Toxocell latex

READ HIGHLIGHTED CHANGES
toxocell latex
Rapid latex particle agglutination test on slide for the
qualitative
and
semiquantitative
determination
of
toxoplasma antibodies in serum.
Summary
Toxoplasmosis is an infectious disease affecting both animals and humans, which is caused by
the protozoan parasite Toxoplasma gondii (1). Acquired toxoplasmosis is usually asymptomatic
and benign (2).
In pregnant women, however, the infection acquires a special significance as the parasite may
enter the fetal circulation through the placenta and cause congenital toxoplasmosis. Different
studies have shown that the risk and severity of congenital toxoplasmosis is greatest when
acquired during the first trimester of pregnancy. The consequences of congenital
toxoplasmosis range from spontaneous abortion and prematurity to generalized and
neurological symptoms, which often involve ocular complications. Infants with congenital
toxoplasmosis may also remain asymptomatic for several weeks after birth (3-6).
Toxoplasmosis can be life-threatening in immmunocompromised patients (AIDS, organ
transplantation). In AIDS patients, acute toxoplasmosis usually occurs due to re-activation of a
latent previously acquired infection, although primary infections are also diagnosed (6,7).
Principle
The toxocell latex reagent is a suspension of polystyrene latex particles of uniform size coated
with soluble Toxoplasma gondii antigen. Latex particles allow visual observation of the antigenantibody reaction. If the reaction takes place, due to the presence of toxoplasma antibodies in
the serum, the latex suspension changes its uniform appearance and a clear agglutination
becomes evident.
When the latex reagent is mixed with the serum, if the serum contains approximately more
than 10 IU/ml of toxoplasma antibodies, a clear agglutination will appear. Results are
expressed in IU/ml of total anti-toxoplasma antibodies based on the WHO 3rd International
Standard.
Components
REF 3000-4525.
-
Latex reagent: 1 x 4 ml.
Suspension of polystyrene latex particles coated with Toxoplasma gondii soluble antigen in a
buffer containing bovine serum albumin. Contains < 0.1% sodium azide.
Positive control: 1 x 1 ml.
Diluted human serum containing rabbit IgG antitoxoplasma. Contains < 0.1% sodium azide.
Negative control: 1 x 1 ml.
Non reactive diluted human serum. Contains < 0.1% sodium azide.
Disposable slides: 18 units (x6).
Precautions
BIOKIT, S.A. - www.biokit.com
Can Malé s/n - 08186 Lliçà d'Amunt - Barcelona - Spain
0843
3800-1226
R01 04/15
20
toxocell latex is intended for IN VITRO diagnostic use.
Sodium azide may react with lead or copper pipes and plumbing creating highly explosive
metal azides. Flush drains with water thoroughly after disposing of the remains of reagents.
All human source material used in the preparation of this product was found to be negative for
the presence of HIV-1/HIV-2 and HCV antibodies, as well as for the hepatitis B surface antigen,
using a method approved by the Food and Drug Administration (USA).
WARNING: POTENTIALLY BIOHAZARDOUS MATERIAL.
Because no test method can offer complete assurance of the absence of infectious agents, this
product should be handled with caution (8).
Dispose all used materials in a suitable biohazardous waste container.
1
Hazard class
Not classified.
Hazard statements
None.
Precautionary statements
P280: Wear protective gloves/protective clothing/eye protection/face protection.
P305+351+338: IF IN EYES rinse cautiously with water for several minutes. Remove contact
lenses, if present and easy to do. Continue rinsing.
References
1.
Johnson AM. The antigenic structure of toxoplasma gondii: a review. Pathology 17: 9-19,
1985.
2.
Miller MJ, Aronson WJ, Remington JS. Late parasitemia in asymptomatic acquired
toxoplasmosis. Ann Intern Med 71: 139-145, 1969.
3.
Desmonts G, Couvreur J. Toxoplasmosis in pregnacy and its trasmission to the fetus. Bull N
Y Acad Med 50: 146-159, 1974.
Storage
4.
The reagents will remain stable until the expiration date shown on the label if stored between 2
and 8°C. Do not freeze.
Frenkel JK. Pathology and pathogenesis of congenital toxoplasmosis. Bull N Y Acad Med 50:
182-191, 1974.
5.
Holliman RE, Barker, KF, Johnson JD. Selective antenatal screening for toxoplasmosis and
the latex agglutination test. Epidemiol Infect 105: 409-414, 1990.
Material required not provided
6.
Holliman RE. The diagnosis of toxoplasmosis. Review. Serodiag Immunother Infect Dis 4: 8993, 1990.
Normal saline (0.9% NaCl, only for semiquantitative test), automatic pipettes, rotator, stirrers and
timer.
7.
Holliman, RE. Investigation of HIV positive patients for toxoplasmosis using the latex
agglutination test. Serodiag Immunother Infect Dis 4: 249-253, 1990.
Sample collection
8.
Biosafety in
2007.
Use fresh serum. Samples can be stored at 2-8°C for 2 days. For longer periods, samples should
be frozen (-20°C).
9.
Feldman HA. Toxoplasma and toxoplasmosis. Hosp Practice 3: 64-72, 1969.
PROCEDURE
Quality control: Before performing a set of determinations it is advisable to test the reagent with
each of the controls included in the kit, following the steps outlined in the section QUALITATIVE
TEST. The reaction between the positive control and the reagent should show a clear
agglutination different from the uniform appearance of the negative control. If these results are not
obtained, do not use the kit.
To assure proper delivery the reagent dropper must be held vertically and a single drop allowed to
fall.
Microbiological and Biomedical Laboratories. CDC/NIH manual, 5th edition,
10. Muñoz C, Guardià C, Juncosa T, Viñas Ll, Sierra M, Sanfeliu I, Bosch J, Dopico E, Lite J,
Matas L, Juste C, Barranco M. Toxoplasmosis and pregnancy. Multicenter study of 16,362
pregnant women in Barcelona. Preliminary report.
11. Dunford P, Johnson J. Detection of toxoplasma-specific immunoglobulin-G: assesment of a
slide agglutination test. Med Lab sci 48: 137-141, 1991.
12. Gray JJ, Balfour AH, Wreighitt TG. Evaluation of a commercial latex agglutination test for
detecting antibodies to Toxoplasma gondii. Serodiag Immunoth Infect Dis 4: 335-340, 1990.
QUALITATIVE TEST
-
Allow the reagents to reach room temperature.
Place 50 µl of the serum (or one drop of control) onto one section of the slide.
Shake the reagent vial and add one drop of reagent next to the drop of sample.
Mix both drops with a stirrer covering the whole surface of the slide section.
Rotate the slide for 5 minutes manually or on a rotary shaker set at 80-100 rpm.
Observe for presence or absence of agglutination.
POSITIVE REACTIONS: Presence of agglutination.
3+ Large clumping with clear background.
2+ Moderate clumping with fluid slightly opaque in background.
1+ Small clumping with opaque fluid in background.
NEGATIVE REACTIONS:
Absence of agglutination, uniform suspension.
Interpretation of the results
A qualitative test performed on a single serum sample can be used to estimate the immunologic
response of the individual.
A negative reaction should be interpreted as the absence of toxoplasma antibodies or titers lower than 10
IU/ml. If the serum tested corresponds to a pregnant woman, it is advisable to repeat the test during the
pregnancy period (once every month) to detect a possible seroconversion.
A positive reaction should be interpreted as presence of toxoplasma antibodies which may reflect
either a past infection or an acute toxoplasma infection. In this case it is recommended to perform
the determination of the antibody titer by usual quantitative tests and investigate the presence of
specific IgM toxoplasma antibodies.
SEMIQUANTITATIVE TEST
-
Place 50 µl of normal saline onto slide sections 2 through 6.
Using an automatic pipette, place 50 µl of the sample onto slide sections 1 and 2.
Using the same pipette take in and release the sample and the saline solution on section 2
several times until they are well mixed.
Take 50 µl of the mixture made on section 2 and transfer it to section 3.
Repeat the aforementioned operations to obtain a thorough mixing of reagents, through
section 6, thereafter discarding 50 µl.
Test each dilution as described in the section QUALITATIVE TEST.
2
19
Seção
1
2
3
4
5
6
Section
1
2
3
4
5
6
Salina µl
-
50
50
50
50
50
Saline µl
-
50
50
50
50
50
50
50
-
-
-
-
Serum µl
50
50
-
-
-
-
1:1
1:2
1:4
1:8
1:16
1:32
10
20
40
80
160
320
Soro µl
Misturar e
transferir µl
Diluição
1:1
1:2
1:4
1:8
1:16
1:32
Mix and
transfer µl
Dilution
UI/ml
10
20
40
80
160
320
IU/ml
50
50
50
50 
50
50
50
50
50 
50
Interpretação dos resultados
Interpretation of the results
O título aproximado do soro é a diluição mais alta do soro que ainda apresente aglutinação
claramente visível (ver esquema).
