Université Paris-Sud - Centre National de la Recherche Scientifique

Écologie, Systématique et Évolution
PROCÉDURE SYBR SAFE
USAGERS
Utilisation comme marqueur d’acides nucléiques
Le SYBR Safe est un agent d'intercalation utilisé comme marqueur
d'acide nucléique. Bien qu'il soit considéré comme peu ou pas
génotoxique dans les documentations fournies par Invitrogen, les
protocoles d'usages et d'élimination des déchets mis en place pour le
Bromure d'Ethidium seront impérativement respectés pour le SYBR
Safe.
Protocole d'utilisation
 les stagiaires doivent impérativement être
accompagnés de leur responsable de stage lors
d'une première utilisation.
 Blouse fermée et gants sont obligatoires pour
manipuler le SYBR Safe.
1. Placer le gel d'agarose sur la pelle plastique réservée à cet usage.
Déposer le gel dans le bain de SYBR Safe 1X en le faisant glisser
délicatement du support afin d'éviter les éclaboussures et en évitant de
mettre les doigts directement dans le bain. Enlever les gants et les jeter
dans la poubelle à déchets BET marquée "gants + papiers absorbants
contaminés" placée sous la paillasse.
2. Laisser tremper le gel de 20 à 30 mn suivant la dimension du gel.
3. Déposer un petit stock de papier absorbant près de la chambre
d'exposition UV avant toute manipulation (Celui-ci servira à essuyer la
chambre après usage). Ouvrir la chambre d'exposition UV et allumer
l'interrupteur électrique situé sur la multiprise ainsi que les différents
appareils de prise de vue avant de manipuler le gel. Récupérer le gel
avec la pelle plastique en évitant toujours de mettre les doigts
directement dans le bain. Égoutter le gel délicatement avant de le
placer dans la chambre d'exposition UV. Si le gel est trop grand pour
être manipulé avec la pelle plastique, changer (après manipulation du
gel) le gant de la main qui va servir à manipuler les appareils de prise
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de vue (une main doit impérativement restée "propre" pour
manipuler la porte et les interrupteurs de la chambre d'exposition
UV ainsi que les différents appareils de prise de vue).
4. Lorsque les prises de vues sont réalisées, éteindre les différents
appareils ainsi que l'interrupteur électrique situé sur la multiprise. Jeter
le gel après usage dans la poubelle blanche située sur la paillasse et
marquée "gels d'agarose contaminés". Nettoyer le plateau de la
chambre d'exposition UV avec le papier absorbant et jeter ce dernier
dans la poubelle à déchets SYBR Safe située sous la paillasse et
marquée "gants + papiers absorbants contaminés". Enlever les gants
et les jeter dans la même poubelle.
 Le changement des bains se fait lorsque la solution a servi 10 à 12
fois (ce chiffre varie en fonction de la taille des gels) où lorsque la
solution a été préparée depuis plus de 10 jours (ou lorsque on ne
voit plus rien à l'exposition UV !!!). Dans ces différents cas de
figure prévenir une des personnes responsables qui éliminera la
solution usagée et préparera une nouvelle solution.
 De même, lorsque l'une des poubelles à déchets SYBR Safe est
pleine, prévenir un responsable pour qu'il la remplace.
Il est indispensable d'indiquer
sur le tableau (à disposition sur
la paillasse SYBR Safe),
l'utilisation du bain (taille
approximative du gel (1 : petit - 2
: moyen - 3 : grand) date et
initiales de l'utilisateur).
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