053 HBsAg-IFU-V3.03-fr-FR-100

AgHBs MAGLUMI (CLIA)
UTILISATION PRÉVUE
130210001M
100
Shenzhen New Industries
Biomedical Engineering Co., Ltd
No.16, Jinhui Road, Pingshan New
District, Shenzhen, 518122, P.R.
CHINE
Tél. + 86-755-21536601
Fax. + 86-755-28292740
Lotus Medical Equipment
Limited
26B Cameron Court,
Cork Street, Dublin 8,
l'irlande
Tél. + 353-1-6571034
Courriel: [email protected]
POUR UTILISATION PROFESSIONNELLE UNIQUEMENT
Conserver à 2-8°C
ENTIÈREMENT
ATTENTION :LIRE
INSTRUCTIONS AVANT L'UTILISATION
LES
EXPLICATIONS DES SYMBOLES
Représentant
autorisé
communauté européenne
dans
la
Fabricant
Consulter le manuel d'utilisation
Contenu du kit
Dispositif médical de diagnostic in vitro
Numéro de lot
Numéro catalogue
À utiliser avant
Limite de température
(conserver à 2-8°C)
Quantité suffisante pour
Le kit a été conçu pour le dosage quantitatif de l'antigène de
surface de l'hépatite B (AgHBs) dans le sérum humain.
L'essai doit être effectué dans l'analyseur de dosage
immunologique par chimiluminescence entièrement automatique
(CLIA) MAGLUMI (notamment Maglumi 600, Maglumi 800,
Maglumi 1000, Maglumi 1000 Plus, Maglumi 2000, Maglumi 2000
Plus et Maglumi 4000).
RÉSUMÉ ET EXPLICATION DU TEST
Le VHB est transmis par les liquides corporels infectés,
notamment le sang, le sperme, et les pertes vaginales
(notamment le sang menstruel). Il peut également être transmis
par une femme enceinte à son enfant pendant la période
périnatale.
L'antigène de surface de l'hépatite B (AgHBs) est l'un des tests
du VHB les plus fréquemment pratiqués. L'antigène VHB est
l'indicateur le plus précoce d'une infection active par le virus de
l'hépatite B. Cet antigène peut être présent avant que les
symptômes d'une infection par le VHB ne soient présents. Si le
niveau de cet antigène reste élevé pendant plus de 6 mois, alors
la personne deviendra probablement porteuse du VHB, ce qui
signifie qu'elle peut le transmettre aux autres pendant toute sa
vie.
L'anticorps de surface de l'hépatite B (HBsAb) est également l'un
des tests les plus communs pour le VHB. Généralement, cet
anticorps apparaît environ 4 semaines après la disparition du
AgHBs et indique que l'infection est à la fin de sa phase active et
que la personne ne peut pas transmettre le virus aux autres (elle
n'est plus contagieuse). Cet anticorps protège également la
personne contre une future infection par le VHB. Le test est
pratiqué pour déterminer la nécessité d'une vaccination ;
l'anticorps sera présent après avoir reçu la série de vaccins
contre le VHB, montrant que le sujet a une protection (immunité)
contre le virus. Occasionnellement, le test peut montrer qu'une
personne a en même temps les anticorps HBsAb et les anticorps
contre l'antigène AgHBs ; dans ce cas elle est encore
contagieuse. L'anticorps nucléocapsidique anti-hépatite B
(HBcAb) est un anticorps dirigé contre l'antigène de la
nucléocapside du virus de l'hépatite B. Cet anticorps apparaît
environ 1 mois après une infection active par le VHB. Il peut être
trouvé chez les personnes qui ont eu une infection auparavant et
chez celles ayant un VHB à long terme (chronique). Il est
habituellement présent à vie.
L'antigène-e de l'hépatite B (HbeAg) est une protéine du VHB qui
est seulement présente pendant une infection active par le VHB.