Um resultado positivo apenas indica uma exposição prévia. O título de anticorpos não pode ser
utilizado para determinar uma infecção ativa ou o estado da doença. Para confirmar uma infecção
aguda é necessário realizar testes IgM específicos.
The approximate titer will correspond to the highest serum dilution that still presents a clearly
visible agglutination.
A positive result only indicates previous exposure; level of antibody may not be used to determine
active infection or disease stage. To confirm acute infection specific IgM tests should be done.
Limitações do procedimento
Em certas ocasiões, soros fortemente positivos podem apresentar fenômenos de pró-zona. Por
isso, quando se suspeita da existência de toxoplasmose e o resultado do exame é negativo,
recomenda-se repetir o teste com uma diluição 1:5 do soro.
Publicou-se que os testes de aglutinação de látex produzem falsos resultados positivos. Estes
resultados estão associados com uma imunoglobulina M não específica.
Valores previstos
Diferentes estudos realizados demonstram que a incidência de anticorpos anti-toxoplasma
depende da população estudada. Em um estudo realizado em 1962, os resultados relativos à
presença de anticorpos variaram desde 3% em soldados dos Estados das Montanhas Rochosas
(EUA) à quase 100% da população feminina adulta de Paris (9).
Em um recente estudo multicêntrico realizado em Barcelona (Espanha) com mais de 16000
amostras de soro de mulheres grávidas, 28,6% das mulheres tinham anticorpos anti-toxoplasma.
A presença de anticorpos IgM específicos se detectou em 2,22% das que tinham anticorpos antitoxoplasma (10).
Características funcionais
Se avaliou a sensibilidade do toxocell latex por comparação com um Imunoensaio Enzimático de
Micropartículas (MEIA) comercializado para a detecção de IgG e IgM, usando um painel de 72
amostras positivas para anticorpos IgG, 52 amostras positivas para anticorpos IgG e IgM e 76
mostras negativas. A sensibilidade relativa foi de 100%, sendo que 124 amostras foram positivas
com o reativo toxocell latex. A especificidade relativa foi de 84,2% (64/76). O valor prognóstico
positivo para o reativo toxocell latex foi de 91,2% e o valor prognóstico negativo de 100%.
Se realizou outro estudo com 215 amostras de soro de mulheres grávidas, conhecidas como
positivas de IgG anti-toxoplasma pelo referido ensaio MEIA comercial, o qual revelou uma
sensibilidade relativa de 100%, sendo que 41 amostras positivas foram positivas com o reativo
látex. A especificidade relativa foi de 95,4% (166/174). O valor prognóstico dos testes positivos foi
de 83,7% e o valor prognóstico negativo foi de 100%.
A funcionalidade do toxocell latex foi comparada com a do Dye test como técnica de referência.
A sensibilidade do reativo foi de 98,7%, a especificidade de 95,8%, o valor prognóstico positivo de
99,4% e o valor prognóstico negativo de 92,0% (11).
Em um estudo realizado com amostras de soro de indivíduos transplantados, o reativo toxocell
latex foi capaz de detectar uma elevação do título de anticorpos anti-toxoplasma em
transplantados de coração que tinham experimentado uma infecção primária ou uma reativação
de uma infecção já passada (12).
Estudou-se um painel de 10 amostras de soro durante 3 dias consecutivos seguindo o teste semiquantitativo. Os resultados deste estudo indicam que a reproduzibilidade do toxocell latex é de
100%.
Limitations of the procedure
Occasionally a prozone effect may be observed with strong positive sera. Therefore, in those
cases where a suspected case of toxoplasmosis gives a negative result, the test should be
repeated using a 1:5 serum dilution.
There has been reported that the latex agglutination tests produce some false positive reactions.
These reactions are associated with an unspecified immunoglobulin M.
Expected values
Different studies show that the incidence of toxoplasma antibodies depends on the population
studied. In a study carried out in 1962, the results of presence of antibodies raised from 3% on
soldiers from Rocky Mountain States (USA) to nearly 100% of adult female population in Paris (9).
In a recent multicenter study performed on more than 16,000 serum samples from pregnant
women in Barcelona (Spain), 28.6% of the women had toxoplasma antibodies. The presence of
specific IgM anti-toxoplasma was detected in 2.22% of those with toxoplasma antibodies (10).
Performance characteristics
The toxocell latex sensitivity was studied in comparison to commercially available IgG and IgM
Microparticle Enzyme Immunoassays (MEIA) using a serum panel of 72 positive samples for IgG
antibody, 52 positive samples for IgG and IgM anti-toxoplasma antibodies, and 76 negative
samples. The relative sensitivity was 100%, all 124 samples were positive with the reagent. The
relative specificity was 84.2% (64/76). The positive predictive value for toxocell latex was 91.2%
and the negative predictive value was 100%.
Another study with 215 serum samples from pregnant women, known positive or negative for IgG
anti-toxoplasma antibody for the same commercially MEIA, was performed. The relative sensitivity
was 100%, all 41 positive samples were positive with the toxocell latex reagent. The relative
specificity was 95.4% (166/174). The positive predictive value was 83.7% and the negative
predictive value was 100%.
The performance of the toxocell latex was compared with that of the Dye test as the reference
test. The sensitivity of the reagent was 98.7%, the specificity was 95.8%, the positive predictive
value was 99.4% and the negative predictive value was 92.0% (11).
In a study performed with serum samples from transplant recipients, the toxocell latex was able
to detect a rise in toxoplasma antibody titers in heart transplant recipients experiencing primary
infection or reactivation of a past infection (12).
A panel of 10 serum samples was tested on 3 consecutive days using the semiquantitative test.
The results of the study indicate that toxocell latex reproducibility was 100%.
References
See "References" at the end of the package insert.
Bibliografia
Veja "References" no fim deste folheto.
18
3
LEER CAMBIOS SOMBREADOS
toxocell latex
Test rápido de aglutinación de partículas de látex en porta,
para la determinación cualitativa y semicuantitativa en
suero de anticuerpos antitoxoplasma.
Classe de perigo
Não classificado.
Advertências de perigo
Nenhuma.
Recomendações de prudência
P280: Usar luvas de proteção/vestuário de proteção/proteção ocular/proteção facial.
P305+351+338: SE ENTRAR EM CONTACTO COM OS OLHOS: enxaguar cuidadosamente com água
durante vários minutos. Se usar lentes de contato, retire-as, se tal lhe for possível. Continuar a enxaguar.
Conservação
O reativos permanecem estáveis até a data de validade indicada na etiqueta, se forem
conservados entre 2 e 8°C. Não congelar.
Sumario
Material necessário não incluído
La toxoplasmosis es una enfermedad infecciosa causada por el protozoo Toxoplasma gondii (1),
que afecta tanto al hombre como a los animales. La toxoplasmosis en su forma adquirida es una
infección frecuente, generalmente asintomática y benigna (2).
Sin embargo, adquiere especial importancia en caso de ocurrir en la mujer embarazada, pudiendo
entonces el parásito alcanzar la circulación fetal a través de la placenta y causar toxoplasmosis
congénita. Diferentes estudios realizados muestran que el riesgo y severidad de la toxoplasmosis
congénita son mayores cuando la infección aguda sucede durante el primer trimestre del
embarazo. Las consecuencias de la toxoplasmosis congénita van desde el aborto espontáneo y
prematuridad hasta lesiones viscerales y neurológicas, siendo especialmente frecuentes las
complicaciones oculares. Los niños con toxoplasmosis congénita pueden también permanecer
asintomáticos durante algunas semanas después del nacimiento (3-6).
La toxoplasmosis puede ser una seria amenaza en pacientes inmunodeprimidos (SIDA,
transplante de órganos). En los pacientes de SIDA, la toxoplasmosis aguda suele ocurrir debido a
una reactivación de una infección latente previamente adquirida, aunque también se han
diagnosticado infecciones primarias (6,7).
Solução salina (0,9% NaCl, somente para o teste semi-quantitativo), pipetas automáticas,
agitador rotatório, palitos de madeira e cronômetro.
Principio
El reactivo toxocell latex es una suspensión de partículas de látex de poliestireno de tamaño
uniforme sensibilizadas con antígeno soluble de Toxoplasma gondii. Las partículas de látex ponen
de manifiesto la reacción antígeno-anticuerpo. Si debido a la presencia de anticuerpos
antitoxoplasma en el suero tiene lugar dicha reacción, la suspensión de látex pierde su aspecto
uniforme haciéndose evidente una clara aglutinación.
