Dosage DRI® Paracétamol Sérum Tox - Fisher Scientific

Dosage DRI® Paracétamol Sérum Tox
Pour usage diagnostique in vitro
1086 (Coffret de 25 mL, 8 mL)
1091 (1 x 5 mL, 5 x 2 mL)
Application
Le dosage DRI® Paracétamol Sérum Tox est destiné à la détermination quantitative du
paracétamol dans du plasma ou du sérum humain.
Résumé et description du test
Le paracétamol est un analgésique ayant également un effet antipyrétique chez l’homme.
C’est l’un des analgésiques les plus populaires parmi ceux disponibles auprès du public sans
prescription. Les effets secondaires toxiques associés au paracétamol comprennent nausées,
somnolence et vomissements. Les traitements chroniques par paracétamol ou l’ingestion de
grandes quantités du médicament accidentellement ou lors de tentatives de suicide peuvent
provoquer une hépatotoxicité.1 On a démontré une corrélation certaine entre les concentrations
sériques en paracétamol et les lésions hépatiques ultérieures.2 La prise en charge correcte des
surdosages en paracétamol nécessite une surveillance précoce des concentrations sériques en
paracétamol afin de prévenir une nécrose hépatique, dont les signes cliniques apparaissent au
moins 12 heures après l’ingestion.3,4 La détermination du paracétamol sérique est l’indicateur le
plus fiable pour le pronostic et même plus important pour l’administration d’antidotes.4,5
Il existe de nombreuses techniques pour déterminer la concentration sérique en paracétamol.
Ces méthodes comprennent la CG, la CLHP, le dosage immunoenzymatique, la spectrophotométrie
UV et le dosage par immunofluorescence. Le dosage DRI® Paracétamol Sérum Tox est un
dosage immunoenzymatique en phase homogène6 utilisant des réactifs liquides prêts à l’emploi.
Le dosage est basé sur la compétition entre le médicament dans l’échantillon de sérum et le
médicament marqué à l’aide d’une enzyme, la glucose-6-phosphate déshydrogénase (G6PDH)
au niveau d’une quantité déterminée de sites de liaison de l’anticorps spécifique du médicament.
Si l’échantillon ne contient pas le médicament, le conjugué médicament-G6PDH est lié par
l’anticorps spécifique ce qui inhibe l’enzyme. Ce phénomène engendre une réaction directe
entre la concentration du médicament présent dans l’échantillon et l’activité enzymatique.
L’activité de l’enzyme G6PDH est déterminée par spectrophotométrie à 340 nm en mesurant sa
capacité à convertir le nicotinamide adénine dinucléotide (NAD) en NADH.
Réactifs
Réactif anticorps/substrat. Contient un anticorps monoclonal anti-paracétamol, du glucose-6phosphate (G6P) et du nicotinamide adénine dinucléotide (NAD) dans un tampon Tris avec de
l’azide de sodium comme conservateur.
Réactif conjugué enzymatique. Contient du paracétamol marqué à l’aide de glucose‑6phosphate déshydrogénase (G6PDH) dans un tampon Tris avec de l’azide de sodium comme
conservateur.
Matériel supplémentaire requis (vendu individuellement) :
1091
Description du coffret
Coffret de calibrateurs de paracétamol. Contient 5 mL de calibrateur
négatif et 2 mL de chacun des calibrateurs de paracétamol à 10 µg/mL,
25 µg/mL, 50 µg/mL, 100 µg/mL et 200 µg/mL dans un tampon Tris avec de
l’azide de sodium comme conservateur.
Mises en garde et avertissement
Les réactifs sont nocifs par ingestion.
Les réactifs utilisés dans ce dosage contiennent de <0,09% l’azide de sodium. Éviter tout
contact avec la peau et les muqueuses. En cas de contact, rincer à grande eau. Consulter
immédiatement un médecin en cas d’ingestion des réactifs ou de contact avec les yeux. L’azide
de sodium peut réagir dans les conduites de plomb ou de cuivre et former des azides métalliques
potentiellement explosifs. Lors de l’élimination des réactifs, toujours rincer à grande eau pour
éviter l’accumulation d’azides. Nettoyer les surfaces métalliques exposées avec une solution
d’hydroxyde de sodium à 10 %.
