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BRUCELLA
Table des matières
Table des matières
3
I - Introduction
7
A.Introduction.....................................................................................7
II - Les caractères bactériologiques
9
A.Les caractères bactériologiques...........................................................9
1.Les Caractères morphologiques..............................................................9
2.Les caractères culturaux et biochimiques.................................................9
3.Les caractères antigéniques.................................................................11
4.La sensibilité aux bactériophages..........................................................12
III - La pathogénie
13
A.Physiopathologie.............................................................................13
B.Pouvoir pathogène..........................................................................14
IV - Epidemiologie et prévention
15
A.Les modes de contamination de l'homme............................................15
B.La distribution.................................................................................15
C.Prévention......................................................................................16
V - Le diagnostic bactériologique
17
A.Diagnostic direct.............................................................................17
B.Diagnostic indirect...........................................................................17
VI - Eléments de thérapeutiques
19
A.Eléments de thérapeutiques..............................................................19
1.Sensibilite aux antibiotiques.................................................................19
2.Les règles du traitement......................................................................19
VII - Conclusion
21
3
A.Conclusion.....................................................................................21
VIII - Auto-évaluation
23
A.QCM 1...........................................................................................23
B.QCM 2...........................................................................................23
C.Questions.......................................................................................24
1.Question 1.........................................................................................24
2.Question 2.........................................................................................24
IX - Pour en savoir plus
25
A.Glossaire........................................................................................25
B.Bibliographie..................................................................................25
Solution des exercices
4
27
Objectifs
pédagogiques
y
y
y
y
y
y
y
y
y
Préciser les différentes espèces du genre Brucella et leur spécificité d'hôte
Décrire les caractéristiques bactériologiques du genre Brucella
Décrire la physiopathologie de la brucellose
Décrire le pouvoir pathogène des Brucelles
Préciser les modes de contamination de l'Homme
Décrire l'épidémiologie de la brucellose
Décrire les moyens de prévention de la brucellose
Indiquer les examens bactériologiques en fonction des phases cliniques de la
brucellose
Décrire la sensibilité aux antibiotiques du genre Brucella
5
I-
Introduction
Introduction
I
7
A.Introduction
y
y
y
y
y
y
Les bactéries du genre Brucella ont été découvertes par D. Bruce à Malte en
1887
C'est une bactérie pathogène spécifique responsable d'infection animale
transmise accidentellement à l'homme : zoonose
La Brucellose est encore appelée fièvre de Malte, fièvre suduro-algique ou
fièvre ondulante méditérraniènne.
Elle est largement répandue dans le monde notamment autour du bassin
méditerranéen.
Trois sous espèces sont pathogènes pour l'homme
-B. melitensis (ovins et caprins)
-B. abortus (bovin)
-B. suis (porc)
Trois sous espèces sont moins répandues
-B. ovis
-B. canis
-B. neotomae
7
Les caractères
bactériologiques
II -
Les caractères bactériologiques
II
9
A.Les caractères bactériologiques
1.Les Caractères morphologiques
Ce sont des petits cocco-bacilles à Gram négatif, immobiles, non capsulés et non
sporulés
Image 1 : Figure1 : Coloration de Gram de Brucella ( cocobacilles à Gram négatif)
2.Les caractères culturaux et biochimiques
La culture des brucelles est difficile, délicate et surtout Lente. Ce sont des bactéries
aérobies strictes. La température de croissance optimale est de 34-35°C. Certaines
espèces se développent mieux sous CO2.
9
Les caractères bactériologiques
Image 2 : Figure 2 : Culture de Brucella de 48H
Sur le plan métabolique : elle est catalase (+), oxydase (+) et uréase (+).
10
Les caractères bactériologiques
Image 3 : Figure 3 : les tests biochimiques utilisés pour l'identification de Brucella
3.Les caractères antigéniques
Brucella a la structure générale d'un bacille à Gram négatif. Sur son L.P.S pariétal,
deux types d'antigènes sont présents en quantité variable selon l'espèce: Ag A (B.
abortus) et Ag M (B. melitensis)
Il y a une parenté antigénique avec d'autres bactéries (Yersinia enterocolitca O9,
11
Les caractères bactériologiques
Francisella tularensis et certaines Salmonella...)
