Hémogramme

Hémogramme
Plan
Introduction
Définition
Technique d’examen
Méthodes d’analyse
Indications de l’hémogramme
Interprétation de l’hémogramme
Globule rouges
leucocytes
Plaquettes
Conclusion
- Examen biologique le plus prescrit
- Indications sont très nombreuses
- Examen simple, peu coûteux, automatisé et
standardisé
- Pour exploiter correctement les résultats il faut
donc:
- connaître les valeurs normales
- savoir reconnaître et définir les anomalies
Définition (1)
- Principal examen d’étude des cellules sanguines
- Examen destinée à évaluer la qualité de l’hématopoïèse:
examen de base du bilan hématologique
- L’hémogramme = numération formule sanguine
Le premier terme est le plus approprié à l’analyse réalisée
car les deux versants quantitatifs et qualitatifs de l’étude
sont inclus dans la terminologie « hémogramme »
- Taux des éléments figurés du sang par unité de volume(mm³
ou Giga/l)
Définition (2)
constitue l’expression du résultat:
- Numération des Hématies (GR) du sang circulant
accompagné de paramètres permettant de caractériser la
population érythrocytaire (constantes érythrocytaires)
- Numération et la formule leucocytaire :
détermination de la proportion des différents types de
leucocytes (polynucléaires neutrophiles, éosinophiles,
basophiles, lymphocytes, monocytes)
- Numération des plaquettes(Pq), constantes Pq
- La détection d’autres cellules (anormalement
rencontrées dans le sang)
Technique d’examen
- Prélèvement sur sang veineux
- Garrot: temps de pose < 60s
- Matériel de prélèvement: système sous vide+++
- Tube contenant anticoagulant : (EDTA)
- lors de prélèvement le tube doit être agité pour éviter
la formation de micro caillots
-Tubes sont calibrés pour des prélèvements de 5ml
- En cas de prélèvement en micro méthodes , les tubes
sont de 1ml
- l’examen doit être réalisé rapidement (<2h) après le
prélèvement
Méthodes d’analyse
Méthode Classique: Hémogramme en Hématometrie
- Lente et fastidieuse
- La détermination GR, GB et des Pq: Cellules fermées
(Malassez, Thomas…) lues au microscope
- Le dosage Hb par spectrophotométrie
- Le dosage Ht: Centrifugation d’un microhématocrite à 8000t/minute
4 minutes (tube de wintrobe)
- Le calcul des constantes GR: concentration corpusculaire ou globulaire
moyenne (CCMH ou CGMH), la teneur corpusculaire ou globulaire
moyenne (TCMH ou TGMH) et le volume globulaire moyen (VGM)
Méthode automatique:
- Rapide et reproductible
- 10000 cellules+++
- <200 µl
- Le dénombrement des cellules se base sur le nombre d’impulsions
électriques induites par le passage de la cellule entre deux électrodes
ou par détection de particules par faisceau laser
- la réalisation de la formule leucocytaire : volume, conductivité et
diffraction cellulaire
- Nouveaux indices : l’indice de distribution érythrocytaire(IDE), le
volume moyen plaquettaire (VMP) , Indice de Distribution
Plaquettaire (IDP)
Messages et alarmes++
Frottis sanguin:
- Indispensable, anomalie quantitative ou qualitative détectée
par l’automate
- Etalement d’une goutte de sang sur une lame de verre et
colorée au May Grünewald Giemsa (MGG)
- L’analyse microscopique :
- morphologie des cellules normales et pathologiques
( Blastes, myélémie, cellules lymphomateuses)
- d’apprécier d’éventuels agrégats plaquettaires
Indications de l’hémogramme (1)
- Syndrome infectieux
– Fièvre prolongée
– Infections récidivantes, résistantes à l’antibiothérapie
– Formes graves d’emblée : choc septique, angine ulcéro-nécrotique, infection des
parties molles.
