hemoglobine predon : interet de l`hemofast

Article Original
HEMOGLOBINE PREDON : INTERET DE L’HEMOFAST®
N. LOUATI *, I. BEN AMOR *, J. CHERIF *, J. TRABELSI**, H. REKIK *, H. FEKI **, J. GARGOURI*
* Centre régional de transfusion sanguine de Sfax, Tunisie.
** Service de médecine communautaire, CHU h. Chaker Sfax, Tunisie.
Résumé
Le contrôle prédon du taux d’hémoglobine (Hb) nécessite une technique précise, rapide, facile à réaliser et
acceptée par les donneurs de sang (DDS). Le but de notre étude a été d’évaluer une méthode de dosage de
l’Hb sur sang capillaire par le photomètre Hémofast ®. Les taux d’Hb de 50 DDS, prélevés au CRTS de
Sfax, ont été mesurés par le lecteur Hémofast ®, l’analyseur automatique Coulter et la méthode manuelle à
la cyanméthémoglobine (cyanméth Hb). La sensibilité et la spécificité de chaque technique ainsi que les
corrélations entre ces 3 techniques ont été déterminées. La comparaison des taux moyens d’Hb obtenus par
les trois techniques n’a pas montré de différence significative. La corrélation entre l’Hb capillaire et l’Hb
veineuse (Coulter, cyanméth Hb) a été significative (r=0,70 et r=0,55 respectivement). La sensibilité et la
spécificité de l’Hémofast® pour la détection de l’anémie chez les DDS a été de 42,85 % et 93,02 %.
L’Hémofast ® constitue ainsi, une technique simple, facile à réaliser en collecte mobile et préservant le
capital veineux.
Summary
The measurement of haemoglobin ( Hb) concentration prior to donation requires an accurate, quick,
practical, and easy method with minimal discomfort for the donors. The aim of this study was to evaluate a
method of measure of Hb on capillary blood using the portable hemoglobinometer Hémofast ®. The
concentration of Hb of 50 blood donors, taken in the regional center of transfusion of Sfax, were determined
by Hémofast ®, automatic analyzer Coulter and manual hemiglobincyanide (HiCN) method. The sensitivity
and the specificity of each method and the correlations between these methods were evaluated. The