Ce test détermine le degré de contagiosité d'une personne. Le
test de cet antigène peut également être utilisé pour le suivi de
l'efficacité du traitement contre le VHB. L'anticorps-e de
l'hépatite B (HBeAb) montre que le stade actif de l'infection par le
VHB est presque terminé et que le risque d'être contagieux est
fortement réduit. L'anticorps HBeAb est habituellement présent
pendant les infections chroniques par le VHB.
PRINCIPE DE LA MÉTHODE
Conserver à l'abri de la lumière
Maintenir verticalement
stockage.
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pendant le
Immuno-analyse par chimiluminescence de type sandwich ;
Utiliser l'ABEI pour marquer un anticorps polyclonal anti-HBs,
utiliser un autre anticorps monoclonal pour revêtir des microbilles
magnétiques à base de nanocomposites. L'échantillon (ou
l'étalon/le contrôle, le cas échéant), le tampon et les microbilles
magnétiques sont mélangés soigneusement et incubés à 37 °C
et après la précipitation dans un champ magnétique, décanter le
surnageant et effectuer un cycle de lavage. Ajouter ensuite le
marquage ABEI, incuber pour former des complexes en
sandwich, puis effectuer un autre cycle de lavage. Ensuite, le
1/4
starter 1+2 est ajouté pour initier une réaction de
chimiluminescence flash. Le signal lumineux est mesuré par un
photomultiplicateur dans les 3 secondes sous forme d'URL qui
est proportionnelle à la concentration d'AgHBs présent dans les
échantillons.
COMPOSANTS DU KIT
Matériel fourni
Réactif Intégral pour 100 déterminations
Microbilles magnétiques : tampon TRIS,
0,2 % NaN 3 , revêtu d'un anticorps monoclonal
2,5 ml
anti-HBs
Étalon bas : sérum bovin, 0,2 % NaN 3 .
3,0 ml
Étalon haut : sérum bovin, 0,2 % NaN 3 .
3,0 ml
Tampon : tampon Tris, contenant du SAB,
12,5 ml
0,2 % NaN 3 .
Marquage ABEI : anticorps polyclonaux
anti-HBs marqué par ABEI, contenant du SAB,
22,5 ml
0,2 % NaN 3 .
Tous les réactifs sont fournis prêts à l'emploi.
Flacons de réactifs dans la boîte du kit
Contrôle de qualité interne : contenant du
SAB, 0,2 % NaN 3 . (Pour la valeur cible se
2,0 ml
référer à la fiche de données d'informations de
contrôle de qualité)
Le contrôle de qualité interne n'est applicable qu'au système
MAGLUMI. Pour le manuel d'utilisation et la valeur cible, consulter
la fiche de données d'informations de contrôle de qualité.
L'utilisateur doit évaluer les résultats à la lumière de ses propres
normes et connaissances.
Accessoires requis mais non fournis
MAGLUMI Reaction module
RÉF. : 630003
MAGLUMI Starter 1+2
RÉF. : 130299004M
MAGLUMI Wash concentrate
RÉF. : 130299005M
MAGLUMI Light Check
RÉF. : 130299006M
Veuillez vous procurer les accessoires auprès de Shenzhen New
Industries Biomedical Engineering Co., Ltd (SNIBE) ou de notre
représentant.
Préparation du réactif Integral
Il est essentiel d'agiter horizontalement, doucement et
soigneusement le réactif Integral avant de retirer le bouchon
(éviter la formation de mousse !) Retirer le bouchon et tourner la
petite molette du compartiment des microbilles magnétiques dans
un sens puis dans l'autre, jusqu'à ce que la couleur de la
suspension vire au marron. Placer l'Integral dans la zone des
réactifs et l'y laisser pendant 30 minutes. Pendant ce temps, les
microbilles magnétiques sont agitées automatiquement et
entièrement remises en suspension.
Ne pas interchanger les composants Integral de différents
réactifs ou lots !
