exploration du sperme pathologique

EXPLORATION DU
SPERME PATHOLOGIQUE
Pr. Ag Leila Keskes
Faculté de Médecine de Sfax
INTRODUCTION
• Le spermogramme:
- Premier examen de l'exploration de la fertilité du couple.
- Analyse différents paramètres cytologiques:
- Numération des spz
- Mobilité
- Morphologie
- Vitalité et autres
- lnterprété en tenant compte de l'histoire du patient et de
son dossier clinique.
- Valeur informative: signes cytologiques révélateurs d'une
dysfonction testiculaire → évaluation approximative de la
fertilité masculine.
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ANOMALIES DU SPERME
- Anomalies
du nombre des spermatozoïdes
* Azoospermie
* Oligospermie
- Anomalies de la mobilité
- Anomalies de la morphologie
- Leucospermie ou bactériospermie
- Agglutination
- Anomalies du plasma séminal
- Autres anomalies morphologiques et fonctionnelles des spz
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ANOMALIES DU NOMBRE DES
SPZ
Azoospermie
- Déf: Absence de spz à l’examen direct et après
centrifugation du sperme.
- Affirmée après deux à trois spermogrammes
- Eliminer les anomalies de l'éjaculation: anéjaculations,
éjaculations incomplètes, éjaculations rétrogrades.
- Si volume de sperme faible: recherche systématique
de spermatozoïdes dans les urines
- Origine excrétoire ou sécrétoire ?
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EXPLORATION DE L’AZOOSPERMIE
- Examen clinique soigneux : interrogatoire et examen physique
- Spermogramme: présence ou non de cellules de la lignée spermatique
- Dosages plasmatiques de FSH:
* FSH augmentée: azoospermie sécrétoire
* Si FSH normale: problème étiologique car il existe des azoo
sécrétoires à FSH normale.
- Dosages des marqueurs séminaux dans l'éjaculat:
* Plusieurs marqueurs :
9 L-carnitine
9 α glucosidase (épididyme),
9 fructose (vésicules séminales),
9 citrate, zinc ou phosphatases acides (prostate).
* Si normaux: azoospermies sécrétoires
* Si anormaux: obstruction ou anomalie fonctionnelle
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INFORMATIONS FOURNIES PAR BS ANORMALE
- Occlusion sur trajet éjaculatoire:
BS : - Carnitine et α-glucosidase bas
- Marqueurs vésiculaire et prostatiques variables selon siège:
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INFORMATIONS FOURNIES PAR BS ANORMALE
- Hypoandrogénie:
Ensemble des marqueurs abaissés
- Inflammation des glandes annexes
ƒ Vésiculite:
Fructose abaissé et faible volume du sperme
ƒ Prostatite:
Citrate, zinc, phosphatases acides bas
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EXPLORATION COMPLEMENTAIRE DE L’AZOOSPERMIE
- Secrétoire:
* Caryotype: anomalie nombre et structure?
* Biologie moléculaire (PCR): microdélétions du chromosome Y?
* Biopsie testiculaire:
- Hypospermatogenèse
- Blocage de la spermatogenèse
- Cellules de Sertoli isolées
* Echo Doppler: varicocèle?
- Excrétoire
* Exploration radiologique: IRM
* Si agénésie bilatérale des canaux déférents: recherche
de mutations du gène CFTR
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ANOMALIES DU SPERME
- Anomalies du nombre des spermatozoïdes
* Azoospermie
* Oligospermie
- Anomalies de la mobilité
- Anomalies de la morphologie
- Leucospermie ou bactériospermie
- Agglutination
- Anomalies du plasma séminal
- Autres anomalies morphologiques et fonctionnelles des spz
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Oligospermie
- Déf: diminution du nbre de spz dans l'éjaculat (< 4O.106/éj).