comparison of means of Hb levels measured by these methods did not show significant difference. The
correlation between capillary Hb and venous Hb (Coulter, HiCN) was significant (r=0,70 and r=0,55
respectively). The sensitivity and the specificity of Hemofast® in screening anemia in blood donors was
42,85 % and 93,02 %, respectively. Considering these results, Hémofast® is a simple technique, suitable in
for use at mobile blood donation settings and can be routinely used by blood banks as an anemia-screen test
‫ﺗﻠﺨﻴﺺ‬
‫ﺗﺴﺘﻮﺟﺐ ﻣﺮاﻗﺒﺔ اﻟﻬﻴﻤﻮﻗﻠﻮﺑﻴﻦ ﻗﺒﻞ اﻟﺘﺒﺮع ﺑﺎﻟﺪم ﺗﻘﻨﻴﺔ دﻗﻴﻘﺔ و ﺳﺮﻳﻌﺔ و ﺳﻬﻠﺔ اﻹﻧﺠﺎز و ﻣﻘﺒﻮﻟﺔ ﻣﻦ‬
‫ ﺑﻌﺪ‬Hémofast ‫ ﺗﻬﺪف دراﺳﺘﻨﺎ إﻟﻰ ﺗﻘﻴﻴﻢ ﻃﺮﻳﻘﺔ ﺗﺤﻠﻴﻞ اﻟﻬﻴﻤﻮﻗﻠﻮﺑﻴﻦ ﺑﺂﻟﺔ‬.‫ﻗﺒﻞ اﻟﻤﺘﺒﺮﻋﻴﻦ ﻧﻔﺴﻬﻢ‬
‫ ﻣﺘﺒﺮﻋﺎ وﻗﻊ ﻋﻠﻴﻬﻢ اﻟﺘﺤﻠﻴﻞ‬50 ‫ ﺗﻬﻢ اﻟﺪراﺳﺔ‬.(capillaire) ‫ﺳﺤﺐ دم ﻣﻦ اﻟﺸﺮاﻳﻴﻦ اﻟﺸﻌﺮﻳﺔ‬
‫( و اﻟﻄﺮﻳﻘﺔ اﻟﻤﺮﺟﻌﻴﺔ‬Coulter) ‫ واﻵﻟﺔ اﻷوﺗﻮﻣﺎﺗﻴﻜﻴﺔ‬Hémofast :‫اﻟﻤﺬآﻮر ﺑﺜﻼﺛﺔ ﻃﺮق‬
‫ ﻟﻢ‬.‫ آﻤﺎ وﻗﻌﺖ دراﺳﺔ اﻟﺪﻗﺔ و اﻟﺨﺼﻮﺻﻴﺔ و اﻟﻌﻼﻗﺔ ﺑﻴﻦ اﻟﺘﻘﻨﻴﺎت اﻟﺜﻼﺛﺔ‬. (cyanmeth Hb )
‫ﺗﻈﻬﺮ اﻟﻤﻘﺎرﻧﺔ ﺑﻴﻦ اﻟﺘﻘﻨﻴﺎت اﻟﺜﻼﺛﺔ أي ﻓﺮق آﻤﺎ ﻟﻮﺣﻆ ﺗﻄﺎﺑﻖ ﺑﻴﻦ آﻤﻴﺔ اﻟﻬﻴﻤﻮﻗﻠﻮﺑﻴﻦ ﺣﺴﺐ اﻟﺘﺤﻠﻴﻞ‬
‫ آﻤﺎ ﺗﻮﺿﺢ أن ﻧﺴﺐ دﻗﺔ‬. ( r = 0.7 ،r = 0.55 ) ‫ و ﺑﻌﺪ ﺳﺤﺐ اﻟﺪم ﻣﻦ اﻟﺸﺮﻳﺎن‬capillaire.
% 42.85 ‫ ﻓﻲ ﺗﺸﺨﻴﺺ ﻓﻘﺮ اﻟﺪم ﻋﻨﺪ اﻟﻤﺘﺒﺮع آﺎﻧﺖ ب‬Hémofast ‫و ﺧﺼﻮﺻﻴﺔ ﻃﺮﻳﻘﺔ‬
‫ وﺳﻴﻠﺔ ﺳﻬﻠﺔ اﻹﻧﺠﺎز ﺑﺎﻟﺨﺼﻮص ﻓﻲ اﻟﻮﺣﺪة اﻟﻤﺘﻨﻘﻠﺔ‬Hémofast ‫ ﺑﻬﺬا ﺗﻤﺜﻞ ﺗﻘﻨﻴﺔ‬.% 93.02 ‫و‬
.‫ﻟﺠﻤﻊ اﻟﺪم ﺗﻤﻜﻦ ﻣﻦ اﻟﻤﺤﺎﻓﻈﺔ ﻋﻠﻰ ﺷﺮاﻳﻴﻦ اﻟﻤﺘﺒﺮع و ﺗﺨﺼﻴﺼﻬﺎ ﻟﻠﺘﺒﺮع ﻧﻔﺴﻪ‬
J.I. M. Sfax, N°19 / 20 ; Juin / Déc 10 : 20 - 24
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N. LOUATI et al.
Une goutte de sang capillaire (d’environ 12 μl)
prélevée au bout du doigt est déposée sur la carte
test. Après hémolyse, l’Hb libérée est transformée
en méthémoglobine par le nitrite de sodium.
L’azoture de sodium réagit ensuite avec la
méthémoglobine pour former un azide de
méthémoglobine de couleur brune détectable à 565
nm à l’aide d’un réflectomètre portable. L’intensité
de la coloration est proportionnelle à la
concentration en Hb de l’échantillon. Les réactions
et la lecture du résultat se font en moins d’une
minute.
