Minutes of the expert meeting : EQAS Sperm analysis: 5/2 - WIV-ISP

Transcription

Institut scientifique de Santé Publique
Section de Biologie Clinique
Contrôle de qualité externe pour l’analyse du sperme
Enquête 2005-2 rapport final
Groupe d’experts Ad hoc: Dr. U. Punjabi (UZA); Dr. G. Verheyen (VUB); Prof. F. Comhaire
(UzG);) Dr. C. Spiessens (KUL); Dr. G. Depré (ULB); Dr. E. Bosmans (Genk); Dr. Ch Wyns
( UCL)
Ce rapport ne peut être reproduit, publié ou distribué sans l’accord de l’ISP
Analyse de sperme. Rapport Global 2005/2
date d’impression: 23/09/2005
1/14
Dr. J.C. Libeer (IPH)
Scheme coordinator
[email protected]
02 642 55 27
Dr. U. Punjabi (UZA)
03/821 33 65
[email protected]
Dr. G. Verheyen (VUB)
02/477 50 50
[email protected]
Prof. F. Comhaire (UzG)
09/240 21 33
[email protected]
Dr. C. Spiessens (KUL)
016/34 42 02
[email protected]
Dr. G. Depré (ULB)
02/555 42 79
[email protected]
Dr. E. Bosmans (ZOL, Genk)
[email protected]
Dr. Ch. Wyns (UCL)
[email protected]
2/14
1. Echantillons
Les échantillons ont été envoyés le 7 juin 2005. Les suspensions et les étalements ont été
préparés par le Prof. F. Comhaire, UZ Gent.
Il y avait des échantillons suffisants pour faire tous les tests d’homogénéité. 6 experts ont reçu
5 échantillons. Ceci a permi d’évaluer l’homogénéité et les conditions d’envoi des échantillons.
On obtient un CV intra-laboratoire de 3,7 à 10,3% pour l’échantillon 0502-1 et entre 1,5 et
10,1% pour l’échantillon 0502-2.
Pour les frottis un CV intra-laboratoire de 5,2 à 20,7 % est obtenu pour l’échantillon 0502-3 et
de 4,7 à 39,6% pour l’échantillon 0502-4.
Ces résultats nous permettent de conclure à une homogénéité suffisante.
Table 1: Résultats des laboratoires experts
Lab A
Lab B
Lab C
Lab D
Lab E
Lab F
0502-1/1
28,3
29,1
26
32,97
30,2
29,1
0502-1/2
26,8
30,6
25,7
37,5
33,6
35,7
0502-1/3
32,2
28,1
25
35,63
31,3
31,4
0502-1/4
31,5
27,9
23,4
35,78
29,9
27,2
0502-1/5
31
28,6
25,8
35,94
33
31,5
Median
31
28,6
25,7
35,78
31,3
31,4
Mean
30,0
28,9
25,2
35,6
31,6
31,0
SD
2,30
1,08
1,06
1,63
1,65
3,18
7,7
3,7
4,2
4,6
5,2
10,3
0502-2/1
41,6
36,2
32,2
43,13
40,2
79,8
0502-2/2
43,7
33,8
30,3
42,03
42
78,5
0502-2/3
40
32,9
33,4
41,41
41
78,2
0502-2/4
40,2
31,9
34,7
42,97
32,2
76,5
0502-2/5
42,1
33,5
30,8
44,06
40,6
77,9
Median
41,6
33,5
32,2
42,97
40,6
78,2
Mean
41,5
33,7
32,3
42,7
39,2
78,2
SD
1,51
1,59
1,82
1,03
3,97
1,19
3,6
4,7
5,6
2,4
10,1
1,5
CV%
CV%
3/14
Lab A
Lab B
Lab C
Lab D
Lab E
Lab F
0502-3/1
10
11
6,5
20
14
27
0502-3/2
10
14
7
22
13
25
0502-3/3
7
12
7
21
12
24
0502-3/4
12
12
6,5
24
12
26
0502-3/5
8
5
23
13
24
Median
10
12
6,5
22
13
25
Mean
9,4
12,3
6,4
22,0
12,8
25,2
SD
1,95
1,26
0,82
1,58
0,84
1,30
CV%
20,7
10,3
12,8
7,2
6,5
5,2
0502-4/1
14
8
6
14
11
28
0502-4/2
13
10
5,5
15
12
25
0502-4/3
14
6
6
15
11
19
0502-4/4
15
15
5,5
15
12
27
0502-4/5
20
6,5
16
10
23
Median
14
9
6
15
11
25
Mean
15,2
9,8
5,9
15,0
11,2
24,4
SD
2,77
3,86
0,42
0,71
0,84
3,58
CV%
18,3
39,6
7,1
4,7
7,5
14,7
/
/
2. Participants
Nous avons reçu les résultats de 132 participants
Les diagrammes en camembert suivants donnent la répartition des cellules de numération
réutilisables utilisées pour le spermogramme (numération des spermatozoïdes), les critères et les
colorations utilisés pour l’évaluation morphologique (spermocytogramme).