Cuando se mezcla el reactivo látex con el suero, si el suero tiene aproximadamente más de 10
UI/ml de anticuerpos antixoplasma se produce una clara aglutinación. Los resultados se expresan
en UI/ml de anticuerpos totales anti-toxoplasma de acuerdo con el 3er Estándar Internacional de
la OMS.
REF 3000-4525.
-
Usar soro fresco. As amostras podem ser conservadas por 2 dias entre 2-8°C. Para guardar por
um período de tempo mais longo as amostras devem ser congeladas (-20°C).
PROCEDIMENTO
Controle de qualidade: Antes de efetuar uma série de determinações é aconselhável testar o
reativo latex com cada um dos controles incluídos no kit. Os controles devem ser testados
utilizando-se o TESTE QUALITATIVO. A reação entre o controle positivo e o reativo deve dar
uma clara aglutinação, diferente da aparência uniforme do controle negativo. Se estes resultados
não são obtidos, não utilize o kit.
Para assegurar uma correta dosagem do reativo o conta-gotas deve ser colocado verticalmente e
deixar cair apenas uma gota.
TESTE QUALITATIVO
-
Deixar que os reativos alcancem a temperatura ambiente.
Depositar 50 µl de soro (ou uma gota de controle) em uma das seções da lâmina.
Agitar o frasco do reativo e colocar uma gota de reativo junto à gota de amostra.
Misturar ambas gotas com um palito, cobrindo-se toda a superfície da seção da lâmina.
Agitar a lâmina manualmente ou com um agitador rotatório (80-100 rpm) durante 5 minutos.
Observar a presença ou ausência de aglutinação.
REAÇÕES POSITIVAS: Presença de aglutinação.
3+ Agregados grandes sobre fundo transparente.
2+ Agregados médios sobre fundo levemente opaco.
1+ Agregados finos sobre fundo opaco.
Componentes
-
Coleta da amostra
Reactivo: 1 x 4 ml.
Suspensión de partículas de látex de poliestireno sensibilizadas con antígeno soluble de
Toxoplasma gondii en un tampón que contiene albúmina de suero bovino. Contiene < 0,1% de
azida sódica.
Control positivo: 1 x 1 ml.
Suero humano diluido que contiene IgG de conejo antitoxoplasma. Contiene < 0,1% de azida
sódica.
Control negativo: 1 x 1 ml.
Suero humano negativo diluido. Contiene < 0,1% de azida sódica.
Portaobjetos desechables: 18 unidades (x6).
Precauciones
toxocell latex es sólo para el diagnóstico IN VITRO.
La azida sódica puede reaccionar con tuberías y desagües de plomo o cobre dando lugar a
azidas metálicas altamente explosivas. Al desechar los restos de reactivos, deje correr agua
abundante.
Todo el material de origen humano utilizado en la preparación de este producto ha sido
encontrado negativo a la presencia de anticuerpos de los virus HIV-1/HIV-2 y HCV, así como a la
del antígeno de superficie de la hepatitis B, utilizando un método aprobado por la Food and Drug
Administration (USA).
ATENCIÓN: MATERIAL DE RIESGO BIOLÓGICO.
Ya que ningún método puede ofrecer la total seguridad de la ausencia de agentes infecciosos,
este producto debe manejarse con precaución (8).
Depositar todos los materiales usados en recipientes adecuados para material biocontaminante.
4
REAÇÕES NEGATIVAS:
Ausência de agregados, suspensão uniforme.
Interpretação dos resultados
Um teste qualitativo realizado com uma única amostra de soro pode ser utilizado para avaliar o
estado imunológico do indivíduo.
Uma reação negativa indica a ausência de anticorpos anti-toxoplasma ou níveis inferiores a 10
UI/ml. Se o soro é de uma mulher grávida, recomenda-se repetir o exame periodicamente durante
o período de gravidez (uma vez por mês) a fim de detectar uma possível soroconversão.
Uma reação positiva indica a existência de anticorpos anti-toxoplasma, os quais podem denotar
tanto uma infecção passada como uma toxoplasmose aguda. Neste caso, convém determinar o
título de anticorpos com as técnicas quantitativas habituais, além de investigar a presença de IgM
específica anti-toxoplasma.
TESTE SEMI-QUANTITATIVO
-
Colocar 50 µl de solução salina em cada uma das seções de 2 a 6 da lâmina.
Com uma pipeta automática, depositar 50 µl de soro nas seções 1 e 2 da lâmina.
Com a mesma pipeta aspirar e expulsar várias vezes o soro e a solução salina contidos na
seção 2 até conseguir misturá-los bem.
Tomar 50 µl da mistura obtida na seção 2 e transferir para a seção 3.
Realizar as mesmas operações descritas anteriormente para conseguir a mistura correta dos
reativos sucessivamente até a seção 6 e então descartar 50 µl.
Testar cada diluição tal como se descreve na seção TESTE QUALITATIVO.
17
LER ALTERAÇÕES DESTACADAS
toxocell latex
Teste rápido de aglutinação de partículas de látex em
lâmina para a determinação qualitativa e semi-quantitativa
de anticorpos anti-toxoplasma em soro.
Clase de peligro
No clasificado.
Indicaciones de peligro
Ninguna.
Consejos de prudencia
P280: Llevar guantes/prendas/gafas/máscara de protección.
P305+351+338: EN CASO DE CONTACTO CON LOS OJOS: Aclarar cuidadosamente con agua
durante varios minutos. Quitar las lentes de contacto, si lleva y resulta fácil. Seguir aclarando.
Conservación
Los reactivos permanecerán inalterados hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta, si se
conservan entre 2 y 8°C. No congelar.
Sumário
Material necesario no incluido
A toxoplasmose é uma doença infecciosa causada pelo protozoário Toxoplasma gondii (1), que
afeta tanto ao homem como aos animais. A toxoplasmose em sua forma adquirida é uma infecção
freqüente, geralmente benigna e assintomática (2).
No entanto, esta doença tem mais relevância quando atinge mulheres grávidas, dado que o
parasita pode alcançar a circulação fetal através da placenta e causar toxoplasmose congênita.
Os estudos realizados demonstram que a presença de infecção aguda durante o primeiro
trimestre da gravidez aumenta a probabilidade de que se originem lesões fetais, cujo risco e
gravidade diminuem à medida que a gravidez avança. As conseqüências da toxoplasmose
congênita podem variar desde o aborto espontâneo e nascimento prematuro até lesões viscerais
e neurológicas graves no feto, sendo bastante freqüentes as lesões oculares. Bebês com
toxoplasmose congênita podem permanecer assintomáticos por várias semanas após o
nascimento (3-6).
A toxoplasmose pode ser uma seria ameaça em pacientes imunodeprimidos (AIDS, transplante
de órgãos). Nos pacientes com AIDS, a toxoplasmose aguda costuma ocorrer devido a uma
reativação de uma infecção latente previamente adquirida, embora também se tenham
diagnosticado infecções primárias (6,7).
Solución salina (0,9% NaCI, sólo para el test semicuantitativo), pipetas automáticas, agitador
rotatorio, palillos mezcladores y cronómetro.
Princípio
O reativo toxocell latex é uma suspensão de partículas de látex de poliestireno de tamanho
uniforme recobertas com antígeno solúvel de Toxoplasma gondii. As partículas de látex permitem
visualizar a reação antígeno-anticorpo. Se anticorpos anti-toxoplasma estiverem presentes no
soro sucederá a mencionada reação, a suspensão de látex perderá seu aspecto homogêneo,
evidenciando-se uma clara aglutinação.
Quando o reativo látex se mistura com o soro, se o soro tem aproximadamente mais de 10 Ul/ml
de anticorpos anti-toxoplasma, ocorrerá uma clara aglutinação. Os resultados estão expressados
em UI/ml de anticorpos totais anti-toxoplasma segundo o 3er Padrão Internacional da OMS.
Componentes
REF 3000-4525.
-
-
Reativo látex: 1 x 4 ml.
Suspensão de partículas de látex de poliestireno recobertas com antígeno solúvel de
Toxoplasma gondii em um tampão com albumina de soro bovino. Contém < 0,1% de azida
sódica.
Controle positivo: 1 x 1 ml.
Soro humano diluído, contendo IgG de coelho anti-toxoplasma. Contém < 0,1% de azida
sódica.
Controle negativo: 1 x 1 ml.
Soro humano negativo diluído. Contém < 0,1% de azida sódica.
Lâminas descartáveis: 18 unidades (x6).
Precauções
toxocell latex é para o diagnóstico IN VITRO.
A azida sódica pode reagir com os encanamentos e ralos de chumbo ou cobre, originando azidas
metálicas altamente explosivas. Ao descartar os restos de reativos, fazê-lo em abundante volume
de água.
