Validation - Le CHU de Nîmes

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Validation Nom Fonction Date S. Finge Biologiste RAQ 14/11/2012 Vérification : E. Mercier Responsable Qualité 16/11/2012 Validation : T. Lavabre‐
Bertrand Chef de Pôle 19/11/2012 Emission : Visa Seule la version papier est émargée "Toute reproduction et/ou diffusion est soumise à autorisation. Toute copie non authentifiée est exclue du système documentaire" Manuel du préleveur
1. INTRODUCTION
1.1. BUT
La qualité du prélèvement de l'échantillon primaire conditionne la qualité du résultat de l'analyse biologique effectuée.
Les échantillons biologiques qui sont prélevés, identifiés, transportés ou prétraités de façon inadéquate sont susceptibles de
conduire à des résultats erronés, à un diagnostic imprécis, à un traitement inapproprié ou à des risques de contamination.
Le manuel du préleveur est un document, élaboré par les laboratoires du pôle Biologies, il regroupe :
●
Les informations nécessaires pour aider le préleveur à effectuer un prélèvement de qualité en vue d'obtenir un
échantillon biologique conforme.
● Les consignes à respecter pour l'identification, la conservation et l'acheminement des échantillons biologiques vers le
laboratoire.
Ce manuel permet de respecter les exigences auxquelles sont soumis officiellement :
●
Les laboratoires du fait du référentiel GBEA (Guide de Bonne Exécution des Analyses en biologie médicale) et selon la
norme d'accréditation ISO 15189.
● Les établissements de santé du fait des référentiels de certification de l'HAS (Haute Autorité en Santé).
1.2. DIFFUSION
Ce manuel est accessible, sous format électronique dans les laboratoires et via Clinicom pour les utilisateurs au niveau des
services de soins intra-hospitaliers.
Le portail du CHU donne accès à une version WEB et à une version PDF (imprimable) pour les utilisateurs externes.
1.3. MISE A JOUR
Toute correction, modification ou nouveauté entraînera une mise à jour du manuel en temps réel.
Le manuel fait partie de la structure documentaire du pôle Biologies, il sera révisé et mis à jour si nécessaire selon la
« procédure annuelle de relecture des documents qualité » avec un changement de version. Des modifications mineures
peuvent être enregistrées sans changement de version.
1.4. LEXIQUE
Echantillon biologique primaire : Partie du matériel humain, destinée à l'examen, la préparation, l'analyse et/ou le
stockage. Souvent cette notion est également désignée par les termes « spécimen », « prélèvement » ou « pièces »
Echantillon biologique secondaire : partie issue du pré-traitement de l'échantillon primaire est destinée à l'analyse et/ou
stockage
DASRI : Déchets d'Activité de Soins à Risques Infectieux
© 2013 - CHU de Nîmes - Tous droits réservés | Référent : Dr Sanae FINGE - Tél : 0466683574 | Webmaster : Olivier FRIGOUT - Tél :0466683985 | page 1/40
2. PRESENTATION DES SECTEURS DU POLE BIOLOGIES
Numéros utiles
Secteurs
04 66 68 suivi de
Centre de
prélèvements
Horaires
Fonctionnement
Lundi au
vendredi
8h-16h
8h-16h
Astreinte
spécifique
Samedi
Dimanche jours
fériés
18h-8h
12h-8h
8h-8h
Oui
8h-18h
8h-12h
18h-8h
12h-8h
8h-8h
Oui
8h-18h
8h-12h
18h-8h
12h-8h
8h-18h
8h-12h
Consultations de Biologie
Tél : 3161
Prélèvements
Pr. J.C. Gris
Laboratoire
Garde Biochimie
Tél : 3653
Bip : 3207
de Biochimie
Biochimie générale,
Hormonologie et
Marqueurs tumoraux,
Toxicologie
Réception des prélèvements:
7426 / 4537
Garde Hématologie
Tél : 4076
Consultations
Secrétariat (RV consultations):
3211 / 3212
24h/24h
Secrétariat : 3207
Pr. S. Lumbroso
Laboratoire
d'Hématologie
Bip : 3211
Hémostase
Pr. J.C. Gris
Hémato -cellulaire
24h/24h
7425
Secrétariat résultats: 3211 ou
3212
Tél : 4076
Bip : 3211
Garde Immunologie
Immunologie / Allergie
Laboratoire
de Cytologie
Clinique,
Cytogénétique,
Immunologie,
Allergie et AMP
Pr. T.
Lavabre-Bertrand
7425
8h-8h
24h/24h
Secrétariat Résultats: 3211 ou
3212
3109
Cytologie clinique
8h-17h
4160
4160
Cytogénétique
8h-17h
4160
3224
AMP
8h-16h30
4160
Laboratoire
Garde Microbiologie
Tél : 3102
Bactériologie
Secrétariat : 3202
de Microbiologie
Dr S. Charachon
Bip : 4396
3102
24h/24h
18h-8h
12h-8h
8h-18h
8h-12h
8h-8h
Oui
8h- 17h
Virologie / Parasitologie
3996
Laboratoire
Anatomie et
Cytologie
pathologiques
Secrétariat: 3451 et 3197
8274
8h-17h
Pr P. Roger
3. LES MISSIONS DU LABORATOIRE
Informer les correspondants internes et externes des conditions pré-analytiques nécessaires à la réalisation des
prélèvements et des examens biologiques.
-
Prendre en charge la réalisation des prélèvements pour les patients externes.
-
Exécuter la prescription médicale, en son absence un formulaire spécifique doit être signé par le patient.
-
Réaliser les examens avec fiabilité et exactitude.
-
Valider les résultats.
-
Les Biologistes :
●
peuvent donner, à la demande du patient, des commentaires concernant les résultats, le médecin prescripteur reste le
seul interlocuteur pour les interpréter en fonction de la clinique et de la thérapeutique éventuelle.
● informent le médecin prescripteur des résultats pathologiques ou ayant un caractère d'urgence.
-
Transmettre les résultats aux patients et aux prescripteurs :
●
Les résultats des patients hospitalisés sont disponibles dans les meilleurs délais sur le serveur des résultats, excepté
les sérologies HIV, les analyses de génétique et d'anatomo-cyto-pathologie.
● Les résultats sont systématiquement transmis au prescripteur externe (sauf demande contraire) par envoi postal mais
aussi par Fax sur demande explicite du prescripteur ou du patient et sous condition de vérification de l'identité du
receveur.
● Les résultats sont remis au patient externe personnellement ou, à sa demande, à un tiers sous pli cacheté ou transmis
par la poste.
● La communication téléphonique des résultats nécessite une vérification d'identité ou l'échange d'un code confidentiel
et est interdite pour certaines analyses.
● Les résultats des examens concernant les patients mineurs, ceux demandés par la Médecine du Travail ou des
compagnies d'assurances sont soumis à une réglementation précise, respectée par le Laboratoire.
Tout ceci par du personnel recruté selon les exigences réglementaires, habilité sur site après formation initiale complétée
par une formation continue, le personnel est soumis au secret professionnel.
4. LA PRESCRIPTION
4.1. LES PRESCRIPTEURS
La prescription des analyses, par la personne habilitée à le faire est le point départ de la phase pré-analytique. Les
personnes autorisées à prescrire des examens de biologie médicale sont les médecins, les sages-femmes et les
biologistes.
4.2. LES SUPPORTS DE PRESCRIPTION
4.2.1. LES CRITERES DE VALIDITE DUNE ORDONNANCE
L'ordonnance doit être rédigée par le prescripteur et doit mentionner :
●
●
●
●
Le nom, les coordonnées, le numéro RPPS, et la signature du prescripteur.
L'identification univoque du patient (nom, prénom, date de naissance).
Les examens à réaliser.
En fonction des circonstances cliniques, les renseignements cliniques requis.
4.2.2. LES IMPRIMES HOSPITALIERS DE DEMANDE DANALYSE
Les feuilles de demande utilisées dans les unités de soins sont spécifiques à chaque laboratoire exécutant, elles sont
identifiées par le nom du laboratoire, une couleur et un code d'enregistrement. Ce sont des supports qui font partie de la
structure documentaire et sont soumis à une mise à jour annuelle avec un changement de version.
Afin de s'assurer du choix du bon support, il est possible de consulter le guide des analyses à la page de l'analyse
souhaitée.
Toute demande d'analyse, pour patient hospitalisé, doit être retranscrite sur la feuille de demande du laboratoire
destinataire.
Les analyses urgentes sont demandées sur la feuille de prescription marquée « URGENT ».
Le préleveur doit :
- Coller dans le cadre(1) l'étiquette du patient en ayant pris soin de vérifier que les informations de l'étiquette correspondent
au patient à prélever (nom, prénom, nom de jeune fille, date de naissance, sexe) et au service prescripteur (code UF, nom
du service).
- Remplir lisiblement :
●
●
●
●
la date et l'heure du prélèvement dans les items prévus en (2)
le numéro de téléphone du service demandeur en (3)
le nom du préleveur en (4)
le nom du prescripteur en (5)
- Cocher les analyses souhaitées.
- Si l'examen à réaliser n'est pas répertorié sur la feuille de demande, écrire le libellé au niveau de l'encart « Autres ».
- En fonction de l'analyse demandée, noter les renseignements cliniques et thérapeutiques.
- Noter les éventuels problèmes ou incidents rencontrés lors du prélèvement.
Pour les consultations externes hospitalières :
- La prescription peut être retranscrite sur une feuille de demande hospitalière comme décrit ci-dessus, dans ce cas,
reporter le code de l'UF de consultation en (6).
