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Revue Bio-Africa - n° 8 - 2010, pp. 7-12
© EdUCI 2010
virologie
EVALUATION DE LA PERFORMANCE DE TROIS TESTS DE DIAGNOSTIC DE
L’INFECTION A VIH A LOME (TOGO)
M. SALOU1,2, A.Y. DAGNRA1,2, K.D. MLAGA2, A. EHLAN1,2, K. ALI-EDJE2,
OURO-MEDELI2, M. PRINCE-DAVID1,2
RESUME
Introduction : Les évaluations des tests de diagnostic Rapides/Simples (TDR) du VIH sont nécessaires
pour la détermination d’algorithmes de tests simples et
rapides, utilisables au point de service pour le conseil
et dépistage volontaire, la surveillance épidémiologique, la sécurité transfusionnelle et dans les services
de consultations prénatales.
Objectif : Evaluer la performance de trois (3) tests
de diagnostic sérologique de l’infection à VIH dont
un (1) test ELISA (EQUIPAR HIV 1/2 recombinant)
et deux (2) tests rapides/simples (HEXAGON HIV et
FIRSTRESPONSE).
Méthodes : L’évaluation de la performance de trois
tests pour le diagnostic de l’infection à VIH à Lomé
(Togo) a été réalisée au centre national de référence
pour les tests VIH/SIDA/IST sis au CHU de Lomé
TOKOIN.
Les tests évalués ont été EQUIPAR HIV ½ recombinant, HEXAGON HIV et FIRST RESPONSE Sang total
HIV 1-2-0. Les sérums ont été collectés de Janvier à
Juillet 2008 des malades hospitalisés au CHU Tokoin
de Lomé ou non, présentant ou non des signes cliniques et ou biologiques faisant suspecter une infection
à VIH/SIDA. Les tests de référence adoptés sur la base
de l’algorithme national en vigueur au Togo ont été un
premier test sensible VIRONOSTIKA et un deuxième
test sensible spécifique TRI-DOT.
L’IMMUNOCOMB® II HIV1&2 Combfirm a été
utilisé comme test n°3 pour valider les résultats. Le
logiciel EPI Info version 6.04b (Epitable) a été utilisé
pour l’analyse statistique.
Résultats : Le test EQUIPAR HIV1/2 a présenté
une sensibilité de 100% ; une spécificité de 82.8%.
HEXAGON HIV a donné une sensibilité de 100%,
une spécificité de 90.1%. FIRST RESPONSE HIV
CARD TEST 1-2-0 avec une sensibilité de 99% et une
spécificité de 98.1% peut être proposé comme test de
diagnostic rapide (TDR) du VIH de première intention
ou de deuxième intention.
Conclusion : Les tests HEXAGON HIV et EQUIPAR
HIV1/2 avec une bonne sensibilité (100%) peuvent être
retenus comme test n°1 dans la stratégie nationale
du Togo.
mots-clés : diagnostic du vih- tests rapides- evaluation
de performance
ABSTRACT
Introduction : The centre national de reference
pour le VIH et les IST au Togo (CNR-VIH/IST) is the
head laboratory which qualify any test of serological
diagnosis of HIV infection in Togo. This study was
undertook in order to assess some new tests for the HIV
national program of Togo.
Objective : Assess the performance of three serological diagnosis tests for HIV/AIDS infection in Togo
Methods : The evaluation of the performance of three
diagnostic tests for HIV/AIDS infection was conducted
at the National Reference Center for HIV/AIDS/STD in
Lomé, Togo. The tests evaluated were EQUIPAR HIV
½ recombinant, HEXAGON HIV and FIRST RESPONSE
whole blood HIV 1-2-0. A total of 386 serum specimens
from patients were collected from January to July 2008.
Reference tests used by following the national algorithm
in Togo were in first step VIRONOSTIKA, secondly TRIDOT. IMMUNOCOMB® II HIV1&2 Combfirm was used
to confirm a diagnosis of HIV infection.
1- Laboratoire BIOLIM Université de Lomé /Togo bp 1515
2- CNR VIH / Laboratoire de Microbiologie CHU Tokoin/Lomé-Togo
Correspondance : Mounerou SALOU
E-mail : mounerous @yahoo.fr
Revue Bio-Africa - n° 8- 2010, pp. 7-12
Results : EQUIPAR HIV1/2 and HEXAGON HIV
showed a sensitivity of 100% but a specificity ranged 82, 8% to 90,1%. FIRST RESPONSE provided a
sensitivity of 99 % and specificity of 98, 1%.
Conclusion : EQUIPAR HIV1/2 and HEXAGON
HIV tests can be use in first line in a diagnosis of
HIV infection strategy. FIRST RESPONSE can be
used in first or second line in a national algorithm
for HIV infection diagnosis in Togo.
