Test DRI® Gravity-Detect - Thermo Fisher Scientific

Test DRI® Gravity-Detect®
Pour usage diagnostique in vitro
1194 (2 Coffrets de 500 mL)
1754 Calibrateur de gravité spécifique de concentration faible
1755 Calibrateur de gravité spécifique de concentration élevée
1757 Contrôle de gravité spécifique Niveau 2
Application
Le test DRI® Gravity-Detect® est destiné à la détermination quantitative de la gravité spécifique
d’urines humaines.
Résumé et description du test
Un programme complet de tests urinaires recherchant des toxicomanogènes implique normalement
le recueil des échantillons, le dépistage immunologique initial, suivis dans le cas d’échantillons
positifs, d’un test de confirmation par chromatographie en phase gazeuse et de spectrométrie
de masse (CG-SM).1 De nombreux usagers de drogues tentent d’échapper à la détection en
adultérant leur échantillon afin de produire un faux négatif lors du dépistage immunologique
initial. Parmi les méthodes d’adultération, on citera une dilution avec de l’eau, une substitution
par un liquide ne contenant pas de drogue, l’ajout de produits domestiques d’accès facile
(tels que vinaigre, bicarbonate de soude, produit pour déboucher les tuyaux, détergent et autres)
ou l’ajout de certains produits chimiques (tels que Urine-Aid, qui contient du glutaraldéhyde ou
Klear, qui contient du nitrite de potassium).
Plusieurs méthodes ont été utilisées pour détecter une adultération des urines. Ces méthodes
comprennent une mesure de la température, du pH, de la gravité spécifique et de la concentration
de créatinine dans l’échantillon. L’urine fraîche normale doit avoir les caractéristiques
suivantes : une température entre 32,5 et 37,7°C ou entre 90,5 et 99,8°F,1 un pH se situant entre
4,7 et 7,8,2,3 une gravité spécifique se situant dans une plage de 1,003 à 1,035 g/mL2,4,5 et une
concentration de créatinine entre 80 et 200 mg/dL.5-9 Si l’un de ces paramètres urinaires se situe
hors de la plage spécifiée, l’évidence suggère que l’échantillon urinaire a été adultéré.
La mesure de la gravité spécifique de l’urine, ainsi que d’autres méthodes, telles que la mesure de
la concentration de créatinine, le pH et l’aspect, sont des techniques auxiliaires utiles aux tests
de toxicomanogènes pour déterminer une adultération possible. Une mesure densitométrique,
une bandelette réactive ou d’autres méthodes manuelles permettent de déterminer la gravité
spécifique de l’urine. On peut également utiliser une technique de mesure colorimétrique à point
de virage basée sur la mesure de la force ionique.
Le test DRI Gravity-Detect peut être réalisé sur un analyseur de chimie clinique automatique. Cette
méthode repose sur la relation linéaire entre la concentration ionique de chlorure dans l’urine et la
gravité spécifique.9 La concentration ionique de chlorure est déterminée par colorimétrie en utilisant du
perchlorate de fer selon l’équation suivante :
Cl- + Fe3+
Préparation et conservation des réactifs
Les réactifs sont prêts à l’emploi. Ils ne nécessitent aucune préparation. Tous les composants
du dosage, s’ils sont correctement conservés, restent stables jusqu’à la date de péremption
indiquée sur l’étiquette. Les réactifs, les calibrateurs et les contrôles Gravity-Detect doivent être
conservés à température ambiante.
1756 Contrôle de gravité spécifique Niveau 1
FeCl2+
L’ion chlorure et le perchlorate de fer dans un milieu acide forment un complexe de FeCl2 avec
une absorbance maximum à 340 nm. L’absorbance à 340 nm est directement proportionnelle à la
concentration de chlorure dans l’urine. On peut tracer une courbe de calibration linéaire à deux
points et en extrapoler la valeur de la gravité spécifique de l’échantillon urinaire en utilisant le
résultat d’absorbance correspondant.
Réactifs
Réactif Gravity-Detect : contient du perchlorate de fer dans une solution aqueuse acide.
Matériel supplémentaire requis (vendu individuellement) :
Calibrateur de gravité spécifique de concentration faible : contient une solution aqueuse de
chlorure de sodium d’une gravité spécifique de 1,010 g/mL.
Calibrateur de gravité spécifique de concentration élevée : contient une solution aqueuse de
chlorure de sodium d’une gravité spécifique de 1,025 g/mL.
Contrôle de gravité spécifique Niveau 1 : contient une solution aqueuse de chlorure de sodium
d’une gravité spécifique de 1,015 g/mL.
Contrôle de gravité spécifique Niveau 2 : contient une solution aqueuse de chlorure de sodium
d’une gravité spécifique de 1,030 g/mL.
