chromatographie

CHROMATOGRAPHIE
L'étymologie du mot chromatographie vient du grec Khromatos qui signifie couleur et graphia, l'écriture. Ses origines remontent aux premières années du
vingtième siècle (1901-1903). C'est le botaniste russe Mikhaïl Semenovitch
Tsvet, né à Asti (Italie), qui fit des études très complètes sur les pigments végétaux et inventa, pour les séparer, la technique connue sous le nom de chromatographie.
En 1900, Tsvet montre que les plantes vertes contiennent deux types de chlorophylles
nommées a et b qui diffèrent par leurs spectres d'adsorption. C'est pour séparer la chlorophylle b qu'il invente la chromatographie d'adsorption sur colonne de carbonate de calcium et
d'alumine. Il met ainsi en évidence six pigments différents. La chromatographie, dans ses diverses
applications, s'est révélée être une des techniques les plus efficaces et les plus exploitées par les chercheurs et techniciens confrontés à des problèmes dans le domaine analytique.
Types de chromatographie
On les différencie grâce aux propriétés physiques des solutions et des phases stationnaires qui sont utilisées pour
effectuer la séparation. On peut les diviser en cinq catégories :
Différents types de chromatographie liquide
La chromatographie en phase liquide (LC et HPLC)
La phase mobile est sous forme liquide.
La Chromatographie Liquide Haute Performance (HPLC) est une amélioration de la chromatographie en phase
liquide, dans laquelle la phase mobile est utilisée sous haute pression.
La chromatographie liquide-solide (phase normale)
La phase mobile est un solvant peu polaire ( pentane, acétate d'éthyle, éther, dichlorométhane, méthanol,...).
La phase stationnaire est un gel de silice ou d'alumine.
La chromatographie liquide-liquide (phase inverse)
La phase mobile est solvant polaire (eau, méthanol, acétonitrile).
La phase stationnaire est un liquide greffé sur un gel de silice.
La chromatographie en couche mince (CCM ou TLC)
La phase mobile est un gel de silice ou d'alumine, réparti en couche mince (0,2mm) sur une plaque.
La phase stationnaire est le même solvant qu'en phase inverse ou normale.
La chromatographie ionique (IEC)
La phase mobile est une solution tampon aqueuse.
La phase stationnaire est une résine échangeuse d'ion, donc un solide comportant des sites ioniques.
La chromatographie d'exclusion stérique (SEC)
Cette chromatographie est appelée aussi chromatographie par perméation sur gel (GPC).
La phase mobile est un solvant organique (en général tétrahydrofuranne, ou toluène).
La phase stationnaire est un solide poreux. Il y a une relation entre la taille des pores et la taille des molécules.
Différents types de chromatographie en phase gazeuse
La chromatographie gaz-liquide
La phase mobile est un gaz (He, H2, N2...).
La phase stationnaire est un liquide greffé sur des particules (colonnes remplies).
La phase stationnaire est un liquide greffé sur la paroi interne de la colonne (colonnes capillaires).
La chromatographie gaz-solide
La phase mobile est un gaz (He, H2, N2...).
La phase stationnaire est un solide adsorbant.
Autres types de chromatographie
La chromatographie supercritique
La phase mobile est un gaz à l'état supercritique (en général CO2 à 50° et 150 bars).
La phase stationnaire est un solide ou liquide greffé sur solide.
44
L'électrophorèse
La phase mobile est une solution tampon.
La phase stationnaire est un gel disposé sur une plaque ou dans un tube capillaire. Un champ électrique est appliqué aux deux extrémités de la plaque (ou du tube).
Chromatographie
Solvants Carlo Erba Réactifs-SdS pour HPLC
Qualitativement, les solvants HPLC ont dû s'adapter aux demandes toujours plus restrictives des appareillages et
des méthodes de détection, en particulier au niveau des impuretés qui par intéractions peuvent jouer sur la justesse du résultat. Les solvants Carlo Erba Réactifs-SdS pour HPLC répondent à des critères de pureté, de transmission optique et d'absence de particules. Ils permettent de répondre parfaitement aux exigences de cette technique analytique en garantissant les spécifications optimales sur les éléments suivants :
-
Pureté
-
Teneur en résidu non volatil (RNV)
-
Transmission UV
RS HPLC
Préparative
RS HPLC
RS HPLC Plus
Gradient
RS HPLC
Ultra Gradient
Gold
RS LC/MS
HPLC Préparative
Application
HPLC Isocratique
HPLC Gradient 254 nm
HPLC Gradient 210 nm
Pesticides
PAH
LC-MS
Solvants pour LC-MS
La LC-MS (HPLC couplée à un spectromètre de masse) est une technique analytique qui permet d'obtenir des
informations sur la structure des composés et de détecter les impuretés à un très faible niveau.
C’est une méthode très sensible. En effet, les impuretés peuvent avoir une influence sur la ligne de base et ainsi
diminuer la sensibilité de l'analyse, empêcher l'identification et la quantification des impuretés en formant des
clusters, donner de faux pics, endommager l'appareil.
Afin de vous éviter de procéder à des sélections de lots, Carlo Erba Réactifs-SdS vous propose des solvants de
très haute pureté dont les spécifications répondent aux exigences des analyses.
-
Test à la Réserpine: Absence de pic supérieur à celui de la réserpine (609 amu) entre 50 et 2 000 amu pour
une concentration de 100 ppb
-
Faible teneur en ions métalliques et inorganiques
-
Résidu non volatil inférieur à 2 ppm
-
Pureté supérieure à 99.9%
-
Transmission UV élevée
-
Excellente qualité de la ligne de base en gradient
-
Fitration à 0.2 µm
Carlo Erba Réactifs-SdS vous propose les références :
Acétonitrile RS HPLC-MS
Acétonitrile RS HPLC-MS
Méthanol RS HPLC-MS
Cdt
1L
2.5 L
2.5 L
Code
412341
412342
414832
Ce sont des solvants dont les spécifications dépassent celles des meilleures qualités HPLC comme le montre le
tableau comparatif suivant.
