Résumés des présentations orales
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Résumés des présentations orales
Table des matières MOT DE BIENVENUE ..................................................................................................................................... 3 LISTE DES PRIX ET PRÉSENTATIONS ............................................................................................................. iv PRIX D'EXCELLENCE POUR LES PRÉSENTATIONS ORALES ........................................................................ iv PRIX D'EXCELLENCE POUR LES PRÉSENTATIONS PAR AFFICHE ................................................................ iv INFORMATIONS GÉNÉRALES ......................................................................................................................... v Résumés des présentations par affiche ........................................................................................................ 9 Séance 1 .................................................................................................................................................... 9 Résumés des présentations par affiche ...................................................................................................... 33 Séance 2 .................................................................................................................................................. 33 Résumés des présentations orales ............................................................................................................. 51 INDEX .......................................................................................................................................................... 61 Le comité organisateur MOT DE BIENVENUE Il nous fait plaisir de vous accueillir à la 30e édition du congrès de la recherche des étudiants du cycle supérieur et postdoctorants en recherche du CHU Sainte-Justine.Cet évènement est organisé d’abord et avant tout pour célébrer votre travail et vos accomplissements année après année, pour renforcer la vie communautaire au centre de recherche et pour stimuler les discussions et les collaborations au sein de notre institution. Afin de célébrer la fin du 40e anniversaire du Centre de recherche du CHU Sainte-Justine, le congrès des étudiants est cette année jumelé à la retraite scientifique du centre de recherche afin de permettre au plus grand nombre possible de participants d’être présents aux deux activités et ainsi d’enrichir les discussions qui auront lieu ces deux prochains jours par une multiplicité des points de vue. Cette grande fête de la recherche à Sainte-Justine a aussi comme objectif d’ouvrir les portes entre les différents groupes et axes de recherche et de présenter les nombreuses plateformes et services disponibles au personnel de recherche. Nous vous invitons donc à être curieux, ouverts et engagés ces prochains jours afin d’enrichir à la fois votre expérience de recherche et la communauté scientifique de votre institution. Par ailleurs, nous souhaitons remercier les commanditaires qui ont rendu possible cette journée grâce à leur généreuse contribution. Il est possible d'aller visiter leurs représentants au cours de la journée qui seront présents durant les pauses et les séances de présentations par affiche au hall de la salle Everest pour échanger avec vous des innovations, produits et services dans le domaine qui pourraient vous intéresser. Nous remercions également les réseaux de recherche qui ont généreusement octroyé des prix d'excellence aux présentations. Évidemment, l'organisation de cette journée ne serait possible sans l'apport de plusieurs personnes: Madame Sandy Lalonde, responsable des affaires académiques, qui comme toujours nous a offert son temps et son expérience pour l’organisation de cette journée, en plus de faire le pont entre le comité organisateur et la direction du Centre de recherche; Madame Ekat Kritikou pour son implication tant dans l’organisation de la journée de la recherche que dans celle de la retraite scientifique du centre de recherche afin d’offrir aux participants un programme riche, engageant et à la mesure des attentes de chaque groupe participant; Madame Dominika Kozubska, assistante administrative au bureau du directeur de la recherche, qui nous a offert sa coopération et les ressources nécessaires pour l'organisation de cette journée et sa réussite; Les membres du comité organisateur de l’association des étudiants du CHU Sainte Justine: Monsieur Gaël Moquin-Beaudry (Vice-président congrès), madame Christelle Khadra (Vice-présidente congrès), monsieur Nicolas Montpas (Vice-président des finances), madame Valérie Orlando (Présidente de l'association étudiante); Dr Alain Moreau, directeur de la recherche, qui a donné son appui à l’organisation de la journée et a permis l’attribution des prix offerts au nom du Centre de recherche du CHU Sainte-Justine; Madame Lilianne Galant, madame Maude Hoffmann-Bélisle et madame Marise Daigle pour l’édition du programme et la production du matériel promotionnel pour l’évènement. Nous tenons également à remercier tous les membres de jury qui ont gracieusement accepté de donner de leur temps afin d’assurer le bon déroulement et le succès de ce congrès. Sans vous, cette journée ne serait pas possible. Bon congrès à tous, Le comité organisateur LISTE DES PRIX ET PRÉSENTATIONS PRIX D'EXCELLENCE POUR LES PRÉSENTATIONS ORALES Meilleure présentation orale Prix FRQ-S 1000$ Prix RMGA 500$ Meilleure présentation à la maîtrise 250$ Meilleure présentation au doctorat et postdoctorat 2 x 250$ PRIX D'EXCELLENCE POUR LES PRÉSENTATIONS PAR AFFICHE Prix RMGA 500$ Prix CMDO 500$ Prix ThéCell 125$ Séance 1- Étudiants au doctorat Meilleure présentation de chaque groupe 8 x 250$ Séance 2- Étudiants à la maîtrise, post-doctorat, stagiaires, personnel de laboratoire et recherche clinique Meilleure présentation de chaque groupe 6 x 250$ Prix passeport commanditaires TOTAL DES PRIX ATTRIBUÉS LORS DU CONGRÈS iv 6875$ INFORMATIONS GÉNÉRALES ACCUEIL DES PARTICIPANTS (8H00 À8H30) Hall du Manoir Saint-Sauveur. Il est tôt, mais ça ne vous empêchera pas de débuter la journée en beauté ! Café ou jus en main, récupérez vos cocardes de participant, passeport participatif, billet pour le lunch et programme scientifique de la journée. Découvrez à quelle heure et sur quel panneau d’affichage vous devrez installer (et par la suite retirer) votre affiche. Vous pourrez également en apprendre plus sur nos généreux commanditaires. Nous vous encourageons fortement à aller les visiter lors des séances de présentation par affiche. Un prix de participation sera offert par tirage au sort parmi tous les passeports reçus. À la fin de la journée, ayez une petite pensée environnementale et remettez votre cocarde à un membre du comité organisateur du congrès, afin qu’elle puisse être réutilisée lors d’un autre événement. SÉANCES DE PRÉSENTATIONS PAR AFFICHE Le matériel nécessaire à l’installation de vos affiches sera disponible dans le Hall de la Salle Everest Chaque participant aura droit à une période de cinq minutes pour présenter son projet devant le jury, suivie de trois minutes de questions. Séance 1 – Étudiants au doctorat 10h05 à 10h30 : Installation des affiches 11h10 à 12h15 : Séance de présentation par affiche avec jury 12h15: Retrait des affiches Séance 2 – Étudiants à la maîtrise et post-doctorat, personnels de recherche, stagiaires et infirmières de recherche 12h15 à 13h15 : Installation des affiches 15h50 à 17h00 : Séance de présentation par affiche avec jury 17h00 : Retrait des affiches Un prix sera remis au participant ayant la meilleure présentation de chaque groupe. Grâce à la générosité du Réseau de médecine génétique appliquée du FRQS (RMGA), du Réseau de recherche en santé cardiométabolique, diabète et obésité (CMDO) du Réseau provincial de recherche en adaptation-réadaptation (REPAR) et du Réseau de thérapie cellulaire et tissulaire du FRQS (ThéCell), des prix seront également décernés parmi les meilleures présentations dans ces domaines de recherche. v SÉANCES DE PRÉSENTATIONS ORALES Salle Everest 13h15 à 15h50 : Voir horaire détaillé des présentations dans le programme Chaque participant aura droit à une période de huit minutes pour présenter ses résultats devant jury, suivie de deux minutes de questions. Les présentations PowerPoint devront être remises au plus tard lundi, le 25 mai à Sandy Lalonde, bureau A-727. L’horaire des présentations orales est à titre indicatif seulement. Il se pourrait que vous soyez appelé à présenter plus tôt ou plus tard que le temps indiqué. Veuillez être prêt à toute éventualité lors de votre séance de présentation. Chaque participant dispose d’une période de dix minutes pour présenter ses résultats devant jury, suivi de trois minutes de questions. Le prix du FRQ-S sera remis à la meilleure présentation orale, tous groupes confondus. Un prix sera remis à la meilleure présentation de chaque groupe. Un prix sera remis au participant ayant la meilleure présentation de chaque groupe. Grâce à la générosité du Réseau de médecine génétique appliquée du FRQS (RMGA), un prix sera également décerné parmi les meilleures présentations dans ce domaine de recherche. vi Page commanditaires partenaires 2015 (1/2) vii Page commanditaires partenaires 2015(2/2) viii Résumés des présentations par affiche Séance 1 Doctorat 11 h 10 à 12 h 15 9 # 1. Surexpression de l'enzyme HGSNAT dans les cellules HEK293 par transduction avec un vecteur lentiviral Camila de Britto Pará de Aragão1, Anne Fougerat1, Jeffrey A. Medin2, Alexey V. Pshezhetsky1 1Centre de Recherche du CHU Sainte-Justine, Montréal 2University Health Network, Toronto La mucopolysaccharidose de type IIIC (MPS IIIC) est une maladie autosomale récessive de surchage lysosomale causée par la déficience en une enzyme, l’héparane sulfate acetyl-CoA : α-glucosaminide N-acetyltransferase (HGSNAT), et conduisant à une accumulation d'héparanes sulfates. Les manifestations cliniques de la maladie apparaissent tôt dans l'enfance et se traduisent par des troubles neurologiques sévères et par des signes systémiques aboutissant au décès avant l’âge adulte. Notre objectif consiste à déterminer si l'utilisation d'un lentivirus (LV) permettant le transfert du gène HGSNAT dans des cellules souches hématopoïétiques pourrait devenir une option thérapeutique pour les patients atteints de MPSIIIC. Nous avons généré un LV contenant l'ADNc codant pour la protéine HGSNAT humaine et possédant un tag GFP et avons démontré que le LV peut être utilisé pour surexprimer l'enzyme HGSNAT dans la lignée cellulaire HEK293. Les cellules HEK293 ont été transduites avec le LV contenant HGSNAT-GFP. Les cellules exprimant la GFP ont été triées par cytométrie en flux et l'activité HGSNAT a été mesurée une fois par semaine pendant 30 jours. Les résultats montrent que le taux de cellules exprimant la GFP est de 84.1% 8 jours après la transduction avec le LV/HGSNAT-GFP. Après 10 jours, l'activité HGSNAT des cellules transduites est augmentée de 99 fois en comparaison des cellules contrôles. L'activité HGSNAT dans les cellules triées GFP+ est augmentée de 130 fois et reste stable jusqu'à 30 jours après la transduction. Par immunofluorescence, nous avons observé que la protéine HGSNAT-GFP co-localise avec le marqueur des lysosomes suggérant que l'enzyme est correctement ciblée aux lysosomes. En conclusion, le vecteur lentiviral contenant l'ADNc d'HGSNAT est capable d'augmenter l'expression de l'enzyme HGSNAT dans les cellules HEK293 et peut être testé pour sa capacité à restaurer l'expression d'HGSNAT dans les cellules hématopoïétiques du modèle de souris MPS IIIC. # 2. Régulation du gène de la hyaluronidase HYAL-1 par le récepteur de l’estrogène ERα dans le cancer de l’ovaire et du sein Lydia Edjekouane1,2, Samira Benhadjeba1,2, Euridice Carmona3, André Tremblay1,2,4 1Département de Biochimie et Médecine Moléculaire, Faculté de Médecine, Université de Montréal de recherche du CHU Sainte-Justine 3Centre de recherche du CHUM de l’Hôpital Notre-Dame, Université de Montréal 4Département d'obstétrique-gynécologie, Faculté de Médecine, Université de Montréal 2Centre Introduction : La hyaluronidase HYAL-1 est une enzyme lysosomale connue pour son rôle dans la dégradation de l’acide hyaluronique, un glycosaminoglycan de la matrice extracellulaire. L’expression de HYAL-1 est élevée dans de nombreux types de cancers, où HYAL-1 est impliqué dans la croissance tumorale et les métastases. Notre laboratoire a aussi démontré une expression élevée de HYAL-1 dans les tumeurs du cancer épithélial de l’ovaire (CEO) de type mucineux et à cellules claires, augmentation qui est inversement corrélée à celle du récepteur de l’estrogène alpha (ERa), suggérant une régulation croisée. Malgré le fait que le rôle de HYAL-1 et de ERa soit bien établi dans les cancers gynécologiques, le mécanisme de cette régulation est tout à fait inconnu. L’objectif de ce projet est de caractériser le mécanisme par lequel ERa régule l’expression de HYAL-1. Méthodologie et Résultats : L’expression ectopique de ERa dans les cellules cancéreuses ovariennes TOV21G (ERa- négatives) de même que le traitement des cellules cancéreuses du sein MCF-7 (ERa-positives) avec l’estrogène a permis de diminuer l’expression de HYAL-1, tel que déterminé par qPCR. Ces résultats identifient HYAL-1 comme gène cible de ERa. La détermination des sites d’interaction du promoteur de HYAL-1 avec ER a été évaluée par essai d’immunoprécipitation de la chromatine (ChIP). Nous avons identifié deux éléments de liaison ERE, un dans la région proximale du promoteur et un plus distale, qui favorise le recrutement de ERa. Nous avons aussi regardé la méthylation de la lysine 27 sur l’histone 3 qui est une marque de répression connue. En réponse à l’estrogène nous avons observé cette marque au niveau du site Sp-1 et ERE sur lesquels ERa est déjà recruté. Ceci confirme la répression de HYAL-1 par ERa. Conclusions : Cette étude identifie HYAL-1 comme un gène cible du récepteur ERa dans les tissus reproducteurs et suggère un mécanisme pour la répression transcriptionnelle de HYAL-1 par les estrogènes. 10 # 3. Mutation dans IKBKE et réduction de la signalisation de IKK dans un cas ressemblant au syndrome de DAVID Youcef Khodja1, Isabel Fernandez2, Jose Capo-Chichi1, Jeremy Schwartzentruber3, Elie Haddad2, Jacek Majewski3, Guy Van Vliet1, Francoise Le Deis2, Mark E. Samuels*1, Christina Nassif1 1Centre de recherche du CHU Sainte-Justine de pédiatrie, CHU Sainte-Justine 3Department of Human Genetics, McGill University 2Département Un cas précédemment signalé d'une éventuelle immunodéficience variable combinée avec déficience pituitaire antérieure. La combinaison de ces deux conditions relativement rares est connue comme le syndrome DAVID. Des mutations dans les patients atteints du syndrome DAVID ont été rapportées dans le gène NFKB2, dans notre cas la mutation dans IKKe trouvée par exome. L’analyse de l'ARN des cellules de la patiente a démontré un saut d'exon en raison de cette mutation, qui est prévue pour provoquer la trancation de la protéine. Des cellules provenant de la patiente ont montré un niveau réduit de protéine IKBKE, et la même chose pour la voie de signalisation IRF3 lorsqu'il est stimulé de manière appropriée. Ceci est le premier rapport de mutation dans IKBKE (également connu sous le nom IKKE et IKKi) associée à un phénotype médicale rare. Methodes : Le projet a été approuvé par le comité d’éthique avec le consentement de la famille. L'ADN a été obtenu à partir de sang périphérique en utilisant des procédures standard. Un séquençage complet de l'exome et une analyse bioinformatique des données de l’exome ont été réalisés. Les cellules lymphocytes B immortalisés avec le virus Epstein-Barr virus B de la patiente et un contrôle en bonne santé ont été performés, et stimulés avec CD40L et BAFF pendant 24 heures. Western blots ont été effectués, et RT-PCR a été réalisée en utilisant des méthodes standards et aussi des essais de signalisation. Conclusion: La variante en IKKe au niveau du gène est pathogène, et probablement joue un rôle dans l'apparition de ce phénotype. Nos résultats suggèrent que l'inhibition à long terme de IKBKE, ou d'autres composants des voies de NFKB, peut avoir des effets inattendus sur la fonction endocrinienne, au moins chez certains patients. Une surveillance étroite de l'hypophyse ou de la fonction endocrine périphérique peut être importante pour les patients recevant des traitements expérimentaux ciblant les voies de NFkB. # 4. Impact de la déficience du gène de la fibrose kystique sur les processus oxydatifs et inflammatoires au niveau de l’intestin Marie-Laure Kleme Amani1,2, Alain Sané2, Alain Montoudis2, Carole Garofalo2, Emile Levy1,2,3 1Département de Nutrition, Université de Montréal de recherche du CHU Sainte-Justine 3Institut de Nutrition et des Aliments Fonctionnels, Québec, Canada 2Centre OBJECTIF : Rechercher les caractéristiques oxydatives et inflammatoires des cellules épithéliales intestinales de la fibrose kystique (FK). METHODE : Délétion du gène CFTR dans des cellules épithéliales intestinales de la lignée Caco 2/15 à l’aide de techniques spéciales de transfection et vérification de la viabilité cellulaire. Quantification du malondialdehyde (peroxydation lipidique) par HPLC et évaluation des activités enzymatiques antioxydantes (glutathion peroxydase, superoxyde dismutase, catalase) par spectrophotométrie après 6 heures d’incubation avec le fer/ascorbate (0,2 mM/2mM). Le trolox (vitamine E) est utilisé comme antioxydant (100mg/ml). Exploration du profil inflammatoire par Western blot en recherchant NF-kB /I-kB, TNF-α, IL-6 et COX-2 après 6h d’incubation avec le lipopolysaccharides. RESULTATS : La délétion génique obtenue est stable. Les cellules épithéliales intestinales de FK présentent à l’état basal un niveau de malondialdehyde plus important et sont plus sensibles au stress oxydant induit par le fer/ascorbate que les cellules contrôles. Les activités de la glutathion peroxydase et de la catalase sont effondrées dans les cellules de la FK toutes conditions confondues. Le stress oxydant induit par le Fer/Ascorbate entraîne une réduction significative de la SOD mitochondriale. Les cellules de FK, contrairement aux contrôles, présentent une inflammation à l’état basal traduite par l’élévation spontanée de NFκB, TNF-α, IL-6 et COX-2. Cette inflammation s’intensifie dans certains cas en présence du LPS. CONCLUSION : les cellules épithéliales intestinales de FK présentent spontanément des caractéristiques inflammatoires et oxydatives exacerbées en présence d’un stimulus. Cet environnement délétère pourrait contribuer à la genèse des désordres intestinaux rapportés dans la FK et pourrait découler en partie d’anomalies de la mitochondrie, cette organelle constituant la source de production par excellence des ROS. 11 # 5. Les neuraminidases : déclencheur de l'athérosclérose Victoria Smutova1, Xuefang Pan1, Christopher Cairo2, Muriel Laffargue3, Alexey Pshezhetsky1 1Université de Montréal of Alberta, Edmonton 3Institut des Maladies Métaboliques et Cardiovasculaires, Toulouse 2University L'athérosclérose est une maladie vasculaire chronique qui se caractérise par une inflammation et une accumulation de lipides dans la paroi artérielle. La maladie se déclenche lorsque les macrophages résidents captent les lipoprotéines de basse densité (LDL) formant ainsi la strie lipidique et éventuellement une plaque d'athérome. Nos récentes données suggèrent que les enzymes de la famille des neuraminidases (Neu 1-4), présentes à la surface des cellules hématopoïétiques et de l'endothélium vasculaire, contribuent au développement de l'athérosclérose. Les neuraminidases catalysent la suppression des résidus d’acides sialiques présents dans les chaînes glycanes des glycoprotéines et des glycolipides, modulant ainsi les événements de reconnaissance moléculaire et cellulaire ainsi que les voies de signalisation. Nos résultats antérieurs démontrent que la déficience génétique en Neu1 réduit significativement la formation de la strie lipidique au niveau du sinus aortique et de l'intima aortique dans deux modèles murins d'athérosclérose, les souris déficientes en apolipoprotéine E (ApoE) et les souris déficientes pour le récepteur au LDL. Récemment nous avons généré des souris ApoE déficientes génétiquement en Neu3 ou Neu4 et nous analysons la formation des lésions athéromateuses au niveau du sinus aortique et le long de l'aorte. Nous avons également montré que le traitement des LDL avec des neuraminidases recombinantes humaines conduit à la suppression des acides sialiques contenus dans les chaînes glycanes de l'apolipoprotéine B, lipoprotéine majeure contenue dans les LDL. De plus, les LDL désialylés par l'action enzymatique des neuraminidases sont captés de façon importante par les monocytes humains en culture. L'ensemble de ces résultats suggèrent que les neuraminidases pourraient devenir de nouvelles cibles thérapeutiques pour la prévention et le traitement de l'athérosclérose et des maladies artérielles coronariennes. # 6. Régulation du métabolisme énergétique en réponse à la ghréline : rôle de PGC-1α Valérie Collet1,2, Sarah keil1,2, Stéphanie Bilodeau1,2, Véronique Caron2, André Tremblay1,2 1Université 2Centre de Montréal de recherche du CHU Sainte-Justine Le syndrome métabolique est une maladie complexe caractérisée par une perturbation de l’homéostasie énergétique. Ce déséquilibre du métabolisme gluco-lipidique entraîne le développement de l’obésité, de maladies cardiovasculaires et de diabète. La ghréline contribue au signal orexigène du système nerveux central pour stimuler la prise alimentaire, jouant un rôle important dans l'apport calorique. L'adaptation à une demande énergétique est associée à une activation de PGC-1α, un co-régulateur transcriptionnel essentiel de la thermogénèse. L'action de PGC-1α permet d'activer en particulier les récepteurs nucléaires PPARα/β/γ, permettant d'induire l'expression de gènes clés du métabolisme gluco-lipidique. L’objectif de ce projet est de caractériser l'impact de la ghréline sur le potentiel intrinsèque de PGC-1α à réguler la transcription et ses partenaires d’interaction. Le rôle de la ghréline sur la régulation de PGC-1α est évalué dans la lignée hépatocytaire HepG2 humaine et dans un système hétérologue de cellules embryonniques de rein. Des essais de gène rapporteur à la luciférase ont permis de démontrer une diminution de l’activité transcriptionnelle de PGC-1α en réponse à la ghréline. Des essais d’immunoprécipitation et analyses Western permettent de déterminer que l'activation du récepteur de la ghréline GHS-R1α favorise l'acétylation de PGC-1α, contribuant à restreindre son potentiel de transactivation intrinsèque. Nous montrons également des effets de la ghréline sur la capacité de PGC-1α à recruter ses partenaires d'interaction et réguler l'expression de gènes cibles. Ces approches nous permettent de caractériser le rôle périphérique de la ghréline sur les étapes clés du métabolisme gluco-énergétique et de définir un axe de régulation impliquant PGC-1α. L’identification de cette voie de signalisation nous permet d'envisager de nouvelles cibles potentielles pour contrer les pathologies associées au syndrome métabolique. 12 # 7. Régulation du récepteur des chimiokines CXCR4 par les estrogènes dans le cancer du sein Samira Benhadjeba1,2, Lydia Edjekouane1,2, Karine Sauvé1,2, André Tremblay1,2 1Université 2Centre de Montréal de recherche du CHU Sainte-Justine L’estrogène est impliqué dans plusieurs aspects de la physiologie humaine, il interagit avec les récepteurs aux estrogènes qui sont des facteurs de transcription nucléaire. Ils sont deux isoformes ERα/β souvent en coexpression. L’activation des ERs se fait par liaison directe de l’estrogène ou par la phosphorylation induite par les facteurs de croissance. Dans notre laboratoire nous avons démontré que l'activation hormonale des ERs mène à la transcription du gène SDF-1 qui va interagir avec CXCR4 à la surface pour induire l’activation de la voie MAPK, qui va phosphoryler la sérine-87 de l’isoforme ERβ. Nous avons aussi démontré que la phosphorylation de cette sérine amplifie l’activité transcriptionnelle des ERs créant une boucle de régulation favorisant le processus des métastases. Dans le but de mieux caractériser cette boucle d’autorégulation positive, nous avons émis l’hypothèse qu’en plus de SDF-1, CXCR4 peut aussi être un gène cible des ERs. Et que la sérine 87 sera impliquée dans la régulation du récepteur CXCR4. Dans le but d'identifier CXCR4 comme gène cible, nous avons développé un modèle cellulaire pour discriminer le rôle transcriptionnel de ERβ. Nous avons généré un système cellulaire qui exprime ERβ ou son mutant ERβ-S87A. Nos résultats démontrent un rôle de la sérine-87 dans la régulation de SDF-1 par l’isoforme ERβ et que cette sérine est importante dans la prolifération cellulaire dépendante de ERβ et induite par SDF-1. Nos résultats de qPCR suggèrent CXCR4 comme gène cible des récepteurs aux estrogène induit par E2 et SDF-1 et que son expression dépend de la sérine-87 pour ERβ. Ces résultats révèlent l’importance de la caractérisation de la régulation de CXCR4 par les récepteurs aux estrogènes qui peut constituer une perspective pour l’investigation de cibles thérapeutiques contre le cancer du sein et ses métastases. # 8. Modulation de l'activité du récepteur aux acides biliaires FXR par la sumoylation Stéphanie Bilodeau1,2, Véronique Caron2, Jonathan Gagnon1,2, André Tremblay1,2 1Université 2Centre de Montréal de recherche du CHU Sainte-Justine dans le métabolisme lipidique et glucidique. Les mécanismes de régulation de l'activité transcriptionnelle de FXR sont peu caractérisés et leur élucidation pourrait permettre de développer des outils thérapeutiques pour les désordres métaboliques. Notre recherche de nouveaux modulateurs de l'activité de FXR a identifié ErbB2, un récepteur tyrosine kinase de la famille des ErbBs, comme étant un activateur du récepteur aux acides biliaires. Résultats : Les résultats montrent que l'activation de ErbB2 par son ligand héréguline induit la sumoylation de FXR via la voie de signalisation PKC. Cette sumoylation induit une augmentation de l'activité transcriptionnelle ainsi qu'une accumulation protéique de FXR. L'augmentation de la sumoylation par ErbB2 est inhibée lors de l'ajout du ligand synthétique de FXR, GW4064, suggérant une régulation ligand-indépendante par ErbB2. De plus, nos résultats montrent que FXR est un récepteur qui est fortement ubiquitiné de façon basale et que le ligand induit une déubiquitination permettant son activation. La sumoylation de FXR semble nécessaire pour cette dé-ubiquitination, indiquant une relation étroite entre les deux modifications post-traductionnelles. Conclusions : Les résultats montrent que la sumoylation et l’ubiquitination sont deux modifications post-traductionnelles importantes dans la régulation de l'activité et l'expression de FXR. Un nouvelle cascade de régulation ErbB2-FXR a été identifiée permettant le contrôle du métabolisme des acides biliaires et amenant de nouvelles opportunités dans le traitement des maladies métaboliques. 