Mises en garde et avertissement
Ce test est réservé à un usage diagnostique in vitro. Les réactifs sont nocifs par ingestion. Éviter
tout contact avec les yeux et la peau.
Le réactif contient du perchlorate de fer dans une solution aqueuse acide. Porter des vêtements,
des gants, un masque et des lunettes de protection.
Conserver la solution à l’abri de la lumière vive.
Ne pas utiliser les réactifs au-delà de leur date de péremption.
Prélèvement et manipulation des échantillons
Collecter les échantillons urinaires dans des récipients en plastique ou en verre. Le test nécessite
des échantillons d’urine fraîche. Les Mandatory Guidelines for Federal Workplace Drug Testing
Programs: Final Guidelines: Notice recommande que tout échantillon qui n’est pas initialement
testé dans les 7 jours suivant son arrivée au laboratoire soit conservé dans un réfrigérateur
en milieu fermé. Manipuler tous les échantillons urinaires comme s’ils étaient potentiellement
infectieux.10
Procédure du dosage
Pour réaliser ce dosage, utiliser un analyseur qui soit capable de maintenir une température
constante, de prélever des échantillons à la pipette, de mélanger les réactifs, de mesurer
l’absorbance à 340 nm et de minuter la réaction avec précision.
Avant de procéder au dosage, consulter la fiche technique spécifique de l’analyseur indiquant
les paramètres et/ou des directives complémentaires.
Contrôle qualité et calibration
Les bonnes pratiques de laboratoire recommandent l’utilisation de contrôles pour valider la
calibration et assurer des bons résultats. Les contrôles de gravité spécifique de 1,015 g/mL et
1,030 g/mL sont disponibles auprès de Microgenics dans ce but. Vérifier que les résultats des
contrôles se situent dans la plage de valeurs établie par le laboratoire. Recalibrer le système
lorsque de nouveaux réactifs sont utilisés ou que les valeurs des contrôles se situent hors des
plages établies. Utiliser les calibrateurs de gravité spécifique de concentration faible et élevée
pour générer la courbe de calibration. Une courbe de calibration type obtenue avec un analyseur
Hitachi 717 possède les caractéristiques suivantes :
Calibrateur
Absorbance (mA/min)
1,010
892
1,025
1 208
Toutes les exigences de contrôle qualité doivent être appliquées conformément aux règlements
locaux, régionaux et nationaux ou aux conditions d’agrément.
Résultats et interprétation des données
Les valeurs de gravité spécifique des calibrateurs et des contrôles utilisés dans le test GravityDetect sont établies et vérifiées par une méthode gravimétrique conventionnelle. Extrapoler la
gravité spécifique de l’échantillon à partir de la courbe de calibration en utilisant la valeur d’
absorbance de l’échantillon. La plupart des analyseurs de chimie clinique comprennent un logiciel
d’ajustement de courbe capable de calculer automatiquement les valeurs de gravité spécifique
des échantillons sans avoir à manipuler les données plus avant.
Valeurs attendues
Il a été déterminé que la plage de gravité spécifique des urines de sujets apparemment sains était
de 1,003 g/mL à 1,035 g/mL.2,3 Il est toutefois recommandé que chaque laboratoire établisse sa
propre plage de gravité spécifique urinaire normale. Des échantillons urinaires présentant une
gravité spécifique basse peuvent indiquer une dilution de l’échantillon. Des échantillons urinaires
présentant une gravité spécifique élevée peuvent suggérer l’ajout de sels ou d’autres adultérants.
Limitations
Ce dosage est optimisé pour la détermination quantitative de gravité spécifique uniquement dans
des urines humaines. La plage d’efficacité est de 1,000 g/mL à 1,040 g/mL. Il est recommandé de
mentionner les valeurs de gravité spécifique inférieures à 1,000 g/mL comme étant « < 1,000 » et
celles supérieures à 1,040 g/mL comme étant « > 1,040 ».
Performance caractéristique
Bibliographie
Les résultats de performance caractéristiques suivants ont été obtenus sur un analyseur de
chimie clinique Hitachi 717 :
1. Mandatory Guidelines for Federal Workplace Drug Testing Programs. National Insitute
on Drug Abuse. Federal Register Vol. 53, No. 69,11979 (1988).
2. Schumann GB, and Schweitzer SC, 1989, Examination of Urine. In Clinical Chemistry:
Theory, Analysis and Correlation, 2nd Edition, Kaplan LA, and Pesce AJ (Eds.) pp 820-849.