Conservation et stabilité
 Fermé : Conservé à 2-8 °C jusqu'à la date de péremption.
 Ouvert : stable pendant 4 semaines. Pour assurer les meilleures
performances du kit, il est recommandé de placer les kits ouverts
au réfrigérateur s'ils ne doivent pas être utilisés dans l'appareil au
cours des 12 heures suivantes.

Maintenir verticalement pendant le stockage.
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
Conserver à l'abri de la lumière.
ÉTALONNAGE ET TRAÇABILITÉ
1) Traçabilité
Pour permettre un étalonnage précis, nous avons fourni des
échantillons d'étalonnage standardisés contre la référence
OMS WHO 1st International Standard Panel 03/262。
2) Réétalonnage en 2 points
Via la mesure des étalons, la courbe maîtresse prédéfinie est
ajustée (ré-étalonnée) jusqu'à un nouveau niveau de mesure
spécifique de l'instrument avec chaque étalonnage.
3) Fréquence de réétalonnage
 Après chaque changement de lot (réactif Integral ou réactifs
inducteurs).
 Chaque semaine et/ou chaque fois qu'un nouvel Integral est
utilisé (recommandation).
 Après
chaque opération d'entretien de l'analyseur
d'immuno-analyse par chimiluminescence (CLIA) entièrement
automatisé MAGLUMI.
 Si les contrôles sont hors de la plage attendue.
 Chaque fois que la température ambiante varie de plus de
5 °C (recommandé).
PRÉLÈVEMENT
ÉCHANTILLONS
ET
PRÉPARATION
DES
Type d'échantillon : sérum
Prélever 5,0 ml de sang veineux dans le tube à prélèvement
sanguin. Séparer le sérum par centrifugation après avoir laissé le
sang total en attente à la température ambiante.
Éviter de congeler et recongeler plusieurs fois. L'échantillon de
sérum ne peut être congelé et décongelé que deux fois. Les
échantillons conservés doivent être soigneusement mélangés
avant l'utilisation (mélangeur Vortex).
Veuillez interroger le représentant local de SNIBE pour davantage
d'informations ou si vous avez un doute quelconque.
Conditions pour les échantillons
 Ne pas utiliser les échantillons dans les conditions suivantes :
(a) Échantillons inactivés par la chaleur ;
(b) Échantillons de cadavres ;
(c) Contamination microbienne manifeste.
 Les échantillons des patients doivent être manipulés avec
précaution pour éviter toute contamination croisée. L'utilisation
de pipettes ou embouts de pipettes jetables est
recommandée.
 Vérifier
l'absence de bulles dans tous les échantillons.
Éliminer les bulles avec un bâtonnet applicateur avant
l'analyse. Utiliser un nouveau bâtonnet applicateur pour
chaque échantillon pour éviter toute contamination croisée.
 Les échantillons de sérum doivent être exempts de fibrine, de
globules rouges ou autres particules.
 Vérifier
que la coagulation a été complète dans les
échantillons de sérum avant de centrifuger. Certains
échantillons, en particulier ceux des patients sous traitement
anticoagulant ou thrombolytique, peuvent présenter des
temps de coagulation augmentés. Si l'échantillon est
centrifugé avant que la coagulation ne soit complète, la
présence de fibrine peut être la cause de résultats erronés.
Préparation pour l'analyse
 Les échantillons de patients ayant un aspect trouble ou
turbide doivent être centrifugés avant de les tester. Après la
centrifugation, éviter la couche lipidique (si présente) en
2/4
pipetant l'échantillon dans un godet à échantillon ou un tube
secondaire.
Les échantillons doivent être mélangés soigneusement
après décongélation par un passage au vortex à vitesse lente
ou en les retournant doucement, et centrifugés avant
utilisation pour retirer les globules rouges ou les particules
pour assurer la cohérence des résultats. Les cycles de
congélation-décongélation multiples des échantillons doivent
être évités.