- S'il n'y a pas retranscription, reporter l'identité du préleveur ainsi que la date et l'heure du prélèvement sur l'ordonnance.
4.2.3. DEMANDE D'ANALYSE(S) COMPLEMENTAIRE(S)
Le prescripteur peut demander oralement un rajout d'analyse(s) sur un échantillon utilisé pour un examen antérieur. Le
laboratoire acceptera ou non la demande en fonction des conditions pré-analytiques et la quantité d'échantillon requises
pour l'examen demandé. Les prescripteurs externes sont tenus d'envoyer, dans un deuxième temps, le complément de
prescription par courrier ou par fax.
4.3. LES RENSEIGNEMENTS CLINIQUES
Dans certains cas, des renseignements sont indispensables pour le calcul du résultat:
●
●
La diurèse si examen sur urines de 24H ou temps calculé
La taille et le poids pour la clairance à la créatinine corrigée par rapport à la surface corporelle
Selon le cas, des informations peuvent aider à la validation biologique des résultats:
●
●
●
Le nom et la posologie de l'anticoagulant pour les analyses d'hémostase.
Le nom du médicament, la posologie, la date et l'heure de la dernière prise pour le dosage sérique d'un médicament.
Date des dernières règles et traitement hormonal pour les dosages hormonaux.
4.4. LES DOCUMENTS ASSOCIES
Pour certains examens, des imprimés (fiche de renseignements, consentement du patient, etc.) à renseigner et à joindre à
la demande sont indispensables à la réalisation de l'analyse.
Ces imprimés sont imprimables à partir de la page de l'examen au niveau du guide des analyses.
Si l'examen souhaité n'est pas répertorié au niveau du guide des analyses, il est indispensable d'appeler le laboratoire avant
d'effectuer le prélèvement.
L'absence de document associé peut conduire au rejet de la demande.
5. LES CONDITIONS PRE-ANALYTIQUES PARTICULIERES
5.1. ETAT DE JEUNE
5.1.1. ETRE A JEUN
« Etre à jeun » se définit par un délai de 12 heures entre le dernier repas et la prise de sang. En général, pour des
prélèvements effectués le matin.
Le laboratoire préconise d'être à jeun pour une prise de sang, car L'alimentation apporte elle-même certains éléments
dosés. Dans ce cas, il est recommandé de prendre un repas léger et pauvre en matières grasses la veille au soir.
5.1.2. A DISTANCE D'UN REPAS
Signifie un jeûne de 3 à 4 heures entre le dernier repas et la prise de sang, après le repas la qualité de l'échantillon sanguin
est modifiée (trouble, viscosité), ces modifications peuvent perturber le fonctionnement des appareils d'analyse ou gêner la
lecture (recherche de cryoglobuline) et conduire à des résultats erronés.
Pour les prélèvements urgents : pas de conditions particulières.
Les exigences de jeûne et d'horaire sont détaillées par analyse dans le guide des analyses au niveau du
paragraphe « Recommandations ».
5.2. LES HORAIRES DE PRELEVEMENT
Le respect de l'heure de prélèvement est primordial car :
●
Pour la majeur partie des examens, les valeurs de référence ont été établies à jeun et au lever. Il est donc nécessaire
de respecter ces conditions pour pouvoir comparer le résultat obtenu aux valeurs de référence et faire le suivi des
résultats si le test est répété dans le temps.
● Certains paramètres varient naturellement en cours de journée (rythme circadien).
● Pour le dosage des médicaments, il est indispensable de respecter un certain délai entre le début du traitement et le
moment du prélèvement (lorsque l'atteinte d'un état stable est nécessaire). Il convient également de s'assurer du délai
nécessaire entre le prélèvement et la dernière administration du médicament lorsque l'on cherche à déterminer des
concentrations à un temps précis (Concentration maximale = pic = quelques minutes après la dernière prise ou
Concentration résiduelle = vallée = quelques minutes avant la prise suivante).
● Respect de période de repos pour le dosage de la prolactine.
Les exigences de jeûne et d'horaire sont détaillées par analyse dans le guide des analyses au niveau du
paragraphe « Recommandations ».
5.3. REGIME ALIMENTAIRE PARTICULIER
Certaines analyses exigent un régime alimentaire particulier pendant une période déterminée précédant le prélèvement.
Le guide des analyses dans son paragraphe « recommandations » détaille le régime alimentaire à respecter quand
cela est nécessaire.
6. LE PRELEVEMENT
6.1. LES PRELEVEURS AUTORISES
Un prélèvement biologique est un acte de soins qui consiste à prélever un échantillon biologique en vue d'examen de
biologie ou de diagnostic cytologique et histologique.
Le but est de réaliser un prélèvement de qualité dans des conditions d'hygiène et de sécurité pour le patient et le personnel.
Parmi le personnel du laboratoire, les préleveurs autorisés sont :
INFIRMIERE
BIOLOGISTE
INTERNE
Ponction de moelle osseuse
*
*
Frottis cervico-vaginaux
*
*
Prélèvements urétraux
*
*
Recueil aseptique des urines
*
Sondage pour prélèvement urinaire
*
Sang artériel pour gazométrie
*
Sang veineux et capillaire
*
Tests dynamiques avec injection
*
Tests dynamiques sans injection
*
TECHNICIEN(1)
*
*
*
*
*
Téguments, phanères et muqueuses Facilement accessibles
Téguments, phanères et muqueuses Directement accessibles
*
*
*
*
*
*
*
*
Test à la sueur
(1) Les techniciens de laboratoire titulaires de certificat de prélèvement sanguin.
6.2. LES PRECAUTIONS DE BASE POUR EFFECTUER UN PRELEVEMENT
En se basant sur le principe selon lequel tout échantillon biologique est potentiellement infectieux, il est nécessaire de
respecter des précautions de base lors de la manipulation de tout produit biologique (sang, liquides, tissus, etc.) de tous les
patients, et de tous les matériels ayant été en contact avec un produit biologique, notamment :
●
●
Porter un équipement de protection adapté aux diverses situations (gants, blouse, masque, lunettes, etc.)
Se laver les mains avant et après chaque acte technique, les désinfecter ensuite en cas de souillure avec un produit
biologique.
● Ne pas recapuchonner les aiguilles.
● Manipuler avec soins les objets coupants et piquants et les déposer immédiatement après usage dans des conteneurs
adaptés.
6.3. IDENTIFICATION DU PATIENT ET RECUEIL DE RENSEIGNEMENTS
Avant d'effectuer le prélèvement :
- Vérifier l'identité du patient : faire décliner et si possible faire épeler au patient: son nom, son prénom, +/- son nom de
naissance, et sa date de naissance.
●
●
Préleveur externe : s'assurer de la concordance entre l'identité complète du patient et celle portée sur l'ordonnance.
Préleveurs hospitaliers : vérifier la concordance entre l'identité complète du patient, l'identité figurant sur le support de
prescription et celle des étiquettes auto-collantes hospitalières.
(Dans la mesure ou le patient est dans l'incapacité de décliner son identité se reporter préférentiellement à un bracelet
d'identification s'il existe)
- Recueillir les renseignements physiopathologiques, thérapeutiques et risque allergique (latex, etc.)
- S'assurer du respect des recommandations pré-analytiques requises pour la réalisation de l'analyse demandée
(préparation particulière, état de jeûne, régime, etc.)
6.4. LES PRELEVEMENTS SANGUINS
6.4.1. LE MATERIEL UTILISE
●
●
●
●
●
●
●
●
Aiguilles.
Tubes à prélèvements sous vide.
Garrot.
Coton.
Alcool à 70°.
Pansements.
Gel pour la désinfection des mains.
Boîte récupératrice d'aiguilles, poubelle pour déchets contaminés et poubelle pour déchets non contaminés.
6.4.2. LE SANG ARTERIEL
Le recueil de sang artériel pour les gaz du sang est généralement réalisé par ponction de l'artère radiale.
23G (6/10e)
Prélèvement artériel avec
aiguille
Seringue BD Preset™ avec aiguille sécurité BD Eclipse™ et bouchon sécurité
type BD Hemogard™
22G (7/10e)
Prélèvement sur ligne artérielle
Seringue BD Preset™ sans aiguille avec bouchon sécurité type BD
Hemogard™
6.4.3. LE SANG CAPILLAIRE
Le recueil du sang capillaire se fait à l'aide d'une lancette pour analyse immédiate par bandelette (glycémie) ou chez les
enfants difficiles à piquer.
6.4.4. LES PRELEVEMENTS VEINEUX
Le sang veineux est obtenu par ponction d'une veine à l'aide de matériel approprié pour analyse ou hémoculture.
Ne jamais piquer un bras:
●
●
●
●
●
Avec un dispositif de perfusion en cours
Avec un dispositif de fistule rénale (hémodialyse)
Du côté du sein opéré chez une femme mammectomisée
Du côté paralysé chez un hémiplégique
Si dermatose
Une vigilance particulière sera portée aux personnes sous traitement anticoagulant ou qui souffrent de troubles de
la coagulation.
LE MATERIEL DE PONCTION
Choisir le matériel de ponction en fonction de la qualité de la veine et du type de prélèvement à effectuer.
- Le système vacutainer® sous vide est un dispositif qui permet une bonne protection des soignants.
