Insuffisances Rénales

RESAOLAB
Convention de Financement N°AFD CZZ 1338
01 C
DIAGNOSTIC BIOLOGIQUE et
SURVEILLANCE DE L’INSUFFISANCE
RENALE
Objectifs
1-Citer deux éléments qui peuvent interférer dans le
dosage de la créatininémie par la méthode de Jaffé
2-Donner le principe du dosage de l’urée à l’uréase
3-Décrire la méthode de détermination de l’albumine
par les bandelettes
I-GENERALITES
Définition
Intérêt
II- EPIDEMIOLOGIE
III- PHYSIOPATHOLOGIE
IV- SIGNES CLINIQUES
V DIAGNOSTIC et SURVEILLANCE de IR
CONCLUSION
I-GENERALITES
Le rein :
organe double formé de 2 glandes
assure plusieurs fonctions dans l’organisme
- Régulation de l’équilibre hydroélectrolytique et
acido –basique
- Excrétion des produits du métabolisme des protéines
et des acides nucléiques:urée, créatinine, acide
urique….
un organe endocrine: produit des hormones:
- L’ arginine vasopressine(hormone
antidiurétique=ADH) influence l’équilibre hydrique;
- l’aldostérone affecte la réabsorption du sodium dans
le néphron,
- la rénine,
- la parathormone.
- Le néphron est l’unité fonctionnelle
Définition
L’altération d’une de ces fonctions conduit à
l’insuffisance rénale
− Si l’altéraAon rénale est brutale, se consAtue en
quelques heures : c'est l'insuffisance rénale aigue,
− Si l'altéraAon est progressive (mois, années) on parle
d'insuffisance rénale chronique
L‘IRC débutante ou modérée se caractérise par les faits
suivants :
cliniquement asymptomatique,
il faut la rechercher de principe :
− Chez le sujet âgé,
− Chez le sujet hypertendu,
− Chez le malade diabéAque,
Intérêt
faire le diagnostic suffisamment tôt d’une IRA (qui peut
engager le pronostic vital) pour rétablir une fonction
rénale normale par correction des troubles
II- EPIDEMIOLOGIE
De manière générale : augmentation du nombre de
malades, d’années en années
Sous région, en particulier au Sénégal :
2003: 500.000 personnes sont traités d’IRC
chiffres imprécis : parce que constituant une maladie
longtemps asymptomatique
Incidence +++ , 7000 nouveaux cas par an
III-PHYSIOPATHOLOGIE
Le fonctionnement ou fonction rénale est réglée ou
régulé par le débit sanguin rénale.
Une diminuAon du débit sanguin rénal→
l’installation de l’IRA
. Si le parenchyme rénale ne souffre pas trop :
Ischémie corrigée
Fonctionnement du néphron conservé
. Si ischémie profonde :
altération parenchyme rénale avec hypoxie
perte capacité fonctionnelle des néphrons
Cette situation est irréversible, même après
normalisation du milieu intérieur
IRC, souvent asymptomatique
↔ à une destruction des néphrons hypertrophiés
Une destruction de 2/3 du capital fonctionnel
→ appariAon des anomalies du milieu intérieur
A ce stade, on a souvent une association avec les
complications : HTA et la protéinurie
IV-SIGNES CLINIQUES
Forme simple aligo anurique surtout pour l’IRA
- chute brutale du volume urinaire
Ces signes peuvent être accompagnées :
- troubles digestifs : nausées, anorexie, vomissements
- troubles neurologiques : syndrome confusionnel,
agitation, crise convulsive
Suite cliniques
- signes cardiovasculaires : augmentation de la PA avec
parfois lésion au fond d’œil
- des œdèmes périphériques et œdèmes aigu du
poumon
V- DIAGNOSTIC et SURVEILLANCE
ELEMENTS de DIAGNOSTIC
• Le dosage de la créatinine dans le sang
La créatinine = métabolite de protéines musculaires
essentiellement éliminée dans l'urine.
proportionnelle à la masse musculaire.
formée par une déshydratation non enzymatique de
la créatine synthétisée par le foie et stockée au
niveau des muscles.