13 # 9. Modélisation d’un nouveau syndrome d’arythmie généralisé à partir de cellules souches pluripotentes Natacha Gosset1,2, Philippe Chetaille2, Christophe Preuss3, Jessica Piché1,3, Severine Leclerc3, Florian Wunnemann3, Maryse Thilbeault3, Gregor Andelfinger3 1Université de Montréal 2Centre mère-enfant CHUQ 3CHU Sainte-Justine Les cellules souches embryonnaires humaines (HuES) issues de l’embryon, et les cellules souches à pluripotence induites humaines (hiPSc, provenant de cellules différenciées adulte reprogrammées en cellules souches embryonnaires via l’utilisation de différents facteurs), sont très largement utilisées aujourd’hui comme modèle cellulaire pour étudier de nombreuses maladies génétiques. Ces cellules sont utilisées comme modèle cellulaire afin d’étudier un nouveau syndrome d’arythmie généralisée rare dans la population franco-canadienne, CAID syndrome (Chronic Atrial and Intestinal Dysrhytmia) causé par une mutation fondatrice récessive dans le gène Shugoshin-like 1 (SGOL1) qui mène à un changement protéique K23E survenant dans un domaine conservé à travers l'évolution, dans lequel les patients affectés souffrent d'une maladie du nœud sinusal (MNS, situé dans l’oreillette droite du cœur) ainsi que d'une pseudo-obstruction intestinale chronique (POIC). Mon hypothèse de Recherche est que la Lysine 23 de SGOL1 joue un rôle primordial pour le développement et le maintien de la fonction du nœud sinusal. En conséquence, les effets délétères de la mutation K23E sur la pathologie associant la MNS et la POIC peuvent être modélisés in vitro dans des cellules souches à pluripotence induite humaine (hiPSc) reprogrammées à partir de fibroblastes de patients. Mon but est donc de créer un modèle cellulaire de cette maladie via la reprogrammation de fibroblastes de patients qui seront transformés d’abord en cellules souches pluripotentes, et par la suite, en cardiomyocytes et en cellules du nœud sinusal. Les résultats préliminaires obtenus lors de la différenciation en cardiomyocytes des HuES, révèlent que ces dernières possèdent les caractéristiques morphologiques et génétiques des cardiomyocytes retrouvés chez le cœur adulte. Dans les prochains mois, j’espère obtenir des cellules du nœud sinusal et identifier le rôle potentiel de SGOL1 dans le processus de différenciation. # 10. Nouvel inhibiteur non-compétitif du récepteur de l’interleukine-1 efficace pour prévenir les naissances prématurées Mathieu Nadeau-Vallée1,7, Christiane Quiniou1, Julia Palacios1, Xin Hou1, Ankush Madaan1,2, Melanie Sanchez1,2, Atefeh Erfani1, Kelycia Leimert4, Amarilys Boudreault1, François Duhamel1,7, José Carlos Rivera1,5, Baraa Noueihed2,5, Xin Ni8, William Lubell3, Sarah Robertson6, David Olson4, Sylvie Girard1, Sylvain Chemtob1,5,7 1Centre de recherche du CHU Sainte-Justine 2McGill University, Department of Pharmacology and Therapeutics 3Université de Montréal, Département de Chimie 4University of Alberta, Department of Obstetrics and Gynecology 5Hôpital MaisonneuveRosemont, Centre de Recherche 6University of Adelaide, Department of Obstetrics and Gynecology 7Université de Montréal, Département de Pharmacologie 8Second Military Medical University, Department of Obstetrics and Gynecology Introduction: Les naissances prématurées sont associées avec une augmentation de la production de cytokines proinflammatoires dans l’utérus, en particulier l’interleukine (IL)-1, pouvant induire localement les protéines activatrices de l’utérus, étape précédant le travail utérin. Le laboratoire hôte a développé un petit peptide (nommé 101.10) modulateur non-compétitif du récepteur de l’IL-1. L’objectif est de démontrer l’efficacité de 101.10 dans différents modèles murins de travail pré-terme induit par l’inflammation. Méthode: 208 souris CD-1 gestantes ont reçu soit une injection intra-utérine d’IL-1β (1µg/souris) ou une injection intrapéritonéale du ligand Toll-like receptor (TLR) -2 acide lipoteichoique (LTA; 12.5mg/Kg) ou du ligand TLR4 lipopolysaccharide (LPS; 0,5 µg/souris) au jour 16 de gestation (terme: 19 jours). 101.10 ou l’inhibiteur compétitif du récepteur de l’IL-1 Kineret ont été administrés deux fois par jour jusqu’à l’accouchement. Le moment des naissances a été rigoureusement monitoré et les tissus de myomètre ont été prélevés suite à l’accouchement. Le mécanisme d’action du 101.10 a été étudié dans des cellules musculaires lisses du myomètre. Résultats: 101.10 a significativement réduit la prématurité induite par IL1β (réduction de 81%, p˂0,001), LTA (réduction de 55%, p<0.001) et LPS (réduction de 37%, p<0.001). 101.10 a aussi diminué l’expression de plusieurs gènes pro-inflammatoires et pro-travail (incluant IL6, OXTR, PGHS2) induite par IL1β, LTA et LPS dans le myomètre. Le mécanisme d’action du 101.10 dans les cellules myométriales implique l’inhibition de la voie de signalisation induite par IL-1 des kinases associées au stress p38 et JNK sans affecter l’activation de NF-κB induite par IL-1 (sélectivité fonctionnelle). Conclusion: Par la présente, nous décrivons le premier inhibiteur non-compétitif du récepteur de l’IL-1 efficace pour prévenir le travail pré-terme. 14 # 11. Caractérisation d'un nouveau syndrome d'arythmie humain : Plusieurs phénotypes observés chez le syndrome CAID Jessica Piché1, Philippe Chetaille2, Christoph Preuss1, Gilles Hickson3, Nour El-Amine3, Harry C. Dietz4, Elena GalloMcFarlane4, Gregor Andelfinger1 1CHU Sainte-Justine mère-enfant CHUQ 3Département de pédiatrie, Université de Montréal 4Johns Hopkins University School of Medicine 2Centre Contexte: Le maintien de la vie nécessite la contraction rythmique de deux organes, le cœur et l'intestin. Cette contraction est assurée par la dépolarisation de tissus spécialisés, soit le nœud sinusal situé dans l'oreillette droite pour le cœur alors que dans les intestins, il s'agit des cellules interstitielles de Cajal situées dans la paroi intestinale. Notre laboratoire a récemment identifié un nouveau syndrome, nommé «Chronic atrial and intestinal dysrhythmia» (CAID), caractérisé par une perte progressive de la fonction normale du nœud sinusal (MNS) et une pseudoobstruction intestinale chronique (CIPO) chez 16 patients Canadiens français et un patient Suédois. Tous les survivants affectés sont porteurs homozygotes d’une mutation fondatrice dans SGOL1, un composant du complexe de la cohésine. Dans ce projet, nous avons établi une corrélation phénotype-génotype dans des lignées cellulaires provenant de familles CAID. Méthodes: Afin de déterminer l'influence de la mutation K23E se SGOL1, nous avons étudié les paramètres du cycle cellulaire, la protéomique quantitative (SILAC), le taux de signalisation TGF-β et de sénescence dans des lignées cellulaires de fibroblastes. Nous avons également effectué des études d'immunofluorescence quantitative afin de déterminer le patron d'expression de SGOL1. Résultats: Étonnamment, les lignées cellulaires hétérozygotes et homozygotes présentent une accélération du cycle cellulaire similaire, des changements dans les niveaux protéiques, de plus hauts taux de signalisation TGF-β et de sénescence ainsi qu'une localisation cytosolique anormale de SGOL1. Discussion: Bien que la mutation SGOL1 K23E montre un effet dominant au niveau cellulaire, ce n'est pas le cas au niveau de l'organisme entier. Ainsi, nos découvertes indiquent l'exigence d'un dosage spécifique de SGOL1 dans ces deux modèles. # 12. Les effets anti-angiogéniques des microparticules dérivées des lymphocytes T sur la néovascularisation choroїdienne médiés par le récepteur CD36 Houda Tahiri1,2, Samy Omri3, Chun Yang2, François Duhamel1,2, Sylvain Chemtob1,2,3, Pierre Hardy1,2 1Département de Pharmacologie, Faculté de médecine, Université de Montréal de recherche du CHU Sainte-Justine 3Centre de recherche Hôpital Maisonneuve-Rosemont 2Centre Introduction : La dégénérescence maculaire liée à l'âge (DMLA) est la première cause de malvoyance après 55 ans chez les citoyens des pays industrialisés. Cette maladie se traduit par une dégénérescence de la rétine et une prolifération des vaisseaux sanguins de la choroïde. Le récepteur CD36 est le principal récepteur "scavenger" des phospholipides oxydés exprimé dans les macrophages, les cellules pigmentaires et endothéliales rétiniennes. Nous avons rapporté précédemment que des microparticules dérivées de lymphocytes T humains (MPLs) inhibaient significativement l'angiogenèse dans plusieurs modèles de la néovascularisation oculaire. Par ailleurs les MPLs induisaient l’expression du CD36. Dans ce sens, notre étude vise à déterminer comment le récepteur CD36 peut médier l’effet anti-angiogénique des MPLs. Méthodes : les MPLs ont été produites par le traitement des lymphocytes T humains avec l'actinomycine D. La viabilité des cellules (test de MTT) et l'apoptose (FACS) ont été testées dans la lignée macrophagique (RAW264.7) stimulée avec les MPLs. L'expression IL10, IL-12, CD206, MCP-1 ont été démontrées par (FACS) ainsi que par qPCR. Nous avons évalué l’activité angiogénique des MPLs dans le modèle in vivo de néovascularisation choroidienne (NVC) induite au laser (Argon), chez des souris wild-type (C57Bl6) et des souris déficientes en récepteur CD36 (CD36 knock-out). Résultats : les MPLs inhibent de façon dose depentante la croissance cellulaire des macrophages sans causer leur apoptose. Pré-traiter les macrophages avec les MPLs inhibe la croissance des cellules endothéliales en augmentant l’expresion de IL-12, Cd36 et HIF-1α. In vivo, les MPLs inhibent la NVC induite par le laser et réduisent l’infiltration des macrophages au niveau du site de lésion. Cet effet antiangiogénique est moins efficace dans le modèle de souris CD36 knock-out. Conclusion: Les MPLs s'avèrent être un candidat potentiel et prometteur dans la thérapie anti-angiogénique. 15 # 13. La modulation statique et dynamique a des effets différents sur les réponses biomécaniques et l’expression de protéines de la plaque de croissance modulée in vitro Rosa Kaviani1,2, Irene Londono1, Stefan Parent1,3, Florina Moldovan1,3, Isabelle Villemure1,2 1CHU Sainte-Justine 2École 3Université Polytechnique de Montréal de Montréal Objectifs: Cette étude vise à déterminer l'effet de la modulation statique vs. dynamique sur les réponses biomécaniques et l’expression des protéines de la plaque de croissance (PC). Méthodes: Des explants de PC porcines ont été séparés en 4 groupes (n=10/gr): référence, contrôle, statique (0.1 MPa) et dynamique (0,1 MPa±30%, 0.1 Hz). La compression a été appliquée aux groupes chargés pendant 12/48h. Les explants ont ensuite été divisés en 3 parties : i) caractérisation biomécanique via le calcul de patrons de déformation basé sur les images confocales d'explants sous compression; ii) contenu en protéoglycanes et collagène; iii) immunohistochimie d’aggrecan, collagène type II et MMP13. L'analyse statistique a été réalisée par une ANOVA à un facteur suivie d'une comparaison post-hoc de Tukey (p<0,01). Résultats: Les résultats ont montré que la modulation statique augmente la déformation dans la zone hypertrophique et la diminue dans les zones proliférative et de réserve, alors que pour le groupe dynamique, le patron de déformation n'était pas modifié par rapport aux contrôles. Les analyses ont montré une réduction significative du contenu en protéoglycanes dans la zone hypertrophique des statiques par rapport aux contrôles. En plus, le collagène type II a été augmenté significativement dans les zones hypertrophique et réserve. Pour le groupe dynamique, les expressions d’aggrecan et collagène type II n’étaient pas changées tandis que l’expression de MMP13 a été augmentée dans toutes les zones par rapport aux contrôles. Conclusion: La modulation statique entraîne plus de changements sur le comportement biomécanique de la PC que la modulation dynamique. Les changements biomécaniques des PC modulés en statique sont associés à une perte de protéoglycanes dans la zone hypertrophique. Ces résultats seront utiles pour trouver des paramètres de chargement efficaces et non dommageables pour les traitements sans fusion de la scoliose. # 14. L'efficacité d'une intervention de distraction par réalité virtuelle pour la gestion de la douleur et de l'anxiété procédurales chez des enfants ayant subi des brûlures: protocole d'un ECR Christelle Khadra1,2,3,4, Sylvie Le May1,2,3, Sylvie Charette2, Viviane Tremblay1,2,3, Ariane Ballard2,3, Johanne Déry1,2, Édith Villeneuve1,2 1Université de Montréal 2CHU Sainte-Justine 3Pain In Child Health 4Centre Universitaire de Santé McGill But: Évaluer l'efficacité d'une intervention de distraction par réalité virtuelle (RV) pour le soulagement de la douleur et de l'anxiété procédurales d'enfants ayant subi des brûlures. Hypothèse: La distraction par RV combinée aux analgésiques sera plus efficace que le traitement standard (analgésiques seuls) pour diminuer la douleur procédurale et l’anxiété d’enfants ayant subi des brûlures. Méthodologie: Essai contrôlé randomisé à deux bras parallèles, auprès d'enfants francophones de 2 à 17 ans, ayant subi des brûlures de 2e degré profond et nécessitant le débridement de leurs plaies. Seront exclus les enfants 1) ayant besoin de soins intensifs, 2) intubés ou inconscients lors de la procédure de changement de pansement, 3) ayant des allergies aux opioïdes et autres analgésiques utilisés dans le traitement pharmacologique standard, 4) souffrant d'épilepsie. Taille de l'échantillon souhaitée: 66 patients pour une puissance statistique de 80% et un alpa de cronbach de 0.05. Milieux: Deux centres hospitaliers universitaires pédiatriques de la région de Montréal. Allocation: Randomisation par bloc, selon une liste préétablie, à un des deux groupes de traitement: groupe expérimental recevra le traitement standard en plus d'une intervention de distraction par RV, le groupe contrôle recevra le traitement standard seulement. Temps de mesures prévus: avant (T1), durant (T2) et après (T3) la procédure. Plan d’analyses: des analyses quantitatives multivariées et des comparaisons entre les deux groupes selon les variables dépendantes seront effectuées pour déterminer l’efficacité de l’intervention. Des analyses de sous-groupes sont prévues pour comparer le groupe d'enfants de 2 à 12 ans, au groupe d'adolescents de 13 à 17 ans. Résultats attendus: La RV pourrait constituer un moyen non pharmacologique important pour soulager la douleur, sans effets secondaires et facile à utiliser dans les unités des Grands Brûlés. 16 # 15. Conception préliminaire d’un dispositif sans fusion à compression cyclique pour le traitement des scolioses idiopathiques adolescentes Viviane Lalande1,2, Isabelle Villemure1,2, Etienne Bouffard-Cloutier1, Stefan Parent2,3, Carl-Éric Aubin1,2 1Polytechnique Montréal Sainte-Justine 3Université de Montréal 2CHU Contexte et objectif: Les nouveaux traitements sans fusion permettent de corriger les déformations scoliotiques en comprimant localement les plaques de croissance (PC) du côté convexe de la courbure. Ceci permet de préserver la mobilité du rachis et la croissance vertébrale. Des études récentes ont montré que la compression dynamique est aussi efficace mais moins dommageable pour les PC et les disques que la compression statique pour moduler la croissance. L’objectif est de concevoir un prototype préliminaire appliquant une compression cyclique sur les PC d’un rachis porcin synthétique. Méthodes: Un modèle synthétique a été fabriqué par impression 3D à partir d’images segmentées CTscan d’un rachis porcin immature (T5 à T12). Des vis ont été insérées antéro-latéralement sur quatre niveaux. Un câble Bowden fixé sur la vis proximale et dont la gaine est fixée sur la vis distale, glisse librement à l’intérieur des autres vis et est relié à un moteur pas à pas bipolaire permettant de réguler sa tension pour obtenir une contrainte de 0.2MPa ± 30% à une fréquence de 0.1Hz. La pression appliquée sur les PC est mesurée par des capteurs de force placés entre les vertèbres et les disques afin d’établir la relation entre la force du câble et la pression générée dans les PC. Résultats et perspectives: Cette version préliminaire du prototype a été fabriquée et le système de contrôle de la pression a été testé. Une relation entre l’amplitude de la pression dans les PC et la tension appliquée dans le câble a été vérifiée. Ce prototype est en cours de raffinement, et permettra de procéder sous peu à des essais (preuves de concept) sur des modèles porcins cadavériques puis à des essais in vivo. Ces derniers permettront d’évaluer l’efficacité de la modulation de la croissance avec un implant à compression cyclique. # 16. La forme des tiges d'instrumentation affecte-t-elle la correction 3D de la scoliose idiopathique adolescente? Franck Le naveaux1,2, Carl-Éric Aubin1,2, Stefan Parent1, Peter Newton3, Hubert Labelle1 1CHU Sainte-Justine polytechnique 3Rady children's Hospital 2École But : Évaluer les changements de forme 3D des tiges d’instrumentation pendant la chirurgie et leurs effets sur la correction 3D de la scoliose. Matériel et méthode : Les tiges de 5.5mm de diamètre en Cobalt Chrome de 35 patients présentant une courbure thoracique majeure sont mesurées, avant leur insertion dans le rachis, pendant l’opération après l’exécution des manœuvres de correction puis 1 semaine post-op, à l’aide des radiographies bi-planaires. La courbure des tiges, leur déflection maximale et l’orientation du plan de courbure maximale (PCM) sont analysées à chaque étape, puis corrélées avec la cyphose thoracique et la rotation vertébrale apicale (RVA). Résultats : L’angle de Cobb de 58±10° est corrigé à 15±8° et la RVA de 18±6° à 9±6° une semaine après la chirurgie. Avant insertion, les tiges sont plus courbées du côté concave (courbure et déflection : 39±8°/25±6mm) que du côté convexe (26±5°/17±3mm). Seule la forme des tiges concaves change après les manœuvres de correction (18±6°/11±5mm; p<0.001) mais reste inchangée post-op. Après la chirurgie, le PCM des tiges est oblique par rapport au plan sagittal (concave: 27±19°/convexe: 15±12°). Il y a une relation linéaire entre le cintrage initial des tiges concaves et le changement de cyphose (R2=0.58) ainsi qu’entre la déflection différentielle concave/convexe des tiges et la correction de la RVA (R2=0.28) (p<0.01). Conclusion : Les manœuvres de correction induisent un changement du profil des tiges concaves, et les deux tiges se retrouvent dans un plan dévié du plan sagittal. Malgré ces déformations, le cintrage différentiel initial impacte la correction des plans sagittal et transverse. Remerciements : Projet subventionné par le CRSNG (Chaire de recherche industrielle avec Medtronic). 17 # 17. Effets du chargement d'impact pendant la puberté sur la croissance, la morphométrie et la biomécanique osseuses: aspects méthodologiques Tanvir Mustafy1,2, Florina Moldovan2,3, Isabelle Villemure1,2 1École Polytechnique de Montréal de recherche du CHU Sainte-Justine 3Université de Montréal 2Centre INTRODUCTION: L’entrainement intensif peut affecter la croissance osseuse. Il n’est clairement pas déterminé si les adolescents pratiquant un sport d'impact éprouvent un retard de croissance, si ces activités améliorent les propriétés des os en jeune âge et si ces propriétés améliorées sont maintenues à l'âge adulte. Ce projet vise à vérifier si les charges d'impact durant la puberté sont dommageables pour la croissance et si elles constituent des facteurs déterminants pour la qualité de l'os et la résistance biomécanique à l'âge adulte. OBJECTIFS: 1. Concevoir un dispositif pour le chargement d'impact in vivo de tibias de rats. 2. Compléter 4 groupes de rats: contrôle, sham, impact faible (IF), impact élevé (IE) 3. Développer une approche basée sur l’imagerie microCT pour évaluer de façon non destructive la croissance. 4. Développer une approche combinant le micro-CT et la modélisation par éléments finis (EF) pour évaluer de façon non destructive les propriétés mécaniques de l’os. METHODOLOGIE: 1. Un dispositif a été conçu pour l’application contrôlée d’IF ou d’IE sur le tibia de rats. 2. Le tibia droit des rats Sprague-Dawley (28 jours) IF et IE sera chargé 4 jours/sem pour 5 semaines. Les rats shams auront les mêmes conditions, sans charge. Les contrôles (sans manipulation) seront aussi analysés. Les deux tibias seront imagés par micro-CT 1 fois/sem jusqu'à 80 jours. 3. Les numérisations du micro-CT prises séquentiellement seront recalées en superposant les volumes enregistrés pour quantifier la croissance. 4. Les paramètres mécaniques seront évalués en combinant l’imagerie par micro-CT (géométrie osseuse) et l'analyse par EF. RÉSULTATS ATTENDUS: Ce projet fournira deux nouveaux outils non-destructifs basés sur le micro-CT pour l’évaluation longitudinale de la croissance et de la biomécanique osseuses. Ce projet pourrait mener à des recommandations sur les programmes d’entrainement pour les athlètes adolescents impliqués dans des sports d’impact. # 18. Intégration d’une Wii et d’une Kinect mesurant la base de sustentation pour le développement d’un jeu vidéo actif adapté Annie Pouliot-Laforte1,2, Édouard Auvinet3, Martin Lemay1,2, Laurent Ballaz1,2 1Département des sciences de l'activité physique, Université du Québec à Montréal de recherche CHU Sainte-Justine, Centre de réadaptation Marie Enfant 3Department of Surgery and Cancer, Imperial College London 2Centre Introduction: Chez les personnes présentant des troubles moteurs, l’habileté de transférer son poids est étroitement liée à leur niveau fonctionnel. Lors de transferts médio-latéraux (ML) du poids du corps, l’amplitude de mouvements dépend de la largeur de la base de sustentation (BS) adoptée par la personne. Pour améliorer sa capacité à transférer son poids, l’individu doit s’exercer sur des amplitudes de mouvements près des limites de sa BS. Il est alors primordial de prendre en compte la BS pour adapter les sollicitations induites par des jeux vidéo, dont l’objectif est d’améliorer l’habileté de transfert ML. Objectif: (1) Intégrer une plateforme de force (wii) et une caméra Kinect; (2) valider la caméra Kinect comme outil de mesure de la BS lors de transferts de poids réalisés sur la plateforme Wii. Méthode: La position ML des pieds a été définie par l’articulation de la cheville du modèle cinématique Kinect (Librairie Microsoft NUI). Premièrement, une période de calibration a permis de définir le déplacement du centre de pression (CoP) sur la plateforme Wii dans le référentiel spatial de la Kinect. Pour ce faire, il a été demandé à un participant de poser son talon 18 fois sur la plateforme Wii à différents emplacements. Deuxièmement, le participant a adopté spontanément 10 BS sur la plateforme Wii. Pour chaque position adoptée, le participant devait effectuer 5 transferts ML à amplitude maximale et à vitesse confortable. Résultats: L’amplitude des déplacements du CoP corrèle avec la distance entre les chevilles (r=0,98; p<0,001). Le déplacement latéral du CoP dépasse la position des chevilles (1,42cm±0,61cm). Conclusion: Ces résultats préliminaires présentent une méthode originale pour l’intégration de la Kinect et de la Wii dans la mesure de la BS. Le couplage de la plateforme Wii et de la Kinect est prometteur pour le développement d’un jeu vidéo actif adapté aux capacités fonctionnelles du joueur, dans le but d’entraîner le contrôle postural dynamique. 18 # 19. Technique de dérotation vertébrale “segmentaire” vs “en bloc” pour la chirurgie de la scoliose: existe-il une différence en terme de correction 3D? Laure Boyer1,2, Carl-Éric Aubin1,2, Lawrence G. Lenke3, Stefan Parent2 1École Polytechnique Sainte-Justine 3Washington University School of Medicine 2CHU Objectifs: Plusieurs techniques de dérotation vertébrale, avec différentes stratégies de correction, sont utilisées pour corriger la rotation axiale des vertèbres scoliotiques, mais les avantages biomécaniques 3D de chaque technique sont encore méconnus. L’objectif est de comparer la correction 3D obtenue par les techniques de dérotation segmentaire (locale) et en bloc (régionale). Méthodes: 57 cas de scoliose idiopathique de l’adolescence (courbure thoracique majeure Cobb 57°), ayant reçu une instrumentation par abord postérieur après 2010, ont été analysés. Pour 25 cas, une technique de dérotation vertébrale régionale en bloc a été utilisée, et pour 32 cas, une technique de dérotation segmentaire a été employée. Pour chaque cas, le rachis a été reconstruit en 3D à partir de radiographies biplanaires, avant et après l’opération. Les indices 3D globaux et locaux ont été mesurés et comparés. Résultats: Les déformations rachidiennes 3D en préopératoire étaient identiques entre les groupes (p>0.05), excepté pour la lordose. En postopératoire, aucune différence statistique (p>0.05) n’a été identifiée entre les techniques en termes de correction de la rotation axiale apicale (15°±6° pour en bloc vs. 17°±6° pour segmentaire), et de la rotation intervertébrale aux vertèbres limites (10°±6° pour les 2 techniques), de la correction de l’angle de Cobb thoracique (40°±11°), et du changement de lordose (5°±8°) et de cyphose (13°±9° (amélioration) pour les cas hypocyphotiques et 4°±8° pour les cas normocyphotiques). Conclusion: Les techniques de dérotation vertébrale segmentaire et en bloc permettent d’atteindre une correction 3D (globale et locale) similaire. D’autres aspects de la manœuvre de dérotation doivent cependant être considérés pour évaluer plus en profondeur les techniques (ostéotomies, type d’instrumentation, efforts induits sur les implants, durée de la chirurgie, etc.) ce qui peut affecter l’efficacité et la sécurité des techniques de dérotation. # 20. Planification chirurgicale pour la correction 3D de la scoliose juvénile progressive avec un dispositif sans fusion flexible: résultats des 15 premiers cas Nikita Cobetto1,2, Carl-Éric Aubin1,2, Julien Clin1,2, Stefan Parent2 1Polytechnique 2Centre Montréal de recherche du CHU Sainte-Justine Objectif: Pour les scolioses juvéniles progressives, une nouvelle technique chirurgicale sans fusion consiste à instrumenter le rachis (implants vertébraux+câble souple appliquant des forces compressives) pour guider la croissance en permettant la flexibilité du rachis. Durant la chirurgie, la mise en place du dispositif influence les forces correctives et la correction 3D. Une tension initiale trop grande dans le câble peut mener à une surcorrection (inversion) de la courbure avec la croissance. L'objectif de ce projet est de développer une méthode numérique de planification chirurgicale pour la correction 3D de la scoliose juvénile avec le dispositif sans fusion flexible. Méthodes: Un modèle éléments finis est construit à partir de radiographies biplanaires du rachis. Il inclut les paramètres de croissance et de potentiel de progression du patient. 15 patients scoliotiques instrumentés ont été utilisés pour simuler l’installation du dispositif et analyser l’effet des paramètres chirurgicaux (nombre/position des vis, tension dans le câble) sur les paramètres de correction 3D (angles de Cobb, cyphose, lordose, rotation vertébrale). Les résultats de correction ont été simulés pour la correction post-opératoire immédiate et pour l’effet de modulation de croissance du dispositif sans fusion. Résultats: Les simulations des 15 premiers cas montrent une adéquation de ±5° pour les angles de Cobb, cyphose, lordose et rotation vertébrale. La position des implants sur les vertèbres (antérieure/postérieure, alignée/non-alignée) permet un effet de correction 3D dans le plan sagittal en corrigeant l’hypocyphose ou l’hypercyphose et dans le plan transverse en permettant une correction de la rotation axiale. Conclusion: Le modèle biomécanique peut être utilisé pour tester différentes configurations chirurgicales du dispositif et pour fournir des recommandations quant à la planification chirurgicale. Cette méthode permettra d’optimiser la correction 3D des dispositifs sans fusion. 