3. Cody GT. Specimen Adulteration in Drug Urinalysis. Foren sic Science Review. 2, 63 (1990).
4. Tiez, NW, ed. Clinical Guide to Laboratory Tests. Philadelphia: WB Saunders, 514 (1990).
5. Edwards C, Fyfe MJ, Liu RH and Walia AS. Evaluation of Common Urine Specimen
Adulteration Indicators. J Anal Toxicol 17, 251 (1993).
6. Murray RL, 1989. Creatinine. In Clinical Chemistry: Theory, Analysis and Correlation, 2nd
Edition, Kaplan LA and Pesce AJ (Eds.) pp 1015-1020.
7. Newkirk RE and Rawnsley HM, Creatinine Clearance, ASCP Check Sample Clinical
Chemistry, No. CC-110, Chicago, 1978, American Society of Clinical Pathologists.
8. Faulkner WR and King JW, Renal Function. In Tietz NW, Ed. Fundamentals of Clinical
Chemistry, 2nd Edition, Philadelphia, 1976, WB Saunders Co, pp 975-1014.
9. Law WT and G Ertingshausen, Novel Reagent and Method for Direct Determination of
Chloride in Serum with a Centrifugal Analyzer. Clin. Chem 26, 1874-1877 (1980).
10.Centers for Disease Control/National Institutes of Health Manual Biosafety in
Microbiological and Biomedical Laboratories. 1988.
11.Young DS. Efects of Drugs on Clinical Laborator Tests. 3rd ed., Washington, DC: AACC
Press; 1990.
12. Friedman RB and DS Young. Effects of Disease on Clinical Laboratory Tests. 2nd ed.,
Washington, DC: AACC Press; 1989.
Précision
Les précisions intra-série et inter-série ont été évaluées en utilisant des échantillons urinaires
cliniques à divers niveaux de gravité spécifique. Les résultats suivants ont été obtenus :
Précision intra-série (n=20)
Précision inter-série (n=10)
Mean (g/mL)
%CV
Mean (g/mL)
%CV
1,015
0,04
1,010
0,00
1,032
0,06
1,030
0,04
1,016
0,02
1,020
0,03
1,009
0,03
1,010
0,04
1,020
0,12
1,020
0,00
Interférence par le pH urinaire
Une interférence potentielle du dosage découlant de la variation du pH a été étudiée. La gravité
spécifique n’a pas varié de plus de + 0,003 g/mL sur une plage de pH de 3 à 11.
Interférence par des substances endogènes
Une interférence par des substances endogènes présentes dans l’urine a été étudiée. Aucune
interférence n’a été observée lorsque des échantillons urinaires ont été ensemencés avec des
substances endogènes jusqu’à la concentration indiquée au tableau ci-dessous.
Interférant
Concentration
Albumine
500 mg/dL
Urée
Créatinine
500 mg/dL
Glucose
Galactose
10 mg/dL
Hémoglobine
300 mg/dL
Interférant
Concentration
6 mg/dL
3 mg/dL
Riboflavine
7,5 mg/dL
Acide ascorbique
20 mg/dL
Pour obtenir des informations sur des substances ou des conditions susceptibles d’avoir un
effet sur les valeurs de gravité spécifique in vivo, consulter les publications11,12 dans la section
Bibliographie.
Linéarité
Des solutions contenant des niveaux de gravité spécifique à 1,006, 1,010, 1,015, 1,020, 1,025 et
1,030 g/mL ont été préparées et soumises à ce test. On a obtenu un coefficient de corrélation de
0,999 lorsque la valeur d’absorbance de chaque solution a été tracée par rapport à sa valeur de
gravité spécifique correspondante.
Exactitude et corrélation
La gravité spécifique attendue d’une série d’échantillons urinaires a été déterminée en utilisant
la méthode de poids par volume classique. Ces valeurs ont été comparées à la gravité spécifique
déterminée par le test Gravity-Detect. On a observé une plage de détection de 99,6 % à 100,3 %.
La gravité spécifique de 65 échantillons urinaires cliniques a été déterminée par le test GravityDetect ainsi que par une méthode en vente libre. L’analyse de régression linéaire suivante a été
obtenue : (y) = 0,98(x) + 0,02, avec un coefficient de corrélation (r) de 0,983. La gravité spécifique
moyenne des échantillons pour le test Gravity-Detect était de 1,028 g/mL avec une plage de 1,004
à 1,062 g/mL. La gravité spécifique moyenne des échantillons pour la méthode en vente libre était
de 1,026 g/mL avec une plage de 1,004 à 1,048 g/mL.
Microgenics Corporation
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Soutien technique et à la clientèle,
États-Unis :
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Pour des mises à jour de la notice, consulter:
www.thermoscientific.com
Autres pays:
Contacter le représentant local Thermo Fisher Scientific.
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2
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