Corps de prélèvement
Aiguille (taille, couleur)
8/10e 32mm
7/10e 32mm
Aiguille Sécurité BD Eclipse™
- Le système à hémoculture
Aiguille (taille, couleur)
23G (6/10e)
tubulure courte 178mm
Unité à prélèvement de sang
sécurité BD Safety-Lok™
21G (8/10e)
tubulure courte 178 mm
- Les aiguilles épicrâniennes avec adaptateur vacutainer® ou aiguilles de ponction, sont utilisées en pédiatrie et pour les personnes dont le capital veineux est
pauvre.
Epicrânienne
Adaptateur BD Vacutainer™
- Les cathéters courts avec adaptateur Vacutainer™ pour perfusion intraveineuse permet également de prélever du sang veineux (protocole spécifique à respecter)
Adaptateur BD Vacutainer™
NATURE ET QUANTITE DE TUBES A PRELEVER
Choisir les tubes de prélèvement en fonction de la prescription.
Les tubes peuvent être sans additif, avec ou sans gel séparateur, pour les analyses sur sérum ; ou avec un anticoagulant
pour les analyses sur sang total ou plasma.
Le guide des analyses précise pour chaque examen le ou les matériel(s) adapté(s) à l'échantillon et à l'analyse souhaitée.
●
●
●
●
Tous les tubes de type vacutainer™ sont sous vide, il ne faut en aucun cas les ouvrir.
Le vide permet l'aspiration d'un volume de sang calculé pour respecter le ratio sang / anticoagulant.
Chaque tube est identifiable par une couleur de bouchon et une étiquette spécifiques.
Comme pour tout matériel stérile, la date de péremption des tubes doit être vérifiée et les tubes périmés
doivent être éliminés.
Les tableaux qui suivent donnent une indication sur le nombre de tubes nécessaires ainsi que les associations d'examens
possibles sur le même échantillon :
LABORATOIRE DE BIOCHIMIE
Biochimie générale: 1 tube jaune avec gel
Hormonologie: 1 tube jaune avec gel
4,5ml (SSTII) pour la majorité des examens
4,5ml (SSTII) pour la majorité des examens
Médicaments et toxiques: 1 tube rouge
4,5ml (Sec) pour la majorité des examens
LABORATOIRE D'HEMATOLOGIE
Hémostase:
Bilan standard (TP, TCA, Fibrine) : 1 tube
Bilan de thrombophilie : 5 tubes
4,5ml (citrate)
4,5ml (citrate)
Hématologie cellulaire:
1 tube violet
4,5ml (EDTA)
LABORATOIRE D'IMMUNOLOGIE
Allergie: 1 tube jaune avec gel
4,5ml (SSTII) pour 15 allergènes
Auto-Immunité: 1 tube jaune avec gel
Immuno-Chimie: 1 tube jaune avec gel
4,5ml (SSTII) pour 3 examens
4,5ml (SSTII) pour l'ensemble des examens
MICROBIOLOGIE
Sérologies infectieuses: 1 tube jaune avec gel
4,5ml (SSTII) pour 5 sérologies
CHOISIR LE SITE DE PONCTION ET POSER LE GARROT
Un prélèvement veineux peut se faire sur tout le réseau veineux superficiel du pli du coude, de l'avant bras et du dos de la
main.
Le garrot doit être posé à 7,5/10 cm au dessus du point de ponction, le pouls doit demeurer perceptible et le temps de pose
du garrot ne doit pas dépasser 1 minute.
●
●
Au-delà d'une minute de pose, la stase veineuse provoque une hémoconcentration.
Lors de la recherche du site de ponction, si le garrot est posé depuis plus d'1 minute, le desserrer pendant 2 à
3 minutes et le remettre en place.
● Avec les tubes sous vide, dès que le sang afflue dans le tube, le garrot doit être desserré.
● Eliminer le garrot s'il est contaminé lors du prélèvement.
EFFECTUER LA PONCTION - ORDRE DE PRELEVEMENT DES TUBES
●
●
●
●
Mettre des gants non stériles.
Désinfecter le site de la ponction et laisser sécher avant de réaliser le prélèvement.
Ne jamais palper le site après désinfection.
Lors du prélèvement positionner le tube, étiquette vers le bas pour pouvoir visualiser l'arrivée du sang dans le tube.
●
●
Si le tube a été introduit dans le corps de prélèvement et percuté avec l'étiquette au-dessus, gênant
la visibilité du remplissage du tube, le retirer du corps, le tourner (étiquette en dessous) et le
réintroduire.Cette manipulation n'entraîne pas de perte de vide.
Ne jamais faire tourner le tube dans le corps de prélèvement lorsqu'il est déjà percuté.
Effectuer le prélèvement des tubes selon l'ordre recommandé dans le tableau qui suit et veiller au bon remplissage
des tubes
Système à ailettes
Piqûre avec aiguille
(ponction franche)
1.
Avec hémoculture
Citrate et CTAD
(remplissage > 90%)*
Sans hémoculture
1.
1.
2.
2.
Sec
2.
(sans gel et sans additif)
Sec
Citrate et CTAD
(remplissage > 90%)
Citrate et CTAD
(remplissage > 90%)
3.
3.
(tube neutre ou sec)
3.
Sec
Sec
(avec gel et sans additif) SSTII
4.
Hépariné
4.
EDTA
5.
6
6.
5.
Hépariné
6.
EDTA
Hépariné
Fluoré
7. Autres (ACD, VS, Aprotinine et
Sec
Sec
5.
4.
EDTA
7.
Fluoré
Thrombine toujours en dernier)
7.
Fluoré
Thrombine toujours en dernier
Thrombine toujours en dernier)
Homogénéiser tous les tubes par plusieurs retournements lents, immédiatement après leur retrait du corps de
prélèvement
* Recommandations pré-analytiques GEHT : En cas de bilan comportant un examen unique d'hémostase, le premier tube
peut être conservé, si la ponction veineuse est franche et si le bilan ne comporte que des tests courants de coagulation.
Cette recommandation s'applique particulièrement pour la surveillance des traitements par antivitamines K.
6.5. LES TESTS DYNAMIQUES
Contacter le laboratoire de Biochimie
6.6. LES CRYOGLOBULINES
●
●
Le Patient doit être au chaud et à jeun.
Le matériel de prélèvement spécial (boîte isotherme contenant 3 tubes secs, une aiguille et un corps de pompe dans
un sac plastique contenant 3 packs de gel eutectique, le tout maintenu à 37°C) est fourni par le laboratoire à la
demande de l'unité de soin.
● Avant 11 H, du lundi au vendredi et en dehors des jours fériés.
● Le temps écoulé entre le départ de la boîte du laboratoire et son retour avec le prélèvement du service ne doit pas
dépasser 30 minutes.
Toute demande de cryoglobuline ne respectant pas ces modalités sera refusée par le laboratoire, car toute baisse de
température peut être responsable de la perte en proportion variable de la cryoglobuline pouvant même aboutir à un résultat
faussement négatif.
6.7. LES RECUEILS D'URINES
6.7.1. RECUEIL D'URINES PAR LE PATIENT
MICTION
1. Se laver les mains au savon.
2. Faire une toilette intime minutieuse (méat urinaire) avec un antiseptique
3. Ouvrez le pot de recueil stérile:
●
Pot à couvercle bleu avec adaptateur pour tubes vacutainers:
●
●
●
●
ne pas soulever l'étiquette
ne pas toucher la canule intégrée
ne pas toucher l'intérieur du couvercle
Pot à bouchon rouge (ne pas toucher l'intérieur du couvercle)
4. Uriner le premier jet dans les toilettes.
5. recueillir le 2ème jet d'urine dans le flacon stérile, le refermer immédiatement (volume minimum 10 ml).
6. Apporterle flacon au laboratoire le plus rapidement possible (moins de 2h ), 1 conservation possible 24h entre 2-8°C.
RECUEIL DES URINES DE 24 HEURES
1. Le matin au lever, uriner aux toilettes (jeter les urines).
2. Noter l'heure.
3. Jusqu'au lendemain matin, même heure, recueillir toutes les urines des 24 heures dans le flacon remis par le laboratoire
4. Pendant la durée du recueil, conserver le flacon entre 2-8°C.
5. A la fin du recueil, apporter le flacon au laboratoire.
RECUEIL DES URINES DE LA NUIT
1. Recueillir les urines de 22H à 6H du matin dans le flacon donné par le laboratoire
2. A la fin du recueil, apporter le flacon au laboratoire.
6.7.2. RECUEIL D'URINES PAR LE PERSONNEL SOIGNANT
A PARTIR DU FLACON STERILE
1. Homogénéiser les urines
2. Retirer l'étiquette de protection (ne pas la jeter).
3.
Insérer le tube (sans additif
puis avec additif
) dans l'orifice et le percuter.
4. Le maintenir en position jusqu'à ce que le remplissage s'arrête.
5. Homogénéiser par 8 à 10 retournements.
6. Durée de conservation : 48 heures à température ambiante (sauf pour les gonocoques : 24 heures)
A PARTIR DU CONTAINER DE 24H
1. Mesurer le volume total d'urines recueillies sur 24h (noter diurèse).
2.
3.
Plonger la canule dans le flacon contenant les urines de 24h.
Insérer le tube à urines sans additif
(tube de chimie) et le percuter
4. Attendre le remplissage complet du tube et le retirer.
5. Identifier le tube et indiquer le volume total des urines recueillies sur 24h sur la feuille de demande d'analyses.
6. Transmettre le tube au laboratoire, à température ambiante, dans les meilleurs délais (voir le guide des analyses).
A PARTIR D'UNE POCHE AUTO-COLLANTE
1.
