LIPOPROTEINE a (Lpa)

LIPOPROTEINE a (Lpa)
Références: LPTUR-H00/UDA
8 x 15 ml R1(A) + 8 x 1.8 ml R2(B)
LPTUR-B00/UDA
2 x 15 ml R1(A) + 2 x 1.8 ml R2(B)
Ò
VITROS 5,1 FS / 5600 / 4600 bi-réactifs prêts à l’emploi sans dilution d’échantillon
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INTRODUCTION - INTERET MEDICAL
La Lipoprotéine (a) est une particule composée de lipides et de protéine ; une
partie de cette particule est constituée de phospholipides, de cholestérol et
d’une apolipoprotéine spécifique, l’apolipoprotéine B100 et est identique aux
LDL (low-density lipoprotein) qui transportent le cholestérol. L’autre partie est
une apolipoprotéine(a) liée à l’apolipoprotéine B100 par des ponts disulfures.
L’apolipoprotéine(a) (à ne pas confondre avec l’apo A1) est spécifique à la Lp(a)
et est synonyme de risque cardiovasculaire accru. On ne connaît pas de
fonction spécifique à la Lp(a). Il est possible que la Lp(a) se comporte comme
une protéine de phase aiguë, il est donc préférable d’en déterminer le taux en
dehors de toute réaction inflammatoire. La concentration en Lp(a) semble, pour
une très grande part, déterminée génétiquement ; L’indication du dosage de la
Lp(a) réside dans le dépistage du risque cardio-vasculaire (athérosclérosecoronaropathies).Il semble que la Lp(a) augmente les risques de maladies
cardiaques soit, par compétition avec le plasminogène pour les sites de liaisons
sur les caillots sanguins, soit, en provoquant la formation d’athéromes.
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CONTROLE DE QUALITE.
Exactitude et reproductibilité: les performances analytiques peuvent être
vérifiées à l’aide du sérum de contrôle interne au laboratoire ou avec des
sérums de contrôle commerciaux. Calibration: La courbe de calibration et sa
stabilité peuvent être validées en utilisant le contrôle de calibration DiAgam
(LPCON-002).
Recalibrer la méthode quand le numéro de lot du réactif change, en cas de
modification des performances (contacter le fabricant si les modifications
subsistent) ou lorsque la législation en vigueur dans le pays l’impose.
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PERFORMANCES ANALYTIQUES.
Détermination quantitative de la Lp(a) dans des sérums humains sur VITROS
5,1 FS, VITROS 5600 and VITROS 4600.
Précision
(échantillons différents
sur les différents
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ECHANTILLONS
Echantillons: sérum et plasma.
Stable 1 jour à 4°C, diminution progressive de Lp(a) dans les échantillons
congelés particulièrement à -20°C. Il est conseillé d’effectuer les dosages aussi
vite que possible après le prélèvement de sang ; la congélation à -70°C est
acceptable.
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WHO suggère aussi la collecte d’échantillons et les conditions de traitement.
analyseurs)
Répétabilité
Reproductibilité
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VALEURS DE REFERENCE
Valeurs normales
adultes
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PRINCIPE DE LA METHODE
La Lp(a) contenue dans l’échantillon à doser réagit spécifiquement avec un
antisérum anti-Lp(a) humaine et la turbidité induite par la formation du complexe
immun antigène-anticorps est mesurée à 340 nm. La turbidité mesurée est
proportionnelle à la concentration en Lp(a) contenue dans l’échantillon.
REACTIFS NECESSAIRES AU DOSAGE
R1 (A)
Tampon
15 ml
2-8°C
Tampon pH 7,6, PEG, chlorure de sodium, azide de sodium (< 1g/l).
R2 (B)
Antisérum
1.8 ml
2-8°C
Antisérum tamponné HEPES pH 7.4 anti Lpa humaine (titre ± 4 mg/ml),
stabilisants, azide de sodium (< 1g/l).
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cal
1 calibrant
LPREH-1/2
2-8°C
Liquide biologique contenant de la Lp(a) d'origine humaine standardisé en
référence à une préparation secondaire de Lp(a), azide de sodium (< 1g/l).
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PRECAUTIONS
Pour diagnostic unique et in vitro ; doit être manipulé par du personnel habilité
sous la responsabilité d'un biologiste.
Les produits d’origine humaine ont subi un dépistage négatif concernant les
anticorps anti-VIH 1 et 2, les anticorps anti-VHC et l'Ag HBs mais doivent
cependant être manipulés comme des produits potentiellement infectieux.