Ne pas utiliser les réactifs au-delà de leur date de péremption.
Préparation et conservation des réactifs
Les réactifs sont prêts à l’emploi. Ils ne nécessitent aucune préparation. Tous les composants du
dosage restent stables jusqu’à la date de péremption indiquée sur l’étiquette s’ils sont conservés
convenablement entre 2 et 8 °C.
Prélèvement et manipulation des échantillons
On peut utiliser ce dosage sur du sérum ou du plasma. Les anticoagulants, tels que l’héparine,
les citrates, les oxalates et l’EDTA n’ont montré aucune interférence avec ce dosage. On peut
utiliser des échantillons plasmatiques recueillis sur ces anticoagulants, mais un échantillon
sérique frais est préférable. Conserver l’échantillon au réfrigérateur. Les échantillons prélevés
à la pipette ne doivent pas contenir de gros débris.
Manipuler tous les échantillons de sérum comme s’ils étaient potentiellement infectieux.
Procédure du dosage
Pour réaliser ce dosage immunoenzymatique en phase homogène, utiliser un analyseur qui
soit capable de maintenir une température constante, de prélever des échantillons à la pipette,
de mélanger les réactifs, de mesurer les taux enzymatiques à 340 nm et de minuter la réaction
avec précision.
Avant de procéder au dosage, consulter la fiche technique spécifique de l’analyseur indiquant
les paramètres et/ou des directives complémentaires.
Contrôle qualité et calibration
Les bonnes pratiques de laboratoire recommandent d’utiliser des échantillons de contrôle pour
garantir des performances correctes du dosage. Il existe plusieurs contrôles en vente libre
permettant le contrôle qualité de ce dosage. Vérifier que les résultats des contrôles se situent
dans la plage de valeurs établie par le laboratoire. Utiliser tous les calibrateurs pour calibrer le
dosage. Recommencer la calibration de l’appareil pour chaque nouveau lot de réactifs utilisé.
Toutes les exigences de contrôle qualité doivent être appliquées conformément aux règlements
locaux, régionaux et nationaux ou aux conditions d’agrément.
Résultats et valeurs attendues
Les analyseurs de chimie clinique déterminent de façon automatisée la concentration en
paracétamol dans le sérum ou le plasma. Aucune autre manipulation des données n’est
nécessaire.
L’administration de doses allant de 325 à 650 mg de paracétamol toutes les trois à quatre heures
pour l’analgésie des adultes n’entraîne pas d’effet secondaire. Normalement, la concentration
sérique nécessaire pour obtenir une réponse analgésique est comprise entre 5 et 20 µg/
mL.7 L’ingestion de quantités plus importantes du médicament peut toutefois entraîner une
hépatotoxicité. On a démontré une corrélation certaine entre les concentrations sériques en
paracétamol et des lésions hépatiques ultérieures.2 Les patients présentant une concentration
inférieure à 120 µg/mL quatre heures après l’ingestion ne développent pas d’insuffisance
hépatique. Cinquante pourcent de ceux qui présentent une concentration comprise entre
120 µg/mL et 300 µg/mL, développent une nécrose hépatique, alors que les concentrations
supérieures à 300 µg/mL sont systématiquement associées à une nécrose hépatique.
La demi-vie sérique du paracétamol constitue probablement le meilleur guide sur l’ampleur
de la lésion hépatique. Il a été montré qu’une nécrose hépatique survenait lorsque la demi-vie
est supérieure à quatre heures et que le coma est très probable lorsque la demi-vie dépasse
12 heures.2,5,8
Limitations
1. Le test a été conçu pour être utilisé uniquement avec le sérum ou le plasma humain,
pas avec le sang total.