Maintenir la poche contenant les urines verticalement et y plonger la canule de transfert.
2. Avec une main, maintenir la canule en place.
3.
De l'autre main, introduire à fond le tube dans le corps de la canule.
4. Attendre le remplissage complet du tube.
5. Homogénéiser l'échantillon par 8 à 10 retournements du tube.
6. Identifier le tube et le transmettre au laboratoire dans les meilleurs délais (voir le guide des analyses).
PRELEVEMENT D'URINES SUR SONDE
1.
Clamper la tubulure (A)
2. Vérifier la quantité d'urine présente dans la tubulure.
3. Désinfecter le site de prélèvement de la sonde (B) selon le protocole recommandé.
4. Percuter le site avec l'aiguille ou avec l'adaptateur (selon la nature du site).
5.
Insérer les tubes et les percuter selon l'ordre recommandé (
puis
)
6. Maintenir le tube en position jusqu'à ce que le remplissage soit complet, veiller à remplir le tube jusqu'au repère de
remplissage minimum indiqué sur l'étiquette.
7. Homogénéiser les tubes par 8 à 10 retournements.
8. Identifier les échantillons et les transmettre au laboratoire, à température ambiante, dans les meilleurs délais (voir le
guide des analyses).
6.8. EXAMEN PHYSIQUE ET CHIMIQUE DES SELLES
Ce chapitre présente les recommandations générales avant prélèvement et les modalités de recueil du prélèvement pour
tout examen de selles mais les conditions préanalytiques précises (température de conservation, durée du recueil, quantité
de prélèvement, etc.) pour chaque type d'examen de selles doivent être consultées sur le guide des analyses.
Les recommandations avant prélèvement
●
Eviter la consommation d'oléagineux les 2 jours précédant le recueil et les 3 jours du recueil, ainsi que les laxatifs
durant la même période.
● Eviter chez les enfants le recueil sur couches, car la déshydratation entraîne un tableau de fausse constipation :
préférer un recueil sur une poche
● Pour le dosage de stéatorrhée (recherche de graisses dans les selles) un régime surchargé en graisses peut être
demandé au patient
● Faire des recueils avant une investigation par imagerie ou au moins 1 semaine après.
● Pour une recherche de sang dans les selles, le prélèvement ne doit pas être effectué pendant la période des règles ou
si le patient souffre de saignement hémorroïdal ou urinaire. Pendant les 48h précédant le recueil, le patient doit éviter
de consommer des substances qui peuvent causer des irritations gastro-intestinales et provoquer un saignement
occulte (alcool, aspirine ou certains médicaments)
Les modalités de prélèvement et de conservation
●
Pour les analyses nécessitant un recueil sur 24h (Clairance alpha1 antitrypsine, Fécalogramme, recherche de
laxatifs, Stéatorrhées, Créatorrhées, ionogramme), le recueil de la totalité des selles s'effectue dans un récipient sec
(pot à selles d'1 litre) différent pour chacune des journées (si recueil sur 3 jours) et sans contact urinaire. La
conservation avant acheminement au laboratoire de biochimie est réalisée à +4°C.
● Pour les analyses nécessitant un simple échantillon (Calprotectine, Elastase, Porphyrines, sang dans les selles) tout
en respectant les masses minimales recommandées dans le guide des analyses, un flacon non stérile, propre et sec
de 40 mL à bouchon blanc est utilisé. La conservation avant acheminement au laboratoire de biochimie est réalisée à
+4°C. Mettre à l'abri de la lumière pour le dosage des porphyrines.
6.9. LES PRELEVEMENTS MICROBIOLOGIQUES
6.9.1. RECOMMANDATIONS GENERALES
●
●
●
Prélever avant le début de l'antibiothérapie si possible, sinon prévenir le laboratoire de l'antibiothérapie en cours.
Fournir les renseignements cliniques.
Préciser au mieux la demande d'examen: demande explicite pour la recherche d'agents infectieux particuliers, nature et
localisation précise de l'échantillon.
● Si plusieurs échantillons, numéroter et identifier précisément les échantillons (sur flacons / écouvillons et sur le bon de
demande).
● Réalisation du prélèvement:
● Se laver les mains.
● Mettre des gants à usage unique (non stériles ou stérile en fonction du prélèvement).
● Porter un masque à usage unique si risque d'inhalation d'agents pathogènes.
6.9.2. HEMOCULTURES
HEMOCULTURE POUR ADULTE
MATERIEL
Flacons BD BACTEC: aérobie (bouchon bleu) et anaérobie (bouchon violet)
MODE DE PRELEVEMENT
Cf. Instruction institutionnelle validée par le CLIN (IHYG028) et le chapitre 6.4.4 Prélèvements veineux du
présent manuel.
Points importants:
●
●
●
●
●
Conditions d'asepsie rigoureuses.
Désinfection du bouchon du flacon avant de prélever +++
Remplir d'abord le flacon aérobie PUIS le flacon anaérobie, et éventuellement les autres tubes de sang ensuite.
Volume de sang recommandé par flacon: 8-10 ml (min 5 ml).
ATTENTION: Une quantité trop faible ou trop importante de sang fausse le résultat.
HEMOCULTURE POUR ENFANT
MATERIEL
Flacon BD BACTEC pédiatrique (bouchon argenté)
MODE DE PRELEVEMENT
Cf. Instruction institutionnelle validée par le CLIN (IHYG028) et le chapitre 6.4.4 Prélèvements veineux du
présent manuel.
Points importants:
●
●
●
●
Conditions d'asepsie rigoureuses
Désinfection du bouchon du flacon avant de prélever +++
Volume de sang recommandé par flacon: 1 à 3 ml.
HEMOCULTURE POUR RECHERCHE DE MYCOBACTERIES
MATERIEL
Flacon BD BACTEC mycobactéries (bouchon rouge)
MODE DE PRELEVEMENT
Cf. Instruction institutionnelle validée par le CLIN (IHYG028) et le chap. 6.4.4 Prélèvements veineux du présent
manuel.
Points importants :
●
●
●
●
Conditions d'asepsie rigoureuses.
Désinfection du bouchon du flacon avant de prélever +++.
Volume de sang recommandé par flacon: 5 ml.
6.9.3. RECUEIL DES URINES
ECBU
Nature du prélèvement
et/ou de la demande
ECBU
Matériel
Mode de prélèvement
Tube à urine avec additif Cf. chapitre 6.7 Recueils d'urine
(bouchon vert)
Points importants:
- Conditions d'asepsie rigoureuses
- De préférence, recueillir les premières urines du matin (ou s'abstenir d'uriner
2-3 heures avant le prélèvement).
- Recueil du milieu de jet
- Transférer immédiatement du flacon stérile vers le tube à bouchon vert
ECBU sur patient sondé
Tube à urine avec additif Cf. chapitre 6.7 Recueils d'urine
(bouchon vert)
Points importants:
- Conditions d'asepsie rigoureuses
- Signaler sur le bon de demande que le prélèvement est réalisé sur sonde
urinaire.
ECBU chez le nourrisson (à Tube à urine avec additif Mise en place de la poche auto-collante:
partir d'une poche
auto-collante)
(bouchon vert)
- Conditions d'asepsie rigoureuses: Procéder à une toilette soigneuse de la
région vulvaire, du méat et du périnée ou du gland et du prépuce (savon doux,
lingettes).
- Poser le sac collecteur.
- Ne pas laisser en place plus de 30 minutes.
- Détacher doucement la poche en soulevant un coin, puis en tirant doucement
- Recueil des urines: Cf. chapitre 6.7 Recueils d'urine
ECBU sur patient appareillé Tube à urine avec additif Prélèvement réalisé par personnel habilité.
Points importants:
(bouchon vert)
Préciser origine de échantillon d'urine: Urine pyélique droite ou gauche,
néphrostomie, urétérostomie, etc.
Ponction vésicale
sus-pubienne
Tube à urine avec additif Prélèvement réalisé par personnel habilité.
(bouchon vert)
URINES 1er JET
Nature du prélèvement et/ou de la demande
Matériel
Urine premier jet pour recherche de:
Tube à urine
Points importants:
Gonocoque (Neisseria gonorrhoeae),
Chlamydia trachomatis
et/ou mycoplasmes génitaux
avec additif
Si écoulement urétral, prélever à l'écouvillon au préalable:
(bouchon vert)
Cf. Chapitre 6.9.9.6 Prélèvement urétral.
De préférence, recueillir les premières urines du matin
(ou s'abstenir d'uriner 2-3 heures avant le prélèvement).
Recueil du premier jet (5-10 ml)
RECHERCHE DE MYCOBACTERIES
MATERIEL
Cf. chapitre 6.7 Recueils d'urine du présent manuel
MODE DE PRELEVEMENT
●
●
Recherche effectuée uniquement si premier ECBU négatif avec leucocyturie > ou égale à 20 000/ml.
La recherche s'effectue sur la totalité des urines du matin après restriction hydrique et pendant 3 jours consécutifs.
RECHERCHE DE SCHISTOSOMES
MATERIEL
MODE DE PRELEVEMENT
Recherche des œufs de schistosomes (bilharzies) dans les urines de 24h ou de préférence la 1ère miction matinale
après un effort physique.
6.9.4. SELLES
BACTERIOLOGIE, MYCOLOGIE ET VIROLOGIE
Nature du prélèvement et/ou de la
demande
Coproculture
Matériel
Pot blanc à bouchon
marron
La prescription d'une seule coproculture est en général suffisante.
