Total β-hCG - Laboratoire de biologie médicale du Quai Vallière

fr
Total ␤-hCG
SYSTEM
7K78
49-3678/R3
B7K782
Faire attention aux modifications
Rvision de juin 2010
Total ␤-hCG
(␤-hCG totale)
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sur www.abbottdiagnostics.com
Suivre scrupuleusement les instructions de cette notice. La fiabilit des rsultats du dosage ne peut pas tre
garantie si ces instructions ne sont pas strictement respectes.
Lgende des symboles utiliss
Cupules
ractionnelles
Rfrence
Dispositif mdical de
diagnostic in vitro
Godets-chantillons
Numro de lot
Septum
Date d'expiration
Bouchons de
remplacement
Conserver entre 2 et 8 °C
Lot de ractifs
Consulter les instructions
d'utilisation
Numro de srie
Fabricant
L’explication complte des symboles utiliss pour la dnomination des
composants se trouve la partie REACTIFS.
1
DENOMINATION
REACTIFS
ARCHITECT -hCG totale
Kit de ractifs, 100 tests / 500 tests
REMARQUE : Les conditionnements varient en fonction de la
commande.
REMARQUE : Certains conditionnements ne sont pas disponibles dans
tous les pays ou utilisables sur tous les ARCHITECT i Systems.
Contactez votre distributeur local.
DOMAINE D'APPLICATION
ARCHITECT -hCG totale est un dosage immunologique
microparticulaire par chimiluminescence (CMIA) pour la dtermination
quantitative et qualitative de la gonadotrophine chorionique humaine
(molcule entire et sous-units bta libres)(-hCG) dans le srum et
le plasma humains pour le diagnostic prcoce d'une grossesse.
Kit de ractifs ARCHITECT -hCG totale (7K78)
•
RESUME ET EXPLICATION DU TEST
La gonadotrophine chorionique humaine (hCG) est une
sialoglycoprotine d'un poids molculaire d'environ 46 000 daltons.1
L'hCG est initialement scrte par les cellules trophoblastiques du
placenta, peu de temps aprs l'implantation de l'ovule fcond dans la
paroi utrine.2,3 L'augmentation rapide des taux sriques d'hCG aprs
la conception constitue un excellent marqueur permettant un diagnostic
prcoce et le suivi de la grossesse.
Physiologiquement, l'hCG joue un rle dans le maintien du corps jaune,
permettant de ce fait la synthse de la progestrone et des estrognes
ncessaires l'endomtre. Dans le cas de grossesses sans
complications, le placenta assume la production de ces hormones. Le
taux srique d'hCG augmente jusqu' un pic, puis diminue et se stabilise.
L'hCG circule sous forme de molcule intacte dans le srum des femmes
saines qui prsentent une grossesse sans complications. Les sousunits sont rapidement clives puis limines par les reins.4
L'hormone placentaire hCG est proche de l'hormone lutinisante (LH),
de l'hormone folliculostimulante (FSH) et de l'hormone thyrostimulante
(TSH). Chacune de ces glycoprotines est constitue de deux sousunits diffrentes (alpha et bta) lies de faon non covalente et
comportant des chanes latrales d'hydrates de carbone. Les sousunits alpha de ces glycoprotines sont trs voisines. A l'inverse, les
sous-units bta leur confrent leurs spcificits biologique et
immunochimique.5,6 La composition des sous-units bta de l'hCG et
de la LH en acides amins prsente une trs importante homologie et
la diffrenciation immunochimique se fait par les rsidus d'acides amins
spcifiques de la sous-unit bta de l'hCG.7
La disponibilit de mthodes de dosage de l’hCG srique quantitatives
sensibles a montr que des mesures d'hCG taient utiles pour prvoir
les avortements spontans8,9 et pour aider au diagnostic des grossesses
extra-utrines8,10,11 ainsi que des grossesses multiples.8
•
1 ou 4 flacon(s) (6,6 ml / 27,0 ml) de
microparticules recouvertes d'anticorps anti--hCG (souris,
monoclonal) dans du tampon TRIS contenant des stabilisants de
protines (bovines). Conservateurs : agents antimicrobiens.
1 ou 4 flacon(s) (2,1 ml / 7,4 ml) de conjugu
d'anticorps anti--hCG (souris, monoclonal) marqu l'acridinium
dans du tampon MES contenant des stabilisants de protines
(bovines). Concentration minimale : 2,9 μg/ml. Conservateur : agent
antimicrobien.
Diluant de dosage
Diluant manuel multi-dosages ARCHITECT i (7D82-50)
•
1 flacon (100 ml) de diluant
manuel multi-dosages ARCHITECT i contenant une solution saline
tamponne au phosphate. Conservateur : agent antimicrobien.
Autres ractifs
Solution de practivation ARCHITECT i
•
Solution de practivation contenant
1,32 % (m/v) d'eau oxygne.
Solution d'activation ARCHITECT i
•
Solution d'activation contenant 0,35 N
d'hydroxyde de sodium.
Tampon de lavage ARCHITECT i
REMARQUE : La taille du flacon et le volume varient en fonction de la
commande.
•
Tampon de lavage contenant une solution saline
tamponne au phosphate. Conservateurs : agents antimicrobiens.
