paludisme asymptomatique chez la femme enceinte

Transcription

UNIVERSITE DE OUAGADOUGOU
BURKINA FASO
Unité de Formation et de Recherche en
UNITE - PROGRES - JUSTICE
Sciences de la Vie et de la Terre (UFR / SVT)
CERBA/LABIOGENE
Département de Biochimie-Microbiologie
UFR/SVT
Diplôme d’Etudes Approfondies en Biochimie/Biologie Moléculaire
Spécialité : Biologie Moléculaire
Par : DOUAMBA Zoénabo
Maître ès Sciences.
SUR LE THÈME :
PALUDISME ASYMPTOMATIQUE CHEZ LA
FEMME ENCEINTE AU CENTRE MEDICAL
SAINT CAMILLE DE OUAGADOUGOU
Soutenu le 14 Avril 2012 devant le jury :
Président : Pr Odile G. NACOULMA, Professeur Titulaire, Université de Ouagadougou
Membres : Pr Jacques SIMPORE, Professeur Titulaire, Université de Ouagadougou
: Dr Christelle WM NADEMBEGA, Maître Assistante, Université de Ouagadougou
: Dr Virginio PIETRA, Chargé de recherche, Université de Brescia, Italie
Dédicace
A la mémoire de mon père ;
A ma très chère mère, à mes frères et sœurs ;
A toutes les femmes qui ont accepté de participer à l’étude ;
A tous ceux qui ont contribué de manière directe ou indirecte à la réalisation
de ce travail.
Mémoire de DEA – DOUAMBA Zoénabo
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Remerciements
Ce travail a été réalisé au Centre Médical Saint Camille et au
Centre de Recherche
Biomoléculaire Pietro ANNIGONI (CERBA/LABIOGENE). Mes remerciements les plus sincères
vont à tous ceux qui m’ont permis d’entreprendre le présent travail et m’ont aidée à le mener à
bien en me prodiguant soutien et conseils et en me réconfortant lorsque cela était nécessaire.
Nous exprimons nos profondes gratitudes :
Au Professeur Jacques SIMPORE, Professeur titulaire de Génétique et de Biologie moléculaires
à l’Université de Ouagadougou, Directeur du CERBA/LABIOGENE, Directeur du laboratoire du
CMSC, Recteur de l’Université Saint Thomas d’Aquin, notre Directeur de mémoire. Nous sommes
très marqués de l’honneur que vous nous avez fait en nous acceptant dans votre laboratoire bien
équipé. Nous avons bénéficié de votre encadrement scientifique malgré vos multiples
engagements professionnels, de votre soutien moral et financier.
Au Professeur Odile Germaine NACOULMA (Université de Ouagadougou), responsable de
l’école doctorale (Département de Biochimie/Microbiologie) pour avoir accepté de présider notre
jury.
Au Docteur Christelle NADEMBEGA, Maître Assistante en Biochimie Microbiologie, Université
de Ouagadougou, pour votre encadrement et pour avoir accepté de corriger et de juger notre
travail.
Au Docteur Virginio PIETRA, responsable de la prise en charge des PvVIH au centre médical
saint Camille, au CERBA et à Nanoro ; nous vous remercions pour tous vos conseils et vos apports
pédagogiques.
Au Docteur Salvatore PIGNATELLI, pour avoir accepté que le CMSC soit un cadre de notre
étude.
Au Docteur Djénéba OUERMI, Assistante en Biologie Animale, Université de Ouagadougou pour
vos conseils et pour votre encadrement durant l’étude.
Au Dr Cyrille BISSEYE (Labiogene/ CERBA) pour ses précieux conseils.
Page iii
A toute l’équipe du Centre de Recherche Biomoléculaire CERBA/LABIOGENE et en particulier
au Dr Florencia DJIGMA et Mlle Tani SAGNA pour leur soutien moral et leur assistance
technique, à Mr Moctar T.A. ZEBA, à Mlle Laure Stella GHOMA-LINGUISSI, à Mr Valérie
BAZIE, à Mr Désiré ILBOUDO, à Mr Rémi MORET et au Père Albert YONLI avec qui nous avons
eu beaucoup de plaisir à travailler.
A toute l’équipe du Laboratoire Saint Camille, et en particulier à Mr Robert BAKAMBA, Mr
Emmanuel BOUDA, Mme Angèle SANFO, Mr Barthélémy pour leur assistance technique.
A toute l’équipe du service de la SMI du Centre Médical Saint Camille pour avoir facilité le
contact avec les femmes et pour la prise en charge de celles qui étaient
infectées par le
plasmodium.
A la Conférence Episcopale Italienne (CEI), pour leur appui financier dans la réalisation de nos
travaux de recherches.
A Cheick Habrahim BOUDA pour ton soutien de tout ordre et tes encouragements
A M. K. Paul KABORE et son épouse pour leurs soutien et encouragements.
A tous ceux qui de près ou de loin nous ont soutenus dans nos études scolaires et/ou
universitaires.
A toute notre promotion et à tous nos amis, ce fut un plaisir pour moi de partager ce trajet
avec vous.
A tous ceux dont j’ai omis de citer le nom.
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TABLE DES MATIERES
Dédicace ............................................................................................................................................... ii
Remerciements ...................................................................................................................................... iii
TABLE DES MATIERES .................................................................................................................. v
LISTE DES FIGURES ........................................................................................................................... viii
LISTE DES TABLEAUX ........................................................................................................................ viii
SIGLES ET ABRÉVIATIONS ................................................................................................................... ix
RESUME ........................................................................................................................................... x
ABSTRACT ...................................................................................................................................... xi
INTRODUCTION ..............................................................................................................................1
I. GENERALITES ..............................................................................................................................3
I.1. Historique du paludisme............................................................................................................3
I.2. Situation du paludisme dans le monde .......................................................................................3
I.3. L’agent vecteur et son écologie .................................................................................................5
I.4. Le parasite ................................................................................................................................5
I.5. Cycle de vie du parasite ............................................................................................................6
I.5.1. Cycle chez l'homme ...........................................................................................................6
I.5.2. Cycle chez l’anophèle ........................................................................................................7
I.6. Pathogenèse du paludisme.........................................................................................................8
I.6.1. Invasion des hématies .........................................................................................................9
I.6.2. La cytoadhérence ...............................................................................................................9
I.7. Variabilité antigénique du Plasmodium ................................................................................... 10
I.8. Manifestations cliniques .......................................................................................................... 11
I.9. Paludisme et grossesse ............................................................................................................ 11
I.9.1. Cytoadhérence placentaire ................................................................................................ 12
1.9.2. Effets chez la mère .......................................................................................................... 13
1.9.3. Effets sur la santé de l’enfant ........................................................................................... 14
I.9.4. Paludisme asymptomatique de la femme enceinte ............................................................. 15
I.9.5. Interventions recommandées dans le cadre de la prévention et de la lutte contre le
paludisme chez la femme enceinte dans les zones de transmission stable (OMS Afrique, 2005) . 16
I.10. Diagnostics du paludisme ...................................................................................................... 17
Page v
I.10.1. Diagnostic microscopique direct par frottis sanguin (FS) et goutte épaisse(GE)............... 17
I.10.2. Détection d’antigènes plasmodiaux par les tests de diagnostic rapide (TDR) ................... 17
I.10.3. Le QBC Malaria test ou Quantitative Buffy Coat ............................................................ 19
I.10.4. Détection des acides nucléiques par les techniques d’amplification génique .................... 19
I.10.5. Détection des anticorps antiplasmodiaux ........................................................................ 20
I.11. Traitement du paludisme et prophylaxie ................................................................................ 22
I.11.1. Traitement du paludisme ................................................................................................ 22
I.11.2. Prophylaxie .................................................................................................................... 24
I.11.3. Résistances antipaludiques de Plasmodium et résistance des vecteurs aux insecticides .... 25
I.12. Hémoglobines S et C Groupes sanguins ABO et paludisme ................................................... 26
I.12.1. Hémoglobines S et C (HbS et HbC) ................................................................................ 26
I.12.2. Groupes sanguins ABO .................................................................................................. 27
I.13. Homocystéine, Folates, Anémie et paludisme ........................................................................ 27
I.13.1. L’homocystéine .............................................................................................................. 27
I.13.2. Les folates ou vitamine B9 ............................................................................................. 29
I.13.3. L’anémie ........................................................................................................................ 29
II. MATERIEL ET METHODES ...................................................................................................... 30
II.1. Cadre d’étude ........................................................................................................................ 30
II.2. Population d’étude ................................................................................................................. 30
II.3. Test rapide, goutte épaisse et densité parasitaire ..................................................................... 31
II.4. Electrophorèse de l’hémoglobine ........................................................................................... 32
II.5. Dosage colorimétrique du taux d’hémoglobine....................................................................... 33
II.6. Détermination des groupes sanguins ..................................................................................... 33
II.7. Dosage du fer sérique ............................................................................................................ 34
II.8. Dosage des folates et de l’homocystéine ................................................................................ 35
II.8.1. Dosage immunologique par polarisation de fluorescence (FPIA) de l’homocystéine ........ 35
II.8.2. Dosage des folates .......................................................................................................... 37
II.9. Considérations éthiques ......................................................................................................... 37
II.10. Analyses statistiques ............................................................................................................ 37
III. RESULTATS.............................................................................................................................. 38
III.1. Caractéristiques socio-économiques et professionnelles des femmes ..................................... 38
III.2. Paramètres hématologiques et biochimiques des femmes enceintes ....................................... 40
III.2.1. Taux hémoglobine et fer sérique .................................................................................... 40
Page vi
III.2.2. Comparaison goutte épaisse et test de dépistage rapide de Plasmodium falciparum ........ 40
III.2.3. Taux d’homocystéine et de folates ................................................................................. 42
III.2.4. Effet de P. falciparum sur les paramètres hématologiques et biochimiques des femmes
enceintes ................................................................................................................................... 43
III.2.5. Prévalence de P. falciparum chez les femmes enceintes en fonction de leurs groupes
sanguins et de leurs types d’hémoglobine .................................................................................. 45
IV. DISCUSSION............................................................................................................................. 47
CONCLUSION ................................................................................................................................ 51
Annexe ............................................................................................................................................. 52
REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES ........................................................................................... 53
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LISTE DES FIGURES
Figure 1 : Situation du paludisme dans le monde en 2010 ....................................................................4
Figure 2 : Cycle de vie de Plasmodium falciparum ..............................................................................8
Figure 3: Cytoadhérence et rosetting ................................................................................................. 10
Figure 4 : Cartographie du nombre de femmes enceintes vivant dans des zones à risques du paludisme
à P. falciparum en 2007..................................................................................................................... 12
Figure 5 : Conséquences du paludisme gestationnel sur le fœtus ........................................................ 13
Figure 6 : Conséquences du paludisme pendant la grossesse : zone de transmission forte ou modérée
(stable).............................................................................................................................................. 15
Figure 7: Introduction des antipaludiques et apparition des résistances (R) de P. falciparum .............. 26
Figure 9: Représentation des résultats de test rapide du paludisme ..................................................... 31
Figure 10 : Une goutte épaisse .......................................................................................................... 32
Figure 11 : Photo de groupes sanguins A, B et O ............................................................................... 34
Figure 12 : Compétition entre la substance à doser et le traceur ......................................................... 36
LISTE DES TABLEAUX
Tableau I: part du paludisme dans l’anémie, le petit poids de naissance et la mortalité néonatale ....... 14
Tableau II : Méthodes de diagnostic des infections plasmodiales ....................................................... 21
Tableau III : Protocole de dosage du fer sérique ................................................................................ 35
Tableau IV : Caractéristiques professionnelles et socio-économiques des femmes ............................. 39
Tableau V : Taux d'hémoglobine et de fer sérique ............................................................................. 40
Tableau VI : Résultats des TDR et de la goutte épaisse...................................................................... 41
Tableau VII : Sensibilité et spécificité des TDR ............................................................................... 41
Tableau VIII : Taux d’homocystéine et de folates.............................................................................. 42
Tableau IX : Corrélation entre les taux d’homocystéine et de folates et entre les taux d’hémoglobine et
de folates .......................................................................................................................................... 42
Tableau X : Goutte épaisse , taux d’hémoglobine, stade de la grossesse, nombre de grossesse,
utilisation de moustiquaires imprégnées et SP ................................................................................... 44
Tableau XI : Electrophorèse de l’hémoglobine, l’anémie, goutte épaisse, le taux de fer sérique ......... 45
Tableau XII : Infection par P. falciparum en fonction du groupe sanguin des femmes enceintes. ....... 46
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SIGLES ET ABRÉVIATIONS
Ac
:
Anticorps
ADN
:
Acide Désoxyribonucléique
ARN
:
Acide Ribonucléique
CERBA
:
Centre de Recherche Biomoléculaire Pietro Annigoni
CMSC
:
Centre Médical Saint Camille de Ouagadougou
ERi
:
Erythrocyte infecté
FPIA
:
fluorescence polarisation immunologic assay
FS
:
Frottis sanguin
GE
:
Goutte épaisse
HCY
:
Homocystéine
HRP2
:
Histidin rich protein 2
LaBioGene :
Laboratoire de Biologie Moléculaire et de Génétique
LDH
:
Lactate déshydrogenase
MII
:
Moustiquaire imprégnée d’insecticide
OMS
:
Organisation mondiale se la santé
PCR
:
Polymerase Chain Reaction
PfEMP-1
:
Plasmodium falciparum erythocyte membrane protein-1
SAH
:
S-adénosyl-L-homocystéine
SP
:
Sulfadoxine - pyriméthamine
TDR
:
Test de diagnostic rapide
TPI
:
Traitement préventif intermittent
VIH
:
Virus de l’Immunodéficience Humaine
Page ix
RESUME
Objectifs : Diagnostiquer le paludisme asymptomatique chez les femmes enceintes en vue
d’une prise en charge médicale.
