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GERES infos N° 1 Groupe d’Étude en Reproduction, Elevage et Sélection des Carnivores domestiques Janvier 2014 CAS CLINIQUE / GESTE TECHNIQUE / NOTES DE LECTURE CAS CLINIQUE ABSENCE DE CHALEURS CHEZ UNE CHIENNE ÉPAGNEUL BRETON E. ROSSET, Dip. ECAR Caresse, une chienne épagneul breton de 3 ans est présentée en consultation pour absence de chaleurs depuis deux ans. Auparavant, l‘expression des chaleurs était classique, avec des écoulements de sang pendant environ 3 semaines. A l’époque, la chienne n’avait pas été présentée au mâle car elle était trop jeune. La chienne est, par ailleurs, assez inhibée auprès des congénères avec lesquels elle vit en chenil. L’examen clinique est normal. La chienne est en bon état général. L’examen génital ne révèle aucune anomalie : la vulve de la chienne a une taille compatible avec celle d’une chienne pubère hors œstrus et l’examen vaginal est normal. Un frottis vaginal confirme l’anœstrus par l’absence de kératinisation des cellules (PHOTO 1). Une échographie abdominale montre deux ovaires de taille un peu augmentée avec une ou deux cavités de quelques millimètres présentes dans le parenchyme de chaque ovaire. 1) COMMENT EXPLIQUER L’ABSENCE DE CHALEURS ET LA VISUALISATION D’OVAIRES ACTIFS À L’ÉCHOGRAPHIE ? L’activité observée dans les ovaires peut être due à des follicules en croissance, des kystes ou des corps jaunes. Dans le premier cas, la chienne serait en œstrus ; ce qui ne semble pas confirmé par le frottis vaginal et le comportement de la chienne. Les résultats des dosages hormonaux nous permettent de progresser dans le raisonnement : • Progestéronémie = 12,1 nmol/L (≈ 4 ng/ mL) • Œstradiolémie < 15 pmol/L Au vu de ces concentrations, il apparaît que la chienne est en métœstrus (chaleurs passées inaperçues il y a moins de 2 mois), ou que ses ovaires présentent des kystes sécrétant de la progestérone. Cette dernière hypothèse expliquerait bien l’absence de chaleurs, mais elle est abandonnée dans un premier temps car les corps jaunes persistants sont très rares chez la chienne. La première hypothèse est confirmée trois semaines plus tard, lorsqu’un nouveau dosage de progestérone est réalisé. En effet, la progestérone plasmatique est alors inférieure à 0,64 nmol/L, la chienne est cette fois-ci en anœstrus. 2) DANS LE CAS ÉTUDIÉ, QUELLE EST L’ATTITUDE À ADOPTER POUR NE PLUS RATER L’ŒSTRUS CHEZ CETTE CHIENNE ? Deux attitudes sont valables pour ce cas : • Il est possible d’attendre les chaleurs suivantes mais, pour ne pas passer à côté, il est conseillé de faire un frottis vaginal tous les 15 jours, quelques semaines après la fin du métœstrus. En effet, en cas de chaleurs silencieuses, la chienne peut être en chaleur sans perdre la moindre goutte de sang. • Si le propriétaire est impatient, les chaleurs de la chienne peuvent être déclenchées artificiellement deux mois après la fin du métœstrus. De nombreuses molécules sont disponibles mais ne sont pas dépourvues d’effets secondaires. L’induction de l’œstrus peut être faite sans risque avec de la cabergoline PHOTO 1 : Image d’anœstrus. Les cellules sont des cellules parabasales. Elles sont peu nombreuses. Le fond du frottis est muqueux et l’écouvillon est clair. 1 GERES infos vée par un dosage de progestérone) et a mis bas sept chiots deux mois plus tard sans aucune autre difficulté. Depuis, la chienne a été placée chez un proche du propriétaire où elle vit en maison. Elle manifeste des chaleurs tout à fait normalement. Le caractère dominé de Caresse au sein de la meute explique certainement l’absence apparente de chaleurs. PHOTO 2 : Image de proœstrus. La kératinisation des cellules inférieure à 50 %, la majorité des cellules étant constituées de cellules basales et parabasales (cellules rondes et à gros noyau) et intermédiaires (cellules plus angulées et dont la taille du noyau diminue). Par contre, le nombre de cellules est beaucoup plus important qu’en anœstrus Le fond du frottis est muqueux et de nombreux érythrocytes sont présents, parfois des polynucléaires neutrophiles, en faible nombre. (Galastop®). Le protocole correspond à une administration une fois par jour à jeun à la dose de 5 mg/kg pendant au maximum quatre semaines avec un arrêt du traitement aux premières gouttes de sang. L’œstrus peut aussi être induit au moyen d’un implant de desloréline (Supprélorin®). Le protocole correspond à la pose de l’implant au niveau de l’ombilic et à son retrait le lendemain de l’ovulation de la chienne. La chienne va rentrer en chaleur au bout de 3 ou 4 jours (contre 10 à 15 jours pour la cabergoline). 