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ATLANTIC GENE THERAPIES, consortium de laboratoires d’excellence spécialisés dans les thérapies
innovantes et bras armé de l’Association Française contre les Myopathies (AFM), mène une
politique de recherche translationnelle dans le domaine des maladies rares.
L’équipe Pharmacologie Moléculaire des Vecteurs AAV recombinants propose un stage de
recherche pour une durée de 4 à 6 mois durant l’année scolaire 2014/2015.
Laboratoire : INSERM UMR 1089 – Thérapie génique pour les maladies de la rétine et les maladies
neuromusculaires – Université de Nantes
Adresse : Institut de Recherche en Santé – 8 quai Moncousu – BP 70721 – 44007 Nantes CEDEX 1
Maître de stage : Philippe MOULLIER (DR INSERM)
Encadrant : Jean-Baptiste DUPONT (Doctorant)
Sujet : Evaluation de l’effet de composés pharmacologiques sur l’efficacité du transfert de gène par un
vecteur AAV recombinant dans le muscle dystrophique
Notre équipe s’intéresse à la compréhension des mécanismes moléculaires à la base de la persistance et de
l’efficacité des vecteurs de thérapie génique dérivés du Virus Adéno-Associé (AAV), dans le contexte de la Dystrophie
Musculaire de Duchenne (DMD). Nous avons injecté des souris modèles de la DMD, ainsi que des souris saines, avec un
vecteur AAV recombinant exprimant un transgène codant pour une protéine fluorescente. Après analyses moléculaires, il
apparaît que l’efficacité du vecteur, traduite par l’expression du transgène, est diminuée de manière importante chez les
souris dystrophiques par rapport aux souris saines. Nous avons corrélé cette observation avec une perte progressive des
génomes AAV en lien avec la dégénérescence des fibres musculaires chez les souris malades, ainsi qu’avec une oxydation
élevée de l’ARN messager du transgène amené par le vecteur. Les caractéristiques pathologiques du muscle au moment
de l’injection du vecteur AAV semblent donc être susceptibles de diminuer l’efficacité de ce vecteur.
Ce sujet de stage s’inscrit dans une stratégie globale visant à améliorer le phénotype du muscle dans lequel sera
injecté le vecteur AAV : des souris dystrophiques vont être traitées pendant 3 mois par un composé pharmacologique
connu pour ses effets bénéfiques sur le muscle dystrophique (ou un placebo). Un mois après le début du traitement, les
souris recevront une injection unique d’un vecteur AAV exprimant un transgène rapporteur. L’effet du composé
pharmacologique sur la persistance du vecteur ainsi que sur son efficacité sera alors évaluée.
Missions :
Evaluation de l’efficacité du composé pharmacologique sur l’amélioration du phénotype musculaire dystrophique
(Histologie, Immunofluorescence)
Evaluation de la persistance du génome AAV recombinant
(Extraction d’ADN, PCR quantitative)
Evaluation de l’expression et de l’activité du transgène rapporteur
(Extraction d’ARN et RT-PCR quantitative, mesures de luminescence)
Application de la démarche scientifique : planification d’expériences, application rigoureuse et précise du
protocole, analyse des données obtenues et des problèmes éventuels et interprétation des résultats
Profil : le ou la candidate(e) devra être engagé dans un diplôme de MASTER (ou équivalent Ecole d’Ingénieur, Pharmacie
et Médecine) et avoir de bonnes connaissances, théoriques et pratiques, en biologie moléculaire. Rigoureux(se) et
organisé(e), il ou elle devra montrer de bonnes capacités d’adaptation et d’autonomie. En tant que membre de l’équipe, il
ou elle prendra activement part aux réunions réflexives autour du projet et aux prises de décision le concernant.
Contact : [email protected]