- Rarement isolée: souvent associée à une asthéno et/ou
une tératozoospermie
- Origine sécrétoire ou excrétoire (oligospermie sévère)
- Plusieurs étiologies :
* Problème d'éjaculation (incomplète ou rétrograde),
* Infection/inflammation du tractus génital (leucospermie)
* Anomalies génétiques
* Varicocèle
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EXPLORATION DE L’OLIGOSPERMIE
• Oligospermie sévère: idem azoospermie
• Oligospermie modérée:
• Recherche de spermatozoïdes dans les urines
• Spermoculture: germes banaux + spécifiques
• Echographie doppler
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ANOMALIES DU SPERME
- Anomalies du nombre des spermatozoïdes
* Azoospermie
* Oligospermie
- Anomalies de la mobilité: asthénospermie
- Anomalies de la morphologie
- Leucospermie ou bactériospermie
- Agglutination
- Anomalies du plasma séminal
- Autres anomalies morphologiques et fonctionnelles des spz
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Asthénospermie
- Déf: chute de la mobilité des spermatozoïdes (<50%)
- Primaire ou secondaire
- Plusieurs étiologies :
- Infection génitale (+leucospermie)
- Auto-immunisation par anticorps (+agglutination),
- Anomalie des structures flagellaires
- Anomalie du plasma séminal:
* absence de fructose ou
* troubles de liquéfaction (protéases).
- Diagnostic étiologique orienté par valeur de la vitalité
- Exploration: Spermoculture, ACAS, microscopie électronique et
éventuellement BS
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ANOMALIES DU SPERME
- Anomalies du nombre des spermatozoïdes
* Azoospermie
* Oligospermie
- Anomalies de la mobilité: asthénospermie
- Anomalies de la morphologie: tératospermie
- Leucospermie ou bactériospermie
- Agglutination
- Anomalies du plasma séminal
- Autres anomalies morphologiques et fonctionnelles des spz
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Tératospermie
- Déf: Taux de formes normales < 30%
- Souvent anomalies polymorphes (+oligo-asthéno)
- Parfois, profils tératospermiques caractéristiques de certaines étiologies:
Ex: varicocèle
infection:
- Rarement tératospermie monomorphe:
* globozoospermie
* ou flagelles courts
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ANOMALIES DU SPERME
- Anomalies du nombre des spermatozoïdes
* Azoospermie
* Oligospermie
- Anomalies de la mobilité: asthénospermie
- Anomalies de la morphologie: tératospermie
- Leucospermie ou bactériospermie
- Agglutination
- Anomalies du plasma séminal
- Autres anomalies morphologiques et fonctionnelles des spz
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Leucospermie:
- Déf: concentration de leucocytes > 1 million/ml
- Révélatrice d'infection infra-clinique ou d’inflammation (lithiase
prostatique, séquelle d'infection, abstinence trop longue).
- Effet délétère à la fois pour le mouvement des spz et les capacités
fécondantes (pénétration des ovocytes).
- Souvent associée à: volume augmenté, pH élevé, numération basse,
flagelles enroulés ainsi que des modifications des paramètres
biochimiques du sperme.
- Ex complémentaires:
Spermoculture et ECBU du premier jet d'urine
Parfois, prélèvement urétral
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ANOMALIES DU SPERME
- Anomalies du nombre des spermatozoïdes
* Azoospermie
* Oligospermie
- Anomalies de la mobilité: asthénospermie
- Anomalies de la morphologie: tératospermie
- Leucospermie ou bactériospermie
- Agglutination
- Anomalies du plasma séminal
- Autres anomalies morphologiques et fonctionnelles des spz
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Agglutination
- Déf: présence d’agrégats de spz mobiles
- Evocateurs de la présence d’ACAS (traumatisme ou infection)
- ACAS: IgG ou IgA
* dans le sperme
* dans le sang périphérique
- Fréquence: 3 à 20%
- Effets:
* immobilisation des spermatozoïdes dans sperme et glaire
cervicale
* activité cytotoxique (nécrospermie)
* inhibition de l’interaction avec l’ovocyte
- Méthodes de détection:
* directes (ACAS fixés sur spz) et indirectes (PS, MC, sérum)
* surtout: Réaction d’agglutination mixte (MAR test)
Réaction de fixation d’immunobilles (IB test)
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ANOMALIES DU SPERME
- Anomalies du nombre des spermatozoïdes
* Azoospermie
* Oligospermie
- Anomalies de la mobilité: asthénospermie
- Anomalies de la morphologie: tératospermie
- Leucospermie ou bactériospermie
- Agglutination
- Anomalies du plasma séminal
- Autres anomalies morphologiques et fonctionnelles des spz
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Anomalies du plasma séminal
- Aspect:
* Jaunâtre: infection?
