chromatographie sur colonne

PCSI-CHIMIE-LGT Bellevue-Fort-de-France
Quantité d’adsorbant/gde mélange à
purifier
Séparation facile
30-50g
Séparation difficile
50-200g
-Mise en suspension de la résine dans une solution tampon
-Remplissage de la colonne
-Régénération de la résine
-Elution par la solution à échanger puis par de l’eau distillée.
Fiche technique N° 12
CHROMATOGRAPHIE SUR COLONNE
Capacité : Savoir mettre en œuvre une chromatographie sur colonne.
La chromatographie sur colonne CC est une technique
reposant sur des phénomènes d’adsorption. C’est une
Définition
technique utilisée en chimie préparative.
Principe
La colonne verticale est remplie d’un gel de silice dans l’éluant . le haut
de la silice est surmonté d’une fine épaisseur de sable pour éviter les
turbulences. Le dépôt est réalisé en tête de colonne, l’éluant est ajouté
au fur et à mesure et s’écoule par gravité. On recueille différentes
fractions de l’éluant dans une série de tubes à essai. L’analyse des
différentes fractions peut alors être réalisée par CCM.
Remarque : La chromatographie sur résine échangeuse d’ions est une
CC.
La phase fixe est une résine polymère portant des groupes ionisables
pouvant échanger de manière réversible certains de leurs ions au contact
d’une solution ionique. Cette technique permet de séparer des ions
d’une solution.
Ex : l’élution d’une résine cationique sulfonique, initialement sous forme
acide, par une solution ionique contenant comme seuls cations H+ et Na+,
permet d’échanger les ions Na+ et de les éliminer de la solution selon :
RSO3-,H+ + Na+ → RSO3-, Na+ + H+
Mise en oeuvre de cette technique
-Choix de la résine (cationique, anionique) et détermination de la
quantité nécessaire.
Le choix de la phase stationnaire dépend du type de composés à purifier
(nature chimique et stabilité sur cet adsorbant). On distingue
principalement deux types d’adsorbants :
-la silice (acide)
-l’alumine (acide, basique ou neutre).
Selon la quantité de produit à purifier et la difficulté de la séparation, les
dimensions de la colonne (hauteur, diamètre) et la quantité
d’adsorbant varient. Lorsque la quantité de produit à purifier est
importante, on choisit préférentiellement une colonne assez large.
Lorsque la séparation est difficile, on choisit une colonne assez fine et
longue.
Schéma du
dispositif
Précautions
expérimentales
Erreurs et
limites
-préparer le gel d’adsorbant (mélange adsorbant/éluant) dans un
erlenmeyer avant de le verser dans la colonne.
-Ne pas déformer la surface du sable « inférieur » lors de l’introduction
du gel d’adsorbant.
-Bien tasser le gel (pas de bulle d’air, pas de fissure) qui doit être
homogène.
-Surface du dépôt parfaitement horizontale.
-Diluer le produit à purifier dans un minimum de solvant.
-Ne jamais laisser sécher la résine dans la colonne.