PRECAUTIONS ET RESTRICTIONS D'EMPLOI
•
•
•
PRINCIPES BIOLOGIQUES DE LA METHODE
ARCHITECT -hCG totale est un dosage immunologique en deux
tapes, utilisant la technologie de dosage immunologique
microparticulaire par chimiluminescence (CMIA) avec des protocoles
de dosage flexibles, appele Chemiflex, pour la dtermination de la
concentration en hCG (molcule entire et sous-units bta libres) dans
le srum et le plasma humains.
Dans un premier temps, l'chantillon et les microparticules
paramagntiques recouvertes d'anticorps anti--hCG sont mis en
prsence. L'hCG prsente dans l'chantillon se lie aux microparticules
recouvertes d'anticorps anti--hCG. Aprs lavage, le conjugu
d'anticorps anti--hCG marqu l'acridinium est ajout dans un
deuxime temps. Les solutions de practivation et d'activation sont
ensuite ajoutes au mlange ractionnel. La raction chimiluminescente
qui en rsulte est mesure en units relatives de lumire (URL). Il existe
une relation directe entre la quantit d'hCG prsente dans l'chantillon
et les URL dtectes par le systme optique ARCHITECT i.
Pour de plus amples informations concernant l'analyseur et la
technologie du dosage, se rfrer au Chapitre 3 du Manuel Technique
ARCHITECT.
Pour diagnostic in vitro
Suivre scrupuleusement les instructions de cette notice. La fiabilit
des rsultats du dosage ne peut pas tre garantie si ces instructions
ne sont pas strictement respectes.
Mesures de scurit
• ATTENTION : Ce produit ncessite la manipulation d’chantillons
humains. Il est recommand de considrer tous les produits d’origine
humaine comme s’ils taient potentiellement infectieux et de les
manipuler selon les rgles “OSHA Standard on Bloodborne
Pathogens“.12 Les produits contenant ou susceptibles de contenir des
agents infectieux doivent tre manipuls selon les rgles de bioscurit
de niveau 213 ou autres rgles de bioscurit en vigueur14,15.
• Pour de plus amples informations sur les mesures de scurit appliquer lors du fonctionnement de l’analyseur, se rfrer au
Chapitre 8 du Manuel Technique ARCHITECT.
Prcautions d'emploi
• Ne pas utiliser les kits de ractifs au-del de leur date d'expiration.
• Ne pas mlanger des ractifs provenant de kits diffrents.
• Avant de charger le kit de ractifs ARCHITECT -hCG totale dans
l'analyseur pour la premire fois, le flacon de microparticules doit
tre homognis afin de remettre en suspension les microparticules
qui se sont dposes pendant le transport. Pour de plus amples
informations sur l'homognisation des microparticules, se rfrer
au paragraphe Procdure du dosage de la partie PROCEDURE
de cette notice.
2
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Des septums DOIVENT tre utiliss afin d'empcher
l'vaporation et la contamination des ractifs et d'assurer leur
intgrit. La fiabilit des rsultats du dosage ne peut pas tre
garantie si les septums ne sont pas utiliss conformment aux
instructions de cette notice.
Afin d'viter toute contamination, porter des gants propres lors de
l'application d'un septum sur un flacon de ractif dbouch.
Une fois qu'un septum a t plac sur un flacon de ractif ouvert, ne
pas retourner le flacon afin d'viter toute fuite de ractif et de ne
pas fausser les rsultats du dosage.
Aprs un certain temps, il se peut que des liquides rsiduels schent
la surface du septum. Il s'agit de sels secs qui n'ont aucune
incidence sur la performance du dosage.
Pour de plus amples informations sur les prcautions d'emploi lors
du fonctionnement de l'analyseur, se rfrer au Chapitre 7 du Manuel
Technique ARCHITECT.
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* UI = Units Internationales (IU = International Units)
PRELEVEMENT ET PREPARATION DES ECHANTILLONS
POUR L'ANALYSE
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Conditions de conservation
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Le kit de ractifs ARCHITECT -hCG totale doit tre
conserv entre 2 et 8 °C et peut tre utilis immdiatement aprs sa
sortie du rfrigrateur (2 8 °C).
Les ractifs sont stables jusqu' leur date d'expiration s'ils sont
conservs et manipuls selon les indications du fabricant.
Le kit de ractifs ARCHITECT -hCG totale peut tre conserv bord de l'ARCHITECT i pendant 30 jours au maximum. Au-del de
ce dlai, le kit de ractifs doit tre jet. Pour de plus amples
informations sur le suivi du temps de conservation bord, se rfrer
au Chapitre 5 du Manuel Technique ARCHITECT.
Les ractifs peuvent tre conservs l'intrieur ou l'extrieur de
l'ARCHITECT i. Si les ractifs sont retirs de l'analyseur, les
conserver entre 2 et 8 °C (munis de septums et de bouchons de
remplacement) en position verticale. Pour les ractifs conservs l'extrieur de l'analyseur, il est recommand de les laisser dans leurs
portoirs et emballage d'origine afin de les maintenir dans une position
verticale. Si le flacon de microparticules (muni d'un septum) ne
reste pas dans une position verticale pendant sa conservation
au rfrigrateur l'extrieur de l'analyseur, le kit de ractifs
doit tre jet. Aprs avoir retir des ractifs de l'analyseur, il faut
initialiser une lecture du carrousel ractifs afin d'actualiser le temps
de stabilit des ractifs dans l'analyseur.
