :
• inactivation par la chaleur
• pools d'échantillons
• hémolyse
• contamination microbienne évidente
• La performance de ce test n'a pas été établie pour les fluides corporels
autres que le sérum et le plasma humains.
• Pour obtenir des résultats exacts, les échantillons de sérum et de
plasma ne doivent pas contenir de fibrine, ni de globules rouges et
autres particules en suspension. Les échantillons de sérum provenant
de patients sous traitement anticoagulant ou thrombolytique peuvent
contenir de la fibrine en raison d'une coagulation incomplète.
• Manipuler les échantillons de patients avec précaution afin d'éviter
toute contamination croisée. Il est recommandé d'utiliser des pipettes
ou des embouts de pipettes à usage unique.
• Pour obtenir des résultats optimaux, vérifier que les échantillons ne
contiennent pas de bulles. Si des bulles sont présentes, les éliminer
à l'aide d'un bâtonnet avant l'analyse. Utiliser un bâtonnet neuf pour
chaque échantillon afin d'éviter toute contamination croisée.
Conditions de conservation
•
L'ARCHITECT B12 Reagent Kit doit être conservé entre 2 et
8 °C en position verticale et peut être utilisé immédiatement après sa
sortie du réfrigérateur (2 à 8 °C).
• Les réactifs sont stables jusqu'à leur date d'expiration s'ils sont
conservés et manipulés selon les indications du fabricant.
• L'ARCHITECT B12 Reagent Kit peut être conservé à bord de
l'ARCHITECT i System pendant 30 jours au maximum. Au-delà de ce
délai, le kit de réactifs doit être jeté. Pour de plus amples informations
sur le suivi de la stabilité des réactifs à bord de l'analyseur, se référer
au Chapitre 5 du Manuel Technique ARCHITECT.
• Les réactifs peuvent être conservés à l'intérieur ou à l'extérieur de
l'ARCHITECT i System. Si les réactifs sont retirés de l'analyseur,
les conserver entre 2 et 8 °C (munis de septums et de bouchons
de remplacement) en position verticale. Pour les réactifs conservés
à l'extérieur de l'analyseur, il est recommandé de les laisser dans
leurs portoirs et emballages d'origine afin de les maintenir dans
une position verticale. Si le flacon de microparticules (muni d'un
septum) ne reste pas dans une position verticale pendant sa
conservation au réfrigérateur à l'extérieur de l'analyseur, le kit
de réactifs doit être jeté. Pour de plus amples informations sur
le déchargement des réactifs, se référer au Chapitre 5 du Manuel
Technique ARCHITECT.
Préparation pour l'analyse
• Pour le traitement des tubes de prélèvement de sérum et de
plasma, suivre les instructions données par le fabricant. La
séparation gravimétrique n'est pas suffisante pour la préparation
des échantillons.
• Homogénéiser soigneusement les échantillons décongelés en les
passant au Vortex à une vitesse faible ou en les retournant 10 fois.
Examiner les échantillons visuellement. En cas d'apparition de
couches ou de stratifications, continuer à mélanger jusqu'à ce que
les échantillons soient visiblement homogènes.
• Afin d'obtenir des résultats cohérents, les échantillons doivent être
transférés dans des tubes pour centrifugeuse puis centrifugés à une
vitesse > 10 000 x g pendant 10 minutes avant l'analyse dans les
cas suivants :
• les échantillons contiennent de la fibrine, des globules rouges ou
des particules en suspension ;
• les échantillons ont été congelés puis décongelés.
• Les échantillons centrifugés présentant une couche lipidique en
surface doivent être transférés dans un godet-échantillon ou un tube
aliquot. Veiller à transférer exclusivement l'échantillon clarifié sans
substances lipémiques.
• Pour l'analyse, transférer l'échantillon clarifié dans un godet‑échantillon
ou un tube aliquot.
Indications d'altération des réactifs
Un contrôle dont la valeur se situe en dehors des limites spécifiées peut
indiquer une altération des réactifs ou des erreurs de technique. Les
résultats des échantillons analysés dans la même série ne sont pas valides
et les échantillons doivent être réanalysés. Une recalibration du dosage
peut être nécessaire. Pour de plus amples informations sur le dépannage,
se référer au Chapitre 10 du Manuel Technique ARCHITECT.