4.La sensibilité aux bactériophages
Elle est utilisée pour l'identification au niveau de l'espèce. Le phage Tbilissi (Tb) est
actif sur B.abortus, phage Weybridge (Wb) est actif sur B.melitensis.
12
III -
La pathogénie
III
Physiopathologie
13
Pouvoir pathogène
14
A.Physiopathologie
La physiopathologie de la brucellose est essentiellement expliquée par :
Leur survie après la phagocytose par inhibition de fusion phago-lysosomiale
et sa multiplication en intra cellulaire.
y Leur LPS.
Après une pénétration cutano-muqueuse ou digestive, les brucelles gagnent le
premier relais ganglionnaire où elles se multiplient. Ce premier relaisgonglionnaire
constitue le point de départ d'une septicémie d'origine lymphatique suivie par une
multiplication intracellulaire dans le système réticulo-endothélial (Polynucléaires et
Macrophages). Les localisations ostéoarticulaires, glandulaires, hépatospléniques ou
neurologiques apparaissent pendant la phase subaiguë.
Au cours de la brucellose, l'immunité est surtout à médiation cellulaire . Un état
d'hypersensibilité retardée vis à vis des antigènes brucelliens s'installe.
La réponse immunitaire humorale (IgM et IgG) est croisée entre les 3 espèces
y
Image 4 : Figure 4 : Pathogénie
13
La pathogénie
B.Pouvoir pathogène
La Brucellose animale
Elle touche essentiellement les bovins, ovins, caprins et porcins.
y
y
Les femelles :
La brucellose donne surtout des avortements septiques avec une atteinte de
la glande mammaire, ce qui implique une excrétion de la bactérie dans le lait
les males :
L'atteinte observée est surtout une orchite ou épididymite.
La Brucellose humaine
Elle est asymptomatique dans 90 % des cas. L'incubation varie de 1 à 4 semaines.
La maladie évolue en trois phases
14
y
Brucellose aiguë
C'est la primo-infection. Elle correspond à la phase septicémique de la
maladie avec sur le plan clinique :
Fièvre ondulante suduro-algique :
à La fièvre : l'aspect ondulant est le + évocateur (fièvre aux alentours
de 39° durant 10 à 15 jours, séparée de phase d'apyrexie de 6 à 10
jours). Cette fièvre est bien tolérée (l'asthénie et l'amaigrissement
étant modérés).
à Les sueurs : profuses, surtout nocturnes, obligeant le malade à
changer de linge plusieurs fois dans la journé.
à Les douleurs : mobiles, fugaces, de siège imprécis : musculaires,
osseuses, articulaires.
L'examen physique :
Généralement pauvre mais peut trouver
à Splénomégalie modérée
à Hépatomégalie
à Adénopathies superficielles, fermes, sensibles
ƒ Plus rarement, il peut y avoir des signes très évocateurs de la
brucellose à savoir :
Plus rarement, il peut y avoir des signes très évocateurs de la brucellose
à savoir :
à Sacroileite révélée par une sciatalgie.
à Orchite unilatérale.
y
Brucellose subaiguë focalisée
localisation ostéo-articulaire : rachis et sacro-iliaque
localisation neuroméningée
génitale, hépatosplénique
y
Brucellose chronique
La patraquerie brucellienne qui associe :
Asthénie physique, psychique et génitale persistante.
Des troubles de caractères.
Un syndrome algique intermittent
Epidemiologie et
prévention
IV -
IV
Les modes de contamination de l'homme
15
La distribution
15
Prévention
16
Il s'agit de bactéries pathogènes spécifiques responsables d'anthropozoonose.
A.Les modes de contamination de l'homme
Contamination directe :
Dans 70 % des cas, par contact avec des animaux malades (peau, conjonctive, voie
respiratoire). Il s'agit d'une maladie professionnelle / intéressant les éleveurs, les
bergers, les bouchers, les vétérinaires et le personnel de laboratoires. Les sources
de contamination sont variables :
produits d'avortement, de mise bas.
y les secrétions vaginales.
y le sol, le fumier.
y Exceptionnellement la viande et les viscères d'animaux abattus.
