Minutes of the expert meeting : EQAS Sperm analysis: 5/2/98

Transcription

Institut scientifique de Santé Publique
Section de Biologie Clinique
Contrôle de qualité externe pour l’analyse du sperme
Enquête 2006-2: rapport global
Comité d’experts ad hoc : Dr. U. Punjabi (UZA); Dr. G. Verheyen (VUB); Dr. A. Mahmoud
(UzG);); Dr. C. Spiessens (KUL); Dr. G. Depré (ULB); Dr. E. Bosmans (Genk); Dr. Ch Wyns
( UCL)
Ce rapport ne peut être reproduit, publié ou distribué sans l’accord de l’ISP
Analyse de sperme. Rapport Global 2006/2
Date d’impression: 12/09/2006
1/15
Dr. J.C. Libeer (IPH)
Scheme coordinator
[email protected]
02 642 55 27
Dr. U. Punjabi (UZA)
03/821 33 65
[email protected]
Dr. G. Verheyen (VUB)
02/477 50 50
[email protected]
Dr. A. Mahmoud (UzG)
09/240 21 33
[email protected]
Dr. C. Spiessens (KUL)
016/34 42 02
[email protected]
Dr. G. Depré (ULB)
02/555 67 41
[email protected]
Dr. E. Bosmans (ZOL, Genk)
[email protected]
Dr. Ch. Wyns (UCL)
[email protected]
2/15
1. Echantillons
Les échantillons ont été envoyés le 12 juin 2006. Les suspensions et les frottis ont été préparés à
l’UZ Gent.
Les tests d’homogénéité ont été faits dans 5 laboratoires d’experts, ayant reçu les échantillons 5
fois.
On obtient un CV intra-laboratoire de 1,5 à 19,4% pour l’échantillon 0602/1.
Ce CV haut se reduit à 8,5 si on elimine les résultats du labo E.
On obtient un CV intra-laboratoire de 2,5 à 17% pour l’échantillon 0602/2.
Ce CV haut se reduit à 8,6 si on elimine de nouveau les résultats du labo E.
Pour les frottis un CV intra-laboratoire de 13,5 à 39,1% est obtenu pour l’échantillon 0602/3 et
de 7,7 à 33,5% pour l’échantillon 0602/4.
Ces résultats nous permettent de conclure à une homogénéité suffisante.
Table 1: Résultats des laboratoires experts
Echantillo
n
Lab A
Lab B
Lab C
Lab D
Lab E
0602-1/1
21,4
10,2
17,7
18,6
7,2
0602-1/2
20,3
10,2
18,2
18,0
11,6
0602-1/3
18,9
10,4
19,3
17,9
12,2
0602-1/4
21,4
9,9
17,8
18,2
12,0
0602-1/5
17,5
10,1
19,7
18,2
10,4
Médiane
20,3
10,15
18,2
18,2
11,6
Moyenne
19,9
10,1
18,5
18,2
10,7
SD
1,69
0,16
0,91
0,27
2,07
CV%
8,5
1,6
4,9
1,5
19,4
3/15
Echantillo
n
Lab A
Lab B
Lab C
Lab D
Lab E
0602-2/1
58,6
44,8
53,8
47,0
25,7
0602-2/2
60,2
44,5
56,3
48,9
37,2
0602-2/3
56,1
45,5
57,3
46,6
37,8
0602-2/4
52,4
46,0
61,3
49,4
29,7
0602-2/5
48,5
47,6
58,1
47,9
28,7
Médiane
56,1
45,5
57,25
47,9
29,7
Moyenne
55,2
45,7
57,3
48,0
31,8
SD
4,75
1,21
2,74
1,20
5,39
CV%
8,6
2,7
4,8
2,5
17,0
0602-3/1
2,0
1,5
7,0
2,0
11,0
0602-3/2
2,0
2,0
6,0
1,0
9,0
0602-3/3
1,0
1,5
7,0
2,0
9,0
0602-3/4
1,0
1,5
6,0
2,0
10,0
0602-3/5
1,0
2,0
5,0
2,0
7,0
Médiane
1,0
1,5
6,0
2,0
9,0
Moyenne
1,4
1,7
6,2
1,8
9,2
SD
0,55
0,27
0,84
0,45
1,48
CV%
39,1
16,1
13,5
24,8
16,1
4/15
Echantillo
n
Lab A
Lab B
Lab C
Lab D
Lab E
0602-4/1
10,0
11,0
10,0
9,0
25,0
0602-4/2
6,0
13,0
12,0
8,0
22,0
0602-4/3
8,0
14,0
10,0
9,0
22,0
0602-4/4
6,0
13,0
11,0
9,0
17,0
0602-4/5
4,0
13,0
11,0
10,0
22,0
Médiane
6,0
7,5
11,0
9,0
22,0
Moyenne
6,8
12,8
10,8
9,0
21,6
SD
2,28
1,10
0,84
0,71
2,88
CV%
33,5
8,6
7,7
7,9
13,3
2. Participants
Nous avons reçu les résultats de 130 participants
Les diagrammes en camembert suivants donnent la répartition des cellules de numération
réutilisables utilisées pour le spermogramme (numération des spermatozoïdes), les critères et les
colorations utilisées pour l’évaluation morphologique (spermocytogramme).