Key
words: diagnosis of hiv- rapid tests-perfor-
mance testing
Introduction
Les évaluations des tests de diagnostic Rapides/Simples (TDR) du VIH sont nécessaires
pour la détermination d’algorithmes de tests
simples et rapides, utilisables au point de
service pour le conseil et dépistage volontaire,
la surveillance épidémiologique, la sécurité
transfusionnelle, dans les services de consultations prénatales1,2,3. La fiabilité d’un diagnostic
sérologique est fonction des paramètres de performance des tests utilisés pour sa réalisation.
Ces tests rapides de dépistage doivent être de
mise en œuvre facile pour tout prestataire de
soins, avoir un coût de revient moindre et être
utilisable sur du sang total.
Le centre national de référence pour le VIH
et les IST est la structure au Togo, qui donne
l’homologation pour tout test de diagnostic
sérologique du VIH en vue d’une autorisation
de mise sur le marché Togolais. C’est ainsi
que le CNR évalue la performance de nouveaux tests pour le programme national de
lutte contre le SIDA du Togo.
L’objectif de ce travail a été d’évaluer la
performance de trois (3) tests de diagnostic
sérologique de l’infection à VIH dont un (1)
test ELISA (EQUIPAR HIV 1/2 recombinant)
et deux (2) tests rapides/simples (HEXAGON
HIV et FIRSTRESPONSE).
MATERIEL ET METHODE
Il s’est agit d’une étude d’évaluation de
Tests de Diagnostic Rapides (TDR) pour le
diagnostic du VIH réalisée d’octobre 2007 à
juillet 2008 au Centre National de référence
pour les tests VIH/IST (CNR/VIH/IST) situé
au laboratoire de Microbiologie du CHU
TOKOIN.
L’étude a porté sur un total de 386
sérums congélés à -20° C dont 180 sérums
collectés entre janvier et février 2008 puis
206 collectés entre juin et juillet 2008.
Les prélèvements ont été collecté chez des
malades hospitalisés ou non au CHU Tokoin
de Lomé présentant ou non des signes
cliniques et/ou biologiques faisant suspecter
une infection à VIH/SIDA.
Caractéristiques des
différents tests (voir tableau I)
Tests de références
Le CNR-VIH/IST ne disposant pas d’un
standard d’or, la sérologie de référence
a été déterminée à partir de l’algorithme
national. Cet algorithme a utilisé un
premier test sensible VIRONOSTIKA et un
deuxième test spécifique TRI-DOT. Lorsqu’il
ya une discordance entre les résultats
obtenus de ces deux test, un troisième test,
IMMUNOCOMB®II HIV1&2 Combfirm a été
utilisé comme test de confirmation.
Principes des tests
VIRONOSTIKA HIV Uni-form II Plus O
Les cupules microelisa sont recouvertes
spécifiquement d’un mélange d’antigène de
VIH : p24 de VIH1, gp160 de VIH1, peptide
ANT70 de VIH1 et peptide env. de VIH2 (acide
aminés 592-603).
HIV TRI-DOT
Les antigènes du VIH sont immobilisés
sur une membrane poreuse d’immuno
filtration.
IMMUNOCOMB® II HIV1&2 Combfirm
ImmunoComb II HIV 1&2 Combfirm est
un test immuno-enzymatique indirect en
phase solide (EIA). La phase solide est un
M. SALOU, AY. DAGNRA, KD. MLAGA et al
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peigne de 12 dents constituées en paire,
chaque paire de dents contient 6 spots, à
raison de 3 spots par dent.
Tous les échantillons ont été testés simultanément selon l’algorithme national.
Le résultat de la sérologie de chaque
échantillon testé a été interprété selon les
recommandations du fabricant.
Les échantillons dont les résultats ont été
indéterminés aux tests de référence ont été
exclus de l’analyse statistique.
EQUIPAR HIV 1/2 recombinant
C’est un test immuno enzymatique (ELISA)
basé sur le principe Sandwich en une seule
étape. La microplaque est sensibilisée par
un mélange de protéines spécifiques (HIV
1-env [gp120, gp41], gag-1[p24, p17] et HIV
2-env-2[gp36]. Ce test ne distingue pas le
VIH-1 du VIH-2.