Todos os materiais de origem humana utilizados na preparação deste produto foram testados e
apresentaram resultados negativos em relação a presença de anticorpos contra os vírus HIV1/HIV-2 e HCV, assim como para o antígeno de superfície da hepatite B, utilizando um método
aprovado pela Food and Drug Administration (USA).
ATENÇÃO: MATERIAL DE RISCO BIOLÓGICO.
Dado que nenhum método pode oferecer a total segurança da ausência de agentes infecciosos,
este produto deve ser manipulado com precaução (8).
Descartar todos os materiais usados em recipientes adequados para material bio-contaminante.
16
Recolección de la muestra
Usar suero fresco. Las muestras pueden ser conservadas durante 2 días entre 2-8°C. Si es por
un período de tiempo más largo las muestras deben ser congeladas (-20°C).
PROCEDIMIENTO
Control de calidad: Antes de realizar una serie de determinaciones es aconsejable controlar el
reactivo con cada uno de los controles incluidos en el kit. Ambos controles deberán utilizarse
siguiendo los pasos descritos para el TEST CUALITATIVO. La reacción entre el control positivo y el
reactivo debe dar una clara aglutinación distinta de la apariencia uniforme del control negativo. Si no
se obtienen dichos resultados, no utilice el kit.
De cara a asegurar una correcta dosificación del reactivo, el gotero debe colocarse verticalmente
y dejar caer una sola gota libremente.
TEST CUALITATIVO
-
Dejar que los reactivos alcancen la temperatura ambiente.
Dosificar 50 µl de suero (o una gota de control) en una de las secciones del portaobjetos.
Agitar el vial del reactivo y añadir una gota del reactivo junto a la gota de muestra.
Mezclar ambas gotas con un palillo cubriendo toda la superficie de la sección del portaobjetos.
Agitar el portaobjetos manualmente o en un agitador rotatorio (80-100 rpm) durante 5 minutos.
Observar la presencia o ausencia de aglutinación.
REACCIONES POSITIVAS: Presencia de aglutinación.
3+ Agregados grandes sobre fondo transparente.
2+ Agregados moderados sobre fondo ligeramente opaco.
1+ Agregados finos sobre fondo opaco.
REACCIONES NEGATIVAS:
Ausencia de aglutinación, suspensión uniforme.
Interpretación de los resultados
El test cualitativo realizado con una única muestra de suero puede utilizarse para la valoración del
estado inmunológico del individuo.
Una reacción negativa indica la ausencia de anticuerpos antitoxoplasma o niveles inferiores a 10
UI/ml. Si el suero es de una mujer embarazada, se aconseja repetir el análisis periódicamente
durante el embarazo (una vez por mes) para detectar una posible seroconversión.
Una reacción positiva indica la presencia de anticuerpos antitoxoplasma que pueden reflejar tanto
una infección antigua como como una toxoplasmosis aguda. En este caso se recomienda
proceder a la determinación del título de anticuerpos antitoxoplasma con las técnicas cuantitativas
habituales, así como investigar la presencia de IgM específicas antitoxoplasma.
TEST SEMICUANTITATIVO
-
Dosificar 50 µl de solución salina en cada una de las secciones 2 a 6 del portaobjetos.
Dosificar con una pipeta automática 50 µl de suero en las secciones 1 y 2 del portaobjetos.
Con la misma pipeta aspirar y expulsar varias veces la muestra y la solución salina contenidas
en la sección 2 hasta lograr una buena mezcla.
Tomar 50 µl de la mezcla realizada en la sección 2 y transferirlos a la sección 3.
Realizar las mismas operaciones descritas anteriormente para lograr la mezcla correcta de los
reactivos hasta la sección 6 y desechar entonces 50 µl.
Comprobar cada dilución como está descrito en el apartado TEST CUALITATIVO.
5
Sección
1
2
3
4
5
6
Sezione
1
2
3
4
5
6
Salina µl
-
50
50
50
50
50
Salina µl
-
50
50
50
50
50
Suero µl
50
50
-
-
-
-
Siero µl
50
50
-
-
-
-
Mezclar y
transferir µl
Dilución
1:1
1:2
1:4
1:8
1:16
1:32
Diluizione
1:1
1:2
1:4
1:8
1:16
1:32
UI/ml
10
20
40
80
160
320
UI/ml
10
20
40
80
160
320
50
50
50
Miscelare e
trasferire µl
50 
50
50
50
50
50 
50
Interpretación de los resultados
Interpretazione dei risultati
El título aproximado es la dilución más alta del suero que aún presente aglutinación claramente
visible (ver esquema).
Un resultado positivo sólo indica exposición previa; el título de anticuerpos no puede utilizarse
para determinar una infección activa o el estado de la enfermedad. Para confirmar una infección
aguda deben realizarse tests IgM específicos.
Il titolo approssimativo del siero corrisponde alla più alta diluizione di siero che presenti ancora
una chiara agglutinazione (vedi schema).
Un risultato positivo indica solo una esposizione previa; il titolo di anticorpi non serve a individuare
una infezione attiva o lo stato della malattia. Per confermare un'infezione acuta vanno realizzati
test IgM specifici.
Limitaciones del procedimiento
Limitazioni della procedura
En algunas ocasiones, sueros fuertemente positivos pueden presentar fenómeno de zona. Por
esta razón, si se sospecha la existencia de toxoplasmosis y el resultado de la prueba ha sido
negativo, se recomienda repetir la prueba con una dilución 1:5 del suero.
Se ha publicado que los tests de aglutinación de látex producen resultados falsos positivos. Estas
reacciones se han asociado con una inmunoglobulina M no específica.
Alcune volte i sieri fortemente positivi possono presentare un fenomeno di zona. Per questo
motivo, se si sospetta la presenza di toxoplasmosi e il risultato del test è stato negativo, si
raccomanda di ripeterlo con una diluizione 1:5 del siero.
È stato scritto che i test di agglutinazione di lattice producono risultati falsi positivi. Questi risultati
sono associati a un'immunoglobulina M aspecifica.
Valores previstos
Valori attesi
Diferentes estudios realizados muestran que la incidencia de anticuerpos antitoxoplasma depende
de la población estudiada. En un estudio realizado en 1962, los resultados de la presencia de
anticuerpos variaron desde un 3% en soldados de los estados de las Montañas Rocosas (USA), a
cerca del 100% en la población femenina adulta de París (9).
En un estudio multicéntrico realizado recientemente en Barcelona (España) con más de 16.000
muestras de suero de embarazadas, 28,6% de las mujeres tenían anticuerpos antitoxoplasma. La
presencia de anticuerpos IgM específicos se detectó en un 2,22% de las mujeres con anticuerpos
antitoxoplasma (10).
Vari studi svolti mostrano che la presenza di anticorpi antitoxoplasma dipende dalla popolazione
esaminata. In un studio realizatto in 1962 i risultati relativi alla presenza di anticorpi variano dal 3%
nei soldati delle Montagne Rocciose (USA), al 100% circa della popolazione femminile adulta di
Parigi (9).
In un altro studio multicentrico svolto recentemente in Barcelona (Spagna) su più di
16000
campioni di siero di gestanti, il 28,6% delle donne presentava titoli d’anticorpi antitoxoplasma. La
presenza di anticorpi IgM specifica sono detettati in 2,22% delle donne con anticorpi
antitoxoplasma (10).
Caratteristiche di funzionalità
Características funcionales
La sensibilidad del toxocell latex se estudió por comparación con unos Enzimoinmunoensayos
de Micropartículas (MEIA) comercializados para la detección de IgG e IgM, usando un panel de
72 muestras positivas para anticuerpos IgG, 52 muestras positivas para anticuerpos IgG e IgM y
76 muestras negativas. La sensibilidad relativa fue del 100%, las 124 muestras fueron positivas
con el reactivo toxocell latex. La especificidad relativa fue del 84,2% (64/76). El valor predictivo
positivo para el reactivo toxocell latex fue del 91,2% y el valor predictivo negativo del 100%.
Se realizó otro estudio con 215 muestras de suero de embarazadas, conocidas como positivas de
IgG antitoxoplasma por el mismo ensayo MEIA comercial. La sensibilidad relativa fue del 100%,
las 41 muestras positivas fueron positivas con el reactivo látex. La especificidad relativa fue del
95,4% (166/174). El valor predictivo de los positivos fue del 83,7% y el valor predictivo negativo
fue del 100%.
La funcionalidad del toxocell latex se comparó con la del Dye test como técnica de referencia. La
sensibilidad del reactivo fue de un 98,7%, la especificidad de un 95,8%, el valor predictivo positivo
del 99,4% y el valor predictivo negativo del 92,0% (11).