3) QUEL EST LE PRONOSTIC ? Après induction des chaleurs avec la cabergoline, 70 % des chiennes entrent en chaleur et 85 % environ seront gestantes. Avec l’implant de desloréline, 87 % des chiennes ovulent et 78 % des chiennes sont gestantes. Par contre, si le déclenchement des chaleurs est initié trop tôt, en fin de métœstrus ou en anœstrus précoce, les résultats sont plus mitigés et décevants. Quel que soit le protocole utilisé, les chiennes peuvent souffrir d’insuffisance lutéale durant la gestation. Il faut donc bien suivre le taux de progestérone de la chienne chaque semaine pendant la gestation afin de les supplémenter en progestérone si nécessaire. Dans le cas étudié ici, le propriétaire a préféré attendre des chaleurs « naturelles ». Des frottis vaginaux ont été effectués tous les 15 jours à partir de la fin de l’anœstrus. Au bout d’un mois et demi, le frottis a commencé à se kératiniser et la chienne est entrée en chaleur (PHOTO 2). Elle n’a jamais perdu de sang ni attiré le mâle. Elle a été inséminée 48 heures après l’ovulation (PHOTO 3) (préalablement objecti- RÉFÉRENCES 1- Ajitkumar G et coll (2010). Comparative efficacy of bromocriptine, cabergoline and thyroxine in inducing oestrus in bitches. Vet Res Commun ; 34(1):65-9. 2- Feldman E C, Nelson R W (2004). Canine and Feline Endocrinology and Reproduction. Third edition. WB Saunders ed Philadelphia : 1089pp. 3- Fontaine E et coll. (2011). Induction of fertile oestrus in the bitch using Deslorelin, a GnRH agonist. Theriogenology ; 76(8):1561-6. 4- Hiemstra M et coll, The reliability of vaginal cytology in determining the optimal mating time in the bitch. Tijdschr Diergeneeskund. 2001, 126(21):685-9. 5- Johnston S D, Root Kustritz M V, Olson P N S (2001). Canine and Feline Theriogenology. WB Saunders ed. Philadelphia : 592pp. PHOTO 3 : Image d’œstrus. Les cellules kératinisées (cellules très angulées, en forme de « corn flakes » avec un noyau picnotique ou absent) deviennent majoritaires et se sont regroupées en amas. Les cellules parabasales et intermédiaires se raréfient et le mucus disparaît peu à peu. Chaque chienne est différente et il est impossible de prédire avec précision le moment de l’ovulation par la seule observation d’un frottis caractéristique d’œstrus. 2 GERES infos l’œstradiolémie. En effet, l’œstradiol 17b produit par les follicules en croissance stimule l’activité mitotique de l’épithélium vaginal. Dès lors, le nombre de AUTEURS : LE GERES couches cellulaires augmente pendant E. ROSSET, Dip. ECAR le proœstrus. Cela entraîne l’exfoliation séquentielle des différents types celLa réalisation du frottis vaginal est relati- lulaires : cellules basales, parabasales, vement simple chez la chienne. Il est peu intermédiaires, superficielles ; ainsi que effectué chez la chatte car il est plus déli- des hématies et des leucocytes. cat à réaliser (petite taille du vagin, peut provoquer l’ovulation). En proœstrus, il est courant d’observer une kératinisation des cellules inférieure L’intérêt d’un examen complémentaire de à 50%, la majorité des cellules étant ce type est de : constituées de cellules basales et paraba• renseigner le praticien sur le stade sales (cellules rondes et à gros noyau) et sexuel d’une femelle en chaleur : proœs- intermédiaires (cellules plus angulées et trus, œstrus, métœstrus ou anœstrus ; dont la taille du noyau diminue). Le fond • étayer le diagnostic différentiel des du frottis est en général muqueux et de pertes vulvaires (vaginite, pyomètre, nombreux érythrocytes sont présents, endométrite…) ; parfois des polynucléaires neutrophiles, • confirmer un diagnostic d’anœstrus en faible nombre. avant d’envisager, par exemple, un déclenchement de chaleur chez la chienne ; En œstrus, les cellules kératinisées (cel• détecter les chaleurs silencieuses chez lules très angulées, en forme de « corn la chienne ; flakes » avec un noyau picnotique ou • déclencher l’ovulation chez une chatte. absent) deviennent majoritaires et se regroupent en amas. Les cellules parabaLa cytologie vaginale est intéressante en sales et intermédiaires se raréfient et le chaleur car elle évolue en parallèle avec mucus disparaît peu à peu. GESTE TECHNIQUE LE FROTTIS VAGINAL En métœstrus, la kératinisation des cellules diminue et on observe un retour des cellules intermédiaires