Matériel et méthodes : La collecte des échantillons s’est déroulée du 23 Septembre au 20
Octobre 2010 au CMSC et a concerné 201 femmes enceintes. Nous avons réalisé des Test de
diagnostic rapide (TDR) de P. falciparum suivis de gouttes épaisses. Nous avons aussi
analysé quelques paramètres biochimiques et hématologiques de ces femmes à savoir les taux
d’hémoglobine, d’homocystéine, de folates et de fer sérique, ainsi que les groupes sanguins et
les types d’hémoglobine par électrophorèse.
Résultats : Nous avons trouvé un taux d’infection au P. falciparum de 24,38% avec une
densité parasitaire moyenne de 4058 parasites/µL. la valeur moyenne du taux d’hémoglobine
était 10,49 ± 1,73g/dL et le taux d’anémie était de 61,19%. De plus 36,81%% des femmes
présentaient une anémie modérée (taux d’hémoglobine compris entre 7 et 10g/dL). Nous
avons trouvé que 33,33% des femmes infectées étaient anémiées contre 10,26% chez celles
présentant une parasitémie nulle. En ce qui concerne la prophylaxie, le taux d’infection était
de 12,73% chez celles utilisant la sulfadoxine-pyriméthamine (SP) comme traitement
préventif intermittent (TPI) sont infectées contre 28,77% chez celles n’ayant pas reçu de dose
de SP. La majorité des femmes avait des taux de fer sérique et d’homocystéine (HCY)
normaux et 62,19% présentaient des taux faibles en folates (<7,7 nmol/L). Nous n’avons pas
trouvé de différences significatives en comparant d’une part, la parasitémie, les taux
d’hémoglobine, de fer sérique et les différents types d’hémoglobine et d’autre part, entre les
groupes sanguins et la parasitémie à P. falciparum.
Conclusion : Nous avons pu réaliser quelques analyses biologiques chez les femmes
enceintes qui nous ont permis, d’une part, d’identifier les femmes ayant un paludisme
asymptomatique qui pourrait être responsable d’une anémie au cours de la grossesse et d’autre
part, d’identifier celles ayant une hyperhomocystéinemie qui pourrait favoriser une
malformation congénitale au de leur fœtus. Cette étude a montré que la sensibilisation sur les
méfaits du paludisme chez les femmes enceintes reste d’actualité au vu du faible taux
d’utilisation des mesures préventives disponibles (MII et TPI).
Page x
ABSTRACT
Objectives: To diagnose asymptomatic malaria in pregnant women for a medical treatment
Methods: The sample collection took place from September 23 to October 20, 2010 at Centre
Médical Saint Camille de Ouagadougou (CMSC) and involved 201 pregnant women. We
have made rapid diagnostic test of P. falciparum followed by thick films. We also analyzed
some biochemical and hematological parameters of these women namely hemoglobin,
homocysteine,
folate and serum iron rates and blood groups and types of hemoglobin
electrophoresis.
Results: We found an infection rate P. falciparum 24.38% with a mean parasite density of
4058 parasites / µL. the mean hemoglobin level was 10.49 ± 1.73 g / dL and the rate of
anemia was 61.19%. In addition 36.81%% of women had moderate anemia (hemoglobin level
between 7 and 10g/dL). We found that 33.33% of infected women were anemic against
10.26% for those with no parasitaemia. With regard to prophylaxis, the infection rate was
12.73% for those using sulfadoxine-pyrimethamine (SP) as intermittent preventive treatment
are infected against 28.77% for those who did not receive dose of SP. The majority of women
had serum iron and homocysteine (HCY) levels normal and 62.19% had low folate levels
(<7.7 nmol/L). We did not find significant differences when comparing the one hand,
parasitaemia, hemoglobin, serum iron rates and the different types of hemoglobin and other,
between the blood groups and P. falciparum parasitaemia
Conclusion: We were able to perform some laboratory tests in pregnant women that allowed
us; firstly, to identify women with asymptomatic malaria might be responsible for anemia
during pregnancy and also to identify those with hyper-homocysteinemia, which could lead to
a congenital malformation of the fetus. This study showed that awareness about the dangers of
malaria in pregnant women is still relevant given the low rate of use of available preventive
measures (ITNs and IPT).
Page xi
INTRODUCTION
Le paludisme est une maladie infectieuse transmise par le moustique appelé anophèle.
C’est une érythrocytopathie fébrile et hémolysante causée par un protozoaire du genre
Plasmodium qui infecte alternativement les hôtes humains et les moustiques. Plasmodium
falciparum, l’espèce qui provoque la forme la plus mortelle du paludisme est répandue par
Anopheles gambiae et Anopheles funestus (Crompton et al, 2010).
Avec 216 millions de personnes malades et 655 000 décès en 2010 (OMS, 2011), le
paludisme demeure la parasitose la plus importante avec près de 81 % des cas en Afrique.
Les enfants de moins de cinq ans et les femmes enceintes constituent la population la plus
vulnérable. L’Afrique Subsaharienne enregistre chaque année environ vingt-cinq millions de
femmes enceintes infectées et, selon l'Organisation Mondiale de la Santé, le paludisme
représente plus de 10 000 décès maternels et 200 000 décès néonatals par an (Schantz-Dunn
et al, 2009).
Au Burkina-Faso, le paludisme reste une endémie stable dans tout le pays, avec un pic
saisonnier (Mai à Octobre). Selon les données statistiques de la Direction Générale de
l’information et des statistiques sanitaires, le paludisme a été la première cause de
consultation (45,42%), d’hospitalisation (56,57%) et de décès (50,79%) en 2009 (Ministère de
la Santé/Direction Générale de l’Information et des Statistiques Sanitaires du Burkina-Faso,
2010). Le pays a, en effet enregistré 4 507 420 cas de paludisme dans l’ensemble des
formations sanitaires, avec 11 810 cas de décès. Chez les enfants de moins de 5 ans, 2 248
474 cas ont été enregistrés. Le total des cas de paludisme enregistrés chez les femmes
enceintes est de 15 394 ; et 172 en sont décédées.
Les femmes enceintes vivant dans les régions où le paludisme sévit de façon
endémique ont une sensibilité particulièrement élevée à l’infection par P. falciparum. Cette
sensibilité est communément associée à l’accouchement prématuré, à l’avortement, à
l’augmentation de la mortalité périnatale et à la réduction du poids du bébé à la naissance. La
grossesse entraîne un certain nombre de changements physiologiques qui rendent les femmes
plus vulnérables. En réduisant son immunité, la grossesse rend la femme plus sensible à
Page 1
l’infection paludique et accroît le risque de maladie, d’anémie sévère et de décès. En outre, les
érythrocytes parasités par P. falciparum sont séquestrés dans les espaces intervilleux du
placenta affectant ainsi sa fonction chez la femme enceinte atteinte de paludisme (Rogerson et
al, 2007a). Dans les zones de forte transmission de P. falciparum, où les taux d’immunité
acquise sont généralement élevés, les femmes enceintes sont exposées à une infection
asymptomatique avec pour conséquence une anémie maternelle, augmentant les taux de
morbidité maternelle et d’insuffisance pondérale des bébés à la naissance. Le paludisme sévit
dans les pays pauvres où les conditions de vie des ménages précaires ont des conséquences
sur l’état nutritionnel de la population surtout les enfants et les femmes en âge de procréer.
Leur alimentation déficiente engendre des carences en vitamines et oligoéléments pouvant
conduire à une anémie. L’anémie est un facteur de risque significatif au regard de la morbidité
maternelle et surtout fœtale d’autant plus s’il s’agit d’une anémie préexistante à la grossesse.
Les pathologies qui ont comme signe biologique l’anémie telles les anémies hémolytiques, les
thalassémies, la drépanocytose et les hémoglobinopathies associées à la mauvaise
alimentation fragilisent les femmes enceintes vivant dans les zones à transmission du
paludisme.
Objectif principal : diagnostiquer le paludisme asymptomatique chez les femmes
enceintes en vue d’une prise en charge médicale.
Objectifs spécifiques :
 Evaluer la prévalence du paludisme asymptomatique chez les femmes enceintes.
 Evaluer les qualités diagnostiques (sensibilité et spécificité) des TDR par rapport à
la goutte épaisse chez les gestantes asymptomatiques.
 Evaluer les caractéristiques socio-économiques et familiales de ces femmes.
 Identifier les femmes enceintes pratiquant une prophylaxie antipaludique.
 Corréler les paramètres biochimiques, parasitologiques et hématologiques avec le
paludisme asymptomatique chez les femmes enceintes en vue de comprendre
d’avantage l’éthiopathogénie paludique de ce groupe vulnérable.
Page 2
I. GENERALITES
I.1. Historique du paludisme
Le paludisme est connu par ses manifestations cliniques depuis l’antiquité. Les termes
italiens Mal’aria « mauvais air » ou encore latin paludis, « marais » furent décrits entre autre
par Hippocrate (460-377 av JC), qui établit d’ailleurs une relation pertinente entre la date et le
lieu où les malades vivent lorsqu’ils succombent. En Chine, dès le IVe siècle, le Qinghaosu
ou Artemisia annua était connu pour ses vertus fébrifuges. En 1620, Don Francisco Lopez,
père jésuite, reconnaît les vertus curatives de la poudre d’écorce du quinquina (Rocco, 2006).
En 1880 Alphonse Laveran, médecin militaire français, observe en Algérie des éléments
cellulaires intra-érythrocytaires n’appartenant à aucune lignée hématologique ; l’hématozoaire
du paludisme est découvert. En 1897, le britannique Sir Ronald Ross, médecin de l’armée des
Indes prouve le rôle des moustiques dans la transmission du paludisme aviaire, et GiovanniBattista Grassi, en 1898 en Italie, démontre que l’anophèle est le vecteur du paludisme
humain. La phase de division dans le foie ne sera identifiée que bien plus tard en 1948 par
Short et Garnham, ils permettent ainsi de compléter la connaissance du cycle du parasite et
d’expliquer les rechutes de la maladie observées dans certains cas. La seconde guerre
mondiale empêchant l’accès aux plantations indonésiennes de quinquina ouvrait la voie du
développement et de l’utilisation des premiers antimalariques de synthèse (amino-4quinoléines). La lutte contre le vecteur devenait possible grâce à la découverte des
insecticides à action rémanente qui permirent l’éradication de l’affection dans des régions
d’Europe encore atteintes, et dans certaines îles. Les résistances devaient apparaître
rapidement, ruinant les espérances d’éradication du paludisme (Malvy et al., 2000).
I.2. Situation du paludisme dans le monde
Le paludisme sévit dans plus de 100 pays tropicaux et subtropicaux notamment en
Afrique subsaharienne, en Asie, dans le Pacifique, en Amérique latine (figure 1). Les
estimations font état de 216 millions d’épisodes de paludisme en 2010, avec un large
intervalle d’incertitude (du 5 au 95e centile) allant de 149 à 274 millions de cas. Près de 81 %,
soit 174 millions de cas (entre 113 et 239 millions), ont eu lieu dans la région Afrique et 13 %
dans la région Asie du Sud-Est (OMS, 2011).
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En 2010, les décès associés au paludisme sont estimés à 655 000 (entre 537 000 et
907 000), dont 91 % (soit 596 000 dans un intervalle compris entre 468 000 et 837 000) dans
la région Afrique. À l’échelle mondiale, 86 % des décès imputables au paludisme ont
concerné des enfants de moins de 5 ans.
Figure 1 : Situation du paludisme dans le monde en 2010
Source : Gething et al., 2011
Parmi les nouvelles tendances, une baisse (de 17%) de la charge de morbidité palustre
a été observée dans toutes les régions de l’OMS entre 2000 et 2010. Les pourcentages de
réduction les plus importants ont été enregistrés dans les régions Europe (99,5 %), Amérique
(60 %) et Pacifique occidental (38 %). Les taux de mortalité dus au paludisme ont chuté de 25
% entre 2000 et 2010, avec les réductions les plus importantes enregistrées respectivement en
Europe (99 %), Amérique (55 %), Pacifique occidental (42 %), et en Afrique (33 %). Cette
réduction de l’incidence du paludisme dans le monde ne doit pas faire oublier la fragilité des
acquis de la lutte antipaludique et la nécessité de maintenir les programmes de lutte même si
le nombre de cas a sensiblement reculé.
