Test in vitro pour déterminer la quantité d`homo- cystéine

Homocysteine Enzymatic
Test in vitro pour déterminer la quantité d’homocystéine-L totale dans le sérum et le plasma humains
Indication
L’homocystéine (Hcy) est un acide aminé contenant un groupement thiol, produit par la déméthylation intracellulaire de la méthionine.
L’homocystéine totale (tHcy) représente la somme de toutes les formes d’Hcy dont les formes oxydées, formes liées aux protéines et formes
libres. Des concentrations élevées de tHcy se sont avérées être un facteur de risque de maladies cardiovasculaires important. En raison de
sa nature irritante, un excès d’Hcy dans le sang peut endommager les vaisseaux artériels et conduire à une inflammation et à la formation
de plaques pouvant causer un blocage du flux sanguin vers le cœur. L’élévation des taux de tHcy est due à quatre facteurs principaux:
• un déficit génétique de certaines enzymes impliquées dans le métabolisme d’Hcy, telles que la cystathionine-béta-synthase
(CBS), la méthionine synthase (MS) et la méthylènetétrahydrofolate réductase (MTHFR)
• un déficit nutritionnel en vitamines B (B6 et B12) et en folate
• une insuffisance rénale entravant la clairance effective des acides aminés
• des interactions médicamenteuses, comme avec l’oxyde nitrique, la méthotrexate et la phénytoïne qui interfèrent avec le
métabolisme d’Hcy. Les taux élevés de tHcy sont également en relation avec la maladie d’Alzheimer et l’ostéoporose
Principe du test: méthode enzymatique cyclique
1. Étape
L’Hcy oxydée qui est liée aux protéines est d’abord réduite en Hcy libre.
Étape 1
Hcy-S- Protéine
Réduction
Hcy oxydée
(liée aux protéines)
Hcy
Protéine
Hcy libre
Étape 2
Hcy
SAM
HMTase
SAH
Met
SAHase
Adénosine
ADA
Inosine
+
NH 3
2. Mesure photométrique
du complexe NAD+
NH 3
GLDH
+ NADH +
Glutamate + NAD+ + H2O
2-oxoglutarate
2. Étape
L’Hcy réagit ensuite avec un co-substrat, la S-adénosyl-méthionine (SAM),
pour former de la méthionine (Mét) et de la S-adénosyl-homocystéine
(SAH) catalysée par une S-Hcy-méthyl-transférase (HMTase). La SAH
est évaluée dans des réactions enzymatiques couplées lors desquelles la
SAH est hydrolysée en adénosine et Hcy sous l’action de SAH hydrolase.
Hcy est introduite dans une réaction de conversion d’Hcy pour former un
cycle réactionnel qui amplifie le signal de détection. L’adénosine formée est
immédiatement hydrolysée en inosine et ammoniac (NH3 ), qui réagit avec
la glutamate déshydrogénase (GLDH) avec conversion concomitante de
NADH en NAD+.
Mesure photométrique
La concentration d’Hcy dans l’échantillon est directement proportionnelle à la quantité de NADH converti en NAD+ (ΔA 340 nm ).
Caractéristiques du test de l’homocysteine
Homocysteine Enzymatic
Homocysteine Enzymatic
Homocysteine Enzymatic
Caractéristiques du test de l’homocysteine
Compatibilité avec
Module cobas c 701/cobas c 702
Analyseur cobas c 311
Systéme Roche/Hitachi MODULAR ANALYTICS <P>
Homocysteine
Enzymaticc 502
Homocysteine Enzymatic
Homocysteine Enzymatic
l’analyseur
Module cobas c 501/cobas
Compatibilité avec
Module cobas c 701/cobas c 702
Analyseur
cobasINTEGRA
c 311 ® 400 plus
Systéme Roche/Hitachi MODULAR ANALYTICS <P>
Système COBAS
®
l’analyseur
Module cobas
501/cobas
c 502
Système
COBAScINTEGRA
800
COBAS INTEGRA® 400 plus
SystèmePlasma
Échantillon
Sérum,
Sérum, Plasma
Sérum, Plasma
Système COBAS INTEGRA® 800
Temps de réaction
10 minutes
10 minutes
10 minutes
Échantillon
Sérum, Plasma
Sérum, Plasma
Sérum, Plasma
Intervalle de mesure
3–50 µmol/L
3–50 µmol/L
3–50 µmol/L
Temps de réaction
10 minutes
10 minutes
10 minutes
Stabilité sur les
4 semaines
4 semaines
4 semaines
Intervalle de mesure
3–50 µmol/L
3–50 µmol/L
3–50 µmol/L
systèmes
Stabilité sur les
4 semaines
4 semaines
4 semaines
Fréquence des
Chaque lot de réactifs
Chaque lot de réactifs
Chaque lot de réactifs
systèmes
calibrations
et après 7 jours
et après 7 jours
et après 7 jours
Fréquence des
Chaque lot de réactifs
Chaque lot de réactifs
Chaque lot de réactifs
Interférence avec
Pas d’interférence avec la cystathionine jusqu’à 100 µmol/L
calibrations
et après 7 jours
et après 7 jours
et après 7 jours
la cystathionine
Interférence avec
Pas d’interférence avec la cystathionine jusqu’à 100 µmol/L
Dans la plupart des laboratoires US, le seuil de 15 mol/L est utilisé pour les valeurs normales d’Hcy chez l’adulte.
Valeurs
la cystathionine
Dans les laboratoires européens, 12 mol/L est utilisé pour les valeurs normales d’Hcy chez l’adulte.
de référence 1
Dans la plupart des laboratoires US, le seuil de 15 mol/L est utilisé pour les valeurs normales d’Hcy chez l’adulte.