45
Chromatographie
Caractéristiques
Unités
Pureté (GC)
Teneur en eau
Résidu non volatil
Acidité
Basicité
Transmission UV (1 cm - Réf: eau)
à 195 nm
à 200 nm
à 210 nm
à 220 nm
à 225 nm
à partir de 230 nm
à 235 nm
à 250 nm
à partir de 260 nm
Fluorescence (quinine) à 254 nm
Fluorescence (quinine) à 365 nm
Test HPLC gradient (1)
HPLC gradient (1)
à 210 nm
à 235 nm
à 254 nm
(1) Test gradient: gradient binaire H2O /
Test LC/MS
TIC ( 50-2000 m/z) ESI (+)
Impuretés sensibles (en réserpine)
Teneur en métaux (2):
Aluminium
Fer
Sodium
Calcium
Magnésium
Potassium
(2) Concentrations mesurées à libération
Spécifications
Acétonitrile
LC MS
412342
min 99.9
max 0,01
max 2
max 0,0005
max 0,0002
%
%
ppm
meq/g
meq/g
%
%
%
%
%
%
%
%
%
ppb
ppb
-
min 80
min 93
min 98
Acétonitrile
HPLC Plus
412392
min 99.9
max 0,01
max 2
max 0,0008
max 0,0002
min
min
min
min
79
90
95
98
Méthanol
LC MS
414832
min 99.9
max 0.02
max 2
max 0,0003
max 0,00006
Méthanol
HPLC Plus
412383
min 99.9
max 0.02
max 5
max 0,0005
max 0,0002
min 30
min 30
min 50
min 65
min 98.5
max 1
max 0.5
Conforme
max 1
max 0.5
min 85
min 95
min 98
max 1
max 1
Conforme
min 80
min 98
max 1
max 1
mAU
max 1
mAU
max 2
mAU
max 0.5
max 1
Acétonitrile de 5 à 90% en acétonitrile en 16 minutes à 1.8 ml/min
ppb
ppb
ppb
ppb
ppb
ppb
ppb
du lot
max 100
max 100
max
max
max
max
max
max
max
max
max
max
max
max
50
50
50
50
50
50
50
50
50
50
50
50
Solvants RS pour HPLC - Ultragradient, Gold, Plus et Gradient
Pour le méthanol et l'acétonitrile nos qualités gradient et Ultragradient sont testées par gradient binaire eau / solvant.
Méthanol HPLC Gradient
de 5 à 90 % de solvant en 16 minutes à 1,8 ml/mm
Hauteur maximum de pic
0,002 DO à 235 nm
et
0,001 DO à 254 nm
Acétonitrile HPLC Gradient
de 5 à 90 % de solvant en 16 minutes à 1,8 ml/mm
Hauteur maximum de pic
0,005 DO à 210 nm
et
0,0008 DO à 254 nm
Acétonitrile HPLC Ultragradient
de 5 à 90 % de solvant en 16 minutes à 1,8 ml/mm
Hauteur maximum de pic
0,002 DO à 210 nm
et
0,0005 DO à 254 nm
Les gammes Ultragradient et Gold sont idéales pour l'analyse en gradient et les analyses de traces.
Produit
Acétonitrile Ultragradient
Acétonitrile Gold
Méthanol Gold
Cdt
1L
2,5 L
1L
2,5 L
5L
2,5 L
Code
P00637U16
P00637U21
412371
412372
412375
412722
Produit
Acétonitrile Gradient
Acétonitrile Plus
Eau Plus
Ethanol Plus
Isopropanol Plus
Méthanol Gradient
Méthanol Plus
46
Cdt
1L
2,5 L
5L
1L
2,5 L
1L
2,5 L
1L
2,5 L
1L
2,5 L
1L
2,5 L
1L
2,5 L
Code
P00637G16
P00637G21
P00637G31
492391
492392
412141
412142
412701
412702
412711
412712
P09337G16
P09337G21
412381
412383
Chromatographie
Solvants RS pour HPLC
Produit
Acétone
Acétonitrile
Butanol
1-Chlorobutane
Chloroforme stabilisé à l'amylène
Chloroforme stabilisé à l'éthanol
Cyclohexane
1,2-Dichloroéthane
Dichlorométhane stabilisé à l'amylène
Dichlorométhane stabilisé à l'éthanol
1,4-Dioxane
1,4-Dioxane Stab. BHT
Eau
Ethanol absolu
Ethanol anhydre
Ether diisopropylique
Ether éthylique
Ethyle acétate
Hexane 99 %
Isohexane
Isooctane
Méthanol
2-Méthyltétrahydrofurane
NOUVEAU
n-Heptane
n-Hexane
Propanol-1
Propanol-2
Ter-butylméthyléther
Tétrahydrofurane
Tétrahydrofurane stabilisé
Toluène
Cdt
1L
2,5 L
1L
2,5 L
1L
2,5 L
1L
1L
2,5 L
1L
2,5 L
1L
2,5 L
1L
2,5 L
1L
2,5 L
1L
2,5 L
1L
1L
2,5 L
1L
2,5 L
1L
2,5 L
2,5 L
2,5 L
1L
2,5 L
1L
2,5 L
1L
2,5 L
1L
2,5 L
1L
2,5 L
1L
2,5 L
5L
1L
2,5 L
1L
2,5 L
1L
2,5 L
2,5 L
1L
2,5 L
1L
2,5 L
1L
2,5 L
1L
2,5 L
1L
2,5 L
Code Carlo Erba
412502
412411000
412412000
412511
412512
412652
412653
412431
412621
412622
Code SdS
P0053716
P0053721
P0063716
P0063721
P0223716
P02437A16
P02437A21
P02437E16
P02437E21
P0253716
P0253721
P0283716
P0283721
P02937A16
P02937A21
P02937E16
P02937E21
P0363716
P03637S16
412582
P0153716
P0153721
P013A3716
P013A3721
412522
412612
412441
412533
412532
412592
412601
412602
412542
412421
412451
412452
412642
P0433721
P0443716
P0443721
P0023716
P0023721
P052373016
P052373021