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Indications d’altration des ractifs
Un contrle dont la valeur se situe en dehors des limites spcifies
peut indiquer une altration des ractifs ou des erreurs de technique.
Les rsultats des chantillons analyss dans la mme srie peuvent ne
pas tre valides et ncessiter une ranalyse. Une recalibration du dosage
peut tre ncessaire. Pour de plus amples informations sur le
dpannage, se rfrer au Chapitre 10 du Manuel Technique
ARCHITECT.
•
FONCTIONNEMENT DE L'APPAREIL
•
•
Pour de plus amples informations sur l'impression des paramtres
de dosage, se rfrer au Chapitre 5 du Manuel Technique
ARCHITECT.
Pour de plus amples informations sur le fonctionnement de
l'analyseur, se rfrer au Manuel Technique ARCHITECT.
L'unit de rsultat par dfaut du dosage ARCHITECT -hCG totale
est la mUI/ml*. Pour l'enregistrement des rsultats, il est possible
de slectionner l'unit alternative, la UI/l, en rglant le paramtre de
dosage "Units de concentration rsultat" sur UI/l. Le facteur de
conversion utilis par le systme est de 1.
Le protocole de dosage de routine ARCHITECT -hCG totale
(dosage n° 651) doit tre install sur l'ARCHITECT i 2000 partir
du CD-ROM de dosages ARCHITECT i avant l'analyse. Il en est de
mme pour les protocoles de dosage de routine et/ou URGENT
ARCHITECT -hCG totale (respectivement dosage 651 et 030) sur
l'ARCHITECT i avec fonction de traitement d'chantillons
URGENTS. Pour de plus amples informations sur l'installation du
fichier de dosage, se rfrer au Chapitre 2 du Manuel Technique
ARCHITECT.
Le protocole de dosage de routine ARCHITECT -hCG totale (en
deux tapes 18-4) est disponible sur les analyseurs ARCHITECT i.
Le protocole de dosage URGENT ARCHITECT -hCG totale (en
deux tapes 4-4) est disponible sur l'ARCHITECT i avec fonction
de traitement d'chantillons URGENTS.
•
•
3
Le dosage ARCHITECT -hCG totale peut tre effectu sur du srum
humain (y compris le srum prlev sur des tubes sparateurs de
srum) ou du plasma prlev sur hparinate de lithium, hparinate
de sodium ou EDTA potassique. Aucun autre anticoagulant n'a t
valid pour une utilisation avec le dosage ARCHITECT -hCG totale.
Suivre les instructions du fabricant pour le traitement des tubes de
prlvement de srum ou de plasma.
L'ARCHITECT i n'est pas configur pour dtecter le type d'chantillon
utilis. Il revient par consquent l'utilisateur de vrifier les types
d'chantillons utiliss dans le dosage ARCHITECT -hCG totale.
Une centrifugation inadquate ou la prsence de fibrine ou de
particules en suspension dans l'chantillon peut entraner des
rsultats errons.
Abbott recommande d'utiliser du plasma pour analyser des
chantillons URGENTS. Le plasma ne ncessitant pas le temps de
coagulation requis pour le srum, la probabilit de prsence de fibrine
ou d'autres particules dans l'chantillon est rduite.
Manipuler les chantillons de patients avec prcaution afin d'viter
toute contamination croise. Il est recommand d'utiliser des pipettes
ou des embouts usage unique.
Pour obtenir des rsultats optimaux, vrifier l'absence de bulles dans
tous les chantillons. Si des bulles sont prsentes, les liminer l'aide d'un b
tonnet avant l'analyse. Utiliser un b
tonnet neuf pour
chaque chantillon afin d'viter toute contamination croise.
Pour obtenir des rsultats optimaux, les chantillons de srum et
de plasma ne doivent pas contenir de fibrine, ni de globules rouges
ou autres particules en suspension.
S'assurer que le caillot s'est compltement form dans les
chantillons de srum avant de les centrifuger. Certains chantillons,
en particulier ceux provenant de patients sous traitement
anticoagulant ou thrombolytique, peuvent prsenter des temps de
coagulation levs. Si l'chantillon est centrifug avant la formation
complte du caillot, la prsence de fibrine peut entraner des rsultats
errons.
Si le dosage est effectu plus de 24 heures aprs le prlvement,
sparer le srum ou le plasma du caillot, du sparateur de srum
ou des globules rouges. Les chantillons peuvent tre conservs
au maximum pendant 7 jours entre 2 et 8 °C avant d'tre analyss.
Si le dosage est effectu plus de 7 jours aprs le prlvement, les
chantillons devront tre congels une temprature infrieure ou
gale -10 °C. Les chantillons conservs congels une
temprature infrieure ou gale -10 °C pendant 12 mois n'ont pas
prsent de diffrence de performance.
Eviter les conglations et dconglations rptes. Les chantillons
doivent tre homogniss AVEC SOIN aprs dconglation, en
les passant au Vortex une vitesse FAIBLE ou en les retournant
dlicatement, puis centrifugs avant emploi, de faon liminer les
globules rouges ou les particules en suspension et obtenir des
rsultats cohrents.
Lorsque des chantillons sont expdis, ils doivent tre conditionns
et tiquets conformment la lgislation rgissant le transport des
chantillons cliniques et des substances infectieuses. Les
chantillons peuvent tre expdis rfrigrs dans des conditions
thermiques contrles ou bien congels (carboglace). Avant
l'expdition, il est recommand de sparer les chantillons du caillot,
du sparateur de srum ou des globules rouges.