Valeurs
L’âge,
la grossesse
et laeuropéens,
fonction rénale
sont importants.
La prise
d’acide folique
soitd’Hcy
par compléments
Dans les
laboratoires
12 mol/L
est utilisé pour
les valeurs
normales
chez l’adulte.ou par l’enrichissement
de référence 1
d’aliments doit également être prise en compte:
L’âge, la grossesse et la fonction rénale sont importants. La prise d’acide folique soit par compléments ou par l’enrichissement
Groupe
Folate complété
Non complété
d’aliments doit également être prise en compte:
A jeun/tHcy basale:
µmol/L
µmol/L
Groupe
Folate
complété
Non complété
Grossesse
8
10
A jeun/tHcy
µmol/L
Enfants
< 15basale:
Jahre
8µmol/L
10
Grossesse
8
10
Adultes
15-65 Jahre
12
15
Enfants < 15
Jahre
816
10
Personnes
âgées
> 65 Jahre
20
Adultes 15-65 Jahre
12
15
Chaque
laboratoire
devra
vérifier la validité
Personnes
âgées > 65
Jahre
16 de ces valeurs et établir au besoin20ses propres domaines de référence selon la
population examinée.
Chaque laboratoire devra vérifier la validité de ces valeurs et établir au besoin ses propres domaines de référence selon la
Répétabilité
Module cobas c 501
Module cobas c 701
Systéme Roche/Hitachi MODULAR ANALYTICS <P>
population examinée.
8.26 µmol/L = 2.0%
6.15 µmol/L = 2.1%
7.91 µmol/L = 2.2%
Répétabilité
Module
cobas
c 501
Module
cobas
c 701
Systéme
Roche/Hitachi
16.9
µmol/L
= 1.4%
13.1
µmol/L
= 1.8%
14.4
µmol/L
= 1.4% MODULAR ANALYTICS <P>
8.26 µmol/L = 2.0%
6.15 µmol/L = 1.3%
2.1%
7.91 µmol/L = 1.3%
2.2%
23.3
30.0
1.4%
47.2
16.9 µmol/L = 1.4%
13.1 µmol/L = 1.8%
14.4 µmol/L = 1.4%
44.4
2.0%
23.3 µmol/L = 1.3%
30.0 µmol/L
=c
1.4%
47.2 µmol/L = 1.3%
Précision
Module
cobas
501
44.4 µmol/L
µmol/L ==2.3%
2.0%
8.26
Précision
Module
cobas
c 501
13.1
µmol/L
= 2.1%
8.26 µmol/L = 2.3%
30.0
1.8%
13.1
44.4 µmol/L = 2.1%
2.2%
30.0résultats
µmol/L =de1.8%
Les
la précision intermédiaire ont été obtenus sur le système de référence, le module cobas c 501.
44.4 µmol/L = 2.2%
Les résultats de la précision intermédiaire ont été obtenus sur le système de référence, le module cobas c 501.
Informations de commande
Homocysteine Enzymatic Assay
Informations de commande
Homocysteine Enzymatic Assay
Homocysteine Enzymatic Assay
Homocysteine Enzymatic Assay
Homocysteine Enzymatic Assay
Module s cobas c /Systémes COBAS INTEGRA®
100 Tests
05 385 415 190
Module cobas c 701/cobas c 702
Module s cobas c /Systémes COBAS INTEGRA®
Systéme Roche/Hitachi MODULAR ANALYTICS <P>
Module cobas c 701/cobas c 702
06 542 921 190
05 385 415 190
05 385 377 190
06 542 921 190
Homocysteine Enzymatic Assay
Systéme Roche/Hitachi MODULAR ANALYTICS <P>
200 Tests
100 Tests
R1: 2 x 23 mL
200 Tests
R2: 2 x 5 mL
R1: 2 x 23
mL
R3:
4 mL
R2: 2 x 5 mL
2 × 3 mL
R3: 2 x 4 mL
Contrôle 1: 2× 3 mL
2Contrôle
× 3 mL 2: 2 x 3 mL
Contrôle 1: 2× 3 mL
Contrôle 2: 2 x 3 mL
HCYS Control Kit
HCYS Calibrator Kit
HCYS Control Kit
05 385 377 190
05 385 504 190
05 142 423 190
05 385 504 190
05 142 423 190
COBAS, COBAS C, COBAS INTEGRA, MODULAR et
LIFE NEEDS ANSWERS sont des marques de Roche.
COBAS, COBAS C, COBAS INTEGRA, MODULAR et
LIFE NEEDS
©2014
RocheANSWERS sont des marques de Roche.
©2014 Diagnostics
Roche
Roche
(Suisse) SA
Industriestr. 7
Roche Diagnostics
CH-6343
Rotkreuz (Suisse) SA
Industriestr. 7
www.roche-diagnostics.ch
CH-6343 Rotkreuz
www.roche-diagnostics.ch
07262574001
­0314 - 0.25 AD
P10xxx_FS_Homocysteine_FR_140305.indd 2
Référence
1 Refsum H. Total Homocysteine: Guidelines for Determination in the Clinical Laboratory.
Clin Lab News 2002; pp 2-14.
Référence
1 Refsum H. Total Homocysteine: Guidelines for Determination in the Clinical Laboratory.
Clin Lab News 2002; pp 2-14.
07244258001
07244258001
0314
- 0.25
0314AD
- 0.25 AD
HCYS Calibrator Kit
05.03.2014 16:12:43 Uhr