– Infection dans les suites d’une chimiothérapie hématotoxique, de
l’administration d’un médicament pourvoyeur d’agranulocytose
- Syndrome anémique
– Pâleur cutanéo-muqueuse, asthénie
– Conséquences cardiaques et respiratoires : essoufflement, angor, signes
d’insuffisance cardiaque
– Conséquences neurologiques : lipothymies, vertiges, acouphènes…
- Syndrome hémorragique
– Purpura, ecchymoses , hémorragie des muqueuses
– Syndrome hémorragique grave : hémorragies neuroméningées, digestives,
hématomes profonds
Indications de l’hémogramme (2)
- Syndrome tumoral
– Principalement : adénopathies isolées ou multiples, splénomégalie, hépatomégalie
– Autre : adénopathies profondes, élargissement du médiastin, hypertrophie
gingivale, lésion cutanée infiltrée (hématodermie, érythrodermie)
- Thrombose artérielle ou veineuse
– Infarctus du myocarde, accident vasculaire cérébral, thrombose artérielle
périphérique.
– Thrombophlébites
– Signes d’hyperviscosité : céphalées, acouphènes, baisse d’acuité visuelle
- Situations systématiques
– Grossesse
– Médecine de travail
– Bilan préopératoire
– Bilan pré thérapeutique
– Suivi thérapeutique
Interprétation de l’hémogramme
Globules Rouges
Cellules anucléées dont le constituant principal est
l’Hémoglobine
Rôle dans le transport de l’oxygène et du dioxyde de carbone
entre les alvéoles pulmonaires et les tissus
• Numération érythrocytaire: Nombre de GR: nombre de GR circulant dans un
volume de sang ( millions/mm³)(Tera/l)
Chez l’homme : 5 - 5,5
Chez la femme: 4 - 4,5
Chez l’enfant: 4 - 5,2
Chez le nouveau-né : 4,5 - 7
Une polyglobulie: GR > 5,5 chez l’homme
Une érythropénie : GR< 5 chez l’homme
• Taux d’hémoglobine (Hb): la quantité d’Hb contenue dans les hématies/ unité de
volume sanguin( g/dl)(g/100ml)
Chez l’homme: 13 - 18
Chez la femme: 12 -16
Chez l’enfant: 11,5 -15
Chez le nouveau-né: 14 – 20
Une anémie : Hb < 13 chez l’homme
Une polyglobulie: Hb > 18 chez l’homme
Taux d’Hématocrite(Ht): volume globulaire contenu
dans 1 mm³de sang(%)
Chez l’homme: 40 - 54
Chez la femme: 37 - 47
Chez l’enfant: 37 - 45
Chez le nouveau-né: 50 – 60
Une polyglobulie: Ht >50 % chez l’homme
L'hématocrite et le taux d'hémoglobine sont les deux
éléments les plus importants pour faire le diagnostic
d'anémie
• Volume globulaire moyen (VGM): Volume moyen d'un
GR
- Rapport du taux de d’Ht sur le nombre de GR
[femtolitres (fl) ou µ³]
VGM: 80-98 fl = normocytose globulaire
Chez le nouveau- né , VGM: 90 – 120 fl
< 80 fl: microcytose
> 98 fl : macrocytose
• Taux corpusculaire moyen en hémoglobine (TCMH ou
TGMH): Poids d'hémoglobine contenu dans chaque GR
- Rapport Hb/le nombre de GR [ Picogrammes (pg)]
TCMH : 27 - 32 = normochromie
< 27 : hypochromie
•
Concentration corpusculaire moyenne en hémoglobine
(CCMH): Volume occupé par l’Hb dans un GR
- Rapport Hb/ hématocrite
CCMH: 32 – 36 = normochromie
< 32: hypochromie
La CCMH ne peut pas augmenter ( Erreur technique)
Indice de distribution des globules rouges (IDR):
RDW (Red Distribution Width)
Coefficient de variation calculé à partir de la courbe érythrocytaire
VGM
- RDW : 11,5 -14,5%
- Hétérogénéité des hématies
- > 15%:
une anisocytose (taille variable)
coefficient d’anisocytose
50
100
200
IDR Normal < 15%
50
100
IDR Elevé 18 %
200
50
100
200
IDR très Elevé 35 %
Numération des réticulocytes: reflète le taux de
production médullaire de l’érythropoïèse
- Caractérisés par la persistance de résidus chromatiniens
intra cytoplasmiques
- Ne fait pas partie de l’hémogramme systématique