P6263716
P6263721
P0633716
P0633721
P0933716
P0933721
P0933729
P9963716
P9963721
P0503716
P0503721
P0523716
P0523721
P0953716
P0953721
P0923716
P0923721
P0703716
P0703721
P07037S16
P07037S21
P0713716
P0713721
Solvants RS pour HPLC préparative
Produit
Acétonitrile
Chloroforme (stabilisé à l'éthanol)
Dichlorométhane (stabilisé à l'amylène)
Dichlorométhane (stabilisé à l'éthanol)
Ethyle acétate
Cdt
2,5 L
2,5 L
2,5 L
2,5 L
2,5 L
Hexane Mélange d'isomères
n-Hexane
Propanol-2
Tétrahydrofuranne
2,5
2,5
2,5
2,5
Toluène
2,5 L
L
L
L
L
Code
P00637P21
438641
463281
463291
P00237P21
448211
P0520037P21
P05237P21
415112
P07037P21
487352
488531
47
Chromatographie
Phase mobile RS HPLC
Si vous utilisez régulièrement une phase éluante, nous pouvons la préparer pour vous selon votre cahier des
charges. Nous pouvons également réaliser des mélanges de solvants de grande pureté en conservant leurs spécifications : solvants anhydres, pour la recherche de traces, conformes à une norme.
Avantages de notre prestation :
•
Gain de temps
•
Traçabilité du mélange final et des composants
•
Amélioration de la sécurité
•
Etiquetage réglementaire
•
Spécifications contrôlées et garanties
Exemples :
Mélange
Acétonitrile / Eau 80/20
Méthanol / Acétonitrile 90/10
Heptane / Ethyle Acétate 50/50
Code
PS0602
PS0752
PS0801
Tous nos solvants pour HPLC et phases mobiles peuvent être livrés dans des conditionnements adaptés :
en fûts navette inox de 5 litres (en caisse de 4), de 25, 50, 200 litres sur demande avec des systèmes de prélèvement adaptés à vos besoins (documentation spécifique sur demande).
Membranes filtrantes Whatman pour le dégazage des solvants
La filtration des phases mobiles élimine les particules même les plus fines tout en dégazant simultanément
le solvant. Ce procédé empêche que n'apparaissent dans le détecteur des pics erronés provoqués par le dégazage
de solvants à la sortie basse pression du chromatographe.
Le kit de filtration de solvant intègre tout ce dont vous avez besoin pour filtrer les solvants :
•
entonnoir de verre 250 mL
•
support conique d'entonnoir, couvercle conique, pince
•
erlenmeyer 1 L
Disposer une membrane 47 ou 50 mm et connecter le GV 050/2 à une source de vide
par un tuyau. C'est tout ce dont vous avez besoin pour réussir votre filtration et le
dégazage de la phase mobile.
Particularité et avantages :
•
Des chromatogrammes clairs, une réduction des temps d'immobilisation
Finies les immobilisations de la pompe provoquées par les poches d'air et les particules dans les clapets anti-retour.
•
Fabrication en verre résistant
L'absence de contact avec des pièces en plastique garantit une filtration sans extraction de plastifiant susceptible de fausser les signaux.
•
Universel
Pas besoin de filtre séparé comme le PTFE. Même les échantillons organiques peuvent être filtrés grâce à l'excellente compatibilité de la membrane en cellulose régénérée (RC).
Support de filtre
Fritté verre
Volume de l'entonnoir
250 ml
Type de membrane
RC55
RC55
Matériau
Cellulose régénérée
Cellulose régénérée
Diamètre
50
47
Volume du réservoir
1L
Whatman
10 442 200
Code
294000753
Seuil de filtration (µm) Cdt
0,45
100
0,45
100
Whatman
10 410 214
10 410 212
Code
294000538
294000532
Les Adsorbants
Carlo Erba Réactifs-SdS propose une gamme de phases stationnaires pour chromatographie.
Produits d'adsorption
La silice irrégulière 60Å est l'adsorbant le plus utilisé.
En complément, nous proposons d'autres produits avec
des caractéristiques particulières offrant d'autres possibilités.
Le CLARCEL FLO® M est un adjuvant de filtration proposé en alternative à la Célite® 545. En effet, la Célite
est constituée entre autre de silice cristalline dont la
classification a été modifiée : cancérigène pour l'homme, nocive si "inhalée sous forme de quartz ou de
cristobalite de source professionnelle" par l'IARC
(International Agency for Research on Cancer).