4/14
Reusable chambers
Makler
6%
Thoma
8%
Bürker
20%
Fuchs-Rosenthal
5%
Improved Neubauer
61%
Morphology criteria
WHO 1992
9%
Tygerberg
57%
WHO 1999
34%
5/14
Staining procedures
Diff-Quick
13%
Spermac
15%
Giemsa
6%
Shorr
4%
Papanicolaou
62%
3.1. Spermogramme (numération des spermatozoïdes)
Pour l’échantillon 0502-1 les résultats suivants ont été obtenus :
Moyenne Médiane ET
Experts (N=8) 30,0
29,5
2,90
Participants
33,0
32,0
5,75
CV
9,7
18,0
Min
25,7
17
Max
35,6
55
P25
28,6
28,7
P75
31,2
36,5
Max
78,2
123
P25
35,8
40,9
P75
45,7
52,1
Pour l’échantillon 0502-2 les résultats suivants ont été obtenus :
Moyenne Médiane ET
Experts (N=8) 45,0
40,9
15,14
Participants
48,0
46,4
8,36
CV
33,7
18,0
Min
32,2
15,6
La médiane du ratio des numérations (échantillon 0502-1/0502-2) pour les laboratoires experts
est 0,75; pour les participants: 0,70.
Les diagrammes en « Box –Whisker » de tous les échantillons sont donnés en appendice.
Certains participants mentionnent la présence de nombreuses têtes et flagelles isolées.
Chaque participant doit situer ses résultats dans les diagrammes. Les résultats en dehors
du percentile 25 et 75 (résultats en dehors des boîtes) doivent être reconsidérés. La
méthode utilisée doit être revue. Eventuellement, vous pouvez consulter un des experts.
6/14
14 participants (9%) se situent pour les deux échantillons en dessous du P25 et 15 participants
(11%) se situent pour les deux échantillons au dessus du P75.
.
3.2. Morphologie (spermocytogramme)
Les échantillons 0502-3 et 0502-4 sont identiques
L’échantillon 0502-3 est considéré comme anormal par 4 des 8 experts (borderline); 74% des
participants considèrent cet échantillon comme normal.
Les diagrammes en « Box –Whisker » de tous les échantillons sont donnés en appendice.
Les résultats suivants sont obtenus:
Moyenne
Médiane
ET
Experts (N=8) 14,2
13,0
6,29
Participants
26,9
22,0
15,19
CV
44,3
69,07
Min
6,5
3
Max
25,0
88,5
P25
10,0
14,0
P75
16,0
33,8
L’échantillon 0502-4 est considéré comme anormal par 4 des experts; 70% des participants
considèrent cet échantillon comme normal.
Les diagrammes en « Box –Whisker » de tous les échantillons sont donnés en annexe.
Les résultats suivants sont obtenus, basés sur les critères utilisés:
Moyenne Médiane
ET
CV
Min
Experts (N=8) 12,3
11,0
5,65
46,1
6
Participants
27,3
20,0
17,79 88,95
4
Max
24
95,5
P25
9,3
12,5
P75
14,3
36,0
14 participants (11%) comptent plus de 50 % de cellules normales dans l’échantillon 05023; 16 participants (7%) comptent plus de 50 % de cellules normales dans l’échantillon
0502-4; 14 (11%) participants le font pour les deux échantillons.
Il n’y a plus des interprétations illogiques
Les critères OMS 99 et Strict devraient donner les mêmes résultats ; cependant ce n’est pas
le cas si l’on compare les résultats des deux groupes
L’application correcte des critères de Tygerberg et de l’OMS requiert une coloration
permettant une bonne visualisation du flagelle et de la pièce intermédiaire. C’est pourquoi
la coloration de Giemsa n’est pas appropriée. Il est recommandé d’utiliser les colorations
de Papanicolaou, Shorr, Spermac ou Diff-Quick.
Chaque participant doit situer ses résultats dans les diagrammes. Les résultats en dehors
du percentile 25 et 75 (résultats en dehors des boîtes) doivent être reconsidérés. Les
résultats en dehors du percentile 10 et 90 (résultats en dehors des « whiskers ») sont
inacceptables.
7/14
Les participants rapportant ≥50% de formes normales doivent revoir leurs critères car il
est impossible d’obtenir un pourcentage aussi élevé en appliquant correctement les critères
de Tygerberg ou de l’OMS 1992 ou 1999.