2. Diluer dans le calibrateur négatif les échantillons patients dont la concentration en
paracétamol dépasse 200 µg/mL et recommencer le dosage. Multiplier le résultat du
dosage par le facteur de dilution pour obtenir la concentration correcte en paracétamol.
Performance caractéristique
Les données caractéristiques suivantes ont été générées avec un analyseur de chimie clinique
Hitachi 717.
Précision
Les précisions intra-série et inter-série ont été évaluées en utilisant trois échantillons de sérum
qui ont donné les résultats suivants :
Précision intra-série (n=20)
Précision inter-série (n=12)
Sample
Mean ± SD
(μg/mL)
% CV
Mean ± SD
(μg/mL)
% CV
01
23 + 1,5
6,5
26 + 2,1
8,1
02
52 + 4,3
8,3
59 + 3,8
6,4
03
116 + 6,2
5,3
123 + 7,4
6,0
Sensibilité
La sensibilité, définie comme la plus faible concentration qui puisse être différenciée de
0 µg/mL avec un intervalle de confiance à 95 % est de 2,5 µg/mL.
Exactitude et corrélation
Quatre-vingt échantillons cliniques de sérum ont été soumis au dosage DRI Paracétamol
Sérum Tox (y) et à une méthode commercialisée de dosage du paracétamol (x). On a obtenu
une corrélation avec une équation de régression linéaire de y = 0,91 (x) + 3,5 et un coefficient
de corrélation (r) de 0,99. La concentration moyenne en paracétamol de l’échantillon pour le
dosage DRI a été de 35,9 µg/mL, avec des valeurs comprises entre 0 µg/mL et 139,1 µg/mL. La
concentration moyenne en paracétamol de l’échantillon pour le dosage commercialisé a été de
35,5 µg/mL, avec des valeurs comprises entre 0 µg/mL et 138,5 µg/mL.
Bibliographie
Spécificité
Des composés dont la structure s’apparente à celle du paracétamol et des médicaments
susceptibles d’être administrés en même temps que le paracétamol ont été analysés pour
rechercher toute réactivité croisée éventuelle au niveau du dosage. Le tableau suivant présente
la concentration des composés analysés ayant donné un résultat de réactivité croisée inférieur
à la limite de détection du dosage.
Composé
(µg/mL)
Paracétamol glucuronide
1.000
N-acétylcystéine
1.000
Amitriptyline
Acide benzoïque
Butalbital
Caféine
20
1.000
30
100
Chlorphéniramine
1.000
Chlorzoxazone
1.000
Codéine
2
Cystéamine
1.000
D-cystéine
1.000
Dextrométhorphane
5
Diazépam
20
Diflunisal
1.000
Éphédrine
1.000
Fénoprofène
1.000
Acide gentisique
1.000
Éther glycéryle de guaiacol
1.000
Homatropine
1.000
Ibuprofène
1.000
Indométhacine
1.000
Méthionine
1.000
Naproxène
1.000
Phénacétine
30
Phénobarbital
1.000
Phénylbutazone
1.000
Phényléphrine
1.000
Propoxyphène
Pyrilamine
Acide salicylique
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Damage. Ann Intern Med, 87:299 (1977).
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8. Rumack BH and H Matthew: Acetaminophen Poisoning and Toxicity. Pediatrics for the
Clinician, 55:871 (1975).
2
1.000
300
Salicylamide
1.000
Sécobarbital
3
Aucune interférence n’a été observée avec les échantillons hémolysés, lipémiques ou ictériques
et des concentrations en hémoglobine, cholestérol et bilirubine aussi élevées que 800 mg/dL,
400 mg/dL et 30 mg/dL respectivement.
Microgenics Corporation
46360 Fremont Blvd.
Fremont, CA 94538-6406 États-Unis
Soutien technique et à la clientèle,
États-Unis :
1-800-232-3342
Pour des mises à jour de la notice, consulter:
www.thermoscientific.com
Autres pays:
Contacter le représentant local Thermo Fisher Scientific.
1090-3
2010 12
2
Microgenics GmbH
Spitalhofstrasse 94
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Tel: +49 (0) 851-88 68 90
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