Le dosage, essentiellement avec :
le sérum d’un sujet à jeun depuis au moins 12 h de
temps.
Mais aussi plasma héparine.
Le prélèvement, par ponction veineuse en général au
niveau du pli du coude.
Le dosage, préférentiellement sur les échantillons du
jour.
Sinon conservation pendant 7 jours à +4 et plusieurs
mois à – 20
Existe plusieurs méthodes de dosage de la créatinine:
.méthodes colorimétriques enzymatiques
.méthodes chromatographiques (HPLC , technique de
choix)
méthode plus utilisée en routine :
méthode de Jaffe : méthode cinétique
principe : repose sur la réaction de la créatinine avec
le picrate en milieu alcalin pour former un complexe
coloré.
l’apparition du complexe est suit en fonction du
temps grâce à un spectrophotomètre.
Interférences : l’hémolyse, les lipides
l’hyperglycémie
La créatininémie n'est pas une constante biologique.
varie suivant le sexe : plus élevée chez l'homme que
chez la femme
augmente avec l’activité sportive
Valeurs usuelles :
9-13 mg/l chez l'homme
6-11 mg/l chez la femme
La créatinine reste le constituant sanguin dont le taux
est le plus constant.
abaissée chez la femme enceinte en raison de l’hyper
volémie
augmentée chez les insuffisants rénaux
• Le dosage de l’urée dans le sang
Synthèse : provient du catabolisme des composés
azotés protéiques et des acides aminés
transamination ou désamination au niveau du foie,
filtré au niveau du glomérule
réabsorbé partiellement par le tubule rénal.
paramètre d’exploration de la fonction rénale. Son
taux sanguin à l’inverse de la créatinine est influencé
par l’alimentation.
Le dosage sur sérum ou plasma, chez un sujet à jeun
d’au moins 12 h de temps.
Le prélèvement au niveau du pli du coude le plus
souvent,
centrifugation à 3000 tours pendant 5 mn.
Méthodes de dosage :
-colorimétriques
-enzymatiques : qui sont utilisées du fait de leur
spécificité
.méthode à l’urèase :
principe ,basé sur l’hydrolyse de l’urée en gaz
carbonique et en ammoniac qui réagit avec le
salicylate et l’hypoclorite pour donner un complexe
coloré
l’intensité est proportionnelle à la concentration
d’urée dans l’échantillon
.Autre méthode :
méthode au diacetyl monoxamine ( DAM). Principe :
l’urée réagit avec le DAM donnant un chromogène
coloré et qui est mesuré à 520 nm.
Interférences : l’ammoniac, le fluorure, certains
médicaments contenant de l’urée.
Les valeurs usuelles : 0,15 à 0,45 g/l mais peuvent
varier suivant les laboratoires.
. diminution : insuffisance hépatique.
.élévation : associée à une hypercréatininèmie
constitue un élément de valeur importante pour le
diagnostic de l’insuffisance rénal
Le dosage des protéines urinaires
• Détermination qualitative de l’albumine
Chez l’homme sain, l’urine est considérée comme
pratiquement exempte d’albumine
Dans certains cas pathologiques, l’urine peut
contenir de l’albumine vraie (protéines), albumoses
et peptones ( produits de dégradation)
prélèvement : urines fraiches recueillies dans un
bocal propre et sec
détermination de l’albumine par 2 méthodes :
.La méthode à la coagulation par ébullition
.la méthode par les bandelettes
Méthode à la coagulation par ébullition( n’est plus
utilisée en routine)
le principe est basé sur la précipitation des protéines
par la chaleur à pH convenable et en milieu
suffisamment riche en électrolytes.
mode opératoire:
mettre dans un verre un volume quelconque d’urine,
ajouter à la moitié de ce volume de la solution de
chlorure de sodium et quelques gouttes d’acide
acétique ( 3 à 5 gouttes environ pour 10 cm 3
d’urine).
Filtrer de façon à obtenir un liquide limpide
Repartir le filtrat dans deux tubes à essais propres, .
chauffer l’un des tubes jusqu’à ébullition
Observer par comparaison avec le tube non chauffé,
s’il y a formation de flocons très nets la présence
d’albumine est certaine.