19 # 21. Les Spasmes Infantiles et leurs relations aux troubles cognitifs et psychiatriques Jonathan Y. Bitton1,2, H. Catherine Sauerwein1,2, Katia Elkouby2, Canadian Pediatric Epilepsy Network2,3,4,5,6,7,8, Lionel Carmant1,2 1Université de Montréal Sainte-Justine 3BC Children’s Hospital, Vancouver 4The Hospital for Sick Children, Toronto 5Children’s Hospital of Eastern Ontario, Ottawa 6McMaster Health Sciences Centre, Hamilton 7Alberta Children’s Hospital, Calgary 8Izaak Walton Killam (IWK) Health Centre, Halifax 2CHU Objectif: Les Spasmes Infantiles (SI), une forme sévère d'épilepsie pédiatrique, sont fréquemment associés à une déficience cognitive et des troubles du spectre autistique (TSA) dans 80% et 35% des cas respectivement. L'objectif de ce projet était d'évaluer un traitement d’appoint, Flunarizine, afin d'améliorer le pronostic à long terme tout en identifiant les facteurs de risque associés aux SI. Méthodes: Les patients avec SI ont été randomisés pour recevoir le Flunarizine en plus du traitement SI standard. Les évaluations cliniques et d’électroencéphalogramme (EEG) ont été réalisées à chacune des 8 visites (0, 0,5, 1, 6, 12, 24, 30 et 60 mois). Les patients ont été évalués cognitivement à l'inclusion et à 2 ans à l’aide du Bayley Scale of Infant Development (BSID) et Vineland Adaptive Behavior Scale (VABS), et à 5 ans avec le Stanford-Binet Intelligence Scale (SB5) et VABS. L'autisme a été évalué avec l’Autism Diagnostic Observation Schedule (ADOS) à 2,5 et 5 ans. Résultats: Parmi 69 patients inclus dans l'étude, 41 patients ont été évalués cognitivement et 44 pour TSA. À 5 ans, 32 (78%) patients avaient des délais mentaux et 10 (23%) avaient des TSA. Le Flunarizine n'a pas influencé les résultats cognitifs ou psychiatriques. Une étiologie symptomatique (p<0,001), la présence de crises (p=0,003) et délais mentaux (p<0,001) pré-SI, ainsi que des EEG anormaux (p=0,0009) ont été associés à un résultat cognitif néfaste. Une étiologie symptomatique (p=0,003), la présence de décharges épileptiques chroniques dans la zone fronto-temporale (p=0,005 et p=0,007) et une origine non-caucasienne (p = 0,009) étaient prédictifs de TSA. Conclusion: Le Flunarizine n'a pas démontré un effet protecteur à long terme chez les patients SI. Néanmoins, des facteurs prédictifs de risques cognitifs et ASD ont été révélés dans cette étude. Les patients atteints de ces risques pourraient être identifiés précocement et bénéficier d'une intervention rapide pour améliorer leur pronostic. # 22. Le récepteur delta-opiacé recycle à partir des compartiments cellulaires profonds Iness Charfi1,2, Graciela Pineyro1,2 1Université 2Centre de Montréal de recherche du CHU Sainte-Justine Les récepteurs opioïdes delta (DOR) sont impliqués dans plusieurs fonctions cérébrales et leurs agonistes sont actuellement considérés comme des cibles thérapeutiques prometteuses pour une variété de troubles, y compris la douleur chronique, les troubles de l'humeur et ceux de l'apprentissage. Des preuves substantielles indiquent que la durée de réponse médiée par le DOR est très influencée par le trafic de ces récepteurs suivant leur activation. Classiquement, les DORs étaient considérés comme des récepyeurs produisant une grande internalisation et un faible recyclage, mais des données plus récentes indiquent que ces modèles de trafic sont également influencés par le ligand d'activation. Ici, nous avons caractérisé l'itinéraire post-endocytique suivi par le DOR après son internalisation par le DPDPE, un agoniste qui soutient le recyclage du DOR. Nous avons constaté que, une fois intériorisé, le DOR passe à travers des compartiments marqués par l'antigène des endosomes précoces (EEA) et SNX1 (endosomes de triage) pour s’accumuler dans les compartiments marqués par le récepteur au mannose-6phosphate, correspondant aux endosomes tardifs et multivésiculaires. L’inhibition de la machinerie de transport qui permet la récupération rétrograde des M6PRs des endosomes tardifs au réseau trans-Golgi (TGN) interfère avec le recyclage du DOR, comme le fait le blocage du transport entre le TGN et la membrane. Cet itinéraire a été confirmé à la fois dans les cellules HEK293 et les neurones, indiquant que les DORs internalisés peuvent revenir à la membrane des compartiments endosomaux tardifs où ils ont été considérés classiquement dirigés vers la voie de la dégradation. 20 # 23. Les bases synaptiques des déficits cognitifs mnésiques de la déficience intellectuelle et des troubles du spectre de l’autisme Valérie Côté1,2, Sébastien Jacquemont1,2, Sarah Lippé1,2 1Université 2CHU de Montréal Sainte-Justine La déficience intellectuelle et les troubles du spectre de l’autisme sont causés par des mutations de gènes codant pour une ou plusieurs protéines impliquées dans la chaîne d'insertion des récepteurs AMPA dont la densité est anormale en post-synaptique. Cela cause alors des dérèglements au niveau post-synaptique tel que l’augmentation, la diminution ou l’altération de la dépression à long terme (LTD) et de la potentialisation à long terme (LTP) des neurones (Chen et al., 1998; Cramer et Galdzicki, 2012; Hamdan et al., 2009; Matic et al, 2014; Muhia et al., 2010; Nicolini et al., 2015; Sidorov et al., 2013). Ces modifications dans l’équilibre synaptique entraînent des changements morphologiques des épines dendritiques, puis des particularités neuroanatomiques à l’échelle cérébrale qui sont variables selon chaque syndrome de déficiences intellectuelles et/ou de trouble du spectre de l’autisme (Lozano et al., 2014; Lott, 2012). Ces caractéristiques neuroanatomiques s’observent principalement dans les zones associées à des fonctions cognitives affectées pour certains de ces troubles neurodéveloppementaux (Ben-David et Shifman, 2012; Cramer et Galdzicki, 2012). Il y aurait, par ailleurs, des déficits communs en mémoire notamment dans la mémoire de travail, à court terme, la récupération et l’apprentissage chez la plupart des déficiences intellectuelles et des troubles du spectre de l’autisme (Ben-David et Shifman, 2012; Gras-Vincendon et al., 2008; Hamdan et al., 2009; Lott, 2012; Lozano et al., 2014; Muhia et al., 2010). Cette revue de littérature permet de mieux comprendre les mécanismes qui relient l’origine génétique de ces troubles neurodéveloppementaux et les impacts observés sur la cognition, particulièrement sur la mémoire et l’apprentissage. # 24. Le rôle du gène de la polarité apico-basale SCRIBBLE1 dans le développement neurologique Kharfallah Fares1 1Université de Montréal La plupart des cellules épithéliales, en plus de leur polarité apico-basale (A-B), sont polarisées sur le plan épithélial. Ce phénomène est appelé la polarité planaire cellulaire (PCP) qui est contrôlée par la voie non canonique Wnt / Frizzled (Wnt / Fz). Chez les vertébrés, cette voie est aussi responsable du processus d'extension convergente (CE) pendant la gastrulation et la formation du tube neural. Des mutations des gènes de la voie PCP ont été associées aux anomalies du tube neural chez la souris et l’humain. Scribble1 (Scrib1) a été identifié comme un membre de la voie PCP chez la souris mutante circletail (Crc) atteinte d’une forme sévère d’ATN (craniorachischisis). L’hypothèse de notre projet est que le membre de la voie non canonique Fz/Dvl SCRIB1 est impliqué dans le développement des ATN chez l’humain. L’objectif est d’étudier le rôle de SCRIB1 dans une cohorte des patients atteints d’ATN. Notre étude comporte 479 patients atteints d’ATN et 467 contrôles. Les exons du cadre de lecture du SCRIB1 ainsi que les jonctions intron-exon étaient amplifiés par PCR et séquencés. Neuf mutations fausses sens et rares étaient identifiées (D93A, G145R, P649H, G469S, Q808H, V1066M, G263S, R1150Q, et T1422M) dans SCRIB1 chez 9 patients. L’effet des mutations dans SCRB1 sur la fonction de la protéine était examiné en utilisant le système double hybride, où on a constaté que trois mutations Q808H, V1066M et R1150Q affectent l’interaction de SCRIB1 avec VANGL2. Ainsi, le modèle des cellules MDCK est utilisé pour étudier l’effet de ces mutations sur la localisation de la protéine SCRIB1 in vivo, où on a trouvé qu’une mutation Q808H affecte la localisation de SCRIB1 au niveau de ces cellules. Notre étude aidera à mieux comprendre le rôle de la PCP, plus spécifiquement de SCRIB1, dans l’étiologie complexe des ATN chez l’humain. L’identification des gènes prédisposant aux ATN nous aidera à mieux comprendre les mécanismes pathogéniques impliqués dans ces maladies. 21 # 25. Le dysfonctionnement synaptique des interneurones GABAergiques en panier du cortex frontal mène à des déficits cognitifs chez les mutants haploinsuffisants pour Cacna1a Alexis Lupien-Meilleur1,2, Ilse Riebe2, Lena Damaj1, Catherine Vanasse1, Louise Gagnon1, Arn M. J. M. Van den Maagdenberg4, Jean-Claude Lacaille2, Elsa Rossignol1,2 1Centre de recherche du CHU Sainte-Justine de Neurosciences, Université de Montréal, Montréal, Canada 3Departments of Human Genetics 4Departments of Human Genetics Neurology, Leiden University Medical Centre, the Netherlands 2Département Introduction : CACNA1A encode la sous-unité α1 du canal calcique Cav2.1. Ce canal régule la relâche synaptique de diverses populations neuronales. Les mutations de ce gène causent une ataxie épisodique avec épilepsie et troubles cognitifs chez l’humain. Nous avons récemment démontré qu’une délétion ciblée de Cacna1a dans les interneurones GABAergiques (IN) corticaux affecte la relâche synaptique des IN en panier exprimant la parvalbumine (PV) et mène au développement d’une épilepsie généralisée chez la souris. Puisque les IN-PV régulent les oscillations corticales responsables de l’attention et de la mémoire chez l’humain et le rongeur, il est possible qu’une altération de leurs fonctions soit responsable également de troubles cognitifs. Hypothèse: Nous proposons que le dysfonctionnement des IN-PV dans le néocortex mène à des déficits cognitifs chez les mutants Cacna1a. Méthode : Nous avons généré trois lignées de souris différentes: une première, portant une délétion de Cacna1a restreinte aux IN-PV (PVcre;Cacna1ac/+), une deuxième, portant une délétion de Cacna1a restreinte aux cellules du cortex préfrontal (cPF) (injection d’AAVcre au cPF d’animaux Cacna1ac/+) ainsi qu’une troisième portant une délétion de Cacna1a restreinte aux cellules pyramidales (Emx1cre;Cacna1ac/+) corticales, hippocampiques et thalamiques. Nous avons investigué chez ces modèles le niveau d’activité et la flexibilité cognitive à l’aide de différents tests comportementaux. Finalement, nous avons évalué la fonction synaptique des IN-PV corticaux in vitro par otpogénétique. Résultats : Nous démontrons que l’haploinsuffisance de Cacna1a dans les IN-PV du cPF altère l’inhibition périsomatique corticale et cause des symptômes d’impulsivité et de rigidité cognitive chez la souris. Conclusion : Nos résultats démontrent le rôle critique qu’a Cav2.1 dans l’inhibition périsomatique lors de processus cognitifs. # 26. La pauvreté et les problèmes de comportement de 1,5 à 8 ans: L’écart devient-il plus grand au fil du temps entre les enfants pauvres et non pauvres ? Julia Mazza1 1Université de Montréal Contexte: La pauvreté a été associée à des niveaux élevés de problèmes de comportement durant l’enfance, pourtant la trajectoire longitudinale de cette association reste inconnue. Objectif: Examiner si la pauvreté prédit des changements dans les problèmes de comportement au cours de l’enfance. Variables dépendantes: Des scores continus de l’hyperactivité, l'agression physique et le comportement d'opposition avec provocation de 1,5 à 8 ans, rapportés par la mère. Méthodes: Nous avons utilisé les vagues de 1998-2006 de l'Étude longitudinale du Développement des Enfants au Québec (N = 2120). La pauvreté a été définie selon les seuils de faibles revenus de Statistiques Canada. Des modèles linéaires à effets mixtes ont été utilisés afin d’évaluer l'association entre la pauvreté et les sous-types de problèmes de comportement durant l’enfance. Les modèles ont été ajustés pour le sexe de l’enfant, l'éducation maternelle, le statut d’immigration, le comportement antisocial de la mère pendant l’adolescence, et la structure familiale. Résultats: Le nombre d'années pendant lesquelles les enfants étaient considérés pauvres était significativement associé à des changements dans les problèmes de comportement des enfants de 1,5 à 8 ans. L’hyperactivité et le comportement d'opposition avec provocation ont diminué au fil du temps, mais à un rythme plus lent pour les enfants pauvres comparativement aux enfants non pauvres. Pour ce qui est de l’agression physique, l'écart entre les enfants pauvres et non pauvres est resté uniforme au fil du temps. Pour tous les résultats, une forme curviligne représentait mieux les modèles de changement. Conclusion: Les enfants pauvres sont confrontés à des niveaux plus élevés de problèmes de comportement que les enfants non pauvres et les disparités semblent être délimitées par l’âge. Des politiques de santé publique visant directement la pauvreté aideront à diminuer les problèmes de comportement chez les enfants, au moins jusqu'à l'âge de 8 ans. 22 # 27. Étude longitudinale des associations entre l’indice de masse corporelle et la consommation d’alcool au travers l’adolescence et de leurs prédicteurs communs à l’enfance Charlie Rioux1,2, Natalie Castellanos-Ryan1,2, Sophie Parent1, Richard E. Tremblay1,2,3, Jean R. Séguin1,2 1Université de Montréal de recherche du CHU Sainte-Justine 3University College Dublin 2Centre L’obésité et la consommation d’alcool sont deux problèmes de santé importants chez les jeunes, mais peu d’études ont examiné leurs associations au cours de l’adolescence. Cette étude a d’abord examiné les associations longitudinales entre l’indice de masse corporelle (IMC) et la consommation d’alcool chez 256 adolescents québécois suivis depuis leur naissance. Un IMC plus faible à 13 ans était associé avec une fréquence de consommation d’alcool plus élevée au début de l’adolescence alors qu’un IMC plus élevé à 13 ans était associé avec une fréquence de consommation d’alcool plus élevée à la fin de l’adolescence. De plus, l’IMC et la consommation d’alcool pourraient avoir des facteurs de risque communs, mais ceux-ci n’ont jamais été examinés pour les deux problèmes dans la même étude. Dans cet échantillon, une interaction entre l’impulsivité et les pratiques parentales coercitives à 6 ans prédisait à la fois l’IMC et la fréquence de consommation d’alcool, mais le patron d’interaction était différent. Des études futures examinant les associations entre l’IMC et la consommation d’alcool ainsi que leurs autres prédicteurs communs et uniques pourraient permettre d’élaborer des programmes de prévention plus efficaces. # 28. Développement d’un modèle de l’encéphalite de Rasmussen Tarek Shaker1, Lionel Carmant1,2 1Université 2CHU de Montréal Sainte-Justine Les inflammasomes sont des récepteurs cytosoliques multi-protéiques assemblés par le système immunitaire en réponse à des signaux tels l’invasion de pathogènes ou le stress cellulaire. L’assemblage des inflammasomes déclenche la cascade d’activation de molécules pro-inflammatoires, notamment les cytokines. Deux sous-types d’inflammasomes, NLRP1 et NLRP3, sont impliqués dans l’encéphalite de Rasmussen (RE) qui est une maladie autoimmune du cerveau latéralisée et associée à des convulsions d’origine focale et une neuroinflammation. L’infiltration de lymphocytes-T (cell-T) périphériques cytotoxiques dans le cerveau est apparemment responsable de l’inflammation focale tôt dans la pathologie. Il a récemment été démontré que le recrutement d’inflammasomes NLRP3 est requis pour la migration des cell-T cytotoxiques dans le cerveau, suggérant une implication de l’induction d’inflammasomes dans le cerveau par des cell-T dans la pathogenèse du RE. Ainsi, notre hypothèse de départ est que les cell-T NLRP3+ initient le processus neuroinflammatoire menant vers une gliose réactive et une hyperexcitabilité. De plus, nous supposons que le RE peut être dû à une insulte initiale au cerveau le rendant plus vulnérable à une infiltration de cell-T. En effet, 10% des patients RE semblent être atteints de dysplasie corticale focale (FCD). Or, nous avons détecté des inflammasomes NLRP1 dans les neurones de rats ayant subi une lésion corticale, mimant la FCD neurodéveloppementale. Ainsi, pour étudier la contribution des inflammasomes NLRP1/3 à la progression du RE, nous proposons d’utiliser un système de co-culture in vitro où des cell-T issus de la rate de ratons sont ajoutés à des tranches de cerveau en culture organotypique (OTC). Nous étudierons l’hyperexcitabilité du réseau qui sous-tend la propension aux crises dans RE par des enregistrements électrophysiologiques, ainsi que les processus inflammatoires tels que la gliose et la sécrétion de cytokines par immunohistochimie. 23 # 29. Sources d’exposition aux pesticides organophosphorés chez les femmes enceintes au Canada – Résultats de l’étude MIREC Katia Sokoloff1,2, William Fraser3,4, Pierre Ayotte5, Tye Arbuckle6, Maryse Bouchard1,2 1Université 2Centre 3Université 4Centre de Montréal de Sherbrooke 5Institut national de santé publique du Québec de recherche du CHU Sainte-Justine de recherche du CHU Sherbrooke 6Santé Canada INTRODUCTION. Les insecticides organophosphorés sont surtout utilisés en agriculture, rarement en usages domestiques. L’exposition prénatale a été associée à certains problèmes, dont un moindre poids de naissance, et des troubles neuro-développementaux. Peu de données sont disponibles sur les sources d’exposition pour la population générale, et encore moins pour les femmes enceintes. OBJECTIF. Identifier les principales sources d’exposition prénatale aux pesticides organophosphorés au Canada. MÉTHODE. Des questionnaires sur les sources potentielles d’exposition ont été administrés à 1887 femmes en grossesse simple, de l’étude pancanadienne mèreenfant sur les composés chimiques de l’environnement (MIREC 2008-2011). L’exposition aux pesticides organophosphorés a été estimée en mesurant les métabolites dimethyl (DMAP) et diethyl (DEAP) alkylphosphates dans l’urine du 1er trimestre. Des analyses de variance univariées ont été effectuées et un résultat est considéré significatif à p<0,05. RÉSULTATS. Les sources potentielles suivantes étaient significativement associées aux concentrations urinaires (i) de DMAP : habiter duplex/maison de ville, consommer café, thé vert, boissons au soja∕riz, jus d’orange, vin rouge, poivron, tomates, et fèves/pois secs; (ii) de DEAP : consommer tisane, épinards cuits, et pizza; (iii) de DMAP et DEAP : utilisation domestique de pesticides, consommer jus de pomme, ou autres jus de fruits, vin blanc, brocoli, et agrumes. DISCUSSION. Fruits et légumes frais sont connus comme source d’exposition aux pesticides. Cette étude précise les aliments et documente d’autres sources. Les DMAP et les DEAP ne proviennent pas des mêmes pesticides organophosphorés. Les sources varient selon les pesticides en question. CONCLUSION. Cette étude a permis d’identifier plusieurs sources d’exposition aux pesticides organophosphorés chez la femme enceinte, des données utiles pour prévenir une exposition excessive. # 30. Impact des convulsions fébriles et du stress sur l’hippocampe et la cognition : Revue de la littérature Fanny Thébault-Dagher1,2,3, Emilie Sheppard1,2,3, Marc-Philippe Lafontaine1,2,3, Lionel Carmant1, Sonia Lupien1, Sarah Lippé1,2,3 1Université de Montréal Sainte-Justine 3Centre de recherche en neuropsychologie et cognition (CERNEC) 2CHU Cette revue de la littérature révèle le rôle du stress dans le développement cognitif des bébés ayant souffert d’une convulsion fébrile (CF). La relation entre le stress et les CFs en lien avec le développement de troubles d’apprentissage est méconnue et n’a pas encore été explorée en recherche. Cependant, plusieurs études existent au sujet de l’impact respectif des CFs et du stress sur l’hippocampe et les fonctions cognitives. Les CFs, surtout atypiques, ont été associées à des modifications au niveau de l’excitabilité des neurones du système limbique (Chen, Baram, et Soltesz, 1999; Dube et al., 2000), ainsi qu’à une atrophie et une asymétrie hippocampique (Cendes et al., 1993; VanLandingham, Heinz, Cavazos, & Lewis, 1998). De plus, des déficits cognitifs sont présents chez 30% des enfants qui ont subi une CF atypique (Lippe et al., 2009). La littérature démontre que ces atteintes se manifestent au niveau de fonctions qui dépendent de l’intégrité de l’hippocampe, comme la mémoire ou l’apprentissage (Martinos et al., 2012). D’un autre côté, le stress chronique est aussi associé à des dommages permanents à l’hippocampe (McEwen & Magarinos, 2001), se manifestant entre autres par une diminution de la quantité de neurones actifs (Carrion, Weems, & Reiss, 2007). De plus, le stress a aussi été associé à des dysfonctions hippocampiques, telles que des difficultés en mémoire spatiale (Corbo & Brunet, 2003). Des études animales récentes présentent le stress durant l’enfance comme un facteur qui contribuerait à la survenue d’une CF, en plus d’engendrer des atteintes cognitives et d’avoir un rôle significatif dans l’épileptogénèse (Desgent et al., 2012). Dans le cadre de mon projet de thèse, nous vérifierons si les enfants ayant présenté une CF ont un indice de stress physiologique plus élevé que les enfants qui n’ont jamais présenté de CF, et si ce stress physiologique est associé à des perturbations du fonctionnement cognitif. 24 # 31. Infection par le virus epstein-barr chez les enfants greffés de cellules souches hématopoïétiques: inefficacité des immunoglobulines intraveineuses Ramatoulaye Bah1,2, Jing Hu1, Samira Mezziani3, Pierre Teira3, Chantal Buteau4, Michel Duval3, Helen Trottier5, Carolina Alfieri1,2 1Centre de recherche du CHU Sainte-Justine Microbiologie-Infectiologie-Immunologie, Université de Montréal 3Service Hémato-Oncologie, CHU Sainte-Justine 4Service Maladies Infectieuses, CHU Sainte-Justine 5Département Médecine Sociale et Préventive, Université de Montréal, CHU Sainte-Justine 2Département INTRODUCTION: L’efficacité des immunoglobulines intraveineuses (IgIV) comme traitement prophylactique contre l’infection par le virus Epstein-Barr (VEB) chez les receveurs de cellules souches hématopoïétiques n’est pas connue. Notre premier objectif consistait à déterminer l’activité neutralisante anti-VEB dans les préparations commerciales d’IgIV. Notre deuxième objectif était d’évaluer la capacité des IgIV à inhiber l’infection par le VEB des cellules souches hématopoïétiques VEB-négatives nouvellement greffées chez une cohorte d’enfants VEB-séropositifs. MÉTHODES: La capacité des IgIV à neutraliser l’infection au VEB des lymphocytes B provenant du sang de cordon a été déterminée pour 20 lots d’IgIV. Leur capacité à bloquer l’expression des antigènes nucléaires et des antigènes précoces viraux a été déterminée parallèlement. Le pouvoir neutralisant in vivo des IgIV a été évalué en faisant l’analyse de PCR quantitatives réalisées sur des échantillons de sang prélevés post-greffe chez 49 enfants VEB-séropositifs greffés de cellules souches hématopoïétiques VEB-négatives. RÉSULTATS: Les titres neutralisant la transformation ainsi que l’expression des antigènes nucléaires et des antigènes précoces ont montré une médiane à 62, 97 et 105, respectivement. Les données cliniques ont révélé que 18 des 37 patients traités avec les IgIV (48.6%) ont eu une charge virale VEB élevée dans le sang durant les 6 premiers mois post-greffe. Parmi eux, 5 patients (13.5%) ont montré une charge virale cliniquement pertinente (˃3000 copies) et 4 patients (10.8%) ont développé la maladie lymphoproliférative B post-greffe (MLP) associée à l’infection au VEB. Concernant les 12 greffés non traités avec les IgIV, seulement 3 patients (25%) ont montré une PCR positive pour le VEB, mais aucun d’eux n’a développé la MLP. CONCLUSION: Ces résultats suggèrent que les IgIV, telles qu’administrées, sont inefficaces contre l’infection au VEB chez les greffés de cellules souches hématopoïétiques. # 32. Nouvelles approches thérapeutiques pour traiter le neuroblastome Assila Belounis1,2, Martine Cordeau2, Paulo Cordeiro2, Sabine Herblot1,2, Hervé Sartelet3, Michel Duval1,2 1Université de Montréal de Recherche du CHU Sainte-Justine 3Institut Gustave Roussy 2Centre Le neuroblastome (NB) est une tumeur maligne qui touche le jeune enfant. Environ 33% des patients atteints de NB à haut risque ne peuvent être guéris par les traitements actuels. Les rechutes du NB sont dues à la présence de cellules résistantes à ces thérapies telles que les cellules initiatrices de tumeur (CIT) et les cellules GD2 négatives. La transplantation allogénique de cellules souches hématopoïétiques permet un effet du greffon contre la tumeur (GvT) représentant ainsi une approche immunothérapeutique très intéressante. Afin d’augmenter l’effet GvT, nous développons une immunothérapie basée sur l’activité anti-tumorale des cellules natural killer (NK) car ces cellules se reconstituent rapidement après la transplantation. Nous avons récemment mis en évidence in vitro que les cellules NK acquièrent la capacité de tuer efficacement et spécifiquement les neuroblastes lorsqu’elles sont activées par des cellules dendritiques plasmacytoïdes. Par ailleurs, la cytotoxicité des cellules NK envers les neuroblastes peut être augmentée par un prétraitement des cellules tumorales avec des modificateurs épigénétiques. Les objectifs de ce projet sont: i. Déterminer les mécanismes impliqués dans la cytotoxicité des cellules NK contre les cellules de NB. ii. Evaluer l’efficacité de l’activation in vivo des cellules NK sur l’éradication du NB. iii. Déterminer quels sont les modificateurs épigénétiques qui potentialisent l’activité cytotoxique des cellules NK contre les neuroblastes. L’ensemble de ces données précliniques servira de base à l’élaboration d’un essai clinique au CHU Sainte-Justine. 