SVT – Lycée Camille Claudel La centrifugation.

SVT – Lycée Camille Claudel
La centrifugation.
Intérêt:
Cette technique permet de séparer les différents constituants cellulaires.
Principe :
En broyant les cellules, on obtient un homogénat, suspension comprenant les
différents organites de la cellule. Ces organites se distinguent par leur taille, leur
forme, leur densité.
Spontanément, sous l'effet de la gravité, ils sédimentent, à des vitesses différentes
parce que leurs tailles, forme et densité sont différentes. Mais cette sédimentation
se fait très lentement. On l'accélère en centrifugeant, ce qui va revenir à augmenter
la gravité. En fait c'est la force centrifuge liée à la rotation qui l'emporte sur la
gravité. Dans la centrifugeuse des vitesses de plusieurs dizaines à plusieurs centaines
de milliers de tours par seconde sont atteintes, produisant des accélérations de
plusieurs milliers de G sur la molécule à purifier. La sédimentation se produit alors en
quelques heures au lieu de plusieurs années.
Les vitesses de sédimentation étant différentes, les temps de sédimentation le sont aussi et les différents organites se déposeront au fond
du tube en couches successives.
La fraction liquide au dessus est nommée surnageant. Le dépôt au fond est appelé culot.
Un problème se pose dans l'utilisation d'une centrifugeuse : le déséquilibre du rotor. Un déséquilibre de part et d'autre du rotor se traduit
par une contrainte qui peut aboutir à la rupture de l'axe. Il faut donc que chaque tube ait en face de lui un tube de masse exactement égale.