FONCTIONNEMENT DE L'APPAREIL
• Avant d'effectuer le dosage, le fichier du dosage ARCHITECT B12
doit être installé sur l'ARCHITECT i System à partir d'un disque de
dosages ARCHITECT i System. Pour de plus amples informations
concernant l'installation du fichier de dosage, la visualisation et la
modification des paramètres de dosage, se référer au Chapitre 2 du
Manuel Technique ARCHITECT.
Conservation
• Les échantillons peuvent être conservés avec ou sans le caillot, les
globules rouges ou le gel séparateur pendant
• 3 jours au maximum à température ambiante ou
• 7 jours au maximum entre 2 et 8 °C.
4
• Echantillon prioritaire : 87 µl pour le premier dosage B12, plus
37 µl pour chaque dosage B12 supplémentaire effectué sur le
même godet-échantillon.
• Echantillon de routine maintenu jusqu'à 3 heures à bord de
l'analyseur : 150 µl pour le premier dosage B12, plus 37 µl pour
chaque dosage B12 supplémentaire effectué sur le même godetéchantillon.
• Echantillon de routine maintenu plus de 3 heures à bord de
l'analyseur : remplacer l'échantillon (échantillon de patient,
contrôle ou calibrateur) par un échantillon frais.
• En cas d'utilisation de tubes primaires ou aliquots, utiliser la
jauge échantillon afin de s'assurer que le volume d'échantillon
de patient est suffisant.
• Préparer les calibrateurs et les contrôles.
• Homogénéiser les ARCHITECT B12 Calibrators et les
ARCHITECT B12 Controls en les retournant délicatement avant
l'emploi.
• Pour obtenir les volumes requis d'ARCHITECT B12 Calibrators
et d'ARCHITECT B12 Controls, tenir les flacons à la verticale et
distribuer 3 gouttes de chacun des calibrateurs ou 3 gouttes de
chacun des contrôles dans les godets-échantillons respectifs.
• Charger les échantillons
• Pour de plus amples informations sur le chargement des échantillons,
se référer au Chapitre 5 du Manuel Technique ARCHITECT.
• Appuyer sur la touche LANCER.
• Pour obtenir une performance optimale, il est important de suivre
les procédures de maintenance de routine décrites au Chapitre 9
du Manuel Technique ARCHITECT. Si le laboratoire requiert une
maintenance plus fréquente, se conformer à ces exigences.
• Si le dosage est retardé de plus de 3 jours pour les échantillons
conservés à température ambiante ou de plus de 7 jours pour les
échantillons conservés entre 2 et 8 °C, séparer le sérum ou le plasma
du caillot, des globules rouges ou du gel séparateur et conserver à
une température inférieure ou égale à -20 °C.
• Eviter de congeler/décongeler les échantillons plus de trois fois.
Transport
• Avant d'expédier des échantillons, il est recommandé de les séparer
du caillot, du gel séparateur ou des globules rouges.
• Lorsque des échantillons sont expédiés, ils doivent être conditionnés
et étiquetés conformément à la législation régissant le transport des
échantillons cliniques et des substances infectieuses.
• Les échantillons peuvent être expédiés congelés (carboglace) à une
température inférieure ou égale à -20 °C. Ne pas dépasser les temps
de conservation mentionnés ci-dessus.
PROCEDURE
Matériel fourni
• 7K61 ARCHITECT B12 Reagent Kit
Matériel nécessaire mais non fourni
• Analyseur ARCHITECT i System
• ARCHITECT i
• 7K61-01 ARCHITECT B12 Calibrators
• 7K61-10 ARCHITECT B12 Controls
• 7D82-50 ARCHITECT i Multi-Assay Manual Diluent
• ARCHITECT i
• ARCHITECT i
• ARCHITECT i
• ARCHITECT i
• ARCHITECT i
• ARCHITECT i
• ARCHITECT i
• Pipettes ou embouts de pipette (facultatif).
