CG/SM - Laboratoire Labex, expertise toxicologique, toxicologie
Transcription
CG/SM - Laboratoire Labex, expertise toxicologique, toxicologie
L’EXPERTISE TOXICOLOGIQUE En savoir plus : Couplage CG/SM La chromatographie en phase gazeuse couplée à la spectrométrie de masse (CG/SM) est une technique d’analyse fréquemment utilisée dans les laboratoires de toxicologie. Il s’agit d’un couplage entre une méthode de séparation des constituants d’un échantillon (CG) et une méthode de quantification (dosage) des molécules d’intérêt ainsi séparées (SM). Le principe de la chromatographie en phase gazeuse est la séparation des constituants d’un mélange mis sous forme vapeur, et entrainé dans une colonne qui va séparer les différents composés en fonction de leur affinité avec sa surface. Dans un premier temps, l’échantillon d’intérêt passe par une phase d’extraction éventuelle (extraction liquide-liquide ou LLE, par extraction en phase solide ou SPE, précipitation des protéines, etc.) ; ensuite l’échantillon est vaporisé par chauffage, et injecté dans le chromatographe en phase gazeuse. A ce niveau-là, les molécules gazeuses, transportées par un gaz vecteur (hélium, argon, hydrogène ou azote), sont séparées du fait de leurs différentes propriétés chimiques. La colonne du chromatographe est tapissée d’un film (phase stationnaire) qui peut retenir plus ou moins les composés qui y passent selon leurs affinités. A la sortie de la colonne, on peut donc analyser les composés un à un puisqu’ils auront un temps de rétention (temps de sortie de la colonne) qui leur sera propre. On obtient un chromatogramme qui montre une intensité de signal des composés séparés en fonction de leur temps de rétention. Dans un deuxième temps, les composés séparés arrivent dans le spectromètre de masse afin de détection. Ils sont ionisés par un mécanisme d’impact électronique. Les molécules sont ensuite soumises à collision, fractionnées, et les différents fragments sont analysés en déterminant leur masse propre. Ceci permet l’obtention d’un spectre de masse caractéristique, véritable « empreinte génétique » de la molécule-mère. Le chromatogramme et le spectre de masse sont traités simultanément pour le rendu des résultats grâce à une interface informatisée. Avec des étalons internes intégrés durant la préparation de l’échantillon, il est possible de quantifier les composés. Photo d’un appareil CG/SM : Siège social : Laboratoire de Toxicologie : 1 chemin des 3 Sources 95290 L’Isle Adam ZAE les Pointes Courriel : [email protected] Rue des Grands Près 60230 Chambly www.laboratoire-labex.fr Téléphone : 01 30 34 12 05 453 554 966 RCS PONTOISE Télécopie : 01 30 34 12 21 Schéma explicatif : Exemple de chromatogramme : Exemple de spectre de masse : Siège social : Laboratoire de Toxicologie : 1 chemin des 3 Sources 95290 L’Isle Adam ZAE les Pointes Courriel : [email protected] Rue des Grands Près 60230 Chambly www.laboratoire-labex.fr Téléphone : 01 30 34 12 05 453 554 966 RCS PONTOISE Télécopie : 01 30 34 12 21