Page 4
I.3. L’agent vecteur et son écologie
L’anophèle est un insecte de la sous-classe des Pterygota et de la famille des
Culicidae. Le genre Anopheles comprend environ 484 espèces, une soixantaine d’espèces
sont des vecteurs, dont une trentaine sont de bons vecteurs ; leur distribution et leur efficience
varient selon les régions géographiques. En Afrique sub-saharienne, on considère qu’il existe
quelque 150 espèces d’anophèles, dont une douzaine sont d’excellents vecteurs tels que A.
gambiae, A. arabiensis, A. funestus, A. nili, A. Moucheti. Dans les régions d’endémie palustre
stable comme les zones de savanes du Burkina, du Nigéria etc, la transmission du parasite est
surtout le fait d’A. gambiae et A. arabiensis pendant les saisons pluvieuses et A. funestus au
début de la saison sèche (Carnevale et Robert, 2009).
Les gites larvaires sont très variées; les anophèles peuvent se développer dans :
- les eaux douces ou saumâtres en Afrique sub-saharienne, sur la façade occidentale et
orientale, en Amérique du Sud, en Asie du Sud-Est dans la péninsule indochinoise et dans les
eaux sur-salées.
- les sites ensoleillés en Afrique tropicale en Amérique, en Asie du Sud-Est ou dans les forets
ombragées dans le Sud-Est asiatique, en Amérique centrale.
I.4. Le parasite
Plasmodium falciparum est un parasite de la classe des Haemosporidea et de la
famille des Plasmodidae (Bannister et Sherman, 2009). Les quatre espèces de Plasmodium
susceptibles d’infester un hôte humain sont: P. falciparum, P. vivax, P. ovale et P. malariae.
On fait également état, dans les zones forestières de l’Asie du Sud-est, d’infestations de plus
en plus fréquentes par P. knowlesi, un parasite du singe (Singh et al., 2004).
P. falciparum,
l’espèce la plus dangereuse et la plus répandue dans les régions
chaudes (Afrique sub-saharienne, Asie, Océanie Amérique Centrale et Sud) est responsable de
la majorité des cas mortels du paludisme.
P. vivax, responsable de la fièvre tierce bénigne en Asie, en Amérique du Sud et
Centrale, est peu représenté en Afrique. Longtemps considéré comme responsable d’infection
bénigne, P. vivax est maintenant reconnu comme une cause de paludisme grave (Karyana et
al,. 2008).
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Présent en Afrique, P. malariae n’est pas mortel mais peut être responsable des cas
rechute de la maladie une vingtaine d’années après la première infection.
P. ovale est surtout présent en Afrique et de façon sporadique en Amazonie, en
Océanie et en Asie. Il n’est pas mortel mais peut resurgir 4 à 5 ans après la première infection.
Une cinquième espèce, P. knwolesi, responsable du paludisme du singe, a été
retrouvée chez l’homme et est responsable de la fièvre quarte à Bornéo (Asie du Sud-est).
Cette infection attribuée à P. malariae, est due en fait à P. knowlesi, son évolution est
potentiellement grave : elle doit être traitée comme P. falciparum (Figtree et al., 2010).
I.5. Cycle de vie du parasite
I.5.1. Cycle chez l'homme
I.5.1.1. Cycle exo-érythrocytaire
Au cours de la piqûre, l’anophèle femelle infectée injecte dans un capillaire sanguin
des sporozoïtes. Ceux-ci transitent dans la circulation générale et, en quelques minutes, ils
envahissent les hépatocytes grâce à une interaction spécifique entre la protéine majeure de
surface du sporozoïte et un récepteur spécifique situé sur la membrane plasmique de
l'hépatocyte du côté de l'espace de Disse, espace directement en contact avec le sang circulant.
Le sporozoïte entre alors dans une phase de réplication et de prolifération intracellulaire qui
repousse en périphérie le noyau de la cellule et finit par constituer une masse multi-nucléée
appelée schizonte qui conduit à la libération de plusieurs dizaines de milliers de mérozoïtes
dans la circulation (Figure 2). Cette phase de multiplication est asymptomatique et dure de 8 à
15 jours, selon les espèces. Contrairement à P. vivax, P. falciparum ne possède pas de formes
de persistance hépatique ou hypnozoïtes.
I.5.1.2. Cycle intra-érythrocytaire
Seule cette phase sanguine est responsable des symptômes qui peuvent être d'intensité
variable. Les mérozoïtes libérés lors de la rupture de l'hépatocyte vont débuter le cycle
sanguin asexué de prolifération de P. falciparum en infectant les érythrocytes. Le mérozoïte
pénètre dans l’érythrocyte grâce à un processus parasitaire actif et se différencie en
trophozoïte, stade à partir duquel une intense phase réplicative commence. Il donne alors
naissance au schizonte, celui-ci après segmentation montre une forme caractéristique de
Page 6
rosace, puis libère 8 à 32 mérozoïtes qui rapidement réinfectent des érythrocytes sains.
L'ensemble de ce cycle dure 48 heures chez P. falciparum. L'apparition des gamétocytes a
lieu en général la deuxième semaine qui suit l'infection et ces formes peuvent persister
plusieurs semaines après la guérison. A la suite d'une nouvelle piqûre par une Anophèle, les
gamétocytes mâles et femelles (au dimorphisme sexuel marqué) sont ingérés avec le repas
sanguin.
I.5.2. Cycle chez l’anophèle
Lors d’un repas sanguin sur un individu infecté, l’anophèle femelle ingère des
gamétocytes, à potentiel sexuel mâle ou femelle. Ceux-ci parviennent dans l'estomac du
moustique et se transforment en gamètes. Le gamète mâle subit un processus d'exflagellation
à la suite duquel les gamètes femelles sont fécondés. Il en résulte un zygote appelé ookinète ;
celui-ci s'implante sous la paroi stomacale en formant l'oocyste. Cette brève phase diploïde
s’achève par une division méiotique et est suivi par plusieurs milliers de mitoses qui
conduisent au développement de sporozoïtes. Les sporozoïtes gagnent préférentiellement les
glandes salivaires du moustique d'où ils pourront être injectés avec la salive lors d'une piqûre.
Chez le moustique, l'ensemble de ce cycle se déroule en 10 à 40 jours, suivant la température
extérieure et les espèces en cause (Bannister et Sherman, 2009).
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Figure 2 : Cycle de vie de Plasmodium falciparum
Source: Bannister et Sherman, 2009
Legende: Stomach wall, muqueuse gastrique. Salivary gland, glande salivaire. Liver, foie. Gametocytes taken up
by mosquito, gamétocytes absorbés par le moustique. Fertilization, fertilisation. Growth stages of oocyst, stades
de croissance des oocystes. Ruptured oocyst, rupture des oocystes.
I.6. Pathogenèse du paludisme
Chez l’homme le parasite a besoin de proliférer et de survivre sans être détruit. Pour
réaliser cela, P. falciparum utilise plusieurs techniques pour éviter le système immunitaire de
l'hôte et provoquer une maladie grave. Les mécanismes les mieux connus sont : l’invasion des
hématies, la cytoadhérence et la séquestration, la formation des rosettes et la variation
antigénique.
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I.6.1. Invasion des hématies
P. falciparum peut envahir les globules rouges à différents stades de leur
développement, des réticulocytes aux stades matures. Des protéines comme Duffy‐Binding
Like proteins (DBL) et Reticulocytes‐Binding Like proteins
(RBL) de P. falciparum
reconnaissent des récepteurs à la surface des érythrocytes, ce qui permet leur invasion
(Rayner et al., 2005).
I.6.2. La cytoadhérence
P. falciparum est responsable de la séquestration des hématies parasitées. La surface
des hématies infectées est recouverte de protubérances appelées knobs qui sont le point de
contact avec les cellules de l’hôte. L’adhésion protège les érythrocytes infectés (ERi) de la
destruction car les ERi circulants sont éliminés dans la rate. Plusieurs protéines parasitaires
sont localisées dans ces protubérances et participent directement ou indirectement à la
cytoadhérence. Les études portent plus particulièrement sur la famille PfEMP-1 (P.
falciparum erythrocyte membrane protein-1) impliquée dans l'adhérence des formes mûres du
parasite (trophozoïtes et des schizontes). Une seule sur soixante protéines variables est
exprimée. Les hématies parasitées adhèrent à l'endothélium des capillaires des organes
profonds (cerveau, poumon, rein, placenta). Cette séquestration joue un rôle majeur dans la
physiopathologie des accès palustres graves et est à ce titre l'objet de nombreuses études
(Ndam et Deloron, 2007; Crompton et al 2010). La formation des rosettes ou rosetting qui est
la capacité des hématies parasitées à se lier aux hématies non parasitées et l'autoagglutination
qui correspond à l'adhérence, entre elles, d'hématies parasitées participent aussi à la
séquestration érythrocytaire (Figure 3).
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Figure 3: Cytoadhérence et rosetting
Source : adapté de Chen Q. et al., 2000
I.7. Variabilité antigénique du Plasmodium
La protéine PfEMP-1 est impliquée dans la variation antigénique du paludisme à P.
falciparum. Avec environ 60 gènes var codant pour PfEMP-1 et un seul gène var dominant
exprimé au stade adulte du parasite, PfEMP-1 a atteint une forme de variabilité qui permet au
parasite de contourner le système immunitaire de l'hôte. De plus, les fréquentes
recombinaisons et remaniements génétiques au cours des processus de fusion et de division
dans le moustique et les érythrocytes humains peuvent entrainer une grande diversité
génétique et antigénique du parasite (Flick et Chen, 2004).
Page 10
I.8. Manifestations cliniques
La manifestation clinique la plus fréquente est l’accès palustre simple qui comprend
généralement un syndrome fébrile avec asthénie, céphalées et embarras gastrique. Cet état est
lié à l’éclatement des hématies parasitées et à la libération de substances pyrogènes. Cette lyse
érythrocytaire et, dans une moindre mesure, une dysérythropoïèse peuvent entraîner une
anémie parfois mortelle, notamment chez les jeunes enfants.
Le paludisme sévère est complexe et touche plusieurs organes. Un paludisme grave se
manifeste habituellement par un ou plusieurs des signes suivants : coma (neuropaludisme),
acidose métabolique, anémie sévère, hypoglycémie, insuffisance rénale aigue ou œdème aigu
du poumon. A ce stade de la maladie, en l’absence de traitement, un paludisme grave est
presque toujours mortel.
 L’anémie sévère correspond aux faibles taux d’érythrocytes et ou d’hémoglobine de
moins de (5 g/dL) avec une parasitémie élevée. Le taux de mortalité est d’environ 1%.
 Le paludisme cérébral indique une atteinte neurologique. Les manifestations vont
d’une simple prosternation à des troubles de conscience et au coma. Le taux de
mortalité est autour de 7%.
 La détresse respiratoire est la manifestation clinique la plus apparente de l'acidose
métabolique et aussi le syndrome avec le taux de mortalité le plus élevé d’environ
24% (Mangano, 2008)
I.9. Paludisme et grossesse
L’infection paludéenne chez les femmes enceintes constitue un très grave problème de
santé publique puisqu’elle comporte des risques pour la mère, le fœtus et le nouveau-né. Les
femmes enceintes sont trois fois plus susceptibles de souffrir d'une infection palustre grave
par rapport aux femmes non enceintes. Dans les zones d'endémie palustre, il est estimé qu’au
moins 25% des femmes enceintes sont infectées par le paludisme, avec le plus grand risque
d'infection et de morbidité chez les primipares, les adolescentes, et celles co-infectées par le
VIH (Schantz-Dunn et al, 2009). Dans les zones de faible transmission de P. falciparum, où
les taux d’immunité acquise sont faibles, les femmes sont exposées à des accès de paludisme
grave. Dans les zones de forte transmission de P. falciparum, où les taux d’immunité acquise
sont généralement élevés, les femmes sont exposées à une infection asymptomatique, qui peut
Page 11
entraîner une anémie maternelle et une parasitémie placentaire. La figure 4 représente le
nombre de femmes enceintes vivant dans les régions à risque d’infection à P.falciparum.
Figure 4 : Cartographie du nombre de femmes enceintes vivant dans des zones à risques du
paludisme à P. falciparum en 2007
Source: Dellicour et al., 2010
I.9.1. Cytoadhérence placentaire
En plus de la séquestration érythrocytaire, de la formation des rosettes et de la
destruction des hématies induisant une anémie maternelle, la sévérité du paludisme
gestationnel est associée à la séquestration des érythrocytes parasités par P. falciparum dans
les espaces intervilleux du placenta (syncytiotrophoblastes). En effet une des protéines de la
famille des PfEMP-1, appelée var2CSA exprimée à la surface des hématies parasitées est
responsable de l’adhésion de ces hématies (figure 5). Celles-ci se fixent à un sucre, la
chondroitine sulfate A (CSA) et à l’acide hyaluronique (HA) présents dans le placenta.
(Rogerson et al, 2007b). Les parasites fixant la chondroïtine sulfate A seraient des variants
seulement trouvés chez les femmes enceintes. Une des stratégies vaccinales envisagées pour
lutter contre le paludisme gestationnel est de recréer une immunité protectrice, en bloquant
l'adhésion des hématies parasitées au placenta (Duffy et Fried, 2011).
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Figure 5 : Conséquences du paludisme gestationnel sur le fœtus
Source : Rogerson et al, 2007b
Légende
IRBC: infected red blood cell (globule rouge infecté); CSA: chondroitin sulfate A; IUGR: intrauterine growth
retardation (retard de croissance intra-utérine); PTD: preterm delivery (délivrance prématurée).
