validation des systèmes de fermeture

Etude de l’intégrité d’un contenant
pharmaceutique
A3P Journées de la sous-traitance
20 & 21 Mars 2013 – LILLE
Marion STYLEMANS
Pharmacien Responsable/ Directeur Laboratoire Microbiologie
Sylvie VINCENT
Sénior Analyste Microbiologie
Sylviane LUBERA
Technicienne Microbiologie
Généralités
 Milieu des années 90 test d’intégrité = test de stérilité
 Mais évolution => test d’intégrité = test de stérilité +
validation des systèmes de fermeture
 Test d’intégrité des contenants pharmaceutiques (ou
contrôle de l’étanchéité) : nécessité pour le maintien de la
qualité du produit jusqu’à péremption
 Réalisé à différents stades de la vie du produit
(développement, production, libération de lot, études de
stabilité, …)
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Aspects réglementaires
 Contrôle de l’intégrité = exigence réglementaire
 USP <661>, <671>, <1207>
 PE chapitres 5.1.1 et 3.2.2.1
 Norme ISO 11607 « Emballages des dispositifs médicaux stérilisés au stade
terminal »
 Annexe 1 des BPF
 ICH Q6A: mise en place de test d’intégrité pour les seringues
 Dossier d’enregistrement Module 3: « l’intégrité doit être
contrôlée »
 Nombreuses bibliographies décrivant les tests d’intégrité
 PDA Technical Pharmaceutical Package Integrity report n°27
 Guidance for industry (Container and Closure system Inegrity
: Testing in lieu of sterility testing)
 Commission SFSTP
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Présentation des méthodes
 Difficulté = choix de la méthode à appliquer
 Différents paramètres à prendre en compte:
 Nature de produit
– Contenant: flacons, ampoules, poches, blisters, seringues,…
– Contenu: poudre, lyophilisat, liquides
 Type de contaminant à identifier (échanges gazeux, liquides
ou microbiens)
 Méthode quantitative /destructive
 Sensibilité recherchée
 Stade de la vie du produit
 Exemple de méthodes:
 Méthode microbiologique, colorimétrique, par infra rouge, par
rayon X, par mise sous vide, …
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Présentation des méthodes
 Méthode Microbiologique par immersion
 Principe
Perte d’intégrité si trouble observé et confirmation par
identification
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Présentation des méthodes
 Méthode Colorimétrique par immersion
 Principe
Perte d’intégrité si coloration observée (confirmation possible
par lecture spectroscopique UV-Visible)
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Problématique
 Etude de l’intégrité d’un contenant par les méthodes
microbiologique et colorimétrique par immersion:
 Contenant: flacons en polypropylène de 500mL, fermeture
avec bouchon à pas de vis
 Contenu: solution de PBS (solution incolore)
 Stade de la vie du produit: en développement
 Objectif :valider la méthode analytique du test d’intégrité
des flacons avec un sensibilité de test la meilleure possible
et déterminer le couple de serrage causant la perte
d’intégrité
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PRÉSENTATION DE RÉSULTATS
DE L’ATELIER
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Essais préliminaires
 Informations nécessaires:
 Force de serrage recommandée par le fournisseur: 3,4 N.m±
0,05
 Gamme de 10 forces de serrage à tester => doivent encadrer
la valeur recommandée par le fournisseur:
Numéro du flacon
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
Valeur basse (en
N.m)
0,18
0,28
0,38
0,48
0,98
1,95
2,95
3,70
3,95
4,45
Valeur à atteindre (en
N.m)
0,20
0,30
0,40
0,50
1
2
3
3,75
4
4,5
Valeur haute(en
N.m)
0,22
0,32
0,42
0,52
1,02
2,05
3,05
3,80
4,05
4,55
Intervalle
+/+/+/+/+/+/+/+/+/+/-
0,02
0,02
0,02
0,02
0,02
0,05
0,05
0,05
0,05
0,05
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Etude de la sensibilité – Méthode microbiologique
 Protocole: préparation des témoins de sensibilité et
d’étanchéité
– Simulation de la présence de fuite: les témoins de sensibilité
sont des flacons présentant au niveau du bouchon un capillaire
de diamètre calibré (0,5µm, 1µm et 2µm).
– Le témoin d’étanchéité est préparé de la même façon que les
témoins de sensibilité excepté le fait que le capillaire est perlé au
bout pour empêcher l'entrée du colorant. Ce témoin d’étanchéité
est réalisé dans le but de valider les conditions de manipulation.
– Pour vérifier la reproductibilité de la méthode, tester chaque
témoins de sensibilité (0,5µm, 1µm et 2µm) en triplicate sur 3
