anti-c-MYC (Y69) Rabbit Monoclonal Primary Antibody

Pour assurer une distribution correcte du réactif et la stabilité de l'anticorps, remettre le
capuchon sur le distributeur après chaque utilisation et ranger immédiatement celui-ci en
position verticale dans le réfrigérateur.
anti-c-MYC (Y69) Rabbit Monoclonal Primary Antibody
790-4628
Chaque distributeur d'anticorps comporte une date de péremption. Lorsqu'il est
correctement conservé, le réactif reste stable jusqu'à la date indiquée sur l'étiquette. Ne
pas utiliser le réactif au-delà de la date de péremption.
06504612001
50
PRÉPARATION DES ÉCHANTILLONS
APPLICATION
Figure 1. Coloration nucléaire par anti-cMYC (Y69) d'un tissu de lymphome.
L'anti-c-MYC (Y69) Rabbit Monoclonal
Primary Antibody (anti-c-MYC (Y69))
est dirigé contre le facteur de
transcription c-MYC, un important
facteur de la régulation du cycle
cellulaire. L'anticorps anti-c-MYC (Y69)
présente un profil de coloration
nucléaire et peut être utilisé pour
faciliter la caractérisation du lymphome.
Cet anticorps est destiné à la coloration
qualitative de coupes de tissus fixés au
Les tissus traités en routine, fixés au formol et inclus en paraffine, peuvent être utilisés
avec cet anticorps primaire lorsque celui-ci est utilisé avec les kits de détection VENTANA
et les automates de coloration VENTANA BenchMark XT et BenchMark ULTRA. Il est
recommandé de fixer les tissus au formol neutre tamponné à 10 %6. Les lames doivent
être immédiatement colorées, car l'antigénicité des coupes tissulaires peut diminuer avec
le temps.
Il est recommandé de tester des contrôles positifs et négatifs en même temps que les
échantillons de patients.
AVERTISSEMENTS ET PRÉCAUTIONS
1.
2.
formol et inclus en paraffine.
Ce produit doit être interprété par un anatomopathologiste qualifié, en association avec un
examen histologique, les informations cliniques pertinentes et les contrôles appropriés.
3.
Cet anticorps est conçu pour être utilisé en diagnostic in vitro (DIV).
4.
RÉSUMÉ ET EXPLICATION
5.
L'anti-c-MYC (Y69) est un anticorps monoclonal de lapin dirigé contre l'extrémité Nterminale de la protéine c-MYC de 64 kDa.
6.
c-MYC agit comme une protéine de liaison à l'ADN et appartient à la famille
MYC/MAD/MAX des protéines à motif crémaillère hélice-boucle-hélice.1,2 L'expression de
c-MYC a été décrite dans plusieurs cancers tels que le cancer du sein, le cancer de la
prostate, les lymphomes, le cancer du poumon et le cancer du côlon. Dans ces cancers,
l'amplification et la surexpression de c-MYC ont été observées au niveau du gène et de
l'ARNm en utilisant des méthodes d'hybridation in situ et des méthodes RT-PCR. Le gène
est situé en position t(8q24), qui est impliquée dans les translocations dans le lymphome
de Burkitt, où le gène c-myc est placé sous le locus IgG des chaînes lourdes ou légères.3
La translocation la plus courante est t(8;14) (q24;q32), mais les translocations t(2;8) (p12;
q24) et t(8;22)(q24;q11) ont également été décrites pour les lymphomes. 4,5
Pour utilisation en diagnostic in vitro (DIV).
Les produits d'origine humaine ou animale doivent être manipulés comme s'ils
étaient capables de transmettre une infection et ils doivent être éliminés en prenant
les précautions appropriées.
Éviter tout contact des yeux et des muqueuses avec les réactifs. Si des réactifs
entrent en contact avec des zones sensibles, laver abondamment à l'eau.
Éviter toute contamination microbienne des réactifs, car cela peut entraîner des
résultats erronés.
Consulter les autorités locales et/ou nationales pour connaître la méthode
d'élimination recommandée.
Pour obtenir des informations de sécurité complémentaires, consulter la fiche de
données de sécurité ainsi que le guide des symboles et des phrases-types de
risque sur le site www.ventana.com.
PROCÉDURE DE COLORATION
Les anticorps primaires VENTANA ont été développés pour être utilisés sur les automates
de coloration VENTANA BenchMark XT et BenchMark ULTRA en association avec les kits
de détection et les accessoires VENTANA. Pour connaître les protocoles de coloration
recommandés, consulter le Tableau 1 et le Tableau 2.
Cet anticorps a été optimisé pour des durées d'incubation spécifiques mais l'utilisateur doit
valider les résultats obtenus avec ce réactif.
Les paramètres des procédures automatisées peuvent être affichés, imprimés et modifiés
selon la procédure décrite dans le manuel de l'opérateur de l'appareil. Pour plus de détails
sur les procédures de coloration immunohistochimique, consulter la notice du kit de
détection VENTANA approprié.
RÉACTIF FOURNI
L'anti-c-MYC (Y69) contient suffisamment de réactif pour effectuer 50 tests.
Un distributeur de 5 mL d'anti-c-MYC (Y69) contient environ 120 µg d'anticorps
monoclonal de lapin.
Tableau 1. Protocole de coloration recommandé pour l'anti-c-MYC (Y69) avec le kit de
détection VENTANA ultraView Universal DAB Detection Kit sur les appareils
BenchMark XT et BenchMark ULTRA.
L'anticorps est dilué dans un tampon TBS contenant 0,3 % de protéine de transport.
La concentration en protéines totales du réactif est d'environ 3,0 mg/mL. La concentration
en anticorps spécifique est d'environ 24 μg/mL.
L'anti-c-MYC (Y69) est un anticorps monoclonal de lapin produit sous forme de
surnageant purifié de culture cellulaire.
Type de procédure
Méthode
Déparaffinage
Sélectionné
Prétraitement
Cell Conditioning 1,
standard
(démasquage de l'antigène)