48
Avantages :
•
Produit non réglementé (Directive 67/548/CEE
modifiée)
•
Aucun danger physique et chimique : concentration
en silice cristalline, fraction respirable < 1%
•
Insoluble dans les acides à toutes les températures
(sauf l'acide fluorhydrique)
•
Réduction des coûts de filtration grâce sa densité
plus faible
•
Débit élevé (perméabilité: 1.4-3.8 Darcy) avec une
clarté optimum grâce à ses propriétés physiques
•
Récupération très facile du résidu à l'issue du cycle
de filtration grâce à sa porosité
•
Pas d'impact d'odeur, de coloration, de goût sur le
filtrat
Chromatographie
Produit
Aluminium oxyde acide
Application
Acides aminés bicarboxyliques, peptides
Caractéristique
Type Brockmann
Aluminium oxyde basique
Usage général pour composé polaire
Type Brockmann
Aluminium oxyde neutre
Stéroïdes, glucosides cétal
Type Brockmann
Calcium hydroxyde
Charbon actif
Usage général
Usage général
Poudre
Poudre
Cellulose
Clarcel FLO M
Usage général
Séparation solide/liquide
Poudre
Cake densité: 170-215 g/l
Perméabilité: 1.4 – 3.8 darcies
Terre silicée
Usage général
Poudre
Florisil
Séparation en colonne de subst. organique
60-100 mesh
Analyse de pesticides
Florisil
Séparation en colonne de subst. organique
100-200 mesh
Gel de silice
Pour CCM
Type Stahl
Pour Flash Chromatographie
40-63 mm
Usage général
60-200 mm
Usage général
6-35 µm
Gel de silice 60 Å
40-63 µm
20-45 µm
35-70 µm
70-200 µm
Gel de silice 70 Å
Usage général
Gel de silice 100 Å
Usage général
Gel de silice 300 Å
Usage général
Gel de silice 1000 Å
Usage général
Magnésium oxyde
Polyamide
Sable purifié
Usage général
Pour CCM
Pour Flash Chromatographie
5 µm
10 µm
15 µm
20 µm
40 µm
5 µm
10 µm
15 µm
20 µm
40 µm
5 µm
10 µm
15 µm
20 µm
40 µm
5 µm
10 µm
15 µm
20 µm
40 µm
Poudre
Poudre
40-100 mesh
Cdt
250 g
1 kg
100 g
1 kg
250 g
1 kg
2,5 kg
250 g
250 g
1 kg
250 g
500 g
1 kg
5 kg
250 g
1 kg
100 g
500 g
100 g
500 g
100 g
500 g
250 g
1 kg
100 g
500 g
1 kg
5 kg
500 g
1 kg
5 kg
1 kg
5 kg
25 kg
1 kg
5 kg
25 kg
1 kg
5 kg
25 kg
1 kg
2 kg
5 kg
25 kg
1 kg
2 kg
5 kg
25 kg
1 kg
1 kg
1 kg
1 kg
1 kg
1 kg
1 kg
1 kg
1 kg
1 kg
1 kg
1 kg
1 kg
1 kg
1 kg
1 kg
1 kg
1 kg
1 kg
1 kg
1 kg
250 g
1 kg
Code
417185
417182
417214
417217
417245
417241
417248
433905
434455
434454
436061
P8770014
P8770017
P8770027
449895
449897
452331
452333
452271
452273
452351
452353
453345
453347
453351
453352
453353
453355
453336
453337
453332
P2010017
P2010027
P2010044
P2050017
P2050044
P2050027
P2200017
P2200027
P2200044
P2000017
P2000026
P2000027
P2000044
P2100017
P2100026
P2100027
P2100044
P200RS17
P201RS17
P202RS17
P203RS17
P204RS17
P205RS17
P206RS17
P207RS17
P208RS17
P209RS17
P210RS17
P211RS17
P212RS17
P213RS17
P214RS17
P215RS17
P216RS17
P217RS17
P218RS17
P219RS17
459617
470021
477153
49
Chromatographie
Les supports en cellulose WHATMAN : Cellulose en poudre et échangeuses d'ions
Notre gamme Whatman de celluloses en poudre et échangeuses d'ions permet de réaliser des séparations de biopolymères, tels que les protéines, enzymes, acides nucléiques, peptides, hormones et anticorps.
Les poudres de cellulose Whatman sont utilisées pour la chromatographie sur colonne et sur couche mince (CCM).
Elles sont fabriquées avec des fibres de coton contenant 98% d'alpha-cellulose.
Le traitement acide permet d'obtenir des poudres sans cendres, et un contrôle attentif de la méthode de préparation permet d'obtenir une granulométrie caractéristique très uniforme.
La teneur en cendres est de l'ordre de 2 ppm.
La cellulose CF1 est constituée de fibres longues pour les séparations séquentielles.
La cellulose CF11 est constituée de fibres de longueur moyenne pour la chromatographie générale sur colonne.
Elle est employée pour une filtration efficace en profondeur, dans la purification d'échantillons avant chromatographie. Elle est largement utilisée pour la séparation de substances organiques et en particulier des hydrates de
carbone.
La CC41 est une cellulose en poudre micro granulaire pure sans liant pour la CCM.
La CC31 est une poudre micro granulaire pour les séparations sur colonne.
La cellulose CDR est un produit spécial pour la séparation des protéines. Celle-ci aide à la purification des protéines par une épuration initiale des lysats cellulaires. Elle élimine les substances indésirables en suspension ,
colloïdales et insolubles en laissant les protéines cibles dans la solution.
Type
CF1
CF11
CF11
CC31
CC31
CC41
CDR
CDR
Caractéristique
Cellulose fibreuse
Cellulose fibreuse en poudre
Cellulose fibreuse en poudre
Cellulose en poudre microgranulaire
Cellulose en poudre microgranulaire
Cellulose microgranulaire
-
Cdt
500 g
500 g
5 kg
500 g
2 kg
500 g
500 g
2 kg
Whatman
4020-050
4021-050
4021-500
4014-050
4014-200
4061-050
4025-050
4025-200
Code
287811011
287811111
294100007
294100142
294100025
294100140
294100146
294100026
Les celluloses échangeuses d'ions améliorées Whatman AIEC (Advanced Ion Exchange Celluloses) ont été étudiées et développées pour garantir une séparation efficace des biopolyméres tels que les protéines, enzymes, acides nucléiques, peptides, hormones et anticorps.