•
PROCEDURE
Matriel fourni
• 7K78 Kit de ractifs ARCHITECT -hCG totale
•
Matriel ncessaire mais non fourni
• Analyseur ARCHITECT i
• CD-ROM de dosages ARCHITECT i
• 7K78-01 Calibrateurs ARCHITECT -hCG totale
• 7K78-10 Contrles ARCHITECT -hCG totale
• 7D82-50 Diluant manuel multi-dosages ARCHITECT i
•
•
ARCHITECT i
•
•
ARCHITECT i
•
ARCHITECT i
•
ARCHITECT i
•
ARCHITECT i
•
ARCHITECT i
•
ARCHITECT i
•
Pour de plus amples informations sur le matriel requis pour les
procdures de maintenance, se rfrer au Chapitre 9 du Manuel
Technique ARCHITECT.
Pipettes ou embouts de pipette (facultatif) pour la distribution des
volumes spcifis dans l'cran Demande de patient ou Demande
de contrle.
•
Procdure du dosage
• Avant de charger le kit de ractifs ARCHITECT -hCG totale sur
l'analyseur pour la premire fois, le flacon de microparticules doit
tre homognis afin de remettre en suspension les microparticules
qui se sont dposes pendant le transport :
• Retourner le flacon de microparticules 30 fois.
• Examiner le flacon pour s'assurer que les microparticules sont
remises en suspension. Si des microparticules restent encore
colles au flacon, continuer retourner ce dernier jusqu' ce
qu'elles soient compltement remises en suspension.
• Une fois les microparticules remises en suspension, retirer et jeter
le bouchon. Retirer un septum de la pochette en portant des gants
propres. Placer soigneusement le septum dans l'ouverture du
flacon.
• Si les microparticules ne sont pas remises en suspension,
NE PAS LES UTILISER. Contacter le Service Clients Abbott.
• Programmer les analyses.
• Charger le kit de ractifs ARCHITECT -hCG totale sur l'ARCHITECT i.
Vrifier que tous les ractifs requis sont prsents. S'assurer que
chaque flacon ractif est recouvert d'un septum.
• Le volume minimum requis dans le godet-chantillon est calcul
par le systme et imprim sur le rapport Liste des demandes. Ne
pas prlever plus de 10 rpliques partir du mme godet-chantillon.
Afin de minimiser les pertes par vaporation, vrifier que le volume
d'chantillon adquat est prsent dans le godet-chantillon avant
d'effectuer le dosage.
• Echantillon prioritaire : 75 μl pour le premier dosage -hCG totale
plus 25 μl pour chaque dosage -hCG totale supplmentaire
effectu sur le mme godet-chantillon
• Echantillon de routine maintenu jusqu' 3 heures dans l'analyseur :
150 μl pour le premier dosage -hCG totale plus 25 μl pour chaque
dosage -hCG totale supplmentaire effectu sur le mme godetchantillon
• Echantillon de routine maintenu plus de 3 heures dans l'analyseur :
un volume supplmentaire est requis. Pour de plus amples
informations sur l'vaporation et les volumes des chantillons, se
rfrer au Chapitre 5 du Manuel Technique ARCHITECT.
•
•
En cas d'utilisation de tubes primaires ou aliquots, utiliser la jauge
chantillon afin de s'assurer que le volume d'chantillon de patient
est suffisant.
Pour obtenir les volumes requis des calibrateurs et des contrles
ARCHITECT -hCG totale, tenir les flacons la verticale et distribuer
4 gouttes de chacun des calibrateurs ou 3 gouttes de chacun des
contrles dans les godets-chantillons respectifs.
Charger les chantillons
• Pour de plus amples informations sur le chargement des
chantillons, se rfrer au Chapitre 5 du Manuel Technique
ARCHITECT.
Appuyer sur la touche LANCER. L'ARCHITECT i effectue les
oprations suivantes :
• Dplace l'chantillon jusqu'au point d'aspiration
• Charge une cupule ractionnelle (CR) dans la couronne
ractionnelle
• Aspire et distribue l'chantillon dans la CR
• Dplace la CR d'une position et distribue les microparticules dans
la CR
• Homognise, incube et lave le mlange ractionnel
• Ajoute le conjugu dans la CR
• Homognise, incube et lave le mlange ractionnel
• Ajoute les solutions de practivation et d'activation
• Mesure l'mission chimiluminescente pour dtecter la prsence
et la quantit d'hCG dans l'chantillon.
• Evacue le contenu de la CR dans la poubelle pour dchets liquides
et dcharge la CR dans la poubelle pour dchets solides
• Calcule le rsultat
Pour de plus amples informations sur les demandes d'analyse des
chantillons de patients, des calibrateurs et des contrles, ainsi que
sur les procdures gnrales de fonctionnement, se rfrer au
Chapitre 5 du Manuel Technique ARCHITECT.
Pour obtenir une performance optimale, il est important de suivre
les procdures de maintenance de routine dcrites au Chapitre 9
du Manuel Technique ARCHITECT. Si votre laboratoire requiert une
maintenance plus frquente, se conformer ces exigences.
Procdures de dilution des chantillons
Les chantillons dont la concentration en hCG totale est suprieure 15 000,00 mUI/ml sont annots “ >15,000.00" et peuvent tre dilus l'aide du protocole de dilution automatique ou de la procdure de dilution
manuelle.