●
Analyse bactériologique et/ou
mycologique
●
Recherche de toxine de Clostridium
difficile
Fournir au patient un récipient propre où les selles fraîchement émises ne seront
pas souillées d'urines, d'eau, où d'autres éléments contaminants (sang des règles,
papier hygiénique, etc.)
Après avoir enfilé des gants non stériles à usage unique, prélever une aliquote de la
selle, du volume d'une noisette à une noix, à l'aide d'un flacon-cuillère ou d'une
spatule puis transférer dans un pot blanc à bouchon marron (conteneur hermétique
propre à usage unique). La partie muco-purulente ou sanglante doit être privilégiée,
en cas de présence. Fermer hermétiquement le pot.
Recherche de virus (Rotavirus,
Adenovirus)
Ecouvillonnage rectal pour examen
bactériologique
Ecouvillon avec milieu
de transport
Possibilité de pratiquer un écouvillonnage rectal notamment chez le nourrisson et le petit
enfant et en particulier dans le cadre d'un SHU post-diarrhée.
PARASITOLOGIE
Nature du prélèvement et/ou
de la demande
Parasitologie des selles
Matériel
Gros pot à bouchon rouge
Recueil des selles chez un patient qui n'aura pas subi une coloscopie ou un
examen radiologique récent du tube digestif avec usage d'un produit de contraste
(transit oeso-gastro-duodénal, lavement baryté) et qui se sera abstenu au moins
pendant deux jours de la prise de poudres insolubles (gel d'alumine, charbon,
argiles, etc.), de mucilages, de lubrifiants (huile de paraffine), de laxatifs contenant
des métaux lourds ou de suppositoires
- Fournir au patient un récipient propre où les selles fraichement émises ne seront
pas souillées d'urines, d'eau, où d'autres éléments contaminants (sang des règles,
papier hygiénique, etc.)
- Après avoir enfilé des gants non stériles à usage unique, prélever à l'aide d'une
spatule l'équivalent de 4 noix de selles et le placer dans un récipient propre (gros
pot à bouchon rouge), stérile, à large ouverture et fermant bien
Parasitologie des selles avec
recherche d'amibes
Gros pot à bouchon rouge
Les selles sont de préférence émises et recueillies au laboratoire, sinon elles
doivent être acheminées dans l'heure qui suit l'émission
Scotch test anal ou test à la
cellophane adhésive pour
recherche d'œufs d'helminthes
Cellophane adhésive
Appliquer un morceau de scotch au niveau de la marge anale le matin, avant
transparente, lame porte objet défécation et avant toute toilette intime.
et boite de transport pour lame
porte objet
Appliquer le scotch sur une lame porte objet Identifier la boite et la lame avec nom
et prénom.
6.9.5. LES SECRETIONS BRONCHO-PULMONAIRES
EXPECTORATION HORS RECHERCHE DE MYCOBACTERIES
demande
Matériel
Expectoration pour examen mycologique Flacon stérile à
ou examen cyto-bactériologique de
bouchon rouge
crachat (ECBC)
Effectuer de préférence le matin au réveil (sécrétions accumulées dans les bronches au
cours de la nuit) et à jeun.
Le recueil peut nécessiter l'aide d'un kinésithérapeute (« clapping »). Après brossage des
dents et rinçage de bouche à l'eau stérile, au liquide physiologique ou au moyen d'une
solution antiseptique (afin de limiter la contamination oro-pharyngée)
Indications limitées: Mucoviscidose,
dilatation des bronches et éventuellement
pneumonies graves
Expliquer au patient l'importance de faire un effort de toux après avoir pris plusieurs
respirations profondes.
Pas d'examen virologique
Faire cracher le patient et recueillir l'échantillon en fin de toux dans le flacon stérile.
ASPIRATION ENDO-BRONCHIQUE
demande
Aspiration endo-bronchique pour examen
bactériologique ou mycologique
Matériel
Flacon piège
Méthode alternative lorsque les méthodes invasives sont contre-indiquées.
Aspiration des sécrétions broncho-pulmonaires par la sonde d'intubation ou de
trachéotomie pour les patients de réanimation ou de soins intensifs.
PRELEVEMENTS PROTEGES
demande
Prélèvements cathéters Brun
Buisson Bronchique (CBB ou
combicath) ou mini LBA pour
examen bactériologique ou
mycologique
Matériel
Flacon stérile à bouchon
Prélèvement réalisé par un médecin habilité de réanimation chez les patients intubés.
rouge ou Tube stérile
transparent "LCR" + 1ml de
sérum physiologique stérile Mini lavage (mini LBA) par instillation d'un volume inférieur à 20 ou 25 ml, souvent à
l'aveugle, permettant de recueillir 2 à 3 ml ou extrémité du cathéter bronchique mis dans
un tube avec 1ml de sérum physiologique stérile
ou
Prélèvement distal protégé (brosse) Tube stérile transparent
pour examen bactériologique ou
"LCR" + 1ml de sérum
mycologique
physiologique
Acheminement urgent au laboratoire +++
Prélèvement réalisé sous fibroscopie par médecin habilité.
Produit de brossage bronchique (brosse télescopique protégée de Wimberley ou cathéter)
recueilli dans un tube stérile contenant 1 ml de sérum physiologique stérile. Bien boucher
le tube et agiter au lit du malade.
Liquide de lavage
bronchiolo-alvéolaire (LBA) pour
rouge
examen bactériologique, virologique
ou mycologique
Lavage d'un territoire pulmonaire par du sérum physiologique stérile par fractions de 50
ml, jusqu'à 300 ml, permettant de recueillir entre 20 et 60 % de la quantité injectée.
RECHERCHE DE MYCOBACTERIES, NOCARDIA ET ACTINOMYCES
de la demande
ECBC pour recherche de
mycobactéries
Matériel
rouge
Répéter le prélèvement (idem ci-dessus) 3 jours de suite le matin, au réveil et à jeun.
Récupérer 2 à 3 ml minimum.
Tubage gastrique pour recherche Flacon stérile à bouchon
de mycobactéries uniquement
rouge
Effectuer le prélèvement chez un sujet à jeun, maintenu alité depuis la veille et le
plus tôt possible après le réveil.
Après avoir descendu la sonde dans l'estomac, aspirer à l'aide d'une seringue
adaptée environ 5ml de liquide gastrique et recueillir dans un flacon stérile.
Répéter le prélèvement (idem ci-dessus) 3 jours de suite.
Aspiration bronchique ou Liquide Flacon stérile à bouchon
de lavage bronchiolo-alvéolaire rouge
(LBA) sous fibroscopie pour
recherche de mycobactéries,
Nocardia, Actinomyces
Remarque: la fibroscopie est responsable d'une irritation se manifestant dans les
heures suivantes par l'émission de crachats qui peuvent être recueillis pour analyse.
6.9.6. PRELEVEMENTS CUTANEO-MUQUEUX
PRINCIPES DE PRELEVEMENT SUR ECOUVILLON
●
●
●
●
Se laver les mains.
Mettre des gants (non stériles, à usage unique).
Sortir l'écouvillon stérile de son emballage en le saisissant par le bouchon à l'extrémité de la tige sans la toucher.
En cas de lésion sèche, humecter l'écouvillon d'un peu de sérum physiologique stérile en dosette unitaire (1 à 2
gouttes).
● Prélever d'une main « ferme » en faisant tourner l'écouvillon pour charger toute la surface.
● Utilisation d'un écouvillon avec milieu de transport liquide (tube bouchon violet): casser l'extrémité de l'écouvillon dans
le tube contenant le milieu liquide (cf schéma ci-dessous) et étiqueter soigneusement.
● Si utilisation d'un écouvillon sec (sans milieu de transport), replacer l'écouvillon dans son étui d'origine et
acheminement urgent au laboratoire ++ (moins de 2h) : à éviter en bactériologie.
Ecouvillon avec milieu de transport liquide
Ecouvillon sans milieu de transport
PRELEVEMENTS ORL: BOUCHE / GORGE
demande
Prélèvement buccal pour examen
mycologique
Matériel
Ecouvillon avec milieu de
transport
Prélever au niveau de la face interne des lèvres et des joues, du frein de la langue, du
palais, des faces externes et internes des gencives (au niveau des collets) et de la
langue.
Pas d'examen bactériologique ++
En cas d'hypertrophie de la muqueuse linguale, un grattage préalable au moyen d'un
abaisse-langue permet une abrasion des dépôts saburraux et des villosités, donc une
meilleure pénétration de l'écouvillon passé ensuite dans les cryptes.
Prélèvement buccal pour examen
virologique
Ecouvillon sec
Prélèvement de gorge pour examen Ecouvillon avec milieu de
bactériologique
transport
Prélever à la périphérie des lésions érosives. Si présence de vésicules, presser avec
l'écouvillon pour recueillir les sérosités.
Si besoin, s'aider d'un abaisse-langue. Demander au patient de dire "Aaaaaa".
Prélever sur les amygdales au niveau des zones inflammatoires ou nécrotiques.
Eviter de toucher la langue ou la luette.
PRELEVEMENTS ORL: NEZ / SINUS
demande
Prélèvement nasal pour recherche
de portage bactérien (S.aureus)
Matériel
transport
Frotter l'écouvillon au niveau de la partie antérieure des deux fosses nasales.
Utiliser un seul écouvillon.
Ecouvillon pour recherche de
virus
Prélèvement avec écouvillon (plutôt chez adulte): Patient assis.
