Petrifilm - Techmicrobio
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Flore totale français 23/01/06 11:39 Page 1 3 Guide d’interpretation Petrifilm™ Flore totale 1 Flore totale français 23/01/06 11:39 Page 2 3M™ Petrifilm™ Flore totale 2 3 Nombre de colonies = 0 Nombre de colonies = 16 Petrifilm Flore Totale sans aucune colonie. Petrifilm Flore Totale avec quelques colonies. L'indicateur présent sur le Petrifilm va colorer en rouge les colonies. Il faut compter toutes les colonies rouges sans tenir compte de la taille ou de l'intensité de couleur. 4 5 Nombre de colonies = 143 Nombre estimé de colonies : 420 La plage optimale pour le dénombrement du Petrifilm Flore Totale se situe entre 10 et 300 colonies. Lorsque le nombre de colonies est supérieur à 300, comme sur la photo 5, le nombre de colonies peut être estimé. Pour cela, déterminer le nombre moyen de colonies dans un carré (l cm2) et le multiplier par 20, afin d'obtenir le nombre total de colonies sur le Petrifilm. La surface approximative inoculée du Petrifïlm Flore Totale, est de 20 cm2. Flore totale français 23/01/06 11:39 Page 3 6 7 Petrifilm incomptable (TNTC) Petrifilm incomptable Cette photo montre un Petrifilm Flore Totale sur lequel les colonies sont trop nombreuses pour être comptées. Lorsque la contamination est très importante, la gélose vire au rose, comme le montre la photo 7. Vous pouvez observer des colonies seulement sur le pourtour de la gélose. Enregistrer ce résultat comme incomptable. 8 9 Petrifilm incomptable Petrifilm incomptable La répartition des colonies peut parfois ne pas être uniforme (Photo 8). C'est là aussi, une des caractéristiques d'un Petrifilm incomptable. Les colonies sur ce Petrifilm Flore Totale (photo 9) apparaissent comme comptables. Cependant, lorsqu'on regarde sur le pourtour du cercle de gélose, on peut observer une grande concentration de colonies. Enregistrer ce résultat comme incomptable. Flore totale français 23/01/06 11:39 Page 4 10 11 Nombre estimé de colonies : 160 Nombre de colonies : 83 Quelques bactéries ont la propriété de liquéfier la gélose sur le Petrifilm Flore Totale (photo 10). Dans ce cas, compter le nombre de colonies dans les carrés non affectés et procéder à une estimation. Ne pas compter la zone liquéfiée. Du fait de la coloration rouge des colonies sur le Petrifilm Flore Totale, les colonies peuvent être distinguées des débris alimentaires opaques (photo Il). Ce qui représente un avantage par rapport à ce qui est observé sur les boîtes de Pétri. Flore totale français 23/01/06 11:39 Page 5 3M™ Petrifilm™ Flore totale Fiche d'utilisation Stockage Petrifilm Petrifilm Petrifilm 1 Conserver les poches fermées au réfrigérateur. Utiliser les Petrifilm avant la date d'expiration indiquée sur les poches. 2 Pour refermer les poches, replier l'extrémité et fermer à l'aide d'un ruban adhésif ou d'une pince. 3 Garder les poches entamées à une température ) 21 °C et à l'abri de l'humidité (<50 % HR). Ne pas les placer au réfrigérateur. Utiliser les Petrifilm dans le mois qui suit l'ouverture de la poche. 5 Ajouter la quantité nécessaire de l'un des diluants suivants : peptone sel, eau peptonée, eau distillée, tampon phosphate. Ne pas utiliser de tampon contenant du citrate de sodium ou du thiosulfate. 6 Broyer ou homogénéiser l'échantillon en utilisant la procédure habituelle. 8 Avec une pipette tenue perpendiculairement au Petrifilm, déposer 1 ml de l'échantillon, ou de l'échantillon dilué au centre du film inférieur. 9 Relâcher doucement le film supérieur. Ne pas le faire rouler. Préparation 4 Préparer la suspension de l'échantillon. Peser ou pipetter le produit dans un container stérile (sac stomacher, bouteille stérile…). Ensemencement 7 Placer le Petrifilm sur une surface plane. Soulever le film supérieur. Flore totale français 23/01/06 11:39 Page 6 10 Placer le diffuseur, face lisse vers le haut, au centre du film supérieur, au-dessus de l'inoculum. 11 Incubation Étaler l'échantillon en exerçant une légère pression sur le diffuseur. Ne pas tourner ou faire glisser le diffuseur ! Interprétation <70°F 13 Incuber le Petrifilm, film supérieur vers le haut, sans empiler plus de 20 unités, à 30 °C ± 1 °C, pendant 72 ± 3 heures (dans la majorité des cas, une incubation de 48 heures est suffisante). 14 Lire le Petrifilm. Se référer au guide d'interprétation pour la lecture des résultats. Pour l'expression des résultats, se référer à la norme NF ISO 4833. Informations complémentaires • Pour toute information technique, appeler le : 01 30 31 85 77 • Pour vos commandes de Petrifilm, appeler le : 01 30 31 84 59 Date Version Février 2004 1.0 3 3M Europe Laboratoires 3M Santé Boulevard de l'Oise 95029 Cergy Pontoise Cedex France Tel : +33 (0) 1 30 31 85 71 Fax: +33 (0) 1 30 31 85 78 www.3M.com/microbiology 12 Retirer le diffuseur. Attendre 1 minute pour permettre au gel de se solidifier.