Méthode de calcul des
paramètres de performance
Spécificité (Sp) = Vrais négatifs *100/
vrais négatifs+faux positifs
Sensibilité (Se) = vrais positifs *100/vrais
positifs+faux négatifs
Valeur prédictive positive (VPP)= vrais
positifs/vrais positifs+faux positifs
Valeur prédictive négative (VPN) = vrais
négatifs/vrais négatifs+faux négatifs
La spécificité est bonne si elle est
supérieure ou égale à 98%
La sensibilité est bonne si elle est
supérieure ou égale à 99%
Vrai positif : individu ayant la maladie
Vrai négatif : individu n’ayant pas la
maladie
Faux positif : un échantillon testé est
déclaré «faux positif» à partir d’un test évalué,
si selon l’algorithme, cet échantillon donne
un résultat négatif
Faux négatif : un échantillon testé est déclaré «faux négatif» à partir d’un test évalué,
si selon l’algorithme, cet échantillon donne
un résultat positif
FIRST RESPONSE Sang complet
HIV 1-2-O
C’est un test Immuno chromatographique
(Rapide) pour la détection qualitative des
anticorps de tous les isotypes (IgG, IgM, IgA)
spécifiques au VIH1 incluant le sous type O
et les anticorps de VIH2 séparément, dans le
sérum, le plasma et le sang complet humain.
C’est un test discrimant pour HIV1 et HIV2
HEXAGON HIV
C’est un test de troisième génération basé
sur une méthode immuno chromatographique. Le test utilise des protéines recombinantes qui représentent des régions immuno
dominantes des protéines d’enveloppe des
virus VIH1 et VIH2. C’est un test discrimant
pour HIV1 et HIV2
Déroulement de l’analyse
L’évaluation a été réalisée en deux temps.
D’une part, 180 échantillons de sérums
congelés ont été utilisés pour évaluer les tests
HEXAGON HIV, et EQUIPAR (HIV 1/2 recombinant) et d’autre part, 206 échantillons de
sérums congelés ont servi à évaluer le test
FIRST RESPONSE HIV CARD TEST 1-2-O.
Test statistique
Les intervalles de confiance des calculs
de pourcentage ont été calculés au risque α
= 0,05 de la loi binômiale :
RESULTATS
Les résultats des tests évalués EQUIPAR
HIV1/2 recombinant, HEXAGON HIV et
FIRST RESPONSE HIV CARD TEST 1-2-O
sont présentés dans (le tableau II).
Le test HEXAGON HIV n’a pas donné de
faux négatifs. Le seul cas positif au VIH2
aux tests de référence s’est également révélé
positif au VIH2 par HEXAGON HIV et FIRST
RESPONSEHIV CARD TEST 1-2-O.
Les différents indicateurs de performances
des différents tests évalués sont consignés
dans le (tableau III) (IC à 0.95 pour intervalle
de confiance) :
Le test EQUIPAR HIV1/2 recombinant a
donné une sensibilité (Se) de 100% et une
spécificité (Sp) de 82.8% ; la valeur prédictive
evaluation de la performance de trois tests de diagnostic de l’infection à vih à Lomé (Togo)
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positive (VPP) a été de 75.9% et la valeur
prédictive négative(VPN) a été de 100%.
Le test HEXAGON HIV a présenté une
sensibilité de 100% et une spécificité de
90.1% ; la valeur prédictive positive calculée
a été de 82,05% et la valeur prédictive
négative a été de 100%.
Le test FIRST RESPONSE HIV CARD TEST
1-2-O a présenté une sensibilité de 99% et
une spécificité de 98.1% ; la valeur prédictive
positive calculée a été de 98.1% et la valeur
prédictive négative a été de 98.54%.