En un estudio realizado con muestras de suero de personas transplantadas, el reactivo toxocell
latex fue capaz de detectar una elevación del título de anticuerpos antitoxoplasma en
transplantados de corazón que habían experimentado una infección primaria o una reactivación
de una infección ya pasada (12).
Un panel de 10 muestras de suero se comprobó durante 3 días consecutivos siguiendo el test
semicuantitativo. Los resultados de este estudio indican que la reproducibilidad del toxocell latex
es del 100%.
La sensibilità del toxocell latex è stata studiata confrontandolo con un Test immunoenzimatico a
cattura di microparticelle (MEIA) commercializzato per il rilevamento di IgG e IgM, utilizzando a
questo fine un panel di 72 campioni positivi agli anticorpi IgG, 52 positivi agli anticorpi IgG e IgM e
76 negativi. La sensibilità relativa è stata del 100%, tutti i 124 campioni hanno dato positivo con il
reagente toxocell latex. La specificità relativa riscontrata è dell'84,2% (64/76). Il valore predittivo
positivo per il reagente toxocell latex è stato del 91,2% mentre quello negativo, del 100%.
Si è eseguito un altro studio con 215 campioni di siero di gestanti risultate positive per IgG
antitoxoplasma con lo stesso test commerciale MEIA. La sensibilità relativa è risultata essere del
100%, tutti i 41 campioni positivi hanno dato positivo anche con il reagente latex. La specificità
relativa è stata dell'95,4% (166/174) mentre il valore predittivo dei positivi è stato del 83,7% e
quello negativo del 100%.
La funzionalità del toxocell latex è stata confrontata usando quella del test tintoriale (Dye test)
come tecnica di riferimento. Il reagente ha dimostrato una sensibilità del 98,7%, una specificità del
95,8% e un valore predittivo positivo del 99,4%, mentre il valore predittivo negativo è stato del
92,0% (11).
In uno studio realizzato con campioni di siero di soggetti trapiantati, il reagente toxocell latex è
riuscito a rilevare un incremento del titolo di anticorpi antitoxoplasma nei trapiantati di cuore che
avevano sperimentato un'infezione primaria o una riattivazione di un'infezione precedente (12).
Un panel di 10 campioni di siero è stato sottoposto per 3 giorni consecutivi a test semiquantitativo e i
risultati di questo studio indicano che la riproducibilità del toxocell latex è del 100%.
Bibliografia
Vedi "References" alla fine del prospetto.
Bibliografía
Ver "References" al final del folleto.
6
15
HERVORGEHOBENE ÄNDERUNGEN LESEN
Classe di pericolo
Non classificato.
Indicazioni di pericolo
Nessuna.
Consigli di prudenza
P280: Indossare guanti/indumenti protettivi/Proteggere gli occhi/il viso.
P305+351+338: IN CASO DI CONTATTO CON GLI OCCHI: sciacquare accuratamente per
parecchi minuti. Togliere le eventuali lenti a contatto se è agevole farlo. Continuare a sciacquare.
toxocell latex
Schnelltest auf Objektträgern durch Agglutination von
Latexpartikeln zur qualitativen und semiquantitativen
Bestimmung von Anti-Toxoplasma-Antikörpern in Serum.
Conservazione
Tutti i reagenti sono stabili fino alla data di scadenza indicata sull'etichetta, se conservati a 2-8°C.
Non congelare.
Materiale necessario non incluso
Soluzione salina (0,9% NaCl, solo per il test semiquantitativo), pipette automatiche, rotatore,
bastoncini miscelatori e cronometro.
Raccolta dei campioni
Usare siero fresco. I campioni possono essere conservati a 2-8°C per non più di 2 giorni. Per
tempi più lunghi devono essere congelati (-20°C).
PROCEDURA
Controllo di qualità: Prima di fare un gruppo di determinazioni testare il reagente latex con i controlli
inclusi nel kit. Ogni controllo dovrebbe essere usato utilizzando il TEST QUALITATIVO. La reazione
del controllo positivo con il reagente dovrebbe mostrare una chiara agglutinazione, diversa
dall’aspetto uniforme del controllo negativo. Se non si ottiene questo risultato, scartare il kit.
Il dispensatore deve essere messo in verticale rispetto al piano di lavoro. Deve essere dispensata
una goccia alla volta.
TEST QUALITATIVO
-
Portare tutti i reattivi a temperatura ambiente.
Dosare 50 µl di campione (o una goccia di controllo) su una sezione del vetrino.
Agitare il flacone di reagente e aggiungere una goccia di reagente vicino a quella del campione.
Miscelare entrambe le gocce con un bastoncino coprendo l’intera superficie della sezione del
vetrino.
Roteare il vetrino manualmente oppure in un agitatore automatico (80-100 rpm) per 5 minuti.
Osservare la presenza o l’assenza di agglutinazione.
REAZIONI POSITIVE: Presenza di agglutinazione.
3+ Aggregati grandi su fondo trasparente.
2+ Aggregati moderati su fondo leggermente opaco.
1+ Aggregati fini su fondo opaco.
Prinzip
Das toxocell latex-Reagenz ist eine Suspension aus Polystyren-Latexpartikeln in gleichmäßiger
Größe, die mit löslichem Antigen des Toxoplasma gondii beschichtet ist. Die Latexpartikel
erlauben eine optische Erkennung der Antigen-Antikörper-Reaktion. Wenn diese Reaktion
aufgrund der Anwesenheit von Anti-Toxoplasma-Antikörpern in der Probe stattfindet, verliert
die Latexsuspension ihr homogenes Aussehen und eine klare Agglutination wird sichtbar.
Wenn das Latex-Reagenz mit dem Serum gemischt wird und dieses mehr als 10 IE/ml AntiToxoplasma-Antikörper enthält, entsteht eine klare Agglutination. Die Ergebnisse werden,
gemäß des 3. internationalen Standards der WHO, in IE/ml der Gesamtzahl Anti-ToxoplasmaAntikörper angegeben.
REF 3000-4525.
-
Interpretazione dei risultati
Per valutare lo stato immunologico di un individuo si può utilizzare il test qualitativo eseguito su un
unico campione.
Una reazione negativa indica l’assenza di anticorpi antitoxoplasma o dei livelli inferiori a
10
UI/ml. Nelle gestanti si consiglia di ripetere periodicamente l’analisi sierologico (una volta al mese)
per rilevare un’eventuale sieroconversione.
Una reazione positiva indica la presenza di anticorpi antitoxoplasma, che può indicare sia
un’infezione precedente, sia una toxoplasmosi acuta. In questo caso si raccomanda di eseguire la
determinazione del livello di anticorpi antitoxoplasma con i tests quantitativi abituali e di controllare
la presenza di IgM specifiche antitoxoplasma.
-
Latex-Reagenz: 1 x 4 ml.
Mit löslichem Antigen des Toxoplasma gondii beschichtete Suspension von PolystyrenLatexpartikeln in Puffer, der Rinderserum Albumin enthält. Enthält < 0,1% Natriumazid.
Positive Kontrolle: 1 x 1 ml.
Verdünntes Humanserum, das Anti-Toxoplasma-IgG von Kaninchen enthält. Enthält < 0,1%
Natriumazid.
Negative Kontrolle: 1 x 1 ml.
Verdünntes, negatives Humanserum. Enthält < 0,1% Natriumazid.
Einmal-Objektträger: 18 Einheiten (x6).
Vorsichtsmaßnahmen
Dosare 50 µl di soluzione salina nelle sezioni da 2 a 6 del vetrino.
Con una pipetta automatica dosare 50 µl di campione nelle sezioni 1 e 2 del vetrino.
Con la stessa pipetta miscelare il campione con la salina nella sezione 2 fino ad ottenere
una buona miscelazione.
Prelevare 50 µl della miscela realizzata nella sezione 2 e trasferire nell a sezione 3.
Ripetere questa operazione fino alla sezione 6. Scartare 50 µl.
Misurare ogni diluizione come descritto nella sezione TEST QUALITATIVO.
toxocell latex ist ausschließlich für die IN VITRO-Diagnostik bestimmt.
Natriumazid kann auf Blei- oder Kupfer-Rohrleitungen und -Abflüsse reagieren und zu
hochexplosiven Metallaziden führen. Beim Entfernen der Reagenzreste muss mit genügend
Wasser nachgespült werden.
Das gesamte zur Herstellung dieser Reagenzien verwendete Humanmaterial wurde mit einer von
der FDA anerkannten Methode auf HBsAg, HIV 1/2 und HCV Antikörper untersucht und für
negativ befunden.
ACHTUNG: BIOLOGISCH GEFÄHRLICHES MATERIAL.
Da kein Nachweisverfahren die Abwesenheit von infektiösen Agenzien garantieren kann, ist
dieses Produkt mit entsprechenden Vorsichtsmassnahmen zu handhaben (8).
