Bakteriologische Probenahme - LANUV

Arbeitsgruppentreffen 21.08.2013
19.11.2015 /LANUV NRW
Selke FB 62
Schlüssel
Zur
Ersten
Legionellen
Selke FB 62
Epidemie
Juli 1976 Bellevue-Stratford Hotel in Philadelphia, USA
58. Veteranenkongress der
Pennsylvania American Legion
Erkrankte: 221
Todesfälle: 34
Entdeckung des Erregers
1977 im Gewebe eines Opfers
Von 1976
Ursache: Klimaanlage
Selke FB 62
bekannte Epidemien
Jahr
Ort
Ursache
Erkrankte
Todesfälle
1976
Bellevue-Stratford Hotel in Philadelphia,
Pennsylvania, USA
Klimaanlage
221
34
1985
Stafford District General Hospital in
Stafford, Großbritannien
Klimaanlage
101
28
1987
Gummifabrik in Armawir, Sowjetunion
Wassertanks
236
3
1999
Blumenmesse (Westfriese Flora) in
Bovenkarspel bei Stede Broec,
Niederlande
zwei Whirlpools
133
23
1999
FEDOBA-Fachmesse in Kapellen, Belgien Zierspringbrunnen
43
5
2000
Melbourne Aquarium in Melbourne,
Australien
119
4
2001
SAS Atlantic Hotel in Stavanger, Norwegen Klimaanlage
28
7
449
6
Whirlpool und
Klimaanlage in einem
Aquarium
Kühlturm eines InnenstadtKrankenhauses,
2001
Stadtgebiet von Murcia, Spanien
Klimaanlage eines Kaufhauses
Selke FB 62
Jahr
2002
2003
2003
2004
2005
2005
2008
2010
2011
2012
2012
2013
2013
Ort
Erkrankte
Todesfälle
87
7
5
2
69
14
32
2
56
10
127
21
Trinkwasser
6
2
Rückkühlwerk eines
Blockheizkraftwerkes
65
5
Playboy Mansion in Los Angeles, USA[8]
Whirlpool
80
0
AR Diamante Beach Hotel in Calp,
Spanien[9]
JW Marriott Hotel (Prime Group Inc.) in
Chicago, Illinois, USA [10]
vermutlich
Warmwassersystem
Springbrunnen in der
Lobby
13
3
10
3
Wesley Ridge Retirement Community (Sun
City) in Reynoldsburg, Ohio, USA [11]
Trinkwasser und Kühlturm
39
6
Kläranlage in Warstein, Deutschland
Kläranlage, Rückkühlwerk
der Esser Werke und
Abwassersystem der
Warsteiner Brauerei
165
3
Bürgerzentrum in Barrow-in-Furness,
Großbritannien
Klinikum Frankfurt (Oder) in Markendorf,
Deutschland
Raffinerie des Unternehmens Noroxo bei
Harnes, Frankreich[7]
Das Unternehmen Lidköpings Värmeverk in
Lidköping, Schweden
Ligninproduzent Borregaard in Sarpsborg,
Norwegen
Pflegeheim Seven Oaks Home for the Aged
in Toronto, Kanada
Saint Peter's University Hospital in New
Brunswick, New Jersey, USA
Telekom-Gebäude nahe dem Ulmer
Hauptbahnhof, Deutschland
Selke FB 62
Ursache
Klimaanlage
Warmwasseranlage
Rückkühlwerk
Kühltürme
industrieller Luftwäscher
Kühlturm
Legionellen-Epidemien NRW
Sept. 2013 – Warstein
165 Erkrankte
3 Tote
Sept. 2014 – Jülich
37 Erkrankte
1(+1) Tote
Selke FB 62
Informationsweg im Epidemie-Fall
Ausruf Epidemie
Quellensuche/ Maßnahmen
Anzahl Erkrankungen
Zeitstrahl
zuständiges
Gesundheitsamt
Stadt/ Kreis
UWB
BR
Gesundheitsministerium
Selke FB 62
Umweltministerium
LANUV
Damit die Planung im Ernstfall nicht zum Fallstrick wird…
Probenahme
Wer kann Probenahme
durchführen?
Laboruntersuchung
Welches Labor ist geeignet?
Welche Verfahren sind geeignet?
Wo können Legionellen auftreten?
Wie schnell sind Messergebnisse verfügbar?
Was kann alles eine mögliche Quelle sein ?
Welche Risiko- oder Gefährdungsanalysen gibt es bereits?
Wer ist zu beteiligen?
Selke FB 62
Stolpersteine Probenahme
Selke FB 62
Probenehmer
Selke FB 62
Probenahme
 Nachgewiesene Qualifikation der eingesetzten
Probenehmer f. Probenahmen der ausgewählten Matrix
und bakteriologischer Probenahmetechniken
 Separate Probenahmeausrüstung (Kelle) u.