puis parabasales. Le fond du frottis redevient muqueux et de nombreux leucocytes sont présents en début de métœstrus. En anœstrus, les cellules sont plutôt de type parabasal et rares. Le fond du frottis est muqueux et l’écouvillon est clair. Cette étape est souvent la première avant d’envisager un déclenchement de chaleurs chez une chienne chez laquelle elles tardent à arriver. Cette méthode à moindre frais permet d’éliminer l’hypothèse de chaleurs silencieuses. D’autres examens sont ensuite mis en place pour confirmer l’anœstrus avant tout traitement. Par contre, le frottis comporte des limites d’interprétation. La progestérone n’a pas d’effet prouvé sur l’épithélium vaginal : ainsi, l’ovulation ne peut pas être détectée par cette méthode. D’autre part, si des bactéries peuvent être visibles sur le frottis, elles n’ont aucune signification pathologique car il est normal de retrouver des bactéries dans le vagin d’une chienne saine. En résumé, le frottis PHOTO 1 : Réalisation du frottis vaginal. En maintenant les lèvres de la vulve d’une main, il est possible d’effectuer l’écouvillonnage vaginal après avoir préalablement humidifié le coton avec du sérum physiologique. L’introduction de l’écouvillon se fait verticalement en collant au plafond du vagin (au plancher se trouvant la fosse clitoridienne qu’il faut éviter) puis horizontalement. Une fois introduit en entier, il suffit de tourner l’écouvillon sur lui-même pour récolter les cellules du vagin avant de ressortir d’un geste franc. PHOTO 2 : Etalement du frottis. L’écouvillon est ensuite roulé sur la lame en veillant à ne pas repasser deux fois au même endroit et les cellules sont fixées au moyen d’un cytofixateur pour être ensuite colorées. Les colorations classiques sont la coloration de Harris Shorr (mise en évidence de l’index éosinophilique de la muqueuse vaginale) ou la coloration de May-Grünwald-Giemsa (mise en évidence des polynucléaires). 3 GERES infos permet simplement de se situer dans les phases du cycle sexuel. Il est, de plus, difficile d’interpréter un unique frottis à un temps donné : l’évaluation sur plusieurs jours est plus pertinente. Le frottis vaginal est également souvent le point de départ d’une consultation de l’appareil reproducteur de la femelle lors de pertes vulvaires. Les pertes vulvaires observées peuvent avoir plusieurs causes possibles : une vaginite, une métrorragie, un pyomètre, une métrite, un avortement… Le frottis vaginal est un acte simple, rapide, peu coûteux et facile d’interprétation avec un peu d’habitude. PHOTO 3 : Image de frottis de vaginite. En cas de pertes vaginales, le fond du frottis est très muqueux et de nombreux leucocytes sont présents avec parfois des hématies. NOTES DE LECTURE EFFICACITÉ CLINIQUE D’UN AGONISTE DE LA GNRH, LA DESLORÉLINE, CHEZ DES CHIENS ATTEINTS D’HYPERPLASIE BÉNIGNE DE LA PROSTATE, ET ÉVALUATION DU FLUX SANGUIN PROSTATIQUE PAR ÉCHOGRAPHIE DOPPLER Résumé par A. GOGNY, Dip. ECAR - Reproduction des animaux de compagnie, Centre Hospitalier Universitaire Vétérinaire Oniris, CS 40706, 44307 Nantes Cedex 3 Polisca A, Orlandi R, Troisi A, Brecchia G, Zerani M, Boiti C, Zelli R. Clinical efficacy of the GnRH agonist (deslorelin) in dogs affected by benign prostatic hyperplasia and evaluation of prostatic blood flow by Doppler ultrasound. Reprod Domest Anim 2013 ; 48(4):673-80. OBJECTIFS DE L’ÉTUDE Chez le chien mâle atteint d’hyperplasie bénigne de la prostate et traité par un implant de desloréline, évaluer : 1) l’efficacité du traitement ; 2) les modifications hémodynamiques du flux sanguin prostatique par échographie Doppler pendant toute la durée du traitement. MATÉRIELS ET MÉTHODES Six Bergers Allemands mâles âgés de 4 à 8 ans sont inclus dans l’étude. Les animaux sont vus à J-30, J0, J5, J11, J22 puis tous les 15 jours jusqu’à J0 + 6 mois. A J-30, l’hyperplasie bénigne de la prostate est attestée par l’analyse histologique d’un prélèvement prostatique effectué par biopsie échoguidée. Les chiens reçoivent un implant de desloréline (Suprelorin® 4,7 mg) par voie sous-cutanée à J0. mesuré dans une artère intraprostatique et dans une artère de la capsule prostatique (évaluation par Doppler pulsé du pic systolique de vélocité, de la vélocité télédiastolique, de l’index de résistance et de l’index de pulsatilité vasculaires, et mesure du nombre de pixels vasculaires Les paramètres évalués sont : par Doppler énergie) ; • la qualité du sperme (pH et concen- • la