5/15
Reusable chambers
Thoma
Makler 8%
5%
Bürker
17%
Fuchs-Rosenthal
5%
Improved Neub +
pos displ
40%
Improved Neubauer
25%
6/15
Morphology criteria
WHO 1999
42%
Tygerberg
58%
Staining procedures
Spermac
15%
Shorr
6%
Diff-Quick
12%
Giemsa
4%
Pap modified
17%
Pap/Wright
46%
7/15
3.1. Spermogramme (numération des spermatozoïdes)
Pour l’échantillon 0602/1 les résultats suivants ont été obtenus :
Moyenne Médiane ET
Experts (N=8)
15,8
16,3
3,88
Participants
22,1
19,5
3,33
(N=130)
Neub/pos displ
19,1
19,7
3,37
N=48
CV, %
24,6
16,9
Min
10,2
7,1
Max
21,4
166,1
P25
13,6
17,2
P75
18,3
22,1
17,1
7,1
27,0
16,9
21,4
Les résultats des participants sont plus hauts que ceux des experts. La dispersion des
participants est meilleure que celle obtenue par les experts.
Pour l’échantillon 0602/2 les résultats suivants ont été obtenus :
Experts (N=8)
Participants
(N=130)
Neub/pos displ
N=48
Moyenne Médiane ET
46,9
46,7
8,58
55,9
55,8
8,82
54,2
55,3
6,44
CV, %
18,3
15,8
Min
31,8
16,7
Max
58,6
217,9
P25
43,2
48,9
P75
50,6
60,9
11,7
26,5
77,0
50,4
58,8
Les résultats des participants sont plus hauts que ceux des experts. La dispersion des
participants est comparable avec celle obtenue par les experts.
La médiane du ratio des numérations (échantillon 0602-1/0602-2) pour les laboratoires experts
est 0,34; pour les participants: 0,36.
Les diagrammes en « Box –Whisker » de tous les échantillons sont donnés en appendice.
Chaque participant doit situer ses résultats dans les diagrammes. Les résultats en dehors
du percentile 25 et 75 (résultats en dehors des boîtes) doivent être reconsidérés. La
méthode utilisée doit être revue. Eventuellement, vous pouvez consulter un des experts.
1 labo a une erreur systématique négative pour les deux valeurs < -3SD et 2 laboratoires
montrent une erreur systématique positive avec les deux valeurs >+ 3SD
3.2. Morphologie (spermocytogramme)
L’échantillon 0602/3 est considéré comme anormal par les 8 experts; 90% des participants
considèrent aussi cet échantillon anormal.
Les diagrammes en « Box –Whisker » de tous les échantillons sont donnés en appendice.
8/15
Les résultats suivants sont obtenus:
Moyenne
Médiane
Experts (N=8)
4,1
3,5
Participants
10,8
8,0
(N=117)
ET
2,80
5,93
CV,%
67,9
74,1
Min
1,0
1,0
Max
9,0
63,0
P25
2,0
5,0
P75
6,0
13,0
L’échantillon 0601/4 est considéré comme normal par 6/8 experts; 62% des participants
considèrent cet échantillon comme normal également.
Les diagrammes en « Box –Whisker » de tous les échantillons sont donnés en annexe.
Les résultats suivants sont obtenus, basés sur les critères utilisés:
Moyenne Médiane
ET
CV, % Min
Experts (N=8)
13,3
11,5
4,20
31,7
10,0
Participants
17,6
20,7
11,1
62,6
2,0
(N=118)
Max
22,0
65,0
P25
10,8
12,0
P75
14,0
27,0
Details des anormalité observées (valeurs médianes) pour les participants qui ont donné
tous les détails:
% normal
% anomalie tête
% anomalie pièce interm.
