Différence de ∆Ct entre 2 échantillons
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Différence de ∆Ct entre 2 échantillons
Ce paragraphe résume les formules les plus utilisées en PCRq en temps réel. Différence de ∆Ct entre 2 échantillons : - PCR avec une efficacité de 100% (2) : Un écart d’un facteur 4 entre 2 échantillons correspondra à : xlog2 = log4 donc x = 2 2 cycles d’écart entre les Cp de 2 échantillons différents d’un facteur 4 1 cycles d’écart entre les Cp de 2 échantillons différents d’un facteur 2 1,58 cycles d’écart entre les Cp de 2 échantillons différents d’un facteur 3 2,32 cycles d’écart entre les Cp de 2 échantillons différents d’un facteur 5 3,32 cycles d’écart entre les Cp de 2 échantillons différents d’un facteur 10 - PCR avec une efficacité de 96% (1,96 ) : Un écart d’un facteur 4 entre 2 échantillons correspondra à : xlog1,96 = log4 donc x = 2,06 2,06 cycles d’écart entre les Cp de 2 échantillons différents d’un facteur 4 Vous avez la pente, vous voulez l’efficacité : E = 10-1/pente Une pente de –3.7 correspond donc à une efficacité PCR de : 10 -1/-3.7 = 1.86, c’est a dire 86% d’efficacité PCR. Vous avez l’efficacité, vous voulez la pente : Pente = - 1 / logE Une efficacité de 100% (donc E = 2) correspond a une pente de -1 / log 2 = 3,32 Vous voulez créer vous-même une courbe standard sous Excel Vous pouvez suivre la procédure à l’adresse WEB suivante ; ABI