• Pour de plus amples informations sur le matériel requis pour les
procédures de maintenance, se référer au Chapitre 9 du Manuel
Technique ARCHITECT.
Procédures de dilution des échantillons
Les échantillons dont la concentration en B12 est supérieure à 2 000 pg/ml
(1 476 pmol/l) sont annotés avec le code “>2000” lors de l'utilisation de pg/ml
(“>1476” lors de l'utilisation de pmol/l) et peuvent être dilués à l'aide du protocole
de dilution automatique ou de la procédure de dilution manuelle.
• Si l'on utilise le protocole de dilution automatique, le système effectue
une dilution au 1/3. Le système utilisera ce facteur de dilution afin de
calculer automatiquement la concentration de l'échantillon avant la
dilution. Cette concentration constituera le résultat enregistré.
• Les dilutions manuelles doivent être effectuées de la manière
suivante :
• La dilution recommandée pour le dosage B12 est de 1/4.
• Pour une dilution au 1/4, ajouter 100 µl d'échantillon de patient à
300 µl d'ARCHITECT i Multi-Assay Manual Diluent (7D82-50).
• La dilution recommandée pour les échantillons provoquant à
plusieurs reprises (2 ou davantage) l'apparition du code d'erreur
“3350 Impossible d'effectuer le dosage, erreur d'aspiration de
(Pipeteur échantillons) en (CR 24)” est de 1/2.
• Pour une dilution au 1/2, ajouter 100 µl d'échantillon de patient à
100 µl d'ARCHITECT i Multi-Assay Manual Diluent (7D82-50).
• Saisir le facteur de dilution dans l'écran Demande de patient ou
Demande de contrôle. Le système utilisera ce facteur de dilution
afin de calculer automatiquement la concentration de l'échantillon
avant la dilution. Cette concentration constituera le résultat
enregistré. Le résultat avant l'application du facteur de dilution
doit être supérieur à 83 pg/ml (61 pmol/l).
Pour de plus amples informations sur les demandes de dilution, se référer
au Chapitre 5 du Manuel Technique ARCHITECT.
Procédure de dosage
• Avant de charger l'ARCHITECT B12 Reagent Kit sur l'analyseur pour la
première fois, le flacon de microparticules doit être homogénéisé afin
de remettre en suspension les microparticules qui se sont déposées
pendant le transport. Après le premier chargement des microparticules,
aucune homogénéisation supplémentaire n'est nécessaire.
• Retourner le flacon de microparticules 30 fois.
• Examiner le flacon pour s'assurer que les microparticules sont
remises en suspension. S'il reste encore des microparticules
collées au flacon, continuer à retourner ce dernier jusqu'à ce
qu'elles soient complètement remises en suspension.
• Une fois les microparticules remises en suspension, retirer et jeter
le bouchon. Retirer un septum de la pochette en portant des gants
propres. Placer soigneusement le septum dans l'ouverture du
flacon.
• Si les microparticules ne sont pas remises en suspension, NE
PAS LES UTILISER. Contacter le Service Clients Abbott.
• Charger l'ARCHITECT B12 Reagent Kit sur l'ARCHITECT i System.
Vérifier que tous les réactifs requis sont présents. S'assurer que
chaque flacon de réactif est recouvert d'un septum. Pour des
informations détaillées sur le chargement des réactifs, se référer au
Chapitre 5 du Manuel Technique ARCHITECT.
• Si nécessaire, programmer une calibration.
• Pour de plus amples informations sur les demandes de calibration, se
référer au Chapitre 6 du Manuel Technique ARCHITECT.
• Programmer les analyses.
• Pour de plus amples informations sur les demandes d'analyse des
échantillons de patients, des calibrateurs et des contrôles, ainsi que sur
les procédures générales de fonctionnement, se référer au Chapitre 5
du Manuel Technique ARCHITECT.
• Le volume minimum requis dans le godet-échantillon est calculé par
le système et imprimé sur le rapport Liste des demandes. Ne pas
prélever plus de 10 répliques à partir du même godet-échantillon.
Afin de minimiser les pertes par évaporation, vérifier que le volume
d'échantillon adéquat est présent dans le godet-échantillon avant
d'effectuer le dosage.