1.9.2. Effets chez la mère
Pour diverses raisons, l’anémie est plus fréquente chez la femme enceinte que chez
celle qui ne l’est pas : hémodilution due à l’augmentation du volume intravasculaire au cours
du deuxième trimestre de la grossesse, sollicitation accrue des réserves de fer et d’acide
folique. La destruction directe d'un nombre important d'érythrocytes infectés est une cause
importante d'anémie du paludisme. Lorsqu’elle est sévère, elle augmente le risque de décès
Page 13
pour la mère et l’on estime que les anémies imputables au paludisme pourraient être
responsables de 10.000 décès maternels par an en Afrique (0MS, 2005).
1.9.3. Effets sur la santé de l’enfant
L’infection palustre chez la mère peut provoquer l’avortement, l’accouchement d’un
mort-né ou une infection congénitale. Au cours de la seconde moitié de la grossesse, elle peut,
en s’associant à une anémie maternelle, interférer avec le gain pondéral du fœtus et contribuer
à un retard de la croissance intra-utérine, ou à une prématurité avec comme résultat un faible
poids à la naissance. L’insuffisance pondérale à la naissance est l’une des causes majeures
d’un taux de survie et de développement très faible chez le nourrisson. D’après des
estimations de l’OMS, le paludisme chez la femme enceinte est responsable de 8 à 14 %
(tableau I) de tous les cas d’insuffisance pondérale à la naissance et est à l’origine de 75 000 à
200 000 décès de nourrissons chaque année (Rogerson et al., 2007a). Il n’y a pas assez de
données sur les conséquences à long terme du paludisme pendant la grossesse pour l'enfant.
Des études essentiellement nutritionnelles indiquent que l'exposition à un environnement
intra-utérin anormal affecte le développement mental, métabolique et anthropométrique
pouvant conduire à un risque accru de maladie plus tard dans la vie (Desai et al., 2007).
Tableau I: part du paludisme dans l’anémie, le petit poids de naissance et la mortalité
néonatale
Effet néfaste sur la santé
% du total
Anémie maternelle
2 – 15
Petit poids de naissance
8 – 14
Naissance prématurée
8 – 36
Retard de croissance intra-utérine
13 – 70
Mort du nouveau né
2–8
Source : OMS, 2005
Page 14
I.9.4. Paludisme asymptomatique de la femme enceinte
Les symptômes et les complications du paludisme au cours de la grossesse diffèrent
selon l’intensité de la transmission et le taux d’immunité acquise par la femme enceinte. Dans
des zones de transmission épidémique ou faible (instable) du paludisme, les femmes enceintes
n’ont pas acquis un taux d’immunité élevé et tombent généralement malades lorsqu’elles sont
infectées par P. falciparum. Dans des zones de transmission stable du paludisme, la plupart
des femmes adultes ont développé une immunité suffisante pour que, même pendant la
grossesse, l’infection à P. falciparum n’entraîne généralement ni fièvre ni autre symptôme
clinique (figure 6). Dans ces zones, l’infection palustre se caractérise principalement par le
déclenchement d’une anémie secondaire et par la présence de parasites dans le placenta. Les
carences nutritives qui en résultent pour le fœtus contribuent à un faible poids à la naissance
(OMS, 2005).
Figure 6 : Conséquences du paludisme pendant la grossesse : zone de transmission forte ou
modérée (stable)
Source : OMS, 2005
Page 15
I.9.5. Interventions recommandées dans le cadre de la prévention et de la lutte contre le
paludisme chez la femme enceinte dans les zones de transmission stable (OMS Afrique,
2005)
Les directives pour la lutte contre le paludisme pendant la grossesse dans les zones de
transmission stable doivent insister sur l’association du traitement préventif intermittent (TPI)
et des moustiquaires imprégnées d’insecticide (MII) et veiller à une prise en charge efficace
des accès palustres et de l’anémie.
I.9.5.1. Traitement préventif intermittent
Il faut administrer à toutes les femmes enceintes vivant dans des zones de transmission
stable au moins deux doses de TPI à partir du moment où elles commencent à percevoir les
mouvements du fœtus. L’Organisation Mondiale de la Santé recommande un calendrier de
quatre consultations prénatales, dont trois après l’apparition des mouvements du fœtus. En
prévoyant l’administration du TPI à ces trois consultations, on s’assurera qu’une grande
proportion des femmes enceintes recevra au moins deux doses. A cause de son innocuité
pendant la grossesse, de son efficacité chez la femme en âge de procréer et de sa facilité
d’utilisation dans le cadre des programmes, la sulfadoxine- pyriméthamine (SP) est
actuellement le médicament le plus efficace pour le TPI. Ce médicament est administré sous
la forme d’une dose unique en présence de l’agent de santé et ne doit pas être pris plus d’une
fois par mois.
I.9.5.2. Moustiquaires imprégnées d’insecticide
Il faut les fournir aux femmes le plus tôt possible après le début de leur grossesse. On
les incitera à les utiliser pendant toute la période de grossesse et le post-partum. Elles seront
mises à la disposition des femmes soit dans les services de soins prénatals, soit par d’autres
acteurs du secteur public ou privé.
I.9.5.3. Prise en charge efficace des cas de paludisme et de l’anémie
Il faut assurer une prise en charge efficace des accès palustres à toutes les femmes
enceintes dans les régions affectées. Le supplément en fer, pour lutter contre l’anémie
maternelle, doit être donné aux femmes enceintes comme faisant partie des soins prénatals de
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routine. Un dépistage d’anémie sera fait chez toutes les femmes enceintes et celles trouvées
avec une anémie modérée à sévère seront prises en charge.
I.10. Diagnostics du paludisme
Une prise en charge efficace de la maladie requiert un diagnostic posé sans délai. Le
diagnostic repose sur la suspicion clinique d’un paludisme et, la recherche des hématozoaires
par l’examen microscopique certifie ce diagnostic en mettant en évidence le parasite dans le
sang circulant. Le tableau II résume les différentes méthodes de diagnostic.
I.10.1. Diagnostic microscopique direct par frottis sanguin (FS) et goutte épaisse(GE)
L’examen microscopique du FS et la GE est la technique de référence préconisée par
l’OMS. Il permet un diagnostic rapide et un contrôle de l’efficacité du traitement
antipaludique par le suivi de la parasitémie. C’est un examen peu coûteux et demeure la
technique la plus utilisée. Cependant, ses performances en termes de sensibilité et de fiabilité
dépendent directement de l’expérience du microscopiste et du niveau de la parasitémie du
sujet infecté. Le frottis sanguin permet un meilleur examen de la morphologie des parasites et
des hématies et donc un diagnostic d’espèce plasmodiale plus aisé. Il permet en outre, de
calculer la parasitémie. Le seuil de détection du FS est de 100 parasites/µL. Cependant sa
sensibilité est beaucoup plus faible que la GE qui permet de détecter de faible parasitémie
(50 parasites/ µL). Le diagnostic microscopique peut également se heurter à des difficultés
d’identification d’espèce particulièrement en présence de parasites altérés par un traitement
présomptif ou en cas de très faibles parasitémies (Moody, 2002 ; Rogier et al., 2009 ; Siala et
al., 2010).
I.10.2. Détection d’antigènes plasmodiaux par les tests de diagnostic rapide (TDR)
Les TDR reposent sur le principe de l’immunochromatographie en utilisant des
bandelettes sensibilisées par des anticorps monoclonaux spécifiques détectant des antigènes
plasmodiaux. Ils sont réalisés avec une goutte de sang déposée sur une bandelette et ne
nécessitent aucun appareillage.
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Détection de l’antigène Histidin Rich Protein 2 (HRP2) : cette glycoprotéine
spécifique de l’espèce P. falciparum est produite par tous les stades érythrocytaires asexués
du parasite et peut persister dans le sang périphérique plus de 15 jours après la disparition des
parasites.
Ces tests sont crédités d’une sensibilité supérieure à 96% par rapport aux techniques
microscopiques classiques, lorsque la parasitémie évaluée sur la GE est supérieure à 100
parasites/µL. Leur seuil de détection varie de 100 à 300 parasites/µL. La persistance de
l’antigénémie après guérison et la monospécificité vis-à-vis de P. falciparum constituent les
inconvénients majeurs de ces tests. Des faux positifs ont été également associés à des
réactions croisées avec les facteurs rhumatoïdes. Les faux négatifs sont possibles et seraient
dus à des mutations sur le gène codant pour l’HRP2 ou en présence d’anticorps anti HRP2
(Rogier et al., 2009 ; Siala et al., 2010).
Détection des lactates déshydrogénases parasitaires (LDH) : ce sont des enzymes
glycolytiques qui présentent l’avantage d’être communes aux 4 espèces plasmodiales,
détectées à tous les stades sexués et asexués du parasite. Les LDH ont un seuil de détection
identique à celui de l’HRP2, leur clairance est par contre plus rapide faisant qu’ils ne
persistent pas dans le sang après disparition du Plasmodium, d’où leur intérêt dans la
surveillance des patients traités (Siala et al., 2010).
L’aldolase : des anticorps capables de reconnaître les aldolases de tous les
plasmodiums humains peuvent être utilisés. La sensibilité de détection de ces antigènes est
cependant encore moindre que celle des tests détectant l’HRP2 et la LDH (Rogier et al.,
2009).
Les TDR sont d’exécution rapide et de lecture facile pouvant être réalisés par un
personnel moyennement formé. Ils sont indiqués particulièrement dans les structures non
spécialisées lorsque l’examen microscopique n’est pas disponible. Leurs performances
dépendent essentiellement de la parasitémie. Ils sont également moins performants avec les
espèces autres que P. falciparum, particulièrement P. ovale. Les TDR doivent être considérés
comme un complément des autres méthodes de diagnostic. Leurs résultats doivent être
vérifiés et complétés si possible par l’examen microscopique. Leur positivité permet une prise
en charge adéquate et rapide des patients. En revanche, leur négativité ne doit pas écarter le
diagnostic (Rogier et al., 2009).
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I.10.3. Le QBC Malaria test ou Quantitative Buffy Coat
Le principe de cette technique microscopique de fluorescence repose sur l’utilisation
d’un fluorochrome (l’acridine orange) capable de se fixer sur le noyau du parasite. La
recherche du Plasmodium se fait dans 50µl de sang recueillis dans un tube à hématocrite,
après concentration par centrifugation et lecture au microscope à fluorescence.
La sensibilité de cette technique serait comparable à celle de la GE pour des infections
supérieures à 100 parasites/µl. Elle varie de 41% à 93% pour des parasitémies inférieures à
100 parasites/µL. La spécificité pour P. falciparum est élevée (93-98%) mais chute à environ
50% pour les infections causées par les autres espèces. Le QBC Malaria test est d’usage facile
et de réalisation rapide ; il constitue actuellement le meilleur test de dépistage pour des
biologistes non spécialisés et pour les structures traitant un grand nombre de tests de
Plasmodium. Malheureusement, son emploi nécessite un matériel et des réactifs coûteux ce
qui limite son utilisation. Il ne permet pas non plus le diagnostic d’espèce et le calcul de la
parasitémie.
I.10.4. Détection des acides nucléiques par les techniques d’amplification génique
L’amplification génique par PCR est la technique la plus utilisée. C’est la technique la
plus sensible qui permet de détecter de très faibles parasitémies de l’ordre de 0,3 parasite/µL
de sang avec une possibilité de quantification de l’ADN plasmodial en utilisant la PCR
quantitative. L’amplification du gène codant pour la petite sous unité 18S de l’ARN
ribosomal du plasmodium permet aussi l’identification des espèces en cause en utilisant une
PCR niché. En dépit de ses avantages, la biologie moléculaire ne peut remplacer en pratique
courante les méthodes classiques de diagnostic du paludisme en raison du temps de réalisation
relativement long, non compatible avec l’urgence du diagnostic du paludisme. La PCR est
essentiellement indiquée pour la détection des faibles parasitémies en cas de forte suspicion et
de difficulté de confirmation microscopique notamment chez les voyageurs sous
chimioprophylaxie. Elle est également d’un apport appréciable dans l’identification des
espèces plasmodiales, le suivi post-thérapeutique et l’étude des gènes impliqués dans la
résistance aux antipaludiques. Ses exigences en matériel et son coût font qu’elle est encore
réservée aux laboratoires spécialisés (Siala et al., 2010).
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I.10.5. Détection des anticorps antiplasmodiaux
La sérologie n’a pas de place dans le diagnostic des accès palustres aigus en raison de
l’apparition tardive des anticorps (Ac) antipalustres par rapport à l’émergence des parasites
dans le sang. Le diagnostic sérologique se heurte également à des difficultés d’interprétation.
En effet, la présence d’Ac spécifiques peut témoigner soit d’une infection palustre évolutive
soit d’un paludisme antérieur dans la mesure où les Ac peuvent persister 2 à 3 ans après
l’infection. Le diagnostic immunologique est indiqué dans certaines formes cliniques
chroniques telles le paludisme viscéral évolutif et la splénomégalie palustre hyper-immune au
cours desquelles les Ac sont à des taux élevés alors que les recherches parasitologiques sont le
plus souvent négatives. La sérologie est aussi utile en rétrospectif en cas de traitement
présomptif ou d’automédication. Elle reste par ailleurs, très utilisée dans le dépistage des
donneurs de sang dans le cadre de la prévention du paludisme post-transfusionnel et dans les
enquêtes épidémiologiques (Siala et al., 2010).