25 # 33. IL-2 et IL-15 : Raccourci vers la retraite pour les lymphocytes T CD8 Jean-Christophe Beltra1,2, Sara Bourbonnais1, Tania Charpentier3, Alain Lamarre3, Hélène Decaluwe1,2 1CHU Sainte-Justine de Montréal 3INRS-Institut Armand-Frappier 2Université L’épuisement clonal est le principal mécanisme par lequel les infections virales chroniques échappent au système immunitaire adaptatif. Cependant, les acteurs favorisant ce processus immuno-suppresseur restent à élucider. Notre étude s’intéresse pour la première fois au rôle de l’IL-2 et l’IL-15, deux cytokines appartenant à la famille gamma-c (γc) dans l’épuisement des lymphocytes T CD8+ (LT CD8+) au cours d’une infection virale chronique. En effet, ces cytokines sont des médiateurs clés dans la différentiation des LT CD8+ et modulent l’expression de facteurs de transcriptions récemment associés à l’épuisement. Ceci suggère que l’IL-2 et IL-15 pourraient promouvoir l’épuisement des lymphocytes T CD8+ au cours d’une infection virale chronique. L’infection de souris C57B/6 par le variant clone13 du virus de la chorioméningite lymphocytaire (LCMVcl13) reproduit une infection virale chronique semblable à la pathologie humaine. Ce modèle nous a permis d’établir une forte corrélation entre le niveau d’expression de la chaine CD122 (IL2Rβ) du récepteur à l’IL-2/15 à la surface des LT CD8+ et la sévérité de l’épuisement. Pour prouver un impact direct de l’IL-2 et l’IL-15 sur l’épuisement des LT CD8+, nous avons généré un modèle murin transgénique déficient pour la chaine CD122 (P14 IL2Rβ-/-). Nous réalisons des transferts adoptifs de LT CD8+ WT (P14) ou IL2Rβ-/- (P14 IL2Rβ-/-) dans des souris C57B/6 24h avant infection par le LCMVcl13. Nos résultats démontrent un rôle critique de l’IL-2 et IL-15 dans l’épuisement des LT CD8+. En outre, ces cytokines augmentent l’expression de multiples récepteurs inhibiteurs et favorisent le développement d’une population sévèrement épuisée (PD-1hi). De plus, l’absence de signaux via IL-2 et IL-15 restore la capacité des LT CD8+ à se différencier en cellules mémoires fonctionnelles. Ces résultats originaux démontrent un rôle majeur de l’IL-2 et l’IL15 dans l’épuisement des LT CD8+ au cours d’une infection virale chronique. # 34. Identification des déterminants sociocognitifs potentiels de l'adhésion au traitement chez les enfants et adolescents atteints d'hémophilie sévère Sarah Bérubé1,2, Georges-Étienne Rivard2, Claudine Amesse2, Nichan Zourichian2, Serge Sultan1,2 1Université 2CHU de Montréal Sainte-Justine Introduction: L'hémophilie peut être traitée par un traitement prophylactique ou sur demande et une activité physique appropriée. À l'adolescence, l'adhésion au traitement diminue considérablement. Objectifs: (1) Décrire les croyances reliées aux comportements de santé (pratique d'activité physique recommandée, évitement de l'activité physique déconseillée et adhésion au traitement médical (2) identifier les facteurs associés à l'intention des patients d'adopter les comportements de santé (croyances sur les normes sociales, attitudes, comportement, sentiment de contrôle). Méthodologie: Les questionnaires sont remplis par 25 patients atteints d'hémophilie A (88 %) et B (12%), âgés de 6 à 18 ans et suivis au CHU Sainte-Justine à Montréal, Canada, et par leurs parents, et incluent le Brief IPQ, VERITAS–Pro et -PRN ainsi qu'un questionnaire évaluant les déterminants sociocognitifs inspiré de la théorie du comportement planifié. Résultats: L'intention de pratiquer de l'activité physique recommandée est associée négativement à l’âge. Les modèles multivariés contrôlant pour l’âge et le nombre de saignements dans la dernière année montrent que l'intention de pratiquer une activité physique déconseillée est liée aux normes sociales familiales et amicales et une anticipation moindre des effets négatifs. L'activité physique recommandée est le seul comportement de soin pour lequel l'attitude en lien avec son efficacité à prévenir les saignements n'est pas ressortie comme variable explicative. La norme sociale en lien avec les autres enfants atteints d'hémophilie n'est pas ressortie comme explicative pour aucun des comportements de soin. Conclusion: Les résultats soutiennent l'importance de créer des interventions afin d’influencer les croyances des jeunes face à l'activité physique et au traitement médical durant la transition vers l'autosoin. Les interventions devraient aussi cibler les parents. 26 # 35. Nouvelle approche dans l'immunothérapie des cancers de l'enfant Aurélien Colamartino1,2, Simon Nicoletti1,4,5, Sabine Herblot2,3, Michel Duval2,3, Élie Haddad1,2 1CHU Sainte-Justine de Montréal 3CHU Sainte-Justine 4Université Paris Sud 5Hôpital Necker 2Université La leucémie aiguë lymphoblastique (LAL) est un cancer liquide affectant particulièrement les enfants. Dans 20% des cas de LAL, après les traitements de chimiothérapie, des blastes cancéreux résistent et la maladie résiduelle engendre une rechute souvent sévère et mortelle. Ces cas de résistance aux traitements actuels nécessitent le développement de thérapies alternatives. Le Neuroblastome est le cancer le plus diagnostiqué pour l’enfant de moins de un an. Les cellules cancéreuses dérivent de progéniteurs de la crête neurale. Dans certains cas le neuroblastome peut résister à toutes les options de thérapie actuelles. Ces cancers résistants nécessitent un élargissement des options de thérapie. Des approches utilisant les biothérapies sont donc mises en place pour solutionner ces impasses médicales. L’immunothérapie a pour but d’utiliser les molécules ou les cellules du système immunitaire humain pour lutter contre la pathologie ciblée. Les nouvelles stratégies immunothérapeutiques visent les antigènes de surface exprimés dans la LAL et le neuroblastome. Une stratégie de thérapie cellulaire utilisant ce mécanisme a été développée en créant des récepteur chimériques d’antigènes (CAR). Ces récepteurs utilisent un fragment externe d’anticorps monoclonal relié par un segment transmembranaire à des domaines internes de signalisation. Au contact de l’antigène il y a activation du récepteur et initiation de la cascade activatrice reliée. Ce système permet de provoquer une réponse immunitaire contre un marqueur cible non physiologique et surpasse donc la limitation liée à la reconnaissance conventionnelle des cellules malignes. L’infusion de cellules exprimant un CAR permet une destruction rapide et efficace des cellules tumorales. Mais la durée de vie de ces cellules transformées ex-vivo est très courte une fois réinjectées. L’idée ici est donc de produire en continu dans le corps ces cellules modifiées en greffant des cellules souches porteuses du transgène. # 36. Création de nouveaux modèles de déficit immunitaire par la technologie des souris humanisées Chloé Colas1,2, Yuanyi Li2, Renée Dicaire2, Natacha Patey2,3, Elie Haddad1,2,4 1Département de Microbiologie, d’Infectiologie et d’Immunologie, Université de Montréal de Cancérologie Charles-Bruneau, Centre de Recherche du CHU Sainte-Justine 3Département de pathologie et biologie cellulaire, CHU Sainte-Justine 4Département de Pédiatrie, Université de Montréal 2Centre Les mécanismes d’action de plusieurs déficits immunitaires restent aujourd'hui encore inconnus. La plupart de ces immunodéficiences sont causées par une mutation génétique dans un seul gène qui est impliqué dans plusieurs fonctions immunitaires. La création de modèles animaux de ces maladies est un outil intéressant, mais ils ne reproduisent pas toujours fidèlement la physiopathologie et l’environnement immunitaire de la maladie humaine. Le projet est donc d’humaniser des souris avec des cellules souches humaines knock-out pour le gène d’intérêt ou avec des cellules souches de patients. Plusieurs maladies génétiques dysimmunitaires nous intéressent pour cette approche, voici deux exemples: Le syndrome lymphoprolifératif lié à l'X (XLP) dû à une déficience en SAP2 (signalling lymphocyte activation molecule associated protein) se déclenche ou s'aggrave fortement lorsqu'il y a une infection par le virus Epstein-Barr (EBV). En utilisant un modèle murin humanisé déficient en SAP, nous allons pouvoir infecter les souris par l'EBV et ainsi mieux comprendre comment ce virus déclenche le dysfonctionnement du système immunitaire. L’atrésie intestinale multiple due à une mutation de TTC7A3 (tétratricopeptide Repeat Domain 7a) peut être associée à un déficit immunitaire combiné. Ce gène est donc exprimé dans de nombreux tissus épithéliaux dont le thymus, pour lequel on observe une hypoplasie. On ne sait donc pas à ce jour si la déficience en TTC7A dans ce tissu joue un rôle dans la lymphocytopénie observée. Nous souhaiterions donc mettre au point un modèle BLT knockout pour TTC7A soit au niveau des cellules hémopoïétiques, soit au niveau des cellules épithéliales thymiques afin de pouvoir répondre à cette question. Au final, notre objectif est donc d’utiliser la technologie des souris humanisées pour reproduire des déficits immunitaires dont la physiopathologie se rapproche de la maladie humaine afin d’étudier plus précisément ces déficits et de tester de nouvelles thérapies. 27 # 37. Consanguinité éloignée chez les Canadiens français et son impact sur des traits physiologiques Héloïse Gauvin1, Jean-Christophe Grenier2, Thibault de Malliard2, Vanessa Bruat2, Elias Gbeha2, Philip Awadalla1,2 1Université 2Centre de Montréal de recherche du CHU Sainte-Justine Introduction: La dépression endogamique est un phénomène qui fait en sorte que la progéniture d'individus apparentés aura une valeur sélective («fitness») réduite, par exemple, une diminution de la fertilité et dans certains cas des anomalies majeures. Le phénomène a souvent été décrit dans des populations animales et quelques fois pour des traits particuliers chez les humains. Objectifs: Décrire le niveau de consanguinité due à l'apparentement éloigné chez les Canadiens français (CF). Identifier des traits physiologiques qui sont corrélés à une augmentation de l'homozygotie. Méthodologie: Afin d’y arriver nous utilisons un échantillon de 958 individus provenant de CARTaGENE et recrutés dans trois régions du Québec (Saguenay, Québec et Montréal). Les génotypes sont générés pour ces individus à l’aide de la puce Illumina OMNI2.5. La première étape consiste à identifier les individus ayant un bagage ancestral d’origine CF. Ensuite, les génotypes sont utilisés afin d’identifier pour chaque individu les régions d’homozygotie sur le génome. Enfin des régressions linéaires ajustées pour l’âge et le sexe sont utilisées pour identifier des corrélations entre les traits physiologiques et le taux d’homozygotie. Résultats: Nous identifions 727 individus CF parmi l’échantillon. La quantité et la longueur des segments homozygotes sont différentes selon la région d’origine des individus CF. Des associations significatives sont observées pour la taille, l’indice de masse corporelle, le nombre de globules blancs et de neutrophiles. Conclusion: Le taux d’homozygotie variant d’une région à l’autre va de concert avec la structure connue de la population CF. Nos résultats confirment une fois de plus l’effet de la dépression endogamique sur la taille, un effet qui est connu et bien documenté. Cependant l’effet de l’homozygotie sur le nombre de globules blancs et le nombre de neutrophiles n’a pas, à ce jour et à notre connaissance, été documenté. # 38. Le rôle de l’Anilline dans la maturation du midbody pendant la cytokinèse Amel Kechad1,2, Gilles Hickson1,2 1CHU Sainte-Justine de Montréal 2Université La cytokinèse est le processus fondamental et conservé par lequel une cellule se divise en deux. Diverses protéines clés constituent la machinerie de la cytokinèse et plusieurs sont sur-experimées dans des tumeurs. De plus l’échec de la cytokinèse peut mener à l’aneuploïdie et causer le cancer, d’où l’importance de mieux comprendre ce processus. La cytokinèse comporte plusieurs étapes. Elle débute lorsque des signaux provenant des microtubules (MTs) du fuseau mitotique (FM) orchestrent la formation d’un anneau contractile (AC) au niveau de l’équateur. S’ensuit une phase de constriction durant laquelle la partie centrale du FM est remodelée et forme le midbody (MB), une structure dense qui régit l’abscission des cellules soeurs. En parallèle, l’AC cortical se transforme en une structure stable; l’anneau du midbody (AM). Ainsi la maturation des structures de MTs (FM, MB) et celles du cortex (AC, AM) semble liée. Or, les mécanismes régissant cette interdépendance sont peu compris. L’Anilline est une protéine d'échafaudage essentielle pour la formation de l’AM. Nous émettons l'hypothèse que l’Anilline coordonne également la maturation MB. L’ Anilline lie maintes protéines corticales et associées au MB, y compris RacGAP50C/Tum via son extrémité C-terminale conservée. Nos résultats préliminaires montrent que l’Anilline est nécessaire pour maintenir RacGAP50C au MB de cellules S2 de drosophile. De plus, l'analyse des mutants tronqués de RacGAP50C a révélé que sa région de liaison à l’Anilline est nécessaire pour la formation de l’AM et que cette fonction dépend de l’Anilline. Les études en cours permettront de tester le rôle de l'interaction entre l’Anilline et RacGAP50C et déterminer son implication dans la coordination de la fermeture de l’AC avec la maturation du MB. 28 # 39. Impact de l'interleukine-15 sur la régulation des réponses humorales Thomas Lejeune1,2, Isabelle Miguel1,2, Mairet-Khedim Mélissa11,2, Valerie Abadie1,2 1Université 2CHU de Montréal Sainte-Justine Les centres germinatifs constituent un microenvironnement spécialisé au sein duquel les lymphocytes B interagissent avec les antigènes, les cellules dendritiques, et les lymphocytes T folliculaires helper (TFH) pour induire des réponses humorales thymo-dépendantes. Les réponses immunitaires au niveau des centres germinatifs permettent de générer des anticorps de forte affinité qui jouent un rôle essentiel dans la défense de l’hôte et la tolérance immunitaire du soi. A l’opposé, la dérégulation des réponses immunitaires au niveau des centres germinatifs peut conduire à la sélection aberrante de lymphocytes B auto-réactifs et à la production d’autoanticorps, et ainsi au développement de l’auto-immunité. Bien que l’IL-15 exerce de nombreuses fonctions dédiées au maintien de l’homéostasie du système immunitaire, la surexpression de l’IL-15 a été observée dans de nombreuses maladies inflammatoires et auto-immunes, où elle contribue à la pathogénèse en altérant des mécanismes régulateurs essentiels. Cependant, la contribution de l’IL-15 dans la dérégulation des réponses immunitaires au niveau des centres germinatifs n’a pas été étudiée. En utilisant des souris transgéniques surexprimant l’IL-15 (IL-15tg), nous avons observé une altération de la composition en lymphocytes B spléniques et des lymphocytes TFH dans les centres germinatifs de souris surexprimant de l’IL-15 après administration d’un antigène modèle (OVA-NP) par voie intra péritonéale. Cependant, la production d’anticorps est plus élevée dans les souris IL15tg en comparaison avec les souris sauvages, ce qui suggère que, dans un environnement riche en IL-15, les anticorps pourraient être produits dans des sites extra folliculaires. Ce projet nous permet d’accroître nos connaissances sur la contribution de l’IL-15 dans la dérégulation des réponses immunitaires humorales et d’évaluer l’impact de sa surexpression sur le développement d’auto-anticorps qui sont caractéristiques des maladies autoimmunes. # 40. L’expression de p16INK4A est requise pour la protection contre la tumorigenèse induite par rayons ionisants Lina Palacio1,2, Le NLO1,2, Krishna V1,2, Sharpless NE3, Beauséjour CM1,2 1Université de Montréal Sainte-Justine 3Department of Medicine and Genetics, University of North Carolina School of Medicine, Chapel Hill 2CHU Le suppresseur tumoral p16INK4a est un inhibiteur de kinase cycline-dépendant qui prévient la progression du cycle cellulaire et induit la sénescence. Nous avons récemment observé que l’expression de p16INK4a augmente dans divers tissus humains et murins suite à une exposition aux rayons ionisants (IR), limitant le potentiel régénératif de lignées progénitrices/souches. Il n’est toutefois pas établi que l’expression soutenue de p16INK4a est nécessaire à la prévention de la tumorigenèse. Ceci relève un intérêt particulier sachant que l’inhibition de p16INK4a favorise la régénération de tissus irradiés. Pour tester notre hypothèse, nous avons utilisé une lignée murine à délétion p16INK4a conditionnelle afin d’évaluer si cette délétion après exposition aux IR pouvait promouvoir la régénérescence cellulaire sans favoriser la tumorigenèse. Résultats : Nous avons tout d’abord confirmé l’induction d’expression p16INK4a post-irradiation et que son inactivation subséquente menait à une augmentation de prolifération cellulaire, tel qu’observé par des études d’incorporation de BrdU. Nous avons aussi observé que la délétion p16INK4a avant-IR aux 8 semaines post-IR mène à une augmentation de l’incidence de cancer, et ce à des niveaux similaires. Conclusions : Nos résultats suggèrent que l’inactivation de p16INK4a pourrait promouvoir le potentiel régénératif de tissus irradiés, mais que son expression soutenue est essentielle à sa fonction comme suppresseur tumoral. 29 # 41. Développement et applications d'un nouveau modèle de tumorigenèse humaine en contexte immunitaire autologue Gael Moquin-Beaudry1,2, Lina Palacio1,2, Christian Beauséjour1,2 1Département 2Centre de Pharmacologie, Faculté de médecine, Université de Montréal de recherche du CHU Sainte-Justine Les études exploratoires et précliniques sur les modèles animaux sont d’une valeur inestimable pour l’avancement des connaissances dans les disciplines du domaine de la santé. Une attention particulière doit être portée pour employer les modèles les plus représentatifs de la réalité clinique afin de mieux prédire la réponse chez l’homme. Un domaine méritant une attention particulière pour le développement de modèles fiables et robustes est celui de la formation tumorale et du traitement des cancers. Présentement, les modèles utilisés sont souvent mésadaptés pour tenir compte des multiples variables de la réponse contre les cellules cancéreuses. Principalement, on ignore souvent l’apport du système immunitaire à la destruction, au maintien et à l’évolution des tumeurs. Pour remédier à cette situation nous développons un modèle de souris pourvue d’un système immunitaire humain grâce à du matériel biologique hématopoïétique fœtal permettant une reconstitution immunitaire humaine chez des souris immunosupprimées de type NSG. À partir de ces mêmes tissus, nous procédons aussi à l’isolation de cellules fibroblastiques qui pourront être transformées en cellules pré-cancéreuses par l’expression des proto-oncogènes hTERT, RasV12 et le gros antigène T du virus SV40. La combinaison de ces approches permet d’obtenir des souris pourvues d’un système immunitaire humain fonctionnel et de tumeurs issus d'un même donneur. On peut ainsi étudier les interactions entre la tumeur et le système immunitaire telles qu’elles se produisent chez des patients. De plus, puisque les tumeurs utilisées sont pré-cancéreuses, il est possible d'étudier l’évolution de celles-ci à différents stades de développement. Notre laboratoire développe ainsi un outil de travail très robuste et représentatif pour les études sur le cancer et pour l’étude de traitements complexes tels que des thérapies cellulaires afin d’améliorer les études précliniques en cancérologie. # 42. Les signaux IL-2 et IL-15 dépendants modulent la différentiation des lymphocytes T CD8 en régulant le devenir des effecteurs précoces (EECs) Cédric Mathieu1,3, Sara Bourbonnais1,3, Alain Lamarre2, Hélène Decaluwe1,3 1Université de Montréal Armand-Frappier 3Centre de recherche du CHU Sainte-Justine 2INRS-Institut Lors d’une infection microbienne, les lymphocytes T CD8 activés se différentient en deux types d’effecteurs : les Short-Lived Effector Cells (SLECs) et les Memory Precursor Effector Cells (MPECs). Alors que les SLECs deviennent les effecteurs terminaux, les MPECs sont les précurseurs des cellules mémoires. Considérant leurs destins opposés, il est nécessaire de mieux appréhender les mécanismes influençant la différentiation vers SLECs ou MPECs. En ce sens, plusieurs études ont prouvé que les cytokines IL-2 and IL-15 régulent le développement en SLECs. De plus, il a été récemment démontré que les SLECs et les MPECs proviennent de progéniteurs communs : les Early Effector Cells (EECs). Les facteurs cellulaires et moléculaires contrôlant le devenir des EECs sont cependant toujours méconnus. Nous émettons l’hypothèse que l’IL-2 et l’IL-15 influent sur la prolifération, la survie et le développement des SLECs en régulant les programmes de différentiation et le devenir des EECs. L’IL-2 et l’IL-15 signalisent via une chaine IL2Rβ commune. Ainsi, pour s’abroger des signaux IL-2 et IL-15 dépendants, nous avons généré un modèle murin déficient pour la chaine IL2Rβ. Pour tester notre hypothèse, nous avons donc comparé la cinétique de différentiation et le maintien de CD8 EEC IL2Rβ déficients ou non dans un modèle d’infection virale aiguë. Nos premiers résultats confirment que les EECs se différentient rapidement en SLECs et en MPECs. Toutefois, il subsiste toujours une faible proportion de EEC après l’élimination du virus. Nous montrons que les EECs sont aussi efficients à devenir cytotoxiques que les SLECs et les MPECs comme l’atteste leur production de Granzyme B. Finalement, nous prouvons que l’IL-2 et l’IL-15 prônent la développement des SLECs en régulant le potentiel de différentiation des EECs précoces. 30 # 43. Épuisement clonal des lymphocytes T CD8+ après transplantation de sang de cordon ombilical Insaf Salem Fourati1,2, Catherine Gravel1,2, Martine Caty1, Samira Mezziani3, Armelle Le Campion1, Michel Duval3,4, Hugo Soudeyns1,2,4 1Unité d'immunopathologie virale, Centre de recherche du CHU Sainte-Justine de microbiologie, infectiologie et immunologie, Université de Montréal 3Service d'hémato-oncologie, CHU Sainte-Justine 4Département de pédiatrie, Université de Montréal 2Département La transplantation de sang de cordon ombilical (TSCO), traitement de choix pour plusieurs pathologies hématologiques, est associée à des risques plus élevés d’infections opportunistes que la transplantation de moelle osseuse (TMO). Ceci nous a amenés à poser des questions quant au potentiel fonctionnel des lymphocytes T CD8+ du SCO. Le présent projet vise à i) identifier le répertoire de biomarqueurs d’épuisement clonal (PD-1, 2B4, CTLA-4, TIM-3, BTLA et LAG-3) exprimés par les lymphocytes T CD8+ après une TSCO ou une TMO; ii) vérifier si l’expression de ces récepteurs est associée avec la différenciation des lymphocytes T (naïve-effecteur-mémoire) et/ou avec l’expression de CD69, un marqueur d’activation précoce; et iii) caractériser l’effet de l’expression de ces récepteurs sur la capacité proliférative des lymphocytes T. Cette étude longitudinale porte sur de jeunes receveurs de TSCO (n=24) ou de TMO (n=13) et comprend un suivi de 24 mois. On a noté une augmentation significative de la fréquence des lymphocytes T CD8+ exprimant PD-1, 2B4, PD-1 et 2B4, ou PD-1 et BTLA pendant les premiers 3 mois post-TSCO. À l’exception de PD-1, ce changement phénotypique n’a pas été observé chez les receveurs de TMO. De plus, l’expression de PD-1 ou de 2B4 était restreinte aux lymphocytes T CD8+ effecteurs-mémoires et n’était pas associée avec l’expression de CD69. Enfin, les lymphocytes T CD8+ marqués au CFSE et exprimant au moins un récepteur inhibiteur ont moins proliféré que les cellules contrôles suite à une stimulation in vitro. Ces résultats indiquent que les lymphocytes T CD8+ présents dans la circulation des receveurs de TSCO, contrairement à leurs homologues retrouvés après une TMO, acquièrent un phénotype épuisé qui altère leur profil de différenciation, les rend plus sensibles aux signaux inhibiteurs qu’aux signaux activateurs, module leur capacité proliférative à la baisse et entrave leur fonction. # 44. Phenotypic and functional characterization of NK cells in Crohn disease patients vis-à-vis healthy control subjects Suzanne Samarani1, Patrick Sagala1, Collette Deslandres2, Guy Grimard2, Claire Dupont1,2, Prevost Janchou1,2, Devendra Amre1,2, Ali Ahmad1,2 1Université 2CHU de Montréal Sainte-Justine Activated Natural Killer (NK) cells have the potential to kill body own cells and contribute towards tissue destruction and inflammation. Crohn disease is a chronic inflammatory disease affecting gastrointestinal tract especially colon in children and adolescents. In order to investigate whether NK cells may play a role in its pathogenesis, we compared activation status and cytotoxic activity of peripheral blood NK cells between Crohn disease patients and healthy control subjects. The investigations were performed ex vivo directly on whole blood taken from the patients as well as from the healthy control subjects. We found non-significant differences between total number of NK (CD3-CD56+) cells between patients and controls. However, CD3-CD56bright subpopulation was decreased in the patients, whereas CD3-CD56+CD16+ subpopulation showed the reverse trend. The NK cells from the patients expressed higher levels of CD69, activating KIRs, NKG2D and IL-23R. They also had higher expression of CD107a (a marker of degranulation history) on their surface. The expression was higher constitutively as well as in response to incubation with NK-sensitive K562 cells. Furthermore, the NK cells from the patients showed higher cytotoxic activity against K562 cells. Collectively, these results suggest that peripheral blood NK cells from Crohn disease patients are highly activated and show enhanced cytotoxic potential. Therefore, they are very likely to play a role in the pathogenesis of the disease and hence could represent important targets in this disease. 31 # 45. SNooPer: une méthode d'apprentissage automatique pour l'identification de variants somatiques à partir de données de séquençage nouvelle génération Jean-François Spinella1,2, Ramon Vidal1, Virginie Saillour1, Pauline Cassart1, Chantal Richer1, Manon Ouimet1, Jasmine Healy1, Daniel Sinnett1,2 1CHU Sainte-Justine de Montréal 2Université Les avancées du séquençage nouvelle génération ont permis une interrogation en profondeur et non-biaisée des génomes tumoraux. Bien que plusieurs outils d'identification de variants somatiques ont été développés et sont couramment utilisés, une caractérisation efficace de ces variations reste un défi considérable comme l'illustre le faible chevauchement des résultats fournis par ces algorithmes. Étant donné que les méthodes disponibles présentent de bonnes performances lorsque les données sont idéales (e.g. couverture élevée, échantillon tumoral homogène, fréquence allélique élevée) mais présentent des limites lorsque les données sont de qualité sous-optimale, nous proposons SNooPer, une approche d'apprentissage automatique hautement versatile qui utilise un modèle de classification Random Forest permettant d'identifier de façon efficace des variants somatiques au sein de données de séquençage faiblement couvertes. SNooPer utilise un sous-ensemble de positions variantes pour lesquelles la classe est connue (''réelle'' ou ''erreur'') afin d'entraîner un modèle spécifique aux données. En utilisant les données de séquençage de 40 leucémies pédiatriques, nous démontrons comment SNooPer surpasse les algorithmes de référence (JointSNVMix2, VarScan2, MuTect) et peut être utilisé pour réduire le coût global de séquençage en maintenant une spécificité et une sensibilité élevées, y compris sur des données faiblement couvertes. Le but de tout projet de séquençage de tumeur est d'identifier une liste pertinente et limitée de variants somatiques pour ensuite étudier leur impact éventuel, toutefois la complexité inhérente aux génomes tumoraux, combinée aux problèmes techniques, peuvent altérer la sensibilité et/ou la spécificité de la plupart des algorithmes. Dans ce contexte, la flexibilité de SNooPer protège des biais techniques, des erreurs systématiques et permet une analyse automatiquement adaptée aux données plutôt que dépendante de paramètres définis par l'utilisateur. 