Tous les échantillons (échantillons de patients ou contrôles)
doivent être traités dans les 3 heures après avoir été chargés
dans le système MAGLUMI. Contacter le service SNIBE pour
une discussion plus détaillée sur les contraintes de
conservation des échantillons chargés dans l'appareil.




Rangement
 Si le test doit être différé de plus de 8 heures, retirer le sérum
du séparateur de sérum, des globules rouges ou du caillot.
Les échantillons retirés du gel séparateur, des cellules ou du
caillot peuvent être conservés pendant une durée allant
jusqu'à 12 heures à 2-8 °C.
 Les échantillons peuvent être conservés pendant une durée
allant jusqu'à 30 jours congelés à une température de -20 °C
ou plus basse.
Expédition
 Avant d'expédier les échantillons, il est recommandé de retirer
les échantillons du séparateur de sérum, des globules rouges
ou du caillot. Lors de l'expédition, les échantillons doivent être
emballés et étiquetés conformément aux réglementations
applicables nationales, fédérales et internationales relatives
au transport des échantillons cliniques et des substances
infectieuses. Les échantillons doivent être expédiés congelés
(carboglace).
MISES EN GARDE ET PRÉCAUTIONS POUR LES
UTILISATEURS


Uniquement pour les procédures de diagnostic IN-VITRO.
Les instructions de la notice doivent être scrupuleusement
respectées. La fiabilité des résultats de l'analyse ne peut
être garantie en cas de non respect des instructions
figurant dans cette notice.
Précautions de sécurité
ATTENTION : ce produit nécessite la manipulation
d'échantillons d'origine humaine.

Les étalons et le contrôle de qualité de ce kit sont préparés
à partir de produits dérivés du sérum bovin. Toutefois,
aucune méthode de test ne pouvant garantir totalement que
le VIH, le virus de l'hépatite B, le VHC ou autres agents
infectieux sont absents (même s'ils ont passé les tests de
HBs-Ag, HIV1/2-Ab, HCV-Ab et ainsi de suite), ces réactifs
doivent être considérés comme un danger biologique
potentiel et manipulés avec les mêmes précautions que
celles appliquées pour tout échantillon de sérum ou de
plasma.

Tous les échantillons, les réactifs biologiques et les
matériels utilisés dans l'analyse doivent être considérés
comme potentiellement susceptibles de transmettre des
agents infectieux. Ils doivent donc être éliminés
conformément aux réglementations et recommandations
en vigueur des agences ayant juridiction sur le laboratoire,
et aux réglementations de chaque pays. Les matériels
jetables doivent être incinérés ; les déchets liquides
doivent être décontaminés avec de l'hypochlorite de
sodium à une concentration finale de 5 % pendant au
moins une demi-heure. Tout matériel devant être réutilisé
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
doit être autoclavé en utilisant une méthode de
surdestruction. Un minimum d’une heure à 121°C est
habituellement considéré comme adéquat, bien que les
utilisateurs doivent contrôler l'efficacité de leur cycle de
décontamination en le validant initialement et en utilisant
en routine des indicateurs biologiques.
Il est recommandé que tous les matériels d'origine
humaine soient considérés comme potentiellement
infectieux et manipulés conformément à la norme 29 CFR.
1910.1030 Occupational exposure to bloodborne
pathogens. Le niveau de sécurité biologique 2 ou d'autres
pratiques de sécurité biologique appropriées doivent être
appliqués pour les matériels qui contiennent ou sont
suspectés de contenir des agents infectieux.
Ce produit contient de l'azoture de sodium ; ce produit et
son contenant doivent être éliminés de manière sécurisée.
Les fiches de données de sécurité sont disponibles sur
demande.
Précautions de manipulation
• Ne pas utiliser les kits de réactifs après leur date de
péremption.
• Ne pas mélanger des réactifs provenant de différents kits de
réactifs.