jours en parallèle d’un témoin d’étanchéité du capillaire.
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Etude de la sensibilité – Méthode microbiologique
 Préparation d’un témoin de stérilité: flacon rempli d’un
milieu de culture puis fermé et incubé 14jour
=> vérifier l’asepsie du procédé de fermeture des flacons
(absence de faux positifs)
 Préparation d’un témoin de fertilité: flacon rempli d’un
milieu de culture et ajout d’un inoculum de B.diminuta. Le
flacon est ensuite fermé puis incubé.
=> Vérifier la fertilité secondaire du milieu de culture (absence
de faux négatifs)
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Etude de la sensibilité – Méthode microbiologique
 Critères de validité
 La durée d’immersion doit être de minimum de 2h
 Les 3 flacons témoin d’étanchéité (jour 1, jour 2 et jour 3) doivent être
négatifs
 Les 3 flacons témoin de stérilité (jour 1, jour 2 et jour 3) doivent être
négatifs
 Les 3 flacons témoin de fertilité (jour 1, jour 2 et jour 3) doivent être
positifs
 La présence de B.diminuta dans les témoins de sensibilité ( 0,5µm,
1µm et 2µm) doit être confirmée par identification
 La mesure de la fermeture des flacons doivent être compris dans
l’intervalle recommandé
 Critère d’acceptation:
 La sensibilité sera validée si 100% des témoins de sensibilité dont le
diamètre du capillaire est le plus petit diamètre reproductible sont
positifs (présence d’une croissance microbienne)
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Etude de la sensibilité – Méthode colorimétrique
 Critères de validité
 La durée d’immersion doit être de minimum de 30 min
 Les 3 flacons témoin d’étanchéité (jour 1, jour 2 et jour 3)
doivent être négatifs
 La présence de Bleu de méthylène dans les témoins de
sensibilité ( 0,5µm, 1µm et 2µm) doit être confirmée par
analyse spectroscopique UV-Visible
 La mesure de la fermeture des flacons doivent être compris
dans l’intervalle recommandé
 Critère d’acceptation:
 La sensibilité sera validée si 100% des témoins de sensibilité
dont le diamètre du capillaire est le plus petit diamètre
reproductible sont positifs (présence de Bleu de méthylène
dans le flacon).
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Test d’intégrité - Méthodes microbiologique et
colorimétrique
 Différentes forces de serrage sont testée: définies lors des
essais préliminaires (cible basse, valeur intermédiaire et
cible haute)
 Pour chaque valeur de force de serrage, 3 flacons sont
testés et ces essais sont répétés 3 fois.
 Témoins positifs: le nombre de témoins de sensibilité et la
taille du diamètre du capillaire utilisé dépend des résultats
de l’étude de sensibilité: en générale, 2 témoins de
sensibilité sont testés par série.
 Témoins négatifs: 1 témoin d’étanchéité est réalisé par
série en parallèle des témoins de sensibilité.
 Les témoins de sensibilité et d’étanchéité sont préparés de
la même façon que lors de l’étude de la sensibilité.
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Test d’intégrité - Méthodes microbiologique
 Critères de validité:
 Au moins un témoin de sensibilité doit être positif
(remarque: en cas de témoin de sensibilité négatif, il faut vérifier que le capillaire n’est
pas bouché par un agrégat de micro organisme entraînant ainsi un faux négatif)






La durée d’immersion doit être de minimum de 2h
Les 3 flacons témoin d’étanchéité doivent être négatifs
Les 3 flacons témoin de stérilité doivent être négatifs
Les 3 flacons témoin de fertilité doivent être positifs
La présence de B.diminuta doit être confirmée par identification
La mesure de la fermeture des flacons doivent être compris dans
l’intervalle recommandé
 Critère d’acceptation:
 Le maintien de l’étanchéité du système flacon/bouchon est démontré
par l’absence de croissance microbienne dans les flacons
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Test d’intégrité - Méthodes colorimétrique
 Critères de validité:




Au moins un témoin de sensibilité doit être positif
La durée d’immersion à vide doit être de minimum 30 min
Les 3 flacons témoin d’étanchéité doivent être négatifs
La mesure de la fermeture des flacons doivent être compris
dans l’intervalle recommandé
 Critère d’acceptation:
 Le maintien de l’étanchéité du système flacon/bouchon est
démontré par l’absence de bleu de méthylène en lecture
visuelle et lecture au spectrophotomètre.
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