Calibration
• Pour effectuer une calibration ARCHITECT B12, analyser les
calibrateurs A à F en double. Les calibrateurs doivent être chargés
en position prioritaire.
• Plage de calibration : 0 - 2 000 pg/ml (0 - 1 476 pmol/l).
• Un échantillon de chaque niveau de contrôle doit être analysé afin
de pouvoir évaluer la calibration du dosage.
• Programmer les contrôles comme décrit ci-dessus.
• S'assurer que les valeurs des contrôles du dosage se situent dans les
limites de concentration spécifiées dans la notice des contrôles.
• Lorsque la calibration du dosage ARCHITECT B12 a été acceptée et
mémorisée, tous les échantillons qui suivent peuvent être analysés
sans effectuer de nouvelle calibration, sauf si :
• un kit de réactifs portant un nouveau numéro de lot est utilisé.
• les valeurs des contrôles se situent hors des limites spécifiées.
5
PROCEDURES DU CONTROLE DE QUALITE
VALEURS ATTENDUES
Le contrôle recommandé pour le dosage ARCHITECT B12 consiste à
analyser un échantillon de chacun des niveaux de contrôle une fois toutes
les 24 heures chaque jour d'utilisation. Les contrôles supplémentaires
peuvent être effectués conformément à la réglementation en vigueur ou aux
exigences relatives à l'accréditation ainsi qu'aux exigences du laboratoire
en matière de contrôle de qualité.
Les valeurs des contrôles doivent se situer dans les limites spécifiées
dans la notice des contrôles. Si un contrôle se situe en dehors de la plage
spécifiée, tous les résultats d'analyse générés depuis les derniers résultats
de contrôle acceptables doivent être évalués afin de déterminer si les
résultats d'analyse peuvent avoir été affectés négativement. Les résultats
d'analyse affectés négativement ne sont pas valides et ces échantillons
doivent être réanalysés. Pour de plus amples informations sur le dépannage,
se référer au Chapitre 10 du Manuel Technique ARCHITECT.
Concentrations en vitamine B12 normales
Il est recommandé à chaque laboratoire d'établir ses propres valeurs
de référence, qui peuvent être spécifiques à la population en question,
en raison de facteurs géographiques, individuels, alimentaires ou
environnementaux.
Une étude a été menée conformément au document C28‑A2 du
Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI).18 Des échantillons
de sérum provenant de 143 individus avec des valeurs normales de
volume globulaire moyen, d'homocystéine et de folates ont été analysés
avec le dosage ARCHITECT B12. La plage de concentration en B12
de cette population était comprise entre 141 et > 1 218 pg/ml (104 à
> 899 pmol/l) avec une moyenne de 407 pg/ml (300 pmol/l). L'intervalle
de confiance à 95 % de cette population d'échantillons est défini cidessous :
Vérification des performances du dosage
Pour de plus amples informations sur les protocoles de vérification
des performances du dosage mentionnées dans la notice, se référer à
l'Annexe B du Manuel Technique ARCHITECT. Le dosage ARCHITECT B12
appartient au groupe 1.
Plage attendue
187 à 883 pg/ml
(138 à 652 pmol/l)
Valeurs B12 indéterminées
Des taux supérieurs à 300 ou 400 pg/ml (221 ou 295 pmol/l) sont rarement
associés à des affections hématologiques ou neurologiques induites par
des carences en B12. Des analyses supplémentaires sont recommandées
pour des patients symptomatiques présentant des taux de B12 compris entre
100 et 300 pg/ml (74 à 221 pmol/l) (anomalies hématologiques) et entre
100 et 400 pg/ml (74 à 295 pmol/l) (anomalies neurologiques).6,7
RESULTATS
Le dosage ARCHITECT B12 utilise une méthode de traitement des données
par l'ajustement de la courbe logistique à 4 paramètres (4 PLC, pondération
en Y) pour créer une courbe de calibration.
CARACTERISTIQUES SPECIFIQUES
Autres unités de résultat
• L'unité de résultat par défaut du dosage ARCHITECT B12 est le pg/ml.