Alle benutzten Materialien sind separat in Behältern für biologische Abfälle zu entsorgen.
14
7
TEST SEMIQUANTITATIVO
-
Die Toxoplasmose ist eine Infektionskrankheit, die durch den Protozoa Toxoplasma gondii (1)
ausgelöst wird und sowohl Menschen als auch Tiere befallen kann. In ihrer erworbenen Form ist
die Toxoplasmose eine häufig vorkommende Krankheit, die in der Regel symptomfrei und gutartig
verläuft (2).
Bei schwangeren Frauen kann sie jedoch schwerwiegende Folgen haben, da der Parasit über die
Plazenta den fetalen Blutkreislauf erreichen und eine konnatale Toxoplasmose hervorrufen kann.
Verschiedene Studien belegen, dass das Risiko und die Schwere der konnatalen Toxoplasmose
größer ist, wenn die Infektion in den ersten drei Monaten der Schwangerschaft stattfindet. Die Folgen
der konnatalen Toxoplasmose können Fehl- und Frühgeburten bis hin zu viszeralen und
neurologischen Läsionen sein, und besonders häufig treten okulare Komplikationen auf. Bei Kindern
mit konnataler Toxoplasmose kann es auch vorkommen, dass die ersten Wochen nach der Geburt
(3-6) symptomfrei verlaufen.
Die Toxoplasmose kann eine ernsthafte Bedrohung für immundepressive Patienten (AIDS,
Organtransplantationen) darstellen. Bei den AIDS-Patienten ist die Reaktivierung einer latenten,
zurückliegenden Infektion häufig die Ursache einer akuten Toxoplasmose, wobei aber auch
primäre Infektionen diagnostiziert worden sind (6,7).
Bestandteile
REAZIONI NEGATIVE:
Assenza di agglutinazione, sospensione omogenea.
-
Zusammenfassung
VEDI CAMBI RISALTATI
Gefahrenklasse
Nicht eingestuft.
Gefahrenhinweise
Keine.
Sicherheitshinweise
P280: Schutzhandschuhe / Schutzkleidung / Augenschutz / Gesichtsschutz tragen.
P305+351+338: BEI KONTAKT MIT DEN AUGEN: Einige Minuten lang behutsam mit Wasser
spülen. Vorhandene Kontaktlinsen nach Möglichkeit entfernen. Weiter spülen.
toxocell latex
Test rapido di agglutinazione di particelle di lattice su
vetrino per la determinazione qualitativa e semiquantitativa
in siero degli anticorpi antitoxoplasma.
Lagerung
Bei einer Lagerungstemperatur von 2-8 °C bleiben Reagenz und Kontrollen bis zu dem auf dem
Etikett angegebenen Verfallsdatum haltbar. Nicht einfrieren.
Erforderliches, nicht mitgeliefertes Material
Normale Kochsalzlösung (0,9% NaCl, nur für die semiquantitative Bestimmung), AutomatikPipetten, Rotator, Rührstäbchen und Stoppuhr.
Probenmaterial
Frisches Serum benutzen. Die Seren sind bei 2-8 °C zu lagern. Bei Lagerung über 2 Tagen sollten
die Proben bei -20 °C eingefroren werden.
DURCHFÜHRUNG
Qualitätskontrolle: Vor Durchführung der verschiedenen Bestimmungsstufen muss eine
Überprüfung des Latexreagenz mit jeder der im Kit enthaltenen Kontrollen entsprechend der im
Abschnitt QUALITATIVE BESTIMMUNG aufgeführten Schritte vorgenommen werden. Die
Reaktion zwischen Positiv-Kontrolle und Reagenz muss eine klare Agglutination zeigen, die sich
von dem homogenen Aussehen der Negativ-Kontrolle unterscheidet. Andernfalls darf der Kit nicht
verwendet werden.
Um die richtige Abgabe der Tropfflasche sicherzustellen, muss diese senkrecht gehalten und ein
einziger Tropfen fallengelassen werden.
-
La toxoplasmosi è una malattia infettiva causata dal protozoo Toxoplasma gondii (1), che colpisce
sia l’uomo che gli animali. La toxoplasmosi è, nella forma acquisita, un’infezione frequente,
generalmente benigna e asintomatica (2).
Però assume una particolare gravità quando colpisce le gestanti, in tal caso il parassita può
entrare nella circolazione fetale attraverso la placenta e causare la toxoplasmosi congenita. Gli
studi svolti mostrano che l’infezione acuta nel primo trimestre di gestazione causa il maggior
pericolo di lesioni fetali. Le conseguenze della toxoplasmosi congenita vanno dall’aborto
spontaneo e dalla prematurità alle lesioni viscerali e neurologiche gravi nel feto, particolarmente
frequenti quelle oculari. I neonati con toxoplasmosi congenita possono rimanere asintomatici nelle
prime settimane dopo il parto (3-6).
La toxoplasmosi può rappresentare un grave pericolo per pazienti immunodepressi (AIDS,
trapianti di organi). Nel pazienti affetti da AIDS la toxoplasmosi acuta suole manifestarsi per effetto
della riattivazione di una infezione latente previamente acquisita, ma ci sono anche casi di
infezioni primarie (6,7).
Principio
QUALITATIVE BESTIMMUNG
-
Sommario
Reagenzien vor Gebrauch auf Raumtemperatur bringen.
50 µl der Probe (oder einen Tropfen der Kontrolle) auf eines der Objektträgertestfelder bringen.
Reagenzflasche schütteln und 1 Tropfen Latexreagenz neben den Tropfen der Probe geben.
Beide Tropfen mit einem Stäbchen gut mischen und auf der ganzen Testfeldoberfläche verteilen.
Objektträger leicht per Hand oder auf dem Rotator (80-100 UPM) während 5 Minuten
schwenken.
Danach Agglutination ablesen.
POSITIVE ERGEBNISSE: Anwesenheit von Agglutination
3+ Große Aggregate auf durchsichtigem Hintergrund.
2+ Mittlere Aggregate auf leichttrübem Hintergrund.
1+ Feine Aggregate auf trübem Hintergrund.
Il reagente toxocell latex è una sospensione di particelle di lattice di polistirene di dimensioni
omogenee, sensibilizzate con l'antigene solubile del Toxoplasma gondii. Le particelle di lattice
evidenziano la reazione antigene-anticorpo. Se, a causa della presenza nel siero di anticorpi
antitoxoplasma, si verifica tale reazione, la sospensione di lattice perde il suo aspetto omogeneo e
si osserva una chiara agglutinazione.
Quando si miscela il reagente lattice con il siero, se il siero contiene più de 10 UI/ml di anticorpi
antitoxoplasma si verifica una chiara agglutinazione. I risultati sono espressi in UI/ml d’anticorpi
totali antitoxoplasma secondo il 3º Standard Internazionale dell’OMS.
Componenti
REF 3000-4525.
-
NEGATIVE ERGEBNISSE:
Abwesenheit von Agglutination, homogene Suspension.
Auswertung der Ergebnisse
-
Der qualitative Test mit einer einzigen Serumprobe kann verwendet werden, um den
immunologischen Zustand des Individuums zu beurteilen.
Eine negative Reaktion ist ein Hinweis auf die Abwesenheit von Anti-Toxoplasma-Antikörpern bzw. auf
eine Anwesenheit in geringen Mengen von weniger als 10 IE/ml. Bei Seren von schwangeren Frauen
wird empfohlen, den Test in regelmäßigen Abständen (einmal pro Monat) während der Schwangerschaft
zu wiederholen, um eine mögliche Serumkonversion festzustellen.
Eine positive Reaktion ist ein Hinweis auf die Anwesenheit von Anti-Toxoplasma-Antikörpern, und kann
sowohl eine alte Infektion als auch eine akute Toxoplasmose anzeigen. In diesem Fall ist es
empfehlenswert, den Anti-Toxoplasma-Antikörper-Titer mit den herkömmlichen quantitativen Techniken zu
bestimmen und die Anwesenheit spezifischer Anti-Toxoplasma-IgM zu untersuchen.
-
Precauzioni
50 µl normale Kochsalzlösung auf je eines der Testfelder 2-6 des Objektträgers eben.
Mit automatischer Pipette 50 µl Serum auf Testfelder 1 und 2 des Objektträgers eben.
Mit der gleichen Pipette Serum und Salzlösung des Testfeldes 2 mehrmals aufziehen und
abgeben, bis eine gute Mischung entsteht.
toxocell latex è per uso diagnostico IN VITRO.
La sodio azide può reagire a contatto con tubature e scarichi in piombo o in rame, formando azidi
metalliche altamente esplosive. Far scorrere acqua in abbondanza quando si gettano i residui dei
reagenti.