32 Résumés des présentations par affiche Séance 2 Maîtrise Postdoctorat Stagiaires Personnels de recherche 15 h 50 à 17 h 00 33 # 46. Le rôle du gène Lrp6 dans la voie de la polarité cellulaire planaire durant la neurulation Abdul-Rahman El-Hassan1, Baptiste Coutaud1, Marie Claude Guyot1, Monica Justice2, Zoha Kibar1 1Centre 2The de recherche du CHU Sainte-Justine, Université de Montréal Hospital for Sick Children, Université de Toronto La voie de signalisation Wnt joue un rôle majeur dans la prolifération et la différenciation cellulaire, dans la spécification des axes embryonnaires et dans plusieurs processus morphogénétiques. Les deux voies principales de signalisation liées au Wnt sont la voie canonique de β-caténine et la voie non canonique de la polarité planaire cellulaire (PCP). Des défauts au niveau de ces deux voies mènent à des cancers et des anomalies du tube neural (ATN) respectivement. Des études récentes ont montré un rôle important d’un groupe d'interrupteurs moléculaires dans la régulation de ces 2 voies. Ces protéines incluant Lrp6 activent une voie et inhibent l’autre simultanément. La perte de l'expression de Lrp6, un co-recepteur de Wnt qui active la voie canonique, a été associée à des ATN chez la souris (Spina bifida). Alors même si Lrp6 est connu pour son rôle dans la voie canonique, il semblerait qu'il aurait un effet sur la voie non canonique. Dans cette étude on émet l'hypothèse que Lrp6 jouerait le rôle d'un interrupteur moléculaire d'un antagonisme sensible au dosage entre les voies canonique et non-canonique de Wnt. Nous avons conduit des études d'interaction génétique entre des souris mutantes de la voie Wnt canonique, Skax26m1Jus et Lrp6GT qui présentent un allèle hypermorphe et un knockout de Lrp6 respectivement, et une souris mutante de la voie non canonique Vangl2 Lp (Lp). Chacune des souris mutantes Skax26m1Jus et Lrp6GT interagit génétiquement avec Vangl2 Lp en causant des ATN chez les doubles hétérozygotes. Nous mesurerons l'activité de la voie canonique et de la voie non-canonique chez ces doubles hétérozygotes par des essais des gènes rapporteurs dans des fibroblastes embryonnaires de souris (FES) E13.5. Nous mesurerons aussi le niveau de l’ARN des gènes cibles de la voie Wnt canonique par PCR à temps réel chez les FES E13.5. Notre étude contribuera à mieux comprendre le rôle de Lrp6 comme interrupteur moléculaire des 2 voies Wnt et son association aux ATN. # 47. Puissance spectrale en magnétoencéphalographie comme prédicteur de la performance dans une tâche de mémoire de travail Victor Oswald1,2, Sarah lippé1,2, Karim Jerbi1, Younes Zerouali1, Aubrée Boulet-Craig1,2, Caroline Laverdière2, Daniel Sinnett2, Pierre Jolicoeur1, Maja Krajinovic2, Philippe Robaey1,2 1Université 2CHU de Montréal Sainte-Justine INTRODUCTION : Plusieurs mesures de l'activité cérébrale au repos pourraient prédire la performance cognitive, cependant peu d’études s’intéressent aux rôles des oscillations cérébrales dans ce contexte. L’objectif de ce projet est d’identifier les bandes de fréquences au repos qui prédisent la performance en mémoire de travail verbale (MTV) et spatiale (MTS). MÉTHODE: 18 sujets en santé ont été soumis à des tests de mémoire de travail verbale (WAIS IVworking memory) et spatiale (Wechsler memory scale - spatial addition). L’activité cérébrale a été enregistrée au repos en magnétoencéphalographie (MEG), les yeux ouverts devant un écran gris. Après avoir enlevé les artefacts oculaires (mouvement et clignement) et cardiaques, nous avons calculé la moyenne de la puissance de la décomposition du spectre fréquentiel (PSD) pour chaque bande de fréquence (Delta, 1-4Hz; Thêta, 4-8Hz; Alpha, 813Hz; Beta, 13-30-Hz; Gamma1, 30-59Hz; Gamma2, 61-90Hz; Gamma3, 90-120Hz; Large Gamma, 30-120Hz) pour chaque sujet. Les puissances ont été normalisées puis corrélées avec la performance aux tests neuropsychologiques en utilisant une méthode d’analyse par clusters qui forment des régions d’intérêt en groupant plusieurs capteurs significatifs. RÉSULTATS: Pour la MTV, les régions corrélées (r=0,1-0,6 ; p=0,001) sont fronto-parietale (FP) droit pour le Delta, fronto-temporale (FT) droit pour le Thêta, parieto-occipitale (PO) droit pour l'alpha et FT gauche pour le Gamma3. Pour la MTS, les régions corrélées (r=0,1-0,6 ; p=0,001) sont FP pour le Delta, PO pour le Beta et anticorrélées (r=0,45, p=0,001) pour le Gamma1, Gamma2, Gamma3. La MTV et MTS partagent trois régions FP droit en Delta, FP en Thêta et PO en alpha. CONCLUSION: L’activité cérébrale de certaines régions au repos peut prédire en partie la performance cognitive de la mémoire de travail. De plus, nos résultats suggèrent que la MTV et la MTS possèdent leurs régions propres mais partagent aussi un même substrat fonctionnel. 34 # 48. Identification d'un site de SUMOylation atypique dans la régulation transcriptionnelle par les récepteurs nucléaires Jonathan Gagnon1,2, Nathalie Picard1,2, André Tremblay1,2,3 1Centre de recherche CHU Sainte-Justine de Biochimie, Université de Montréal 3Département d'Obstétrique-Gynécologie, Université de Montréal 2Département Objectif : Les récepteurs nucléaires agissent comme facteurs de transcription dans l'expression des gènes impliqués dans plusieurs processus reliés au métabolisme, au développement et à la reproduction. L’activité des récepteurs nucléaires peut être modulée par des ligands hormonaux, mais aussi par des modifications post-traductionnelles dont la SUMOylation, une modification décrite récemment pour plusieurs protéines. Récemment, notre laboratoire a identifié un nouveau motif de SUMOylation non-consensus nommé pSuM. Le rôle de cette SUMOylation atypique reste encore inconnu et cette étude vise à caractériser ses effets sur les récepteurs nucléaires ERb et Nor1, deux récepteurs qui possèdent le site pSuM. Résultats: Nos résultats démontrent que la SUMOylation atypique régule la réponse à l’estrogène du récepteur estrogénique ERb au niveau de la lysine 4 du récepteur et ce, sous le contrôle de la phosphorylation par la kinase Erk. De plus, le site pSuM de ERb possède une extension qui permet la phosphorylation par GSK-3b pour potentialiser la SUMOylation. Nor-1, un récepteur nucléaire orphelin dérivé des neurones, possède également un site pSuM. Nous démontrons que Nor-1 est une cible de la SUMOylation qui, de plus, est sous le contrôle de la voie Erk. Également, la SUMOylation sur le site pSuM de Nor-1 est impliquée dans la réponse transcriptionnelle du récepteur suggérant ainsi un rôle important de la SUMOylation atypique sur le récepteur Nor-1. Conclusion: Les résultats de cette étude nous permettent d'identifier un nouveau processus de SUMOylation impliqué dans la fonction des récepteurs nucléaires. Avec des fonctions associées à la reproduction pour ERb et à l'intégrité neuronale pour Nor-1, ces résultats suggèrent un rôle de la SUMOylation impliquée dans plusieurs réseaux géniques et processus physiologiques. # 49. Facteurs associés au profil d'activités des jeunes diabétiques de type 1, incluant le type de traitement à l'insuline Isabelle Michaud1,2,3, Mélanie Henderson1,2, Laurent Legault4, Marie-Eve Mathieu1,2 1Université de Montréal Sainte-Justine 3Statistique Canada 4The Montreal Children’s Hospital 2CHU Le traitement du diabète de type 1 (DT1) a récemment évolué avec l’utilisation de la pompe à insuline. En milieu pédiatrique, ce dispositif est de plus en plus prescrit. À ce jour, seulement une étude norvégienne a investigué l’impact de la pompe sur le niveau d’activité physique (AP) et elle a révélé que l’utilisation de la pompe comparée aux injections à insuline multiples n’est pas associée au niveau d’AP des patients. Le but de l’étude est donc de dévoiler le profil d’activité complet des enfants canadiens ayant le DT1 selon le type de traitement à l’insuline (pompe ou injections), incluant les barrières à la pratique d’AP. L’étude a été effectuée à la Clinique du Diabète du CHU Sainte-Justine, Montréal, Canada, auprès de 188 patients de 6 à 17 ans ayant le DT1 et un de leur parent. La durée moyenne du diabète était de 5,3 ± 3,6 ans, 56% des patients étaient des garçons et 60% utilisaient la pompe. De plus, 76% et 56% des patients ne suivaient pas les recommandations en AP et en sédentarité respectivement. Aucune différence significative entre les types de traitements pour les niveaux d’activités sédentaires et physiques, ni pour les barrières à l’AP, n’a été identifiée malgré des différences cliniquement d’intérêt. Par contre, indépendamment du type de traitement, la peur des hypoglycémies était la barrière à l’exercice la plus importante avec 26% des patients rapportant cette barrière. Fait à noter, les adolescents dont les parents pratiquaient une grande variété d’AP étaient ceux qui faisaient le plus d’AP (ß=1.61; p=0.003) et ceux qui passaient le moins de temps devant les écrans (OR=0.52; p=0.079). En conclusion, cette première étude canadienne confirme les résultats norvégiens selon lesquels le type de traitement n’est pas associé au profil d’activité des patients DT1. Toutefois, une grande variété d’activités physiques pratiquées par les parents se révèle être un facteur déterminant d’un mode de vie plus sain des adolescents ayant le DT1. 35 # 50. Altérations du profil lipidique et de la composition lipoprotéique chez les survivants de la leucémie lymphoblastique aiguë Sophia Morel1, Fournier M1, Leahy J1, Poulain F1, Marcil V1,2, Levy E1,2 1Université de Montréal 2Centre de recherche du CHU Sainte-Justine Résumé: Les survivants de la leucémie lymphoblastique aiguë (LLA) pédiatrique sont susceptibles de développer des complications cardiométaboliques telles des dyslipidémies. Cependant, les mécanismes expliquant ces effets à long terme demeurent énigmatiques. Il est connu que des dérangements métaboliques peuvent modifier la composition des lipoprotéines, mais l’impact des conditions entourant la LLA sur ces processus demeure inconnu. Objectif: Ce projet de recherche a pour objectif d’identifier les altérations du profil lipidique et de la composition des lipoprotéines (VLDL, LDL, HDL2 et HDL3) chez les enfants et jeunes adultes survivants de la LLA recrutés dans le cadre du projet PETALE au CHU Sainte-Justine. Méthode: Le profil lipidique/lipoprotéique (LDL, HDL, triglycérides) des survivants de la LLA (n=80) et des sujets contrôles (n=22) appariés pour le genre et l’âge a été déterminé. Pour chaque sujet, les lipoprotéines ont été isolées par ultracentrifugation. Les différentes classes de lipides ont été dosées dans chaque lipoprotéine par colorimétrie. Résultats: Nos données montrent des valeurs lipidiques/lipoprotéiques anormales chez une grande proportion des survivants de la LLA, soient des triglycérides (16%) et des LDL élevés (16%), et des HDL bas (31%). De plus, chez les survivants présentant une dyslipidmémie, plusieurs altérations de la composition en lipoprotéines ont été observées. Particulièrement, nos résultats révèlent un plus grand ratio de la taille des VLDL (1.33 +/- 0.39 vs. 1.00 +/- 0.38, P=0.002) et une proportion élevée de triglycérides (4.16 +/- 1.51 vs. 3.14 +/- 1.29, P=0.0092) mais faible en phospholipides (32.04 +/- 4.26 vs. 35.04 +/6.02, P=0.026) dans les HDL2. Conclusion : Ces résultats divulguent des perturbations du profil lipidique et lipoprotéique chez un nombre inquiétant de survivants de la LLA et dévoilent le risque important de complications cardiovasculaires auquel ils sont exposés. # 51. Effets préventifs ou curatifs des polyphénols de la pomme après induction d’une colite ulcéreuse chez l’animal Yeganeh P1,2, Denis MC 1,2, Garofalo C 1,2, Sane A T1,3, Garofalo C1, Levy E1,2,3 1CHU Sainte-Justine de Nutrition, Université de Montréal 3Departement de Chimie, Université de Montréal 4INAF 2Departement Problématique: la muqueuse intestinale est exposée à des agents oxydants. Une diète riche en fruits et légumes peut diminuer le stress oxydant (OxS). Ces effets bénéfiques peuvent être attribuables à leur contenu élevé en polyphénols. En raison de leur puissante capacité anti-OxS, on a émis l’hypothèse que les polyphénols de la pelure de pomme (DAPP) aideraient à maintenir l’homéostasie intestinale en situation de OxS et d’inflammation. L’objectif principal est d’évaluer les aspects préventifs et curatifs des DAPP sur les MII en spécifiant leurs bénéfices cliniques et voies mécanistiques. Méthodologie : L’induction de l’inflammation intestinale chez la souris C57BL6 est effectuée par administration de l’agent inflammatoire DSS à 2.5% pendant 10 jours. Des doses de DAPP (200 et 400 mg/kg/j) ont été administrées par gavages pendant 10 jours afin d’évaluer les effets d’une consommation préventive ou curative de DAPP sur les paramètres macro et microscopiques, les marqueurs de l’inflammation et la balance pro/anti-OxS. Résultats : L’inflammation a provoqué une perte de poids, un raccourcissement du côlon, l’exulcération et les infiltrations au niveau du côlon distal. De plus, le DSS induit une augmentation de la peroxidation lipidique, une modulation des enzymes antioxydantes, une expression protéique à la hausse de la MPO, du COX-2 et de la production des prostaglandines E2. Les DAPP ont permis de rétablir ces déséquilibres de façon significative en situation préventive et curative; en plus de diminuer l’expression protéique de NF-κB et des cytokines (TNF-a et l’IL6). D’autre part, l’augmentation des facteurs de transcription antioxydants (Nrf-2, PGC1-a) en présence des DAPP a permis d’augmenter la défense antioxydante. Conclusions: Les polyphénols des DAPP diminuent le stress oxydant et réduisent l’inflammation dans les MII. Par conséquent, l’évaluation des effets curatifs et préventifs des DAPP pourra être envisageable cliniquement chez les individus ayant une MII. 36 # 52. Étude de la cardiotoxicité des anthracyclines: développement d'un modèle in vivo chez le gros animal Clemence Balosetti1,2, Daniel Curnier2,3, Hélène Héon5, Nagib Dahdah2, Matthias Freidrich4, Farida Cheriet1,2, Delphine Périé1,2 1Polytechnique 2CHU 3Université 4Institut Montréal de Montréal Sainte-Justine de Cardiologie de Montréal 5CRCHUM Introduction: La chimiothérapie du cancer peut être à haut risque pour le cœur, des altérations apparaissent en particulier chez les jeunes survivants recevant un haut dosage d’anthracyclines. Objectifs: Le premier but de ce projet pilote est de vérifier la faisabilité d’induire une cardiomyopathie par administration systémique de doxorubicine chez le miniporc. Le second objectif est de déterminer la sensibilité de l’IRM à détecter les changements structurels induits dans le myocarde par la doxorubicine. Hypothèses: 1) Le protocole d’administration permet le développement d’une cardiomyopathie dû uniquement à l’action de la doxorubicine, 2) Les propriétés mécaniques du myocarde sont des biomarqueurs des cardiomyopathies induites par un traitement à la doxorubicine, 3) Ces paramètres mécaniques peuvent être mesurés in-vivo par une combinaison d’outils d’imagerie par résonance magnétique. Méthodes: Afin de rester au plus proche du protocole clinique pour lequel les risques sont les plus importants, 3 miniporcs Yucatan femelles prépubères ont suivi un traitement de 5 doses de 75mg/m2 d’anthracyclines aux 3 semaines. Ils ont également subi des examens IRM (ciné, T1 et T2) et échographique en début, milieu et fin d’étude afin d’évaluer la réaction mécanique du myocarde. Des analyses hématologiques ont été effectuées durant l’étude et des échantillons de tissus ont été conservés pour étudier leur élasticité par élastographie IRM, leur biochimie et leur histologie. Résultats: Les résultats hématologiques et échographiques de notre étude pilote présentent les effets normaux de la doxorubicine sur le métabolisme et montrent le développement d’une dysfonction cardiaque visible à la toute fin du protocole. L’analyse du signal IRM devrait pouvoir détecter plus précocement les modifications structurelles dues à la doxorubicine. Conclusion: La prévention des changements cardiaques amènerait à développer de nouvelles procédures afin d’éviter le développement complet de la dysfonction. # 53. Modélisation biomécanique de la correction du tronc par rééducation posturale globale en physiothérapie pour la scoliose idiopathique adolescente Sarah Dupuis1,2, Carole Fortin2,3, Christiane Caouette2, Carl-Éric Aubin1,2 1Polytechnique Montréal Sainte-Justine 3École de réadaptation, Faculté de médecine, Université de Montréal 2CHU Objectif : Pour les scolioses modérées, la rééducation posturale globale en physiothérapie est un modèle de prise en charge alternatif ou complémentaire au traitement par corset. Notamment, le patient apprend à s’autocorriger dans le but d’améliorer sa posture et diminuer sa courbure scoliotique. L’objectif de l’étude est de développer une approche de modélisation numérique pour représenter et calculer la correction du patient, et exploiter ce modèle pour évaluer un indice de réductibilité et le potentiel de correction pour des cas cliniques. Méthodes : Le modèle numérique par éléments finis de 3 patients adolescents scoliotiques suivis en physiothérapie a été construit à partir du scan de surface et d’une reconstruction radiographique 3D. Un second scan de surface a ensuite été acquis lorsque le patient adoptait la position d'autocorrection, tel que travaillée en physiothérapie. La correction a alors été reproduite dans le modèle et évaluée biomécaniquement à l’aide d’indices tels : les angles de Cobb, la cyphose, la lordose et un indice de réductibilité. Résultats : La simulation de trois cas a permis de reproduire numériquement le mouvement d'autocorrection du patient, et de constater une réduction moyenne accrue de la courbure lombaire (25%) par rapport à la courbure thoracique (10%) (Cobb moyens thoracique, lombaire avant/pendant l’autocorrection : 34° / 31°, 33° / 25°, cyphose, lordose avant/pendant l’autocorrection : 19° / 20°, 53° / 56°). Conclusion : La méthodologie développée permet de représenter et d'évaluer biomécaniquement l'autocorrection du patient. La prochaine étape sera d'évaluer les forces générées à la colonne nécessaires au maintien de l'autocorrection et de reproduire la correction manuelle du physiothérapeute dans le modèle. À long terme, le modèle trouve son utilité comme outil d'assistance en amont du traitement conservateur de la scoliose pour planifier et optimiser le traitement de rééducation posturale globale en physiothérapie. 37 # 54. Performance cardiaque chez les survivants de leucémie lymphoblastique aiguë Marc-Olivier Lapointe1,2, Caroline Laverdière2,3, Maja Krajinovic2,3, Daniel Sinnett2,3, Gregor Andelfinger2,3, Daniel Curnier2,3 1École Polytechnique Sainte-Justine 3Université de Montréal 2CHU Introduction : L’effet cardiotoxique à long terme du traitement par anthracycline a été décrit chez les survivants de leucémie lymphoblastique aiguë (LLA). L’objectif de cette étude est d’évaluer la performance cardiaque d’une cohorte de survivants de LLA par échocardiographie et par impédance cardiographique. Nos hypothèses spécifiques sont que les effets cardiotoxiques de la chimiothérapie dépendent de la dose cumulative administrée et que la contractilité cardiaque est représentative des paramètres hémodynamiques à l’exercice. Méthodes : La fonction cardiaque a été évaluée chez 161 survivants de LLA (74 hommes) via un examen échocardiographique complet incluant le mode M, Doppler et Doppler Tissulaire 14 ± 6 ans après le traitement. La performance cardiaque a aussi été évaluée via des paramètres hémodynamiques acquis par impédance cardiographique (PhysioFlow) durant un test à l’effort. La cohorte a été divisée en 2 groupes sur la base du niveau de risque de comorbidités (94 risques élevés et 67 risques standards). La déformation longitudinale, circonférentielle et radiale du cœur au repos a été calculée à l’aide d’un logiciel dédié (EchoPAC, GE). Résultats : Les résultats démontrent que le niveau de risque n’influence pas la contractilité cardiaque, mais que celle-ci est diminuée par rapport aux valeurs qu’on retrouve chez une cohorte en santé. De plus, les patients du groupe à haut risque possèdent une forme physique significativement plus faible que les patients à risque standard (diminution de la VO2max et de la ventilation). Rapporté à la cohorte entière le déconditionnement est -14 ± 16 %. Conclusion : Bien que la fonction cardiaque ne soit pas pathologique chez les deux groupes de risque, la performance cardiaque de la cohorte entière semble diminuée par rapport à une population saine. Dans le futur, afin de confirmer cette tendance, un groupe contrôle devra être constitué. # 55. Effet d’un exercice de marche sur l’évolution de la démarche en triple flexion chez l’enfant avec une paralysie cérébrale Audrey Parent1, Annie Pouliot-Laforte2, Maxime Raison1, Pierre Marois3, Désirée B. Maltais4, Laurent Ballaz2 1École Polytechnique de Montréal du Québec à Montréal 3CHU Sainte-Justine 4Université Laval 2Université La marche en triple flexion (« crouch gait ») est fréquemment retrouvée chez les enfants atteints de paralysie cérébrale (PC) de type diplégie spastique. Elle est caractérisée par une flexion excessive des hanches, des genoux et des chevilles lors de la phase d’appui. Ce patron de marche peut mener à une fatigue musculaire précoce et à une modification du patron de marche étant donné le travail musculaire considérable nécessaire pour maintenir cette posture. L’objectif de cette étude est d’évaluer l’impact d’un exercice de marche sur la cinématique d’une démarche en triple flexion. Méthodes: Sept enfants et adolescents avec une diplégie spastique ont participé à l’étude. Ceux-ci devaient être capables de marcher durant au moins 6 minutes, et devaient présenter une flexion du genou ≥ 15° durant la phase d’appui. La cinématique complète du corps a été enregistrée avant et après un exercice de marche de 6 minutes à vitesse de marche confortable. Les variables évaluées étaient : (1) L’angle (°) maximal et minimal des hanches, des genoux et des chevilles dans le plan sagittal durant la phase d’appui; et (2) la position (m) et l’accélération (m/s2) du centre de masse (COM). Ces paramètres ont été comparés pour chaque jambe avant et après l’exercice de 6 minutes à l’aide d’un test de Student pour groupe apparié. Résultats: Suite à l’exercice de marche, la dorsiflexion et l’amplitude de mouvement de la cheville ont augmenté de façon significative (p=0,003 et p=0,011, respectivement), et la hauteur minimale et moyenne du COM ont diminué (p=0,032 et p=0,012, respectivement). Une tendance suggère une augmentation de l’angle maximal de flexion aux genoux et une diminution de la hauteur maximale du COM (p=0,057, chacun). Conclusion: Les enfants marchant en triple flexion ont tendance à s’affaisser davantage à la suite d’un exercice de marche de 6 minutes. Ces résultats sont pertinents pour évaluer l’impact d’un exercice quotidien sur la démarche en triple flexion. 38 # 56. Dimensionnement personnalisé des moteurs d'exosquelettes des membres inférieurs: étude de cas chez les enfants atteints de paralysie cérébrale Bahare Samadi1, Maxime Raison1,2, Audrey Parent1, Laurent Ballaz3, Sofiane Achiche2 1Rehabilitation Engineering Chair Applied to Pediatrics, École Polytechnique de Montréal and CRME – CHU Sainte-Justine of mechanical engineering, École Polytechnique de Montréal 3Département de kinanthropologie, Université du Québec à Montréal et CRME – CHU Sainte-Justine 2Department Introduction : Les exosquelettes des membres inférieurs sont des aides techniques de plus en plus viables pour supporter les mouvements quotidiens des patients atteints de troubles musculosquelettiques. Mais les moteurs d’exosquelettes sont actuellement sélectionnés selon des données d’analyses de mouvement chez des adultes typiquement développé (TD). Ceci génère des efforts indésirables au niveau des articulations, en particulier chez les enfants atteints de paralysie cérébrale (PC) et spastiques, rendant les exosquelettes difficilement applicables à cette population. Le dimensionnement des moteurs d’exosquelettes personnalisé à chaque individu permettrait d'optimiser les spécifications des moteurs d’exosquelettes en vue de développer un contrôle plus réactif et confortable. L’objectif de cette étude est de proposer une méthode de dimensionnement personnalisé des moteurs d’exosquelettes chez les enfants atteints de PC. Méthode. Trois enfants TD et trois enfants atteints de PC ont marché de manière naturelle dans un laboratoire de mouvement. Un modèle dynamique du corps humain a fourni les vitesses, les couples et les puissances au niveau de la hanche, du genou et de la cheville lors de cycles de marche. Résultats. Les couples et puissances moyennes ont été représentées en fonction de la vitesse pour chaque enfant TD et chaque enfant atteint de PC. Discussion et conclusion. Les puissances et couples montrent des différences nettes entre les enfants TD et les enfants atteints de PC. Ces résultats permettent de dimensionner les moteurs d’exosquelettes de chaque articulation pour chaque enfant atteint de PC. La perspective est de développer un exosquelette réactif et confortable, sur base d’une sélection et d’un contrôle personnalisés de chaque moteur pour chaque bénéficiaire, et d’étendre la méthode à d’autres populations fatigables, telles que les enfants atteints de dystrophie musculaire # 57. Génotypage d’allèles de PRDM9 contenant des doigts de zinc de type k à partir de données de séquençage de nouvelle génération Armande Ang Houle1,2, Jean-Christophe Grenier2, Vanessa Bruat2, Philip Awadalla1,2 1Université 2CHU de Montréal Sainte-Justine La recombinaison est un phénomène qui permet un échange d’information génétique entre les chromosomes homologues durant la méiose. Les évènements de recombinaison agrègent ensemble dans des régions de 1 à 2 kb, nommés hotspots de recombinaison. Leur position dans le génome est déterminée par la protéine PRDM9. Cette protéine évolue rapidement, générant plusieurs nouveaux allèles en raison d’une structure répétitive de doigts de zinc à leur extrémité C-terminale. Certains de ses allèles, contenant un doigt de zinc de type k (k-ZnF), ont été retrouvés en excès dans plusieurs cohortes de patients atteints de la leucémie aiguë lymphoblastique. Nous proposons une méthode qui permet de repérer le nombre d’allèles contenant un k-ZnF présents dans un échantillon de données de séquençage de nouvelle génération. Notre méthode est basée sur la corrélation des profils de motifs uniques à chaque ZnF entre des ensembles de courtes lectures de séquençage, représentant une paire d’allèle, et l’ensemble de courtes lectures de séquençage de l’échantillon. Une fonction de poids discrète est appliquée aux paires d’allèles ayant les coefficients de corrélation les plus élevés avec l’échantillon. La classe génotypique prédite pour l’échantillon est celle ayant le score le plus élevé. Nous validons l’efficacité de prédiction avec des simulations d’échantillons de données de nouvelle génération, à différentes couvertures. Notre méthode semble également capable de déterminer la classe génotypique de PRDM9 à partir d’échantillons dont l’allèle n’a pas été préalablement observé, ce qui est un avantage majeur lorsque nous considérons l’évolution rapide du gène. Cette méthode pourra être utilisée afin d’identifier s’il y a un excès d’allèles de PRDM9 contenant des k-ZnF dans d’autres cancers pédiatriques, permettant peut-être éventuellement l’identification de facteurs génétiques contribuant à la détection précoce de cancers. 39 # 58. La proscillaridine comme traitement épigénétique pour la leucémie lymphoblastique aiguë pédiatrique Gregory Armaos1,2, Annie Beaudry2, Noël Raynal1,2 1Département 2CHU de pharmacologie, Faculté de médecine, Université de Montréal Sainte-Justine La leucémie lymphoblastique aiguë (LLA) représente 25% des cancers pédiatriques diagnostiqués chaque année. 