En cas de sélection de l'unité alternative pmol/l, le facteur de conversion
utilisé par le système est de 0,7378.
• Formule de conversion :
(Concentration en pg/ml) x (0,7378) = pmol/l
(Concentration en pmol/l) / (0,7378) = pg/ml
Les résultats d'analyse obtenus peuvent varier d'un laboratoire à l'autre
par rapport à ceux indiqués dans les études suivantes.
Reproductibilité
Le dosage ARCHITECT B12 a été développé afin de présenter un CV
total ≤ 11 % pour les concentrations comprises dans la plage des valeurs
des contrôles bas, moyen et haut. Une étude de reproductibilité a été
menée pendant 20 jours pour le dosage ARCHITECT B12 sur la base du
document EP5-A2 du CLSI.19 L'analyse a été effectuée au sein d'Abbott
Laboratories à l'aide de trois lots de réactifs ARCHITECT B12, de deux
lots d'ARCHITECT B12 Calibrators, d'un lot d'ARCHITECT B12 Controls
et de deux appareils. Quatre niveaux de contrôles et des panels ont été
analysés en triple, 2 fois par jour, pendant 20 jours. Les données sont
résumées dans le tableau suivant.
Annotations
• La rubrique "Annotations" peut contenir des informations sur certains
résultats. Une description des annotations qui peuvent apparaître
dans cette rubrique est fournie au Chapitre 5 du Manuel Technique
ARCHITECT.
LIMITES DE LA METHODE
• Pour établir un diagnostic, les résultats doivent être utilisés en
association avec d'autres données disponibles, telles que les
symptômes, les résultats d'autres dosages, les données cliniques,
etc.
• Le diagnostic d'une carence en B12 ne peut pas se baser uniquement
sur les concentrations sériques ou plasmatiques en B12. Chez les
patients symptomatiques présentant des anomalies hématologiques
ou neurologiques, il est recommandé d'analyser également l'acide
folique, les anticorps anti-facteur intrinsèque, l'holotranscobalamine,5
l'homocystéine et/ou l'acide méthylmalonique.6,7
• Si les concentrations en B12 ne correspondent pas à l'observation
clinique, il est recommandé d'effectuer des dosages supplémentaires
afin de pouvoir confirmer le résultat.
• Il a été démontré que l'hémolyse interfère avec ce dosage B12. Ne
pas utiliser d'échantillons hémolysés.
• Les échantillons contenant des concentrations en protéines supérieures
à la valeur normale peuvent provoquer à plusieurs reprises (2 ou
davantage) l'apparition du code d'erreur “3350 Impossible d'effectuer
le dosage, erreur d'aspiration de (Pipeteur échantillons) en (CR 24)”. Il
est recommandé de diluer ces échantillons au 1/2 à l'aide du protocole
de dilution automatique ou de la procédure de dilution manuelle.
• Les anticorps hétérophiles et le facteur rhumatoïde (FR) présents dans
le sérum humain peuvent réagir avec les immunoglobulines des réactifs,
interférant avec les dosages immunologiques in vitro.17 Les patients
régulièrement en contact avec des animaux ou des produits contenant
du sérum d'origine animale peuvent être sujets à cette interférence et
fournir de ce fait des valeurs anormales. Pour établir un diagnostic,
de plus amples informations peuvent être nécessaires.
• Le dosage est destiné à l'analyse de sérum et de plasma humains.
Les échantillons analysés sur d'autres matrices peuvent ne pas donner
de résultats précis.
• Se référer à la partie PRELEVEMENT ET PREPARATION DES
ECHANTILLONS POUR L'ANALYSE de cette notice pour de plus
amples informations sur les limites des échantillons.