Elles sont disponibles sous forme de :
•
Cellulose AIEC micro-granulaire pré-conditionnée pour des capacités de charges élevées, vitesses et résolutions rapides : économie de temps grâce à l'élimination du conditionnement avant équilibrage du tampon
•
Cellulose AIEC micro-granulaire sèche pour des performances similaires à la cellulose pré-conditionnée après
le conditionnement; réduit l'éventualité d'une croissance bactérienne
•
Cellulose AIEC fibreuse pour un volume traîté maximal à un débit important
•
Groupes fonctionnels échangeurs d'anions et de cations couramment utilisés : DEAE (diéthylaminoéthyle tertiaire aminé) et CM (carboxyméthyle greffé par une liaison éther)
•
Echangeur de cation bifonctionnel orthophosphate pour une séparation fine de molécules de poids moléculaire
moyen
Les échangeurs d'anions faibles DE sont basés sur le groupe fonctionnel DEAE.
50
DE-23
Elle délivre des débits élevés.
Indiquée pour les séparations quand la vitesse d'élution est critique et quand la résolution doit être
maintenue élevée.
DE-32
Faiblement basique. Adaptée pour améliorer les résolutions des polyélectrolytes ayant un poids
moléculaire élévé.
DE-52
La meilleure résolution chromatographique pour les protéines moyennement chargée négativement.
Densité de charge modérée. S'utilise pour la purification des enzymes autour de leur point isoélectrique.
DE-53
Echangeur d'anions DEAE partiellement quaternisé, hautement substitué et présentant une capacité
plus élevée que DE52. La meilleure résolution chromatographique est obtenue avec les protéines
très faiblement chargées négativement. S'utilise comme ligand en présence d'ions organiques.
QA-52
Cellulose échangeuse d'anions fortement basique avec grande capacité protéique, modérément
substituée avec une amine quaternaire. QA-52 est intégralement ionisée et maintient la charge
constante, indépendamment des conditions de pH. La QA-52 est préconisée dans le cas d'applications à pH élevé.
Chromatographie
Produit
Intervalle Capacité
Capacité par
de pH
d’échange
protéine
ionique meq/g (a) mg/g (b)
Cellulose échangeuse d’ anions micro granulaire pré conditionnée
DE-52 (Diethylaminoethyl)
2-9,5
0,88-1,08
700 (d)
DE-53 (Diethylaminoethyl)
2-9,5
1,8-2,2
750 (d)
QA-52 (Ammonium quaternaire) 2-12
1,0-1,2
Cellulose échangeuse d’ anions sèche micro granulaire (h)
DE-32 (Diethylaminoethyl)
2-9,5
0,88-1,08
Cellulose échangeuse d’ anions sèche fibreuse (g)
DE-23 (Diethylaminoethyl)
2-9,5
0,88-1,08
Application
750 (d)
Biopolymères à charge négative faible à élevée
Peut être utilisé en série avec DE52
pour augmenter la capacité de charges
Séparation des protéines à pH élevé
700 (d)
Biopolymères à charge négative
425 (d)
Biopolymères à charge négative
Echangeurs de cations :
CM-32
Cellulose de haute capacité, excellente résolution et bons débits. Elle nécessite un conditionnement
pour rétablir le gonflement. Une fois gonflée, elle est équivalente à CM52.
CM-52
Cellulose échangeuse de cations faiblement acide. Sous forme micro granulaire, elle est pré-conditionnée, prête à l'emploi. Elle ne nécessite pas de mise en milieu.
P-11
Elle est dérivée de la cellulose, constituée de fibres sèches de 25 µm, et principalement utilisée
pour la séparation en colonnes et en batch. Disponible à l'état sec, sous forme ionique (monoammonium). Mise en milieu rapide avec un traitement acide-base puis équilibre à pH 7,0.
Produit
Intervalle Capacité
Capacité par
de pH
d’échange
protéine
ionique meq/g (a) mg/g (b)
Cellulose échangeuse de cations microgranulaire
CM-32 (Carboxymethyl)
3-10
2,1-2,8
1180 (f)
Cellulose échangeuse de cations micro granulaire pré conditionnée
CM-52 (Carboxymethyl)
3-10
0,90-1,15
1180 (e)
Cellulose échangeuse de cations sèche fibreuse (g)
P-11 (Ortophosphate)
3-10
3,2-5,3
-
Application
Protéines, hormones, polypeptides et autres
biopolymères à charges positives faibles à
élevées
Protéines, hormones, polypeptides et autres
biopolymères à charges positives faibles à
élevées
Séparation en colonne
a) g: gramme sec
b) capacité pour les protéines de référence
c) 0,005 M pH 8,5 Tampon phosphate/Albumine Bovine
d) 0,01 M pH 8,5 Tampon phosphate/Albumine Bovine
e) 0,01 M pH 5,0 Tampon acétate/Lysozyme
f) 0,01 M, pH 4,4 Tampon acétate/Lysozyme
g) nécessitent un pré-conditionnement
Type
DE-23
DE-23
DE-32
DE-32
DE-52
DE-52
DE-53
DE-53
