Enterobacter sakazakii isolation agar Usage In Vitro
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Enterobacter sakazakii isolation agar Usage In Vitro
ESIA Enterobacter sakazakii isolation agar Usage In Vitro Conserver entre 2 et 8°C PRINCIPE Enterobacter sakazakii est une entérobactérie qui a été mise en cause dans des cas d’infections néonatales véhiculées par des poudres de lait infantiles et se traduisant par des entérocolites ou des méningites sérieuses. Elle peut être également responsable d’infections nosocomiales. Elle appartient au groupe des coliformes thermotolérants ce qui la rend apte à croître à une température de 44°C. Initialement considérée comme un Enterobacter cloacae à pigments jaunes, l’espèce Enterobacter sakazakii a été individualisée en 1980 sur la base d’études portant notamment sur l’hybridation ARN-ADN. Les facteurs de virulence de ce germe reste à ce jour non élucidés. La gélose chromogénique ESIA est destiné à la recherche d’Enterobacter sakazakii dans les échantillons alimentaires, notamment les poudres de lait ou les aliments à base de poudre de lait. Sur ce milieu, les colonies d’Enterobacter sakazakii apparaissent de couleur bleue. La méthode ESSB/ESIA permet la recherche spécifique d’Enterobacter sakazakii dans les échantillons alimentaires, notamment les poudres de lait ou les aliments à base de poudre de lait. Le bouillon ESSB a été spécifiquement formulé pour garantir une croissance optimale d’Enterobacter sakazakii tout en inhibant fortement les flores associées, garantissant ainsi, une lecture simplifiée sur le milieu ESIA. (Voir protocole) RESULTATS Les colonies typiques de l’espèce Enterobacter sakazakii apparaissent bleues sur le milieu ESIA. A partir de colonies typiques bien isolées, procéder à des tests de confirmation selon protocole choisi. LIMITES ET PRECAUTIONS Certains coliformes peuvent donner des colonies violettes sur ESIA. Ces colonies sont aisément différentiables des colonies bleues typiques d’Enterobacter sakazakii. BIBLIOGRAPHIE 1. FORMULATION En gramme par litre de milieu Digestat pancréatique de caséine Extrait de levure Chlorure de sodium Desoxycholate de sodium Cristal violet X-alpha-glucopyranoside Agar 7 3 5 0.6 0.002 0.15 15 2. pH final : 7,0 + 0,2 à 25°C 3. Simmons, B.P., Gelfand, M.S., Haas, M., Metts, L. and Ferguson, J. 1989. Enterobacter sakazakii infections in neonates associated with intrinsic contamination of a powdered infant formula. Infect Control Hosp Epidemio. 10:398401. Van Acker, J., De Smet, F., Muyldermans, G., Bougatef, A., Naessens, A. and Lauwers, S. 2001. Outbreak of necrotizing enterocolitis associated with Enterobacter sakazakii in powdered milk formula. J Clin Microbiol. 39:293-297. ISO/TS 22964 : Milk and milk products – Detection of Enterobacter sakazakii. PREPARATION Verser 30.8 g dans 1 litre d’eau distillée. Porter à ébullition jusqu’à complète dissolution. Stériliser à l’autoclave à 121°C pendant 15 minutes. Refroidir à 45-50°C et répartir en boîtes de Pétri stériles. Déshydraté AEB150002 : Flacons de 500 grs Milieu ESIA pré-coulé AEB520010 : Coffret de 20 boites de 90 mm MODE OPERATOIRE Recherche d’Enterobacter sakazakii protocole normalisé : Se référer à la norme ISO/TS 22964. PRESENTATION selon le Recherche d’Enterobacter sakazakii selon la méthode ESSB/ESIA (mis au point par AES Laboratoire) : Bouillon ESSB prêt-à-l’emploi AEB611448 : Coffret de 6 flacons de 225 ml Fabriqué par AES Laboratoire - Combourg - France 520010 : 05/09/05 -B AES Laboratoire – Rue Maryse Bastié – Ker Lann – CS 17219 – 35172 Bruz Cedex Tél. 02 23 50 12 12 Fax. 02 23 50 12 00 http://www.aeslaboratoire.com - [email protected]