Introduire doucement l'écouvillon horizontalement (de avant vers arrière) dans une
narine, en le faisant tourner sur lui-même, sur quelques centimètres pour atteindre la
paroi post du pharynx.
Prélèvement naso-pharyngé pour
recherche de VRS, PCR grippe ou
coqueluche
Dose de sérum physiologique Injecter quelques ml de serum physiologique par une narine, puis immédiatement
stérile Flacon stérile à bouchon recueillir les sécrétions pharyngées dans le flacon stérile en demandant au patient de
rouge ou flacon piège pour
se moucher en tenant le flacon sous son nez.
aspiration
Utilisation possible d'un flacon piège pour aspiration des sécrétions naso-pharyngées
avec une seringue (pratique chez le petit enfant)
ou
Prélèvement de pus de sinus
transport ou flacon piège pour
aspiration ou Flacon stérile
bouchon rouge
Prélèvement réalisé par médecin habilité
PRELEVEMENTS ORL: OREILLE
demande
Prélèvement auriculaire pour
examen bactériologique ou
mycologique
Matériel
transport
Introduire l'écouvillon dans le conduit auditif externe et le faire tourner plusieurs fois.
Prélever au niveau des lésions si visibles.
Prélèvement de pus de paracentèse Ecouvillon avec milieu de
transport ou Flacon stérile
bouchon rouge
ou
PRELEVEMENTS OCULAIRES
demande
Matériel
Prélèvement conjonctival pour examen Ecouvillon avec milieu de
transport
Prélever les sécrétions ou le pus par frottis conjonctival et dans angle interne de œil
sans toucher la peau
Prélèvement conjonctival pour examen Ecouvillon sec
virologique
Prélever les sécrétions lacrymales dans l'angle interne de l'œil.
Prélèvement conjonctival pour
recherche de Chlamydiae
Ecouvillon spécifique avec
Grattage conjonctival des paupières supérieure et inférieure après retournement.
milieu de transport Chlamydiae
(à demander au laboratoire)
Remarque: il est important de récupérer des cellules.
Ouvrir le tube contenant le milieu de transport liquide, y plonger l'écouvillon puis le
casser en appuyant la tige sur le bord du tube (écouvillon sécable) Bien reboucher
le tube avec le fragment de l'écouvillon à l'intérieur.
Recherche d'acanthamibes :
Ecouvillon sec ou pot stérile
Grattage cornéen déposé sur écouvillon sec,
- Prélèvement de cornée,
Lentilles de contact envoyées dans un pot stérile,
- Liquide de lentilles,
Boîtiers et solutions d'entretien utilisés pour les lentilles de contact.
- Lentilles
Prélèvement de cornée Ponction de
chambre antérieure ou vitré, humeur
aqueuse
ou
Ecouvillon sec ou pot stérile
rélèvement réalisé par médecin habilité.
ou
BACTERIOLOGIE / VIROLOGIE: PRELEVEMENTS CUTANES
demande
Matériel
Prélèvement de lésion cutanée
superficielle (furoncle, impétigo,
folliculite, etc.) pour examen
bactériologique
transport
Prélever avec un écouvillon (+/- imbibé avec une goutte de sérum physiologique
stérile si la lésion est sèche) en frottant au niveau de la lésion.
Prélèvement de plaie, ulcère,
suppuration cutanée pour examen
bactériologique
Prélèvement réalisé par personnel habilité
- Ne prélever qu'en présence de signes locaux d'inflammation +++
- Eviter si possible de prélever à l'écouvillon. Contre-indication formelle pour
la recherche de mycobactéries.
- Antisepsie sur la zone cutanée proximale de la lésion. Rincer au sérum
physiologique stérile.
ou
- Plaie du site opératoire (cicatrice): prélever l'écoulement de la cicatrice de
préférence par aspiration à la seringue, puis transférer dans flacon stérile ou, si
écoulement spontané, prélever avec un écouvillon préalablement imbibé de sérum
physiologique
- Morsure: Aspirer le liquide présent dans la blessure avec une seringue, puis
transférer dans flacon stérile. A défaut, pratiquer un écouvillonnage profond.
- Ulcère, lésions nécrotiques: Biopsie ou ponction à l'aiguille montée sur seringue,
puis transfert dans flacon stérile.
L'écouvillonnage simple des escarres est proscrit (reflet de la colonisation
bactérienne!)
Prélèvement de pied diabétique pour
examen bactériologique
Prélèvement réalisé par un médecin habilité en suivant les recommandations du
GP30
Références: Recommandations Le Pied Diabétique Infecté: Les prélèvements
ou
Prélèvement cutané pour examen
virologique
Ecouvillon sec
Prélever à la périphérie des lésions érosives.
Si présence de vésicules, presser avec l'écouvillon pour recueillir les sérosités.
6.9.7. LES PRELEVEMENTS POUR MYCOLOGIE / PARASITOLOGIE
MYCOLOGIE: PRELEVEMENTS DE PEAU
et/ou de la demande
Matériel
Prélèvement de peau
Matériel chirurgical particulier stérile Prélèvement réalisé par médecin habilité.
pour examen mycologique et en bon état: curette de Brocq
fenêtrée, scalpel mousse ou
vaccinostyle, ciseaux fins, pince à En cas de lésions multiples, les échantillons biologiques d'origines différentes doivent être
nettement individualisés.
épiler, etc.
Flacon stérile à bouchon rouge
- Prélever au minimum une vingtaine de squames (ou plus si possible), au-dessus du flacon, avec un
scalpel mousse ou une curette, sur toute la surface d'une lésion dyschromique (notamment au niveau
des éventuelles zones fluorescentes sous lampe de Wood), en périphérie d'un intertrigo humide, sur le
relief érythémato-vésiculo-squameux en périphérie d'une lésion circinée (le centre est en voie de
guérison), sur les faces latérales macérées des orteils, etc.
- Prélever au moins une quinzaine de poils cassés courts, prélevés à la pince à épiler, au besoin en
pinçant les squames qui les engluent.
- Pour ces types de prélèvements, l'utilisation du seul écouvillon (préalablement humecté de quelques
gouttes de sérum physiologique stérile) doit rester exceptionnelle (otite externe, blépharite, lésions
pustuleuses ou très suintantes,...) et toujours venir en complément du recueil de squames (fond du pli
Ecouvillon avec milieu de transport des intertrigos humides et suintants) et de poils (gouttelette de pus qui sourd par l'ostium après
prélèvement).
L'écouvillon ne doit en aucun cas être utilisé seul pour les lésions sèches.
MYCOLOGIE: PRELEVEMENTS D'ONGLES
Nature du
prélèvement et/ou
de la demande
Prélèvement
d'ongles pour
examen
mycologique
Matériel
Matériel chirurgical particulier stérile
Prélèvement réalisé par médecin habilité.
et en bon état: curette de Brocq
vaccinostyle, ciseaux fins, pince à Le préleveur ne doit en aucune manière « compter son temps », brusquer le patient, ni rendre
le prélèvement inutilement douloureux.
épiler, etc.
En cas de lésions cutanées associées (fréquemment, un intertrigo inter-digitoplantaire),
les échantillons biologiques doivent être nettement individualisés, en terminant par le
prélèvement unguéal.
Prélever un maximum de fragments d'ongle et de matière sous-unguéale, recueillis dans un
flacon à l'aide d'une curette et/ou d'un scalpel au niveau d'une lésion proximale de candidose,
jusqu'à la limite de décollement de la tablette en cas de dermatophytose sous-unguéale
latéro-distale, par grattage des zones superficielles de leuconychie ou sous le repli proximal en
cas de paronychie
Ecouvillon avec milieu de transport
Il convient d'insister sur le fait que, pour ces types de prélèvements, l'écouvillon ne doit en
aucun cas être utilisé seul mais doit toujours venir, préalablement humecté de liquide
physiologique, en complément du recueil de fragments d'ongle et de matière sous-unguéale
(pus d'un péri-onyxis, …)
MYCOLOGIE: PRELEVEMENTS DE CHEVEUX
Nature du
prélèvement et/ou
de la demande
Prélèvement de
cheveux, cuir
chevelu pour
examen
mycologique
Matériel
Matériel chirurgical particulier stérile Prélèvement réalisé par médecin habilité.
et en bon état: curette de Brocq
vaccinostyle, ciseaux fins, pince à
épiler, etc.
- Prélever avec un scalpel mousse un maximum de squames au-dessus d'un flacon sur
toute la surface des zones squameuses lors d'une suspicion de pityriasis capitis, au moins
une quinzaine de cheveux courts prélevés à la pince à épiler sur les plaques d'alopécie ou
les placards inflammatoires, au besoin en pinçant les squames qui les engluent (teigne
trichophytique), le contenu des godets, exprimé à la curette, en cas d'éventuel favus.
- Pour ces types de prélèvements, l'utilisation de l'écouvillon (préalablement humecté de
quelques gouttes de liquide physiologique stérile) ne se justifie que pour humidifier et
Ecouvillon avec milieu de transport décoller préalablement les croûtes recouvrant les plaques d'une teigne trichophytique et
pour recueillir, après prélèvement à la pince à épiler, les squames restées collées sur le cuir
chevelu ou la gouttelette de pus qui sourd par l'ostium des cheveux prélevés ; l'écouvillon
ne doit en aucun cas être utilisé seul.
PARASITOLOGIE: SCOTCH-TEST
de la demande
Scotch test cutané pour le
diagnostic de pityriasis
versicolor
Matériel
Cellophane adhésive transparente,
Appliquer un morceau de scotch au niveau de la lésion cutanée.