• Si l'on utilise le protocole de dilution automatique, le systme effectue
une dilution de l'chantillon au 1/15me, puis calcule
automatiquement la concentration de l'chantillon dilu et enregistre
le rsultat.
• Les dilutions manuelles doivent tre effectues de la manire
suivante :
• La dilution recommande pour le dosage -hCG totale est de
1/15me. Des dilutions suprieures 1/75me ne sont pas
recommandes.
• Pour une dilution au 1/15me, ajouter 20 μl d'chantillon de patient
280 μl de diluant manuel multi-dosages ARCHITECT i
(7D82-50).
• Saisir le facteur de dilution dans l'cran Demande de patient ou
Demande de contrle. Le systme utilisera ce facteur de dilution
afin de calculer automatiquement la concentration de l'chantillon
avant la dilution. Cette concentration constituera le rsultat
enregistr. Le rsultat (avant l'application du facteur de dilution)
doit tre suprieur 467,00 mUI/ml.
• Si le facteur de dilution n'est pas saisi, le rsultat rendu sera celui
de l'chantillon dilu. Ce rsultat (avant l'application du facteur
de dilution) doit tre suprieur 467,00 mUI/ml.
• REMARQUE : Un rsultat infrieur 7 000,00 mUI/ml (protocole de
dilution automatique au 1/15me) imprim ou affich l'cran indique
que l'chantillon doit tre ranalys avec une dilution infrieure ou
sans dilution. Le rsultat et l'interprtation ne devront pas tre
enregistrs.
• Pour de plus amples informations sur les demandes de dilution, se
rfrer au Chapitre 5 du Manuel Technique ARCHITECT.
4
Interprtation des rsultats
Pour ce qui est de l'interprtation qualitative des rsultats du dosage
ARCHITECT -hCG totale, les chantillons ayant des concentrations
en hCG infrieures ou gales 5,00 mUI/ml seront signals comme
"NEGATIF" dans la rubrique "Interprtation" sur l'cran des rsultats
d'analyses ou sur la bande des rsultats. Les chantillons dont la
concentration en hCG est suprieure ou gale 25,00 mUI/ml seront
signals comme "POSITIF". Pour les chantillons dont la concentration
en hCG est suprieure 5,00 mUI/ml et infrieure 25,00 mUI/ml,
seule la concentration sera enregistre. Aucune interprtation ne sera
indique pour ces rsultats.
Calibration
• Pour effectuer une calibration du dosage ARCHITECT -hCG totale,
analyser les calibrateurs A, B, C, D, E et F en double. Un chantillon
de chacun des niveaux de contrles -hCG totale doit tre analys
afin de pouvoir valuer la calibration du dosage. S'assurer que les
valeurs des contrles du dosage se situent dans les limites de
concentration spcifies dans la notice des contrles. Les
calibrateurs doivent tre chargs en position prioritaire.
• Limites des calibrateurs : 0,00 15 000,00 mUI/ml.
• Les protocoles de dosage de ROUTINE et URGENTS doivent tre
calibrs sparment mais ne requirent l'utilisation que d'un seul kit
de ractifs.
• Lorsque la calibration du dosage ARCHITECT -hCG totale a t
accepte et mmorise, tous les chantillons suivants peuvent tre
analyss sans effectuer de nouvelle calibration, sauf si :
• un kit de ractifs portant un nouveau numro de lot est utilis
• les valeurs des contrles se situent en dehors des limites
spcifies
• Pour de plus amples informations sur la procdure de calibration
d'un dosage, se rfrer au Chapitre 6 du Manuel Technique
ARCHITECT.
LIMITES DE LA METHODE
•
•
PROCEDURES DU CONTROLE DE QUALITE
•
Le contrle de qualit minimum recommand pour le dosage
ARCHITECT -hCG totale consiste analyser un chantillon de chaque
niveau de contrles une fois toutes les 24 heures, chaque jour
d'utilisation. Si les procdures du contrle de qualit de votre laboratoire
exigent une utilisation plus frquente des contrles pour vrifier les
rsultats d'analyse, se conformer ces exigences. S'assurer que les
valeurs des contrles du dosage se situent dans les limites de
concentration spcifies dans la notice des contrles.
Comme la composition de l'analyte et/ou des matrices peut varier, il se
peut que les contrles de qualit externes et les chantillons utiliss
pour les tudes de performance ne donnent pas des rsultats identiques
pour tous les dosages d'hCG. Les contrles de qualit non-Abbott et
les panels de performance peuvent contenir des concentrations leves
de sous-units bta libres de l'hCG. Les contrles de qualit non-Abbott
et les panels de performance peuvent gnrer des rsultats diffrents
lorsque l'on compare un dosage de la molcule d'hCG entire un
dosage mesurant l'hCG entire et les fractions libres. Chaque
laboratoire doit dterminer pour chaque contrle s'il est appropri pour
des dosages immunologiques spcifiques et le valider avant de l'utiliser.
•
•
•
Vrification des performances du dosage
Pour de plus amples informations sur les protocoles de vrification des
performances du dosage mentionnes dans la notice, se rfrer l'Annexe B du Manuel Technique ARCHITECT. Le dosage ARCHITECT
-hCG totale appartient au groupe 1.