QA-52
CM-32
CM-32
CM-52
CM-53
P-11
P-11
P-11
P-11
Cdt
100 g
250 g
100 g
500 g
500 g
2 kg
500 g
2 kg
500 g
100 g
500 g
500 g
2 kg
100 g
500 g
2 kg
10 kg
Whatman
4053-010
4053-025
4055-010
4055-050
4057-050
4057-200
4058-050
4058-200
4065-050
4035-010
4035-050
4037-050
4037-200
4071-010
4071-050
4071-200
4071-910
Code
294100386
294100163
294100316
294100115
287824521
287824522
294100132
294100016
294100133
294100341
294100119
287822521
294100024
287821111
294100126
294100018
294100005
51
Chromatographie
Plaques CCM
Carlo Erba Réactifs-SdS vous propose sa gamme de plaques pour CCM avec des formats variés, des adsorbants
multiples et des épaisseurs de couches différentes :
•
Des plaques analytiques (épaisseur de couche 0,25 mm)
•
Des plaques préparatives (épaisseur de couche 0,5 à 2 mm)
•
Des plaques de hautes résolution HPTLC (épaisseur de couche de 0,15 à 0,2 mm)
Type de plaques
Plaques analytiques
Support polyester
Alumine 60A F254
Alumine 60A
Gel de Silice 60 F254
Gel de Silice 60
Support Aluminium
Silice RP18 F254
Gel de Silice 60 F254
Gel de Silice 60
Gel de Silice 60 avec indicateur
Alumine 60A F254
Support verre
Silice RP18 F254
Alumine 60A F254
Alumine 60A
Gel de Silice 60 F254
Plaques préparatives
Gel de Silice 60
Gel de Silice 60
Gel de Silice 60
Gel de Silice 60
Support verre
Alumine 60A F254
Gel de Silice 60
Gel de Silice 60 F254
Plaques de haute résolution HPTLC
Plaques Chirales
Support verre
Silice 60/10 F254
Chiral F254
Epaisseur
Dimensions
plaques
Quantité
par boîte
Code
0,2 mm
0,2 mm
0,2 mm
0,25 mm
0,25 mm
0,25 mm
0,25 mm
5 x 20
20 x 20
20 x 20
20 x 20
5 x 20
20 x 20
5 x 20
50
25
50
25
50
25
50
PCCM331325
PCCM331254
PCCM330254
PCCM321354
PCCM321321
PCCM320354
PCCM320325
0,2
0,2
0,2
0,2
0,2
0,2
20 x 20
5 x 20
20 x 20
5 x 20
20 x 20
4x8
20 x 20
25
50
25
50
25
50
25
PCCM251554
PCCM251525
PCCM221254
PCCM221225
PCCM220254
PCCM221205
PCCM231254
1 mm
0,25 mm
0,25 mm
0,25 mm
0,25 mm
0,25 mm
0,25 mm
0,25 mm
0,25 mm
0,25 mm
0,25 mm
0,25 mm
0,25 mm
0,25 mm
0,25 mm
20 x 20
20 x 20
10 x 10
20 x 20
20 x 20
5 x 20
20 x 20
10 x 20
10 x 10
5 x 20
5 x 10
20 x 20
10 x 20
5 x 20
5 x 10
15
25
25
25
25
100
25
50
25
100
50
25
50
100
50
PCCM151653
PCCM151351
PCCM151334
PCCM131354
PCCM130354
PCCM130327
PCCM121354
PCCM121345
PCCM121335
PCCM121327
PCCM121315
PCCM120354
PCCM120345
PCCM120327
PCCM120315
1 mm
2 mm
1 mm
0,5 mm
0,2 mm
variable
1 mm
0,5 mm
20
20
20
20
20
20
20
20
20
20
20
20
20
20
20
20
15
12
12
25
25
25
25
25
PCCM131653
PCCM120758
PCCM120653
PCCM120459
PCCM121758
PCCM121854
PCCM121653
PCCM121459
0,2 mm
0,5 mm
-
10 x 10
10 x 10
20 x 20
25
25
25
PCCM111234
PCCM111231
PCCM171354
mm
mm
mm
mm
mm
mm
x
x
x
x
x
x
x
x
Systèmes de visualisation pour plaques CCM
La visualisation en CCM est très simplifiée avec l'utilisation de plaques avec indicateur de fluorescence. En plaçant
la plaque sous une lampe UV à 254 ou 366 nm, les substances apparaîtront comme des taches foncées sur un
fond fluorescent.
Sont également utilisés des réactifs comme l'iode, l'acide sulfurique, l'acide nitrique, l'acide sulfurique, le bichromate de potassium, qui après traitement, mettent en évidence les produits séparés. Certains composants peuvent
être repérés par vaporisation sur la plaque de CCM de solutions chromogènes.
52
Chromatographie
Réactifs spécifiques pour la préparation de la solution chromogène
Produit
Cdt
Code
Produit
Cdt
Acide phosphomolybdique
50 g
405913
Fluorescéine acide
50 g
Code
452083
Acide phtalique
250 g
406205
Fluorescéine sodique
50 g
452113
Acide nitrique 69,5%
1L
408071
Hydrindantine
5g
455291
Acide perchlorique 65%
1L
409111
Iode bisublimé
250 g
455955
Acide sulfurique à 76%
1L
410301
Mercure(eux) nitrate
100 g
461154
Aldéhyde anisinique
100 ml
415312
Ninidrine
25 g
464922
Antimoine trihlorure
100 ml
422834
8-hydroxyquinoléine
50 g
467353
Argent nitrate
25 g
423952
Pourpre de bromocrésol
5g
470038
Bismuth nitrate basique
100 g
428294
Pourpre de bromocrésol 0,4%
250 ml
470045
p-diméthylaminobenezaldéhyde
100 g
444604
Potassium dichromate
500 g
470336
2,4-dinitrofluorobenzène
10 g
445701
Potassium iodure
250 g
472735
Gamme Whatman pour la préparation d'échantillons
Notre gamme Whatman propose la plus vaste gamme de produits en matière de préparation d'échantillons.
Chaque produit de notre ligne de préparation d'échantillons répond à des standards élevés.