- Permet de différencier l’origine centrale ou périphérique
d’une anémie
- Taux de réticulocytes: 0,2 à 2% soit 25 – 75 10³/mm³ ou
giga/l
< 120 giga/l: anémie peu regenerative
> 120 giga/l: anémie régénérative
Coloration vitale au bleu de crésyl brillant
Le colorant pénètre spontanément dans les hématies et se fixe
sur l'ARN
L'observation se fait au microscope
L'appréciation se fait sur 1000 globules rouges
Cytométrie de Flux
L'ARN ribosomal peut être marqué par des produits auto
fluorescents qui sont détectés en cytométrie de flux. Cette
méthode automatisée est plus fiable
résidus chromatiniensintracytoplasmiques
L'étude morphologique:
La population érythrocytaire normale est homogène, ce qui peut
s'apprécier d'après 3 critères:
* La forme : disque biconcave se présentant sur les frottis sur leur face
arrondie
* La taille : 7,2 microns
* La coloration : liée au contenu en hémoglobine
Toute population érythrocytaire qui ne correspond pas à ces 3 critères est
pathologique et les anomalies seront classées selon ces critères
Anomalies de forme
-
Sphérocytes: GR de petit diamètre, très colorés, sans centre clair
-
Drépanocytes : hématies falciformes
- Schizocytes :
Hématies fragmentées
- Ovalocytes ou élliptocytes : hématies allongées
- Cellules cibles: centre foncé du GR
- Dacryocytes: GR en forme de larme
- Poikylocytes : mélange d’hématies de formes variables
Anomalies de taille
-
Anisocytose : mélange de tailles différentes
Anomalies de coloration
- Hypochromie : GR clairs, pauvres en hémoglobine,
souvent microcytaires
- Polychromatophilie : lorsque des hématies sont
bleutés: hyper réticulocytose
- Anisochromie: GR de coloration différente
Les inclusions
- Hématies à granulations basophiles (ou hématies ponctuées)
- Corps de Jolly : résidus nucléaires
- Anneau de Cabot:
- Les corps de Heinz : hémoglobine dénaturée / coloration
spéciale
Variations physiologiques (1)
- Age:
Taux d’hémoglobine:
Plus élevé chez le nouveau-né
Décroît avec l’âge jusqu’à 5 ans
Augmente ensuite jusqu’au taux observés chez l’adulte
VGM: macrocytose physiologique chez le nouveau – né
- Sexe
Le taux d’hémoglobine doit être interprété selon le sexe à partir de 12ans
- Ethnie
Taux d’hémoglobine :
Chez les sujets de race noire est inférieur de 0,8 à 1 g/dL. Cela conduit à
un diagnostic d’anémie par excès dans cette population
Variations physiologiques
(2)
- Grossesse
Taux d’hémoglobine :
Il est physiologiquement abaissé en raison, en partie, de
l’hémodilution
[Un seuil de 11g/dL est admis, bien que ce taux diminue
nettement du 1er au 3ème trimestre (perte d’environ 1 g/dL)]
Une carence martiale ne doit cependant pas être méconnue
- Autres facteurs
L’alcool entraîne essentiellement des variations modérées du
VGM
Globules Blancs
La numération leucocytaire: Globules blancs circulants
dans un volume de sang
Valeur normale: 4 – 10 Giga/l
G.B > 10 Giga/l : hyperleucocytose
G.B < 4 Giga/l : leucopénie
- La formule leucocytaire:
Polynucléaires neutrophiles (PNN), éosinophiles ( PNE) et
basophiles (PNB), Lymphocyte, Monocytes
- Le résultat est exprimé en (%)
- les valeurs de référence pour apprécier les anomalies
pathologiques doivent être en valeur absolue de cellules
circulantes / unité de volume
Ils se calculent en multipliant le pourcentage de chaque
catégorie leucocytaire par la numération leucocytaire
La lignée granuleuse
Les polynucléaires neutrophiles (PNN)
65 à 70% des GB
1,8 - 7 Giga/l
PNN <1,5 Giga/l: une neutropénie
