Prélèvements Virologie - Manuel de Prélèvement

ACHEMINEMENT DES PRELEVEMENTS
DE VIROLOGIE
MILIEU DE TRANSPORT
A utiliser pour tout prélèvement destiné à la CULTURE.
Il est disponible à la Réception Centrale des Analyses (Laboratoires). Dans les services
cliniques, il doit être conservé congelé, et décongelé au moment de son utilisation.
Durée de péremption : 1 an
Deux présentations existent :
En tube
En pot
Pour :
Pour :
- écouvillons (peau, gorge ...)
- sécrétions naso-pharyngées
- biopsies
- urines
- Lavages BronchoAlvéolaires
- Liquides amniotiques
TRANSPORT
Tout prélèvement doit être acheminé immédiatement au laboratoire
+++
En cas d'envoi différé, conserver le prélèvement le moins longtemps possible, selon les
indications suivantes :
NATURE
TEMPERATURE
LCR (PCR)
Congélation si possible
Sinon : 4°
Congélation si possible
Sinon : 4°
TOUT PRELEVEMENT POUR
CULTURE : écouvillons,
sécrétions, liquides, urines,
biopsies, selles
SANG HEPARINE (virémie)
SANG TUBE SEC (sérologie)
SANG EDTA (PCR)
Conservation impossible
t° ambiante
t° ambiante
RECHERCHE DE VIRUS DANS LES
PRELEVEMENTS CUTANES
FAIRE IMPERATIVEMENT :
- un prélèvement pour EXAMEN DIRECT (Microtrak°)
- un prélèvement pour ISOLEMENT VIRAL (culture)
LESION VESICULEUSE
Aspirer le liquide vésiculaire à la
seringue ou le prélever à
l'écouvillon (virus libre +++)
Le décharger dans un milieu de transport en
tube
culture de virus
Etaler le prélèvement sur les 2 puits.
Laisser sécher et fixer à l'acétone
immunofluorescence
LESION CROUTEUSE
Enlever la croûte à l’aiguille
Ecouvillonner vigoureusement
le plancher de la vésicule
(cellules infectées)
Répéter l'opération avec
un deuxième écouvillon
Etaler le prélèvement sur les 2 puits
Laisser sécher et fixer à l'acétone
immunofluorescence
Décharger le prélèvement dans un
milieu de transport en tube
culture de virus
RECHERCHE DE VIRUS DANS LES
PRELEVEMENTS RESPIRATOIRES
PRELEVEMENT DE GORGE
Milieu de transport
en tube
Ecouvillonner énergiquement
le pharynx et la région
amygdalienne
Décharger l’écouvillon
dans le milieu de transport
Jeter l’écouvillon
Envoyer le milieu de
transport
SECRETIONS NASO-PHARYNGEES
Aspirer les sécrétions du rhinopharynx
(min 0.5 ml) à l’aide d’un mucus
extractor ou d’une sonde gastrique n°8
montée sur seringue
Décharger les sécrétions dans
un milieu de transport
Envoyer le milieu de transport
LAVAGES BRONCHO-ALVEOLAIRES
Recueillir le produit du lavage
dans un pot stérile
Transférer une partie du liquide
dans un pot de milieu de transport
(volume à volume )
Envoyer le milieu de transport
RECHERCHE DE VIRUS DANS LES
BIOPSIES
PAR CULTURE
Déposer un fragment dans un tube de milieu de transport
PAR PCR
Déposer le fragment biopsique dans un tube sec
Humidifier avec une goutte de sérum physiologique
Ne pas diluer le prélèvement dans un grand volume de liquide +++
RECHERCHE DE VIRUS DANS LES
SELLES
En cas d’impossibilité d’obtenir des selles, pratiquer un écouvillonnage rectal (en culture,
rendement inférieur à celui de la selle).
SELLES
Mettre l’équivalent d’une noix de selle (5 à 10 g), à sec, dans un pot stérile.
ECOUVILLONNAGE RECTAL
Milieu de transport
en tube
Introduire l’écouvillon dans l’anus
jusqu’à l’ampoule rectale et le tourner
sur son axe
Décharger l’écouvillon
dans le mileu de transport
Jeter l’écouvillon
Envoyer le milieu de transport
RECHERCHE D'UNE VIREMIE
PAR CULTURE
Concerne essentiellement la recherche de Cytomégalovirus (CMV).
Le virus est détecté par culture sur cellules et par immunocytochimie.
La culture nécessite un tube bien rempli de sang sur HEPARINE (bouchon vert).
Agiter immédiatement le tube
par retournement (4 ou 5) pour
éviter la formation de microcaillots
Le sang doit parvenir avant la fin de la matinée au laboratoire, pour permettre la
séparation des leucocytes.
Les tubes non parvenus dans les délais seront non utilisés +++.
PAR PCR
Le prélèvement doit être fait sur EDTA (bouchon mauve).
Les impératifs de délai de transmission au laboratoire sont les mêmes que pour le tube
hépariné.
RECHERCHE DE VIRUS DANS LE
LIQUIDE CEPHALO-RACHIDIEN (LCR)
Les recherches virales dans le LCR se font par biologie moléculaire.
Le LCR doit être recueilli dans un tube sec et stérile.
Si possible, prescrire les recherches virologiques en même temps
que la cytologie et la bactériologie +++
En cas de prescription retardée, prévenir au plus tôt le laboratoire de
Virologie qui ne conserve les LCR adressés en Bactériologie que pendant
une semaine.