• Avant de charger le kit de réactifs dans le système pour la
première fois, les microbilles nécessitent d'être mélangées
pour remettre en suspension les microbilles qui ont
sédimenté pendant l'expédition.
• Pour les instructions de mélange des microbilles, consulter la
rubrique COMPOSANTS DU KIT, préparation du réactif
Integral dans cette notice.
• Pour éviter toute contamination, porter des gants propres lors
de l'utilisation d'un kit de réactifs et d'un échantillon.
• Faire attention aux liquides résiduels qui ont séché à la
surface du kit.
• Pour une discussion détaillée sur les précautions de
manipulation pendant l'utilisation du système, consulter les
instructions de maintenance de SNIBE.
PROCÉDURE DE TEST
Pour assurer la bonne performance du test, respectez strictement
le manuel d'utilisation de l'analyseur d'immuno-analyse par
chimiluminescence (CLIA) entièrement automatisé MAGLUMI.
Chaque paramètre du test est identifié par une radio-étiquette
RFID sur le réactif Integral. Pour toute information complémentaire
veuillez consulter le manuel d'utilisation de l'analyseur
d'immuno-analyse par chimiluminescence (CLIA) entièrement
automatisé MAGLUMI.
100 μl
+ 100 μl
+ 20 μl
20 min
400 μl
+ 200 μl
20 min
400 μl
3s
Échantillon, étalon
Tampon
Microbilles magnétiques
Incubation
Cycle de lavage
Marquage ABEI
Incubation
Cycle de lavage
Mesure
DILUTION
La dilution des échantillons par l'analyseur n'est pas disponible
dans ce kit de réactifs.
Les échantillons ayant des concentrations supérieures à la plage
de mesure peuvent être dilués manuellement. Après une dilution
manuelle, multiplier le résultat par le facteur de dilution.
Avant qu'une dilution manuelle ne doive être réalisée, veuillez
choisir des diluants appropriés ou consulter SNIBE pour avis.
3/4
CONTRÔLE DE QUALITÉ


Suivre les recommandations de contrôle de qualité pour les
laboratoires médicaux
Utiliser des contrôles appropriés pour le contrôle de qualité
au laboratoire. Des contrôles doivent être effectués au moins
toutes les 24 heures (un cycle ne doit pas dépasser 24
heures), une fois par kit de réactifs et après chaque
étalonnage. Les intervalles des contrôles doivent être adaptés
aux exigences individuelles de chaque laboratoire. Les
valeurs obtenues doivent être dans les plages définies.
Chaque laboratoire doit établir des recommandations pour les
mesures correctives à prendre si des valeurs sont hors de la
plage.
Précision intra-analyse
Contrôle
Moyenne
Écart-type
CV %
(index/ml)
(index/ml)
Niveau 1
6,07
0,21
3,52
Niveau 2
98,47
3,28
3,33
Niveau 3
432,16
13,22
3,06
Le coefficient de variation inter-essais a été évalué sur trois lots de
kits. Doser les sérums de manière répétée 10 fois dans la même
série, et mesurer 3 niveaux différents, pour un total de 30 fois pour
calculer le coefficient de variation.
Précision inter-analyses
Contrôle
Moyenne
(index/ml)
Niveau 1
6,287
Niveau 2
103,57
Niveau 3
457,81
Écart-type
(index/ml)
0,25
3,15
15,20
CV %
3,98
3,04
3,32
LIMITES DE LA MÉTHODE
1) Limites
Une technique adroite et un respect strict des instructions sont
nécessaires pour obtenir des résultats fiables.
Les instructions d'utilisation doivent être strictement respectées
et une mise en œuvre soigneuse doit être effectuée pour obtenir
des résultats valides. Toute modification du protocole est
susceptible d'altérer les résultats.
Une contamination bactérienne,
ou des cycles de
congélation-décongélation répétés peuvent affecter les résultats
des tests.