PNN < 0,2 Giga/l: une agranulocytose
PNN > 7 Giga/l: une polynucléose neutrophile
Répartition des PNN:
Les polynucléaires éosinophiles (PNE)
1-3 % GB
Taux normal < 0,4 Giga/l
PNE > 0,4 Giga/l: une éosinophilie
Les polynucléaires basophiles (PNB)
< 1% GB
PNB < 0,1 Giga/l
PNB > 0,1 Giga/l: une basophilie
La lignée monocytaire
2 - 8% GB
Le nombre de monocytes est de 0,2 à 0,8 Giga/l
Taux de monocyte > 0,8 Giga/l: une monocytose
Taux de monocytes < 0,2 Giga/l: une monocytopénie
La lignée lymphoïde
Le taux normal: 1,5 à 4 Giga/l
Un taux > 4,0 Giga/l: hyper lymphocytose
Un taux < 1,5 Giga/l: lymphopénie
variations physiologiques
- Age
Au cours du premier mois de vie jusqu’à l’âge de 5-6 ans: taux de Lc
est de 8 Giga/l
- Démargination des PNN
Une cause importante de variation physiologique du taux des PNN aux
environ de 1,2 Giga/l ; s’observe chez des sujets noirs africains et la
femme en période péri ménopausique
- Grossesse
Polynucléose neutrophile dont les valeurs maximums surviennent entre
la 30ème et 34ème semaine (9-15 Giga/l)
- Tabac
Polynucléose neutrophile de 20% proportionnelle au nombre de
cigarettes fumées / Jour
Hyperlymphocytose qui se majore avec l’ancienneté du tabagisme
- Effort physique:
Augmentation du taux de PNN et de Lc
Retour à des valeurs de base obtenu après un repos de 20mn
Frottis sanguin:
- 100 à 200 cellules
- Anomalies morphologiques:
- PN à noyau non segmentés ou hypersegmentés
- Anomalies de granulations des PN
- Lymphocytes à noyau hyperbasophile
- Cellules anormales: leucoblastes leucémique
Plaquettes
La numération plaquettaire: Examen essentiel
C'est le décompte des plaquettes dans le sang circulant
- Taux normal : 150 - 400 Giga/l
- Taux < 150 x Giga/l : thrombopénie ou thrombocytopénie
- Taux > 500 x Giga/l : thrombocytose, ou hyperplaquettose
En pratique:
Il faut savoir renouveler l'examen lors d'un résultat anormal
- fausses thrombopénies
- hyperplaquettose
Volume moyen plaquettaire(VMP):
Valeur normale: 8 - 12 fl
VMP
Indice de distribution du Volume Plaquettaire (IDP ou
PDW): Coefficient d’anisocytose plaquettaire
Normes : 10 à 15 %
L'étude morphologique sur frottis montre:
- Agrégats plaquettaires
- Elle peut détecter des anomalies plaquettaires, rares:
anisoplaquettose , macrothrombocytes.
En pratique, ce sont les anomalies quantitatives des plaquettes
qui sont de loin les plus fréquentes
Variations physiologiques
- Grossesse:
- diminution très modérée de la numération des Pq
- doit être considérée comme pathologique et faire proposer
au minimum une enquête clinique, un contrôle de
l’hémogramme, une analyse du frottis sanguin et une
évaluation du VMP, voir des exploration plus poussés
- Altitude:
thrombocytose (3000-4000m)
Le compte rendu d’un hémogramme doit comprendre
au minimum les valeurs :
- de l’hémoglobine
- de l’hématocrite
- de la numération des érythrocytes ; des principales constantes
érythrocytaires : VG M , CCMH et TCMH
- de la numération des leucocytes avec établissement
de la formule.( Les valeurs de la numération des différents types de
leucocytes doivent être fournies sous forme de valeurs absolues)
- de la numération des plaquettes
Les constantes érythrocytaires les plus utiles au praticien sont le VGM et
la CCMH. Ces constantes sont utilisées en clinique pour classifier
une anémie
Les réticulocytes ne font pas partie de l’hémogramme systématique.
( résultat en valeur absolue). Cette valeur ne peut être appréciée
qu’en tenant compte du taux d’hémoglobine