* Brunâtre: hémospermie (lésion urètre)
* Très visqueux: anomalie prostatique
* Transparent: oligo ou azoospermie
- Volume:
* hypospermie: éjaculation rétrograde partielle, agénésie
vésiculo-déférentielle
* Hyperspermie: inflammation/infection génitale
- pH:
* Bas: anomalie vésiculaire
* Élevé: anomalie prostatique
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ANOMALIES DU SPERME
- Anomalies du nombre des spermatozoïdes
* Azoospermie
* Oligospermie
- Anomalies de la mobilité: asthénospermie
- Anomalies de la morphologie: tératospermie
- Leucospermie ou bactériospermie
- Agglutination
- Anomalies du plasma séminal
- Autres anomalies morphologiques et fonctionnelles
des spz
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Anomalies ultrastructurales:
*
*
*
*
Etude par la microscopie électronique:
Réservée à des cas particuliers: asthéno majeure ou inf inexpliquée
Interprétation difficile car grande hétérogénéité de structure
Surtout anomalies flagellaires:
. mitochondries absentes,
. pièces intermédiaires allongées
. anomalies des structures axonémales:
abce de bras de dynéine, tot ou partielle,
absence de doublet central,
désorganisation des doublets
* Parfois anomalies touchant 100 % des spz:
. maladie des cils immobiles syndrome de Kartagener
. absence d’acrosome (tête ronde)
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Anomalies du pouvoir fécondant
- Evoquées en cas d’infertilité inexpliquée ou échecs de FIV
- Plusieurs tests d’exploration:
9 Test post-coïtal (TPC) ou test de Huhner
9 Test d’interaction sperme-mucus in vitro
9 Test de fixation à la zone pellucide
9 Test de la réaction acrosomique
9 Test de fécondation hétérospécifique: Hamster test
9 Test d’étude de la maturité nucléaire
9 Fécondation in vitro à titre diagnostique
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TEST DE FIXATION SUR LA ZONE PELLUCIDE
- zones pellucides humaines récupérées à partir d’ovocytes
immatures provenant d'ovaires au cours d'une intervention ou
après un échec de FIV.
- Un faible taux de fixation des spermatozoïdes sur la zone pellucide
pourrait évoquer la présence d'anticorps à la surface de la membrane
plasmique du spermatozoïde.
- Corrélation entre le nombre de spermatozoïdes fixés sur la zone
pellucide et les succès de FIV
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TEST DE LA REACTION ACROSOMIQUE
- Plusieurs méthodes directes et indirectes utilisées: visualisent
l'acrosome et la réaction acrosomique.
ƒ microscopie électronique
ƒ microscopie à contraste de phase à l'aide de colorants
cytologiques (colorants de Talbot)
ƒ microscopie à fluorescence: lectines marquées et anticorps
monoclonaux.
- Valeur relative des tests: interprétation avec prudence
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HAMSTER TEST
- Principe: fusion de spermatozoïdes humains avec ovocytes
dépellucidés de hamster
- Permet d'évaluer :
* la fonction fusiogénique du spermatozoïde,
* la capacité de décondensation des têtes spermatiques
- Résultats variables et non toujours reproductibles
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TEST DE QUALITE DU MATERIEL
NUCLEAIRE
• Appréciée par:
- un examen direct à l'aide d'un colorant fluorescent, l'acridine
orange: fluorescence verte lorsque l'ADN est bicaténaire et
fluorescence jaune-orangé quand l'ADN est monocaténaire.
- des méthodes cytochimiques et biochimiques.
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CONCLUSION
- Le spermogramme: pierre angulaire de l'évaluation de
l'infertilité masculine.
- Les spermogrammes anormaux doivent conduire à
d'autres tests d’exploration permettant:
* Un diagnostic étiologique de l’anomalie spermatique
* Une évaluation du pronostic de fertilité
* Une orientation thérapeutique
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