La pénétration des bactéries se fait par voie :
y
y
y
Cutanée saine ou à la faveur d'une excoriation.
Muqueuse (bouche, voie conjonctivale, voie aérienne par inhalation de
poussières)
Contamination indirecte :
Dans 30 % des cas, par ingestion de produits laitiers contaminés
Contamination interhumaine
Pas de contamination interhumaine
B.La distribution
y
y
Fréquente dans pourtour méditerranéen
Les animaux domestiques et sauvages sont les réservoirs de Brucella. Par
conséquent, l'atteinte animale va conditionner l'infection humaine. Il existe
une relation entre l'hôte et l'espèce :
B. melitensis touche les ovins et les caprins
B. abortus touche les bovins
B. suis touche les porcins
15
Epidemiologie et prévention
y
En Tunisie : la brucellose seprésente sous deux formes :
cas sporadiques
foyers épidémiques : de 1988 à 1993 épidémie à B. mélitensis dans le
Sud Les cas de cette maladie ont marqué une baisse au cours de l'année
2005 (284 cas) par rapport à l'année 2004 (354 cas) puis augmentation
en 2006 (370 cas en 10 mois). 69% du total des cas sont déclarés dans
la région de Gafsa et de Kasserine.
C.Prévention
y
y
y
y
16
C'est une maladie à déclaration obligatoire
La vaccination animale est essentielle.
Eradication de la maladie animale est possible par la vaccination des
troupeaux et l'identification et l'abattage des animaux infectés.
Précaution individuelle : consommation de lait pasteurisé pour la
communauté et port de gants et de masque pour les professions exposées
(fermiers, vétérinaires, personnel de laboratoire)
Le diagnostic
bactériologique
V-
V
Diagnostic direct
17
Diagnostic indirect
17
A.Diagnostic direct
La recherche devrait être indiquée au biologiste. Elle est essentielle au cours de la
Brucellose aiguë et subaiguë. Elle se fait par :
y
y
y
y
y
Hémoculture +++: c'est un bon moyen de diagnostic avec une sensibilité
importante pendant la phase aigue, moindre dans les formes focalisées mais
presque nulle en cas de brucellose chronique. Les milieux proposés par les
automates d'hemoculture (Bactec, Bact'Alert) sont satisfaisants avec une
lecture plus rapide 2 à 3 jours, et une bonne sensibilité.
Prélèvements ostéo-articulaire, LCR, pus ganglionnaire: La mise en culture
de ces prélèvements doit être realisée sur des milieux enrichis avec une
incubation prolongée.
La caractérisation du genre Brucella se base sur les caractères
morphologiques, culturaux et biochimiques
l'identification au niveau de l'espèce et des biovars se fait dans les
laboratoires spécialisés
PCR : Elle est encore réservée à la recherche
la suspiscion de brucellose devrait être toujours signalée sur le bon de demande
d'examen bactériologique afin que le biologiste prenne les précautions nécessaires.
B.Diagnostic indirect
Il a une place importante notamment dans la brucellose subaigue. Deux tests sont
essentiels : le sérodiagnostic de Wright et le Rose Bengale.
Sérodiagnostic de WRIGHT : c'est la réaction de référence pour l'OMS.
C'est une technique d'agglutination en tube qui met en evidence des Ac de type IgG
et IgM. Un taux ≥ 1/80 correspond à une brucellose évolutive récente. Ce test est
+ dès le 12ème -15ème jour.Il est + à la phase aiguë septicémique et parfois dans
les formes subaigues. Il est toujours négatif au cours de la brucellose chronique.-
17
Le diagnostic bactériologique
Image 5 : Figure 5 : sérodiagnostic de Wright (le titre correspond à la dernière
dilution où une agglutination est observée)
Epreuve de l'Antigène tamponnée (Card test ou rose Bengale) C'est une réaction
rapide d'agglutination sur lame avec le sérum non dilué qui met en évidence les
IgG.