testostéronémie, mesurée lors de tration du sperme, mobilité, viabilité et chaque visite prévue par le protocole anomalies des spermatozoïdes) ; expérimental ainsi qu’à J1, J3 et J7. • les volumes prostatiques (volume effectif, et volume attendu en fonction du RÉSULTATS poids du chien) ; Avant la pose de l’implant, tous les chiens • le flux sanguin artériel prostatique, inclus sont asymptomatiques. Aucune 4 GERES infos anomalie n’est relevée sur le plan andrologique, en dehors d’un volume prostatique plus important que le volume prostatique attendu. A partir de J37, le volume prostatique décroît (p < 0,01). Il atteint une valeur minimale à J52, et la conserve jusqu’à la fin de l’étude. De même, à partir de J22, les caractéristiques du sperme sont modifiées (diminution de la mobilité et augmentation des anomalies) (p < 0,01). A partir de J35, il n’est plus possible d’obtenir un éjaculat. Les valeurs du pic systolique de vélocité et de la vélocité télédiastolique diminuent à partir de J11. La différence devient significative à partir de J22. Les valeurs les plus basses sont mesurées à J52, et ne sont plus modifiées jusqu’à la fin de l’étude. En revanche, les index de résistance et de pulsatilité vasculaires ne sont pas modifiés. Parallèlement, une diminution du nombre de pixels, significative à partir de J11, est observée dans les artères prostatiques de J5 à J52. La testostéronémie augmente dans les jours qui suivent la pose de l’implant, puis diminue jusqu’à ne plus être détectable à partir de J11. Les valeurs du pic systolique de vélocité, de la vélocité télédiastolique et le nombre de pixels vasculaires sont corrélées avec la testostéronémie (p < 0,001), et avec le volume prostatique. Sur le plan cutané, les implants sont bien tolérés et aucun autre effet indésirable couler de la carence en androgènes, attesn’est observé. tée ici par une diminution simultanée de la testostéronémie et des valeurs mesurant DISCUSSION les flux artériels prostatiques (pic systoLa diminution du volume prostatique lique de vélocité, vélocité télédiastolique et observée dans cette étude est cohérente nombre de pixels vasculaires). avec les autres études menées sur l’emploi de la desloréline dans le traitement de CONCLUSION l’hyperplasie bénigne de la prostate chez Chez les chiens ne pouvant être castrés le chien. Les auteurs évoquent une action chirurgicalement, la desloréline adminisinhibitrice de la desloréline sur l’axe hypo- trée sous forme d’implant pourrait repréthalamo-hypophysaire. senter une bonne alternative pour traiter l’hyperplasie bénigne de la prostate chez Les résultats des mesures obtenues par les chiens sans signes cliniques d’affection Doppler pulsé et Doppler énergie confir- prostatique. ment que ces examens peuvent être utilisés pour différencier l’hyperplasie bénigne Par ailleurs, lors d’hyperplasie bénigne de de la prostate chez le chien. la prostate, l’examen Doppler est un bon moyen de surveiller l’évolution de l’affecL’absence de modification de l’index de tion après mise en œuvre du traitement. résistance vasculaire démontre que le pic systolique de vélocité et la vélocité télédiastolique artériels diminuent de façon NOTRE AVIS SUR CETTE ÉTUDE proportionnelle après la pose de l’implant Les plus : de desloréline. Comme cet index reflète • Evaluation d’une technique d’exploration le degré de résistance vasculaire périphé- de l’hyperplasie bénigne de la prostate rique, l’absence de modification au cours non invasive et validée par ailleurs dans de traitement suggère que les modifica- l’espèce humaine tions vasculaires observées ici ont une • Présentation d’une théorie simple sur autre origine. le mode d’action de la desloréline sur la prostate, bien étayée par les résultats de La diminution des valeurs du pic systolique cette étude de vélocité et de la vélocité télédiastolique Les moins : dans les artères prostatiques reflète une • Etude menée sur un faible nombre de réduction du flux sanguin dans la prostate. chiens, puissance statistique faible Cette diminution étant corrélée à celle du • L’augmentation des paramètres juste volume prostatique, il est probable que la après la pose de l’implant suggère que le réduction du volume prostatique découle traitement n’est pas adapté aux animaux d’une ischémie/hypoxie tissulaires locales. symptomatiques (point non abordé dans La diminution du flux sanguin pourrait dé- la discussion). 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