La méthode utilisée doit être revue. Eventuellement, vous pouvez consulter un des experts
5. Calendrier des enquêtes d’analyse du sperme 2005
2005/1 : semaine 11
2005/2 : semaine 23
2005/3 : semaine 42
5. Littérature
F. Comhaire and L. Vermeulen. Human semen analysis. Human reproduction Update 1995
(vol. 1) 4 343-362.
British Andrology Society: Seminal fluid analysis & Anti-sperm antibody testing. Standard
operating procedures laboratory manual: http://www.ReproMED.org.uk/bas/bas1.html
WHO laboratory manual for the examination of human semen and sperm-cervical mucus
interaction. Fourth edition. Cambridge University Press. ISBN 0 521 64599 9
Nordic Association for Andrology: Manual for basis semen analysis 2000:
http://www.ki.se/org/nafa/manual/manual.html
ESHRE Monographs. Manual on Basic Semen Analysis. editors: U. Kvist and L.
Björndahl. Oxford University Press ISSN 1477-741x
6. Annexes
Global results:
Echantillon 0502-1: Numération de cellules
Echantillon 0502-3: Morphologie
Echantillon 0502-4: Morphologie
8/14
Box-Whisker plots:
Echantillon 0502-1: Numération de cellules (cellules utilisée)
Echantillon 0502-2: Numération de cellules (cellules utilisée)
Ratio échantillon 0502-1/0502-2
Echantillon 0502-3: Morphologie (coloration)
Echantillon 0502-3: Morphologie (critères)
Echantillon 0502-4: Morphologie (coloration)
Echantillon 0502-4: Morphologie (critères)
Sample 0502-1: Cell counting
Results
60
55
50
45
40
35
30
25
20
15
Count 1
Experts 1
9/14
Results
60
55
50
45
40
35
30
25
Thoma
Disposable
Makler
Fuchs-Rosenthal
Bürker
15
Improved Neubauer
20
Results
140
120
100
80
60
40
20
0
Count 2
Experts 2
10/14
Results
140
120
100
80
60
40
Results
Thoma
Disposable
Makler
Fuchs-Rosenthal
Bürker
0
Improved Neubauer
20
Ratio sample 0502-1/0502-2
2,2
2
1,8
1,6
1,4
1,2
1
,8
,6
,4
,2
Overall ratio
Experts ratio
11/14
Results
Ratio sample 0502-1/0502-2
2,2
2
1,8
1,6
1,4
1,2
1
,8
,6
Results
Thoma
Disposable
Makler
Bürker
Improved Neubauer
,2
Fuchs-Rosenthal
,4
Sample 0502-3: Morphology criteria
100
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0
Tygerberg
WHO 1992
WHO 1999
12/14
Results
Sample 0502-3: Morphology staining
100
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0
Diff-Quick
Giemsa Papanicolaou
Shorr
Spermac
Sample 0502-4: Morphology: criteria
Results
100
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0
Tygerberg
WHO 1992
WHO 1999
13/14
Results
Sample 0502-4: Morphology: staining
100
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0
Diff-Quick
Giemsa Papanicolaou
Shorr
Spermac
14/14
23/09/2005
Ministery of public Health
IPH Clinical Biology section
External quality assessment for sperm tests
Page:
GLOBAL RAPPORT / SPERM 2005/2
Sample 0502-1 Count
Method
Mean
Median
SD
CV
Minimum
Maximum
N
Global results
32,96
32,00
5,75
17,99
17
55
132
Disposable chamber
25,13
24,70
1,57
6,37
21
33
7
RC.Bürker
34,29
33,85
4,78
14,12
27
46
24
RC.FUCHS-Rosenthal
33,73
33,42
4,15
12,42
27,2
39,75
6
RC.improved Neubauer
32,90
31,67
5,12
16,19
17
52,2
72
RC.Makler
33,40
31,60
4,81
15,24
25
50,2
7
RC.Thoma
36,40
33,55
5,04
15,02
26
55
10
Reusable chambers
1
23/09/2005
Page:
Sample 0502-2 Count
Method
Mean
Median
SD
CV
Minimum
Maximum
N
Global results
48,02
46,35
8,36
18,04
15,58
123
132
