Les bacilles Gram négatif non exigeants et aérobies

Les bacilles Gram négatif non exigeants
et aérobies
Objectif : *Connaissance du groupe des bacilles à Gram négatif : étude des caractères
différentiels entre les Enterobacteriaceae, le genre Vibrio et apparentés et le genre Pseudomonas et
apparentés.
1er jour
Manipulation : Par personne, vous disposez d’une souche pure présentée sur GNi :
Souche numérotée
présentée sur gélose nutritive
inclinée
Etude de la voie
d’attaque du glucose :
*Ensemencer 2 milieux Hugh
et Leifson glucosés.
Etude
microscopique :
Réaliser un état frais et une
coloration de Gram
Isolements sur
géloses :
Recherche des
enzymes
respiratoires :
*Réaliser le test
d’orientation
rapide en fonction du
Compte-rendu :
Coloration de Gram
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Recherche du type
respiratoire :
Isoler sur milieux :
! non sélectif : gélose
nutritive ordinaire
Ensemencer une gélose
VF (Viande Foie)
! sélectif des bacilles
Gram - : gélose Mac
Conkey
Test respiratoire :
Etat frais
2ème jour
Manipulation :
Lecture des différents milieux ensemencés : boîtes et tubes. (voir fiches
techniques)
Réaliser le test complémentaire nécessaire à la mise en évidence de la nitrate
réductase. (voir fiche technique)
Compte-rendu :
1. Ensemencements
Gélose VF
Bouillon nitraté
Hugh et Leifson
glucosés
Isolements
observation : aspect des
colonies
Gélose Nutritive Ordinaire
Gélose Mac Conkey
Conclusion
Proposer une orientation vers le genre ou la famille de la bactérie étudiée.
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