Tableau I : Caractéristiques des tests évalués et des tests de Référence
Tests
Ag ou Ac utilisé
EQUIPAR HIV1/2
VIH1 :env.[gp120, gp41], gag
recombinant
[p24, p17]
supports
Principe
Microplaque
sandwich
Durée des tests
2heures
30 min
VIH2 : env. [gp36]
VIH1 :gp41, p24
HEXAGON HIV
Vironostika HIV
Unit-Form II Plus O
Immuno-
Bandes de cellulose
VIH2 :gp36
VIH1 :P24, gp160, ANT70
VIH2 :Env. (aa592-603)
20 minutes
chromatographique
Microplaques
sandwich
2 heures
Membranes poreuses
Immuno
chromatographique
10 minutes
peigne
Immuno enzymatique
1 heure 10 min
Ag du grpe O
HIV
TRI-DOT
VIH1 :gp41, gp120
VIH2 : gp36
ImmunoComb II
Vih1 : gp120, gp41, p24, p31
HIV 1&2 Combfirm
VIH2 : gp36
FIRST
RESPONSE®WB
VIH1-2-0
VIH1: gp41, p24
VIH2: gp36
Ag du grpe O
Immuno chromato-
Bandes de cellulose
15 minutes
graphique
Env.= enveloppe, gag = group antigen (antigène du groupe), gp = glycoprotéine,
p = protéine, aa = acide aminé, Ag = antigène
Tableau II : Résultats des tests évalués
VP
FP
VN
FN
EQUIPAR HIV1/2 recombinant
63
20
96
00
FIRST RESPONSE HIV
102
02
101
01
HEXAGON HIV
47
10
91
00
VP : vrai positif, FP : faux positif, VN : vrai négatif, FN : faux négatif
Tableau III : les indicateurs de performance des différents tests évalués
Paramètres de performance
Test
sensibilité
spécificité
VPP
VPN
EQUIPAR HIV1/2 recombinant
100%
[92,8-100]
82,8%
[74,4-88,9]
75,9%
[65,1-84,3]
100%
[95,2-100]
HEXAGON HIV
100%
[90,6-100]
90,1%
[82,1-94,6]
82,5%
[69,6-98,8]
100%
[95-100]
FIRST RESPONSEHIV CARD
TEST 1-2-O
99%
[93,9-99,9]
98,1%
[92,5-99,7]
98,1%
[92,5-99,7]
99%
[93,9-99,9]
M. SALOU, AY. DAGNRA, KD. MLAGA et al
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DISCUSSION
L’une des limites de notre travail est la non
disponibilité d’un standard d’or. Toutefois un
algorithme de trois tests combinés a été utilisé
à savoir : VIRONOSTIKA comme test n°1 qui
selon une étude réalisée au Togo en 2002
par DAGNRA et al4 a présenté une sensibilité
et une spécificité de 100% et ce test a été
recommandé en première intention pour le
dépistage ou le diagnostic de l’infection à VIH.
Il en est de même que TRIDOT classé test n°2
et ImmunoComb II HIV1et 2 Combifirm utilisé
comme test n°3. Ce troisième test présente
une caractéristique particulière de révéler
individuellement la présence ou non des
anticorps dirigés contre les antigènes gp120,
gp41, p24, p31 du VIH1 et gp36 du VIH2. Il
est utilisé pour élucider les discordances entre
VIRONOSTIKA et TRIDOT.
La taille des échantillons utilisée a varié
d’un test à un autre. Cette taille dépend du
nombre de test disponibles ; elle est de 108
pour EQUIPAR HIV1/2 recombinant, 148
pour HEXAGON HIV et 206 pour FIRST
RESPONSEHIV CARD TEST 1-2-O.
Les différences obtenues à l’évaluation
de ces tests peuvent être due soit à la taille
des échantillons soumis à l’épreuve, soit
au type de population dont proviennent
les échantillons ou encore aux différentes
étapes de l’infection que présente cette
population. Les populations africaines sont
exposées à de nombreux agents infectieux
dont la production d’anticorps peut être à
la l’origine des fausses positivités. L’OMS
recommande une sensibilité ≥ 99% et une
spécificité ≥ 95%. A l’analyse, ce test ELISA
est d’exécution simple et présente une
sensibilité au dessus de celle recommandée
(100%) donc peut être utilisé comme un
premier test (Test1) de la stratégie nationale,
et pour la sécurité transfusionnelle.
Des deux tests rapides évalués, FIRST
RESPONSE HIV CARD TEST 1-2-O a été
le plus performant avec des paramètres
supérieures aux valeurs recommandées par
l’OMS. La comparaison de ces paramètres à
ceux rapportés par le fabricant à travers une
étude, a montré une similitude. Ces auteurs
ont obtenu une sensibilité de 100% et une
spécificité de 99.18% sur un total de 242
échantillons. Ce test peut être recommandé
en première ou deuxième intention au Togo
selon les critères de l’OMS ; par rapport à
HEXAGON HIV qui ne peut être utilisé qu’en
première intention pour sa sensibilité de 100%.
Toutefois ces tests présentent l’avantage de
réalisation facile et discriminatoire puis de
temps d’exécution plus court.
Conclusion
Suite à l’évaluation de ces trois tests et
sur la base des recommandations de l’OMS,
le test EQUIPAR HIV 1/2 recombinant avec
une sensibilité de 100% a pourra être retenu
comme test de première intention dans l’algorithme national de dépistage et pour la
sécurité transfusionnelle. Il en est de même
pour HEXAGON HIV qui a aussi donné une
sensibilité de 100%.
Par contre, FIRST RESPONSE qui a présenté une sensibilité (99%) et une spécificité
(98.1%) supérieurs au seuil fixé par l’OMS est
un test performant et pourra être proposé
surtout dans les unités périphériques pour
un diagnostic correct et efficace du VIH.
evaluation de la performance de trois tests de diagnostic de l’infection à vih à Lomé (Togo)
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