Consulter la notice du kit de détection VENTANA approprié pour une description détaillée
de : (1) Principes de la procédure, (2) Matériel et réactifs nécessaires mais non fournis,
(3) Recueil et préparation des échantillons pour l'analyse, (4) Procédures de contrôle de
qualité, (5) Résolution des problèmes, (6) Interprétation des résultats et (7) Limitations
générales.
Anticorps (primaire)
Appareil BenchMark XT
16 minutes, 37 °C
Appareil BenchMark ULTRA
16 minutes, 36 °C
MATÉRIEL NÉCESSAIRE MAIS NON FOURNI
Amplification
Les réactifs de coloration tels que les kits de détection VENTANA et les composants
accessoires, y compris les lames de contrôles de tissus négatifs et positifs, ne sont pas
fournis.
Appareil BenchMark XT, sélectionné
Appareil BenchMark ULTRA, sélectionné
CONSERVATION
Contre-coloration
Hematoxylin II, 4 minutes
Après contre-coloration
Bluing, 4 minutes
Conserver entre 2 et 8 °C. Ne pas congeler.
2014-11-16
FT0700-410c
1/3
1011077FR Rev C
Tableau 2. Protocole de coloration recommandé pour l'anti-c-MYC (Y69) avec le kit de
détection OptiView DAB IHC Detection Kit sur les appareils BenchMark XT et
BenchMark ULTRA.
Type de procédure
Méthode
Déparaffinage
Sélectionné
Prétraitement
Cell Conditioning 1, 64 minutes
Tissu
(démasquage de l'antigène)
Anticorps (primaire)
Appareil BenchMark XT
16 minutes, 37 °C
Appareil BenchMark ULTRA
16 minutes, 36 °C
Contre-coloration
Hematoxylin II, 4 minutes
Après contre-coloration
Bluing, 4 minutes
Nbre de
positifs/Nbre
total de cas
Tissu
Nbre de
positifs/Nbre
total de cas
Endomètre
1/6
Prostate
0/3
Muscle squelettique
0/3
Col de l'utérus
1/4
Nerf (clairsemé)
1/6
Peau
3/6
Nœud lymphoïde
0/6
Mésothélium et
poumon
0/3
Sensibilité
Tableau 4. La sensibilité de l'anticorps anti-c-MYC (Y69) a été déterminée en testant
différents tissus néoplasiques fixés au formol et inclus en paraffine.
En raison de la variation de la fixation et du traitement des tissus ainsi que des conditions
générales environnementales et d'utilisation des appareils du laboratoire, il peut être
nécessaire d'augmenter ou de diminuer la durée d'incubation de l'anticorps primaire, du
prétraitement par cell conditioning ou du prétraitement à la protéase en fonction des
échantillons, de la méthode de détection utilisée et des préférences de l'opérateur. Pour
en savoir plus sur les variables de fixation, consulter l'ouvrage « Immunohistochemistry Principles and Advances ».7
Pathologie
Nbre de
positifs/Nbre
total de cas
Glioblastome
1/1
Méningiome atypique
0/1
Épendymome malin
0/1
Oligodendrogliome malin
0/1
Adénocarcinome séreux
1/1
Adénocarcinome de l'ovaire
2/2
Carcinome des îlots de Langerhans
0/1
Adénocarcinome du pancréas
0/2
Séminome
1/2
CARACTÉRISTIQUES DE PERFORMANCE
Carcinome embryonnaire
1/2
La spécificité, la sensibilité et la répétitivité de la coloration ont été testées ; les résultats
sont présentés au Tableau 3 et au Tableau 4 et à la section Répétitivité.
Carcinome médullaire
0/1
Carcinome papillaire
0/1
Carcinome intracanalaire du sein
0/1
Carcinome canalaire invasif du sein
2/2
Carcinome pulmonaire indifférencié à petites cellules
1/1
Carcinome épidermoïde pulmonaire
1/1
Adénocarcinome pulmonaire
0/1
Carcinome épidermoïde de l'œsophage
0/1
Adénocarcinome de l'œsophage
1/1
Adénocarcinomes gastriques mucineux
1/1
Adénocarcinome gastro-intestinal
0/1
GIST (tumeurs stromales gastro-intestinales)
1/1
Carcinome hépatocellulaire
0/1
Hépatoblastome
0/1
Carcinome à cellules claires du rein
0/1
Adénocarcinome de la prostate
0/2
Léiomyome
0/1
Adénocarcinome de l'endomètre
0/1
CONTRÔLE DE TISSU POSITIF
La peau constitue un exemple de tissu de contrôle positif pour cet anticorps.
INTERPRÉTATION DE LA COLORATION / RÉSULTATS ATTENDUS
Le profil de coloration cellulaire avec l'anticorps anti-c-MYC (Y69) est nucléaire.
LIMITATIONS SPÉCIFIQUES
Cet anticorps peut présenter une réactivité croisée avec la mucine dans l'intestin grêle.
Cette coloration non spécifique ne compromet pas l'interprétation de la coloration.
Spécificité
Tableau 3. La spécificité de l'anticorps anti-c-MYC (Y69) a été déterminée en testant des
tissus sains fixés au formol et inclus en paraffine.
Tissu
Nbre de
positifs/Nbre
total de cas
Tissu
Nbre de
positifs/Nbre
total de cas
Cerveau
0/6
Thymus
0/3
Cervelet
0/3
Tissu myéloïde
(moelle osseuse)
0/3
Glande surrénale
0/3
Poumon
0/3
Ovaire
2/2
Cœur
0/3
Pancréas
0/3
Œsophage
1/3
Hypophyse
0/3
Estomac
0/3
Testicule
0/3
Intestin grêle
3/3
Thyroïde
0/4
Côlon
0/3
Sein
1/3
Foie
0/3
Rate
1/3
Glande salivaire
1/3
Amygdale
0/3
Rein
1/3
2014-11-16
FT0700-410c
2/3
1011077FR Rev C
Pathologie
Nbre de
positifs/Nbre
total de cas
Carcinome à cellules claires de l'endomètre
0/1
Carcinome épidermoïde de l'utérus
1/2
Rhabdomyosarcome embryonnaire
0/1
Mélanome malin de l'anus
0/1
Carcinome basocellulaire
0/1
Carcinome épidermoïde
1/1
Neurofibrome
0/1
Neuroblastome rétropéritonéal
0/1
Mésothéliome épithélial malin
1/1
Lymphome de Burkitt
3/3
Lymphome à cellules B
70/175
Lymphome folliculaire
1/4
Lymphome de Hodgkin
4/11
Lymphome anaplasique à grandes cellules
0/1
Lyphome à petits lymphocytes
0/2
Lymphome T
12/22
Myélome des cellules plasmatiques
1/8
Carcinome transitionnel de la vessie
0/1
Léiomyosarcome de bas grade
0/1
Ostéosarcome
0/1
Rhabdomyosarcome à cellules fusiformes
0/1
Léiomyosarcome de grade intermédiaire
0/1
Répétitivité
Des études de répétitivité ont été réalisées pour l’anti-c-MYC (Y69) afin de démontrer :