Les produits contenant de l’azide de sodium doivent être manipulés avec
précaution: éviter l’ingestion et le contact avec la peau ou les muqueuses.
L’azide de sodium devient explosif au contact de métaux lourds comme le
cuivre ou le plomb.
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PREPARATION ET STABILITE.
Les réactifs, calibrants et contrôles sont prêts à l’emploi, une fois ouverts ils sont
stables jusqu'à la date de péremption à condition d’être conservés à la
température indiquée en flacon fermé et d’éviter toute contamination.
VITROS 5600
VITROS 4600
Moyenn
e (g/l)
Moyenn
e (g/l)
Moyenn
e (g/l)
(n=20)
0.051
0.143
0.385
(n=15)
0.130
0.248
0.381
CV
(%)
5.2
2.8
2.6
7.0
5.1
4.5
(n=20)
0.067
0.207
0.356
(n=15)
0.149
0.247
0.366
CV
(%)
4.5
5.8
2.2
8.0
6.5
3.1
(n=21)
0.062
0.144
0.218
(n=10)
0.061
0.147
0.209
CV
(%)
6.5
2.2
2.4
6.9
3.8
5.9
Spécificité
arc unique de précipitation en présence
de plasma normal humain, sérum concentré 2X et
Lp(a) + ; pas de réaction vs. Apo B et plasminogène
concentré.
limite de détection
limite de quantification
Prozone
0.008 g/l
0.021 g/l
Domaine d’analyse
Stabilité à bord
0.021 g/l à 0.8 g/l
jusqu’à la date d’expiration (appareil sous-tension)
Interférences
triglycérides
hémoglobine
bilirubine
héparine
fluorure de Na
EDTA
citrate de Na
< 10% ou 2 DS jusqu’à
< 10% ou 2 DS jusqu’à
< 10% ou 2 DS jusqu’à
< 10% ou 2 DS jusqu’à
< 10% ou 2 DS jusqu’à
< 10% ou 2 DS jusqu’à
< 10% ou 2 DS jusqu’à
< 0.30 g/l
Chaque laboratoire doit établir les normes propres à sa zone géographique.
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VITROS 5,1 FS
3.3 g/l
2.5 mmol/l
40 µmol/l
500 µmol/l
0.5 g/l
4 g/l
5 g/l
5 g/l
BIBLIOGRAPHIE
(1) Ezratty, et al. Lipoprotein(a) binds to human platelets and attenuates
plasminogen binding and activation. Biochem. (1993);32: 4628-4633
(2) Clinical guide to laboratory tests, edited by Norbert W. Tietz, W.B. Saunders
Company, sd edition (1990).
(3) Tietz Textbook of Clinical Chemistry, edited by Carl A. Burtis, Edward R.
Ashwood and David E. Burns, fourth edition (2006).
(4) Tietz Clinical Guide to Laboratory Test, W.B. Saunders Company, fourth
edition (2006).
(5) Use of Anticoagulants in Diagnostic Laboratory Investigations & Stability of
blood, plasma and serum samples. Publication WHO/DIL/LAB/99.1 Rev. 2.
Jan. 2002.
(6) Demetrios, S. et al. Effect of freezing and thawing of serum on the
immunoassay of Lipoprotein(a). et al.
Clin. Chem. (1992); 38:9: 1873-1877
(7) Leino, A. et al. Serum concentrations of Apolipoprotein A-I, Apolipoprotein B,
and Lipoprotein(a) in a population sample.
Clin. Chem. (1995); 41:11: 1633-1636
(8) Rifai, N. et al. Apolipoprotein(a) size and Lipoprotein(a) concentration and
future risk of angina pectoris with evidence of severe coronary
atherosclerosis in men. Clin. Chem. (2004); 50:8: 1364-1371
(9) Dieplinger, B. et al. Increased serum Lipoprotein(a) concentrations and low
molecular weight phenotypes of Apolipoprotein(a) are associated with
symptomatic peripheral arterial disease. Clin. Chem. (1995); 41:11:
1633-1636
LPTURUDAFTFR 04/09/2014 v02
Avenue Louis Lepoutre 70 – 1050 BRUXELLES Belgique
[email protected]
Tel: +32 (0) 68 55 14 82 / Fax: +32 (0) 68 56 89 40
Distributeur : DiAgam France – 8 rue du Maréchal de Lattre de Tassigny - 59800 LILLE France Tel: +33 (0) 3 20 42 85 17/ Fax: +33 (0) 3 20 54 22 07
LIPOPROTEINE a (Lpa)
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