Lame porte objet et boite de transport pour lame
porte objet
Appliquer le scotch sur une lame porte objet
Identifier la lame et la boite avec nom et prénom.
6.9.8. RECHERCHE DE PORTAGE DE BACTERIES MULTIRESISTANTES (BMR)
Prélèvement nasal pour recherche de portage de
SARM (S.aureus résistant à méticilline)
Matériel
transport
Frotter l'écouvillon au niveau de la partie antérieure des deux
fosses nasales.
Utiliser un seul écouvillon
Prélèvement ano-rectal pour recherche de portage
de bactéries entériques multirésistantes
(Entérobactéries BMR, Entérocoque résistant à la
vancomycine (ERV), Acinetobacter totorésistant...)
transport
Insérer l'écouvillon au niveau de l'anus.
6.9.9. PRELEVEMENTS GENITAUX
PRELEVEMENT GENITAL EXTERNE
Matériel
et/ou de la demande
Prélèvement génital externe (vulve, grandes Ecouvillon avec milieu de
lèvres, petites lèvres chez la femme; gland, transport
sillon balano-préputial chez l'homme)
Lésion érosive : Prélever avec un écouvillon (+/- imbibé avec une
goutte de sérum physiologique stérile si la lésion est sèche) en frottant
au niveau de la lésion. Utiliser un écouvillon avec milieu de transport
pour examen mycologique
+/- bactériologique (Staphylococcus aureus,
Streptococcus pyogenes)
(hors chancre)
Prélèvement au niveau d'un chancre
(suspicion de Syphilis ou chancre mou)
Scalpel mousse ou
vaccinostyle
Prendre contact avec le laboratoire: prélèvement à analyser en
extemporané+++
Lame de verre/lamelle
Gratter avec un vaccinostyle après avoir éliminé les tissus nécrosés.
Prélever à la périphérie du chancre les sérosités qui apparaissent
après grattage pour examen au microscope à fond noir pour le
diagnostic de la Syphilis ou mise en culture pour le diagnostic de
H.ducreyi
Prélèvement génital externe pour examen
virologique
Ecouvillon sec
Prélever à la périphérie des lésions érosives. Si présence de
vésicules, presser avec l'écouvillon pour recueillir les sérosités.
PRELEVEMENT VAGINAL
Nature du
prélèvement et/ou de
la demande
Prélèvement vaginal
Matériel
transport +/- Spéculum
Prélèvement réalisé par médecin ou sage-femme habilités
Recommandations pour la patiente:
S'abstenir de toilette ou de rapport sexuel dans les 24h précédentes. Eviter la période des règles.
Prélever sous spéculum, sans lubrifiant.
Noter l'aspect des leucorrhées.
Mise en place du spéculum: Choisir la taille du spéculum en fonction de l'âge, de la parité de la
patiente (ex: 25x90 chez la femme nullipare ou femme âgée, 35x90 chez la multipare). Maintenir
les petites lèvres écartées avec deux doigts de la main gauche. Introduire le spéculum en
appuyant sur la fourchette, pour éviter la zone sous-urétrale sensible et le clitoris, parallèlement à
l'axe de la vulve en tournant de 90° tout en l'enfonçant pour le ramener dans le plan de la cavité
vaginale. Après introduction sur 5-6cm, l'ouverture légère du spéculum permet le contrôle visuel
de sa progression vers le sacrum selon un axe de 45° par rapport au plan de la table d'examen.
Dès visualisation du col, écarter avec la vis les deux valves qui se placent l'une dans le cul-de-sac
ant, l'autre dans le cul-de-sac post. Lorsque le spéculum est bien en place, le col correctement
exposé, bien éclairer pour réaliser le(s) prélèvement(s).
Prélever avec écouvillon au niveau de lésions visibles ou recueillir les sécrétions anormales en
chargeant bien l'écouvillon.
Prélèvement sans spéculum : introduire l'écouvillon dans la première partie du vagin et faire
tourner l'écouvillon sur lui-même pour recueillir un maximum de sécrétions.
DEPISTAGE PERINATAL DU STREPTOCOQUE B PAR PCR
Dépistage vaginal/rectal du
streptocoque groupe B par
PCR
Double écouvillon avec
milieu de transport
(à demander au
laboratoire)
Prélèvement sans spéculum :
1. Retirez du sachet les deux cotons-tiges comportant une marque.
2. Introduisez délicatement les deux cotons-tiges dans le vagin de la patiente. Prélevez les
sécrétions au niveau de la muqueuse du tiers inférieur du vagin. Faites pivoter les
cotons-tiges trois fois pour garantir un échantillon uniforme sur les deux cotons-tiges.
3. Optionnel : Introduisez délicatement les deux mêmes cotons-tiges dans le sphincter anal,
à une profondeur d'environ 2,5 cm, puis faites-les pivoter doucement pour prélever les
sécrétions des cryptes anales.
Remarque : Le prélèvement dans la partie inférieure du vagin et du rectum produit de
meilleurs résultats par rapport à l'échantillonnage du col de l'utérus ou du vagin sans
prélèvement du rectum.
4. Placez les deux cotons-tiges dans le récipient de transport.
Acheminer en urgence à T° ambiante
AUTO PRELEVEMENT VAGINAL
Nature du
prélèvement
Matériel
et/ou de la demande
Auto-prélèvement
vaginal
transport
Prélèvement réalisée par la patiente, après lui avoir remis la note explicative.
Introduire l'écouvillon dans le vagin en écartant les grandes lèvres, l'enfoncer de quelques
centimètres, puis le retirer et remettre l'écouvillon dans le tube contenant le milieu de transport.
PRELEVEMENT D'ENDOCOL
de la demande
Prélèvement endocervical pour
examen bactériologique +
recherche de Chlamydia
trachomatis +/- mycoplasmes
génitaux
Matériel
Ecouvillon avec milieu de transport Prélèvement réalisé par médecin ou sage-femme habilités
Préciser le site de prélèvement (endocol) sur le bon de demande
Mettre en place le spéculum (Cf. ci-dessus).
Nettoyage soigneux de l'exocol avec pince longue et compresse imbibée
d'antiseptique.
Laisser agir 1 minute, puis recommencer l'opération une 2ème fois.
Rincer avec une compresse imbibée de sérum physiologique.
Ecouvillon spécifique avec milieu
de transport Chlamydiae (à
demander au laboratoire)
Introduire l'écouvillon jusque dans la cavité fusiforme de l'endocol et, par un
frottement léger, ramener de la glaire cervicale et des cellules endocervicales.
Faire un écouvillon (+ milieu de transport bouchon violet) pour la recherche des
bactéries, un 2ème écouvillon (+ milieu de transport spécifique bouchon rouge)
pour la recherche de Chlamydia trachomatis+/- recherche de mycoplasmes
génitaux.
GLANDE DE BARTOLIN
Prélèvement à l'orifice de la glande de Bartholin
Matériel
transport
Désinfecter la région péri-orificielle, puis recueillir le pus avec
l'écouvillon après une pression douce sur la glande
PRELEVEMENT URETRAL
demande
Matériel
Prélèvement urétral pour recherche Ecouvillon fin
de Gonocoque (Neisseria
gonorrhoeae)
+ utiliser tube avec milieu de
transport pour bactérie
Si une goutte de pus s'écoule au niveau du méat, la recueillir sur un écouvillon.
Sinon, prélever au niveau du canal urétral en introduisant l'écouvillon sur environ
+ Ecouvillon spécifique avec
1 cm, puis tourner délicatement.
milieu de transport Chlamydiae
(à demander au laboratoire)
Faire un écouvillon pour la recherche des bactéries, un 2ème écouvillon
(spécifique en dacron) pour la recherche de Chlamydia trachomatis.
Recherche de Chlamydia
trachomatis
Ouvrir le tube contenant le milieu de transport liquide pour Chlamydiae, y plonger
l'écouvillon puis le casser en appuyant la tige sur le bord du tube (écouvillon
sécable) Bien reboucher le tube avec le fragment de l'écouvillon à l'intérieur.
Ce prélèvement peut-être associé (ou remplacé) à un prélèvement de premier jet
urinaire.
PRELEVEMENT DE SPERME
demande
Prélèvement de sperme pour
spermoculture
Matériel
Flacon stérile à bouchon rouge Prélèvement réalisé par le patient après 2 ou 3 jours d'abstinence.
Boire abondamment (1,5 L) la veille.
Recueil du sperme :
- Uriner avant le recueil.
- Se laver les mains, puis désinfecter soigneusement le gland, le méat, le sillon
balano-préputial et le prépuce au savon antiseptique ; puis rincer avec du sérum
physiologique stérile.
- Effectuer le recueil par masturbation dans le flacon stérile fourni : recueil de la
totalité de l'éjaculat.
- Attention ! le recueil doit être le plus aseptique possible : Eviter de toucher
l'intérieur du flacon, le coït interrompu est à proscrire.
- Bien refermer le flacon après le recueil.
- Le prélèvement doit être transmis au laboratoire rapidement (1h au maximum) à
température ambiante.
6.9.10. PUS PROFOND, ABCES, COLLECTION FERMEE, LIQUIDES DE PONCTION
PRINCIPES DE PRELEVEMENT
●
●
●
●
●
Prélever avant début de antibiothérapie si possible, sinon prévenir le laboratoire de antibiothérapie en cours.
Avant ponction, antisepsie de type chirurgical.
Fermer hermétiquement les flacons pour le transport au laboratoire.
