Sécurité biologique dans les laboratoires de microbiologie
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Sécurité biologique dans les laboratoires de microbiologie
Sécurité biologique dans les laboratoires de microbiologie D.S. Blanc Médecine Préventive Hospitalière CHUV Buts • protection du personnel • protection des personnes en dehors du laboratoire • protection de l'environnement Cadre légal • Ordonnances – Ordonnance sur l'utilisation d’organisme en milieu confiné – Ordonance sur la protection des travailleurs contre les risques liés aux microorganismes – Ordonnance sur la protection de la maternité • Recommandations SUVA: – Prévention des maladies professionnelles dans les laboratoires de microbiologie diagnostique. 2003. 2869/27.f – Prévention des infections transmises par voie sanguine dans les laboratoires médicaux. 2003. 2869/19.f – Prévention des atteintes à la santé lors des opérations de désinfection. 1993. 2869/23.f – Prévention des maladies infectieuses transmises par voie sanguine dans le secteur sanitaire. 2003. 2869/30.f – Tuberculose dans le cadre professionnel: Risques et prévention – Vaccination du personnel de santé – Allergie au latex 4 Niveaux de Sécurité Biologique (BSL): fonction (entre autres!) de la pathogénicité des microorganismes utilisés 1: non pathogènes (ex. Bacillus subtilis) 2: modérément pathogènes 3: causant des maladies sévères ou potentiellement létales (HIV, B.anthracis) 4: risque élevé de transmission par aérosol et causant des infections léthales (FVH) Laboratoires de diagnostic microbiologique: BSL-2 Mesures de sécurités biologiques: 1. 2. 3. 4. 5. Infrastructures Pratiques microbiologiques Elimination des déchets Hygiène du lieu de travail Hygiène et prévention personnelle 1. Infrastructures • Un panneau de risque biologique doit être suspendu sur chaque porte d'accès des laboratoires • L'accès au laboratoire est limité • Portes et fenêtres des lieux de travail doivent être fermées pendant le travail 2. Pratiques microbiologiques standards • Pas de pipetage à la bouche • Utilisation de matériel jetable de préférence Matériel réutilisable doit être pré-désinfecté chimiquement ou thermiquement avant le nettoyage manuel (ex. pipettes en verres) • Aiguilles hypodermiques et seringues: ne doivent être utilisées que si cela est absolument nécessaire et doivent être éliminées de manière sûre; le recapuchonage des aiguilles est proscrit Pratiques microbiologiques standards • Minimiser la production d’aérosols! Lorsqu'il y a possibilité de production d'aérosols entraînant un risque d'infection aérogène, la manipulation d'échantillons doit s'effectuer sous un flux de sécurité de classe II • Port de gants obligatoire: ⇒ risque de contact cutané avec du matériel infectieux, une surface ou un équipement contaminés ⇒ travaille avec un récipient ouvert contenant du sang ou un autre liquide biologique Pratiques microbiologiques standards • Désinfection des récipients d'échantillons dont l'extérieur est souillé avant toute manipulation • Contrôle de l'identité des microorganismes de référence utilisés Pratiques microbiologiques spéciales Manipulation sous un flux laminaire de classe 2 ¾ Prélèvements respiratoires ou de tissus: ¾ Production d'aérosol potentiellement infectieux Hottes de sécurité biologique Classe 2 Classe 1 Classe 3 3. Classification et élimination des déchets du secteur de la santé A. Déchets médicaux ne posant pas de problème, composition similaire à celle des déchets urbains B. Déchets spéciaux 1. Danger de contamination (contenant du sang, des excrétions et des sécessions) 2. Danger de blessures 3. Médicaments périmés 4. Cytostatiques C. Infectieux OUC: inactivation des déchets contaminés avant de les sortir des laboratoires D. Autres déchets spéciaux (chimiques, radioactifs…) IMU-DAM: Élimination des déchets Déchets infectieux solides Cultures de microorganismes ou de cellules Fermeture du sac avec une attache zip Échantillons de patients, reste d'analyse Objets ayant touchés des échantillons (tips de pipetage de sérum, …) Dépôt dans les chariots prévus à cet effet Autoclavage (IMU ou BH-03) IMU-DAM: Élimination des déchets Déchets infectieux liquides B2. Objets tranchants Tubes de cultures Flacons de cultures Inactivation chimique (eau de Javel) Evier IMU-DAM: Élimination des déchets Déchets présentant un danger de blessure Aiguilles, lames, pipette Pasteur B2. Objets tranchants IMU-DAM: Élimination des déchets Déchets toxiques Bromure d'éthidium Radiactivité Etc… Emballage adhoc D. Pharmacie IMU-DAM: Élimination des déchets Déchets urbains Emballages échantillons Emballages de kits Récipients de réactifs vides Essuie-mains Sac gris sagex. Etc… Liquide corporels et excrétions de personnes infectées: peuvent en principe être déversées dans les canalisations Déchets ne présentant pas de risque (urbains): peu souillés de sang et peu contaminé (sparadraps, pansements, couches…) A. Déchets urbains CHUV: Recyclage des déchets Papier Plastique Aluminium Attention: tous les documents contenant une identification de patient doivent être détruit de façon "sécurisée" (par exemple avec une déchiqueteuse). 