Le dosage de l’Hb par les méthodes manuelle et
automatique a été réalisé sur du sang veineux
prélevé au pli du coude sur EDTA. Le principe du
dosage se base sur la spectrophotométrie. Après
lyse des globules rouges par une solution de lyse
(Drabkin pour la méthode manuelle, réactif lyse
pour la méthode automatique), l’Hb est convertie
en un chromogène stable (cyanméthémoglobine).
L’absorbance lue est directement proportionnelle à
la concentration en Hb. Le dosage automatique a
été fait au moyen d’un automate de marque
Beckman Coulter AC.T (USA). Le sang de
contrôle standard Coulter® 4C®-ES Cell Control,
fourni par le fabricant, a été testé dans chaque série
quotidienne.
Le dosage de l’Hb par l’analyseur automatique a
été retenu comme la technique de référence. Nous
avons fixé la limite inférieure du taux d’Hb pour le
don à 12 g/dl pour les femmes et 13 g/dl pour les
hommes.
L’analyse des résultats a été faite avec le logiciel
SPSS 11.0. La sensibilité, la spécificité, les valeurs
prédictives, l’indice de Youden et l’exactitude de
chaque méthode par rapport à la méthode de
référence ont été calculés. Les taux d’Hb obtenus
par les différentes méthodes de dosage, exprimés
en moyennes et écarts types, ont été comparés par
le test de Student apparié. Une valeur de p <0,05 a
été retenue comme significative. La corrélation
entre les valeurs veineuses et capillaires a été
évaluée par le calcul du coefficient de corrélation
« r ». La corrélation a été jugée forte pour un
coefficient de corrélation r ≥ 0,75, moyenne pour
« r » compris entre 0,4 et 0,75 et faible pour r <
0,4 [4,5]. La méthode de Bland et Altman [6,7] a
été utilisée pour la détermination des limites de
dispersion des différences des taux d’Hb obtenus
par les 3 méthodes. La détermination de l’intervalle
de confiance à 95 % (moyenne des différences plus
ou moins deux écarts-types) permet, enfin, de juger
si les différences sont cliniquement acceptables.
INTRODUCTION
Le contrôle prédon du taux d’hémoglobine (Hb) est
l’un des paramètres importants de la sécurité
transfusionnelle. Un taux bas d’Hb constitue un
critère d’exclusion des donneurs de sang (DDS) ou
des concentrés globulaires [1,2,3].En effet, le
prélèvement de sang chez un donneur anémique
peut l’exposer à des complications et n’apporte pas
au receveur le bénéfice escompté par rapport aux
risques encourus.
Réalisé systématiquement dans plusieurs pays, ce
contrôle prédon n’est, à ce jour, pas obligatoire en
Tunisie. Les seules mesures prises, pour la
protection du donneur d’une anémie induite par le
don de sang, se résument à une limitation du
nombre de dons (5 dons de sang total par an pour
les hommes et 3 pour les femmes) et à l’examen
clinique du donneur à la recherche de signes
d’anémie [2]. La décision du contrôle pré-don du
taux d’Hb est laissée à l’appréciation du médecin
chargé de la sélection médicale des DDS. La
technique utilisée est, jusque là, classique c'est-àdire faisant appel à des compteurs de globules. Ce
qui représente une perte de temps pour l’opération
du don et un désagrément pour le donneur en raison
de la ponction veineuse qu’elle exige.
Dans l’attente d’une éventuelle systématisation du
contrôle du taux d’Hb prédon en Tunisie, nous
avons mené une étude en vue d’évaluer les résultats
d’une méthode de dosage rapide sur sang capillaire.
1- MATERIELS ET METHODES
Notre étude a concerné 50 DDS total homologue
prélevés au Centre Régional de Transfusion
Sanguine de Sfax. Un interrogatoire et un examen
clinique prédon ont été effectués pour tous les DDS
[2].
