DOCTEUR DE L`UNIVERSITE DE TOURS Fabrice BÉNÉDET

1
UNIVERSITÉ FRANCOIS RABELAIS
TOURS
Ecole Doctorale : Information Biologique
Environnement et Santé
Année Universitaire : 1998-1999
THESE
Pour obtenir le grade de
DOCTEUR DE L’UNIVERSITE DE TOURS
Discipline : Sciences de la vie
Par
Fabrice BÉNÉDET
Soutenance le 23 juillet 1999
Modalités de reconnaissance d’un ravageur, Acrolepiopsis assectella,
par son parasitoïde, Diadromus pulchellus :
identification et perception d’un signal polypeptidique
FIGURES & TABLEAUX
JURY :
R. BROSSUT
Y. CARTON
J. F. FERVEUR
J. HUIGNARD
S. RENAULT
E. THIBOUT
Directeur de Recherche - C.N.R.S. - Dijon
Directeur de Recherche - C.N.R.S. - Gif sur Yvette
Chargé de Recherche - C.N.R.S. - Dijon
Professeur
- Université de Tours
Maître de Conférences - Université de Tours
Directeur de Recherche - C.N.R.S. - Tours
Rapporteur
Rapporteur
Examinateur
Examinateur
Examinateur
Directeur de thèse
1
M kDa
2
M
kDa
M
3
kDa
330
330
150
90
86
78
70
220
66,9
45
67
60
37
35
36
30
29
36
20
a
b
c
Figure 21 : Profils SDS-PAGE d’un extrait de cocon d’A. assectella dialysé (ED).
(a) Gel à 7 % en polyacrylamide coloré à l’argent, dépot de 5 µg de ED (ligne 1).
(b) Gel à 10 % coloré à l’argent, 5 µg de ED (ligne2).
(c) Gel à 10 % coloré au bleu de Coomassie® colloïdal, 20 µg de ED (ligne3).
Les poids moléculaires des marqueurs de taille (M) sont indiqués en kDa. En marge droite du gel
coloré au bleu de Coomasie® (c) sont indiqués les 9 polypeptides majeurs de l’extrait.
1
2
M
kDa
kDa
90
86
78
70
94
66,9
45
36
29
Figure 22 : Profil SDS-PAGE d’un extrait de cocons d’A. assectella filtré (EF, ligne 1) et dialysé
(ED, ligne 2). Gel de polyacrylamide 10 % coloré à l’argent, 5 µg de ED et EF ont été déposés.
Les poids moléculaires du marqueur de taille (M) sont indiqués en kDa. En marge gauche du gel
sont indiqués les 4 glycopolypeptides de EF.
kDa
M
1
2
3
4
106
Tra.
67
Cre.
a
43
Enz.
30
Rib
20,1
kDa
1
2
3
M
kDa
Enz.
90
86
78
70
106
67
43
b
30
20,1
Figure 23 : Profils SDS-PAGE des polypeptides des coconsd’A.assectella (gels 10 % colorés à
l’argent). Les poids moléculaires des marqueurs de taille (M) sont indiqués en kDa.
(a) Extrait de polypeptides filtré (EF) traité par la N-glycosidase F (ligne 1) et non traité (ligne
2). Protéine et glycoprotéines du contrôle contenant de la transferrine humaine (Tra), de la
ribonucléase B (Rib) et de la créatinase (Cre) traitées par la N-glycosidase F (Enz) (ligne 3) et
non traitées (ligne 4).
(b) EF traité par la O-glycosidase (enz) (ligne 1) et non traité (ligne 3). O-glycosidase seule (enz)
(ligne 2).
kDa
106
67
M
1
2
3
kDa
90
86
78
70
43
30
20,1
14,4
Figure 24 : Profil SDS-PAGE d’un extrait de cocon d’A. assectella filtré (EF, ligne 1) et digéré
par la pronase (ligne 2). Gel de polyacrylamide 10 % coloré à l’argent. 5 µg de EF digérés ou non
ont été déposés. Les poids moléculaires des marqueurs de taille (M) sont indiqués en kDa. En
marge droite du gel sont indiqués les 4 glycopolypeptides de EF. La pronase seule a été déposée
ligne 3.
P30 P(35+37) B2
B1
EG
kDa P100 P150 M
kDa
150
100
B1
B2
106
66,9
45
36
37
35
30
29
Figure 25 : Profil SDS-PAGE d’un extrait de cocons d’A. assectella dialysé (EG) et des
différents polypeptides isolés par électroélution (P30, P35+P37, B2, B1, P100, P150). Gel de
polyacrylamide 10 % coloré à l’argent. Les poids moléculaires du marqueur de taille (M) et des 7
polypeptides isolés de EF sont indiqués en kDa.
kDa
M
B. m.
A. a.
E. k.
67
45
36
29
14,4
Figure 26 : Profil SDS-PAGE d’un extrait de cocons de Bombyx mori (B. m.), d’A. assectella ou
ED (A. a.) et d’Ephestia kuniella (E. k.). Gel de polyacrylamide 10 % coloré au bleu de
Coomassie® colloïdal, 15 à 20 µg d’extrait total ont été déposés. Les poids moléculaires des
marqueurs de taille (M) sont indiqués en kDa. Les pointes de flèches sur le gel indiquent 8 des
polypeptides majoritaires de ED.
1
kDa
90
86
78
70
2
3
M
kDa
106
67
45
36
29
14,4
Figure 27 : Profil SDS-PAGE d’un extrait de glandes séricigènes de larves d’A. assectella (ligne
1) et d’un extrait de cocons filtré (EF, ligne 2 et 3). Gel de polyacrylamide 10 % coloré à
l’argent, respectivement 5 µg et 1 µg de EF ont été déposés ligne 2 et 3. Les poids moléculaires
des marqueurs de taille (M) sont indiqués en kDa. En marge gauche du gel sont indiqués les 4
glycopolypeptides de EF.