mast id™ corynebacterium diphtheriae identification system

MAST ID
CORYNEBACTERIUM DIPHTHERIAE
IDENTIFICATION SYSTEM
CORYNE-ID. Système à 3 caractères biochimiques pour
l’identification présomptive de Corynebacterium
diphtheriae.
une goutte de réactif de contrôle PYZ (solution
d’acide pyrazine carboxylique à 1 mg/ml (Numero de
CAS 98-97-5) dans l’eau) dans le tube pour vérifier
que le réactif PYZ Developing Reagent fonctionne
correctement.
Interprétation des résultats
USAGE IN VITRO UNIQUEMENT
PYZ
CYS
URE
Contenu
1. Pyrazinamidase Test (PYZ). 10 tubes avec bouchons
jaunes contenant les réactifs lyophilisés.
2. Cystinase Test (CYS) 10 tubes avec bouchons bleus
contenant les réactifs lyophilisés.
3. Urease Test (URE) 10 tubes avec bouchons rouges
contenant les réactifs lyophilisés.
4. PYZ Developing Reagent. Un flacon contenant 10
comprimés de PYZ Developing Reagent.
Conservation
Conserver à 2-8°C dans les containers fournis jusqu’à la
date de péremption indiquée sur l’étiquette de la boîte.
Ramener à température ambiante avant ouverture.
Précautions
Usage In Vitro uniquement. Observer les règles de
sécurité et d’hygiène en vigueur. Ne peut être utilisé que
par du personnel de laboratoire qualifié. Stériliser les
effluents biologiques dangereux avant de les éliminer. Se
référer à la fiche de sécurité du produit (disponible sur
demande ou via le site Internet MAST).
Matériels nécessaires non fournis
Réactifs et équipements microbiologiques standards
(anses, suppléments sélectifs MAST, écouvillons,
ensemenceurs, autoclaves et incubateurs, etc.) ainsi que
des réactifs sérologiques et biochimiques et des additifs
tels que le sang.
Négatif
Incolore / jaune pâle
Incolore / jaune pâle
Orange-jaune
* avec la solution de contrôle également.
Pour des isolements cliniques significatifs de
corynébactéries, la table suivante peut être utilisée pour
l’identification présomptive des souches. .
Germe
PYZ
CYS
C. diphtheriae var. gravis
+
C. diphtheriae var. mitis
+
C. diphtheriae var. intermedius
+
C. diphtheriae var. belfanti
+
C. ulcerans
+
C. pseudotuberculosis
+
C. amycolatum
+
C. imitans
+/C. pseudodiphtheriticum
+
C. striatum
+
v = variable
+/- = réaction faible
URE
+
+
v
+
-
Contrôle de qualité
Vérifier tous signes de détérioration. Le contrôle de
qualité doit être effectué avec au moins une souche pour
qu’il soit valide. Ne pas utiliser le produit si le résultat
d’une souche de contrôle est incorrect. La liste ci-dessous
montre la performance de souches de contrôle que
l'utilisateur peut se procurer facilement.
Procédure
1. Le nombre de colonies isolées et le temps nécessaire
pour effectuer le test détermine la densité de
l’inoculum nécessaire. Pour un test rapide en 4
heures, effectuer une suspension de 5 McFarland
dans 400µl d’eau stérile. Pour un test d’une nuit (24
heures), effectuer une suspension de 1 McFarland
dans 400µl d’eau stérile.
2. Enlever le bouchon et ajouter 100µl de suspension
bactérienne dans les tubes PYZ et URE. Ajouter
200µl d’eau stérile dans le tube CYS suivi de 20µl de
suspension bactérienne.
3. Boucher tous les tubes et tapoter doucement les
tubes pour mélanger. Incuber en aérobiose à 3537°C pendant 4 heures ou 24 heures si l’inoculum
n’est pas dense.
4. Après incubation ajouter un comprimé de PYZ
Developing Reagent dans chaque tube PYZ. Prendre
la précaution de minimiser la formation d’aérosols
lors du retrait des bouchons en n’agitant pas les
tubes avant ouverture. Si le test est négatif, ajouter
Positif
Rouge / orange*
Jaune brillant
Rose
*
Germes Test
C. striatum* (NCTC 12078)
C. ulcerans (NCTC 12077)
PYZ
+
-
CYS
+
URE
+
Cet isolat est catalogué C. xerosis, mais a été identifié
comme C. striatum.
Limites
Utiliser des colonies isolées d’une culture jeune. Ces
cultures doivent avoir été caractérisées comme
corynébactéries par les tests simples comme par
exemple la morphologie et l’aspect des colonies.
Références
Bibliographie disponible sur demande.
IFU155 NB 06/08 V6
MAST est une marque déposée
*La formule peut varier pour optimiser les performances