Kühltaschen für stark belastete u. gering belastete
Wässer (Minimum)
 Probenahmereihenfolge: immer vom voraussichtlich
unbelasteten zu belasteten Messstellen
 Aussagekräftiges PN-Protokoll: Datum, Uhrzeit, MS,
Vorortparameter: pH, LF, T; ggf. Foto der Probe,
Besonderheiten: Regenereignis?, Einsatz von Bioziden
(Wann? Welche? Wie viel? Inaktivierung durch?)…
 Einhaltung Transport- & Lagerbedingungen, ggf.
Mitführen eines Temperaturloggers
 Persönliche Übergabe der Proben im Labor
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Stolpersteine Probenahme
Selke FB 62
Was lieben Legionellen ?
Stagnation
Totleitungen
Wassertanks,
Schlechte
Isolierung von
Leitungen,
Filter,
Armaturen...
Wärme
Optimum:
30°C - 37°C
Vermehrung:
20°C – 50°C
Vorkommen in Protozoen
Selke FB 62
Biofilme
Bakterienrasen
Algen
Korrosionsprodukte
Anorganische
Niederschläge
repräsentative Messstellen
 Kühlwasser: genaue Kenntnis des Aufbaus
Selke FB 62
repräsentative Messstellen
 Kühlwasser: genaue Kenntnis des Aufbaus
Selke FB 62
repräsentative Messstellen/ repräsentative PN
 Genaue Kenntnis der aktuellen Betriebsdaten und
jeweiliger Anlagenaufbau=> Auswahl der MS
 Auswahl MS u. alle PN mit Betriebsleiter od. Vertreter
(Sicherstellung Kenntnis aktueller Betriebssituation u. Lage
der MS)
 Vor jeder PN Kontrolle der MS und der aktuellen
Bedingungen (z.B. Biozideinsatz, Änderung im Ablauf)
 MS der Selbstüberwachung = MS der amtl.
Überwachung
 Lage MS im Optimum an Stelle homogener
Durchmischung (z.B. Pumpe im Ablauf, Alternative:
sterile Mischproben)
 Bei Kühlwasserproben: Biofilm beproben falls vorhanden
(Legionellensenke)
 Kühlwasser: Beachtung VDI 2047 "Kühltürme; Begriffe
und Definitionen" und VDI 2047 Blatt 2 "Rückkühlwerke;
Sicherstellung des hygienegerechten Betriebs von
Verdunstungskühlanlagen (VDI-Kühlturmregeln)" (Jan.
2015)
Selke FB 62
repräsentative Messstellen/ repräsentative PN
 Abwasser: PN nur bei speziellen Fragestellungen;
Beachtung das hohe Begleitflorakonzentration
Nachweis stört
 Probenahme erfolgt i.d.R. als sterile Schöpfprobe
 innerhalb eines Wasserkörpers, möglichst 1/3 unterhalb der
Wasseroberfläche
 Vermeidung von Miterfassung sedimentierter oder aufschwimmender Partikel
 In Abwasser-führenden Kanälen, Ablaufrinnen oder Schächten
sollte eine ausreichende Wasserführung und Wassertiefe
vorhanden sein, um Proben unter der Wasseroberfläche
entnehmen zu können
 Ggf. Staublechs mit V-Nut verwenden und Probenahme aus
dem freien Überlauf nehmen
Selke FB 62
Stolpersteine Probenahme
Selke FB 62
sterile Probenahme
 Optimum: für jede PN separate sterile Schöpfer verwenden
 Nicht nur Schöpfgefäße müssen innen u. außen steril sein,
der Kellenhalter muss mind. bis zu Eintauchtiefe steril sein
 Bei Verwendung von Alkohol darauf achten, dass er in
Sprühflasche nicht verwässert; nur 70-75%iger Alkohol wirkt
bakterizid
 Bei Verwendung von Braunglasflaschen darauf achten, dass
keine Lichtbeugung im Glas sichtbar ist (Bruchgefahr);
Papierstreifen beim Sterilisieren verhindern dass Stopfen
verklemmen
 Trockensterilisation der Probennahmeflaschen durchführen
(es darf kein Wasser in Flasche verbeiben –
Kontaminationsgefahr, Verfälschung des Volumens)
 Lagerzeit unbenutzter sterilisierter Flaschen beachten!
 Schöpfbecher rechtzeitig austauschen, falls Verfärbungen
sichtbar oder Oberfläche angeraut ist, um Verschleppungen zu
vermeiden; Mitführen von Ersatzbechern
 Mitführen geeigneter Flaschen mit Biozid-Inaktivatoren
Selke FB 62
LABOR-Untersuchung
Welche Verfahren gibt es?
Wofür sind sie geeignet?