2) Substances interférentes
Le dosage n'est pas affecté par la bilirubine < 0,4 mg/ml,
l'hémoglobine < 10 mg/ml ou les triglycérides < 20 mg/ml.
3) HAMA
Les échantillons de patients contenant des anticorps humains
anti-souris (HAMA) peuvent donner des valeurs faussement
élevées ou diminuées. Bien que des agents neutralisant les HAMA
soient ajoutés, des concentrations sériques d'HAMA extrêmement
élevées peuvent occasionnellement influencer les résultats.
RÉSULTATS
1) Calcul des résultats
 L'analyseur
calcule automatiquement la concentration
d'AgHBs dans chaque échantillon au moyen d'une courbe
d'étalonnage qui est générée par une procédure de courbe
maîtresse d'étalonnage en 2 points. Les résultats sont
exprimés en index/ml. Pour toute information complémentaire
veuillez consulter le manuel d'utilisation de l'analyseur
d'immuno-analyse par chimiluminescence (CLIA) entièrement
automatisé MAGLUMI.
 Facteur de conversion: 1 UI/ml = 10 index/ml
2) Interprétation des résultats
Les résultats obtenus avec le dosage de l'AgHBs MAGLUMI
peuvent être interprétés de la manière suivante :
 Non-réactif : Un résultat inférieur à 1,0 index/ml (<1,0 index/ml)
est considéré négatif.
 Réactif : Un résultat supérieur ou égal à 1,0 index/ml (≥ 1,0
index/ml) est considéré positif.
Si le résultat du test de l'échantillon est hors les limites de dosage,
l'échantillon peut être dilué manuellement. VEUILLEZ NOTER
QUE SEULEMENT AcHBs et AgHBs NÉGATIFS LES DEUX
DANS LE SÉRUM HUMAIN PEUVENT ÊTRE UTILISÉS
COMME DILUANT (le sérum bovin ne peut être utilisé comme
diluant ici). Après la dilution manuelle, multiplier le résultat de test
avec le facteur de dilution.
CARACTÉRISTIQUES DE PERFORMANCES
1) Précision
Le coefficient de variation intra-analyse a été évalué sur 3 niveaux
différents de contrôle. Mesurer de manière répétitive 10 fois au
cours du même cycle pour calculer le coefficient de variation.
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2) Sensibilité analytique
< 1 index/ml.
La limite de détection représente le niveau d'analyte le plus bas
qui peut être distingué de zéro.
3) Spécificité
La spécificité du système de dosage de l'AgHBs a été évaluée en
mesurant la réponse apparente de l'essai à divers analytes ayant
une réactivité croisée potentielle.
Il n'y a pas de réaction croisée avec les anticorps IgG ou IgM du
VHA, du VHC, du VIH, de la syphilis, de l'EVB. Un échantillon non
infecté par le EVB, qui est positif pour le FR ou l'ANA, est rendu
négatif par le dosage avec ce réactif. Quand l'antigène VHA,
l'antigène de capside du VHC, VHC NS3, VHC NS5 atteint
séparément une concentration de 100 ng/ml, la détection de
l'AgHBs sera négative. Lorsque AgHBe = 1124,683 index/ml, la
détection AgHBs est < 5,287 index/ml.
4) Récupération
En considérant un étalon haut de concentration connue comme
échantillon, le diluer selon des rapports de 1:2 avec des diluants et
effectuer 10 mesures de la concentration diluée. Puis calculer la
concentration et la récupération attendues de la concentration
mesurée. La récupération doit être de l'ordre de 90 % à 110 %.
Attendue
Mesure moyenne
Récupération
203,6 index/ml
200,4 index/ml
98 %
RÉFÉRENCES
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the branched DNA assay for hepatitis B virus DNA detection in
patients with chronic hepatitis B lacking hepatitis B e-antigen
and treated with interferon-alpha. J Viral Hepat
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4/4