Tutto il materiale di origine umana utilizzato nella preparazione di questo prodotto è risultato
negativo per anticorpi dei virus HIV-1/HIV-2 come pure per l'antigene di superficie dell'epatite B,
usando metodi approvati dalla Food and Drug Administration (USA).
ATTENZIONE: MATERIALE POTENZIALMENTE BIOPERICOLOSO.
Poiché nessun metodo può offrire la totale sicurezza dell’assenza di agenti infettivi, questo
prodotto deve essere manipolato con precauzione (8).
Depositare tutti i materiali utilizzati in recipienti idonei per materiale biocontaminante.
8
13
SEMIQUANTITATIVE BESTIMMUNG
-
-
Reagente lattice: 1 x 4 ml.
Sospensione di particelle di lattice di polistirene sensibilizzate con antigene solubile di
Toxoplasma gondii in un tampone con albumina bovina sierica. Contiene < 0,1% di sodio
azide.
Controllo positivo: 1 x 1 ml.
Siero umano diluito contenente IgG di coniglio antitoxoplasma. Contiene < 0,1% di sodio azide.
Controllo negativo: 1 x 1 ml.
Siero umano negativo diluito. Contiene < 0,1% di sodio azide.
Vetrini monouso: 18 sezioni (x6).
Section
1
2
3
4
5
6
Saline µl
-
50
50
50
50
50
Sérum µl
50
50
-
-
-
-
-
Mélanger et
transférer µl
Dilution
1:1
1:2
1:4
1:8
1:16
1:32
UI/ml
10
20
40
80
160
320
50
50
50
50 
50
Interprétations des résultats
Le titre approximatif du sérum est la dilution la plus élevée présentant encore une réaction positive
(voir schéma).
Un résultat positif indique seulement une exposition préalable ; le titre d’anticorps ne peut servir à
déterminer une infection active ni le stade de la maladie. Pour confirmer une infection aiguë, il faut
faire des tests IgM spécifiques.
Limites de la procédure
Certains sérums fortement positifs peuvent présenter des phénomènes de zone. Pour cette
raison, si l’on soupçonne une toxoplasmose et si le résultat a été négatif, refaire le test avec une
dilution 1:5 du sérum.
D’après certains travaux publiés, les tests d’agglutination de latex produisent des résultats
faussement positifs. Ces résultats sont associés à une immunoglobuline M non spécifique.
Valeurs attendues
Plusieurs études indiquent que l’incidence des anticorps antitoxoplasme dépend de la population
étudiée. Dans une étude réalisée en 1962, les résultats de la présence d’anticorps ont oscillé de
3% chez des soldats des États des Montagnes rocheuses (USA) à près de 100% sur la population
féminine adulte de Paris (9).
Dans une étude multicentrale réalisée récemment à Barcelone (Espagne) sur plus de 16 000
échantillons de sérum de femmes enceintes, 28,6% présentaient des anticorps antitoxoplasme et
sur 2,22% de ces femmes, la présence d’anticorps IgM spécifiques a été détectée (10).
Caractéristiques fonctionnelles
La sensibilité du toxocell latex a été comparée à celle d’un enzymo-immunotest de
microparticules (MEIA) commercialisé pour la détection des IgG et des IgM, en utilisant un panel
de 72 échantillons positifs aux anticorps IgG, 52 échantillons positifs aux anticorps IgG et IgM et
76 échantillons négatifs. La sensibilité relative a été de 100%, les 124 échantillons ont donné
positif avec le réactif toxocell latex. La spécificité relative a été de 84,2% (64/76). La valeur
prédictive positive pour le réactif toxocell latex a été de 91,2% et la valeur prédictive négative de
100%.
Une autre étude a porté sur 215 échantillons de sérum de femmes enceintes, dont la positivité aux
IgG antitoxoplasme avait été déterminée par le même test MEIA commercial. La sensibilité
relative a été de 100%, les 41 échantillons positifs ont donné positif avec le réactif latex. La
spécificité relative a été de 95,4% (166/174). La valeur prédictive des résultats positifs a été de
83,7% et la valeur prédictive négative de 100%.
La fonctionnalité du toxocell latex a été comparée à celle du Dye test qui a servi de technique de
référence. La sensibilité du réactif a été de 98,7%, la spécificité de 95,8%, la valeur prédictive
positive de 99,4% et la valeur prédictive négative de 92,0% (11).
Dans une étude portant sur des échantillons de sérum de sujets greffés, le réactif toxocell latex a
été capable de détecter une augmentation du titre d’anticorps antitoxoplasme chez des patients
qui, après une greffe du cœur, avaient subi une infection primaire ou la réactivation d’une infection
ancienne (12).
Un panel de 10 échantillons de sérum a été analysé pendant 3 jours consécutifs en appliquant le
test semi-quantitatif. Les résultats de cette étude indiquent une reproductibilité de 100% pour le
toxocell latex.
Bibliographie
Voir "References" à la fin du prospectus.
50 µl der Mischung von Testfeld 2 nehmen und auf Testfeld 3 überführen.
Die beschriebenen Schritte bis Testfeld 6 wiederholen, damit die richtige Mischung der
Reagenzien entsteht. Nach Testfeld 6 müssen 50 µl der Mischung verworfen werden.
Jede Verdünnung so bewerten, wie im Kapitel QUALITATIVE BESTIMMUNG beschrieben.
Testfeld
1
2
3
4
5
6
Salzlösung µl
-
50
50
50
50
50
Serum µl
50
50
-
-
-
-
Mischen und
überführen µl
Verdünnung
1:1
1:2
1:4
1:8
1:16
1:32
IE/ml
10
20
40
80
160
320
50
50
50
50 
50
Auswertung der Ergebnisse
Der approximative Titer des Serums entspricht der höchsten Verdünnung, die noch eine klar
sichtbare Agglutination zeigt (siehe Schema).
Ein positives Ergebnis ist lediglich ein Hinweis auf eine zurückliegende Infektion. Der AntikörperTiter kann nicht verwendet werden, um eine aktive Infektion oder den Krankheitszustand zu
bestimmen. Zur Bestätigung einer akuten Infektion sind spezifische IgM-Tests durchzuführen.
Begrenzung der Methode
In einigen Fällen kann bei stark positiven Seren ein Prozoneneffekt auftreten. Deshalb sollte der
Test, wenn der Verdacht auf Toxoplasmose besteht und das Ergebnis negativ ausgefallen ist, mit
einer 1:5 Verdünnung des Serums wiederholt werden.
Es sind Studien veröffentlicht worden, die von falschen positiven Ergebnissen bei LatexAgglutinationstests berichten. Diese Ergebnisse sind auf einen unspezifischen Immunoblobulin M
zurückzuführen.
Erwartete Werte
Verschiedene Studien haben gezeigt, dass die Inzidenz von Anti-Toxoplasma-Antikörpern
populationsabhängig ist. In einer 1962 durchgeführten Studie schwankten die Ergebnisse
bezüglich der Anwesenheit von Antikörpern zwischen 3% bei Soldaten der Rocky MountainStaaten (USA) und annähernd 100% in der erwachsenen femininen Bevölkerung von Paris (9).
In einer kürzlich in Barcelona (Spanien) durchgeführten multizentrischen Studie an über 16.000
Serumproben schwangerer Frauen, hatten 28,6% Anti-Toxoplasma-Antikörper. Die Anwesenheit
spezifischer IgM-Antikörper wurde bei 2,22% der Frauen mit Anti-Toxoplasma-Antikörpern
ermittelt (10).
Charakteristika des Tests
Die Sensitivität des toxocell latex wurde im Vergleich mit einem zur Bestimmung des IgG und
IgM kommerzialisierten Mikropartikel-Enzymimmunoassay (MEIA) untersucht. Dabei wurde ein
Panel mit 72 für IgG-Antikörper positiven Proben, 52 für IgG- und IgM-Antikörper positiven Proben
und 76 negativen Proben verwendet. Die relative Sensitivität lag bei 100%, die 124 Proben waren
mit dem Reagenz toxocell latex positiv. Die relative Spezifizität lag bei 84,2% (64/76). Der
positive Vorhersagewert für das Reagenz toxocell latex betrug 91,2% und der negative
Vorhersagewert 100%.
Es wurde eine weitere Studie an 215 Serumproben schwangerer Frauen, die mit demselben
kommerziellen MEIA-Test als positiv für IgG-Anti-Toxoplasma befunden worden waren,
durchgeführt. Die relative Sensitivität lag bei 100%, die 41 positiven Proben waren mit dem LatexReagenz positiv. Die relative Spezifizität lag bei 95,4% (166/174). Der positive Vorhersagewert
betrug 83,7% und der negative Vorhersagewert 100%.