Image 6 : Figure 6 : Réaction de Rose Bengale
y
y
Immunofluorescence indirecte (IFI) ou Immuno-enzymatique (ELISA): met
en évidence les IgG et les IgM. Elle est positive dans les formes chroniques
et subaigues.
IDR à la mélitine = HSR : elle a un interet dans la brucellose chronique. Elle
n'est plus pratiquée en clinique.
Image 7 : Tableau 1 : Intérêt de différentes méthodes diagnostiques de la
brucellose
18
Eléments de
thérapeutiques
VI -
VI
Eléments de thérapeutiques
19
A.Eléments de thérapeutiques
1.Sensibilite aux antibiotiques
y
y
y
La réalisation de l'antibiogramme est discutée. En effet, la méthode reste
non standardisée.
Les souches sont toujours sensibles à la Tetracycline et la Rifampicine.
Les fluoroquinolones et les aminosides sont également actifs
2.Les règles du traitement
y
y
y
Il faut utiliser des antibiotiques actifs en intracellulaire
l'association d'antibiotiques la plus bactéricide: Rifampicine + Cycline
Durée de traitement devrait être prolongée de 6 à 8 semaines
19
VII -
Conclusion
VII
Conclusion
21
A.Conclusion
y
y
y
Zoonose encore fréquente dans notre pays
Rôle du laboratoire : indispensable pour le diagnostic
Diagnostic direct: fortement amélioré par les nouvelles technologies :
PCR: encore limitée
La sérologie: nouveaux antigènes++
21
VIII -
Auto-évaluation
VIII
QCM 1
23
QCM 2
23
Questions
24
A.QCM 1
Exercice 1
[Solution n°1 p 27]
La brucellose est :
une maladie strictement humaine
une infection symptomatique dans 90 % des cas
provoquée par des bactéries aérobie strictes
provoquée par l'espèce B. abortus en Tunisie
contrôlée par une vaccination humaine efficace
B.QCM 2
Exercice 1
[Solution n°2 p 27]
Quels sont les
macrophages
bactéries
pouvant
se
développer
à
l'intérieur
des
Staphylococcus aureus
Brucella
Streptococcus pyogenes
Mycobacterium tuberculosis
Escherichia coli
23
Auto-évaluation
C.Questions
1.Question 1
Citer l'espèce de Brucella rencontrée en Tunisie
Solution
y
y
Brucella melitensis
B. melitensis
2.Question 2
Quels sont les moyens de prévention contre la brucellose
Solution
S'agissant d'une zoonose, la prévention comporte deux volets. Sur le versant
animal, il faut procèder à la vaccination des troupeaux et l'abattage des animaux
infectés. Concernant, l'Homme, il s'agit d'une maladie à déclaration obligatoire. La
prévention individuelle passe essentiellemnt par le port de gant et de masque pour
les gens des métiers exposés et l'hygiène alimentaire pour la communauté.
24
IX -
Pour en savoir plus
IX
Glossaire
25
Bibliographie
25
A.Glossaire
y
y
y
LPS : lipopolysaccharides
PCR : reaction de polymérisation en chain
HSR : hypersensibilité retardée
B.Bibliographie
Monographie
Image 8 : .
Liste des sites web
y
y
y
http://www.microbes-edu.com1
http://www.invs.sante.fr/publications/2007/brucelloses_2002_2004/index.h
tml 2
http://www.invs.sante.fr/publications/2005/brucellose_210305/brucellose_2
10305.pdf3
1 - http://www.microbes-edu.com
2 - http://www.invs.sante.fr/publications/2007/brucelloses_2002_2004/index.html
3 - http://www.invs.sante.fr/publications/2005/brucellose_210305/brucellose_210305.pdf
25
Solution des
exercices
> Solution n°1 (exercice p. 23)
une maladie strictement humaine
une infection symptomatique dans 90 % des cas
provoquée par des bactéries aérobie strictes
provoquée par l'espèce B. abortus en Tunisie
contrôlée par une vaccination humaine efficace
Je ne sais pas
> Solution n°2 (exercice p. 23)
Staphylococcus aureus
Brucella
Streptococcus pyogenes
Mycobacterium tuberculosis
Escherichia coli
Je ne sais pas
27