Le dosage du taux d’Hb prédon a été effectué, pour
chaque DDS, par 3 méthodes différentes réalisées
par le même opérateur :
 méthode photométrique sur sang capillaire
par le lecteur d’hémoglobine portable:
Hémofast® Stite Site.
 méthode manuelle à la
cyanméthémoglobine (cyanméth Hb).

méthode automatique.
Le dosage de l’Hb par le lecteur d’Hb portable
(Hémofast®) se fait à l’aide de cartes tests
Hémofast®.
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HEMOGLOBINE PREDON : INTERET DE L’HEMOFAST®
RESULTATS
Les DDS se répartissent en 4 femmes et 46
hommes (Sex-ratio = 11,5), d’âge moyen 36,5 ±
10,96 ans avec des extrêmes de 20 et 63 ans.
Les taux moyens d’Hb a été de 14,44 ± 1,31 g/dl
(Extrêmes : 11 - 16,7) par l’analyseur automatique,
de 14,17 ± 1,38 g/dl (Extrêmes : 11,2 - 17,5) par le
lecteur Hémofast® et de 14,52 ±1,81 g/dl
(Extrêmes : 9 -17, 83) par la méthode manuelle.
18
Hb capillaire mesuréé par Hémofast (g/dl)
17
Il n’existait pas de différence significative entre les
taux moyens d’Hb obtenus par Hémofast® et
l’analyseur automatique (p= 0,075) d’une part, et
par Hémofast® et la méthode manuelle d’autre part
(p= 0,38). Les taux d’Hb ont été inférieurs aux
seuils fixés ci-dessus chez 6 DDS par le lecteur
Hémofast®, 7 DDS par l’analyseur automatique et
9 DDS par la méthode manuelle. Les paramètres
statistiques de comparaison des trois méthodes sont
donnés dans le Tableau N°1.
16
15
14
13
12
y=0,674x + 4,82
11
10
11
12
13
14
15
16
17
18
Hb veineuse mesurée par Coulter (g/dl)
Hb capillaire mésurée par Hémofast (g/dl)
18
Le coefficient de corrélation entre les valeurs
obtenues par Hémofast® et celles par la méthode
automatique a été de 0,70 et celui entre Hémofast®
et la méthode manuelle a été de 0,55 (Fig.1).
La figure N° 2 illustre la dispersion des différences
entre les taux d’Hb obtenus par Hémofast® et la
méthode automatique. La moyenne des différences
a été de -0,26 ± 1,034 g/dl. Les limites considérant
95 % des valeurs (±2DS) ont été de –2,32 g/dl pour
la limite inférieure et de +1,80 g/dl pour la limite
supérieure.
Par ailleurs, la moyenne des différences entre les
taux d’Hb obtenus par Hémofast® et la méthode
manuelle a été de -0,35±1,55 g/dl. Les limites
considérant 95 % des valeurs (±2DS) étaient de 3,45 g/dl pour la limite inférieure et de +2,75 g/dl
pour la limite supérieure. Ces résultats sont
illustrés dans la figure N°2.
17
16
15
14
13
12
y=0,55 x + 0,73
11
8
10
12
14
16
18
cyanméth Hb
Figure N°1: analyse de régression entre les taux
d’Hb mesurés par Hémofast vs Hb mesurée par
Coulter et cyanméth Hb (g/dl)
Tableau N°1 : Paramètres statistiques de comparaison des trois méthodes.
Automate
Coulter
Hémofast®
Cynameth
Hb
VP
VN
FP
FN
Se
Sp
VPP
VPN
Exactitude
Indice de
Youden
7
43
0
0
100%
100%
100%
100%
100%
+1
3
5
40
39
3
4
4
2
42,85%
71,42%
93,02%
90,69%
50%
55,55%
90,90%
95,12%
86%
88%
+0,35
+0,62
VP : Vrai positif; VN : Vrai négatif; FP: faux positif; FN : Faux négatif; Se: sensibilité; Sp: Spécificité; V.P.P:
valeur prédictive positive; VPN : valeur prédictive négative.