% anomalie flagelle
% inclusions cytoplasmiques
Echantillon 0602/3
B EQA
8
69
20
22
4
Echantillon 0602/4
B EQA
18
61
16
17
4
L’application correcte des critères de Tygerberg et de l’OMS requiert une coloration
permettant une bonne visualisation du flagelle et de la pièce intermédiaire. C’est pourquoi
la coloration de Giemsa n’est pas appropriée. Il est recommandé d’utiliser les colorations
de Papanicolaou (modifié selon les recommendations OMS), Shorr, Spermac ou DiffQuick.
Chaque participant doit situer ses résultats dans les diagrammes. Les résultats en dehors
du percentile 25 et 75 (résultats en dehors des boîtes) doivent être reconsidérés. Les
résultats en dehors du percentile 10 et 90 (résultats en dehors des « whiskers ») sont
inacceptables.
Les participants rapportant ≥50% de formes normales doivent revoir leur critères car il
est impossible d’obtenir un pourcentage aussi élevé en appliquant correctement les critères
de Tygerberg ou de l’OMS 1999.
La méthode utilisée doit être revue. Eventuellement, vous pouvez consulter un des experts
Pour évaluer l’effet de la formation en utilisant le logiciel Strict 1-2-3 les résutats de
morphologie de ‘enquête ESHRE 2005/3 (avant le training) seront comparés avec ceux de
‘enquête ESHRE 2006/3 (après le training).
9/15
4. Calendrier des enquêtes d’analyse du sperme 2006
2006/1: 20 mars
2006/2: 8 juin
2006/3 : 23 octobre
5. Littérature
F. Comhaire and L. Vermeulen. Human semen analysis. Human reproduction Update 1995
(vol. 1) 4 343-362.
British Andrology Society: Seminal fluid analysis & Anti-sperm antibody testing. Standard
operating procedures laboratory manual: http://www.ReproMED.org.uk/bas/bas1.html
WHO laboratory manual for the examination of human semen and sperm-cervical mucus
interaction. Fourth edition. Cambridge University Press. ISBN 0 521 64599 9
Nordic Association for Andrology: Manual for basis semen analysis 2000:
http://www.ki.se/org/nafa/manual/manual.html
ESHRE Monographs. Manual on Basic Semen Analysis. editors: U. Kvist and L.
Björndahl. Oxford University Press ISSN 1477-741x
6. Annexes
Résultats globaux
Echantillon 0602/1: Numération de cellules
Echantillon 0602/3: Morphologie
Echantillon 0602/4: Morphologie
Box-Whisker plots:
Echantillon 0602/1: Numération de cellules (cellules utilisée)
Echantillon 0602/2: Numération de cellules (cellules utilisée)
Ratio échantillon 0602-1/0602-2
Echantillon 0602-3: Morphologie (coloration)
Echantillon 0602-3: Morphologie (critères)
Echantillon 0602-4: Morphologie (coloration)
Echantillon 0602-4: Morphologie (critères)
10/15
Results
Sample 0602-1: Cell counting
180
160
140
120
100
80
60
40
20
0
Count 1
Results
Experts 1
180
160
140
120
100
80
60
40
Thoma
Disposable
Makler
Fuchs-Rosenthal
Bürker
Imp Neub + pos disp pip
0
Improved Neubauer
20
11/15
Results
225
200
175
150
125
100
75
50
25
0
Count 2
Results
Experts 2
225
200
175
150
125
100
75
50
Thoma
Disposable
Makler
Fuchs-Rosenthal
Bürker
Neub + pos displ pip
0
Improved Neubauer
25
12/15
Results
Ratio sample 0602-1/0602-2
4
3,5
3
2,5
2
1,5
1
,5
0
0verall ratio
Results
Experts ratio
Ratio sample 0602-1/0602-2
4
3,5
3
2,5
2
1,5
1
Thoma
Disposable
Makler
Fuchs-Rosenthal
Bürker
Neub + pos displ pip
0
Improved Neubauer
,5
13/15
Results
Sample 0602-3: Morphology criteria
70