Appareil Echantillon
1
Panel de sérum
Contrôle bas
Contrôle moyen
Contrôle haut
2
Panel de sérum
Contrôle bas
Contrôle moyen
Contrôle haut
n
360
354
355
359
357
356
352
355
Reproductibilité
intra-laboratoire
Concentration
(total)
Intra-série
moyenne
(pg/ml)
E.T. CV (%) E.T. CV (%)
262
12,6 4,8
16,3
6,2
246
13,8 5,6
16,7
6,8
424
14,3 3,4
16,8
4,0
890
36,0 4,0 38,9
4,4
248
11,6 4,7
13,3
5,4
241
10,4 4,3
12,9
5,4
408
13,3 3,3
15,5
3,8
885
23,9 2,7 29,7
3,4
Précision par rapport au standard de l'OMS
Une étude a été menée afin d'évaluer la précision du dosage
ARCHITECT B12 à l'aide du standard international de la vitamine B12 03/178
de l'Organisation Mondiale de la Santé. Le dosage a montré une différence
de -3,6 % par rapport à la valeur cible de 480 pg/ml (354 pmol/l).
Sensibilité
La sensibilité est définie comme étant la limite du blanc (LoB), la limite de
détection (LD) et la limite de quantification (LQ) du dosage ARCHITECT B12.
Le dosage ARCHITECT B12 a été développé afin de présenter une LQ
≤ 150 pg/ml (≤ 111 pmol/l). Une étude menée sur la base du document
EP17-A20 du CLSI a fourni une LoB de 83 pg/ml (61 pmol/l), une LD de
125 pg/ml (92 pmol/l) et une LQ de 125 pg/ml (92 pmol/l).
Spécificité
Le dosage ARCHITECT B12 a été développé afin de présenter une
interférence (différence) inférieure à la LD du dosage avec le cobinamide,
un analogue de la vitamine B12. La spécificité du dosage ARCHITECT B12
a été déterminée en étudiant la réactivité croisée avec le cobinamide.
Un échantillon de sérum humain présentant une valeur d'environ 230 pg/ml
(168 pmol/l) a été surchargé avec du cobinamide à 9 000 pg/ml et l'interférence
était de 4 pg/ml (3 pmol/l).
6
16. Clinical and Laboratory Standards Institute. Protection of Laboratory
Workers from Occupationally Acquired Infections: Approved Guideline—
Third Edition. CLSI Document M29-A3. Wayne, PA: Clinical and
Laboratory Standards Institute; 2005.
17. Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all
immunoassays. Clin Chem 1988;34:27-33.
18. Clinical and Laboratory Standards Institute. How to Define and
Determine Reference Intervals in the Clinial Laboratory; Approved
Guideline - Second Edition. CLSI Document C28-A2. Wayne, PA:
CLSI, 2000.
19. Clinical and Laboratory Standards Institute. Evaluation of Precision
Performance of Quantitative Measurement Methods; Approved
Guideline-Second Edition. CLSI document EP5-A2. Wayne, PA: CLSI,
2004.
20. Clinical and Laboratory Standards Institute. Protocols for Determination
of Limits of Detection and Limits of Quantitation: Approved Guideline.
CLSI Document EP17-A. Wayne, PA:, CLSI, 2004.
21. Clinical and Laboratory Standards Institute. Method Comparison and
Bias Estimation Using Patient Samples; Approved Guideline- Second
Edition. CLSI document EP9-A2. Wayne, PA: CLSI, 2002.
22. Passing H, Bablok W. A New Biometrical Procedure for Testing the
Equality of Measurements from Two Different Analytical Methods.
J Clin Chem Clin Biochem. 1983; 21:709-20.
ARCHITECT, AxSYM et Chemiflex sont des marques commerciales d'Abbott
Laboratories dans plusieurs pays.
ProClin est la propriété de son détenteur respectif.
Interférence
Aux concentrations indiquées ci-dessous, la bilirubine (fractions conjuguées
et non conjuguées), les protéines totales et les triglycérides ont montré
moins de 10 % d'interférence dans le dosage ARCHITECT B12 pour les
échantillons à concentration basse (plage de concentration : 150 pg/ml à
250 pg/ml (111 pmol/l à 184 pmol/l)) et les échantillons à concentration
élevée (plage de concentration : > 500 pg/ml (> 369 pmol/l)) :
• Bilirubine
< 25,1 mg/dl
• Protéines totales < 12 g/dl
< 3 325 mg/dl
• Triglycérides
Les échantillons hémolysés ne doivent pas être analysés ; se référer à la
partie LIMITES DE LA METHODE de cette notice.