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Tableau II : Méthodes de diagnostic des infections plasmodiales
Volume de sang
examiné
Sensibilité pour P.
falciparum (95% de
chance de détection)
Temps de réalisation
en minutes
Coût (en euros)
Diagnostic de P.
falcipaum
Diagnostic de P.
vivax
Diagnostic de P.
ovale et P. malaria
Estimation de la
densité parasitaire
Avantages
Inconvénients
Goutte épaisse
Frottis mince
QBCTM Malaria test
TDR HRP2
TDR LDH
PCR
3 – 4µL
1 – 1,5µL
55 – 65µL
5 – 15µL
5 – 15µL
10 – 100µL
24/µL pour 100 champs
30 – 60
1 – 5/µL
100 – 300µL
100 – 300µL
0,001 – 0,3/µL
30 – 60
< 10
5 – 20
5 – 20
40 – 60 (PCR
0,03 – 0,7
Oui
0,03 – 0,7
Oui
1,5
0,4 – 3
Oui
0,4 – 3
Oui
Oui
Oui
Non
Non
Oui
Oui
Oui
Oui
Non
Non
Oui mais sensibilité
Oui
Evoqué par le monomorphisme des formes
temps réel)
Environ 15
Oui
médiocre
Oui
Oui
Méthode de référence
Morphologie des hématies
parasitées conservée
Dépend de l’expérience
technique et d’une source
d’électricité
Dépend de l’expérience
technique et d’une source
d’électricité
Non
Non
Facilité d’emploi
sans besoin
d’électricité
Coût initial
d’investissements
élevé. Dépend de
l’expérience technique
et d’une source
d’électricité
Positivité
persistant 15 jours
après guérison
Source : Rogier et al., 2009
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Non
Non
Facilité d’emploi
sans besoin
d’électricité
négativité rapide
après guérison
Technicité
réservée à des
centres
spécialisés.
Coût des
investissements
I.11. Traitement du paludisme et prophylaxie
I.11.1. Traitement du paludisme
Un traitement antipaludique doit être efficace, accessible, bien toléré et peu onéreux
car les populations majoritairement concernées ont des faibles revenus avec un accès au soin
limité. La prise en charge thérapeutique du paludisme dépend de plusieurs facteurs
notamment de l’espèce de parasite en cause, de la gravité de l’infection, de l’âge de la
personne atteinte et du profil de résistance aux médicaments antipaludéens dans la région du
monde où la personne a contracté la maladie.
I.11.1.1. Cibles plasmodiales
Le parasite dispose pour son développement intra érythrocytaire d’un métabolisme et de
moyens de défenses spécifiques qui constituent autant de cibles aux antipaludiques. Nous
distinguerons :
 la vacuole digestive du parasite qui est le siège de la digestion de l’hémoglobine, de la
cristallisation de l’hème et où des moyens de défense spécifiques contre le stress oxydatif sont
retrouvés.
 un cytoplasme comportant le cytosol et deux organites essentiels, les mitochondries et
l’apicoplaste. Ils sont nécessaires à la biosynthèse des acides nucléiques.
 une membrane plasmique, constituée de phospholipides, des canaux calciques et
parasitophores, siège du trafic nutritionnel.
Les antipaludiques peuvent être classés selon leur mode d’action en schizonticides
actifs sur la phase asexuée érythrocytaire, et gamétocyticides actifs sur la phase sexuée
érythrocytaire. Les amino-8-quinoléines (tafénoquine et primaquine) sont des molécules
actives sur la phase hépatique du parasite. Du fait de leur index thérapeutique faible, leur
usage exige une surveillance clinique rapprochée.
I.11.1.2. Molécules antipaludiques
 Les schizonticides
Ce groupe comprend les dérivés quinoléiques (chloroquine, amodiaquine) et les
dérivés de l’artémisinine (méfloquine, halofantrine, luméfantrine). Ces molécules interfèrent
avec la digestion de l’hémoglobine dans la vacuole nutritive en inhibant la formation de
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l’hémozoïne. Les dérivés de l’artémisinine (artésunate, artéméther, etc) de type peroxyde
interfère aussi dans la digestion de l’hémoglobine, par libération de radicaux libres, toxiques
pour le parasite. Les dérivés de l’artémisinine ont une action gamétocytocide, qui réduit la
transmission et limite les risques de voir émerger des résistances.
 Les inhibiteurs des acides nucléiques ou antimétaboliques
Ils bloquent la division du noyau de l’hématozoaire. Ce groupe comprend les antifolates, les naphtoquinones et les antibiotiques.
Les anti-folates sont répartis en deux familles, les anti-foliques (sulfamides, dont la
sulfadoxine et sulfone) et les anti-foliniques (proguanil et pyriméthamine). Ils agissent au
niveau de la voie de synthèse des folates, qui sont essentiels à la biosynthèse des acides
nucléiques du parasite. Les anti-foliques inhibent la dihydroptéroate synthétase (DHPS) qui
produit l’acide folique et les anti-foliniques inhibent la dihydrofolate réductase (DHFR), qui
produit l’acide folinique.
Les naphtoquinones : l’atovaquone est un inhibiteur puissant des fonctions mitochondriales en
bloquant la chaîne de transfert d’électrons au niveau de son enzyme-clé, la dihydroorotate
déshydrogénase. Elle a peu d’impact thérapeutique lorsqu’elle est utilisée seule.
Les antibiotiques : les tétracyclines (doxycycline), les macrolides (érythromycine,
azythromycine, clindamycine) peuvent inhiber la synthèse protéique par inhibition de
certaines fonctions de l’apicoplaste.
 Les associations d’antipaludiques
Les nouveaux antipaludiques qui ont fait l’objet de développements récents sont tous
associés, au moins en bithérapie. Certaines associations sont fixes : l’atovaquone-proguanil,
l’arthéméther-luméfantrine et la chlorproguanil-dapsone. D’autres associations sont libres,
associant toujours un dérivé de l’artémisinine vu la rapidité d’action, l’impact sur la
transmission et l’absence de chimiorésistance de P. falciparum : artésunate-méfloquine,
artésunate-amodiaquine,
artéméther-proguanil
et
artésunate-sulfadoxine-pyriméthamine.
(Njomnang Soh, 2008).
Page 23
I.11.2. Prophylaxie
La lutte contre le paludisme repose en partie sur le contrôle des vecteurs qui vise à
supprimer ou limiter le contact homme-vecteur pour prévenir l’infection par des
plasmodiums. Elle est complémentaire de la lutte contre le parasite lui même par la
chimioprophylaxie, les traitements préventifs intermittents ou les traitements curatifs. Une
évaluation entomologique est cependant indispensable pour vérifier et surveiller l’efficacité
des interventions anti vectorielles.
I.11.2.1. La lutte antivectorielle
 La lutte contre les anophèles au stade adulte
 Moustiquaires imprégnées d’insecticide (MII)
Dans l’attente d’un vaccin et face au phénomène de la chimiorésistance de
Plasmodium falciparum aux médicaments antipaludiques, la lutte anti vectorielle demeure de
nos jours une des composantes majeures de la lutte contre le paludisme en prévenant ou en
réduisant la transmission de l’infection plasmodiale. Les moustiquaires imprégnées
d’insecticide (MII) offrent une bonne protection mécanique pour limiter le contact entre les
vecteurs et les humains. Lorsqu’une proportion importante d’une population humaine dort
sous des MII, les anophèles cherchant à les piquer sont fortement exposés à l’insecticide et
ont une durée de vie diminuée. La transmission des plasmodiums peut alors être diminuée
pour l’ensemble de la communauté humaine; il s’agit de l’effet de masse.
 Pulvérisations intra domiciliaires d’insecticides à effet rémanent
Les pulvérisations intra-domiciliaires à l’aide d’insecticides à effet rémanent agréés
par l’OMS (y compris le DDT : dichloro-diphényl trichloroéthane) constituent encore l’une
des principales interventions de lutte anti vectorielle destinées à réduire ou interrompre la
transmission du paludisme dans tous les contextes épidémiologiques (OMS, 2006).
 La lutte contre les anophèles au stade larvaire
Les moyens de lutte contre les larves permettent d’empêcher la prolifération des
moustiques. La lutte contre les larves peut prendre plusieurs formes : éliminer les lieux de
ponte, modifier les larves pour qu’elles ne puissent plus s’y développer, rendre les lieux de
ponte inaccessibles aux moustiques adultes, introduire dans les lieux de ponte des poissons
larvivores ou d’autres prédateurs, épandre des larvicides et des inhibiteurs de croissance des
insectes.
Page 24
I.11.2.2. Traitement préventif
Un traitement préventif intermittent est recommandé pour les groupes de population
vivant dans des zones où le taux de transmission reste élevé et qui sont particulièrement
exposés au risque d’une infection à Plasmodium ou à ses conséquences, notamment les
femmes enceintes et les nourrissons. La plus part des pays en Afrique subsaharienne ont
adopté le TPI pour les femmes enceintes comme politique nationale. Aucun pays n’a pour
l’instant fait du TPI un élément de sa politique nationale dans le cas des nourrissons depuis sa
recommandation en 2009 (OMS, 2011).
I.11.3. Résistances antipaludiques de Plasmodium et résistance des vecteurs aux
insecticides
I.11.3.1. Résistances antipaludiques
Au cours de leur évolution, les micro-organismes ont su déjouer les pièges qui leur
sont tendus par l’environnement et notamment leur hôte (immunité et utilisation de molécules
anti-infectieuses). L’émergence et la diffusion de la résistance aux antipaludiques posent un
sérieux problème de santé publique. P.
falciparum est maintenant résistant à tous les
antipaludiques utilisés même aux derniers commercialisés comme les associations à base
d’artémisinine (figure 7). Les échecs prophylactiques ou thérapeutiques entrainent une
réémergence du paludisme s’accompagnant d’une augmentation de la transmission, de la
morbidité et de la mortalité. La connaissance des mécanismes de résistance permet le
développement de nouvelles molécules qui diminueront la résistance, d’identifier les cibles de
nouveaux antipaludiques et enfin d’identifier des marqueurs moléculaires pour la surveillance
de la résistance aux antipaludiques. La résistance est souvent associée à une altération
d’enzymes (mutations) clés qui sont des cibles d’antipaludiques à l’altération de
l’accumulation de l’antipaludique dans le parasite résultant d’une diminution d’entrée ou
d’une augmentation de sortie (efflux) de la molécule, voire aux deux (Pradines et al., 2010).
Page 25
Figure 7: Introduction des antipaludiques et apparition des résistances (R) de P. falciparum
Source : Pradines et al, 2010
I.11.3.2. La résistance des vecteurs aux insecticides
Les résistances des vecteurs aux insecticides sont observées dans de nombreuses
populations de vecteurs partout dans le monde. Ces résistances peuvent être dues à la
détoxification naturelle des insecticides par des enzymes ou à une mutation de la cible de
l’insecticide (Djogbénou, 2009).
I.12. Hémoglobines S et C Groupes sanguins ABO et paludisme
Les facteurs génétiques de l’hôte affectent aussi l’évolution de la maladie. Parmi ces
facteurs génétiques, les polymorphismes de l’hémoglobine jouent un rôle essentiel.
I.12.1. Hémoglobines S et C (HbS et HbC)
Les polymorphismes génétiques de HbS et HbC assurent la protection contre les
formes simples et sévères du paludisme. HbC est aussi associée à la protection contre le
paludisme en Afrique de l’ouest. Elle est d'environ 90% chez les homozygotes HbCC et de
30% chez les hétérozygotes HbAC au Burkina Faso (Modiano et al., 2001 ; Rihet et al, 2004).
Page 26
HbAS joue un rôle dans la mise en place d’une immunité acquise. Une étude faite au Kenya a
montré l’acquisition accélérée de l'immunité contre le paludisme simple chez les enfants âgés
de moins de 10 ans porteurs de HbAS (Williams et al., 2005). L’hémoglobine S est présente
dans les régions tropicales et équatoriales en Afrique, en Arabie Saoudite et en Inde tandis
que l’allèle C se rencontre dans une région restreinte en Afrique de l’ouest et du centre
(Modiano et al., 2008).
I.12.2. Groupes sanguins ABO
Le polymorphisme du complexe des groupes sanguins ABO joue un rôle dans
l’évolution du paludisme. Il a été montré que les individus du groupe sanguin O étaient plus
protégés contre le paludisme sévère que les individus des autres groupes sanguins. Une faible
séquestration et un taux réduit de rosettes par les érythrocytes du groupe sanguin O infectés
par P. falciparum assurent cette protection. Le groupe sanguin A, a quant à lui été associé au
paludisme sévère (Rowe et al., 2007).
I.13. Homocystéine, Folates, Anémie et paludisme
I.13.1. L’homocystéine
L’homocystéine (HCY) est un acide aminé soufré qui ne rentre pas dans la structure
des protéines. Dans le cycle de la méthionine, l’HCY constitue l’intersection de deux voies
métaboliques appelées reméthylation et trans-sulfuration. La complexité des voies
métaboliques de l’HCY et de la méthionine et l’équilibre parfait nécessaire au bon
fonctionnement
de ce cycle peut être largement influencée par le paludisme dû à P.
falciparum. En fait, le parasite utilise le métabolisme des polyamines, essentiel à sa croissance
et modifie le taux du glutathion, un puissant antioxydant naturel, dans la cellule hôte infectée
(Chillemi et al., 2004) (Figure 8).