60
50
40
30
20
10
0
Tygerberg
Results
WHO 1999
WHO 1992
Sample 0602-3: Morphology staining
70
60
50
40
30
20
Spermac
Shorr
Pap (WHO)
Papanicolaou
Giemsa
0
Diff-Quick
10
14/15
Results
Sample 0602-4: Morphology criteria
70
60
50
40
30
20
10
0
Tygerberg
Results
WHO 1999
WHO 1992
Sample 0602-4: Morphology staining
70
60
50
40
30
20
Spermac
Shorr
Papanicolaou
Pap (WHO)
Giemsa
0
Diff-Quick
10
15/15
12/09/2006
Ministery of public Health
IPH Clinical Biology section
External quality assessment for sperm tests
Page:
GLOBAL RAPPORT / SPERM 2006/2
Sample 0602-1 Count
Method
Mean
Median
SD
CV
Minimum
Maximum
N
Global results
22,01
19,70
3,25
16,50
7,1
166,1
131
Disposable chamber
19,48
19,21
6,30
32,80
13,9
27,5
6
RC.Bürker
32,97
20,70
5,81
28,11
16
166,1
20
RC.FUCHS-Rosenthal
21,60
21,85
2,07
9,49
16
24,75
6
RC.improved Neubauer
21,02
19,05
2,52
13,23
10,15
58,05
30
RC.improved Neubauer With Positive Displacement
19,05
19,67
3,37
17,14
7,1
27
48
RC.Makler
23,85
17,10
2,59
15,17
14
60
6
RC.Thoma
21,02
22,12
4,29
19,43
14
27,2
10
Reusable chambers
1
12/09/2006
Page:
Sample 0602-2 Count
Method
Mean
Median
SD
CV
Minimum
Maximum
N
Global results
55,76
55,60
8,82
15,86
16,7
217,9
131
Disposable chamber
43,51
44,50
7,90
17,75
35,3
51,33
6
RC.Bürker
65,86
59,25
7,78
13,13
31
217,9
20
RC.FUCHS-Rosenthal
65,03
66,25
7,93
11,97
49,6
81,6
6
RC.improved Neubauer
54,99
56,65
8,52
15,04
16,7
87,6
30
RC.improved Neubauer With Positive Displacement
54,17
55,30
6,44
11,66
26,5
77
48
RC.Makler
41,63
42,50
7,11
16,74
22
59
6
RC.Thoma
63,94
59,65
6,67
11,18
39,5
110,4
10
Reusable chambers
---------- End ----------
2
12/09/2006
Page:
1
Sample 0602-3 Morphology - Normal forms
Method
Mean
Median
SD
CV
Minimum
Maximum
Normal
Abnormal
N
10,76
8,00
5,93
74,12
1
63
11 %
89 %
118
6,55
5,65
4,81
85,28
1
20
8%
92 %
66
WHO criteria(1999)
15,73
13,00
9,08
69,85
2
63
15 %
85 %
48
Global results for staining procedure
10,76
8,00
5,93
74,12
1
63
11 %
89 %
118
Diff-Quick (test simplets)
12,12
8,50
6,74
79,36
3
32
17 %
83 %
14
Giemsa + modifications
7,90
7,00
1,48
21,17
5,5
11
100 %
5
Papanicolaou/Modified
9,60
8,00
5,74
71,81
1
63
11 %
89 %
19
Papanicolaou/Wright
10,66
7,50
5,93
79,07
1
57
13 %
87 %
53
Shorr
12,21
12,00
10,93
91,11
2
21
100 %
7
Spermac
11,92
12,00
11,86
98,83
1
25
86 %
17
Global results for criteria
Criteria
Tygerberg criteria
Staining procedure
14 %
12/09/2006
Page:
2
Sample 0602-4 Morphology - Normal forms
Method
Mean
Median
SD
CV
Minimum
Maximum
Normal
Abnormal
N
20,62
17,50
11,11
63,53
2
65
62 %
38 %
119
Tygerberg criteria
14,30
13,60
5,18
38,15
5
28
62 %
38 %
66
WHO criteria(1999)
28,03
27,00
13,34
49,41
2
65
61 %
39 %
49
Global results for staining procedure
20,62
17,50
11,11
63,53
2
65
62 %
38 %
119
Diff-Quick (test simplets)
20,15
18,50
10,22
55,29
2
50
67 %
33 %
14
Giemsa + modifications
18,70
17,00
2,22
13,08
7,5
34
40 %
60 %
5
Papanicolaou/Modified
18,30
17,50
5,93
33,88
10
45
79 %
21 %
19
Papanicolaou/Wright
20,55
17,00
10,37
61,04
6
65
54 %
46 %
54
Shorr
23,00
15,00
15,56
103,78
9
51
43 %
57 %
7
Spermac
23,41
19,00
17,79
93,63
5
48
79 %
21 %
17
Global results for criteria
Criteria
Staining procedure
---------- End ----------

Minutes of the expert meeting : EQAS Sperm analysis: 5/2/98

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