PARTICULARITES EN FONCTION DE LA LOCALISATION
demande
Prélèvement pour examen
bactériologique avec recherche de
bactéries anaérobies, ou examen
mycologique
Matériel
Flacon stérile
Avant ponction d'un foyer fermé, antisepsie de type chirurgical.
Prélèvements liquides: Ponction à l'aiguille montée sur seringue, puis transfert
dans flacon stérile.
Une paire de flacon d'hémoculture (aérobie et anaérobie) peut être ensemencée
avec le liquide ponctionné pour augmenter la sensibilité (respecter les règles de
ponction d'un flacon d'hémoculture en particulier la désinfection du
bouchon), sauf si le liquide résulte de la perforation d'un organe creux avec
contenu septique.
et
Flacon hémoculture aérobie (
bouchon bleu) et anaérobie (
bouchon violet)
Prélèvements solides, Biopsies: Recueil de fragments tissulaires de volume
suffisamment important dans flacon stérile, sans conservateur, sans liquide.
et
Prélèvement de LCR
Tube stérile transparent "LCR" Le LCR est recueilli successivement dans 3 ou 4 tubes stériles sans
bouchon blanc
anticoagulant, numérotés de 1 à 3 (ou 4) destinés respectivement à l'examen
biochimique et microbiologique. La quantité de LCR nécessaire est de 2 à 5 ml
chez l'adulte, idéalement de 2 ml chez l'enfant.
Prélèvements dans le cadre des
infections ostéo- articulaires sur
matériel
Effectué par le chirurgien en fonction des recommandations de pratique
clinique: infections ostéo-articulaires sur matériel (prothèse, implant,
ostéosynthèse) 2009
6.9.11. PRELEVEMENT DE CATHETER
demande
Prélèvement avec ablation du
matériel: Cathéter pour examen
Matériel
Flacon stérile
L'examen systématique des cathéters n'est pas justifié en dehors de signes
locaux et/ou généraux d'infection
Procéder stérilement au retrait du matériel, couper stérilement les 5 cm de
l'extrémité distale pour les cathéters longs et la partie insérée pour les cathéters
courts. Les placer dans un flacon stérile.
En aucun cas n'envoyer la partie externalisée du cathéter (ailettes, fil...)
Prélèvement avec ablation du
matériel: Cathéter pour analyse
microbiologique semi-quantitative
Tube stérile transparent "LCR" Procéder stérilement au retrait du matériel, couper stérilement les 5 cm de
+ 1ml de sérum physiologique l'extrémité distale pour les cathéters longs et la partie insérée pour les cathéters
courts. Les placer dans un tube stérile. Ajouter 1 ml de sérum physiologique
stérile.
Acheminement urgent au laboratoire
Prélèvement effectué matériel en
place: Hémocultures "appariées"
(avec différentiel de délai de
positivité)
Flacons BD BACTEC aérobie
(bouchon bleu) et anaérobie
(bouchon violet)
Réaliser antisepsie adéquate.
Prélever en même temps (
et
7. ELIMINATION DES DECHETS D'ACTIVITE DE SOINS A RISQUE INFECTIEUX
7.1. PAR LE PERSONNEL DE SANTE
Voir la documentation hospitalière sur les DASRI
7.2. PAR LE PATIENT
art. R 1335-2 du Code de Santé publique « Toute personne qui produit des DASRI est tenue de les éliminer »
●
La législation contraint les patients produisant des déchets de soin piquants ou coupants à les jeter dans une boîte
spécifique.
● Ces boîtes sont disponibles au niveau des pharmacies depuis le 1er novembre 2011.
● Il est formellement interdit d'utiliser d'autres récipients (boîtes de conserve, bouteilles en verre ou en plastique...) sous
peine d'amende ou d'emprisonnement, notamment en cas d'accident des agents de tri.
● Ne pas remplir le collecteur au-delà du trait supérieur et le fermer définitivement avant élimination au niveau d'une
borne de récupération des DASRI. Le délai de stockage ne doit pas dépasser 3 mois. Ranger les boîtes jaunes hors
de portée des enfants.
8. IDENTIFICATION DES PRELEVEMENTS
8.1. IDENTIFICATION PRIMAIRE DES ECHANTILLONS
L'identification des échantillons doit être effectuée par le préleveur au moment du prélèvement.
Décret n° 2002-660 du 30 avril 2002, Art. 20-5 :
« Les prélèvements destinés à être transmis à un laboratoire de biologie médicale effectués par les professionnels de santé,
y compris ceux exerçant au sein des établissements et des centres de santé ne disposant pas de laboratoire d'analyses de
biologie médicale, doivent être parfaitement identifiés. Ils le sont par le nom patronymique, le nom marital ou usuel, le
prénom, la date de naissance et le sexe du patient, mentionnés par le professionnel de santé au moment du prélèvement.
Ce dernier spécifie son nom et précise la date et l'heure du prélèvement. »
8.1.1. PRELEVEMENTS EFFECTUES AU SEIN DU CHU
PATIENT HOSPITALISE
L'enregistrement du patient hospitalisé permet l'édition d'étiquettes à code-barres portant l'identification complète et
univoque du patient (nom, prénom, nom de jeune fille, date de naissance et sexe), son statut en tant qu'hospitalisé (H) ainsi
que son unité d'hospitalisation.
PATIENT CONSULTANT EXTERNE
L'enregistrement du patient au bureau des entrées, avant son arrivée à l'office de prélèvements du laboratoire ou dans les
unités de consultations hospitalières, permet l'édition d'une planche d'étiquettes à code-barres portant l'identification
complète et univoque du patient (nom, prénom, nom de jeune fille, date de naissance et sexe), son statut en tant qu'externe
(E ou E+) ainsi que son unité de consultation.
8.1.2. PRELEVEMENTS EFFECTUES PAR DES PRELEVEURS EXTERNES
Le préleveur peut être le patient lui-même, les infirmiers libéraux, les centres de soins, les offices de santé, etc.
Les échantillons peuvent être identifiés de façon manuscrite ou à l'aide d'étiquettes auto-collantes.
Les informations obligatoires qui doivent figurer sur les échantillons et sur la fiche de transmission sont: nom, prénom, nom
de jeune fille, date de naissance et sexe.
L'étiquette hospitalière sera collée à postériori sur l'échantillon au niveau du laboratoire.
8.2. IDENTIFICATION SECONDAIRE AU LABORATOIRE
L'enregistrement du dossier dans le SIL (système informatique du laboratoire) engendre l'édition d'étiquettes à code-barres
avec l'identité complète du patient et les numéros internes du dossier et des échantillons.
9. CONDUITE A TENIR EN CAS D'INCIDENT DE PRELEVEMENT
Quels que soient la nature et le site du prélèvement, le préleveur doit noter sur le support de prescription toute
difficulté ou incident rencontrés lors de la réalisation du prélèvement.
Le tableau suivant présente les mesures à prendre concernant le patient en cas d'incident de prélèvement.
Incident ou Accident
Malaise du patient sans
perte de connaissance
Cause
Anxiété, jeûne, etc.
Conduite à tenir
Rassurer le patient.
Arrêter le prélèvement et comprimer le point de prélèvement.
Incliner le dossier du fauteuil de manière à ce qu'il soit le plus allongé possible.
Relever les jambes du patient de manière à ce qu'elles soient plus hautes que la tête et le
couvrir si nécessaire.
Essayer de retenir l'attention du patient pour éviter la perte de connaissance.
Faire prévenir un biologiste ou un personnel titulaire de l'AFGSU Formation aux Gestes et
Soins d'Urgence (liste) sans laisser le patient seul.
Noter l'incident sur le support de prescription.
Hématome au point de
prélèvement
Garrot trop serré, veine trop
fine, piqûre hésitante, etc.
Rassurer le patient.
Compresser le point de prélèvement
Poser une compresse alcoolisée
Perte de connaissance
du patient
Anxiété, jeûne, causes
médicales, etc.
Arrêter le prélèvement.
Incliner le dossier du fauteuil de manière à ce qu'il soit le plus allongé possible.
Relever les jambes du patient de manière à ce qu'elles soient plus hautes que la tête et le
couvrir si nécessaire.
Faire prévenir un biologiste ou un personnel titulaire de l'AFGSU sans laisser le patient seul. Si
nécessaire appeler le 15
Crise d'épilepsie
Prendre toutes les précautions nécessaires pour éviter que le patient ne se blesse.
Appeler le 15 (83329)
Choc anaphylactique
Vaccination, injection de fer ,
etc.
10. CONDITIONNEMENT ET ACHEMINEMENT DES ECHANTILLONS BIOLOGIQUES
L'acheminement des prélèvements biologiques doit respecter l'obligation réglementaire du triple emballage.
Les températures de conservation ainsi que les délais d'acheminement doivent respecter les recommandations du Guide
des analyses.
●
Conditionnement pour les prélèvements intra-hospitaliers
Les échantillons sont mis dans des sachets en plastique étanches munis d'une poche kangourou pour le support de
prescription afin d'éviter le contact entre ce dernier et le contenant de l'échantillon biologique. L'ensemble étant
transporté dans des valisettes fermées pour assurer la sécurité du personnel, la préservation des échantillons et la
confidentialité quant à l'identité figurant sur les étiquettes.
●
Conditionnement pour les prélèvements extra-hospitaliers
Les emballages doivent être respectueux de la réglementation et de la température préconisée pour l'analyse en
question.

Validation - Le CHU de Nîmes

Transcription

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