80 % des patients connaissent une rémission suite aux traitements classiques. Malheureusement, certains patients résistants ou qui rechutent suite à ces traitements sont associés à un mauvais pronostic. Les altérations épigénétiques sont connues pour être des facteurs principaux impliqués dans le développement et la progression de la leucémie, ainsi que la résistance aux traitements. Lors d’un criblage de médicaments approuvés par la FDA, nous avons découvert une dizaine de molécules ayant des caractéristiques épigénétiques qui pourraient être utilisées pour le traitement des LLA. Nous émettons l’hypothèse qu’une de ces molécules, le glucoside cardiotonique proscillaridine A, aurait des effets épigénétiques et anticancéreux dans des modèles précliniques de LLA et pourrait être repositionné pour le traitement de la leucémie pédiatrique. Pour tester notre hypothèse, nous avons traité trois lignées cellulaires de LLA Reh (non-T; non-B), Nalm-6 (pre-B LLA) et Molt-4 (T-LLA) in vitro pendant 48 heures à des doses pertinentes sur le plan clinique pour ensuite analyser les effets de la molécule. Nous avons observé une inhibition dose dépendante de la croissance dans les trois lignées, avec des valeurs d’IC50 de 3.4, 2.7 et 2.1 nM dans les Reh, les Nalm-6 et les Molt-4. Nos études sur le cycle cellulaire, utilisant le BrdU, démontrent un arrêt du cycle en G2M. Par RT-qPCR, nous avons également pu observer une augmentation d’expression de régulateurs du cycle cellulaire importants, tel que p21, ainsi que des modifications d’expressions de régulateurs épigénétiques comme CREBBP, DNMT3a et EZH2. Finalement, nous avons détecté des changements au niveau de la méthylation et l’acétylation des histones par Western blot. Ces résultats prometteurs illustrent les perspectives d’utiliser la proscillaridine comme nouvelle thérapie chez des patients résistants ou réfractaires. # 59. Test de marche de six minutes comme indicateur de la condition physique chez les survivants d'une leucémie lymphoblastique aigue Jessica Audet1,2, Valérie Lemay1,2, Caroline Laverdière2,3, Maja Krajinovic2,3, Daniel Sinnet2,3, Gregor Adelfinger1,2, Daniel Curnier1,2 1Laboratoire de physiopathologie de l'exercice (LPEX), Département de Kinésiologie, Université de Montréal de recherche du CHU Sainte-Justine 3Département de Pédiatrie, Université de Montréal 2Centre Contexte : Le test de marche de six minutes permet d’estimer la condition physique du patient. Il est largement utilisé en réadaptation. Il existe des équations permettant d’estimer la consommation d’oxygène maximale du sujet à partir de données anthropométriques et de la distance parcourue au test de marche de six minutes. Ces équations ne sont cependant pas adaptées à une population spécifique tels les survivants d’une leucémie lymphoblastique aiguë (LLA). Objectif : L’objectif principal de cette étude est de déterminer s’il serait possible de raffiner l’équation existante permettant d’estimer de façon adéquate la VO2max des survivants d’une LLA par des facteurs qui leur sont propres. Design : Les résultats au test de marche de six minutes de 150 patients de l’étude Pétale à Ste-Justine sont mis en relation par régression linéaire multiple. Méthode : L’analyse s’est déroulée en plusieurs étapes dont deux essentielles. Le premier modèle à être développé comprenait les valeurs de sexe, poids (kg), taille (cm), âge (année) et la distance parcourue (m). Le modèle fut par la suite raffiné par des valeurs physiologiques (FC en fin de test) et par le risque encouru par le patient. Résultats : Le premier modèle a permis d’obtenir un R=0,7245. L’équation raffinée en y incorporant les valeurs FC en fin de test et le risque permet d’obtenir un R=0,7929. Conclusion: Nos analyses préliminaires nous permettent d’affirmer que le facteur de risque et le niveau de FC atteinte lors du test permettent de raffiner la corrélation prédictive de la VO2max. Cette relation permet d’appuyer la pertinence de l’utilisation du test de marche de six minutes pour obtenir une estimation de la VO2max chez les LLA. 40 # 60. Détermination du mode de liaison des chimiokines SDF-1 et ITAC au récepteur atypique CXCR7 Besma Benredjem1,2, Nikolaus Heveker1,2 1Université 2CHU de Montréal Sainte-Justine Les chimiokines sont des petites protéines secrétées dont la fonction principale est la stimulation de la migration de cellules immunitaires vers différents tissus et organes. Elles sont souvent impliquées lors des maladies inflammatoires et auto-immunes dont le cancer. Ainsi, les chimiokines et leurs récepteurs couplés aux protéines G (RCPG) sont la cible pharmacologique de plusieurs essais thérapeutiques. Nous prendrons comme modèle, lors de notre étude, le récepteur atypique CXCR7. Ce récepteur est dit atypique car il ne signalise pas via la voie classique des protéines G mais plutôt via la voie des β-arrestine. CXCR7 est impliqué dans de nombreux cancers, favorise la progression métastatique et est un co-récepteur pour le virus de l’immunodéficience humaine (VIH). Cependant, aucune donnée sur son mode de liaison avec ses ligands CXCL11/ITAC et CXCL12/SDF-1 n’existe à date. Nous pensons que cette information est essentielle pour le développement efficace d’agonistes et antagonistes et nous nous sommes intéressés à identifier les résidus essentiels à la liaison de CXCR7 à ses deux ligands. Pour cela, nous avons créé une série de mutants par substitutions ou délétions d’acides aminés de la partie Nterminal, des boucles extracellulaires et des domaines transmembranaires du récepteur, avons testé leur expression par cytométrie en flux, leur liaison aux ligands par expériences de radio-liaison et leur capacité à recruter la β-arrestine par essais BRET. Les résultats obtenus seront comparés avec ceux des pairs CXCR4/SDF-1 et CXCR3/ITAC et nous permettront de conclure si c’est un mode de liaison non conventionnel du récepteur CXCR7 à ses ligands qui est responsable de son comportement atypique. # 61. Rôles de sites de phosphorylation sur le recrutement de CXCR4 de β-arrestine Julien Bonneterre1,2, Nassr Nama1,2, Mathias Plourde1,2, Nikolaus Heveker1,2 1Université 2Centre de Montréal de recherche CHU Sainte-Justine Les chimiokines sont de petites protéines impliquées dans la migration cellulaire. La chimiokine CXCL12 signalise via le récepteur CXCR4. CXCR4 est surexprimé dans plus de 20 types de cancer, et est associée à la croissance et la survie métastatique. CXCR4 signalise par deux voies principales: Gai et β-arrestine. La régulation de la voie β-arrestine demeure à préciser, mais implique les GRK. Ce projet étudie les deux voies de signalisation à l’aide des mutants de CXCR4; N119S et R134A et ce, à l’aide du BRET. Nous avons confirmé que CXCR4 N119S est un CAM à la fois sur le Gai et la voie arrestine. En revanche, R134A est un CIM, dépourvu de signalisation par la protéine G, mais recrute spontanément la β-arrestine2. Nous avons étudié la dépendance de la β-arrestine2 sur le recrutement de l'activité Gai utilisant la toxine de Pertussis, un inhibiteur de l'activation Gai. Ce qui n’abolit pas le recrutement constitutif de la β-arrestine2, démontrant le recrutement β-arrestine2 Gai-indépendante. Nous évaluons maintenant le rôle des différents sites de phosphorylation sur CXCR4 dans le recrutement de la β-arrestine aux mutants R134A et N119S, que nous émettons l'hypothèse qu’ils sont réglementés par des mécanismes différents: R134A via GRK6 Gindépendante, et N119S par activation constitutive Gai, et donc GRK 2/3. Nous avons combiné les mutations N119S et R134A avec des substitutions des sites de GRK 2/3 connues ainsi que GRK 5/6 et sites. Nous nous attendons à l'annulation de l'activité constitutive d'une CAM par l'une des mutations. Toutefois, selon notre hypothèse, l'autre CAM n’est pas affectée par la mutation réciproque. Le projet fournira de nouveaux éclairages sur les mécanismes d'activation de la voie β-arrestine de CXCR4. La signalisation par l'intermédiaire de la β-arrestine chez CXCR4 est en corrélation directe avec la croissance tumorale et est donc d'un intérêt majeur dans une optique de traitement du cancer. 41 # 62. APPROCHES COMBINATOIRES DE THÉRAPIES ÉPIGÉNÉTIQUES DANS LES SARCOMES PÉDIATRIQUES Elodie Da Costa1,2, Annie Beaudry1, Noël Raynal1,2 1CHU Sainte-Justine de pharmacologie, Faculté de médecine, Université de Montréal 2Département Les sarcomes représentent 15% des cancers pédiatriques avec un taux de survie à 5 ans estimé à 10%, indiquant la nécessité de trouver de nouvelles stratégies thérapeutiques. Dans ces tumeurs solides, quelques mutations génétiques causales ont été identifiées. Cependant, les modifications épigénétiques, incluant la méthylation de l’ADN et les modifications d’histones, sont responsables de la répression de gènes suppresseurs de tumeurs ou à l’inverse, de la surexpression d’oncogènes. Ces modifications épigénétiques sont réversibles et peuvent être ciblées pharmacologiquement par des médicaments épigénétiques. Notre étude se porte sur différentes lignées cellulaires de sarcomes : les ostéosarcomes (U2OS) et les rhabdomyosarcomes (RD). Nous étudions l’effet de la proscillaridine, un glycoside cardiotonique approuvé par la FDA des États-Unis dont nous avons récemment démontré qu’elle possède un effet épigénétique et un effet anticancéreux dans des cellules de cancer du colon. Par le biais d’essais clonogéniques, l’IC50 de la proscillaridine a pu être estimé à 6nM pour les U2OS ainsi que pour les RD, démontrant une efficacité 100 fois plus importante que dans d’autres lignées cellulaires. Le mécanisme d’action expliquant l’efficacité de la proscillaridine dans les modèles de sarcomes pédiatriques reste à caractériser. Toutefois un traitement de proscillaridine pendant 24h et 48h produit une baisse de marqueurs de répression d’histones soutenant son mode d’action épigénétique. Une meilleure compréhension des mécanismes épigénétiques impliqués dans les effets anti-cancéreux de la proscillaridine permettrait de concevoir de nouvelles approches thérapeutiques pour traiter les sarcomes pédiatriques. # 63. Nouvelle stratégie pour le traitement de la leucémie aiguë lymphoblastique (LAL) Yildian Diaz Rodriguez1,2, Martin Lelaidier1,2, Martine Cordeau1,2, Paulo Cordeiro2, Elie Haddad1,2, Sabine Herblot1,3, Michel Duval1,2 1Université de Montréal de recherche CHU Sainte-Justine 3CHU Ste-Justine 2Centre Pour les patients atteints de LAL réfractaire au traitement de chimiothérapie ou en rechute, la transplantation des cellules souches hématopoïétiques est la seule alternative thérapeutique. Pour augmenter l’efficacité de ce traitement il faut renforcer l’effet du greffon contre la leucémie (GvL), en stimulant le système immunitaire très tôt après la greffe, lorsque les cellules leucémiques résiduelles sont en faible nombre. Dans les premières semaines après la greffe, les cellules immunitaires responsables de l’effet GvL sont les cellules natural killer (NK). Nous proposons d’utiliser les cellules dendritiques plasmacytoïdes (pDC) pour stimuler l’activité cytolytique des cellules NK vis-à-vis des LAL. Nous avons établi in vitro que l’activation des cellules NK par les pDC permet de surmonter la résistance des cellules LAL et d’éliminer spécifiquement ces cellules. Nos travaux ont également permis de déterminer quels sont les mécanismes cellulaires impliqués dans cette cytotoxicité. Ces résultats nous permettent de proposer une nouvelle immunothérapie basée sur l’injection de pDC activées pour augmenter l’activité cytolytique des cellules NK après greffe. Pour tester cette hypothèse in vivo, nous utilisons un modèle de leucémie humaine chez la souris humanisée. Nous montrons que l’injection de pDC activées induit une activation des cellules NK humaines chez la souris et un contrôle de la leucémie. Ces résultats établissent les bases d’une nouvelle stratégie immuno-thérapeutique visant à éliminer la maladie résiduelle après greffe et ainsi réduire les rechutes de leucémie chez les enfants atteints de LAL. 42 # 64. Étude des effets de l'initiation précoce du traitement sur la réactivité immunitaire chez l'enfant infecté par le VIH-1 Hinatea Dieumegard1,2, Insaf Salem Fourati1,2, Jason Brophy3, Fatima Kakkar4,5, Valérie Lamarre4,5, Normand Lapointe4,5, Ari Bitnun6, Stanley Read6, Lindy Samson3, Michael Hawkes7, Hugo Soudeyns1,2,5, Epic 4 Study Group1 1Unité d'immunopathologie virale, Centre de recherche du CHU Sainte-Justine de microbiologie, infectiologie et immunologie, Université de Montréal 3Children's Hospital of Eastern Ontario, Ottawa 4Centre maternel et infantile sur le SIDA (CMIS), Centre de recherche du CHU Sainte-Justine 5Département de pédiatrie, Université de Montréal 6Hospital for Sick Children, Toronto 7University of Alberta, Edmonton 2Département L’infection à VIH ne peut être guérie car ce virus s’intègre à l’ADN de son hôte. Les personnes infectées sont traitées au moyen de thérapie antirétrovirale, qui permet de ralentir la progression de la maladie. Cette thérapie sert aussi à prévenir la transmission du VIH de la mère à l’enfant. Malgré cela, plus de 3,3 millions d’enfants vivent avec le VIH dans le monde et la majorité ont été infectés par leurs mères. En 2013, des chercheurs américains ont rapporté qu’une fillette qu’on a appelée « le Bébé du Mississippi », qui avait contracté le VIH de sa mère et avait été traitée rapidement après sa naissance avec une combinaison d’agents antirétroviraux, avait réussi à se débarrasser du VIH (virémie indétectable sans traitement). Quatre cas potentiellement similaires ont été ultérieurement identifiés à Toronto et à Ottawa. Même si la réplication virale a repris chez le Bébé du Mississipi 27 mois plus tard, cette rémission pose nombre de questions quant aux effets bénéfiques d’une initiation précoce du traitement chez l’enfant infecté. L’objectif de ce projet est de déterminer si les enfants traités précocement développent une réponse immunitaire à médiation cellulaire contre le VIH qui est quantitativement et/ou qualitativement différente de celle retrouvée chez les enfants traités plus tard. Pour ce faire, nous caractériserons la réponse anti-VIH des lymphocytes T CD8+ isolés à partir d’échantillons sanguins obtenus de ces enfants au moyen d’un test ELISpot et de panels de peptides synthétiques correspondant au clade de VIH retrouvé chez l’enfant. Nos expériences préliminaires ont permis de révéler la présence d’une réponse immunitaire spécifique au VIH chez un enfant ayant contrôlé la réplication virale depuis sa naissance. Ces résultats suggèrent que les réponses anti-VIH des cellules T pourraient contribuer au contrôle de la réplication du VIH et de l’établissement des réservoirs viraux chez des enfants traités immédiatement après leur naissance. # 65. Assemblage des tubes de septines en structures hautement organisées chez la drosophile Zlatina Dragieva1, Gilles Hickson1 1Université de Montréal Introduction : Les septines sont des protéines hautement conservées dont la dérégulation contribue aux maladies comme le cancer. Ce sont des protéines d’échafaudage qui interagissent avec le cytosquelette d’actine pour former des complexes ordonnés qui peuvent polymériser en filaments ou en anneaux, hautement organisés. Les mécanismes de polymérisation et l’organisation des septines restent à être élucidés. La Drosophile offre un système simple pour l’étude des septines avec 5 gènes de septines: pnut, sep1, sep2, sep4, and sep5 comparativement aux 13 chez l’humain. Résultats et Méthodes : 20% des cellules S2 de drosophile présentent des structures tubulaires observées à l’aide d’un anticorps contre Pnut. Pour observer la composition de ces structures et l’implication des différentes septines, on a généré une lignée cellulaire qui exprime Sep-2 GFP et des ARNi contre les différentes septines. La déplétion de Pnut par ARNi perturbe l’organisation de Sep2 GFP et le signal GFP se disperse uniformément dans la cellule. La déplétion de Sep1, par contre, cause la dispersion du signal GFP en flocons. Ceci conforme l’importance de Sep1, Sep2 et Pnut dans l’organisation des tubes de septines. On s’est aussi intéressés à la relation entre l’actine et les septines. Malgré que les tubes ne sont pas reconnus par la phalloidine, le traitement avec Latrunculin A, un inhibiteur de la polymérisation de l’actine, mène à la dépolymérisation des tubes en anneaux dans le cytoplasme. La déplétion de l’actine, la cofiline ou l’AIP1, mène au même phénotype. Un cytosquelette d’actine dynamique est alors nécessaire pour la formation et le maintien des tubes de septines. Conclusion : D'autres études auront comme but de mieux comprendre l’organisation des septines en structures hautement organisées et leur relation avec l’actine. 43 # 66. Identification de biomarqueurs génétiques pour la détection précoce des séquelles métaboliques chez les survivants de la leucémie pédiatrique Jade England1,2, Valérie Marcil2, Maja Krajinovic2, Caroline Laverdière2, Emile Levy2, Daniel Sinnett2 1Université 2Centre de Montréal de recherche CHU Sainte-Justine La leucémie lymphoblastique aiguë (LLA) représente le tiers de tous les cancers pédiatriques et est la principale cause de mortalité par maladie chez les enfants. Malgré des taux de guérison allant jusqu’à 85%, plus de 60% des survivants présentent des effets tardifs dus à la toxicité des traitements. Entre autres, on observe des complications cardiométaboliques (CM), soit l’obésité, l’intolérance au glucose, les dyslipidémies et l’hypertension. Bien que les facteurs génétiques expliquent 50% de la variance associée aux CM, peu d'études les ont pris en compte. Nos objectifs visent à caractériser le profil métabolique des survivants de la cohorte PETALE et à évaluer la contribution des facteurs génétiques dans le développement des CM. Les données cliniques, biochimiques et génomiques ont été recueillies et comparées aux valeurs seuils pour l’âge et le sexe chez les participants de cette étude (n=136, âge moyen de 22.1+/- 6.8). Nous avons effectué des études d’association avec les variantes communes et les facteurs de risque en utilisant le logiciel PLINK. Nos résultats montrent que 75% des adultes et 56% des enfants présentent au moins un facteur de risque cardiométabolique, la dyslipidémie et l’obésité étant les complications les plus prévalentes (47.8% et 33.1% respectivement). Au niveau des dyslipidémies, des associations avec des variantes dans trois gènes ont été révélées: LRP8 (p=0.004, FDR=0.44), BAD (p=0.005, FDR=0.44) et CYBA (p=0.006, FDR=0.44). Trois variantes communes dans THADA (p<0.003, FDR=0.10, 0.16 et 0.23) et deux variantes communes dans PRRC2A (p<0.015, FDR=0.26, et 0.31) ont été associées avec la résistance à l’insuline. Ces résultats suggèrent que des gènes impliqués dans le transport du cholestérol, le syndrome métabolique, les complications cardiaques ainsi que dans le développement du diabète et de l’obésité peuvent contribuer au risque de dyslipidémies et de résistance à l’insuline chez les survivants de la LLA. # 67. Étude de l’occupation parentale et le risque de la survenue de la maladie de Crohn chez les enfants Jobin Eslahapzir Esfandabadi1, Ali lalavi1, Devendra Amre1 1Université de Montréal Contexte: La maladie de Crohn est une maladie inflammatoire chronique intestinale. Il s’agit d’une maladie rare avec une incidence d'environ 6 cas par an et pour 100 000 personnes et ayant une prévalence d'environ 140 pour 100 000. Des facteurs de risque génétiques et environnementaux sont suspectés. Des facteurs génétiques expliquent moins de 20% de sa variabilité. Une grande partie de la variabilité manquante pourrait être attribuée aux facteurs environnementaux. Une source majeure de cette exposition environnementale pourrait être le contact des enfants avec des facteurs environnementaux à travers leurs propres parents. À notre connaissance, aucune étude jusqu’à présent n'a encore exploré cette hypothèse. Buts et objectifs: Nous proposons d'examiner l’hypothèse selon laquelle l'exposition professionnelle des parents pourrait conférer le risque de survenue de la maladie de Crohn chez les enfants. Méthodes: L'étude présente est proposée sur la base des données recueillies à partir d'une étude castémoins en cours sur les facteurs de risque environnementaux pour la maladie de Crohn. Pour cette étude, des enfants et des jeunes adultes ayant un diagnostic confirmé (n = 600) avec 600 témoins avec les diagnostics de traumatismes mineurs ont été recrutés à l’hôpital Saint-Justine. Analyse: L'analyse préliminaire est basée sur l'association entre la classification de différentes catégories d’emplois et le diagnostic. L’emploi de chaque parent est analysé séparément. Des modèles de régression logistique à plusieurs variables sont ajustés aux données pour explorer l'association entre les différentes catégories d'emploi et le risque de la survenue de la maladie. Résultats attendus: On s’attend à ce que l’étude en question puisse mettre en évidence des expositions professionnelles pertinentes capables potentiellement de conférer une certaine susceptibilité pour l’apparition de MC chez les enfants. 44 # 68. La relation entre les polymorphismes génétiques déterminant le nombre de globules blancs/neutrophiles et la toxicité de la chimiothérapie chez les enfants atteints de la leucémie aiguë lymphoblastique (LAL) Sanja Glisovic Joksimovic1,2, Yves Pastore1,2, Maja Krajinovic1,2, Daniel Sinnett1,2, Rania Boukrab1, Ranya Yasri1, Maria Plesa1,2 1Université de MontréaL 2CHU Sainte-Justine L'immunosuppression est un des effets secondaires fréquemment associés à la chimiothérapie. La neutropénie, la plus grave toxicité hématologique, est associée à un risque accru d’infection qui entraîne une réduction de doses de plusieurs médicaments utilisés dans la chimiothérapie ainsi que des délais dans le traitement. Cependant, des variantes génétiques impliquées dans la production de globules blancs sont associées à un faible nombre de globules blancs (WBC) ainsi que de neutrophiles (ANC) dans le sang périphérique. Nous tentons de déterminer s’il y a association entre les polymorphismes génétiques dans les gènes DARC, CXCR2 et CXCL2 ainsi que le locus ORMDL3GSDMA-CSF3 avec les résultats cliniques des patients. L'objectif est de déterminer s’il existe une relation entre les polymorphismes génétiques et la variabilité interindividuelle dans la réponse au traitement, notamment la toxicité de la chimiothérapie, la sévérité et la fréquence des complications infectieuses au cours du traitement. La sélection des SNP est basée sur l’information provenant de base de données de SNP (1000genome). Les patients traités pour la LAL au CHU Sainte-Justine entre 1989 et 2005 sont inclus dans cette étude. Les patients ont été traités selon les protocoles Dana Farber Cancer Institute (DFCI) 87-01, 91-01, 95-01 et 2000-01. Le génotypage a été effectué par la méthode ASO (‘allele-specific oligonucleotides hybridization’) pour 10 polymorphismes génétiques dans les gènes mentionnés en haut. Suite à cette analyse, nous avons trouvé des associations statistiquement significatives entre le SNP DARC rs 863006 et la présence/fréquence d’APC < 1 x 109/L (p = 0.013/p=0.006). Les études futures vont nous permettre d’analyser l’association entre ces polymorphismes génétiques et d’autres variables cliniques (la fréquence de l’infection, le nombre d’hospitalisations, nombres de jours d’arrêt dans le traitement, la dose cumulative de médicaments). # 69. Analyse des anomalies numéraires des sous-populations de lymphocytes B chez des enfants exposés aux VIH mais non-infectés Catherine Gravel1,2, Armelle Le Campion2, Laurence Raymond-Marchand1,2, Marc Boucher1,3, Normand Lapointe1,3, Valérie Lamarre1,3, Fatima Kakkar1,3, Hélène Côté4,5, Hugo Soudeyns1,2,3 1Université de MontréaL 2Unité d'immunopathologie virale, CHU Sainte-JustinE 3Centre maternel et infantile sur le SIDA (CMIS), Centre de recherche du CHU Sainte-Justine 4University of British Columbia, Vancouver 5Women’s Health Research Institute, Vancouver La thérapie antirétrovirale (TAR) peut prévenir la transmission mère-enfant du VIH dans plus de 98% des cas lorsque administrée pendant la grossesse, le travail et au nouveau-né. L’accessibilité à la TAR dans près de 70% des 1,5 millions de cas de grossesses VIH+ dans le monde mène à la naissance de plus d’un million d’enfants exposés non infectés (EENI) chaque année. Le nombre d'EENI est ainsi à la hausse ainsi que les préoccupations concernant leur santé. En effet, plusieurs groupes ont signalé une augmentation de la morbidité et de la mortalité chez les EENI. L'analyse des données rétrospectives de 705 EENI de la cohorte mère-enfant du CMIS a révélé qu’à 2 mois d'âge, les enfants nés de mères ayant une charge virale (CV) ˃1,000 copies/ml avaient une fréquence de lymphocytes B significativement plus élevés par rapport aux EENI nés de mères ayant une CV indétectable. L'objectif de cette étude est de caractériser ces anomalies. Les lymphocytes B, provenant du sang de cordon ombilical (SCO) et de sang veineux obtenu à 6 et 12 mois d’âge, ont été phénotypés par cytométrie en flux. La réponse antigène-spécifique des lymphocytes B aux vaccins de l’enfance a été mesurée par marquage avec des tétramères fluorescents de toxoïde tétanique (TT). Nous avons observé, chez les EENI, une réduction de la fréquence des lymphocytes B naïfs et une augmentation des B mémoires activés et des plasmablastes entre le SCO et 6 mois. Les fréquences de lymphocytes B mémoire classique et atypiques sont demeurées inchangées. Pour les lymphocytes B TT-spécifiques, une diminution de la fréquence des B naïfs et une augmentation des B mémoires classiques, activés et des plasmablastes a été détectée entre le SCO et 6 mois. Ces résultats suggèrent la présence de capacités fonctionnelles chez les lymphocytes B dont l’ampleur et les caractéristiques devront être analysées afin de fournir un portrait de l’immunocompétence des EENI, ce qui pourrait affecter leur prise en charge en clinique. 45 # 70. Mécanismes d'action des cellules stromales mésenchymateuses dans la réaction du greffon contre l'hôte William Lemieux1,2, Silvia Selleri1,2, Elie Haddad1,2,3 1Département de Microbiologie, d’Infectiologie et d’Immunologie, Université de Montréal de Cancérologie Charles-Bruneau, Centre de Recherche du CHU Sainte-Justine 3Département de pédiatrie, Université de Montréal 2Centre Utilisées dans le traitement de la maladie du greffon contre l’hôte chez les patients pédiatriques, les cellules stromales mésenchymateuses ne sont pas encore bien caractérisées. L’élucidation des facteurs propres à leurs effets immunomodulateurs pourrait permettre d’améliorer l’utilisation de ces cellules et pourrait fournir des cibles intéressantes afin d’augmenter leurs effets. Dans cette optique, nous avons développé un modèle In Vitro de la maladie du greffon contre l’hôte, permettant l’utilisation d’inhibiteurs chimiques et de modifications géniques pour disséquer les mécanismes impliqués. Nous avons déterminé que les cellules stromales mésenchymateuses sont capables de transférer leurs propriétés modulatrices aux cellules immunitaires en contexte inflammatoire et que la prostaglandine E2 n’est pas requise dans ce modèle. # 71. Caractérisation de la variabilité du microDNome et son impact sur la sensibilité différentielle dans les traitements de cancer Pamela Mehanna1,2, Vincent Gagné2, Mathieu Lajoie2, Daniel Sinnett1,2, Ivan Brukner3,4, Maja Krajinovic1,2 1Université de Montréal Sainte-Justine 3Jewish General Hospital, Molecular Diagnostic Lab 4Department of Medical Diagnostics, McGill University 2CHU Les microADNs sont des petits fragments d'ADN circulaires extra-chromosomiques de 200 à 400 pb. Les microADNs n'ont été caractérisés que récemment et ont été définis comme étant dérivés de séquences génomiques uniques et non-répétitives. La génération de ces entités semble avoir lieu durant la réplication de l'ADN, le processus entraînant parfois l'élimination de petits fragments d'ADN circulaire laissant place à des microdélétions chromosomiques. Ces microdélétions, situées au niveau de loci génomiques divers, pourraient ainsi modifier le profil transcriptomique d'une cellule lorsqu'une région régulatrice est altérée ou résulter en un gain/perte de fonction d'un gène en modifiant sa région codante. De plus, dans le cadre d'une pression de sélection imposée par un traitement, si elles offrent un avantage sélectif lié à une résistance, ces altérations pourraient être sélectionnées et fixées au sein des cellules les présentant. En nous basant sur ces informations, nous avons émis l'hypothèse selon laquelle la formation des microADNs s'accompagne de microdélétions qui pourraient influencer la sensibilité à la chimiothérapie. Nous avons dans un premier temps tenté de mieux caractériser ces nouvelles entités et comprendre leur rôle. Nous avons utilisé 10 échantillons provenant de lignées cellulaires LCL traitées ou non au Methotrexate, médicament utilisé lors de traitements anti-cancer. Nous avons identifié 62 microADNs redondants entre les échantillons (>2) et nous avons défini leurs régions génomiques d'origine. Parmi ces évènements, 10 microdélétions potentielles localisées au sein de régions introniques/exoniques de gènes ont été priorisées pour validation. En caractérisant l'origine génomique de ces microDNAs et en comparant les 'patterns' observés entre cellules présentant des statuts de résistances différents à une molécule, nous espérons comprendre l'influence éventuelle des microdélétions sur la sensibilité aux traitements anti-cancer. 