Application du test développement embryonnaire de - envlit

Application du test développement embryonnaire
de bivalve à la surveillance du milieu marin
Quiniou Françoise*, Delesmont Régis**, Delesmont Edith**
* Ifremer Brest - DEL/PC
** Institut Pasteur de Lille - Laboratoire Littoral de Gravelines
Principe
La méthodologie adoptée est inspirée du protocole E.P.A. : EPA/OPPTS 850-1055 Avril 1996 - "
Bivalve acute toxicity test (Embryo-larval) ".
Le milieu de référence est constitué par l'eau de mer synthétique (Zaroogian et al., 1969) ou l'eau de
mer naturelle filtrée.
L'émission des gamètes des mollusques matures est déclenchée par chocs thermiques modérés.
Après fécondation en eau de référence, les œufs sont répartis dans les milieux à tester (env. 20 000
par litre).
Manteau hypertrophié
Larve D normale
Le stade larve "D", atteint en 24 h à 24 °C pour l'huître creuse et 48 h à 20 °C pour la moule, détermine
la durée du test.
Les résultats sont exprimés en taux de réussite de développement, déterminé pour chaque
concentration testée sur 100 larves par replicat (pourcentage brut qui peut être corrigé en fonction des
Témoins).
La dose déterminant 50 % de larves anormales (CI50) est déterminée graphiquement ou par la
méthode des Probits.
Le contrôle qualité de chaque série d'essais, est assuré par la réalisation d'un test avec le sulfate
cuivre (CuSO4) : toxique de référence.
Applications
Effluent
anormales
Pourcentage net de larves
100
50
0
10
100
Sédiment
110
Contamination chimique
100
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0
-10 0,1
1
10
concentration (mg/kg de
sédiment sec)
Pourcentage net de larves anormales
Eau de mer utilisée dans un process industriel
Développement bloqué au stade embryon
Larves de Crassostrea gigas
Niveau 1 GEODE
Niveau 2 GEODE
10000
1000
100
10
1
0,1
Mercure
Arsenic
Cuivre
Plomb
PCB
Concentration en
Concentration en effluent (g/l)
sédiment (g/l)
Comparaison des toxicités de l'effluent brut (en
rouge) et de l'effluent épuré (en bleu)
CI
50 = 1.1.
Toxique de référence
Nombre d'observations
Pourcentage de larves Normales
Rivières
100
80
60
40
20
0
Témoin
Douve
Orne
Dives
Seine
18
16
14
12
10
8
6
4
2
0
1
10
100
CI 50
72 déterminations
réalisées entre 1993 et
1999.
Huîtres en provenance
de Gravelines, Barfleur
et Arcachon.
Tests réalisés en eau de
mer naturelle ou de
synthèse
Moyenne :
CI50 = 8,9 ± 3,1 ug Cu/l
(µg/l)
Résultats obtenus avec le sulfate de cuivre
Eaux de rivières testées à la dilution 1/10, salinité 30
Conclusions
Remerciements
Ces travaux ont pu être réalisés grâce au soutien du RNO.
Le test développement embryonnaire de bivalves est applicable aux milieux
liquides ainsi qu'à l'étude des sédiments contaminés.
Il permet d'évaluer la toxicité des milieux testés et d'en suivre leur évolution.
Les tests réalisés, depuis 1993, avec le sulfate de cuivre (Cu/SO4), toxique de
référence, ont permis de vérifier la sensibilité du test, sa fiabilité et sa
reproductibilité en eau de mer naturelle comme en eau de synthèse.