 La voie de la reméthylation
Elle assure la re-méthylation de l’HCY en méthionine selon deux réactions
enzymatiques distinctes. Ce transfert du groupe méthyl, qui permet la synthèse de la
méthionine, n’est possible qu’en présence de méthylcobalamine ; d’où la synergie d’action
entre les folates et la vitamine B12.
Page 27
 La voie de la transsulfuration
La majorité de l’HCY n'est pas re-méthylée mais catabolisée en cystéine par la voie de la
trans-sulfuration. Cette voie permet à la méthionine d’apporter un atome de soufre pour la
formation de cystéine. Ces deux réactions nécessitent la présence d’un cofacteur enzymatique,
le phosphate de pyridoxal ou vitamine B6.
Figure 8 : Schéma simplifié des voies de polyamines et de l’homocystéine
Soucre : Chillemi et al., 2004
Page 28
I.13.2. Les folates ou vitamine B9
La vitamine B9 ou folacine, aussi appelée acide folique est présente dans les aliments
sous forme de polyglutamates. Les folates sont impliqués dans la synthèse des acides
nucléiques (ADN, ARN), dans les processus de méthylation et dans le contrôle du taux de
synthèse de l’homocystéine. De ce fait, leur carence se traduit par la dérégulation du
métabolisme de transfert des monocarbones, conduisant entre autres, à une accumulation de
l’homocystéine (Chango, 2008), aux risques de cancer, de troubles cardio-vasculaires et
neurologiques. La perturbation de la division cellulaire peut se traduire chez la femme
enceinte par une anomalie de fermeture du tube neural du fœtus au cours de l’embryogenèse
(Loiseau, 2009). Les taux élevés d’homocystéine jouent un rôle dans les complications de
grossesse (risque accru d’éclampsie, d’enfants de faibles poids à la naissance, de mort-nés et
de prématurés) (Vollset et al., 2000).
I.13.3. L’anémie
L’anémie est définie lorsque la concentration d’hémoglobine est inférieure au seuil
limite établi, tel qu’il est défini par l’OMS en 2001. Ce seuil se situe dans une fourchette
allant de 11 g/dL pour les femmes enceintes et pour les enfants de 6 mois à 5 ans, à 12 g/dL
pour les femmes non enceintes et à 13 g/dL pour les hommes. L’anémie peut être
diagnostiquée en analysant le taux d’hémoglobine dans le sang ou en mesurant la proportion
de globules rouges dans le sang entier (hématocrite). Des carences en nutriments ont été
corrélées à l’anémie, dont les carences en fer, en vitamines A, B-6 et B-12, en riboflavine en
acide folique. Les infections générales et les maladies chroniques figurent également dans les
causes de l’anémie (USAID et INACG, 2003). Par exemple, le risque d’anémie augmente
quand les personnes sont exposées au paludisme et aux helminthiases. Il existe de nombreuses
autres causes d’anémie, notamment des anomalies héréditaires telles que la thalassémie. Le
paludisme est cause d’anémie suite à la destruction des érythrocytes et à l’inhibition de la
production de nouveaux globules rouges.
Page 29
II. MATERIEL ET METHODES
II.1. Cadre d’étude
Notre cadre d’étude comprenait le Centre Médical Saint Camille (CMSC) et le Centre
de Recherche Biomoléculaire Pietro Annigoni (CERBA) qui dépendent du district sanitaire
du secteur 30. Le CMSC comprend une maternité, un service de pathologie néonatale, un
service de pédiatrie, un service de santé maternelle et infantile (SMI) où nous avons recruté
les femmes, un dispensaire adulte, un dépôt pharmaceutique, un cabinet dentaire, un service
d'imagerie médicale et un laboratoire d'analyse (parasitologie, bactériologie, biochimie,
hématologie, sérologie, immuno-virologie, biologie moléculaire). Le CERBA dans lequel
nous avons effectué nos analyses est une fédération de plusieurs laboratoires : le Laboratoire
de Biologie et de Génétique moléculaires (LABIOGENE-UFR SVT, Université de
Ouagadougou), le laboratoire d’analyse médicale et le centre de recherche biomoléculaire.
II.2. Population d’étude
Deux cent une (201) femmes âgées de 18 à 39 ans venues pour leur première
consultation prénatale à la SMI (Santé Maternelle et Infantile) du CMSC ont été incluses dans
l’étude. Un questionnaire a été élaboré pour recueillir des données sociodémographiques et
la méthode de prophylaxie antipalustre utilisée par chaque femme. La collecte des
échantillons s’est déroulée du 23 septembre au 20 octobre 2010 (période de haute
transmission) au CMSC.
Chez les femmes sélectionnées, 6ml de sang veineux ont été prélevés et répartis dans
deux tubes EDTA et un tube sec. Le premier tube EDTA a servi à la recherche de l’antigène
HRP2, à la détermination de la parasitémie de P. falciparum sur goutte épaisse, et au dosage
du taux d’hémoglobine. Le second tube EDTA est centrifugé et le plasma a servi au dosage
des folates, de l’homocystéine. Le sérum du tube sec a servi au dosage du fer sérique.
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 Critères d’inclusion
Les femmes enceintes ayant au moins 18 ans et suivant les visites prénatales au CMSC
et ne présentant pas de suspicion clinique de paludisme et consentantes à l’étude.
 Critères de non-inclusion
 Les femmes enceintes de moins de 18 ans.
 Les femmes enceintes malades du paludisme.
II.3. Test rapide, goutte épaisse et densité parasitaire
 Test rapide (ACON Malaria P.f., San Diego ; USA)
La bandelette de test rapide du paludisme est un test immunologique qualitatif basé
sur la détection de l'antigène HRP2 dans le sang total. Les bandelettes contiennent des
anticorps monoclonaux (anti-HRP2) de Plasmodium falciparum. Pendant le test le mélange
(sang total plus anticoagulant) migre par capillarité vers le haut de la membrane. Si
l'échantillon contient des antigènes de Plasmodium, une ligne rouge apparaîtra dans la région
de test. L'absence de la ligne rouge dans la région de test indique que le spécimen ne contient
pas d'antigène de Plasmodium falciparum. Pour servir de procédure de contrôle une ligne de
couleur apparaîtra toujours dans la région de contrôle validant ainsi le test (figure 9).
Figure 9: Représentation des résultats de test rapide du paludisme
Page 31
 Goutte épaisse et densité parasitaire
Déposer une goutte de sang au milieu d'une lame de microscope et, à l'aide du coin
d'une autre lame, étaler la goutte de sang jusqu'à obtenir un diamètre de 10 à 15 mm
(figure 10).
Figure 10 : Une goutte épaisse
Lorsque les étalements sont secs, colorer pendant environ 30 mn au Giemsa dilué au
1/10, laver doucement et laisser sécher. Au microscope, examiner au grossissement 100 la
goutte épaisse en utilisant de l'huile à immersion. Pour estimer la densité parasitaire, compter
le nombre de parasites présents en comptant 200 leucocytes. Ce nombre est multiplié par 40
pour avoir la parasitémie en parasite/µL.
II.4. Electrophorèse de l’hémoglobine
Le principe consiste en la migration, dans un champ électrique, d'un hémolysat
d'hématies lavées, l'échantillon du patient étant analysé parallèlement à ceux de témoins
normaux et pathologiques.
Mettre 4 mL de solution hémolysante contenant 1% de fluorure de sodium, 12% de
NaCl et 1,5% d’oxalate de potassium dans des tubes à essai. Ajouter 3 gouttes de sang et
centrifuger 30 secondes à 1500 rpm. Verser le surnageant et ajouter au culot 3 gouttes de
saponine à 1% et porter au vortex pour hémolyser les hématies. Par des capillaires, déposer
des spots sur le cellogel, lancer la migration 45 minutes à 200V avec du tris-glycine comme
tampon de migration.
Page 32
II.5. Dosage colorimétrique du taux d’hémoglobine
Le dosage a été effectué en utilisant un kit de dosage colorimétrique (Cypress
DIAGNOSTICS, Belgique) et un spectrophotomètre (MICROLAB 200).
Principe : l’hémoglobine est oxydée par le ferricyanure de potassium en
méthémoglobine laquelle est convertie en cyanométhémoglobine par le cyanure de potassium.
L’intensité d’absorption de la cyanométhémoglobine est proportionnelle à la concentration de
l’hémoglobine.
Protocole ; mélanger 20 µL de sang dans 5 mL de solution de travail, vortexer et
incuber 3 minutes à température ambiante. Ce mélange est lu contre un blanc (solution de
travail).
Concentration de l’hémoglobine = (Abs échantillon/ Abs standard) X 15 en g/dL. Limite de
détection 0,1 g/dL ; linéarité jusqu’à 20 g/dL.
II.6. Détermination des groupes sanguins
Nous avons utilisé des anticorps anti-A, anti-B, anti-AB et anti-D du BHAT BIOTECH (Inde).
La détermination du groupe sanguin consiste à rechercher la présence ou l'absence des
antigènes A et B présents sur les globules rouges et les anticorps correspondants aux
antigènes absents dans le sérum.
Protocole : sur une plaque, déposer 4 gouttes de sang à des endroits différents sur la
même ligne pour chaque échantillon. Ajouter une goutte du réactif anti-A à la première
goutte, une goutte du réactif anti-B à la deuxième goutte, une goutte du réactif anti-AB à la
troisième goutte et une goutte du réactif anti-D à la dernière goutte puis mélanger. Lire les
résultats au bout de deux minutes (figure11).
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Groupe O+
Groupe A+
Groupe B+
Figure 11 : Photo de groupes sanguins A, B et O
II.7. Dosage du fer sérique
Nous avons utilisé un kit de dosage colorimétrique (Cypress DIAGNOSTICS,
Belgique) et un spectrophotomètre (HOSPITEX).
Principe du dosage : Dans le sérum, le fer est lié à la transferrine. En présence d’une
faible acidité, le fer se dissocie de son complexe alors que les protéines sériques restent en
solution. Après sa réduction par l’acide ascorbique, le fer est converti et se lie à la ferrozine
pour former un complexe coloré dont l’intensité est proportionnelle à la concentration du fer
dans l’échantillon.
Page 34
Tableau III : Protocole de dosage du fer sérique
Réactifs
Réactif blanc
Standard
Echantillon
Echantillon
blanc
Standard (Fer aqueux)
200 µL
200 µL
------
------
Echantillon
------
------
200 µL
200 µL
R1 : (tampon acétate) + R2
1 mL
1 mL
1 mL
1 mL
-------
1 goutte
(réducteur : acide ascorbique)
R3 (couleur : ferrozine)
------
1 goutte
Mixer et attendre 10 minutes à la température ambiante. Mesure au spectrophotomètre du standard et
de l’échantillon versus le blanc de standard /échantillon. La couleur est stable au moins 30 minutes.
II.8. Dosage des folates et de l’homocystéine
Ces dosages ont été effectués en utilisant un kit de dosage des folates et un kit de
dosage de l’homocystéine pour AxSYM (ABBOTT, USA).
II.8.1. Dosage immunologique par polarisation de fluorescence (FPIA) de l’homocystéine
Principe : l’homocystéine (HCY) liée est réduite en homocystéine libre qui est à son
tour convertie en S-Adenosyl-L-Homocystéine (SAH) comme décrit ci-dessous. L’HCY, ses
formes disulfures ainsi que les formes mixtes protéine-HCY présentes dans l’échantillon sont
réduites en homocystéine libre sous l’action du dithiothréitol (DTT).
HCY-SS-HCY (homocystéine)
R1-SS-HCY (R1 = résidu thiol)
DTT
HCY
protéine-SS-HCY
Ensuite l’HCY libre est convertie en SAH utilisant la SAH hydrolase et de l’adénosine en
excès. Le SAH est ensuite dosé par FPIA.
Page 35
Principe du FPIA : l’échantillon, le réactif de prétraitement et le diluant sont mis en
contact et incubés. Une première lecture est prise comme blanc par le système optique FPIA.
Les anticorps (anti-SAH) et les traceurs (substance identique à la substance à doser liée à un
traceur fluorescent) sont ajoutés au mélange réactionnel et incubés. La substance à doser entre
en compétition avec le traceur pour occuper les sites de liaison des anticorps (figure 11). Le
système optique détecte et mesure dans un plan de polarisation bien précis, l’intensité de la
fluorescence émise. La variation de cette intensité détermine la concentration de la substance
à doser dans l’échantillon :

si l’échantillon contient une forte concentration de la substance à doser, il
restera un grand nombre de molécules de traceurs non liées. La lumière polarisée provoque
une excitation de ces petites molécules qui tournent rapidement en émettant de la lumière
dans de nombreux plans et donc pas seulement dans le plan retenu pour la mesure; l’intensité
lumineuse mesurée sera donc faible ;

si la concentration de la substance à doser est faible dans l’échantillon, un
grand nombre de molécules de traceurs se lieront aux anticorps formant de grosses molécules,
plus lourdes; ces molécules tournent plus lentement en émettant de la lumière polarisée dans
le même plan. L’intensité de la lumière mesurée dans ce plan de polarisation sera donc
intense.