Disposable chamber
37,94
35,10
10,97
31,27
26
50,9
7
RC.Bürker
51,44
47,25
4,89
10,35
38,1
123
24
RC.FUCHS-Rosenthal
48,43
51,95
9,71
18,69
15,58
72,8
6
RC.improved Neubauer
44,82
45,00
7,96
17,70
28,4
65,8
72
RC.Makler
60,02
43,00
31,76
73,87
32,5
100
7
RC.Thoma
53,84
52,75
6,52
12,36
40
90
10
Reusable chambers
---------- End ----------
2
23/09/2005
Page:
1
Sample 0502-3 Morphology - Normal forms
Method
Mean
Median
SD
CV
Minimum
Maximum
Normal
Abnormal
N
26,91
22,00
15,19
69,07
3
88,5
74 %
26 %
119
Tygerberg criteria
18,29
16,00
7,41
46,33
3
57
73 %
27 %
65
WHO criteria(1992)
42,09
36,00
18,53
51,47
17
88
64 %
36 %
11
WHO criteria(1999)
35,50
31,50
19,64
62,36
9
88,5
77 %
23 %
40
Global results for staining procedure
26,91
22,00
15,19
69,07
3
88,5
74 %
26 %
119
Diff-Quick (test simplets)
26,30
21,00
12,97
61,77
7
65
57 %
43 %
15
Giemsa + modifications
41,00
36,00
17,79
49,41
15
76
86 %
14 %
7
Papanicolaou/Wright
25,66
18,50
13,71
74,12
3
88,5
74 %
26 %
70
Shorr
27,20
22,00
8,89
40,43
14
46
100 %
Spermac
24,08
22,00
5,18
23,58
8
52
71 %
Global results for criteria
Criteria
Staining procedure
5
29 %
17
23/09/2005
Page:
2
Sample 0502-4 Morphology - Normal forms
Method
Mean
Median
SD
CV
Minimum
Maximum
Normal
Abnormal
N
27,29
20,00
17,79
88,95
4
95,5
70 %
30 %
120
Tygerberg criteria
18,15
15,00
8,15
54,36
4
95,5
62 %
38 %
65
WHO criteria(1992)
45,72
41,00
22,97
56,04
18
87
73 %
27 %
11
WHO criteria(1999)
35,76
28,00
21,49
76,77
5
85
85 %
15 %
41
27,29
20,00
17,79
88,95
4
95,5
70 %
30 %
120
27,00
22,00
12,97
58,96
7
68
71 %
29 %
15
41,28
30,00
27,79
92,66
11
79
86 %
14 %
7
Papanicolaou/Wright
25,53
18,00
14,45
80,30
4
95,5
66 %
34 %
71
Shorr
28,20
19,00
20,01
105,34
11
48
100 %
Spermac
27,08
25,00
16,30
65,23
7
74
76 %
Criteria
Staining procedure
5
24 %
17
23/09/2005
Page:
3
Sample 0502-3 Morphology - Ratio (Nf/Tv)
Method
Mean
Median
SD
CV
Minimum
Maximum
Normal
Abnormal
N
1,63
1,30
0,63
48,46
0,38
14
76 %
24 %
93
Tygerberg criteria
1,60
1,20
0,43
36,44
0,38
14
77 %
23 %
53
WHO criteria(1992)
1,19
1,20
0,38
31,81
0,425
2,12
57 %
43 %
7
WHO criteria(1999)
1,78
1,60
0,74
46,33
0,71
4,3
81 %
19 %
31
1,63
1,30
0,63
48,46
0,38
14
76 %
24 %
93
1,45
1,20
0,88
74,12
0,425
4,3
58 %
42 %
12
1,46
1,60
0,54
33,82
0,9
1,93
80 %
20 %
5
Papanicolaou/Wright
1,69
1,21
0,60
50,23
0,38
14
76 %
24 %
55
Shorr
1,38
1,40
0,15
11,11
1,15
1,57
100 %
Spermac
1,52
1,48
0,77
52,59
0,79
2,53
86 %
Criteria
Staining procedure
4
14 %
14
23/09/2005
Page:
4
Sample 0502-4 Morphology - Ratio (Nf/Tv)
Method
Mean
Median
SD
CV
Minimum
Maximum
Normal
Abnormal
N
1,47
1,21
0,62
51,46
0,33
14
70 %
30 %
93
Tygerberg criteria
1,46
1,07
0,51
48,49
0,33
14
62 %
38 %
53
WHO criteria(1992)
1,23
1,30
0,55
42,76
0,6
1,85
71 %
29 %
7
WHO criteria(1999)
1,52
1,40
0,52
37,32
0,43
4,1
84 %
16 %
31
1,47
1,21
0,62
51,46
0,33
14
70 %
30 %
93
1,17
1,15
0,53
46,41
0,5
2,3
67 %
33 %
12
1,24
1,13
0,37
32,80
0,79
1,8
80 %
20 %
5
Papanicolaou/Wright
1,51
1,07
0,61
57,50
0,33
14
64 %
36 %
55
Shorr
1,23
1,26
0,09
7,64
1,1
1,3
100 %
Spermac
1,52
1,45
0,68
47,54
0,5
2,6
86 %
Criteria
Staining procedure
---------- End ----------
4
14 %
14

Minutes of the expert meeting : EQAS Sperm analysis: 5/2 - WIV-ISP

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