information produit

INFORMATION PRODUIT
Early Passage (Passage rapide) Cellules Endothéliales de la Veine
Ombilicale Humaine (HUVEC) – de donneurs multiples
Code produit :
ZHC-2301
(cryopréservé)
Présentation
Chaque fiole de Early Passage HUVEC cryopréservé contient un minimum de 500.000 cellules de
donneurs multiples, garanties viables à 70% après décongélation. Les cellules sont congelées après
une culture secondaire dans un milieu contenant des cryoprotecteurs.
Recommended Milieu et suppléments recommandés
Pack milieu de croissance Human Large Vessel Endothelial Cell : ZHM-2953
contient:
Milieu basal Human Large Vessel Endothelial Cell, 500ml
Supplément de croissance Human Large Vessel Endothelial Cell, 500ml
Supplément antibiotique (Gentamycine / Amphotéricine B) concentré 1000x,
0.5ml
Densité d’ensemencement recommandée
2500 cellules viables par cm2
Capacité de prolifération
Les cellules humaines normales ont une durée de vie limitée in vitro. Lorsque des cellules sont
cultivées en utilisant nos réactifs et nos procédures recommandées, Cellworks garantit 10
doublements de la population.
Conservation et entretien des cellules
Les cellules cryopréservées arrivent congelées sur de la glace sèche, et si elles ne sont pas
ensemencées immédiatement, elles doivent être transférées en phase vapeur d’une unité de
stockage d’azote liquide.
N.B. Une conservation continue sur de la glace sèche ou à -80°C N’est PAS appropriée.
Pour de brèves instructions concernant la culture de cellules Cellworks, voir au verso.
Cellworks, a division of Caltag Medsystems ● Whiteleaf Business Centre ● 11 Little Balmer ● Buckingham ● MK18 1TF ● UK
Tel +44 (0)1280 827460 Fax +44 (0)1280 827466 Email [email protected] Website www.cellworks.co.uk
VAT Reg. No. GB 765 6661 89 Registered in the UK No. 4162330 Registered Office: Whiteleaf Business Centre, 11 Little Balmer, Buckingham, MK18 1TF.
ZHC-2301 v1 May14
Brèves instructions concernant la culture de cellules Cellworks
Initiation de cultures proliférantes à partir de cellules cryopréservées
1. Préparer le milieu dans le nombre requis de flasques de culture et pré-équilibrer à 37°C, dans un incubateur
humidifié à 5% de CO2. N.B. Nous recommandons d’utiliser 15ml de milieu dans les flasques T75 et 6ml de
milieu dans les flasques T25.
2. Préparer un bain d’eau à 37°C.
3. Retirer la fiole de cellules de l’azote liquide et la placer dans la glace sèche (ou dans un Dewar d’azote liquide).
Desserrer légèrement le bouchon pour libérer toute pression et resserrer.
4. Mettre la moitié inférieure de la fiole de cryo dans le bain d’eau à 37°C, en s’assurant que le bouchon n’est pas
submergé. Faire tourner doucement pendant 1 à 2 minutes jusqu’à ce qu’il ne reste qu’un petit morceau de
glace.
5. Essuyer immédiatement la fiole et le bouchon avec de l’éthanol et la placer dans la hotte.
6. Sans délai, en utilisant une pipette, mettre les cellules dans chaque flasque de culture en arc à la surface du
milieu et faire tourner doucement le milieu pour disperser les cellules pour obtenir une croissance équilibrée.
7. Examiner les cellules au microscope avant de les transférer vers un incubateur à CO2. Permettre aux cellules de
s’attacher pendant la nuit sans qu’elles soient dérangées.
8. Après un maximum de 24 heures examiner les cultures au microscope pour vérifier que l’ensemencement a
réussi, et remplacer le milieu par du milieu pré-équilibré frais en prévoyant 6ml par T25 ou 15ml par T75. Faire
bien attention de verser le milieu sur une surface de la flasque dépourvue de cellules et jamais sur la couche de
cellules, sous peine de déloger les cellules.
9. Replacer les cellules dans l’incubateur, réalimenter avec du milieu de croissance frais toutes les 48 heures.
10. Faire des sous-cultures lorsque les cellules atteignent 60 à 80% de confluence, pendant qu’elles se divisent
encore activement.
Avertissement
Pour la recherche uniquement, usage thérapeutique ou de diagnostic exclu.
Traiter toutes les cellules humaines comme potentiellement biologiquement dangereuses et les
jeter de façon appropriée.
Cellworks, a division of Caltag Medsystems ● Whiteleaf Business Centre ● 11 Little Balmer ● Buckingham ● MK18 1TF ● UK
Tel +44 (0)1280 827460 Fax +44 (0)1280 827466 Email [email protected] Website www.cellworks.co.uk
VAT Reg. No. GB 765 6661 89 Registered in the UK No. 4162330 Registered Office: 69 Little London, Towcester, NN12 8UP, UK.
ZHC-2301 V1 May14