Précision par corrélation
Une étude a été menée sur la base du document EP9‑A2 du CLSI.21
329 échantillons de sérum ont été analysés pour la détermination de la vitamine
B12 à l'aide du dosage ARCHITECT B12 et d'un kit de diagnostic disponible
dans le commerce. Les résultats sont indiqués dans le tableau suivant*.
Abbott ARCHITECT B12 vs. Abbott AxSYM B12
Nombre Ordonnée à
Coefficient de
Méthode
d'échantillons l'origine
Pente
corrélation
Régression
329
-2,05
1,01
0,99
linéaire par la
méthode des
moindres carrés
329
21,96
0,95
0,99
Régression
linéaire de
Passing-Bablok22
Abbott Ireland
Diagnostics Division
Lisnamuck, Longford
Co. Longford
Ireland
+ 353-43-3331000
Lors de cette évaluation, les échantillons de sérum analysés avec le dosage
ARCHITECT B12 ont donné des résultats compris entre 113 et 2 769 pg/ml
(83 à 2 043 pmol/l) et entre 93,5 et 2 655,8 pg/ml (69,1 à 1 959,5 pmol/l)
avec le dosage comparatif.
* Données indicatives, les résultats obtenus peuvent varier d'un laboratoire
à l'autre.
Distribué par Abbott Laboratories
Abbott Park, IL 60064 USA
et
ABBOTT 65205 Wiesbaden, Germany
BIBLIOGRAPHIE
1. Lee DSC, Griffiths BW. Human Serum Vitamin B12 Assay Methods - A
Review. Clin Biochem 1985; 18:261-6.
2. Chararin I. Megaloblastic Anemia, Cobalamin and Folate. J Clin Pathol
1987; 40:978-84.
3. Beuerlein FJ. Testing Strategies for Anemias. Lab Mgmnt 1988;
Dec:23-9.
4. Pennypacker LC, Allen RH, Kelly JP et al. High Prevalence of Cobalamin
Deficiency in Elderly Outpatients. J Am Geriatr Soc 1992;40:1197-204.
5. Obeid R, Herrmann W. Holotranscobalamin in laboratory diagnosis of
cobalamin deficiency compared to total cobalamin and methylmalonic
acid. Clin Chem Lab Med 2007; 45(12):1746-50.
6. Klee GC. Cobalamin and Folate Evaluation: Measurement of
Methylmalonic Acid and Homocysteine vs. Vitamin B12 and Folate.
Clin Chem 46; 2000:1277-83.
7. Snow CF. Laboratory Diagnosis of Vitamin B12 and Folate Deficiency:
A Guide for the Primary Care Physician. Arch Intern Med. 1999;
159:1289-98.
8. Beck WS. Biological and Medical Aspects of Vitamin B12. In: Dolphin
D, editor. B12 Volume 2, Biochemistry and Medicine. New York: Wiley
Interscience, 1982.
9. Carethers M. Diagnosing Vitamin B12 Deficiency, A Common Geriatric
Disorder. Geriatrics 1988; 43(3): 89-112.
10. Herbert V. Five Possible Causes of All Nutrient Deficiency: Illustrated
by Deficiencies of Vitamin B12 and Folic Acid. Am J Clin Nutr 1973;
26:77-86.
11. Dahele A, Ghosh S. Vitamin B12 Deficiency in Untreated Celiac
Disease. Am J Gastroenterol. 2001; 96:745-50
12. Pratt JJ, Woldring MG. Radioassay of Vitamin B12 and Other Corrinoids.
Methods Enzymol 1982; 84:369-406.
13. US Department of Labor, Occupational Safety and Health
Administration, 29 CFR Part 1910.1030, Bloodborne pathogens.
14. US Department of Health and Human Services. Biosafety in
Microbiological and Biomedical Laboratories. 5th ed. Washington, DC:
US Government Printing Office; January 2007.
15. World Health Organization. Laboratory Biosafety Manual. 3rd ed.
Geneva: World Health Organization; 2004.
Août 2010
© 2006, 2010 Abbott Laboratories
7