Se = VP/(VP + FN); Sp = VN/(VN + FP); VPP = VP/(VP + FP); VPN = VN/(VN + FN); Exactitude = (VP +
VN)/total; Indice de Youden = (Se + Sp) – 1.
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3
Hémofast - cyanméth Hb g/dl
(Hémofast - référence) g/dl
N. LOUATI et al.
2
1
0
-1
4
3
2
1
0
-1
-2
-3
-2
-4
-3
-5
-4
11
-6
12
13
14
15
16
17
10
(référence+Hémofast)/2 g/dl
11
12
13
14
15
16
17
18
(Hémofast + cyanméth Hb)/2 g/dl
Figure N°2: Dispersion des différences des valeurs du taux d’Hb par la méthode Hémofast selon
Bland et Altman [6,7]
mesurée par méthode manuelle (r=0,70 et r=0,55,
respectivement). Cette corrélation a été jugée
moyenne pour le lecteur Hémofast® par rapport au
compteur automatique et, également, par rapport à
la cyanméth Hb.
Selon la méthode statistique de Bland et Altman
[6,7], les limites de dispersion des différences dans
lesquelles se trouvent 95% des valeurs de
l’Hémofast® (par rapport à la méthode de
référence), sont de –2,32 et +1,80 g/dl. Cet
intervalle, relativement large, montre que le dosage
de l’Hb par Hémofast® aura pour conséquence le
refus de certains donneurs. Cette éviction risque
d’entrainer, à court terme, une baisse du nombre de
dons. Mais, elle peut assurer ultérieurement une
amélioration de la qualité des concentrés
globulaires. Enfin, ces résultats peuvent être
expliqués
par
la
différence
entre
les
hémoglobinémies veineuses et capillaires. Plusieurs
études ont confirmé cette différence et ont montré
que la précision des photomètres portables semble
être satisfaisante par rapport à la méthode
automatique pour les échantillons veineux alors
qu’elle ne l’est pas pour les échantillons capillaires
[10,11,12]. D’autres études réalisées sur le sujet ont
rapporté que 50% des DDS retrouvés anémiques
par technique automatique auraient été autorisés au
don après le contrôle du taux Hb par le lecteur
d’Hb portable Hémocue [13,14].
En définitive, le dosage d’Hb par Hémofast ® est
une technique fiable, simple, rapide, facile à
DISCUSSION
Le dosage du taux d’Hb est le seul contrôle pré-don
permettant de prévenir l’apparition d’une anémie
induite par le don ou d’éviter de prélever des
donneurs anémiques avec des conséquences
directes sur le donneur lui-même et sur la qualité
du concentré globulaire issu du don. Ce dosage
dépend de la méthode utilisée, des contrôles de
qualité établis, du type de prélèvement et du
personnel impliqué.
Le dosage de l’Hb par analyseur automatique est la
méthode de référence. C’est une technique sensible
et spécifique. Cependant, elle est inappropriée au
contrôle d’Hb prédon car elle exige une ponction
veineuse avant le don et est, de ce fait, rarement
acceptée par les DDS. De plus, elle n’est pas
disponible en collecte mobile [8]. Ainsi, le recours
à une méthode de dosage adaptée aux
établissements de transfusion sanguine et qui donne
des
résultats
similaires
est
aujourd’hui
incontournable. Pour cela, les hémoglobinomètres
portables peuvent être un outil alternatif [9].
Dans notre étude, le lecteur d’Hb portable
Hémofast® a montré une sensibilité et une VPP,
respectivement de 42,85 % et 50 % et une
spécificité et une VPN, respectivement de 93,02 %
et 90,90 %. Il existe une corrélation significative
entre l’Hb capillaire mesurée par Hémofast® et
l’Hb veineuse mesurée par le compteur
automatique, ainsi qu’entre l’Hb capillaire et celle
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HEMOGLOBINE PREDON : INTERET DE L’HEMOFAST®
[3] Manuel de bonnes pratiques transfusionnelles.