4. Hygiène du lieu de travail • Les lieux de travail doivent être parfaitement propres et en ordre; seuls les matériaux et appareils absolument nécessaires doivent s’y trouver; les réserves doivent être rangées dans les locaux et armoires prévus à cet effet • Place de travail: responsable: personnel technique - maintient de l'ordre - nettoyage et désinfection après chaque travail ou à la fin de chaque journée, et après chaque souillure par du matériel viable Hygiène du lieu de travail • Equipements: responsable: personnel technique - Désinfection selon fiche technique Un équipement devra être désinfecté avant de le sortir du laboratoire (changement de laboratoire, réparation, mise à la casse) • Surfaces (sols et murs): responsable: service de maison - Selon le plan d'hygiène • En cas de présence d'insectes ou de rongeurs, faire appel au Service de maison pour leur élimination • Les animaux de compagnie sont interdits d'accès 5. Hygiène personnelle • Port de la blouse fermée (ou autres vêtements de protection): – obligatoire dans les lieux de travail! – La blouse reste dans le laboratoire!!! Hygiène personnelle • Il est interdit de manger, de boire, de fumer, de priser, de manipuler des verres de contact, d’utiliser des produits cosmétiques ou d’entreposer de la nourriture dans les lieux de travail Hygiène personnelle Lavage/désinfection des mains Il convient de se désinfecter (solution alcoolique) ou de se laver (savon désinfectant) soigneusement les mains: • à la fin de chaque opération de travail • après le port de gant • avant de quitter le laboratoire Prévention personnelle • Vaccination contre les hépatites A et B: hautement recommandée pour tout le personnel • Vaccination contre le méningocoque: recommandé pour le personnel des laboratoires de diagnostique • Vaccin contre la grippe: recommandé • Test à la tuberculine (Mantoux): à l'engagement, puis à rythme annuel s'il est négatif (chaque année pour le personnel du labo TB) • Mise à jours des vaccins généraux (diTE, ROR, etc.): contrôle par la Médecine du Personnel lors de l'engagement Prévention personnelle • Grossesse suspectée ou confirmée: Informer le médecin du personnel ou/et le supérieur responsable, afin que soient appréciés et discutés les risques éventuels du poste de travail actuel. Vdoc: 6.4.2A Directives générales DIR CHUV: Protection des collaboratrices enceintes ou qui allaitent Ne sont pas autorisées pour les femmes enceintes (*: + 3 premiers mois d’allaitement) •les manipulations du virus HIV, herpès simplex ou varicelle •*les manipulations de sang ou autres liquides biologiques HIV ou HBV ou HCV positifs ou suspects de l’être •les manipulations de prélèvements déclarés infectieux (point jaune) •les manipulations d’agents bactériens* (tuberculose, listeria, gonocoque), viraux (en l’absence d’immunité démontrée : CMV, virus varicelle-zona, herpès, rougeole, rubéole, parvovirus B19) ou parasitaire (toxoplasmose): évaluation rigoureuse •*Les activités avec des agents infectieux dans le cadre des laboratoires de recherches doivent dans tous les cas être évalués avec la Médecine du personnel. Pour le général, voire le document « Application de l’ordonnance sur la protection de la maternité dans les Institutions HospicesCHUV ». Mesures de sécurité supplémentaires pour le laboratoire des mycobactéries • Port des gants obligatoire pour toutes les manipulations de cultures • Port d'une blouse à usage unique obligatoire Cette blouse ne doit pas quitter le laboratoire de tuberculose. Les blouses à usage unique doivent être jetées dans les poubelles biologiques réservées à cet effet (sacs rayés rouge et blanc) • Entrée du laboratoire restreinte au personnel autorisé Mesures en cas de contamination Contamination par du liquide (tube de bouillon de culture ou récipient contenant un liquide biologique cassé, etc.) Contamination par contact (plaques de milieux de cultures qui tombent par terre, échantillon clinique qui tombe sur la surface de travail, etc...) Mesures en cas de contamination • Porter des gants • Recouvrir de papier absorbant imbibé de désinfectant. Eviter de sprayer ou de verser le désinfectant de haut, ce qui peut engendrer des aérosols • Laisser agir • Éponger et jeter le matériel souillé dans conteneur adéquat (Ne jamais manipuler du verre cassé directement avec les mains, même gantées, mais utiliser une brosse et ramassoire, un pincette …) Mesures en cas d'accident • Mesures d'urgences – Piqûre et blessures: laver immédiatement la partie lésée à l'eau et au savon, la rincer abondamment et la désinfecter (alcool ou Betadine) – Projections sur les muqueuses (bouche, yeux): rincer abondamment avec du sérum physiologique ou à défaut de l'eau du robinet • Conseil médical rapide – Semaine, nuit, week-end et fériés: tél. 40 275 • Déclarer l'accident – Déclaration avec le responsable du service adressée à la Médecine du personnel (obligation légale) Les désinfectants utilisés au CHUV • Stérilium (alcool, ammonium quaternaire): désinfection des mains • SeptoCHUV2000 (alcool, ammonium quaternaire): désinfection des surfaces • Lysetol AF (amines) désinfection des instruments (trempage) Les désinfectants utilisés au CHUV Stérilium Septochuv Lysetol Bactéries végétatives +++ +++ +++ Micobactéries ++ +++ +++ Virus +++ +++ +++ Champignons +++ +++ +++ - - ± Spores Documents M:/IMU/COMMUN/ ACCREDITATION/ Biosécurité/Documents/ SécuriteLabo4_DBlanc.pdf