46 # 72. Étude sur le rôle de SIGIRR dans la maladie de Crohn chez les humains Patrick Sagala1,2, Suzanne Samarani1,2, Claire Dupont1,2, Collette Deslandres1,2, Guy Grimard2, Prevost Janchou1,2, Devendra Amre1,2, Ali Ahmad1,2 1Université 2CHU de Montréal Sainte-Justine Le "Single Immunoglobulin and IL-1 Receptor Related" (SIGIRR) est une molécule possédant un domaine TIR (TLR-IL1 Receptor). Ces domaines TIR se retrouvent dans la queue cytoplasmique des TLR, des IL-1R et d’autres molécules apparentées. Cependant, et contrairement au IL-1R et TLR, SIGIRR induit des réponses anti-inflammatoires. Ce dernier possède dans sa région extracellulaire un seul "immunoglobulin-like domain". De plus, SIGIRR inhibe la signalisation pro-inflammatoire induite par les TLR et d'autres cytokines de la famille IL-1. En plus de l’expression de SIGIRR sur les cellules épithéliales intestinales (CEI), il est aussi présent sur les cellules immunitaires comme les cellules myéloïdes, NK, TH1, TH2 et TH17. Il est connu que la souris Balb/c ''KO'' de SIGIRR est plus susceptible à la colite ulcéreuse induite par le DSS. Il a été démontré récemment que SIGIRR est un récepteur pour l’IL-37, une molécule anti-inflammatoire membre de la famille de l’IL-1. Cependant, peu de choses sont connues concernant son expression et son rôle dans la maladie de Crohn (CD). La maladie de Crohn représente la forme la plus sévère et répandue parmi les maladies intestinales inflammatoires chroniques dans les sociétés occidentales. Parmi les pays occidentaux industrialisés, l’incidence de cette maladie est l’une des plus élevées au Canada. Cette maladie est caractérisée par une inflammation chronique du tube digestif. Notre hypothèse suggère que le rôle antiinflammatoire potentiel de SIGIRR est compromis chez les patients atteints de la CD. Pour cette raison, nous avons étudié l'expression de SIGGIR sur différents types cellulaires des PBMC provenant des patients atteints de CD et des sujets témoins sains en utilisant la cytométrie en flux. Nos résultats préliminaires démontrent une diminution dans l’expression de cette molécule anti- inflammatoire chez les monocytes, NK, les lymphocytes B chez les patients comparés aux contrôles. # 73. Cyclin b involvement in the mitotic end process – cytokinesis and abscission Diaz, Mélanie 1,2, Hickson, Gilles R.X.1,2 1 2 CHU Sainte-Justine Université de Montréal Un dérèglement du cycle cellulaire peut causer le cancer. Lors de la cytokinèse un anneau contractile (AC) d’actine et de myosine se forme, se contracte, et donne un anneau du midbody qui mène à l’abscision. Le processus de cytocinèse est sous le contrôle de protéines telles que la GTPase Rho qui active la cytocinèse et les cyclines-Cdks qui l'inhibent. La Drosophile possède 3 cyclines mitotiques A/B/B3 qui sont successivement dégradées en fin de mitose et permettent l'initiation de la cytokinèse (Mathieu et al., 2013). La dernière étape d’abscission est un phénomène qui reste encore peu connu. Les protéines Vps4 et CHMP4C liées à ANCHR vont, sous la dépendance d’Aurora B, promouvoir l’abscission mais de récentes études semblent indiquer une implication de la cycline B (Mathieu et al., 2013; Thoresen et al., 2014). Le but de cette étude est de déterminer de quelle manière cette cycline B semble revenir au midbody pour promouvoir l’abscission. Nous avons d’abord généré des lignées de cellules exprimant, de façon inductible, des versions de cycline B non-dégradable (CycBs) et dégradable (WT), couplées en GFP, permettant de tester sont recrutement dans le temps et l’espace. La microscopie à haute résolution sur des cellules vivantes de drosophile S2 exprimant des protéines marquées en fluorescence, indique que l’expression de CycBs prolonge la contraction de l’AC. Elle est, de plus, retrouvée au midbody de façon très transitoire dans les premiers temps du midbody mais ne semble pas recrutée au moment de l’abscission. En revanche la cycline B (WT) semble recrutée seulement avant le phénomène d’abscission. Des expériences de FRAP indiquent une localisation dynamique de cette CycB au midbody tardif. Ces résultats concordent avec des études antérieures et la poursuite de ce travail permettrait de comprendre comment la cytocinèse et l’abscission sont régulés par la CycB. 47 # 74. Abaque décisionnel de chirurgie d'enclouage pour les enfants atteints d'ostéogénèse imparfaite Christiane Caouette1,2,6, Marie-Hélène Beauséjour2, Frank Rauch1,4,5, Isabelle Villemure1,2,6, Pierre-Jean Arnoux3,6, Carl-Éric Aubin1,2,6 1CHU 2Polytechnique 3Université 4Montreal Sainte-Justine Aix-Marseille 5McGill University Montréal Shriners Hospital for children 6Laboratoire international associé en biomécanique des traumatismes et pathologies du rachis Objectifs : L’ostéogénèse imparfaite (OI) fragilise les os et cause des difformités des os longs qui requièrent une correction par enclouage chirurgical lorsqu’elles sont trop importantes ou causent des fractures. Il n’existe présentement aucun moyen objectif d’estimer le risque de fracture associé à une difformité, et le chirurgien doit se fier à son expérience. L’objectif est de concevoir un abaque décisionnel permettant d’identifier objectivement les cas à risque de fracture, afin d’assister le chirurgien dans sa prise de décision. Méthodes : Trois patients présentant des déformations du tibia n’ayant pas été opérées ont été rétrospectivement recrutés. Un modèle par éléments finis personnalisé du tibia a été construit à partir de radiographies bi-planaires et d’images pQCT puis utilisé pour évaluer la force verticale requise pour causer une fracture. Un plan d’expériences a été utilisé pour évaluer l’effet de quatre paramètres : le diamètre diaphysaire, l’épaisseur corticale, la densité trabéculaire et le degré de courbure du tibia. Un modèle de régression permettant l’estimation de la force de fracture et un abaque décisionnel pour la chirurgie ont été développés à partir de ces résultats. Résultats : L’analyse ANOVA a révélé que la densité trabéculaire n’était pas reliée à la force de fracture et donc au risque de fracture de la diaphyse. L’épaisseur corticale, la courbure du tibia ainsi que le diamètre diaphysaire étaient des facteurs significatifs pour la force de fracture. Par exemple, le patient 1 verrait sa force de fracture de 2500N augmenter à 3081N pour un diamètre augmenté de 15% ou à 3385 pour une épaisseur corticale augmentée de 20%, malgré une courbure de 20°. Conclusions : Cette étude démontre la faisabilité d’utiliser la méthode des éléments finis pour construire un abaque d’aide à la décision chirurgicale pour les patients OI. Le recrutement de nouveaux patients permettra de raffiner le modèle de régression et de valider l’abaque. # 75. Raffinement de l’estimation des forces musculaires maximales individuelles : pour une meilleure calibration du modèle de Hill Fabien Dal Maso1, Maxime Raison2, Mickaël Begon1 1Université de Montréal 2École Polytechnique de Montréal Contexte : La calibration du modèle de Hill consiste à associer la force développée par chaque muscle à son excitation. Des méthodes de calibration des forces musculaires individuelles existent, mais aucune n’a considéré les muscles antagonistes. La normalisation des signaux électromyographiques (EMG) et les modèles optimisent de nombreux paramètres ce qui diminue leur robustesse. L’objectif a été de tester différents modèles d’estimation des forces musculaires maximales individuelles. Méthodes : L’EMG des muscles du coude, la cinématique du membre supérieur et la cinétique à la main ont été enregistrés. Douze participants ont réalisé des contractions isométriques maximales du coude. Les forces musculaires ont été estimées par minimisation des moindres carrés entre le moment calculé par dynamique inverse et par EMG. Trois modalités ont été évaluées : avec vs. sans muscles antagonistes ; EMG normalisés vs. brut ; pondération globale vs. spécifique. Résultats : L’inclusion des muscles antagonistes a augmenté de manière significative les forces maximales de 19%. La normalisation de l’EMG a permis de réduire significativement l’erreur quadratique. La pondération globale a réduit le coefficient de variabilité interindividuel des forces maximales. En moyenne (amplitude), le modèle retenu a produit des forces maximales du biceps brachii de 766 N (251-1309 N), du brachioradialis de 180 N (59-308 N), du brachialis de 811 N (266-1386 N) et du triceps brachii de 2238 N (734-3825 N). Conclusion : La méthode proposée permet de diminuer l’erreur entre les moments calculés et estimés. En moyenne, les forces musculaires maximales individuelles sont comparables à celles utilisées dans les modèles musculo-squelettiques existants. Cependant, les valeurs de forces musculaires peuvent avoir un multiple de 5 d’un participant à un autre. Ce modèle étant personnalisable, son utilisation pourrait être pertinente chez des enfants. 48 # 76. La neuraminidase 1 régule positivement la signalisation à l'insuline Anne Fougerat1, Nikolaus Heveker1, Jeffrey Medin2, Alexey Pshezhetsky1 1CHU Sainte-Justine Health Network, Toronto 2University Le diabète de type 2 (DT2) est une maladie métabolique caractérisée par une hyperglycémie causée par la combinaison d'une résistance à l'action de l'insuline et un défaut de sécrétion d'insuline. La neuraminidase 1 (Neu1) appartient à la famille des neuraminidases, enzymes qui catalysent la suppression des résidus d'acides sialiques présents dans les glycoconjugués, et dont il existe 4 isoformes chez les mammifères. Outre sa fonction catabolique dans le lysosome, Neu1 est également présente à la surface cellulaire où elle module l’activité de récepteurs et par conséquent diverses voies de signalisation. Des données du laboratoire ont montré que le récepteur à l'insuline (IR) représente un des récepteurs activés par Neu1. Des souris modifiées génétiquement qui présentent 10% de l'activité Neu1 normale dans leurs tissus et nourries avec un régime gras développent une intolérance au glucose et une résistance à l'insuline deux fois plus rapidement que les souris sauvages. A présent, nous montrons que la fixation de l’insuline sur son récepteur conduit à une interaction de IR avec Neu1 qui hydrolyse alors les acides sialiques des chaînes glycanes de IR et par conséquent induit son activation. Nous démontrons également que la désialylation de IR par Neu1 induit la conformation active du récepteur. Ainsi, l'augmentation de l'activité Neu1 dans les tissus cibles de l'insuline pourrait avoir un effet protecteur contre le DT2 et atténuer la maladie dans un modèle de souris diabétique. Afin de tester cette hypothèse, nous étudierons le métabolisme du glucose et la signalisation à l'insuline chez des souris surexprimant Neu1 générées par transfert de gène via un adénovirus ou un lentivirus. Nous testons actuellement le lentivirus exprimant Neu1 in vitro et in vivo afin de confirmer sa capacité à induire une expression et une activité Neu1 stable à long terme. Cette étude pourrait conduire à identifier Neu1 comme une nouvelle cible thérapeutique pour le traitement du DT2. # 77. La lactoferrine du lait de vache diminue le stress oxydant tout en préservant le pouvoir inflammatoire dans les cellules macrophagiques thp-1. Sylvain Mayeur1, Carole Garofalo1, Marie-Claude Denis1, Alain Montoudis1, Valérie Marcil1,2, Yves Pouliot3, Emile Levy1,2,3,4 1Université de Montréal de Nutrition, Université de Montréal 3INAF, Université de Lavall 4Chaire de recherche en Nutrition JA de Sève 2Département Introduction: La lactoferrine (Lf) est une glycoprotéine produite par plusieurs types de cellules humaines mais elle se retrouve également dans le lait maternel et bovin. Elle est impliquée dans de multiples fonctions biologiques, incluant la prolifération/différentiation cellulaire, et la protection contre les infections microbiennes. Cependant, peu d'informations sont disponibles concernant ses effets et ses mécanismes d'actions sur le stress oxydatif (SO) et l'inflammation dans les macrophages qui sont des acteurs importants dans la formation de la plaque d'athérome. Objectifs: Déterminer l'impact de la Lf bovine (Lfb) sur les processus oxydatifs et inflammatoires, et définir ses mécanismes d'actions. Méthodes: Les cellules THP-1 différenciées sont utilisées pour étudier le rôle de la Lfb contre le SO et l'inflammation induits par le Fer/Ascorbate (Fe/Asc, 100µM/1mM) ou le lipopolysaccharide (LPS, 1µg/ml), respectivement. Résultats: L'addition de Fe/Asc aux THP-1 induit un SO, caractérisé par une augmentation de la production de malondialdehyde. Le traitement avec la Lfb permet de diminuer la peroxydation lipidique en mobilisant la réponse anti-oxydante tenant compte des activités de la glutathion peroxydase et la superoxyde dismutase. L'incubation des cellules avec le Lfb induit la production du facteur inflammatoire TNF-α, l’activation de la cyclooxygénase-2 (COX-2) et de l’interleukine 1β, tout en stimulant la translocation nucléaire de NF-kB. La comparaison cinétique de la Lfb et du LPS laisse voir les mêmes effets inflammatoires et mécanismes d’action à l’instar de l’activation de NF-kB. Conclusion: La Lfb présente des effets pléiotropiques avec une action bénéfique sur le SO et le maintien de l’activité pro-inflammatoire qui pourrait être nécessaire pour renforcer la fonction immunitaire des cellules macrophagiques. 49 # 78. Une mutation somatique rare au niveau de la protéine du complexe Shelterin des télomères TPP1 agit comme driver de la leucémie aiguë lymphoblastique pédiatrique Pauline Cassart1, Jean-François Spinella1,2, Jasmine Healy1, Nicolas Garnier1, Philippe Rousseau3, Claire Drullion1, Ramon Vidal1, Virginie Saillour1, Chantal Richer1, Manon Ouimet1, Stephan Busche4,5, Bing Ge4,5, Tomi Pastinen4,5, Chantal Autexier3,5, Daniel Sinnett1,2 1CHU Sainte-Justine 3Lady Davis Institute 5Université McGill 2Université 4Centre de Montréal D'Innovation Génome Québec La leucémie aiguë lymphoblastique (LAL) pédiatrique est une maladie hétérogène tant au niveau biologique que clinique. Nous sommes convaincus que la caractérisation complète de la complexité génomique sous-jacente de la LAL pédiatrique nécessite l'identification des mutations somatiques « drivers » récurrentes, mais également des événements rares. En se basant sur cette hypothèse, grâce à l’utilisation du séquençage de haut débit, nous avons été en mesure de générer un répertoire complet des mutations somatiques privées et récurrentes d’un patient atteint de LAL. Le développement en interne d’une stratégie d’analyse restrictive nous a permis d’identifier celles étant le plus susceptibles d'avoir un impact fonctionnel et de les hiérarchiser en fonction de leur implication potentielle dans la tumorigenèse. Nous avons identifié une mutation faux-sens rare (p.G223V) dans le domaine oligonucleotide/oligosaccharide (OB) de la protéine TPP1/ACD, membre du complexe Shelterin qui est responsable du maintien de l'intégrité des télomères. Cette mutation n’a présenté aucune autre occurrence dans une cohorte étendue de 600 patients LAL pédiatriques, ni dans les bases de données publiques de cancer. Grâce à des essais de cytotoxicité, nous avons démontré un effet protecteur de la mutation TPP1 p.G223V contre l'apoptose dans les cellules leucémiques. De plus, en sachant que la protéine TPP1 joue un rôle clé dans la protection des télomères et le recrutement de la télomérase, des essais de restriction de fragment de télomères (TRF) nous ont également permis de montrer que cette nouvelle mutation entraîne une augmentation de la longueur du télomère dans les cellules leucémiques. Cette étude a permis d’identifier la première mutation somatique dans TPP1 conduisant à un impact fonctionnel et souligne l'importance de mutations somatiques rares/privées dans la compréhension de l’étiologie de la LAL pédiatrique. # 79. Caractérisation de la désensibilisation du récepteur δ–opioïde (DOR) par des agonistes ayant des signatures de signalisation distinctes Ahmed Mansour1,2, Karim Nagi1,2, Johanie Charbonneau2, Graciela Pineyro1,2 1Département 2Centre de pharmacologie, Faculté de médecine, Université de Montréal de recherche du CHU Sainte-Justine Les agonistes des récepteurs opioïdes sont utilisés pour le traitement de douleurs sévères. Malheureusement, ils entraînent de nombreux effets secondaires comme la tolérance. Dans cette étude, nous nous intéressons aux récepteurs δ–opioïdes (DOR) et à certains de ses agonistes qui ont des réponses signalétiques différentes. Nous voulons déterminer si les agonistes ayant des profils de signalisation différents présentent aussi des différences dans leur potentiel à induire une désensibilisation du récepteur à court terme, qui est un des mécanismes de tolérance. Pour ce faire, des cellules HEK293 ont été transfectées transitoirement avec un biosenseur basé sur la technologie BRET (Protéine G : Gαi1-Luc, Gγ2-GFP and Gß1) conjointement avec DOR rat. Cela nous permet de déterminer l’efficacité des différents agonistes DOR à induire l’activation de la protéine G. Suite à un court traitement par ces différents agonistes afin d’induire une désensibilisation rapide, des courbes doses-réponse pour deux agonistes: DPDPE (imperméable à la membrane cellulaire) et d’AR-M100390 (perméable) sont obtenues. Nos résultats montrent que la désensibilisation de la signalisation à travers la protéine G est déterminée pas seulement par le type de prétraitement mais aussi par la nature du ligand qu’on utilise pour évoquer cette réponse. Ces observations révèlent une diversité et une complexité inconnues pour la régulation des GPCR (récepteurs couplés aux protéines G). De plus, ces résultats pourraient expliquer la différence dans le développement de la tolérance entre les agonistes. 50 Résumés des présentations orales Maîtrise Doctorat Postdoctorat 13 h 15 à 15 h 50 51 Analyse par Data Mining de l’impact de la grande prématurité sur les échanges gazeux et l’hémodynamique cardiaque à l’effort Jacques Delfrate1,2,3, Thuy Mai Luu3,4, Anne-Monique Nuyt3,4, Daniel Curnier2,3 1Polytechnique Montréal de Physiopathologie de l’EXercice (LPEX), Département de Kinésiologie, Université de Montréal 3Centre de recherche du CHU Sainte-Justine 4Département de Pédiatrie, Université de Montréal 2Laboratoire Introduction: La majorité des études réalisées chez les jeunes adultes nés grands prématurés ont permis de mettre en évidence le fait que, dès la naissance, ils étaient plus assujettis à diverses séquelles telles les dysplasies bronchopulmonaires. Concernant la capacité à l’exercice, le peu d’études existantes restent controversées. Certaines ont démontré que les sujets avec des DBP avaient des capacités à l’exercice normales, alors que d’autres ont prouvé une baisse de la consommation maximale de l’oxygène. Objectifs: Dans un premier temps, cette étude s’intéresse à la mal adaptation de l’organisme à l’effort. Les séquelles se trouvent-elles uniquement au niveau pulmonaire ou sontelles plus diffuses dans l’organisme ? Ensuite, il faudra analyser l’hétérogénéité de la réponse à l’effort chez l’ensemble des sujets, prématurés vs contrôle. Méthode: Quatorze jeunes adultes nés prématurés et 14 contrôles nés à terme ont réalisé une évaluation à l’effort avec mesure des échanges gazeux et hémodynamique cardiaque. Un test spirométrique a été effectué avant/après effort et 15 minutes après la prise d’un bronchodilatateur. Résultats: Des tests statistiques simples (SPSS) retrouvent, comme seul paramètre qui atteint un niveau significatif, le volume courant inspiratoire au repos (p=0.012). Le Data Mining a été appliqué aux données obtenues à l’effort. Avec 28 sujets nous avons obtenu des taux de classifications supérieurs à 72% avec les paramètres systole/diastole max, quotient respiratoire, tidal volume inspiratoire et réserve ventilatoire. Conclusion: Le Data Mining est de plus en plus appliqué au domaine du médical. Obtenir la meilleure prédiction avec le moins de paramètres possibles, va permettre de mettre en avant de nouvelles caractéristiques agrégatives qui n’atteignent pas un niveau significatif lors de tests statistiques simples. Cette méthode a permis de mettre en avant de nouveaux paramètres physiologiques à l’effort, avec un très bon taux de classification. Études comparatives des effets secondaires comportementaux de deux anticonvulsivants, Brivaracetam versus Levetiracetam, chez un modèle de rat épileptique induit à l’acide kaïnique Jonathan Gagné1,2, Nathalie Sanon2, Sébastien Desgent1,2, Ciprian Bosoi2, Lionel Carmant1,2 1Université 2CHU de Montréal Ste-Justine Le Levetiracetam (LEV) est un médicament anticonvulsivant déjà utilisé pour traiter l’épilepsie en clinique et le Brivaracetam (BRV) est son homologue de nouvelle génération. Ce dernier aurait une affinité dix fois plus grande pour son ligand, la glycoprotéïne SV2A, et aurait moins d’effets secondaires que le LEV. Le but du projet est d’évaluer les effets sur le comportement en utilisant un modèle d’épilepsie chez le rat. Pour se faire, des rats ont été traités à l’acide kaïnique (KA) pour reproduire l’épilepsie du lobe temporal (TLE) où apparaissent des crises spontanées récurrentes. À P90, les rats sont injectés avec un des deux anticonvulsivants, puis passent une batterie de tests comportementaux. A) Les tests "Champs Ouvert" et "Labyrinthe en Croix Surélevé" servent à évaluer l’anxiété. B) Le "Conditionnement à la peur" sert à évaluer la mémoire limbique (amygdale et gyrus dentelé). C) Les comportements dépressifs sont mesurés avec le test de la "Nage Forcée de Porsolt". D) Nous testons la mémoire spatiale grâce au test du "Labyrinthe de Morris". E) Les comportements sociaux des rats tels que l’agressivité sont mesurés grâce au test de "l'Intru-Résident". Suite à la batterie de tests, les cerveaux sont perfusés et utilisés pour confirmer les pertes cellulaires caractéristiques du modèle. Nos résultats montrent que, dans nos conditions, le LEV et le BRV ne semblent pas altérer l’anxiété dans les groupes indépendamment des tests. En revanche, dans le test de la Nage forcée de Porsolt, les deux drogues semblent diminuer les comportements dépressifs chez les rats épileptiques en n’ayant aucun effet sur les rats contrôles. De manière plus importante, on observe une hausse de l’agressivité et une baisse des comportements sociaux chez les rats contrôles recevant du LEV, alors que ceux recevant le BRV se rapprochent plus des contrôles. En conclusion, le BRV semble avoir moins d’effets secondaires surtout au niveau des comportements sociaux. 52 L'induction de la formation de synapses par les neurones périphériques sur une surface synthétique dans un modèle animal Xavier Marchand1,2, Jenny Lin1,2, Tim E. Kennedy3, Carolin Madwar3 1Université de Montréal de recherche du CHU Sainte-Justine 3Institut neurologique de Montréal (MNI) 2Centre Bien-fondé: Les amputations sont fréquemment rencontrées en clinique et laissent des séquelles fonctionnelles et développementales importantes. Les prothèses mécaniques actuelles ne répondent pas aux besoins de la population des amputés. Une stratégie améliorant le fonctionnement des prothèses serait d'utiliser des implants neurologiques s'intégrant directement dans les tissus qui agiraient comme interface entre les nerfs périphériques et la prothèse. Il a été démontré que des microbilles avec divers recouvrements peuvent induire la formation de synapses par les neurones et pourraient donc servir de base à la conception d'un tel implant. Comme les recherches sur les microbilles n'ont été conduites que dans des modèles in vitro, nous évaluerons la capacité de ces billes d'induire la différentiation synaptique dans les nerfs périphériques dans un modèle animal. Méthodologie: Nous avons injecté dans le nerf sciatique de souris des microbilles de 10 microns recouvertes de poly-L-lysine (PLL), polyD-lysine (PDL), de netrin-1, d'un mélange de lipides ainsi que des billes contrôles. Nous avons récolté les nerfs après 2 ou 7 jours. Nous avons ensuite effectué une coloration immunohistochimique visant une protéine, synaptophysine, afin de détecter des synapses. Nous avons imagé avec un microscope confocal. Résultats: Nous pouvons voir que les microbilles se colocalisent avec des amas de synaptophysine, signifiant la formation de synapses. Les microbilles recouvertes de lipides induisent la formation de synapses après 2 jours et celles recouvertes de PDL et Netrin-1 ne le font qu'après 7 jours. Nous n'avons pas détecté de synaptophysine aux pourtours des billes contrôles et PLL. Conclusion et avenues futures: Cette expérience montre des résultats excitants pour le développement de nouveaux implants neurologiques. Il faudra évaluer dans de prochaines expériences la stabilité de ces synapses, leur origine ainsi que la réaction gliale qu'elles provoquent. Thérapie épigénétique avec le disulfiram dans le traitement du neuroblastome pédiatrique Simon Jacques-Ricard1,2, Annie Beaudry2, Noël Raynal1,2 1Département 2Centre de pharmacologie, Faculté de médecine, Université de Montréal de recherche du CHU Sainte-Justine Le neuroblastome pédiatrique est un des cancers extracrâniens le plus fréquent chez les enfants. Malgré une amélioration du taux de survie avec les thérapies actuellement disponibles, les stades avancés de neuroblastome ou en rechute présentent un très mauvais pronostic. De nouvelles approches thérapeutiques doivent donc être développées afin d'augmenter la survie des patients. Une de ces approches est la thérapie par médicaments épigénétiques. Le neuroblastome, comme plusieurs autres cancers pédiatriques, contient plusieurs altérations épigénétiques au niveau de la méthylation de l'ADN et des modifications des histones. Lors d'un criblage de médicaments déjà approuvés par la FDA, nous avons découvert quelques molécules ayant des caractéristiques de médicaments épigénétiques jusqu’alors jamais découvertes. Notre étude cherche donc à démontrer l'efficacité de ces molécules dans le traitement de lignées cellulaires de neuroblastome. Suite à des tests préliminaires, une des molécules approuvées par la FDA s'est démarquée : le disulfiram, un médicament approuvé pour le traitement de l’alcoolisme chronique. Nous avons donc traité deux lignées cellulaires de neuroblastomes (IMR-32 et SK-N-SH) pendant 48 heures avec du disulfiram à des concentrations pertinentes sur le plan clinique (10nM à 50 µM). Nos résultats démontrent une inhibition de croissance de 50 % (IC50) à 50nM pour les lignées cellulaires testées. De plus, après analyse par cytométrie de flux, on observe un blocage du cycle cellulaire en G2/M. Nous avons également observé la réactivation de plusieurs gènes suppresseurs de tumeurs comme le GRHL1, p16 et p21 par Q-PCR. Des travaux sont en cours afin de déterminer le mécanisme d’action du disulfiram impliqué dans la réactivation des gènes suppresseurs de tumeurs. Notamment, nous analysons les modifications post-traductionnelles de la chromatine. Cette recherche permettra d’évaluer l’efficacité du disulfiram dans le traitement du neuroblastome. 