•
RESULTATS
Le dosage ARCHITECT -hCG totale utilise une mthode de traitement
des donnes par l'ajustement de la courbe logistique 4 paramtres
(4PLC, pondration en Y) pour crer une courbe de calibration.
•
Autres units de rsultat
• L'unit de rsultat par dfaut du dosage ARCHITECT -hCG totale
est la mUI/ml. En cas de slection de l'unit alternative UI/l, le facteur
de conversion utilis par le systme est de 1.
• Formule de conversion : (Concentration en mUI/ml) x (1) = UI/l
Annotations
• La rubrique "Annotations" peut contenir des informations sur certains
rsultats. Une description des annotations qui peuvent apparatre
dans cette rubrique est fournie au Chapitre 5 du Manuel Technique
ARCHITECT.
•
5
Ce dosage est capable de dtecter la molcule entire (intacte)
d'hCG ainsi que les sous-units -hCG libres.
En vue d'tablir un diagnostic, les rsultats du dosage de l'hCG
doivent toujours tre utiliss en association avec d'autres donnes,
telles que les antcdents mdicaux du patient, les symptmes, les
rsultats d'autres examens, les donnes cliniques, etc. Les mesures
d'hCG seules ne permettent pas de distinguer une grossesse extrautrine d'une grossesse normale.10,11 Les rsultats de ce dosage
ou de tout autre kit de diagnostic devront tre utiliss et interprts
uniquement dans le contexte du tableau clinique gnral.
Lorsque les taux d'hCG ne correspondent pas aux donnes cliniques,
les rsultats doivent tre confirms par une autre mthode de dosage
de l'hCG, celle-ci pouvant tre la recherche qualitative dans l'urine.29
L'absence d'hCG urinaire peut indiquer un rsultat srique
faussement lev. Les rsultats peuvent aussi tre confirms par
une srie de dilutions de l'chantillon. En rgle gnrale (mais pas
toujours), les chantillons contenant des substances interfrentes
fournissent des rsultats non linaires une fois dilus.
Le dosage ARCHITECT -hCG totale a t valid uniquement pour
le diagnostic prcoce d'une grossesse. Il n'a pas t valid pour les
autres usages tels que le dpistage de marqueurs tumoraux, le suivi
de marqueurs tumoraux, etc... et ne doit pas tre utilis d'autres
fins.
Occasionnellement, les taux d'hCG peuvent tre constamment
levs en raison, entre autres, des facteurs suivants :20,21,28,29,31,32
- anticorps htrophiles
- liaisons protiques non spcifiques
- substances similaires l’hCG
- noplasmes trophoblastiques ou non trophoblastiques
Comme dans toute raction immunochimique, des interfrences
inconnues provenant de mdicaments ou de substances endognes
peuvent avoir une incidence sur les rsultats.
Des taux levs d'hCG ont t associs des tats pathologiques
(par exemple des noplasmes trophoblastiques et non
trophoblastiques)16,17 et les rsultats de ce dosage ne doivent pas
tre utiliss dans le diagnostic de ces tats pathologiques. Des cas
de patientes ayant subi inutilement un traitement mdical ou
chirurgical (par exemple une chimiothrapie ou une hystrectomie)
en raison de l'utilisation de dosages d'hCG pour le diagnostic d'tats
pathologiques ont t dcrits.
Des substances interfrentes (telles que les anticorps htrophiles,
les protines non spcifiques ou les substances similaires l’hCG)
peuvent provoquer des rsultats faussement abaisss ou levs.
Ces substances interfrentes peuvent tre la cause de rsultats
errons dans tout le domaine de mesure du dosage, et pas
seulement des concentrations faibles, et peuvent faire croire la
prsence d'hCG alors qu'il n'y en a pas.
La dtection de trs faibles concentrations d'hCG n'exclut pas la
possibilit d'une grossesse.21 De faibles quantits d'hCG peuvent
apparatre chez des femmes non enceintes et apparemment en
bonne sant.26,27 Les valeurs d'hCG doublant toutes les 48 heures
environ au cours d'une grossesse normale,21 les patientes prsentant
des taux d'hCG trs faibles doivent subir un nouveau prlvement
au bout de 48 heures pour une ranalyse.
•
•
•
•
Les chantillons de femmes postmnopauses peuvent fournir des
rsultats faiblement positifs en raison de faibles concentrations en
hCG sans relation avec la grossesse. Si l'on obtient un rsultat
faiblement positif, les bonnes pratiques de laboratoire recommandent
de reprlever la patiente aprs 48 heures et de ranalyser
l'chantillon ou bien d'effectuer l'analyse par une autre mthode de
dosage de l'hCG.
Comme ce dosage prsente un degr de sensibilit lev, les
chantillons trouvs positifs les premiers jours aprs la conception
peuvent tre ultrieurement trouvs ngatifs en raison de l'arrt
naturel de la grossesse. La grossesse s'interrompt naturellement
dans 22 % des grossesses non reconnues cliniquement et dans
31 % de toutes les grossesses.30 Les bonnes pratiques de laboratoire
recommandent de reprlever la patiente aprs 48 heures
supplmentaires et de ranalyser l'chantillon si les rsultats taient
faiblement positifs.