Ministère de la santé publique de la république tunisienne.
[4] Burdock EI, Fleiss JL, Hardesty AS.
A new view of interobserver agreement.
Pers Psychol 1963; 16: 373–84.
[5] Fleiss JL.
The design and analysis of clinical experiments.
New York: John Wiley and Sons 1986.
[6] Bland JM, Altman DG.
Statistical methods for assessing agreement between two
methods of clinical measurement.
Lancet 1986; p: 307-10.
[7] Altman DG, Bland JM.
Measurement in medicine: the analysis of method comparison
studies.
Statistician 1983; 32: 307-17.
[8] Mendrone A Jr, Sabino EC, Sampaio L, Neto CA,
Schreiber GB, Chamone D , Dorlhiac-Llacer PE.
Anemia screening in potential female blood donors:
comparison of two different quantitative methods.
TRANSFUSION 2009; 49 (4):662-8.
[9] Von Schenck H, Falkensson M, Lundberg B.
Evaluation of ‘‘HemoCue’’, a new device for determining
haemoglobin.
Clin Chem 1986; 32:526–9.
[10] Krenzischek DA, Tanseco FV.
Comparative study of bedside and laboratory measurements of
haemoglobin.
Am J Crit Care 1996; 5: 427-32.
[11] Anaes.
La transfusion de globules rouges en situation d’urgences
hémorragiques. Indications et contres indications des
transfusions de produits sanguins labiles.
Paris: EDK 1998; p: 34-9.
[12] Tong E, Murphy WG, Kinsella A, Darragh E, Woods J,
Murphy C, McSweeney E.
Capillary and venous
haemoglobin levels in blood donors: a 42-month study of
36 258
paired
samples.
Vox Sang 2009 [Epub ahead of print].
[13] Chambers LA, McGuff JM.
Evaluation of methods and protocols for haemoglobin
screening of prospective whole blood donors.
Am J Clin Pathol 1989; 91:309–12.
[14] Radtke H, Polat G, Kalus U, Salama A, Kiesewetter H.
Haemoglobin screening in prospective blood donors:
Comparison of different blood
samples and different
quantitative methods.
Transf Apher Sci 2005; 33:31–5.
réaliser en collecte mobile et préservant le capital
veineux. La principale limite dans l’utilisation de
ce lecteur réside dans le coût de l’appareil, mais il
faut y opposer l’impact de la connaissance directe
et instantanée de l’hémoglobinémie dans la qualité
du don et dans l’intérêt du donneur. Toutefois, les
fabricants offrent, aujourd’hui, la possibilité de
mise à disposition de l’appareil pour ne
comptabiliser que le prix de la carte test. Ainsi, le
coût du test s’avère sensiblement équivalent avec
1,600 DT pour un dosage par l’automate,
comprenant le prix d’un tube de prélèvement
sanguin et les réactifs nécessaires, contre 1,800 DT
pour une carte test Hémofast®.
CONCLUSION
Le confort et la sécurité des donneurs de sang, ainsi
que la qualité des concentrés globulaires issus des
dons impliquent, impérativement, la connaissance
de l’Hb en pré-don. Pour cela, l’examen des
conjonctives n’est pas, à lui seul, un moyen
efficace de sélection. Il doit être combiné au dosage
de l’hémoglobine par une méthode simple et
sensible.
Sous réserve d’une étude sur une population plus
large, les résultats de notre étude plaident en faveur
de la possibilité d’introduire sans difficulté majeure
un dosage photométrique d’hémoglobine sur sang
capillaire chez les donneurs de sang.
REFERENCES
[1] Gargouri J. Le don de sang total. ONFP-CRTS de Sfax
2000.
[2] Circulaire
N°49/05
relative
à
la
sécurité
transfusionnelle.
Ministère de la santé publique de la république tunisienne.
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