Kulturverfahren
•
ISO 11731:1998
Legionella
Water quality – Determination of
und die aus ihr entstandenen weiteren Normen:
Selke FB 62
•
ISO 11731-2: 2004
Water quality – Determination
and enumeration of Legionella Part 2: Direct membrane filtration
method for waters with low bacterial counts
•
DIN EN ISO 11731-2: 2008-06 Wasserbeschaffenheit –
Nachweis und Zählung von Legionellen –Teil 2: Direktes
Membranfiltrationsverfahren mit niedriger Bakterienzahl,
(ISO 11731-2:2004); Deutsche Fassung EN ISO 11731-2:2008
LABOR-Untersuchung
Kulturverfahren
• ISO 11731:1998
gemäß
„Scope“(Geltungsbereich)
ebenfalls auf die
Untersuchung von
Umweltproben,
wie
Oberflächenwasserproben,
Abwasser, KühlwasserProben, Sedimenten,
Biofilmen etc. anzuwenden
Selke FB 62
Water quality – Determination of Legionella
Dauer: ca. 10-12 Tage
LABOR-Untersuchung
Welche Verfahren gibt es?
Wofür sind sie geeignet?
alternative Verfahren
• Quantitative Polymerase-Kettenreaktion
(qPCR) nach AFNOR T90-471 und T90-431 bzw.
ISO/TS 12869
• Viability PCR (vPCR) (Mansi et al. 2014)
• FISH (Fluoreszenz-in-situ-Hybridisierung) als
Direktnachweis auf Filter
Selke FB 62
LABOR-Untersuchung
alternative Verfahren
• qPCR/ vPCR/ FISH
•
•
Kurze
Untersuchungsdauer
ca. 1-2 Tag
Teilweise für belastete
Matrices, wie
Klärschlämme
verwendbar
•
Geringe Erfahrungen in der
Praxis
•
Bis dato keine Korrelation
zu Ergebnissen des
Kulturverfahrens bekannt
•
Nur von wenigen
Spezialisten durchführbar
•
Daher derzeit nicht für
Routine geeignet
=> Einsatz für spezielle Fragestellungen z.B.
Kontrolle von Sanierungsmaßnahmen
Selke FB 62
Legionellen-Ausbruch
Jülich 19.09.2014
Stand 05.11.2014
87 potentiell
Erkrankte
36 nachgewiesen
Erkrankte
Messstellen
Selke FB 62
Erste Betrachtung möglicher
Quellen im Häufungsbereich
der Erkrankungsfälle
Messstellen
Selke FB 62
Auflistung potentiell
Verdächtiger Anlagen
Kreis Düren
&
LANUV
Tagebau Hambach
Tagebau Inden
Messstellen
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Untersuchte Anlagen
Kreis Düren & LANUV
Stand 24.09.2014
Ausschnitt der vorherigen Karte
Messstellen
Selke FB 62
LANUV
Messstellen
Selke FB 62
Messstellen LANUV
STAND: 24.09.2014
Ausschnitt 1
Messstellen
Selke FB 62
Messstellen LANUV
STAND: 24.09.2014
Ausschnitt 2
Messstellen
Selke FB 62
• ab Sept. 2013 Probenahmen
durch das LANUV
• Von September 2013 bis
Mai 2015 wurden an über 400
Probenahmestellen insgesamt rund
3.600 Abwasser-, Gewässer-Sediment-,
Schlamm-, Biofilm-sowie Luftkeimproben entnommen
•
Beprobung von potentiellen
„Risikoanlagen“ gemäß aktuellem
Wissensstand; Herbst 2014
Selke FB 62
•
Erstellung „Konzeptpapier f. Probenahme
und Kulturverfahren“
•
Beteiligung an „Expertenkommission
Legionellen“
•
Bewertung von Untersuchungsergebnissen
•
Aufstellung von Messprogrammplanung
•
Ringversuch „Legionellen in Abwasser
und OFW“ Sept. 2014
•
Aufbau eines eigenen LegionellenLabors
•
Nachsorge in Warstein bis mind. Ende
2015; Nachsorge Jülich dauert an
•
Beratung MKULNV/ BR in Fragen
verschiedener Probenahme- und
Untersuchungsmethoden (Wasser, Luft!!)
• Schulung von Probenehmern
----------------------------------------------------------•
Ursachenermittlung Fall Jülich
•
Erstellung Untersuchungskonzepte
•
Durchführung amtlicher Probenahmen
•
Ausbreitungsrechnungen
•
Seit dem 01.04.2015 eigenes
Legionellenlabor im LANUV…..
FB
62 Selke
Selke
FB 62
Danke
Danke für Ihre Aufmerksamkeit!
https://www.umwelt.nrw.de/fileadmin/redaktion/PDFs/umwelt/legionellen_expertenkommission.pdf
FB 62 Selke
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