Enterobacter sakazakii isolation agar Usage In Vitro

Transcription

Enterobacter sakazakii isolation agar Usage In Vitro
ESIA
Enterobacter sakazakii isolation agar
Usage In Vitro
Conserver entre 2 et 8°C
PRINCIPE
Enterobacter sakazakii est une entérobactérie qui a été
mise en cause dans des cas d’infections néonatales
véhiculées par des poudres de lait infantiles et se
traduisant par des entérocolites ou des méningites
sérieuses. Elle peut être également responsable
d’infections nosocomiales.
Elle appartient au groupe des coliformes
thermotolérants ce qui la rend apte à croître à une
température de 44°C. Initialement considérée comme
un Enterobacter cloacae à pigments jaunes, l’espèce
Enterobacter sakazakii a été individualisée en 1980 sur
la base d’études portant notamment sur l’hybridation
ARN-ADN.
Les facteurs de virulence de ce germe reste à ce jour
non élucidés.
La gélose chromogénique ESIA est destiné à la
recherche d’Enterobacter sakazakii dans les
échantillons alimentaires, notamment les poudres de
lait ou les aliments à base de poudre de lait. Sur ce
milieu, les colonies d’Enterobacter sakazakii
apparaissent de couleur bleue.
La méthode ESSB/ESIA permet la recherche
spécifique d’Enterobacter sakazakii dans les
échantillons alimentaires, notamment les poudres de
lait ou les aliments à base de poudre de lait.
Le bouillon ESSB a été spécifiquement formulé pour
garantir une croissance optimale d’Enterobacter
sakazakii tout en inhibant fortement les flores
associées, garantissant ainsi, une lecture simplifiée sur
le milieu ESIA. (Voir protocole)
RESULTATS
Les colonies typiques de l’espèce Enterobacter sakazakii
apparaissent bleues sur le milieu ESIA.
A partir de colonies typiques bien isolées, procéder à des
tests de confirmation selon protocole choisi.
LIMITES ET PRECAUTIONS
Certains coliformes peuvent donner des colonies violettes
sur ESIA. Ces colonies sont aisément différentiables des
colonies bleues typiques d’Enterobacter sakazakii.
BIBLIOGRAPHIE
1.
FORMULATION
En gramme par litre de milieu
Digestat pancréatique de caséine
Extrait de levure
Chlorure de sodium
Desoxycholate de sodium
Cristal violet
X-alpha-glucopyranoside
Agar
7
3
5
0.6
0.002
0.15
15
2.
pH final : 7,0 + 0,2 à 25°C
3.
Simmons, B.P., Gelfand, M.S., Haas, M., Metts,
L. and Ferguson, J. 1989. Enterobacter
sakazakii infections in neonates associated with
intrinsic contamination of a powdered infant
formula. Infect Control Hosp Epidemio. 10:398401.
Van Acker, J., De Smet, F., Muyldermans, G.,
Bougatef, A., Naessens, A. and Lauwers, S.
2001. Outbreak of necrotizing enterocolitis
associated with Enterobacter sakazakii in
powdered milk formula. J Clin Microbiol.
39:293-297.
ISO/TS 22964 : Milk and milk products –
Detection of Enterobacter sakazakii.
PREPARATION
Verser 30.8 g dans 1 litre d’eau distillée. Porter à
ébullition jusqu’à complète dissolution. Stériliser à
l’autoclave à 121°C pendant 15 minutes. Refroidir à
45-50°C et répartir en boîtes de Pétri stériles.
Déshydraté
AEB150002 : Flacons de 500 grs
Milieu ESIA pré-coulé
AEB520010 : Coffret de 20 boites de 90 mm
MODE OPERATOIRE
Recherche d’Enterobacter sakazakii
protocole normalisé :
Se référer à la norme ISO/TS 22964.
PRESENTATION
selon
le
Recherche d’Enterobacter sakazakii selon la
méthode ESSB/ESIA (mis au point par AES
Laboratoire) :
Bouillon ESSB prêt-à-l’emploi
AEB611448 : Coffret de 6 flacons de 225 ml
Fabriqué par
AES Laboratoire - Combourg - France
520010 : 05/09/05 -B
AES Laboratoire – Rue Maryse Bastié – Ker Lann – CS 17219 – 35172 Bruz Cedex
Tél. 02 23 50 12 12 Fax. 02 23 50 12 00 http://www.aeslaboratoire.com - [email protected]