53 Vers une meilleure compréhension de la pathogenèse de la maladie osseuse associée à la fibrose kystique : Rôle du CFTR Valérie Orlando1,2, Geneviève Morin2, Geneviève Mailhot1,2,3 1Université de Montréal de recherche du CHU Sainte-Justine 3Département nutrition 2Centre Les patients fibrose kystique (FK) présentent une densité osseuse amoindrie qui découle d’un débalancement de l’homéostasie osseuse caractérisé par un déséquilibre entre la formation et la résorption osseuse. Les cellules osseuses, plus particulièrement les ostéoblastes (Ob), sont reconnues comme ayant effet modulateur sur le microenvironnement leucocytaire de la moelle osseuse (MO). Ce projet vise à investiguer l’impact de l’absence du CFTR sur la niche leucocytaire de la MO et sur le métabolisme des Ob dans un modèle murin de FK. Nous avons tout d'abord démontré que les souris Cftr -/- ont un nombre moindre de leucocytes (cellules T, B, NK, macrophages, dendritique, monocytes) à l'exception des granulocytes qui sont présents en plus grande quantité vs Cftr +/+. Ces résultats suggèrent qu'il y a une altération de la niche leucocytaire de la MO en absence du CFTR. Ces observations corroborent nos résultats portant sur la différenciation ostéoblastique. En effet, ceux-ci démontrent que les marqueurs ostéoblastiques de la phase intermédiaire, soit la phosphatase alcaline et le collagène de type 1, sont exprimés de façon prématurée chez les Cftr -/- vs Cftr +/+. L'ostéocalcine, un marqueur de la phase tardive de différenciation ostéoblastique, se comporte de la même façon avec une expression précoce chez les Cftr -/- vs Cftr +/+. Ceci laisse croire qu'il y a un défaut au niveau de la différenciation/maturation ostéoblastique chez les souris Cftr -/-. Nos résultats de densitométrie osseuse et de microtomographie à rayons X viennent confirmer les résultats obtenus in vitro puisque les souris Cftr -/- ont une densité osseuse et un contenu minéral osseux abaissé vs les souris Cftr +/+ de même qu’un nombre amoindri de travées osseuses et une plus grande séparation entre les travées; signe d’une fragilité osseuse plus importante. À la lumière de ces nombreux résultats, il nous apparaît donc clairement que l’absence du CFTR a un impact important sur la MO et le tissu osseux. Des mutations de novo hautement délétères jouent un rôle important dans le développement les anomalies du tube neural Philippe Lemay1,2, Marie-claude Guyot2, Élisabeth Tremblay1,2, Alexandre Dionne-Laborte3, Dan Spiegelman3, Édouard Henrion3, Ousmane Diallo3, Patrizia De Marco4, Elisa Merello4, Christine Massicotte2, Valérie Désilet2, Jacques L. Michaud1,2, Guy A. Rouleau3, Valeria Capra4, Zoha Kibar1,2 1Université 2CHU 3McGill 4Istituto de Montréal University Sainte-Justine Giannina Gaslini Les anomalies du tube neural (ATN) sont des malformations congénitales affectant 1:1000 naissances et causées par une fermeture incomplète du tube neural résultant en des malformations du cerveau et de la moelle épinière. Plusieurs études suggèrent que l’étiologie de cette maladie est complexe incluant des facteurs génétiques et environnementaux. La sévérité du phénotype associé aux formes les plus fréquentes d’ATN, diminuant largement le potentiel reproductif des individus atteints, suggère un rôle compensatoire des mutations de novo (MDN) permettant le maintien de la prévalence de la maladie. Malgré cela, les approches traditionnelles ont échoué à identifier les causes génétiques de cette maladie. Le séquençage de nouvelle génération offre une alternative puissante pour les maladies complexes et permettra d’éclaircir l’étiologie génétique des ATN. Nous avons séquencé 43 cas sporadiques d’ATN ainsi que leurs parents non-affectés afin d’identifier les MDN dans leurs exomes. Les exomes ont été capturés par le kit Agilent SureSelect Human All Exon et la lecture a été faite par Illumina Hiseq2000. Les données brutes ont été analysées par un protocole informatique maison. Ceci a permis l’identification de 42 MDN dont 6 étaient hautement délétères (HD), ce qui représente un taux plus élevé que celui observé dans la littérature. De plus, deux mutations HD provenant de familles indépendantes ont été identifiées dans le gène SHROOM3. Ceci représente un enrichissement significatif de MDN hautement délétères dans ce gène lorsque comparé au taux de mutations défini dans la littérature. Des MDN ont aussi été identifiées sur des gènes précédemment associés aux ATN chez la souris. L’étiologie des ATN demeure encore largement inconnue. Cette approche, n’ayant jamais été utilisée dans cette maladie, permettra d’identifier de nouveaux gènes et de développer un meilleur conseil génétique des familles affectées et une meilleure stratégie préventive. 54 GPR81 (HCA1), un nouveau récepteur du lactate, induit le développement de la vasculature (interne) dans la rétine de souris Ankush Madaan1,2, Jose Carlos Rivera1,3, Mathieu Nadeau-Vallée1,3, David Hamel1, Sylvain Chemtob1,2,3 1CHU Sainte-Justine University 3Université de Montréal 2McGill Objectif: La rétinopathie du prématuré (ROP), caracterisée par une phase ischémique suivie d'une phase de néovascularisation abberante, est une cause de cécité chez l’enfant. Le processus de vascularisation fait intervenir de nombreux intermediaires métaboliques. Nous nous sommes intéressés au rôle du lactate, fortement exprimé dans la rétine ischémique, et de son récepteur couplé à une protéine G: GPR81 dans le developpement de la ROP. Méthodes: Le niveau de lactate a été mesuré par colorimétrie dans les rétines de souris exposées au modèle ROP de rétinopathie induite à l’oxygène (OIR). L’ARN messager du GPR81 de ces souris a été mesuré par qPCR. L’expression du récepteur GPR81 a été évaluée par immunomarquage sur des cryosections de rétines. Les réponses pro-angiogéniques suivant l’administration de lactate ont été mesurées in vitro, ex vivo et in vivo. Résultats: Le niveau de lactate dans les rétines de souris exposées au modèle OIR est significativement augmenté. L’expression de GPR81 a été détectée dans la rétine et des lignées cellulaire rétiniennes, principalement dans les cellules de Muller. Les stimulations d’explant aortique avec le lactate induisent un effet pro angiogénique. L’injection intravitréenne de lactate induit une augmentation significative de la densité de la vasculature interne de la rétine; ces effets n’ont pas été observés dans les souris GPR81 KO. Ces souris KO ont montré une densité vasculaire interne réduite comparativement aux souris WT, ce qui a été associé avec une diminution de l’expression de ligand de la voie Wnt. Conclusions: Le lactate exerce des effets pro-angiogéniques via son récepteur GPR81, et participe dans la vascularisation de la rétine interne, physiologiquement et dans la ROP, via la régulation de la voie Wnt. Ainsi, nous mettons en evidence que le GPR81 pourrait être ciblé pour diminuer les dommages observés durant la phase vasoproliférative qui caractérise les rétinopathies incluant la ROP. Implant minimalement invasif pour la correction sans fusion de la scoliose: validation sur un modèle porcin Bahe Hachem1,2, Carl-Éric Aubin1,2, Stefan Parent2,3 1École Polytechnique de Montréal Sainte-Justine 3Université de Montréal 2CHU Objectifs. Évaluer un dispositif local sans fusion agissant sur les plaques de croissances épiphysaires des vertèbres apicales sans traverser le disque intervertébral pour le traitement précoce de la scoliose idiopathique de l’adolescence. Méthodes. Des dispositifs agissant localement sur les plaques de croissance épiphysaires supérieure et inférieure des vertèbres T7-T9 ont été implantés sur 7 porcs immatures (modèle inverse). Quatre animaux appariés selon l'âge ont servi de contrôle. La déformation rachidienne induite et la cunéiformisation vertébrale ont été quantifiées par des radiographies mensuelles. Les changements géométriques globaux (rachis) et locaux (vertèbres) ont été évalués sur 3 mois. Résultats. À l’exception d’un porc qui a été exclu pour une infection profonde persistante, aucune complication postopératoire majeure n’a été observée. Le groupe instrumenté n’a montré aucune modification dans le plan sagittal. L’angle de Cobb final (plan coronal) était de 24.5°±4.7° mesuré entre T7T9, avec la plus importante cunéiformisation vertébrale à T9 (16.8°±1.2°). La cunéiformisation vertébrale cumulée était de 45.4°, indiquant un phénomène de cunéiformisation discale inverse. Les déformations locales et régionales induites diffèrent significativement des contrôles (p <0.01), pour lesquels aucun changement significatif n’a été mesuré dans les plans coronal et sagittal. Conclusions. Le dispositif épiphysaire a permis une modulation localisée de la croissance menant à une importante modification de la forme des vertèbres, sans interférer avec le disque intervertébral. En augmentant le nombre de niveaux instrumentés, on pourrait obtenir plus de contrôle sur la courbure et potentiellement fournir une méthode unique de correction 3D locale pour traiter la déformation de la colonne sans affecter le disque intervertébral et la mobilité rachidienne. Commanditaires: projet financé par le CRSNG (chaire de recherche industrielle avec Medtronic du Canada). 55 Le rôle de la signalisation via mTOR dans la connectivité GABAergique corticale Mayukh Choudhury1,2, Josianne Nunes Carrico 2, Arianne Quintal 1, Martin Berryer 1,2, Graziella Di Cristo 1,2 1Université 2CHU de Montréal Sainte-Justine La voie de signalisation de mTOR est impliquée dans le contrôle de plusieurs aspects du développement neuronal en régulant le taux de synthèse de protéines. Des mutations au niveau de TSc1 et TSc2, les membres régulateurs du complexe 1 de mTOR(mTORC1), causent la Sclérose Tubéreuse (TSC) chez l’humain. La majorité des patients développent des troubles neurologiques tels que l’épilepsie, le retard mental et l’autisme. Des études récentes ont analysé le rôle d’un changement de régulation de la voie mTOR dans les neurones excitateurs corticaux. Par contre,le rôle de la voie mTOR dans le développement des interneurones GABAergiques ainsi que leur contribution dans la TSC demeure inexploré. Ce projet tente de comprendre comment la délétion de Tsc1 spécifiquement dans les interneurones ‘Basket’ (BC) exprimant la parvalbumine (PV) va perturber le développement du circuit GABAergique. Pour examiner le rôle de mTOR dans les interneurones GABAergiques in vivo, nous avons étudié les souris Nkx2.1CRE;Tsc1lox, Nkx2.1 étant un facteur de transcription exprimé lors de la spécification d’une sous-population d’interneurones GABAergiques, incluant les BC. Au jour postnatal 18 (P18), les souris mutantes homozygotes montrent une hyperactivation de la voie mTOR ainsi qu’une hypertrophie des interneurones PV. De plus, on observe une augmentation des marqueurs des synapses GABAergiques (PV et vGAT) autour des neurones corticaux. Toutefois, à P45 on note une diminution de ces marqueurs en comparaison aux contrôles. Ces résultats sont complémentés par l’analyse du développement d’une unique BC mutante en culture organotypique de type sauvage. Enfin, les souris mutantes présentent des déficits au niveau de la mémoire de travail et du comportement social. En conclusion,la délétion conditionnelle du gène Tsc1 spécifiquement dans une sous-population des interneurones GABAergiques démontre l’importance d’une régulation stricte de la voie mTOR au cours du développement du circuit GABAergique. Une souris viable en dépit d'une maladie mitochondriale grave: la déficience en fumarate hydratase dans les tissus adipeux Hao Yang1,2, Jiangwei Wu1, Shupei Wang1, Pierre Allard1, Annie Castonguay3, François Lépine3, Grant A. Mitchell1 1CHU Sainte-Justine Agriculture and Forestry University 3INRS-Institut Armand-Frappier 2Northwest Introduction: Les tissus adipeux brun et blanc (BAT & WAT) présentent respectivement une haute et une faible utilisation énergétique. Les souris ayant une déficience systémique ou hépatique en fumarate hydratase (FHD) décèdent à l’état embryonnaire. Hypothèse : Les souris invalidées en FH spécifiquement dans les tissus adipeux (les souris FHAKO) seront viables. Résultats: Les souris FHAKO sont viables. Elles révèlent les conséquences d’une forme de dysfonction mitochondriale grave limitée aux tissus adipeux. Par rapport aux témoins, la production d'ATP est moindre de 96% (BAT, p<0,001) & de 75% (WAT, p<0,05). Par microscopie électronique, les mitochondries adipeuses sont enflées et leurs crêtes sont anormales. Les souris FHAKO présentent un retard pondéral, exclusivement par faible masse adipeuse. À 5m d’âge, le diamètre modal des adipocytes blancs FHAKO est de 50µm, vs 70µm chez les témoins. Chez les souris FHAKO âgées de 5 ou de 10m, on trouve des taux plasmatiques faibles d’adiponectine, de leptine, de l’insuline, des acides gras non estérifiés et des triglycérides. Chez les souris FHAKO âgées de 10m, la sensibilité à l'insuline et la tolérance au glucose sont plus grandes que chez les témoins. La lipogenèse, mesurée à l’état basal et après stimulation à l’insuline, est significativement moindre chez les souris FHAKO que chez les témoins. Les adipocytes bruns FHAKO sont au contraire hypertrophiés et monovésiculaires. La masse du BAT FHAKO excède celle des témoins (1,4X). À jeun, les souris FHAKO deviennent hypothermiques au froid. Conclusion: Malgré une dysfonction mitochondriale grave aux BAT & WAT, les souris FHAKO sont viables. Elles présentent même de nombreux traits généralement associés à la santé (sveltes, avec de petits adipocytes blancs, sensibilité à l'insuline, tolérance au glucose). Spéculation: L’invalidation génique aux tissus adipeux permettra l'étude de nombreuses enzymopathies mitochondriales dont le phénotype est létal dans d’autres tissus. 56 CLIC5, une nouvelle cible transcriptionnelle d'ETV6 dans la leucémie aiguë lymphoblastique Benjamin Neveu1,2, Pauline Cassart2, Karine Lagacé1,2, Chantal Richer2, Mathieu Lajoie1,2, Jean-François Spinella1,2, Daniel Sinnett1,2 1Université de Montréal 2Centre de recherche du CHU Sainte-Justine La translocation t(12;21) est observée dans environ 25% des cas de leucémie aiguë lymphoblastique (LAL) de l'enfant, ce qui en fait l'aberration génétique la plus fréquemment retrouvée dans ce type de leucémie. L'expression de la chimère résultante, ETV6-AML1, n'est pas suffisante pour initier la leucémogenèse, suggérant que des mutations supplémentaires sont requises afin de déclencher ce processus. Or, il a été observé que dans environ 75% des cas de LAL ayant la t(12;21), il y a également perte de l'allèle résiduel d'ETV6. L’inactivation complète d'ETV6 serait l'événement déclencheur de la maladie. Comme ETV6 est un répresseur transcriptionnel, nous pensons que l'implication d'ETV6 dans la LAL se ferait par l'entremise de ses gènes cibles. Or, aucune étude à large échelle visant l'identification de cibles transcriptionnelles d'ETV6 n'a encore été faite. Dans ce but, nous avons réalisé une expérience de séquençage d'ARN (RNA-seq) pour obtenir une vue d'ensemble de l'effet d'ETV6 sur le transcriptome. Cette expérience a permis l'identification de 88 cibles potentielles d'ETV6. CLIC5 fait partie des gènes dont l'expression est significativement diminuée par ETV6. L'analyse de transcriptomes de patients leucémiques a également démontré que l'expression de CLIC5 était spécifiquement augmentée dans le sous-type t(12;21) positif. La surexpression de CLIC5 suite à la perte d'ETV6 dans les patients t(12;21) positifs pourrait contribuer au phénotype leucémique. Des expériences d'immunoprécipitation de la chromatine (ChIP) ont démontré une interaction entre ETV6 et le promoteur proximal de l'isoforme CLIC5A, suggérant que CLIC5A est directement régulé par ETV6. Pour évaluer l'effet fonctionnel de CLIC5A, des lignées cellulaires surexprimant CLIC5A ont été générées. La surexpression de CLIC5A engendre entre autres une résistance à l'apoptose induite par un stress oxidatif, pouvant ainsi contribuer à la leucémogenèse. L’étude de la coinfection par le virus de l’hépatite C (VHC) et le virus de l’immunodéficience humaine de type 1 (VIH-1) chez la femme enceinte éclaire la complexité des mécanismes impliqués dans la transmission du VHC de la mère à l’enfant Ariane Larouche1,2, Armelle Le Campion1,2, Sébastien Fauteux-Daniel1,2, Marc Boucher4,5, Normand Lapointe3,4, Mel Krajden6, Deborah M. Money7, Hugo Soudeyns1,2,3 1Unité d’immunopathologie virale, Centre de recherche du CHU Sainte-Justine 2Département de microbiologie, infectiologie et immunologie, Université de Montréal 3Département de pédiatrie, Université de Montréal 4Centre maternel et infantile sur le SIDA (CMIS), Centre de recherche du CHU Sainte-Justine 5Département d'obstétrique-gynécologie, Université de Montréal 6BC Center for Disease Control, Vancouver 7Women’s Health Research Institute, Vancouver La coinfection par le VHC et le VIH-1 est courante. Le VHC existe chez son hôte sous forme de quasiespèce, la majeure partie de la variabilité se retrouvant au niveau de la protéine d’enveloppe E2. Chez la femme enceinte, les pressions sélectives exercées sur E2 visent des régions exposées en surface, suggérant l’implication de la réponse humorale. Les objectifs de l’étude sont de déterminer si l’évolution de la quasiespèce est associée à la réponse humorale maternelle et d’évaluer l’impact de la coinfection de la mère avec le VIH-1 sur la transmission mère-enfant (TME) du VHC. Pour ce faire, des échantillons sériques de femmes enceintes infectées par le VHC seulement (mono-infections; n=17) ou coinfectées par le VHC et le VIH-1 (coinfections; n=20) furent prélevés pendant les 3 trimestres de gestation et en post-partum. L’ARN du VHC a été amplifié par RT-PCR et traité par séquençage à haut débit (Roche 454). Les fréquences relatives des différentes variantes protéiques d’E2 ont servi à calculer la distance UniFrac entre les échantillons et l’indice de diversité de Shannon. Cette analyse a révélé que l’évolution de la quasiespèce était plus lente chez la femme coinfectée par le VIH-1. Dans le groupe infecté par le VHC seulement, une baisse de la charge virale VHC entre le 3ème trimestre et le post-partum a été observée qui n’était pas présente chez les femmes coinfectées (p=0.0485). Enfin, des valeurs de diversité faibles durant la grossesse ont été associées à un risque significativement plus élevé de TME du VHC dans le groupe mono-infecté (p=0.0024; OR=29.86) mais pas chez les femmes coinfectées. Ces résultats suggèrent que la diversité de la quasiespèce du VHC et la coinfection par le VIH augmentent les risques de transmission du VHC de la mère à l’enfant, mais le font à travers des mécanismes indépendants dont certains sont de nature immunitaire. Ces résultats ouvrent la voie à une compréhension nouvelle des mécanismes impliqués dans la TME du VHC. 57 Rôle de CXCR7 dans la modulation négative de la domiciliation des cellules leucémiques dans les niches de la moelle osseuse Nicolas Montpas1,2, Kathie Béland1, François Fontaine1, Simon Lamothe1,2, Simon Nicoletti1, Élie Haddad1, Nikolaus Heveker1,2 1Centre de recherche du CHU Sainte-Justine de Montréal 2Université Les rechutes leucémiques frappent près de 25% des patients en rémission. Elles sont provoquées par des cellules s’étant domiciliées, par le biais de la chimiokine CXCL12, dans les niches de la moelle osseuse (MO) où résident les cellules souches hématopoïétiques. Le microenvironnement de ces niches procure aux résidants un état antiprolifératif et anti-apoptotique les protégeant du traitement chimiothérapique. Les fonctions de CXCL12 sont régies par deux récepteurs soit : CXCR4 et CXCR7. La liaison de CXCL12 à CXCR4 provoque la réponse migratoire alors que sa liaison à CXCR7 promeut la dégradation du ligand et une atténuation de la réponse migratoire. Ces résultats suggèrent que CXCR7 pourrait être un modulateur négatif de la rétention cellulaire dans les niches. Ainsi, utilisant un modèle de souris humanisées, nous avons évalué le temps de développement de leucémies primaires - provenant de biopsies de MO de patients leucémiques au moment du diagnostic – en fonction du niveau d’expression de CXCR7. Deux constats ont pu être établis : i) contrairement à CXCR4, CXCR7 n’est pas toujours exprimé dans les leucémies primaires et ii) plus il y a de CXCR7, plus la leucémie prend du temps à s’installer suggérant une moins bonne domiciliation au niveau de la MO. Lorsque les données seront disponibles, nous corrélerons les résultats obtenus en souris avec les rechutes des patients. Si notre hypothèse se concrétise, par une simple vérification du niveau d'expression de CXCR7 sur les cellules leucémiques des patients leucémiques au moment du diagnostic, nous serons en mesure de déterminer le risque spécifique de chacun à développer une rechute. Le rôle de l'environnement social dans la réponse immunitaire à l'infection Joaquín Sanz1,2, Jessica Brinkworth1,2, Jordan Kohn3,4, Noah Snyder-Mackler5, Jean-Christophe Grenier1,2, Zacchary Johnson3,4, Mark Wilson3,4, Jenny Tung5, Luis Barreiro1,2 1Université de Montréal Sainte-Justine 3Emory University 4Yerkes National Primate Research Center 5Duke University 2CHU L'environnement social a un impact clair et profond sur la santé humaine et le bien-être. Le stress social chronique et un faible soutien social sont des facteurs prédictifs de certaines pathologies, notamment les maladies cardiovasculaires et le diabète. En effet, il semble que le stress social est lié à l'espérance de vie elle-même: la mauvaise intégration sociale, par exemple, a été estimée comme un facteur de risque de mortalité aussi important que le tabagisme et l'obésité. Cependant, malgré un vif intérêt concernant l'impact du stress social sur la santé humaine, les relations fonctionnelles qui le relient à ses impacts sur le corps sont encore mal connues, en particulier au niveau génomique. Dans cette étude, nous abordons ce point en étudiant comment le rang de dominance chez les macaques rhésus femelles influence la régulation du génome et les réponses immunitaires à l'infection. Plus précisément, nous avons testé pour une association entre le rang de dominance et l'expression génique mesurée dans les échantillons de sang total avant et après la stimulation aux lipopolysaccharides (LPS imite une infection par une bactérie Gram négative). Nos résultats confirment le rôle essentiel de l'environnement social sur l'élaboration des profils d'expression des gènes: nous avons constaté qu'environ 20% de tous les gènes montrent des valeurs d'expression qui sont en corrélation linéaire avec le rang de dominance dans au moins une condition expérimentale. En outre, nous avons identifié un nombre de gènes pour lesquels la réponse au LPS diffère en fonction du rang de dominance. Fait intéressant, ces gènes sont enrichis en fonctions immunologiques primaires (comme la signalisation de l'interféron gamma et la production et la sécrétion des cytokines clés), ce qui fournit de nouveaux indices fonctionnels sur la façon dont le rang social pourrait avoir une incidence sur la santé humaine. 58 Prévalence d’un déficit musculaire et osseux chez des survivants de longue date de la leucémie lymphoblastique aiguë: Résultats préliminaires de l'étude PETALE Louis-Nicolas Veilleux1,2, Frank Rauch1,2, Maja Krajinovic1, Caroline Laverdière1, Daniel Sinnett1, Nathalie Alos1 1Centre de recherche du CHU Sainte-Justine Shriners pour Enfants 2Hôpital Le taux de survie pour la leucémie lymphoblastique aiguë (LLA) s’est largement amélioré au fil des ans et atteint désormais 85%. De ce nombre, environ 70% des survivants de longue date montrent d’importantes morbidités, conséquences des effets de la maladie et/ou des effets des traitements. Le but de la présente étude est de déterminer la proportion de survivants de longue date de la LLA qui ont des déficits relatifs aux systèmes musculaire et osseux. Patients: 153 survivants de la LLA ont pris part à cette étude (62% de filles; âge moyen au recrutement [Déviation Standard; DS]: 22.3 ans [6.7]; âge moyen au diagnostic: 5.6 ans [4.2]; 57% avaient reçu un diagnostic de haut-risque; durée moyenne du traitement: 26 mois [4.7]. Méthode/Résultats : La fonction musculaire a été mesurée par la mécanographie des sauts. Les résultats des tests de sauts multiples sur une jambe et de saut simple avec contremouvement ont montré une prévalence plus élevée que la normale d’un déficit de la force musculaire (2DS sous la moyenne; attendus 2%; observés 12%) et de la puissance musculaire (attendus 2%; observés 17%) comparativement aux données de références spécifiques au sexe et à l'âge. Les données de la tomographie périphérique assistée par ordinateur (pQCT) ont montré que la taille et la densité du muscle de la jambe étaient normales. Au niveau osseux, la prévalence d’un déficit au niveau de la taille de l’os était plus élevée que la norme avec 10% des survivants montrant une section transverse du tibia inférieure à 2 DS à la moyenne des données de références alors que cette proportion était de 7% pour le contenu minéral osseux. Conclusions: Une prévalence plus élevée que la normale a été trouvée pour le déficit de la fonction musculaire (12-17%) ainsi que pour le déficit osseux (7-10%) chez les survivants de longue date de la LLA. Ces résultats suggèrent que l’évaluation de la santé musculaire et osseuse devrait faire partie du suivi à long-terme de ces patients. 59 60 INDEX Abadie, 29 Ahmad, 31, 47 Alfieri, 25 Amre, 31, 44, 47 Andelfinger, 14, 15 Ang Houle, 39 Armaos, 40 Aubin, 17, 19, 37, 48, 55 Audet, 40 Awadalla, 28, 39 Bah, 25 Ballaz, 18, 38, 39 Balosetti, 37 Barreiro, 58 Beauséjour, 29, 30 Begon, 48 Belounis, 25 Beltra, 26 Benhadjeba, 13 Benredjem, 41 Bérubé, 26 Bilodeau, 13 Bitton, 20 Bonneterre, 41 Bouchard, 24 Boyer, 19 Caouette, 48 Carmant, 20, 23, 52 Cassart, 50 Charfi, 20 Chemtob, 14, 55 Choudhury, 56 Cobetto, 19 Colamartino, 27 Colas, 27 Collet, 12 Côté, 21 Curnier, 38, 40, 52 Da Costa, 42 Dal Maso, 48 de Britto Pará de Aragão, 10 Decaluwe, 26, 30 Delfrate, 52 Di Cristo, 56 Diaz Rodriguez, 42 Dieumegard, 43 Dragieva, 43 Dupuis, 37 Duval, 25, 42 Edjekouane, 10 El-Hassan, 34 England, 44 Eslahapzir Esfandabadi, 44 Fortin, 37 Fougerat, 49 Fraser, 24 Gagné, 52 Gagnon, 35 Gauvin, 28 Glisovic Joksimovic, 45 Gosset, 14 Gravel, 45 Hachem, 55 Haddad, 27, 46 Hardy, 15 Heveker, 41, 58 Hickson, 28, 43, 47 Jacques-Ricard, 53 Kaviani, 16 Kechad, 28 Khadra, 16 Kharfallah, 21 Khodja, 11 Kibar, 34, 54 Kleme Amani, 11 Krajinovic, 45, 46 Labelle, 17 Lalande, 17 Lapointe, 38 Larouche, 57 Le May, 16 Le naveaux, 17 Lejeune, 29 Lemay, M, 18 61 Lemay, P, 54 Lemieux, 46 Levy, 11, 36, 44, 49 Lin, 53 Lippé, 21, 24 Lupien-Meilleur, 22 Luu, 52 Madaan, 55 Mailhot, 54 Mansour, 50 Marchand, 53 Mathieu, C, 30 Mathieu, M-E, 35 Mayeur, 49 Mazza, 22 Mehanna, 46 Mélanie, 47 Michaud, 35 Mitchell, 56 Moldovan, 16, 18 Montpas, 58 Moquin-Beaudry, 30 Morel, 36 Mustafy, 18 Nadeau-Vallée, 14 Neveu, 57 Nuyt, 52 Orlando, 54 Oswald, 34 Palacio, 29 Parent, 19, 38, 55 Périé, 37 Piché, 15 Pineyro, 20, 50 Pouliot-Laforte, 18 Pshezhetsky, 10, 12, 49 Raison, 38, 39, 48 Rauch, 48, 59 Raynal, 40, 42, 53 Rioux, 23 Robaey, 34 Rossignol, 22 Sagala, 47 Salem Fourati, 31 Samadi, 39 Samarani, 31 Samuels, 11 Sanz, 58 Sartelet, 25 Séguin, 23 Shaker, 23 Sinnett, 32, 44, 46, 50, 57 Smutova, 12 Sokoloff, 24 Soudeyns, 31, 43, 45, 57 Spinella, 32 Sultan, 26 Tahiri, 15 Thébault-Dagher, 24 Tremblay, 10, 12, 13, 35 Veilleux, 59 Villemure, 16, 17, 18, 48 Yang, 56 Yeganeh, 36 62 demi-pages publicité 2015 (3 pages) 63