Les chantillons provenant de patients auxquels ont t administres
des prparations d'anticorps monoclonaux de souris des fins
diagnostiques ou thrapeutiques peuvent contenir des anticorps
humains anti-souris (HAMA). De tels chantillons peuvent donner
des rsultats faussement levs ou abaisss lorsqu'ils sont analyss
avec des kits de dosage utilisant des anticorps monoclonaux de
souris.18,19 Ces chantillons ne doivent pas tre analyss par le
dosage ABBOTT ARCHITECT -hCG totale.
Les anticorps htrophiles prsents dans le srum humain peuvent
ragir avec les immunoglobulines des ractifs, interfrant ainsi avec
les dosages immunologiques in vitro. 20,21,32 Les patients
rgulirement en contact avec des animaux ou des produits
contenant du srum d'origine animale peuvent tre sujets cette
interfrence et fournir de ce fait des valeurs anormales. Pour tablir
un diagnostic, de plus amples informations peuvent tre ncessaires.
Echant.
du
panel
1 10
11 15
16 22
23 40
n
Min
50
50
50
50
<1,20
16 995,65
6 860,23
1 583,40
Max
>225 000,00
>225 000,00
>225 000,00
65 911,38
201,64
22 536,49
8 006,62
1 599,80
Intra-srie
E.T. CV (%)
Total
E.T CV (%)
1
1
1
1
1
1
2
2
1
2
1
2
80
80
80
80
21,07
24,97
25,22
24,75
0,984
0,880
1,027
0,819
4,7
3,5
4,1
3,3
1,027
1,115
1,134
1,096
4,9
4,5
4,5
4,4
2
2
2
2
1
1
2
2
1
2
1
2
80
80
80
80
735,93
772,66
750,99
754,87
14,917
12,161
13,812
11,762
2,0
1,6
1,8
1,6
18,144
14,671
16,065
12,592
2,5
1,9
2,1
1,7
3
3
3
3
1
1
2
2
1
2
1
2
80
80
80
80
5 063,95
5 116,40
4 976,44
5 052,13
84,801
72,066
98,439
59,656
1,7
1,4
2,0
1,2
107,073
86,052
109,379
79,602
2,1
1,7
2,2
1,6
Rcupration
Le dosage ARCHITECT -hCG totale a t conu de manire fournir
une rcupration moyenne de 100 ± 10 % lorsque les chantillons analyser sont surchargs avec des concentrations connues d'hCG. Une
concentration d'hCG connue (1 000,45 mUI/ml) a t ajoute 8 fractions aliquotes de srum humain. La concentration d'hCG a t
dtermine par le dosage ARCHITECT -hCG totale et la rcupration
a t calcule et exprime en pourcentage. Le pourcentage de
rcupration du dosage ARCHITECT -hCG totale tait compris entre
104,1 % et 108,8 %, avec une moyenne de 106,7 %. Il s'agit de donnes
indicatives ; les rsultats obtenus peuvent tre diffrents d'un laboratoire
l'autre.
Vrification de la dilution
L’exactitude du protocole de dilution automatique ARCHITECT -hCG
totale a t value l'aide d'chantillons de srum humain. Les rsultats
des chantillons analyss en double en utilisant le protocole de dilution
automatique au 1/15me ont t compars aux rsultats des mmes
chantillons dilus au 1/15me avec le diluant manuel multi-dosages
ARCHITECT i. La performance a t value sous forme de
pourcentage de rcupration et a t calcule d'aprs l'quation
suivante :*
L'hormone hCG tant normalement synthtise et scrte par les
cellules du placenta et de son prcurseur, les taux de cette hormone
chez les femmes saines et non enceintes sont faibles, voire non
dcelables.16 Les concentrations en hCG mesures dans le srum de
femmes non enceintes indiques dans la littrature sont infrieures 5 mUI/ml.22 La concentration en hCG dans le srum maternel augmente
rapidement en dbut de grossesse. Des taux d'hCG compris entre 5 et
25 mUI/ml peuvent indiquer un dbut de grossesse.2,23 Les taux d'hCG
atteignent en gnral un maximum au cours du premier trimestre, pour
diminuer lentement pendant le reste de la grossesse.
Des chantillons provenant de 200 femmes enceintes ont t classs
en 4 groupes, bass sur le nombre de semaines d'amnorrhe (1 10,
11 15, 16 22, 23 40), puis analyss avec le dosage ARCHITECT
-hCG totale. Les rsultats sont rsums dans le tableau ci-aprs.
Nombre de
semaines
d'amnorrhe
n
Conc.
moyenne
(mUI/ml)
* Donnes indicatives ; les rsultats obtenus peuvent tre diffrents d'un
laboratoire l'autre.
RESULTATS ATTENDUS
Limites
(mUI/ml)
2,5e percentile
Lot
de
Apparactifs reil
Conc. en hCG aprs dilution automatique (mUI/ml)
% de rcupration = ––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––– x 100
Conc. en hCG aprs dilution manuelle (mUI/ml)
Echantillon
A
B
C
D
E
97,5e percentile
Conc. en hCG aprs Conc. en hCG aprs
dilution manuelle dilution automatique
(mUI/ml)
(mUI/ml)
98 488,05
27 534,10
47 730,65
13 413,25
10 391,55
102 152,34
27 199,45
46 994,66
13 438,39
9 463,34
% de
rcupration
103,7
98,8
98,5
100,2
91,1
* Donnes indicatives ; les rsultats obtenus peuvent tre diffrents d'un
laboratoire l'autre.