La méthode par les bandelettes, très utilisée permet
de déceler des constituants urinaires tel que
l’albumine
La technique :
Immerger brièvement la zone réactive dans l’urine.
Egoutter la bandelette en passant la tranche contre le
rebord du récipient.
-Lire les résultats après 30 secondes en comparant les
colorations à celles des gammes colorimétriques de
l’étiquette.
Ne pas tenir compte des variations de coloration
observées plus de 2 minutes après l’immersion des
bandelettes.
Une réaction positive se manifeste par un
changement de couleur.
Détermination quantitative des protéines urinaires
= dosage des protéines totales dans les urines.
Le prélèvement =urines de 24h qui sont collectées
dans un bocal propre contenant un antiseptique et
conservées à une température qui empêche la
pullulation bactérienne
Différents méthodes de dosage :
La méthode néphélemétrique
principe est basée sur le fait que les protéines sont
coagulées à chaud par l’acide trichloracétique.
Le trouble qui en résulte est comparé par
turbidimétrie à une gamme étalon à base
d’oxyalbumine coagulée par le même réactif.
mode opératoire :
mettre dans un tube à essais, 10 ml d’urines, faire
bouillir,
ajouter 1 ml d’acide trichloracétique au tiers, agiter,
porter à ébullition et refroidir.
Agiter et lire en comparant à la série des tubes de la
gamme étalon.
Cette méthode ne peut pas déceler les taux de
protéines inférieurs à 0,10 g/l.
Méthode au rouge de pyrogallol
très utilisée en routine
principe basé sur la réaction des protéines avec le
rouge de pyrogallol et le molybdate en milieu acide ;
pour former un complexe coloré lu au
spectrophotomètre.
prélèvement = urines de 24 h.
Interférence :la bilirubine, certains médicaments
valeurs usuelles : < 0,15g/24h.
élévation : suspicion altération de la fonction rénale
• Les éléments de surveillance
L'évolution de l'insuffisance rénale se mesure par la
détermination de la clairance de la créatinine
Clairance = volume sanguin épuré par le rein par
unité de temps.
Elle doit se faire
− Tous les ans avec clairance de la créaAnine
supérieure à 50 ml/min,
− tous les 6 mois entre 50 et 30 ml/min,
− Plus fréquemment en cas d'insuffisance rénale
chronique sévère.
Il existe différentes sortes de formule pour le calcul de
la clairance :
Formule tenant compte du volume urinaire. Dans ce
cas il faut un prélèvement sanguin des urines de
24h.
procéder aux dosages de la créatinine dans le sang,
dans les urines en utilisant la même méthode.
déterminer la clairance suivant la formule UV/P
U= concentration créatinine urinaire
P= concentration créatinine sérique
V= diurèse
Formule tenant compte de l’âge du sexe et du poids
ou formule de COCKROFT
Clairance de la créatinine (ml/min) : [140- âge (an)] X
poids (Kg) X k /créatininémie (en μmol/l)
K homme : 1,23
K femme : 1
valeurs physiologiques : 80 - 120 ml / min pour une
surface corporelle de 1.73 m2
valeurs plus faibles chez le jeune enfant : 50 - 80 ml /
min
Les valeurs pathologiques varient en fonction du
degré de l’atteinte rénale
Quelques valeurs de créatininemie en
fonction du degrés d’atteinte
FONCTION
Clairance de la créatinine en ml/mn
Fonction rénale normale
>90
Insuffisance rénale légère
60-90
Insuffisance rénale modérée
30-59
Insuffisance rénale sévère
15-29
Insuffisance rénale terminale
< 15
CONCLUSION
IR est un réel problème de santé publique avec
l’augmentation du nombre. La prise en charge
précoce avec le dosage périodique des marqueurs
comme la créatinine, l’urée et les protéinuries est
fondamentale afin de prévenir l’apparition de
symptômes mais aussi la survenue de pathologies
liées telle que HTA, Diabète
SOURCES
Doctissimo, Analyses médicales
MFP retraite, fiches pratique
Prospectus des paramètres dosés en biochimie
MERCI