La préparation de l'échantillon est une étape critique de l'analyse HPLC, il est donc nécessaire de choisir avec le
plus grand soin les produits les mieux appropriés à votre application, en alliant fiabilité, efficacité et productivité.
Membranes en Téflon (PTFE)
Les membranes en PTFE Whatman (type
WTP, support en polypropylène) sont
chimiquement stables et inertes et
conviennent pour les applications impliquant des solvants organiques agressifs,
des acides et bases concentrés. L'une
des applications majeures de cette
membrane est la clarification des
solvants. Ceci inclut les exigences sévères posées par la filtration des échantillons en HPLC où toute particule solide
peut endommager définitivement la
colonne ou les détecteurs. On utilise
communément le seuil de 0,5 µm.
Diamètre Seuil de
(mm)
filtration
(µm)
25
0,2
25
1,0
37
1,0
47
0,2
47
0,2
47
1,0
Cdt
Whatman
Code
100
100
100
100
100
100
7582-002
7590-002
7590-003
7582-004
7585-004
7590-004
287843103
294100295
287843602
287843303
287843503
287843603
SPARTAN®- Filtre certifié pour HPLC
Les filtres seringues SPARTAN assurent des résultats reproductibles dans la filtration de solutions organiques et
aqueuses en HPLC. Lots après lots, la gamme de filtres SPARTAN est testée et certifiée pour garantir l'absence de
substances absorbant les UV à des longueurs d'onde de 210 et 254 nm
en utilisant l'eau, le méthanol et l'acétonitrile.
Particularité et avantages :
•
La membrane hydrophile est en cellulose régénérée à faible taux
d'absorption protéique et excellente résistance chimique
•
corps de filtre en polypropylène de grade HPLC
•
disponible en 2 diamètres : 30 mm pour les échantillons de plus de
5ml et 13 mm pour les échantillons de moins de 5 mL
•
le certificat du lot est disponible et téléchargeable sur
www.whatman.com
Type
Filtres pour seringue 13 mm (non stériles)
Filtres pour seringue 30 mm (non stériles)
*LLF: Luer-lock femelle, LM: Luer mâle
Seuil de Filtration
0,2 µm
0,2 µm
0,2 µm
0,2 µm
0,45 µm
0,45 µm
0,45 µm
0,45 µm
0,2 µm
0,2 µm
0,45 µm
0,45 µm
0,45 µm
Raccord* entrée/sortie
LLF/Mini-Tip
LLF/Mini-Tip
LLF/LM
LLF/LM
LLF/Mini-Tip
LLF/Mini-Tip
LLF/LM
LLF/LM
LLF/LM
LLF/LM
LLF/LM
LLF/LM
LLF/LM
Cdt
100
500
100
500
100
500
100
500
100
500
50
100
500
Whatman
10 463 040
10 463 042
10 463 100
10 463 102
10 463 030
10 463 032
10 463 110
10 463 112
10 463 060
10 463 062
10 463 053
10 463 050
10 463 052
Code
294000515
294000796
294000516
294000808
294000514
294000795
294000517
294000809
294000554
294000811
294000345
294000553
294000810
53
Chromatographie
Dérivatisation
Les dérivés sont des substances qui permettent de modifier chimiquement une molécule et ainsi en modifier les
propriétés pour les rendre adaptables à un protocole analytique spécifique.
Au début, la GLC a bénéficié des avantages de la dérivatisation. Successivement, les possibilités d'utilisation de
cette technique se sont étendues à d'autres types d'analyses dont la spectrométrie de masse, la RMN, la spectrophotométrie UV et Visible, la fluorimétrie, l'électro et la radio analyse.
Carlo Erba Réactifs-SdS présente une sélection de produits d'usage courant :
Produit
Cdt
Code
N-acétylimidazole
25 g
400713
Acide heptafluorobutyrique
10 ml
405451
Anhydride pentafluoropropionique
1 ml x 10
422082
Anhydride trifluoroacétique
25 ml
422221
100 ml
422222
Benzène sulfonyle chlorure
10 ml
426231
o-Benzylehydroxyamine chlorhydrate
10 g
466621
N,O-bis-(triméthylsilyl)acétamide (BSA)
1 ml
489933
25 ml
489934
1 ml
489563
25 ml
489561
N,N'Bis(triméthylsilyl) urée
1g
466513
Tert-butyldiphénylchlorosilane
25 ml
431862
Tert-butyldiméthylsilylimidazole
1 ml
431872
N,N-Carbonyldiimidazole
0.5 g X 10
434442
Chlorométhyldiméthylchlorosilane
25 ml
438722
4-Diméthylaminopyridine
25 g
444512
Diméthyldichlorosilane
100 ml
444771
Diméthyléthylsilylimidazole
1 ml
444542
N,N,-Diméthylformamide diméthylacétal
10 ml
444901
Heptafluorobutyrylpivaloyméthane
10 ml
446651
Hexaméthyldisilane
1 ml
447023
25 ml
447024
1 ml
446733
25 ml
446731
Hexaméthyldisiloxane
1 ml
446743
(+)-1-(9-fluorényl)éthylchoroformiate
10 ml
452251
Méthyl-iso-thiocyanate
100 g
462531
N-méthyl-N-triméthylsilyltrifluoroacétamide (MSTFA)
1g
461832
Méthyltrichlorosilane
250 ml
462964
2,5 L
462968
Huile végétale (caractérisation); réactif de silylation n°1
1 ml x 10
478043
Octadécyltrichlorosilane
250 ml
466684
Pentafluorobenzyl bromure
g5
468112
Tétracyanoéthylène
10 g
487091
p-Toluènesulfonylhydrazine
25 g
488681
Triméthylchlorosilane
1 ml
489923
100 ml
489921
1L
489926
N-triméthylsilylacétamide
25 g
489951
N-triméthylsilyldiéthylamine
1 ml
489943
25 ml
489941
1 ml
489963
N,O-Bis(triméthylsilyl)trifluoroacétamide (BSTFA)
Hexaméthyldisilazane
N-triméthylsilylimidazole
54
Chromatographie
Les réactifs pour modification pré et post-colonnes en HPLC
Les réactions pré ou post-colonne sont toutes les deux
les plus utilisées en HPLC : on-line et off-line.