Die Funktionalität des toxocell latex wurde mit dem Dye-Test als Referenzmethode verglichen.
Die Sensitivität des Reagenz lag bei 98,7%, die Spezifizität bei 95,8%, der positive
Vorhersagewert betrug 99,4% und der negative Vorhersagewert 92,0% (11).
In einer Untersuchung mit Serumproben transplantierter Personen konnte das Reagenz toxocell
latex eine Erhöhung des Anti-Toxoplasma-Antikörper-Titers bei den Personen mit einer
Herztransplantation, bei denen eine primäre Infektion oder eine Reaktivierung einer
zurückliegenden Infektion aufgetreten war, feststellen (12).
Ein Panel mit 10 Serumproben wurde an 3 aufeinander folgenden Tagen mit dem
semiquantitativen Test geprüft. Die Ergebnisse dieser Untersuchung haben eine
Reproduzierbarkeit des toxocell latex von 100% ergeben.
Literatur
12
Siehe "References" am Ende des Prospekts.
9
LIRE LES CHANGEMENTS SURLIGNÉS
toxocell latex
Test rapide d’agglutination de particules de latex sur lame
pour la détermination qualitative et semiquantitative des
anticorps toxoplasmiques sériques
Classe de danger
Non classifié.
Mentions de danger
Aucune.
Conseils de prudence
P280 : Porter des gants de protection/des vêtements de protection/un équipement de protection
des yeux/ du visage.
P305+351+338 : EN CAS DE CONTACT AVEC LES YEUX : rincer avec précaution à l’eau pendant
plusieurs minutes. Enlever les lentilles de contact si la victime en porte et si elles peuvent être facilement
enlevées. Continuer à rincer.
Conservation
Les réactifs resteront stables jusqu’à la date de péremption indiquée sur l’étiquette, à condition
d’être conservés à 2-8 °C. Ne pas congeler.
Sommaire
Matériel nécessaire non fourni
La toxoplasmose est une maladie infectieuse causée par le parasite protozoaire Toxoplasma
gondii (1) affectant les animaux et les humains. La toxoplasmose acquise est une infection
fréquente, souvent asymptomatique et bénigne (2).
Chez les femmes enceintes, cependant, le parasite peut passer dans la circulation du foetus via le
placenta et causer une toxoplasmose congénitale. Différentes études réalisées ont montré que le
risque et la sévérité de la toxoplasmose congénitale sont plus importants quand l’infection a lieu
dans le premier trimestre de la grossesse. Les conséquences d’une toxoplasmose congénitale
vont de l’avortement spontané ou de la prématurité aux lésions viscérales et aux symptômes
neurologiques, qui impliquent souvent des complications oculaires. Les nouveau-nés atteints par
la toxoplasmose congénitale peuvent rester asymptomatiques pendant plusieurs semaines après
la naissance (3-6).
La toxoplasmose peut constituer un risque sérieux pour les patients immunodéprimés (SIDA,
greffe d’organes). Chez les personnes atteintes du SIDA, la toxoplasmose aiguë est généralement
la réactivation d’une infection latente acquise auparavant, bien que des infections primaires aient
également été diagnostiquées (6,7).
Solution saline (0,9% NaCl uniquement pour le test semiquantitatif), pipettes automatiques,
agitateur rotatif, bâtonnets et chronomètre.
Principe
Le réactif toxocell latex est une suspension de particules de latex de polystyrène de dimension
uniforme sensibilisées avec l’antigène solubilisé du Toxoplasma gondii. Les particules de latex
permettent une observation visuelle de la réaction antigène-anticorps. Si la réaction a lieu, à
cause de la présence des anticorps toxoplasmiques, la suspension de latex change son
apparence uniforme et une agglutination claire devient évidente.
Quand on mélange le réactif latex avec le sérum, si celui-ci contient plus de 10 UI/ml d’anticorps
toxoplasmiques, une agglutination nette apparaît. Les résultats sont exprimés en UI/ml d’anticorps
toxoplasmiques totaux par rapport au 3e Standard International de l’OMS.
REF 3000-4525.
-
Utiliser du sérum frais. Les échantillons peuvent être conservés à 2-8°C pendant 2 jours. Pour des
périodes plus longues, les échantillons doivent être congelés (-20°C).
PROCÉDURE
Contrôle de qualité: Avant de réaliser une série de déterminations, tester le réactif latex avec
chaque contrôle fourni dans le coffret. Les deux contrôles seront utilisés selon les étapes décrites
dans le TEST QUALITATIF. La réaction entre le contrôle positif et le réactif doit donner une
agglutination nette différente de l’apparence uniforme du contrôle négatif. Si les résultats attendus
ne sont pas obtenus, ne pas utiliser le coffret.
Pour assurer une bonne distribution, tenir le compte-gouttes de réactif en position verticale et
verser une seule goutte.
TEST QUALITATIF
-
Composants
-
Prélèvement de l’échantillon
Réactif latex: 1 x 4 ml.
Suspension de particules de latex de polystyrène sensibilisées avec l’antigène toxoplasmique
dans un tampon avec albumine sérique bovine. Contient < 0,1% d’azide sodique.
Contrôle positif: 1 x 1 ml.
Sérum humain dilué avec IgG de lapin antitoxoplasme. Contient < 0,1% d’azide sodique.
Contrôle négatif: 1 x 1 ml.
Sérum humain négatif dilué. Contient < 0,1% d’azide sodique.
Lames jetables: 18 unités (x6).
Précautions
toxocell latex est destiné à un usage diagnostique IN VITRO.
L’azide sodique peut réagir au contact de tuyauteries et de bouches d’écoulement des eaux en plomb
ou en cuivre. Cette réaction donne lieu à des azides métalliques hautement explosives. Lorsque vous
jetez les restes de réactifs, veuillez laisser couler l’eau abondamment.
Tout le matériel d’origine humaine utilisé dans le cadre de la préparation de ce produit a donné
des résultats négatifs quant à la présence d’anticorps aux virus HIV-1/HIV-2 et HCV, de même
qu’à celle de l’antigène de surface de l’hépatite B. La méthode utilisée est agréée par la Food and
Drug Administration (USA).
ATTENTION: MATÉRIEL À RISQUE BIOLOGIQUE.
Compte tenu du fait qu’aucune méthode n’est capable d’offrir une garantie absolue de l’absence
d’agents infectieux, ce produit doit être manipulé avec précaution (8).
Déposer tout le matériel utilisé dans des récipients conçus pour le matériel biocontaminant.
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Laisser que les réactifs atteignent la température ambiante.
Déposer 50 µl de l´échantillon (ou une goutte de contrôle) sur une des sections de la lame.
Agiter le flacon du réactif et ajouter une goutte de réactif à côté de la goutte d’échantillon.
Mélanger les deux gouttes avec un bâtonnet en recouvrant toute la surface de la section de la lame.
Agiter la lame avec un léger mouvement de rotation, manuellement ou à l’aide d’un agitateur
rotatif (80-100 tpm) pendant 5 minutes.
Vérifier la présence ou l’absence d’agglutination.
RÉACTIONS POSITIVES: Présence d’agglutination.
3+ Grands agrégats sur fond transparent.
2+ Agrégats modérés sur fond légèrement opaque.
1+ Agrégats fins sur fond opaque.
RÉACTIONS NÉGATIVES:
Absence d’agglutination, suspension uniforme.
Interprétation des résultats
Le test qualitatif réalisé sur un seul échantillon de sérum peut servir à évaluer l’état
immunologique du patient.
Une réaction négative indique l’absence d’anticorps antitoxoplasme ou des niveaux inférieurs à 10
UI/ml. Dans le cas d’une femme enceinte, il est conseillé de refaire l’analyse sérologique
périodiquement (une fois par mois) pour détecter une éventuelle séroconversion.
Une réaction positive indique la présence d’anticorps antitoxoplasme, soit par une infection
ancienne, soit par une toxoplasmose aiguë. Dans ce cas-là il est recommandé de procéder à une
détermination du titre d’anticorps antitoxoplasme à l’aide des techniques quantitatives habituelles,
et de rechercher la présence d’IgM spécifiques antitoxoplasme.
TEST SEMIQUANTITATIF
Placer 50 µl de solution saline sur les sections 2 à 6 de la lame.
Déposer, à l’aide d’une pipette automatique, 50 µl de sérum sur les sections 1 et 2 de la lame.
Avec la même pipette mélanger l’échantillon et la solution saline de la section 2 plusieurs fois.
Prélever 50 µl de la dilution obtenue dans la section 2 et les transférer dans la section 3.
Répéter l’étape antérieure et suivre de suite jusqu’à la section 6, prélever 50 µl et les jeter.
Analyser chaque dilution selon il est décrit dans la section TEST QUALITATIF.
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