la reproductibilité inter-lots de l'anticorps,

la reproductibilité intra-cycle et inter-cycles sur un appareil BenchMark XT,

la reproductibilité intra-plate-forme sur l'appareil BenchMark XT et l'appareil
BenchMark ULTRA,

la reproductibilité inter-plates-formes entre les appareils BenchMark XT et
BenchMark ULTRA.
RÉFÉRENCES
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
Crouch DH, Fisher F, Clark W, Jayaraman PS, Goding CR, Gillespie DA. Generegulatory properties of Myc helix-loop-helix/leucine zipper mutants: Max-dependent
DNA binding and transcriptional activation in yeast correlates with transforming
capacity. Oncogene. 1993;(7):1849-1855.
Williams K, Fernandez S, Stien X, Ishii K, Love HD, Lau YF, Roberts RL, Hayward
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Zimonjic DB, Keck-Waggoner C, Popescu NC. Novel genomic imbalances and
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Vega F, Medeiros LJ. Chromosomal translocations involved in non-Hodgkin
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Hecht JL, Aster JC. Molecular biology of Burkitt’s lymphoma. J Clin Oncol.
2000;(21):3707-3721.
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Kong: American Society for Clinical Pathology Press; 2009.
Roche PC, Hsi ED. Immunohistochemistry-Principles and Advances. Manual of
Clinical Laboratory Immunology, 6th edition. In: NR Rose, ed. ASM Press; 2002.
PROPRIÉTÉ INTELLECTUELLE
BENCHMARK, ultraView, OptiView, VENTANA, et le logo VENTANA sont des marques
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Toutes les études étaient conformes à leurs critères d'acceptation (≥ 90 %).
2014-11-16
FT0700-410c
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