La réaction pré-colonne optimise la sélectivité et la sensibilité, augmente la stabilité, la résolution, la symétrie
des pics et diminue ou augmente les temps de rétention des solutés.
La réaction post-colonne et l'utilisation d'un réactif fluorescent ou un colorant augmente les possibilités de
détection.
Nous avons à disposition une large gamme de produits
capables de réagir sur les groupements fonctionnels
facilitant la séparation et la détection spectrophotométrique ou fluorométrique des produits difficiles à
analyser.
Produit
p-bromoacétophénone
2',7'-dichlorofluorescéine
Cdt
10 g
10 g
Code
430361
442541
3,5-dinitrobenzoyl chlorure
2,4-dinitrofluorobenzène
25 g
10 g
445361
445701
5g
1 kg
50 g
500 g
10 g
5g
452113
452117
452083
452087
452751
455291
10 ml
100 g
5g
25 g
460691
462531
464928
464922
Fluorescéine sodique
Fluorescéine acide
o-Phaltaldéhyde (OPA)
Hydridantine
2-Mercaptoéthanol
Méthyle isothiocyanate
Ninhydrine
Etalons monoéléments RS pour chromatographie ionique
Les solutions monoéléments Carlo Erba Réactifs-SdS pour chromatographie ionique sont obtenues à partir de sels ou d'acides de très
haute pureté et d'une eau de 18 mégaohms. Elles sont conditionnées
dans des flacons PEHD.
Le certificat d'analyse précise :
•
la valeur certifiée obtenue par chromatographie ionique
•
la précision de +/- 0,2 %
•
la traçabilité au NIST
•
la teneur en impuretés
•
le chromatogramme avec les conditions expérimentales
•
la validité: 24 mois flacon fermé et 12 mois flacon ouvert
Eléments
Ammonium : NH4+
Bromate : BrO3Bromure : BrCalcium : Ca2+
Chlorates : ClO3Chlorites : ClO2Chlorures : ClChromate : Cr6+
Cyanure : CNFluorure : FIodure : ILithium Li+
Magnésium : Mg2+
Nitrite : NO2Nitrate : NO3Phosphate : PO43Potassium : K+
Sodium : Na+
Sulfate : SO42-
Concentration
1 g/L
1 g/L
1 g/L
1 g/L
1 g/L
1 g/L
1 g/L
1 g/L
1 g/L
1 g/L
1 g/L
1 g/L
1 g/L
1 g/L
1 g/L
1 g/L
1 g/L
1 g/L
1 g/L
Matrice
H2O
H2O
H2O
H2O
H2O
H2O
H2O
H2O
H2O (traces NaOH)
H2O
H2O
H2O
H2O
H2O
H2O
H2O
H2O
H2O
H2O
50 ml
503310
503170
503210
503220
503180
503190
503230
503240
503250
503260
503280
503290
503320
503330
503340
503270
503300
503350
100 ml
503311
503171
503211
503221
503181
503191
503231
503241
503358
503251
503261
503281
503291
503321
503331
503341
503271
503301
503351
250 ml
503312
503172
503212
503222
503182
503192
503232
503242
503252
503262
503282
503292
503323
503332
503342
503272
503302
503352
500 ml
503313
503173
503213
503223
503183
503193
503233
503243
503253
503263
503283
503293
503323
503333
503343
503273
503303
503353
Eluants concentrés pour chromatographie ionique
Nos éluants sont préparés à partir de sels ultra purs et d'eau déionisée à 18 mégaohms filtrée à 0,2 µ.
La validité est de 24 mois flacon fermé et de 12 mois flacon ouvert.
Eléments
0,18 M Sodium carbonate / 0,17 M Sodium bicarbonate
0,22 M Sodium carbonate / 0,28 M Sodium bicarbonate
0,35 M Sodium carbonate / 0,1 M Sodium bicarbonate
0,5 M Sodium carbonate
0,17 M Sodium bicarbonate
Matrice
H2O
H2O
H2O
H2O
H2O
Cdt
100
100
100
100
100
ml
ml
ml
ml
ml
Code
504530
504531
504532
504533
504534
Ces solutions sont à diluer par un facteur 100
55
Chromatographie
Etalons multiéléments RS pour chromatographie ionique
Quelques exemples de solutions multiéléments :
Eléments
Solution dans H2O conformes aux normes EPA
7 anions: Br -, Cl - , F-, NO3 - (- N) , NO2 - (- N), PO4 3 - (- P) , SO4
Pour calibration et contrôle qualité : dilution 1/10 à 1/100
7 anions
SO4 2 Br PO43ClNO3- (-N)
NO2-(-N)
F-
2-
Carlo Erba Réactifs-SdS vous propose également des solutions
multiéléments à façon pour chromatographie ionique pour
lesquelles vous avez la possibilité de choisir le produit source.
Elles sont livrées avec un certificat indiquant la traçabilité au
NIST de chaque solution mère, la validité calculée en fonction
des éléments présents dans la solution.
56
Concentration
Matrice
Cdt
Code
1000 mg/L
H2O
100 ml
504526
H2O
100 ml
504527
150 mg/L
100 mg/L
50 mg/L
30 mg/L
30 mg/L
20 mg/L
20 mg/L