>225 000,00
>225 000,00
50 238,60
49 412,65
Sensibilit analytique
Le dosage ARCHITECT -hCG totale a t conu de manire fournir
une sensibilit analytique < 1,2 mUI/ml. La sensibilit analytique est
dfinie comme tant gale la concentration 2 carts-types par rapport
la valeur URL moyenne du calibrateur A ARCHITECT -hCG totale
(0,00 mUI/ml), ce qui reprsente la plus faible concentration en hCG
mesurable pouvant tre distingue de zro.
Il est recommand chaque laboratoire d'tablir ses propres valeurs
attendues.
CARACTERISTIQUES SPECIFIQUES
Reproductibilit
Le dosage ARCHITECT -hCG totale a t conu de manire obtenir
une reproductibilit <10 % (CV total). Une tude base sur le protocole
EP5-T2 24 du Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI,
anciennement NCCLS) a t effectue pour le dosage ARCHITECT
-hCG totale. Un panel constitu de 3 chantillons base de srum
humain trait a t analys en double, en utilisant 2 lots de ractifs, 2
fois par jour, pendant 20 jours. Les donnes de cette tude sont
rsumes dans le tableau suivant.*
Spcificit
Le dosage ARCHITECT -hCG totale a t conu de manire fournir
une spcificit analytique moyenne < 10 % de ractivit croise avec la
FSH, la LH et la TSH. Des fractions aliquotes de srum humain contenant
de l'hCG ont t surcharges avec 150 mUI/ml de FSH, 250 mUI/ml de
LH et 100 μUI/ml de TSH, puis analyses pour dterminer leur
concentration en hCG. La ractivit croise a t calcule sous forme
de pourcentage d'interfrence et elle tait infrieure 10 % pour chacune
des substances testes.
6
9.
Contamination
La contamination d’un chantillon contenant 0 mUI d’hCG/ml par un
chantillon voisin contenant 1 000 000 mUI d’hCG/ml tait infrieure 7,5 mUI d’hCG/ml.
REMARQUE : Certains chantillons peuvent prsenter des
concentrations leves en raison de la formation de protines sur
l'aiguille du pipeteur. Pour de plus amples informations sur le dpannage,
se rfrer au Chapitre 10 du Manuel Technique ARCHITECT.
10.
11.
12.
Interfrence
L'interfrence potentielle moyenne dans le dosage ARCHITECT -hCG
totale de l'hmoglobine, de la bilirubine, des triglycrides et des protines
aux concentrations indiques ci-dessous est < 10 %.
• Hmoglobine
- < 10 % 500 mg/dl
• Bilirubine
- < 10 % 20 mg/dl
• Triglycrides
- < 10 % 3 000 mg/dl
• Protines
- < 10 % 2 g/dl et 12 g/dl
13.
14.
15.
Prcision par corrlation
Le dosage ARCHITECT -hCG totale a t conu de manire fournir
une pente de 1,0 +/- 0,15 et un coefficient de corrlation > 0,95 pour la
plage de mesure comprise entre 0 et 15 000 mUI/ml lorsqu'il est compar
au dosage AxSYM -hCG totale.
Une tude a t ralise sur des chantillons analyss par les dosages
ARCHITECT -hCG totale et AxSYM -hCG totale. Les donnes de
cette tude rsumes dans le tableau* ci-aprs ont t analyses l'aide des mthodes de rgression des moindres carrs et de PassingBablok.25
16.
17.
18.
19.
Abbott ARCHITECT -hCG totale vs.
Abbott AxSYM -hCG totale
Limites
AxSYM
(mUI/ml)
20.
Mthode
Nombre
d'chant.
Ordonne
l'origine Pente
Coef. de
corrlation
Rgression linaire
par la mthode des
moindre carrs
93
192
471
2 1 0001
2 15 0002
2 200 0003
3,40
58,34
- 672,30
1,00
0,89
0,82
0,945
0,980
0,986
21.
22.
23.
Rgression linaire
de Passing-Bablok**
93
192
471
2 1 0001
2 15 0002
2 200 0003
0,48
1,88
19,84
1,08
0,94
0,80
0,945
0,980
0,986
24.
Lors de cette valuation, les chantillons sriques analyss par le
dosage ARCHITECT -hCG totale ont donn des rsultats compris
entre : 1 1,99 et 1 262,17 mUI/ml, 2 1,99 et 14 934,93 mUI/ml, 3 1,99 et
180 620,00 mUI/ml.
25.
* Donnes indicatives ; des variables telles que les diffrences au niveau
de la taille d'chantillonnage et des populations d'chantillons peuvent
affecter la corrlation du dosage ; c'est pourquoi les rsultats obtenus
peuvent tre diffrents d'un laboratoire l'autre.
** Mthode de rgression linaire sans hypothses particulires concernant
la distribution des chantillons et des erreurs de mesure.25
26.
27.
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Assay Performance, and Clinical Application; Approved Guideline
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ARCHITECT, AxSYM et Chemiflex sont des marques commerciales
d’Abbott Laboratories dans plusieurs pays.
Abbott Ireland
Diagnostics Division
Lisnamuck, Longford
Co. Longford
Ireland
+353-43-3331000
Distribu par Abbott Laboratories
Abbott Park, IL 60064 USA
et
ABBOTT 65205 Wiesbaden, Germany
Juin 2010
© 2006, 2010 Abbott Laboratories
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