Protocole : mettre 150 µL de plasma ainsi qu’un contrôle bas, normal, et haut dans les
cartouches de réaction et lancer l’analyse.
Figure 12 : Compétition entre la substance à doser et le traceur
Source : manuel de l’AxSYM
Page 36
II.8.2. Dosage des folates
Principe : le dosage AxSYM Folate est basé sur une technologie par capture d’ions. La
solution de capture d’ions, ammonium quaternaire de poids moléculaire élevé, est distribuée
sur la matrice en fibres de verre. Une charge positive est ainsi transmise à la matrice, ce qui la
rend capable de capturer les complexes d’analytes chargés négativement. Au cours du dosage,
il y a formation de complexes polyanions-analytes chargés négativement qui sont capturés par
interaction électrostatique avec la matrice en fibres de verre chargée positivement. Le dosage
AxSYM Folate utilise un réactif soluble de liaison composé de protéines de liaison des folates
(FBP : Folate Binding Protein) couplées à des anticorps monoclonaux, couplés à leur tour de
manière covalente à la carboxyméthylamylase (polyanion). Au cours du dosage AxSYM
Folate, il y a formation de complexes d’analytes chargés négativement grâce à la réaction de
liaison entre les folates et le réactif soluble de liaison. Les complexes d’analytes chargés
négativement sont capturés par interaction électrostatique avec la matrice en fibres de verre
cationique. Les folates sont quantifiés par la mesure de la population des sites FBP non
occupés liés à la matrice, en utilisant un conjugué d’acide ptéroïque (un analogue des folates)
et de la phosphatase alcaline comme molécule génératrice de signal, ainsi qu’un substrat le
phosphate de méthyl-4-ombelliféryl. La vitesse de formation du méthyl-4-ombelliférone
(produit fluorescent) est mesurée. Cette vitesse est proportionnelle à la concentration des
folates dans l’échantillon.
Protocole : mettre 150 µL de plasma ainsi qu’un contrôle bas, normal, et haut dans les
cartouches de réaction et lancer l’analyse.
II.9. Considérations éthiques
Le comité d’éthique du Centre Médical Saint-Camille et du CERBA a approuvé cette
étude et chaque femme a donné son consentement avant la collecte du sang.
II.10. Analyses statistiques
Les données ont été saisies sur Excel 2007 puis analysées avec le logiciel standard
Statistical Package for Social Sciences (SPSS) version 17 pour windows et par le logiciel
EpiInfo version 6. Le seuil de signification statistique a été fixé à p < 0,050.
Page 37
III. RESULTATS
III.1. Caractéristiques socio-économiques et professionnelles des femmes
Les femmes enceintes se présentant au laboratoire du CMSC pour des examens
prénatals ont consentis librement à faire un test de paludisme et à faire parti de notre étude.
Leur âge variait entre 18 et 39 ans, avec une moyenne d’âge de 25,23 ± 5,20 ans et parmi
elles, 77,61% avaient moins de 30 ans. Le tableau IV récapitule les caractéristiques
professionnelles et socio-économiques des femmes. Les ménagères représentaient 61,19% ;
les analphabètes 41,79% et 28,88% avaient un niveau d'instruction post-primaire et 2,49%
étaient salariées. Parmi les femmes enceintes, 42,79% étaient des multipares ayant au moins
3
grossesses ; 34,82% étaient des primipares et seules 42,29% des femmes enceintes
dormaient sous une moustiquaire imprégnée. La prise d’un supplément médicamenteux (fer
acide folique) ne concernait que 40,30% des femmes.
Page 38
Tableau IV : Caractéristiques professionnelles et socio-économiques des femmes
Nombre
Pourcentage (%)
Ménagères
123
61,19
Secteur informel
60
29,85
Salariées
05
02,49
Elèves/étudiantes
13
06,47
Illettrées
84
41,79
Primaire
59
29,35
Post-primaire
58
28,88
≤ 20
50
24,88
21 à 25
59
29,35
26 à 30
59
29,35
31 à 39
33
14,42
1
70
34,82
2
45
22,39
≥3
86
42,79
1er trimestre
70
34,83
2ème trimestre
96
47,76
3ème trimestre
35
17,41
Oui
85
42,29
Non
116
57,71
Oui
81
40,30
Non
120
59,70
Caractéristiques
Profession
Education
Age en années
Nombre de grossesse
Stade de la grossesse
Moustiquaires
imprégnées
Fer acide folique
Page 39
III.2. Paramètres hématologiques et biochimiques des femmes enceintes
III.2.1. Taux hémoglobine et fer sérique
Le tableau V résume les taux d’hémoglobine et du fer sérique des femmes. La valeur
moyenne du taux d’hémoglobine était de 10,49 ± 1,73 g/dL. Les femmes enceintes ayant un
taux d’hémoglobine < 11 g/dL représentaient 61,19% et celles ayant un taux d’hémoglobine
situé entre 7 g/dL et 10 g/dL représentaient 36,81%. La majorité des femmes avait un taux
normal de fer sérique (83,08%) sans relation statistiquement significative entre taux de fer et
anémie.
Tableau V : Taux d'hémoglobine et de fer sérique
Paramètres
Valeurs
Nombre
%
(g/dL)
Anémie sévère
<7
2
1,00
Anémie modérée
[7 – 10[
74
36,81
Anémie légère
[10 -11[
47
23,38
Absence d’anémie
≥ 11
78
38,81
Bas
< 7,16
21
10,45
Normal
7,16 à 26,85
167
83,08
Haut
> 26,85
13
6,47
Taux d’hémoglobine
(10,49 ±1,73g/dL)
Fer sérique
(14,64 ±1,96 µmol/L)
III.2.2. Comparaison goutte épaisse et test de dépistage rapide de Plasmodium
falciparum
Le taux de positivité à P. falciparum était respectivement de 30,35% (61/201) et
24,38% (49/201) par TDR et goutte épaisse (P = NS). La densité parasitaire moyenne était de
4058 parasites/µL (Tableau VI).
Page 40
Tableau VI : Résultats des TDR et de la goutte épaisse
GE négative
GE positive
Total
TDR négatif
140
0
140
TRD positif
12
49
61
Total
152
49
201
La sensibilité de notre TDR ou la probabilité que le test soit positif si la goutte épaisse
est positive se calcul par la formule suivante :
VP
Sensibilité = ---------------VP+FN
Quant à la spécificité ou la probabilité d’obtenir un test négatif si la goutte épaisse est
positive, elle est donnée par la formule suivante :
VN
Spécificité = ---------------VN+FP
VP (vrais positifs) représente le nombre de cas positifs à la goutte épaisse et au TDR.
VN (vrais négatifs) est le nombre de cas négatifs à la goutte épaisse et au TDR.
FP (faux positif) représente le nombre de cas négatifs à la goutte épaisse et positifs au TDR.
FN (faux négatifs) est le nombre de cas positifs à la goutte épaisse et négatifs au TDR.
Le TDR que nous avons utilisé avait une sensibilité de 100% (tableau VII) avec une
spécificité de 92,11%.
Tableau VII : Sensibilité et spécificité des TDR
Effectif
Pourcentage
Intervalle de confiance 95%
(binomiale exacte)
Sensibilité
49 / (49+0) = 49/49
100
92,75 – 100,00
spécificité
140 / (140+12) = 140/152
92,11
86,62 – 95,85
Page 41
III.2.3. Taux d’homocystéine et de folates
La majorité des femmes (90,05%) avait un taux normal d’homocystéine (≤ 12
µmol/L) et 62,19% avaient des taux faibles en folates (<7,7 ng/mL) ; la proportion des
femmes ayant une hyperhomocystéinémie modérée (entre 12 et 30 µmol/L) était de 8,95%
(Tableau VIII). Nous avons remarqué que 16/20 (80,00%) femmes ayant des taux
d’homocystéine élevés avaient leur taux de folates bas. En outre, 77/123 (62,60%) des
anémiées avaient aussi des taux faibles en folates mais avec des différences non
statistiquement significatives (Tableau IX).
Tableau VIII : Taux d’homocystéine et de folates
Paramètres
Folates
(7,01 ± 2,84 ng/mL)
Homocystéine
(10,49 ± 1,73µmol/L)
Nombre
%
< 7,7
125
62,19
≥ 7,7
76
37,81
≤ 12
181
90,05
[12 – 30[
18
08,95
≥ 30
02
1,00
Tableau IX : Corrélation entre les taux d’homocystéine et de folates et entre les taux
d’hémoglobine et de folates
Homocystéine
Paramètres
< 7,7
Folates
≥ 7,7
≤ 12
> 12
Anémiées
Non anémiées
109/181
16/20
77/123
48/78
60,48%
80,00%
62,60%
61,54%
72/181
4/20
46/123
30/78
39,78%
20,00%
37,40%
38,46%
Page 42
III.2.4. Effet de P. falciparum sur les paramètres hématologiques et biochimiques des
femmes enceintes
Sur un total de 201 femmes, cent vingt trois (61,19%) étaient anémiées (taux
d’hémoglobine < 11 g/dL). L’anémie était significativement plus fréquente chez les femmes
infectées par P. falciparum (33,33%) comparativement aux femmes enceintes non infectées
(10,26%) (P= 0,0002) (Tableau X). Aucune différence statistiquement significative n’a été
observée d’une part, entre le stade de la grossesse, la parité et la présence du parasite et
d’autre part entre l’usage ou non de la moustiquaire imprégnée et la présence de P.
falciparum. Cependant, la présence de P. falciparum était significativement réduite chez les
femmes ayant pris un TPI à base de SP (12,73%) comparativement à celles n’ayant pas pris
de TPI (28,77%) (P= 0,0182).
Page 43
Tableau X : Goutte épaisse , taux d’hémoglobine, stade de la grossesse, nombre de grossesse,
utilisation de moustiquaires imprégnées et SP
Paramètres
Goutte épaisse
Négative
Positive
82/123
41/123
(66,67%)
(33,33%)
70/78
8/78
(89,74%)
(10,26%)
1er trimestre
55/70
15/70
N= 70/201 (34,83%)
(78,57%)
(24,43%)
68/96
28/96
N= 96/201 (47,76%)
(70,83%)
(29,17%)
3ème trimestre
29/35
6/35
N= 35/201 (17,41%)
(82,86%)
(17,14%)
1
53/70
17/70
N= 70/201 (34,83%)
(75,71%)
(24,29%)
2
34/45
11/45
N= 45/201 (22,39%)
(75,56%)
(24,44%)
≥3
65/86
21/86
N= 86/201 (42,78%)
(75,58%)
(24,42%)
104/146
42/146
N= 146/201 (72,64%)
(71,23%)
(28,77%)
Oui
48/55
7 /55
N= 55/201 (27,36%)
(87,37%)
(12,73%)
Non
88/116
28/116
N= 116/201 (57,71%)
(75,86%)
(24,14)
Oui
64/85
21/85
N= 85/201 (42,29%)
(75,29%)
(24,71%)
Présence d’anémie
N= 123/201 (61,19%)
Absence d’anémie
N= 78/201 (38,81%)
Stade de la grossesse
Nombre de grossesses
Traitement
2
ème
trimestre
préventif Non
(SP)
Moustiquaire imprégnée
P-value
0,0002
NS
NS
0,0182
NS
NS = Non significatif ; en gras P-value significative
Page 44
III.2.5. Prévalence de P. falciparum chez les femmes enceintes en fonction de leurs
groupes sanguins et de leurs types d’hémoglobine
La distribution des types d’hémoglobine chez les femmes enceintes était la suivante :
AA (74,62%) ; AS (7,96%) ; AC (15,92%) ; CC (0,50%) et SC (1,00%) (Tableau XI).
Le taux d’infection à P. falciparum respectivement de 26,00%, 25,00% et 18,75% chez les
femmes enceintes porteuses d’hémoglobine AA, AS et AC (P = NS).
Le taux de fer sérique était significativement plus élevé (P < 0,05) chez les femmes enceintes
porteuses d’hémoglobine AC comparativement à celles ayant l’hémoglobine AA (15,62% VS
4, 00%).
Tableau XI : Electrophorèse de l’hémoglobine, l’anémie, goutte épaisse, le taux de fer sérique
Electrophorèse de l’hémoglobine
AA
AC
AS
150/201
32/201
74,62%
Absence
d’anémie
Paramètres
Taux
d’hémoglobine
Anémie
Négatif
Goutte épaisse
Positif
Bas
Taux de fer
Normal
sérique
Haut
CC
SC
16/201
01/201
02/201
15,92%
7,96%
0,50%
1,00%
56/150
14/32
6/16
37,33%
43,75%
37,50%
0/1
2/2
94/150
18/32
10/16
62,67%
56,25%
62,50%
1/1
0/2
111/150
26/32
12/16
74,00%
81,25%
75,00%
1/1
2/2
39/150
6/32
4/16
26,00%
18,75%
25,00%
0/1
0/2
16/150
5/32
10,67%
15,63%
0/1
0/2
128/150
22/32
14/16
85,33
68,75%
87,50%
1/1
2/2
6/150
5/32
2/16
4,00%
15,62%
12,50%
0/1
0/2
0/16
Electrophorèse et anémie : AA → AC, P = 0,498 ; AA → AS, P = 0,990 : AC → AS, P = 0,679
Electrophorèse et goutte épaisse : AA → AC, P = 0,388 ; AA → AS, P = 0,831 ; AC → AS, P = 0,900
Electrophorèse et fer sérique : AA → AC, P = 0,036 ; AC → AS, P = 0,289
Page 45
Le tableau XII résume la distribution des groupes sanguins chez les femmes enceintes. Les
femmes du groupe sanguin O étaient moins infectées par P. falciparum
que celles
appartenant aux autres groupes sanguins sans différence statistiquement significative.
