212 centre Canto : 20 Diva , 1 infinicyte

III.
EXPLOITATION DES RESULTATS ET CORRECTIONS DU FC500
1. CQ1 FC500 : Absence de clone HPN et myélémie
A. Analyse des résultats : CQ1 FC500
a) Recherche sur les leucocytes : CQ1 FC500
5/5 centres ont coché « absence de clone HPN » et n’ont pas rendu de % de clone.
b) Recherche sur les hématies : CQ1 FC500
2/5 centres ont réalisé l’analyse des hématies et ont rendu « absence de clone sur les hématies ».
c) Interprétation: CQ1 FC500
5/5 centres ont bien rendu « absence de clone HPN » clairement et 3/5 ont rendu une limite de sensibilité sur les polynucléaires neutrophiles.
B. Correction et discussion
a) Exemple de gating accepté : CQ1 FC500 leucocytes
i.
CQ1 FC500 leucocytes
0.1%
ii.
CQ1 FC500 hématies
L’analyse des hématies n’était pas à réaliser
b) Exemple d’interprétation acceptée : CQ1 FC500
Absence de clone HPN :
- sur les polynucléaires neutrophiles à la limite de sensibilité de 0,02%
- sur les monocytes à la sensibilité de 0,1%
c) Discussion
Il s’agissait d’un cas démontrant la présence de faux type II sur les polynucléaires neutrophiles en cas de myélémie. Il s’agit d’un piège qu’il faut
connaître pour éviter de rendre des faux clones. Cette myélémie est identifiable (se référer au gating ci-dessus « CD45 low ») et ne génère pas de
type III si la zone HPN type III est correctement placée à l’aide des standards internes. Il n’y avait pas de clone HPN monocytes mais les
monocytes étant en nombre inférieur ne peuvent pas être utilisé pour confirmer une absence de clone sur les polynucléaires neutrophiles.
L’analyse des hématies n’était pas à réaliser.
Pour la conclusion, il est important de :
-
Ecrire clairement « absence de clone HPN »
-
Donner la limite de sensibilité du test et non de la technique sur au moins les polynucléaires neutrophiles.
Celle-ci doit être calculée en divisant le clone minimal (20 événements) divisé par le nombre de polynucléaires analysés
Exemple :
20/105738 * 100=0.018 arrondie à 0.02%
La limite de sensibilité du test égale à 0.02% est inférieure à la limite de sensibilité de la technique (=0.01%), il faut donc rendre
0.02%.
2. CQ2 FC500 : Clone HPN minoritaire
A. Analyse des résultats : CQ2 FC500
a) Recherche sur les leucocytes : CQ2 FC500
5/5 centres ont décrit un clone HPN minoritaire sur les polynucléaires neutrophiles et sur les monocytes avec des résultats similaires :
N=5
MOYENNE
ET
CV(%)
%
type III
PNNS
%
type II
PNNS
0,80
0,07
8,82
%
clone
Nombre de %
%
HPN(II+III) PNNS
type III
type II
PNNS
analysés
MO
MO
0
0,8
331241,2
0,67
0,07 184311,11
0,09
8,82
55,64
13,8
% clone
Nombre de
HPN(II+III) Monos
MO
analysés
0
0,67
23888,4
0,09
6048,45
13,8
25,32
b) Recherche sur les hématies : CQ2 FC500
5/5 centres ont fait l’analyse sur les hématies. 1 centre a décrit la présence de type III, et 4 centres la présence de type II sans type III.
N=4
MOYENNE
ET
CV(%)
Nombre d'hématies
% type II GR analysées
0,50
131956,4
0,01
680,04
2,83
0,52
c) Interprétation: CQ2 FC500
4/5 centres ont décrit un clone HPN minoritaire et 1/5 a décrit la présence d’un clone de très petite taille.
2/5 centres ont rendu un % total de type II+III sur les polynucléaires neutrophiles et sur les monocytes.
1/5 centre a confirmé la présence d’un clone minoritaire sur les hématies et 1 centre a décrit la présence d’un déficit partiel.
2/5 ont demandé un contrôle à distance.
B. Correction et discussion
a) Exemple de gating accepté : CQ2 FC500 leucocytes
i.
CQ2 FC500 leucocytes
ii.
CQ2 FC500 hématies
b) Exemple d’interprétation acceptée : CQ2 FC500
Présence d'un clone HPN minoritaire qui représente 0.79% des polynucléaires neutrophiles confirmé sur les monocytes
(0.67%). Une confirmation sur un deuxième prélèvement est souhaitable. La signification des clones minoritaires (<1%)
reste cependant mal connu.
c) Discussion
Il est important de donner les % de type II et type III pour chaque lignée afin que les ARCs (Attachés de Recherche Clinique) puissent les
retranscrire dans le registre international. Ces % doivent obligatoirement être supérieur à la sensibilité de la technique (0.01% sur les
polynucléaires neutrophiles et 0.1% sur les monocytes).
Ils doivent être suivis d’une conclusion claire pour le clinicien qui mentionne :
-
La présence du clone avec le % total du clone (II+III) sur les polynucléaires neutrophiles
La confirmation sur au moins une autre lignée (Monocytes et/ou hématies) : difficile dans ce cas sur les hématies car
présence de type II sans type III
Dans le cas des clones minoritaires (1%), il est de bon sens de demander une confirmation sur un deuxième prélèvement.
3. CQ3 FC500 : Absence de clone HPN
A. Analyse des résultats : CQ3 FC500
a) Recherche sur les leucocytes : CQ3 FC500
5/5 centres ont coché « absence de clone HPN » sur les polynucléaires neutrophiles et les monocytes.
b) Recherche sur les hématies : CQ3 FC500
2/5 centres ont réalisé l’analyse des hématies et ont rendu « absence de clone HPN sur les hématies »
c) Interprétation: CQ3 FC500
4/5 centres ont écrit clairement « absence de clone HPN », 1 centre a décrit une « absence de déficit en molécules GPIliées ».
3/5 centres ont rendu une sensibilité sur les polynucléaires neutrophiles
B. Correction et discussion
a) Exemple de gating accepté : CQ3 FC500 leucocytes
i.
CQ3 FC500 leucocytes
0.02%
0.2%
ii.
CQ3 FC500 hématies
L’analyse des hématies n’était pas à réaliser
b) Exemple d’interprétation acceptée : CQ3 FC500
Absence de clone HPN :
- sur les polynucléaires neutrophiles à la limite de sensibilité de 0.02%
- sur les monocytes à la limite de sensibilité de 0.2%
c) Discussion
Il s’agissait d’un cas négatif.
Pour la conclusion, il est important de :
-
Ecrire clairement « absence de clone HPN »
-
Donner la limite de sensibilité du test et non de la technique sur au moins les polynucléaires neutrophiles.
Celle-ci doit être calculée en divisant le clone minimal (20 événements) divisé par le nombre de polynucléaires analysés
Exemple :
20/105738 * 100=0.018 arrondie à 0.02%
La limite de sensibilité du test égale à 0.02% est inférieure à la limite de sensibilité de la technique (=0.01%), il faut donc rendre
0.02%.