Tableau XII : Infection par P. falciparum en fonction du groupe sanguin des femmes
enceintes.
Groupes sanguins
Paramètres
Négatif
Goutte épaisse
Positif
A
B
AB
O
36/50
46/63
12/17
58/71
72,00%
73,02%
70,59%
81,69%
14/50
17/63
5/17
13/71
28,00%
26,98%
29,41%
18,31%
A → B, P = 0,904; A → AB, P = 0,842; A → O, P = 0,207; B → AB, P = 0,915; B → O, P = 0,229; AB → O, P = 0,494
Page 46
IV. DISCUSSION
Le but de ce travail était l’étude du paludisme asymptomatique chez les femmes
enceintes en visite prénatale au CMSC de Ouagadougou. Nous avons montré que sur les 201
femmes incluses dans notre étude, l’usage du TDR et de la méthode microscopique classique
ont mis respectivement en évidence une infection plasmodiale de 30,35% et de 24,38%. Notre
TDR avait une sensibilité de 100% avec une spécificité plus faible (92,11%). Ce taux de
spécificité serait dû à la persistance dans l’organisme de l’antigène HRP2 malgré l’absence de
P. falciparum ou à des réactions croisées. Nos résultats sont comparables à ceux de Yavo et
al. en 2002 en Côte d’Ivoire avec une sensibilité de 100% et une spécificité de 88,1% et de
ceux de Munier et al. en 2009 au Sénégal avec une sensibilité de 96% et une spécificité de
87%.
Nous avons, grâce à un questionnaire, évalué l’usage des moustiquaires imprégnées
d’insecticide chez les femmes enceintes, seules 42,29% des femmes de notre étude ont
affirmé utiliser une moustiquaire imprégnée. Plusieurs raisons expliqueraient cette faible
utilisation des moustiquaires imprégnées et notamment leur coût.
En effet, le pourcentage
des femmes enceintes appartenant aux groupes ménagères et illettrées utilisant les
moustiquaires imprégnées d’insecticide était parmi les plus faibles. Le faible usage de la
moustiquaire chez certaines femmes enceintes était lié à leur ignorance du risque de
l’infection plasmodiale sur leur santé et celle de l’enfant. De plus, le non usage de la
moustiquaire était aussi lié à son inconfort, en effet, parmi les femmes n’utilisant pas les
moustiquaires imprégnées, plus de 25% affirmaient s’étouffer sous la moustiquaire.
La lutte contre le paludisme chez les femmes enceintes associe l’usage de la
moustiquaire imprégnée et un traitement préventif intermittent (TPI) avec la sulfadoxine
pyriméthamine (SP). Ainsi, toutes les femmes enceintes vivant dans des zones de
transmission stable du paludisme devraient recevoir au moins deux doses de TPI selon les
recommandations de l’OMS. Cependant, seulement 27,36 % de nos sujets ont déjà pris la
première dose de SP et moins de la moitié des femmes prenaient un supplément de fer acide
folique. Ce retard dans la prise de fer acide folique et de SP s’expliquerait par le fait que la
majorité des femmes avait débuté leur consultation prénatale vers leur 5ème mois de grossesse
et ceci pour diverses raisons : soit par ignorance des risques liés à une grossesse mal suivie,
Page 47
soit par manque de moyens financiers. Par ailleurs certaines femmes ont soulevé que pour des
raisons financières, elles ont repoussé leur première visite prénatale.
La prise de TPI a été associée à une prévalence d’infection par P. falciparum de
12,73% chez les femmes qui avaient pris la SP contre 28,77% chez les femmes enceintes qui
n’ont pas reçu de SP. Nos résultats sont comparables à ceux obtenus au Ghana par Wilson et
al. en 2011 où 15,30% des femmes enceintes ayant reçu la SP étaient infectées par P.
falciparum contre 44,70% en absence de traitement préventif.
Paramètres
biochimiques,
parasitologiques
et
hématologiques
et
paludisme
asymptomatique chez les femmes enceintes
L’infection par le plasmodium peut entrainer une variation des taux d’hémoglobine, de
fer des folates et d’homocystéine
pouvant conduire à une anémie ou entrainer des
complications au cours de la grossesse.
L’anémie chez la femme enceinte est un problème majeur de santé publique
puisqu’elle contribue directement ou indirectement à augmenter le taux de morbidité et de
mortalité maternelle et périnatale. L’OMS estimait en 2001 la prévalence de l’anémie selon le
taux d’hémoglobine (< 11 g/dL) chez les femmes enceintes à 52% dans les pays en
développement et à 22,7% dans les pays industrialisés.
Nous avons montré que 61,19% (123/201) des femmes enceintes étaient anémiées
dont 1% présentait une anémie sévère. Nos résultats sont comparables à ceux d’études
antérieures ayant trouvé des taux d’anémie de 66% à Bobo-Dioulasso, 59,6% au Nigéria et
64% au Bénin (Meda et al., 1999 ; Agan et al., 2010 ; Bodeau-Livinec et al., 2011).
Nous avons montré une corrélation entre parasitémie et anémie. En effet, 33,33% des
femmes anémiées avaient une goutte épaisse positive contre 10,26% des femmes qui ne
présentaient pas d’anémie. Les résultats de notre étude sont comparables à ceux d’Erhabor et
al., (2010) et de Jumbo et al., (2011), qui ont montré la présence de parasites chez 66% et
71,6% des femmes anémiées contre 48% et 10,3% chez les femmes non anémiées. Nous
n’avons pas trouvé de corrélation entre la parité et le taux d’hémoglobine. Ceci est en accord
avec l’étude d’Agan et al. au Nigéria qui ont aussi travaillé sur le paludisme asymptomatique
chez les femmes enceintes.
Page 48
Cependant, d’autres études ont montré un taux plus élevé de femmes anémiées chez
les primipares que chez les multipares (Glover-Amengor et al., 2005 ; Ofori et al., 2009 ;
Erhabor et al., 2010). Dans une étude faite en Ouganda il a été montré que le risque d’anémie
était plus élevé chez les femmes enceintes âgées de moins de 20 ans (Ndyomugyenyi, et al.,
2008).
Des carences en nutriments ont été corrélées à l’anémie, notamment les carences en fer
et acide folique. Nous avons montré que 83% des femmes enceintes avaient un taux de fer
sérique normal mais que 62,19% d’entre elles avaient un taux de folates inférieur à la
normale. Ainsi, 62,60% des femmes anémiées avaient un faible taux de folates, ce qui diffère
des résultats d’une étude faite au Nigéria où les femmes présentaient un taux normal de
folates avec une moyenne de 17,9 nmol/L (VanderJagt et al, 2007).
La plus part des femmes (90%) de notre étude avait un taux normal d’homocystéine
(≤12 µmol/L) avec un taux moyen de 10,49 µmol/L, une valeur nettement supérieure à celle
trouvée par Simporé et al. (2000) (3,59 µmol/L) chez les femmes en bonne santé. Cette
différence pourrait s’expliquer par les changements physiologiques intervenant au cours de la
grossesse. Le taux moyen d’homocystéine trouvée dans notre étude était inférieur à celui
trouvé au Nigéria (14.1 µmol/L) par (VanderJagt et al. (2007). Cette différence pourrait être
due à la prévalence de l’hyperhomocystéinemie modérée chez les adolescentes et les adultes
des deux sexes dans la population nigériane (VanderJagt et al. (2000). En effet Simporé et al.
(2000) ont montré que le taux plasmatique d’homocystéine (HCY) variait selon la race, le
sexe, l’âge, les habitudes nutritionnelles etc. Nous avons trouvé une corrélation entre le taux
de folates de d’homocystéine.
Les proportions des différents types d’hémoglobine trouvés dans notre étude étaient
comparables à celles de Hercberg et Galan (1987). Il n’y a pas d’association entre le type
d’hémoglobine et l’anémie chez les femmes enceintes.
Nous n’avons pas non plus trouvé d’association entre la parasitémie, le taux de fer
sérique et les différents types d’hémoglobine. Des études antérieures faites au Burkina ont
prouvé que l’hémoglobine S et C conférait une protection naturelle contre le paludisme
d'environ 90% chez les homozygotes HbCC et de 30% chez les hétérozygotes HbAC
(Modiano et al, 2001). Une étude faite au Kenya a montré l’acquisition accélérée de
l'immunité contre le paludisme simple chez les enfants âgés de moins de 10 ans porteurs de
Page 49
HbAS (Williams et al, 2005). La différence entre ces résultats et ceux de notre étude
s’expliquerait par la taille de notre échantillon mais aussi par l’état de nos sujets qui ne
présentaient pas de symptômes de paludisme.
Page 50
CONCLUSION
Au cours de notre étude, nous avons pu réaliser quelques analyses biologiques, à
savoir, le TDR du paludisme, la goutte épaisse, les taux d’homocystéine, de folates et de fer
sérique, l’électrophorèse de l’hémoglobine et les groupes sanguins chez les femmes enceintes.
On comprend donc l’importance de cette étude car d’une part, elle a permis d’identifier les
femmes ayant un paludisme asymptomatique qui pourrait induire une anémie et d’autre part
identifier les femmes ayant une hyper-homocystéinémie qui pourrait favoriser une
malformation congénitale au niveau de leur fœtus. Nous avons montré que l’usage du TPI
réduisait le taux d’infection et que le paludisme asymptomatique augmentait le risque
d’anémie chez les femmes enceintes.
Il serait nécessaire que le ministère de la santé promeuve d’avantage la sensibilisation,
l’information aux femmes enceintes ou en âge de procréer sur les méfaits du paludisme
pendant la grossesse au vu du faible taux d’utilisation des mesures préventives disponibles
(MII et TPI). Le diagnostic systématique du paludisme devrait être envisagé chez toutes les
femmes enceintes en saison de haute transmission. Le paludisme en général diminue le
rendement économique et intellectuel. Quand le paludisme ne tue pas le fœtus, le stress
oxydatif induit par le parasite chez le fœtus pourrait influencer son quotient intellectuel parce
qu’il aurait à un moment donné une hypoxie. Malheureusement cet état d’étude est difficile à
démontrer.
Perspectives
 Rechercher les marqueurs de résistance à la sulfadoxine pyriméthamine ;
 Etudier la transmission verticale du paludisme par le placenta ;
 Réaliser un génotypage des souches de Plasmodium falciparum chez les
femmes enceintes.
Page 51
Annexe
FICHE INDIVIDUELLE DE COLLECTE DE DONNEES SUR LES FEMMES ENCEINTES POUR
L’ETUDE SUR LE PALUDISME. Compléter ou Cocher les réponses qui vous semblent exactes.
IDENTIFICATION :
Code de la patiente:…………………………Nom et prénoms :………………………………………….….. .
Date de naissance :………………Lieu (ville/pays) naissance :…..…………………. Résidence…….……
Statut matrimonial : Mariée :
Ethnie : Mossi :
Célibataire :
Bobo :
Peulh :
Niveau d’étude : Analphabète :
Profession : Ménagère :
Veuve :
Samo :
Primaire :
Salariée :
Divorcée :
Gourounsi :
Secondaire :
Bissa :
Autre :……
Supérieure/Université :
Commerçante :
Autre :……………………….…
Nombre de grossesses :……….Nombre d’enfants vivants:…………Nombre d’avortements :…………..
Stade de la grossesse : 1er trimestre :
2e trimestre :
3e trimestre :
Nombre de visite au centre de sante depuis le début de la grossesse :
1 visite :
2e visite :
3e visite :
4e visite :
Plus :
PROPHYLAXIE ANTI-PALUDISME :
Utilisez-vous une moustiquaire simple? Oui :
Non :
Utilisez-vous une moustiquaire imprégnée? Oui :
Non :
Quelquefois :
Utilisez-vous autre chose contre les moustiques? Oui :
laquelle?............................
Non :
Si oui
Prenez-vous un médicament contre le paludisme? Oui :
lequel?...............................
Non :
Si oui
A quel stade de la grossesse on vous l’a prescrit ? : 1e trimestre :
2e trimestre :
3e trimestre :
A quelle dose d’administration on vous l’a prescrit ? : ………………........................................................
Prenez-vous un supplément médicamenteux? Oui :
Non :
Si oui lequel…………….……….
ANTECEDENT PALUSTRE :
Avez-vous déjà eu une crise de paludisme ces 6 derniers mois ?
Non :
1 fois :
2 fois :
3 fois :
Plus :
Quel traitement avez-vous fait ?..................................Le traitement a-t-il été efficace ? Oui :
Avez-vous eu une rechute ? Oui :
Non :
Si oui combien de jours après le traitement?..........
Combien de crise de palu avez-vous en moyenne chaque année ? 1 fois:
Non :
2 fois :
plus:
Page 52
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paludisme asymptomatique chez la femme enceinte

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